バイタルメディアカラー Candida 寒天培地発表記録 Candida 属鑑別培地バイタルメディアカラーカンジダ（仮称）の基礎的検討 1） ○杉山知代1）、佐藤智明 1）、豊田耕一 2）静岡県立静岡がんセンター感染症科、2）極東製薬工業株式会社微生物学術グループ Ⅰ．はじめに近年多くの検査室で、発育コロニーの色調により Candida 属を鑑別する培地が使用されている。今回、色調による Candida 属鑑別用培地『バイタルメディアカラーカンジダ』（極東製薬工業より発売予定、以下検討培地）について検討を行なった。 Ⅱ．対象と方法検討培地で鑑別可能とされている 7 菌種について、ATCC 株を用いてコロニーの色調を確認した。また、臨床分離株を用いて他社類似品である A 社培地との鑑別能を比較した。 Ⅲ．結果 z主要 Candida 属の鑑別 ① ② ④ ③ ⑤ ⑥ ⑦ （35 ℃ 48 時間培養後）菌種実際の呈色 ① C. albicans 緑色 ② C. glabrata 薄ピンク色備考 24 時間培養でも緑色を呈するため鑑別可能 C. parapsilosis と色調は似ているが、こちらの方がコロニーが大きい ③ C. parapsilosis 薄ピンク色～ピンク色 C. glabrata と色調は似ているが、コロニーの大きさが他と比べ小さい ④ C. krusei 薄ピンク色 R 型 ⑤ C. tropicalis 赤紫色～赤茶色 ⑥ C. guillermondii 薄ピンク色～ピンク色色調・コロニーの大きさ、ともに C. parapsilosis に似ており、やや鑑別は難しい ⑦ C. dubliniensis 緑色 C. albicans と酷似しており鑑別困難 R 型の大きい特徴のあるコロニーで容易に鑑別可能 zCandida 属以外の真菌の発育 Cryptococcus neoformans は、48 時間培養で微小コロニーが認められ、72 時間培養では白色の C. parapsilosis に似たコロニーの発育が認められた。 48時間培養後 72時間培養後 Trichosporon beigelii は、48 時間培養にて青緑色の R 型（しわっぽい）コロニーを呈するため、他の菌種との鑑別は可能であった。 24 時間培養での判定を試みると、緑色を呈するもののコロニーの形態がはっきりしないため、C. albicans と誤って識別してしまう可能性が考えられた。 48時間培養後バイタルメディアカラー Candida 寒天培地発表記録 zP. aeruginosa の発育検討培地には P. aeruginosa が発育するとされるが、発育するとコロニー辺縁部が透明でいびつな形となり、中央は赤色を呈した。また、発育箇所の培地自体の色が若干黄変した。 C. tropicalis も同系色の赤色を呈するが、コロニー形態が明らかに異なるため鑑別は可能である。 48時間培養後 z臨床分離株の発育① 喀痰検体を直接検討培地に分離した場合、Candida 属以外の菌種の発育は抑制され、 C. albicans のみ発育が確認できた。左側：検討培地、右側：血液寒天培地 48 時間培養後 z臨床分離株の発育②―血液培養陽性検体より Candida 発育例 (1) C. albicans のみの発育かと思われたが、48 時間培養にて検討培地に C. glabrata の発育が確認でき、Candida が 2 菌種検出された。同時に分離していた A 社培地は、48 時間培養では C. albicans のみの発育しか確認がされなかったが、後に C. glabrata の微小コロニーが確認できた。検討培地：緑色コロニーに混じって薄いピンク色コロニーを確認再分離したところC. glabrata と同定 A 社培地：緑色コロニーの発育が認められ、ごくわずかピンク色の微小コロニーが認められる z臨床分離株の発育②―血液培養陽性検体より Candida 発育例 (2) 24 時間、48 時間培養それぞれにて、検討培地での色調による識別が困難であった。同時に分離していた A 社培地では色調よりC. tropicalis が推定された。菌量が多かったことによる色調の判定が困難であったと考え、菌量を少なくして再度検討培地に分離したところ、C. tropicalis と鑑別できた。菌量を減らし再分離くすんだピンク色のコロニーが密集して発育し、鑑別困難赤紫色のコロニーが発育し、 C. tropicalis と鑑別 Ⅳ．まとめ検討培地は分離頻度の低い Candida 属では他の同定キットなどを併用する必要があるが、臨床検体にて分離頻度の高い主要菌種は鑑別可能であり、分離培地や推定同定用培地として有用な培地であると思われた。また、酵母様真菌薬剤感受性キット：ASTY（極東製薬工業）の添付文書には、サブロー寒天培地に発育したコロニーより検査を実施するよう記載されているが、検討培地の発育コロニーから本製品に供試したところ、添付文書に従い行った場合との結果がほぼ一致し、参考値として使用できると考えられた。この一部は第 20 回日本臨床微生物学会総会（2009.1.31～2,1）で発表した。