10. DIGラベリングおよび検出実験のための設備

DIG ラベリングおよび検出実験のための設備
10. DIGラベリングおよび検出実験のための設備
D
I
G
の
基
礎
以下の表は, DIGラベリングおよび検出実験のために必要とされる設備, 器具など常備品,
および ロシュ社の試薬を一覧にしたものです.
DIG実験で必要とされる主な実験設備
設
備
マグネティック・スターラープレート
1
ヴォルテックス(Vortexer)
1
マイクロ遠心分離機(Microcentrifuge)
1
UVクロスリンカー(Stratalinkerなど)
1
水平式のゲル電気泳動装置
1〜2
パワーサプライ
1〜2
マイクロウェーブ
1
バランス
1
UVトランスイルミネーター
1
沸騰用ウォーターバス
1
温度調節(37℃〜68℃)ができるシェーカー付きウォーターバス
PCRサーマルサイクラー
1
ハイブリダイゼーション用バッグを閉じるためのヒートシーラー
フィルム現像装置
1
必要な数
2,3
X-線フィルム用カセット
1〜2
1
1
1
3
水平式平面(プラットフォーム)シェーカー
冷凍冷蔵庫
2〜3
1〜2
1
1 PCRラベリングのみに必要.
2 DIGの実験操作エリアの近くに設置すること.
3 イメージャーが設置されている場合, X-線フィルムや器具は不要.
33
DIG ラベリングおよび検出実験のための設備
一般的な実験器具
D
D
I
I
G
G
の
の
基
基
礎
礎
器
具
スパーテル
三角(アーレンマイヤー)フラスコ(200 ml, 500 ml)
滅菌済みメスシリンダー(50 ml, 100 ml, 500 ml, 1000 ml)
ガラスびん(1リットル, 500 ml)
マグネティック・スターラーバー(滅菌済み, RNaseフリー)
1
温度計
ピペッター(1 ml, 200/100μl, 10μl)
ピペッター用滅菌済みチップ
滅菌済みピペット(10 ml)
ピペッティング用バルブ
滅菌済みマイクロ遠心チューブ(1.5 ml)
マイクロ遠心チューブ立て
パラフィルム
はさみ
先の平らなピンセット
解剖用メス(スカルペル)
(オプション)
Whatman 3 MM ろ紙
手袋, いろいろなサイズ(パウダーフリー)
油性マーカー
50 ml 滅菌ディスポーザブルの目盛り付き円錐チューブ
15 ml 滅菌ディスポーザブルの目盛り付き円錐チューブ
ディスポーザブルの実験用タオル
発砲スチロール製で浮力のあるマイクロ遠心チューブ立て
ふた付きプラスチック製トレー(プレハイブリダイゼーション, ハイブリダイゼーション,
検出の際のインキュベーション用)
150 mm ペトリ皿(ラベリング効率を直接検出する際のインキュベーション用)
ディスポーザブルの実験用ティッシュ
氷を入れる容器と氷
実験台用紙
アルミホイル
鉛の輪などの重り(ハイブリダイゼーション用メンブレンをインキュベーション中に
水平に保つため)
アセテートセルロースフィルター, 0.45μm(オプション, ラベルされたプローブの精製のため)
34
DIG ラベリングおよび検出実験のための設備
器
具
滅菌済みシリンジ(5 ml)
(オプション, フィルター滅菌用)
D
I
G
の
基
礎
タイマー
Thin-walled PCR用チューブ(200μl)
フィルター滅菌済み再蒸留水
フィルター滅菌, DMDCまたはDEPC処理済み再蒸留水
RNase-ZAPまたは同様の製品
1
エチルアルコール
ロシュ・ダイアグノスティックス社から発売されている試薬およびキット
試薬およびキットの名称
カタログ番号
High Pure Nucleic Acid Purification Kits
ノート 1 を参照
DNAまたはRNA Labeling Kit(s)
この章の41ページ,
セクション 2 を参照
Agarose, MP
1 444 964
SDS, 粉末
1 028 693
DNAまたはRNA Molecular Weight Marker, unlabeled
ノート 2 を参照
DNAまたはRNA Molecular Weight Marker, DIG-Labeled
ノート 2 を参照
Hybridization Bags
1 666 649
DIG Easy Hyb buffer, ready-to-use, RNase- and DNase-free
1 603 558
20 × SSC
1 666 681
Anti-DIG-alkaline phosphatase(酵素標識抗体)
1 093 274
DIG Wash and Block Buffer Set
1 585 762
Nylon Membrane, Positively Charged
1 417 240
Chemiluminescent substrate - 選択が可能
CDP-Star, ready-to-use
CSPD, ready-to-use
2 041 677
1 755 633
検出記録用設備
Lumi-Film Chemiluminescent Detection Film
1 666 657
1 High Pure核酸精製用キットは, 精製度の高いテンプレートを必要とするDIGラベリングに対して, 最も簡
便な方法をもたらす製品ラインです. 現在発売されているHigh Pureの全製品については, ウェブサイトを
参照ください(http://www.roche-applied-science.com).
2 現在発売されている分子量マーカーについては, ウェブサイトを参照ください.
(http://www.roche-applied-science.com)
35