MINICAP HEMOGLOBIN(E)
Ref. 2207
Ref. 2227*
MINICAP FLEX-PIERCING
2014/06
MINICAP HEMOGLOBIN(E) ΜΕ ΤΟ ΟΡΓΑΝΟ MINICAP FLEX-PIERCING
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
ΧΡΗΣΗ ΓΙΑ ΤΗΝ ΟΠΟΙΑ ΠΡΟΟΡΙΖΕΤΑΙ
Το κιτ MINICAP HEMOGLOBIN(E) έχει σχεδιαστεί για το διαχωρισμό των φυσιολογικών αιμοσφαιρινών (A, A2 και F) σε δείγματα ανθρώπινου
αίματος και την ανίχνευση των βασικών παραλλαγών αιμοσφαιρίνης (S, C, E και D) μέσω τριχοειδούς ηλεκτροφόρησης σε αλκαλικό ρυθμιστικό
διάλυμα (pH 9,4) με το όργανο SEBIA MINICAP FLEX-PIERCING. Το κιτ MINICAP HEMOGLOBIN(E) έχει σχεδιαστεί για εργαστηριακή χρήση.
Το όργανο MINICAP FLEX-PIERCING είναι ένας αυτοματοποιημένος αναλυτής που δημιουργεί ένα πλήρες προφίλ αιμοσφαιρίνης για την
ποσοτική ανάλυση των κλασμάτων φυσιολογικής αιμοσφαιρίνης A, A2 και F καθώς και για την ανίχνευση των βασικών παραλλαγών
αιμοσφαιρίνης S, C, E και D. Η δοκιμασία πραγματοποιείται στο αιμόλυμα δειγμάτων ολικού αίματος που έχουν συλλεχθεί σε σωληνάρια και
περιέχουν K2EDTA ή K3EDTA ως αντιπηκτικό.
Για in vitro Διαγνωστική Χρήση.
ΑΡΧΗ ΤΗΣ ΕΞΕΤΑΣΗΣ
Η αιμοσφαιρίνη είναι ένα σύνθετο μόριο που αποτελείται από δύο ζεύγη πολυπεπτιδικών αλυσίδων. Κάθε αλυσίδα συνδέεται με την αίμη, έναν
τετραπυρρολικό πυρήνα (πορφυρίνη) που λαμβάνει μορφή χηλικού συμπλόκου με ένα άτομο σιδήρου. Το μέρος αίμης είναι κοινό σε όλες τις
αιμοσφαιρίνες και τις παραλλαγές τους. Ο τύπος της αιμοσφαιρίνης καθορίζεται από το μέρος της πρωτεΐνης που ονομάζεται σφαιρίνη. Οι
πολυπεπτιδικές αλυσίδες α, β, δ και γ αποτελούν τις φυσιολογικές ανθρώπινες αιμοσφαιρίνες :
• αιμοσφαιρίνη Α........................................ = α 2 β 2
• αιμοσφαιρίνη A2...................................... = α 2 δ 2
• εμβρυακή αιμοσφαιρίνη F ....................... = α 2 γ 2
Η αλυσίδα α είναι κοινή σε αυτές τις τρεις αιμοσφαιρίνες.
Η χωρική δομή της αιμοσφαιρίνης και άλλες μοριακές ιδιότητες (όπως αυτή όλων των πρωτεϊνών) εξαρτώνται από τη φύση και την ακολουθία
των αμινοξέων που αποτελούν τις αλυσίδες. Η υποκατάσταση των αμινοξέων μέσω μετάλλαξης ευθύνεται για το σχηματισμό των παραλλαγών
αιμοσφαιρίνης με διαφορετικό φορτίο επιφανείας και συνεπώς διαφορετική ηλεκτροφορητική κινητικότητα,η οποία εξαρτάται επίσης από το pH
και την ιοντική ισχύ του ρυθμιστικού διαλύματος.
Οι προκύπτουσες ποιοτικές (ή δομικές) ανωμαλίες ονομάζονται αιμοσφαιρινοπάθειες (9, 10, 13). Η μειωμένη σύνθεση μίας από τις αλυσίδες
αιμοσφαιρίνης οδηγεί σε ποσοτικές (ή ρυθμιστικές) ανωμαλίες που ονομάζονται θαλασσαιμίες.
Η ηλεκτροφόρηση αιμοσφαιρίνης είναι μια ευρέως καθιερωμένη και συνήθης τεχνική που χρησιμοποιείται σε κλινικά εργαστήρια για την εξέταση
δειγμάτων για τυχόν πρωτεϊνικές ανωμαλίες (1, 2, 3, 4, 12). Το Σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING έχει σχεδιαστεί ώστε να παρέχει πλήρη
αυτοματοποίηση της συγκεκριμένης εξέτασης με ταχύ διαχωρισμό και ικανοποιητική ανάλυση. Η μεθοδολογία αυτή μπορεί να θεωρηθεί από
πολλές απόψεις μια ενδιάμεση τεχνική μεταξύ της κλασικής ηλεκτροφόρησης ζώνης και της υγρής χρωματογραφίας (8, 11).
Το Σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING βασίζεται στην αρχή της τριχοειδούς ηλεκτροφόρησης. Με την τεχνική αυτή, τα φορτισμένα μόρια
διαχωρίζονται με βάση την ηλεκτροφορητική τους κινητικότητα σε αλκαλικό ρυθμιστικό διάλυμα με συγκεκριμένο pH. Ο διαχωρισμός
πραγματοποιείται επίσης σύμφωνα με το pH του ηλεκτρολύτη και την ηλεκτροοσμωτική ροή (5).
Το Σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING διαθέτει τριχοειδή που λειτουργούν παράλληλα επιτρέποντας τη διεξαγωγή 2 ταυτόχρονων αναλύσεων
για την ποσοτικοποίηση των αιμοσφαιρινών. Παρασκευάζεται ένα διάλυμα δείγματος με διάλυμα αιμόλυσης το οποίο εγχέεται με αναρρόφηση
στο άκρο ανόδου του τριχοειδούς. Στη συνέχεια, οι αιμοσφαιρίνες διαχωρίζονται με την εφαρμογή υψηλής τάσης και ανιχνεύονται άμεσα στα
415 nm στο άκρο καθόδου του τριχοειδούς. Πριν από κάθε ανάλυση, εκτελείται έκπλυση των τριχοειδών με Διάλυμα Πλύσης και προετοιμασία
για την επόμενη ανάλυση με ρυθμιστικό διάλυμα.
Οι αιμοσφαιρίνες που έχουν διαχωριστεί σε τριχοειδή από διοξείδιο του πυριτίου (silica) ανιχνεύονται άμεσα με μήκος κύματος απορρόφησης
στα 415 nm το οποίο είναι ειδικό για τις αιμοσφαιρίνες. Τα διαγράμματα ηλεκτροφόρησης που προκύπτουν αξιολογούνται οπτικά για ανωμαλίες
στο πρότυπό τους.
Η άμεση ανίχνευση παρέχει ακριβή σχετική ποσοτικοποίηση του μεμονωμένου κλάσματος αιμοσφαιρίνης με ιδιαίτερο ενδιαφέρον όπως της
αιμοσφαιρίνης A2 για τη διάγνωση της β-θαλασσαιμίας. Επιπλέον, η υψηλή ανάλυση της συγκεκριμένης διαδικασίας θα πρέπει να επιτρέπει
την ταυτοποίηση των παραλλαγών αιμοσφαιρίνης και ειδικότερα τη διαφοροποίηση των αιμοσφαιρινών S από τις D και των E από τις C.
Η ποσοτικοποίηση της αιμοσφαιρίνης Α2 μπορεί να διεξαχθεί επίσης όταν είναι παρούσα η αιμοσφαιρίνη Ε.
Με χρήση ρυθμιστικού διαλύματος αλκαλικού pH, οι φυσιολογικές και μη αιμοσφαιρίνες (ή οι παραλλαγές τους) ανιχνεύονται με την ακόλουθη
σειρά από την κάθοδο προς την άνοδο : δA’2 (παραλλαγή A2), C, A2/O-Arab, E, S, D, G-Philadelphia, F, A, Hope, Bart, J, N-Baltimore και H.
Η καρβονική ανυδράση δεν οπτικοποιείται στα ηλεκτροφορητικά πρότυπα των αιμοσφαιρινών. Αυτό επιτρέπει την ταυτοποίηση παραλλαγών
της αιμοσφαιρίνης Α2 στη συγκεκριμένη ζώνη μετακίνησης.
ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΑ ΚΑΙ ΥΛΙΚΑ ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ ΜΕ ΤΑ ΚΙΤ MINICAP HEMOGLOBIN(E)
ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ : Δείτε τα φύλλα δεδομένων ασφάλειας.
ΣΤΟΙΧΕΙΟ
Ρυθμιστικό διάλυμα (έτοιμο προς χρήση)
Αιμολυτικό διάλυμα (έτοιμο προς χρήση)
Διάλυμα πλύσης (πυκνό διάλυμα)
Δοχεία αντιδραστηρίων
Φίλτρα
Κάδοι για χρησιμοποιημένα δοχεία
Ετικέτες γραμμωτού κωδικού για αιμολυτικό διάλυμα
* MINICAP HEMOGLOBIN(E) MAXI-KIT
PN 2207
2 φιαλίδια, 250 mL έκαστο
1 φιαλίδιο, 225 mL
1 φιαλίδιο, 25 mL
1 συσκ. των 125
3 φίλτρα
4 κάδοι
5 φύλλα των 4 ετικετών
PN 2227*
6 φιαλίδια, 250 mL έκαστο
3 φιαλίδια, 225 mL έκαστο
3 φιαλίδια, 25 mL έκαστο
3 συσκ. των 125
3 φίλτρα
12 κάδοι
15 φύλλα των 4 ετικετών
Κατά τη μεταφορά, το κιτ μπορεί να παραμείνει εκτός ψυγείου (στους 15 ως 30 °C) επί 15 ημέρες χωρίς δυσμενείς επιδράσεις στην απόδοσή
του.
- 240 -
Ο∆ΗΓΙΕΣ SEBIA - Ελληνικά
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
ΓΙΑ ΑΡΙΣΤΑ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ :
Όλα τα αντιδραστήρια από ίδιο κιτ πρέπει να χρησιμοποιούνται πάντα μαζί και σύμφωνα με τις οδηγίες χρήσης.
ΠΑΡΑΚΑΛΟΥΜΕ ΔΙΑΒΑΣΤΕ ΠΡΟΣΕΚΤΙΚΑ ΤΟ ΦΥΛΛΟ ΟΔΗΓΙΩΝ.
ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ : Μη χρησιμοποιείτε απιονισμένο νερό που διατίθεται ευρέως στην αγορά, όπως, για παράδειγμα, νερό για σιδέρωμα
(κίνδυνος ζημιάς σημαντικών τριχοειδών). Χρησιμοποιείτε μόνο υπερκάθαρο νερό, όπως νερό κατάλληλο ειδικό για έγχυση.
1. ΡΥΘΜΙΣΤΙΚΟ ΔΙΑΛΥΜΑ
Παρασκευή
Το ρυθμιστικό διάλυμα είναι έτοιμο προς χρήση. Περιέχει : ρυθμιστικό διάλυμα pH 9,4 ± 0,5, πρόσθετα, μη επιβλαβή στις χρησιμοποιούμενες
συγκεντρώσεις, αναγκαία για άριστη απόδοση.
Χρήση
Ρυθμιστικό διάλυμα για την ανάλυση πρωτεϊνών στο MINICAP FLEX-PIERCING.
Φύλαξη, σταθερότητα και σημεία αλλοίωσης
Φυλάσσετε το ρυθμιστικό διάλυμα στο ψυγείο (2 έως 8 °C). Παραμένει σταθερό μέχρι την ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στις ετικέτες της
συσκευασίας του κιτ ή των φιαλιδίων ρυθμιστικού διαλύματος. Αποφύγετε τη φύλαξη σε θερμοκρασία δωματίου για μεγάλο χρονικό διάστημα ή
κοντά σε παράθυρο ή σε πηγή θερμότητας.
ΜΗΝ ΚΑΤΑΨΥΧΕΤΕ.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Όταν φυλάσσεται σε θερμοκρασία 2 – 8 °C και πριν από τη χρήση, το ρυθμιστικό διάλυμα πρέπει να φθάσει σε θερμοκρασία
δωματίου. Όταν είναι γεμάτο, αφήστε το φιαλίδιο ρυθμιστικού διαλύματος σε θερμοκρασία δωματίου για διάστημα τουλάχιστον 3 ωρών πριν
από τη χρήση. Εάν δεν ληφθεί αυτό το προφυλακτικό μέτρο, ενδέχεται να επηρεαστεί η απόδοση της διαδικασίας.
ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ : Μην προθερμαίνετε το ρυθμιστικό διάλυμα σε ζεστό νερό.
Αφού το ρυθμιστικό διάλυμα ανοιχθεί και τοποθετηθεί στο σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING, παραμένει σταθερό για 1 μήνα το ανώτερο
(αθροιστικά) σε θερμοκρασία δωματίου (15 έως 30 °C). Μετά από κάθε χρήση, το ρυθμιστικό διάλυμα πρέπει οπωσδήποτε να
τοποθετείται αμέσως για φύλαξη στο ψυγείο (μεταξύ 2 και 8 °C). Στη συνέχεια παραμένει σταθερό μέχρι την ημερομηνία λήξης που
αναγράφεται στην ετικέτα του φιαλιδίου του.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Ο αθροιστικός χρόνος φύλαξης του ρυθμιστικού διαλύματος σε θερμοκρασία δωματίου δεν πρέπει να ξεπερνά τον 1 μήνα. Σε
αυτό το διάστημα φύλαξης λαμβάνεται υπόψη ο χρόνος που απαιτείται για να φθάσει το ρυθμιστικό διάλυμα σε θερμοκρασία δωματίου.
Απορρίψτε το ρυθμιστικό διάλυμα αν μεταβληθεί η όψη του, π.χ. θόλωση λόγω μικροβιακής επιμόλυνσης.
2. ΑΙΜΟΛΥΤΙΚΟ ΔΙΑΛΥΜΑ
Παρασκευή
Το αιμολυτικό διάλυμα είναι έτοιμο προς χρήση. Περιέχει : ρυθμιστικό διάλυμα pH 8.7 ± 0.5 ; πρόσθετα, μη επιβλαβή στις χρησιμοποιούμενες
συγκεντρώσεις, αναγκαία για άριστη απόδοση.
Χρήση
Για την αραίωση και αιμόλυση ερυθρών αιμοσφαιρίων.
Φύλαξη, σταθερότητα και σημεία αλλοίωσης
Φυλάσσετε το αιμολυτικό διάλυμα στο ψυγείο (2 έως 8 °C). Παραμένει σταθερό μέχρι την ημερομηνία λήξης η οποία σημειώνεται στις ετικέτες
της συσκευασίας του κιτ και του φιαλιδίου του διαλύματος. Αποφύγετε τη φύλαξη σε θερμοκρασία δωματίου ή κοντά σε παράθυρο ή σε πηγή
θερμότητας. ΜΗΝ ΚΑΤΑΨΥΧΕΤΕ.
Πετάξτε το αιμολυτικό διάλυμα αν μεταβληθεί η όψη του, π.χ. θόλωση λόγω μικροβιακής επιμόλυνσης.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ: Μετά από κάθε χρήση, κλείστε αμέσως καλά το φιαλίδιο του αιμολυτικού διαλύματος και φυλάξτε το στο ψυγείο.
ΣΗΜΕΙΩΣΗ : Το αιμολυτικό διάλυμα πιθανόν να εμφανίζει ένα περισσότερο ή λιγότερο έκδηλο κίτρινο έως πορτοκαλί χρώμα, χωρίς αυτό ωστόσο
να επηρεάζει την απόδοσή του.
3. ΔΙΑΛΥΜΑ ΠΛΥΣΗΣ
Παρασκευή
Το φιαλίδιο πυκνού διαλύματος πλύσης θα πρέπει να αραιώνεται στα 250 mL με απεσταγμένο ή απιονισμένο ύδωρ.
Μετά την αραίωση, το διάλυμα πλύσης περιέχει ένα αλκαλικό διάλυμα pH ≈ 12.
Χρήση
Για πλύση των τριχοειδών πριν και μετά από την ηλεκτροφόρηση των αιμοσφαιρινών.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Πριν γεμίσετε τον περιέκτη του διαλύματος πλύσης, συνιστάται η πλύση του ανοίγματός του, του συνδετήρα και του σωλήνα με
άφθονο απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό για την αποφυγή εναπόθεσης αλάτων.
Φύλαξη, σταθερότητα και σημεία αλλοίωσης
Φυλάσσετε το πυκνό διάλυμα και το διάλυμα εργασίας σε κλειστά δοχεία σε θερμοκρασία δωματίου ή στο ψυγείο. Το πυκνό διάλυμα πλύσης
παραμένει σταθερό μέχρι την ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στην ετικέτα του κιτ ή του φιαλιδίου διαλύματος πλύσης.
Το διάλυμα πλύσης εργασίας παραμένει σταθερό για 3 μήνες.
Πετάξτε το διάλυμα εργασίας αν μεταβληθεί η όψη του, π.χ. αν θολώσει λόγω μικροβιακής επιμόλυνσης.
4. ΔΟΧΕΙΑ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΩΝ
Χρήση
Δοχεία μίας χρήσης για αραίωση των δειγμάτων αίματος και μετακίνηση στο αυτοματοποιημένο όργανο. Τοποθετούνται στο αυτοματοποιημένο
σύστημα φόρτωσης δοχείων του MINICAP FLEX-PIERCING. Κάθε δοχείο προορίζεται για την ανάλυση 2 δειγμάτων αίματος.
ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ : Τα δοχεία αντιδραστηρίων που περιέχουν βιολογικά δείγματα απαιτούν προσεκτικό χειρισμό.
5. ΦΙΛΤΡΑ
Χρήση
Αναλώσιμα φίλτρα για διήθηση του ρυθμιστικού διαλύματος της ανάλυσης, του διαλύματος πλύσης εργασίας και του απεσταγμένου νερού (που
χρησιμοποιείται για την έκπλυση των τριχοειδών).
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Αλλάζετε συστηματικά τα φίλτρα με κάθε αντικατάσταση του κιτ.
- 241 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
Βιδώστε ένα φίλτρο στο συνδετήρα που βρίσκεται στο άκρο κάθε σωληναρίου που βυθίζεται στα φιαλίδια με το ρυθμιστικό διάλυμα, το διάλυμα
πλύσης και το απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Κατά την τοποθέτηση των φίλτρων στο σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING, εκπλύνετε τους
συνδετήρες και τα σωληνάρια με απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό.
Αποθήκευση
Πριν από τη χρήση, φυλάσσετε τα φίλτρα στη σφραγισμένη συσκευασία τους σε ξηρό μέρος σε θερμοκρασία δωματίου ή στο ψυγείο.
6. ΚΑΔΟΙ ΓΙΑ ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΗΜΕΝΑ ΔΟΧΕΙΑ
Χρήση
Κάδοι που προορίζονται για την αυτοματοποιημένη συλλογή των χρησιμοποιημένων δοχείων αντιδραστηρίων στο MINICAP FLEX-PIERCING.
Τοποθετούνται στο MINICAP FLEX-PIERCING στη θέση που προορίζεται για το σκοπό αυτό.
ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ : Οι κάδοι που περιέχουν δοχεία αντιδραστηρίων με βιολογικά δείγματα απαιτούν προσεκτικό χειρισμό.
7. ΕΤΙΚΕΤΕΣ ΓΡΑΜΜΩΤΟΥ ΚΩΔΙΚΟΥ ΓΙΑ ΑΙΜΟΛΥΤΙΚΟ ΔΙΑΛΥΜΑ
Χρήση
Ετικέτες για την ταυτοποίηση του σωληναρίου που περιέχει το αιμολυτικό διάλυμα (HEMOGLOBIN(E) HEMOLYSING SOLUTION).
ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΑ ΑΠΑΡΑΙΤΗΤΑ ΑΛΛΑ ΜΗ ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ
ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ : Δείτε τα φύλλα δεδομένων ασφάλειας.
1. ΦΥΣΙΟΛΟΓΙΚΑ ΔΕΙΓΜΑΤΑ ΕΛΕΓΧΟΥ Hb A2
Σύνθεση
Το Φυσιολογικό Δείγμα Ελέγχου Hb A2 (SEBIA, PN 4778) λαμβάνεται από μια δεξαμενή από φυσιολογικά δείγματα ανθρώπινου αίματος. Το
δείγμα ελέγχου Hb A2 βρίσκεται σε σταθεροποιημένη λυοφιλοποιημένη μορφή.
Ενδεδειγμένη χρήση
Το Φυσιολογικό δείγμα ελέγχου Hb A2 έχει σχεδιαστεί για τον έλεγχο της μετακίνησης πριν από την έναρξη μιας νέας ακολουθίας ανάλυσης και
μετά την ανάλυση ενός πλήρους περιστρεφόμενου δειγματολήπτη καθώς και για τον ποιοτικό έλεγχο της ποσοτικοποίησης της ανθρώπινης
αιμοσφαιρίνης A2 με τη διαδικασία ηλεκτροφόρησης που διεξάγεται με το όργανο MINICAP FLEX-PIERCING.
Κάντε ανασύσταση του κάθε φιαλιδίου Φυσιολογικού δείγματος ελέγχου Hb A2 με τον όγκο απεσταγμένου ή απιονισμένου νερού, όπως
υποδεικνύεται στο εσώκλειστο φυλλάδιο της συσκευασίας του Φυσιολογικού δείγματος ελέγχου Hb A2. Αφήστε το να σταθεί για 30 λεπτά και
αναμίξτε ήπια (αποφύγετε το σχηματισμό αφρού).
ΣΗΜΕΙΩΣΗ : Η ακρίβεια του όγκου ανασύστασης που θα πρέπει να τηρείται είναι ± 1,0 %.
Έλεγχος μετακίνησης :
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Για άριστη χρήση του Φυσιολογικού δείγματος ελέγχου Hb A2 με το όργανο MINICAP FLEX PIERCING, είναι απαραίτητο να
χρησιμοποιείτε ένα ειδικό σωληνάριο, σχεδιασμένο για δείγματα ελέγχου αίματος (βλ. ΑΠΑΙΤΟΥΜΕΝΟΣ ΕΞΟΠΛΙΣΜΟΣ ΚΑΙ ΕΞΑΡΤΗΜΑΤΑ,
Σωληνάρια και πώματα για δείγματα ελέγχου) και να ταυτοποιείτε το συγκεκριμένο σωληνάριο με την αντίστοιχη ετικέτα γραμμωτού κωδικού
του Φυσιολογικού δείγματος ελέγχου Hb A2.
Το Φυσιολογικό Δείγμα Ελέγχου Hb A2 θα πρέπει να χρησιμοποιείται με τον ακόλουθο τρόπο :
- Τοποθετήστε το ανασυσταθέν Φυσιολογικό δείγμα ελέγχου Hb A2 σε ένα σωληνάριο που έχει σχεδιαστεί για έλεγχο του αίματος.
- Κλείστε το σωληνάριο με το πώμα του.
- Τοποθετήστε το σωληνάριο (ταυτοποιείται με την ετικέτα γραμμωτού κωδικού του Φυσιολογικού δείγματος ελέγχου Hb A2), στη θέση 28 του
περιστρεφόμενου δειγματολήπτη του MINICAP FLEX-PIERCING (θέση Control με δακτύλιο κεντραρίσματος).
- Αδειάστε 5 mL διαλύματος αιμόλυσης MINICAP HEMOGLOBIN(E) σε ένα σωληνάριο αιμόλυσης (ταυτοποιείται με την ετικέτα γραμμωτού
κωδικού του διαλύματος αιμόλυσης) χωρίς να εισέλθουν φυσαλίδες αέρα και τοποθετήστε το στη θέση 27 του περιστρεφόμενου
δειγματολήπτη (θέση Diluent / Solution χωρίς δακτύλιο κεντραρίσματος) (Εάν δεν υπάρχει διάλυμα αιμόλυσης θα εμφανιστεί ένα μήνυμα).
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Πριν τοποθετήσετε το σωληνάριο στον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη βεβαιωθείτε ότι δεν υπάρχει αφρός στο εσωτερικό του.
• Ωθήστε τον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη στο σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING.
• Κλείστε τις θύρες του συστήματος MINICAP FLEX-PIERCING. Η ανάλυση ξεκινά αυτόματα.
• Στο παράθυρο που εμφανίζεται στην οθόνη, επιλέξτε τον αριθμό αναλύσεων του Φυσιολογικού Δείγματος Ελέγχου Hb A2 που επιθυμείτε να
εκτελεστούν σύμφωνα με τις ακόλουθες ενδείξεις και επικυρώστε :
- 1 ανάλυση του Φυσιολογικού Δείγματος Ελέγχου Hb A2 πριν από την έναρξη της ακολουθίας της νέας ανάλυσης
- 2 αναλύσεις μετά την αλλαγή του φιαλιδίου ρυθμιστικού διαλύματος της ανάλυσης (ακόμη και αν ο αριθμός παρτίδας είναι
πανομοιότυπος) ή της τεχνικής, μετά από μια ακολουθία καθαρισμού τριχοειδών με το CAPICLEAN, μετά από αναβάθμιση
λογισμικού ή μετά από ενεργοποίηση των τριχοειδών
- 3 αναλύσεις για την πρώτη χρήση του προγράμματος ανάλυσης "HEMOGLOBIN(E)" με το όργανο MINICAP FLEX-PIERCING ή μετά
από παρατεταμένη διακοπή της λειτουργίας (πάνω από 1 εβδομάδα).
Τα αποτελέσματα λαμβάνονται τότε αυτόματα υπόψη από το λογισμικό για την ανάλυση δεδομένων.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Η οπτική πυκνότητα (OD) του κλάσματος αιμοσφαιρίνης A του φυσιολογικού δείγματος ελέγχου Hb A2 πρέπει να είναι
τουλάχιστον 0,10. Με τιμές μικρότερες από τη συγκεκριμένη, ο επαναπροσδιορισμός του κέντρου της ηλεκτροφορητικής μορφολογίας δεν θα
γίνει σωστά. Κατά την ανάλυση δειγμάτων, η αναγνώριση κλασμάτων αιμοσφαιρίνης, Hb A, Hb F, Hb A2 και Hb C καθώς και ο προσδιορισμός
της ζώνης μετακίνησης άλλων μεταβλητών μπορεί να μην είναι δυνατός ή σωστός (βλ. παράγραφο ΑΝΑΛΥΣΗ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ).
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Για βέλτιστη χρήση του Φυσιολογικού δείγματος ελέγχου Hb A2, πρέπει να χρησιμοποιείτε μια ετικέτα γραμμωτού κωδικού για
την ταυτοποίηση του σωληναρίου δείγματος ελέγχου που περιέχει το Δείγμα ελέγχου Hb A2 (κλείστε το σωληνάριο με το ειδικό πώμα του πριν
από τη χρήση).
- 242 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
Μετά την εγκατάσταση του οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING, κατά τη διάρκεια της πρώτης ακολουθίας της ανάλυσης δειγμάτων αίματος,
εμφανίζεται ένα κόκκινο σήμα π ροειδοποίησης εάν απουσιάζει η αιμοσφαιρίνη Α απ ό ένα δείγμα (και δεν θα είναι δυνατός ο
επαναπροσδιορισμός του κέντρου του ηλεκτροφορητικού προτύπου. Βλ. παράγραφο "Ανάλυση αποτελεσμάτων").
Στη συνέχεια συνιστάται η ανάλυση του δείγματος αίματος με αιμοσφαιρίνη Α στο σχετικό τριχοειδές και η εκ νέου ανάλυση του δείγματος χωρίς
αιμοσφαιρίνη Α τοποθετώντας το σε μια θέση που αντιστοιχεί σε τριχοειδές που έχει ήδη ανιχνεύσει αιμοσφαιρίνη Α.
Έλεγχος ποιότητας :
Το Φυσιολογικό Δείγμα Ελέγχου Hb A2 θα πρέπει να χρησιμοποιείται ως κανονικό ανθρώπινο αίμα. Μετά από την ανασύσταση,
χρησιμοποιήστε απευθείας το Φυσιολογικό Δείγμα Ελέγχου Hb A2 ως δείγμα αίματος προς ανάλυση ή ως δείγμα ελέγχου μετακίνησης (στη
θέση 28 του περιστρεφόμενου δειγματολήπτη. Βλ. προηγούμενη παράγραφο). Θα αραιωθεί αυτομάτως με αιμολυτικό διάλυμα. Συνιστάται να
συμπεριλαμβάνεται μόνο μια ανάλυση Φυσιολογικού Δείγματος Ελέγχου Hb A2. Οι λαμβανόμενες τιμές πρέπει να βρίσκονται εντός της
παρεχόμενης περιοχής τιμών με κάθε παρτίδα Hb A2 Δειγμάτων Ελέγχου.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Για βέλτιστη χρήση του Φυσιολογικού δείγματος ελέγχου Hb A2 που έχει τοποθετηθεί στις θέσεις 1 έως 26 του περιστρεφόμενου
δειγματολήπτη, πρέπει να χρησιμοποιείται μια ετικέτα γραμμωτού κωδικού που προορίζεται για την ταυτοποίηση του σωληναρίου δείγματος
ελέγχου που περιέχει το δείγμα ελέγχου Hb A2 (κλείστε το σωληνάριο με το ειδικό πώμα του πριν από τη χρήση).
Φύλαξη, σταθερότητα και σημεία αλλοίωσης
Δείτε το φύλλο οδηγιών χρήσης Φυσιολογικών Δειγμάτων Ελέγχου Hb A2.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Μετά την ανάλυση του Φυσιολογικού δείγματος ελέγχου Hb A2 με το όργανο MINICAP FLEX-PIERCING (για έλεγχο της
μετακίνησης ή για ποιοτικό έλεγχο) αποθηκεύετε αμέσως το δείγμα ελέγχου στους 2 - 8 °C ή στους - 18 / - 22 °C, σύμφωνα με το εσώκλειστο
φυλλάδιο της συσκευασίας του Φυσιολογικού δείγματος ελέγχου Hb A2.
ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ : Καμία μέθοδος εξέτασης δεν μπορεί να εξασφαλίσει απόλυτα την απουσία ιών HIV, ηπατίτιδας Β και C ή άλλων λοιμωδών
παραγόντων. Επομένως, είναι απαραίτητο να χειρίζεστε τα Φυσιολογικά Δείγματα Ελέγχου Hb A2 ως επικίνδυνο βιολογικό υλικό.
Το συγκεκριμένο δείγμα ελέγχου βρέθηκε αρνητικό σε αναλύσεις εγκεκριμένες από τον FDA ή την αντίστοιχη ρυθμιστική αρχή της ΕΕ :
- επιφανειακό αντιγόνο ηπατίτιδας Β,
- HCV αντισώματα,
- HIV1 και HIV2 αντισώματα.
2. ΑΠΕΣΤΑΓΜΕΝΟ Η ΑΠΙΟΝΙΣΜΕΝΟ ΝΕΡΟ
Χρήση
Για έκπλυση τριχοειδών στο αυτοματοποιημένο σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING, SEBIA, για τη διαδικασία τριχοειδούς ηλεκτροφόρησης.
Συνιστάται η χρήση φιλτραρισμένου απεσταγμένου ή απιονισμένου νερού (σε φίλτρο με πορώδες ≤ 0,45 μm) και με αντιστασικότητα
υψηλότερη από 10 Megohm x cm.
Προς αποφυγή ανάπτυξης µικροβίων, αλλάζετε το νερ/ καθηµερινά.
Για βέλτιστη λειτουργία, προσθέστε 35 µL/dL CLEAN PROTECT (SEBIA, PN 2059, 1 φιαλίδιο των 5 mL).
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Πριν από την πλήρωση του δοχείου έκπλυσης, συνιστάται η πλύση του δοχείου με άφθονο απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό.
3. CAPICLEAN
Σύνθεση
Το φιαλίδιο του συμπυκνωμένου διαλύματος CAPICLEAN (SEBIA, PN 2058, 25 mL) περιέχει : πρωτεολυτικά ένζυμα, επιφανειοδραστικούς
παράγοντες και πρόσθετα, μη επιβλαβή στις χρησιμοποιούμενες συγκεντρώσεις, αναγκαία για άριστη απόδοση.
Χρήση
Για τον καθαρισμό του ακροφυσίου δειγματοληψίας στο αυτοματοποιημένο σύστημα τριχοειδούς ηλεκτροφόρησης MINICAP FLEX-PIERCING
της SEBIA, κατά τη διάρκεια της ακολουθίας καθαρισμού CAPICLEAN.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Εκτελείτε ακολουθία καθαρισμού CAPICLEAN μία φορά την εβδομάδα τουλάχιστον και το μέγιστο μία φορά την ημέρα ή ανά
500 αναλύσεις όταν πραγματοποιούνται σε διάστημα μικρότερο της μίας εβδομάδας.
Βλ. φύλλα οδηγιών που παρέχονται με το σύστημα CAPICLEAN, SEBIA.
ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ : Μη χρησιμοποιείτε πωματισμένα σωληνάρια.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Για βέλτιστη χρήση του διαλύματος CAPICLEAN με το σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING πρέπει να χρησιμοποιείται μια
ετικέτα γραμμωτού κωδικού που προορίζεται για την ταυτοποίηση του σωληναρίου αιμόλυσης που χρησιμοποιείται ως βάση για το
μικροσωληνάριο που περιέχει το αραιωμένο διάλυμα CAPICLEAN (κόψτε το πώμα του μικροσωληναρίου πριν από τη χρήση).
Φύλαξη, σταθερότητα και σημεία αλλοίωσης
Φυλάσσετε το CAPICLEAN στο ψυγείο (2 - 8 °C). Παραμένει σταθερό μέχρι την ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στην ετικέτα του φιαλιδίου.
ΜΗΝ ΚΑΤΑΨΥΧΕΤΕ.
Ενδέχεται να παρατηρηθεί ίζημα ή αιωρούμενα συζευγμένα σωματίδια (θρόμβοι) στο φιαλίδιο CAPICLEAN, τα οποία ωστόσο δεν επηρεάζουν
δυσμενώς τη χρήση.
Μην διαλύετε αυτό το ίζημα ή αυτά τα σωματίδια. Συνιστάται η συλλογή μόνο του υπερκειμένου.
Για μετέπειτα χρήση, φυλάσσετε το σωληνάριο που περιέχει το αραιωμένο διάλυμα στους 2 - 8 °C. Το προϊόν πρέπει να χρησιμοποιείται εντός
της ημέρας.
4. ΔΙΑΛΥΜΑ ΥΠΟΧΛΩΡΙΩΔΟΥΣ ΝΑΤΡΙΟΥ (για καθαρισμό ακροφυσίων δειγματοληψίας)
Προετοιμασία
Προετοιμάστε το διάλυμα υποχλωριώδους νατρίου (χλώριο 2 % έως 3 %) αραιώνοντας 250 mL χλωριούχου συμπυκνωμένου διαλύματος
(χλώριο 9,6 %) σε 1 λίτρο κρύου απεσταγμένου ή απιονισμένου νερού.
- 243 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
Χρήση
Για τον καθαρισμό των ακροφυσίων δειγματοληψίας στο Σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING (εβδομαδιαία συντήρηση για την απομάκρυνση
προσροφημένων πρωτεϊνών από το ακροφύσιο).
Βλ. εγχειρίδιο χρήσης του συστήματος SEBIA MINICAP FLEX-PIERCING.
• Εφαρμόστε σε ένα μικροσωληνάριο 500 µL αραιωμένου χλωριούχου διαλύματος που έχετε ετοιμάσει προηγουμένως.
• Κόψτε το πώμα αυτού του μικροσωληναρίου.
• Τοποθετήστε το μικροσωληνάριο που βρίσκεται μέσα σε ένα νέο σωληνάριο αιμόλυσης που χρησιμοποιείται ως βάση (ταυτοποιείται με μια
ετικέτα γραμμωτού κωδικού ειδική για το διάλυμα υποχλωριώδους νατρίου) στον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη του MINICAP FLEXPIERCING.
• Τοποθετήστε ένα νέο δοχείο αντιδραστηρίου στο αυτοματοποιημένο σύστημα φόρτωσης δοχείων του MINICAP FLEX-PIERCING (εάν δεν
υπάρχει δοχείο αντιδραστηρίου θα εμφανιστεί ένα μήνυμα).
• Ωθήστε τον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη στο σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING.
• Κλείστε τις θύρες του συστήματος MINICAP FLEX-PIERCING. Η ακολουθία καθαρισμού ξεκινά αυτόματα.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Για βέλτιστη χρήση του διαλύματος υποχλωριώδους νατρίου με το σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING πρέπει να
χρησιμοποιείται μια ετικέτα γραμμωτού κωδικού που προορίζεται για την ταυτοποίηση του σωληναρίου αιμόλυσης που χρησιμοποιείται ως
βάση για το μικροσωληνάριο που περιέχει το διάλυμα (κόψτε το πώμα του μικροσωληναρίου πριν από τη χρήση).
Φύλαξη, σταθερότητα και σημεία αλλοίωσης
Φυλάσσετε το χλωριούχο διάλυμα εργασίας σε κλειστό δοχείο σε θερμοκρασία δωματίου. Το διάλυμα παραμένει σταθερό για 3 μήνες.
Αποφεύγετε την έκθεση στο ηλιακό φως και την αποθήκευση κοντά σε πηγές θερμότητας και ανάφλεξης, οξέα και αμμωνία.
5. CAPILLARYS / MINICAP WASH SOLUTION
Παρασκευή
Κάθε φιαλίδιο του πυκνού Διαλύματος Πλύσης CAPILLARYS / MINICAP (SEBIA, PN 2052, 2 φιαλίδια, 75 mL) θα πρέπει να αραιώνεται σε έως
και 750 mL με απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό.
Για το MINICAP FLEX-PIERCING, σκόπιμο είναι να αραιώνονται μόνο 25 mL του πυκνού διαλύματος με 250 mL απεσταγμένου ή απιονισμένου
νερού.
Μετά την αραίωση, το διάλυμα πλύσης περιέχει ένα αλκαλικό διάλυμα pH ≈ 12.
Χρήση
Για πλύση των τριχοειδών του MINICAP FLEX-PIERCING.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Πριν γεμίσετε τον περιέκτη του διαλύματος πλύσης, συνιστάται η πλύση του ανοίγματός του, του συνδετήρα και του σωλήνα με
άφθονο απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό για την αποφυγή εναπόθεσης αλάτων.
Φύλαξη, σταθερότητα και σημεία αλλοίωσης
Φυλάσσετε το πυκνό διάλυμα και το διάλυμα εργασίας σε κλειστά δοχεία σε θερμοκρασία δωματίου ή στο ψυγείο. Το πυκνό διάλυμα πλύσης
παραμένει σταθερό μέχρι την ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στην ετικέτα του κιτ ή του φιαλιδίου διαλύματος πλύσης.
Το διάλυμα πλύσης εργασίας παραμένει σταθερό για 3 μήνες.
Πετάξτε το διάλυμα εργασίας αν μεταβληθεί η όψη του, π.χ. αν θολώσει λόγω μικροβιακής επιμόλυνσης.
6. ΧΛΩΡΙΟΝΑΤΡΙΟΥΧΟ ΔΙΑΛΥΜΑ
Παρασκευή
Ετοιμάστε διάλυμα 0,15 M (0,9 g/dL) NaCl σε απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό.
Χρήση
Για την έκπλυση των ερυθρών αιμοσφαιρίων πριν από την αποθήκευση στους - 80 °C, εφόσον απαιτείται.
Φύλαξη, σταθερότητα και σημεία αλλοίωσης
Φυλάσσετε το διάλυμα NaCl σε θερμοκρασία δωματίου ή στο ψυγείο.
Πετάξτε το μετά από 3 μήνες ή αν μεταβληθεί η όψη του, π.χ. θόλωση λόγω μικροβιακής επιμόλυνσης. Για μεγαλύτερες περιόδους διατήρησης,
προσθέστε αζίδιο του νατρίου, 0,1 g/dL.
ΣΗΜΕΙΩΣΕΙΣ :
Οι δοκιμές που πραγματοποιήθηκαν προς επικύρωση των αντιδραστηρίων κατέδειξαν ότι, για τα διαφορετικά διαλύματα και με χρήση κατάλληλου
εξοπλισμού για τον όγκο ανασύστασης, μια απόκλιση ± 5 % στον τελικό όγκο δεν επηρεάζει δυσμενώς την ανάλυση.
Το απεσταγμένο ή απιονισμένο ύδωρ που χρησιμοποιείται για την ανασύσταση διαλυμάτων πρέπει να είναι ελεύθερο βακτηρίων και μυκήτων (χρήση
φίλτρου ≤ 0.45 µm) και να έχει αντιστασικότητα υψηλότερη από 10 Megohms x cm.
ΕΞΟΠΛΙΣΜΟΣ ΚΑΙ ΣΥΜΠΛΗΡΩΜΑΤΙΚΑ ΕΞΑΡΤΗΜΑΤΑ
1. Σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING, SEBIA, PN 1232.
2. Περιστρεφόμενος δειγματολήπτης που παρέχεται με το MINICAP FLEX-PIERCING, εξοπλισμένος με δακτυλίους κεντραρίσματος για το
MINICAP FLEX-PIERCING (ειδικοί για τη διαδικασία MINICAP HEMOGLOBIN(E)) για σωληνάρια διαμέτρου 13 mm.
3. Δακτύλιοι κεντραρίσματος MINICAP FLEX-PIERCING για σωληνάρια διαμέτρου 11 mm, SEBIA (PN 1612).
4. Κιτ περιεκτών που παρέχεται με το MINICAP FLEX-PIERCING : Περιέκτης έκπλυσης (για πλήρωση με απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό)
και αποβλήτων.
5. Σωληνάρια συλλογής διαμέτρου 13 mm με τα αντίστοιχα πώματα (μέγιστο μήκος σωληναρίου με το πώμα : 100 mm, μέγιστη διάμετρος
πώματος : 17 mm) : για παράδειγμα, σωληνάρια BD Vacutainer, Terumo Venosafe 5 mL, Greiner Bio-one Vacuette 1, 2, 3 ή 4 mL ή Sarstedt
S-Monovette 4 mL (13 x 75 mm),
ή
σωληνάρια συλλογής διαμέτρου 11 mm με τα αντίστοιχα πώματα (μέγιστο μήκος σωληναρίου με το πώμα : 100 mm, μέγιστη διάμετρος
πώματος : 17 mm) : για παράδειγμα, σωληνάρια Sarstedt S-Monovette 2,7 mL ή Kabe Labortechnik Primavette S 2,6 mL (11 x 66 mm),
ή σωληνάρια συλλογής με ισοδύναμες διαστάσεις, εγκεκριμένα για κλινικές αναλύσεις.
6. Σωληνάρια και πώματα για δείγματα ελέγχου, SEBIA, PN 9205 : 500 κωνικά σωληνάρια και τα πώματά τους για την ανάλυση δειγμάτων
ελέγχου αίματος και ειδικών δειγμάτων με το όργανο MINICAP FLEX-PIERCING.
- 244 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
7. Αιμολυτικά σωληνάρια (με διάμετρο 8 έως 16 mm και μήκος 50 έως 100 mm).
8. Ετικέτες γραμμωτού κωδικού LOW VOLUME, SEBIA (20 τεμάχια), PN 9204 : ετικέτες που χρησιμοποιούνται για την ταυτοποίηση δειγμάτων
με όγκο κάτω από 1 mL.
9. Ετικέτες γραμμωτού κωδικού AUTOMATIC LOW VOLUME, SEBIA (20 τεμάχια), PN 9208 : ετικέτες που προορίζονται για την ταυτοποίηση
δειγμάτων όγκου κάτω του 1 mL για ανάλυση με τον τρόπο λειτουργίας automatic dilution (VS ≥ 8.61).
10. Ετικέτες γραμμωτού κωδικού MANUAL LOW VOLUME, SEBIA (20 τεμάχια), PN 9209 : ετικέτες που προορίζονται για την ταυτοποίηση
δειγμάτων όγκου κάτω του 1 mL για ανάλυση με τη λειτουργία manual dilution (VS ≥ 8.61).
11. Δοχεία αντιδραστηρίων MINICAP, SEBIA (250 τεμάχια), PN 2280.
12. Καπάκια για κάδους για χρησιμοποιημένα δοχεία αντιδραστηρίων, SEBIA (12 τεμάχια), PN 2286 : για τη σφράγιση των δοχείων που
περιέχουν χρησιμοποιημένα κύπελλα.
13. Φίλτρο αντλίας για MINICAP FLEX-PIERCING, SEBIA (2 τεμάχια), PN 1620.
ΔΕΙΓΜΑΤΑ ΠΡΟΣ ΑΝΑΛΥΣΗ
Λήψη και διατήρηση δειγμάτων
Για την ανάλυση συνιστάται η χρήση φρέσκων δειγμάτων ολικού αίματος που έχουν συλλεχθεί σε σωληνάρια και περιέχουν K2EDTA ή K3EDTA
ως αντιπηκτικό. Αποφύγετε τα αντιπηκτικά που περιέχουν ιωδο-οξεικό. Το αίμα πρέπει να συλλέγεται σύμφωνα με τις καθιερωμένες διαδικασίες
στην κλινική εργαστηριακή πρακτική.
Τα δείγματα μπορούν να φυλαχθούν έως και 7 ημέρες μεταξύ 2 και 8 °C.
ΣΗΜΕΙΩΣΗ : Τα δείγματα δεν θα πρέπει να φυλάσσονται σε θερμοκρασία δωματίου.
Μπορεί να συμβεί προοδευτική αποσύνθεση αιμοσφαιρινών (Hb) για δείγματα τα οποία φυλάσσονται μεταξύ 2 με 8 °C.
Όταν το δείγμα αίματος φυλάσσεται για περισσότερο από 7 ημέρες στους 2 - 8 °C :
• ένα ασθενές κλάσμα, το οποίο αντιστοιχεί στη μεθαιμοσφαιρίνη, εμφανίζεται μέσα στη ζώνη μετακίνησης της Hb S,
• όταν είναι παρούσα η Hb C, ένα κλάσμα το οποίο αντιστοιχεί σε αποσυντιθεμένη Ηb C φαίνεται πιο κοντά προς τον ανοδικό πόλο σε σχέση
με την Ηb A2 η οποία δεν παρεμβάλλεται σε αυτό (ζώνη Z(E), δείτε τον πίνακα στην παράγραφο "Ερμηνεία"),
• όταν είναι παρούσα η O-Arab, ένα κλάσμα το οποίο αντιστοιχεί σε αποσυντιθεμένη Hb O-Arab εμφανίζεται στη ζώνη μετακίνησης της Hb S
(Z(S) ζώνη, δείτε τον πίνακα στην παράγραφο "Ερμηνεία"),
• όταν είναι παρούσα η Hb E, ένα κλάσμα το οποίο αντιστοιχεί σε αποσυντιθεμένη Hb E εμφανίζεται στη ζώνη Z(D) (δείτε τον πίνακα στην
παράγραφο "Ερμηνεία"),
• όταν είναι παρούσα η Hb S, ένα κλάσμα το οποίο αντιστοιχεί σε αποσυντιθεμένη Hb S εμφανίζεται στη ζώνη μετακίνησης της Hb F (ζώνη Ζ7,
δείτε τον πίνακα στην παράγραφο "Ερμηνεία"),
• όταν είναι παρούσα η Hb Α, ένα κλάσμα το οποίο αντιστοιχεί σε αποσυντιθεμένη Hb Α ("κλάσμα γήρανσης" της Hb A) εμφανίζεται πιο κοντά
προς τον ανοδικό πόλο (ζώνη Ζ11, δείτε τον πίνακα στην παράγραφο "Ερμηνεία").
• όταν είναι παρούσα η Hb F (σε δείγματα αίματος από νεογέννητα μωρά), εμφανίζεται ένα κλάσμα στη ζώνη μετακίνησης της Hb A (ζώνη Ζ9,
δείτε τον πίνακα στην παράγραφο "Ερμηνεία") λόγω αλλοίωσης του δείγματος.
Όταν φυλάσσονται για περισσότερο από 10 ημέρες, παρατηρούνται ιξώδεις αθροίσεις στα ερυθρά αιμοσφαίρια. Είναι απαραίτητο να
απορριφθούν πριν από την ανάλυση.
Για μακροχρόνια φύλαξη, τα δείγματα ολικού αίματος (χωρίς προετοιμασία) ή τα εκπλυμένα ερυθρά αιμοσφαίρια μπορούν να καταψυχθούν
στους - 80 °C εντός 8 ωρών από τη συλλογή.
Τα κατεψυγμένα δείγματα ολικού αίματος και τα ερυθρά αιμοσφαίρια είναι σταθερά έως και 3 μήνες το μέγιστο στους - 80 °C.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Για βέλτιστη φύλαξη των δειγμάτων, φυλάσσετέ τα στους - 80 °C. Μην φυλάσσετε στους - 20 °C (βλ. ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΑ,
J. Bardakdjian-Michau et al, 2003).
Προετοιμασία ερυθρών αιμοσφαιρίων για φύλαξη στους - 80 °C :
Εκπλύνετε τα ερυθρά αιμοσφαίρια σύμφωνα με την παρακάτω διαδικασία : Φυγοκεντρίστε άπηκτο αίμα για να λάβετε ίζημα ερυθρών
αιμοσφαιρίων, αφαιρέστε το πλάσμα, εκπλύνετε τα ερυθρά αιμοσφαίρια 2 φορές με 10 όγκους φυσιολογικού ορού (φυγοκεντρίστε μετά από
κάθε βήμα έκπλυσης). Στη συνέχεια αφαιρέστε την περίσσεια φυσιολογικού ορού πάνω από τη μάζα των ερυθρών αιμοσφαιρίων και
περιδινήστε τα πριν από την ψύξη τους.
Προετοιμασία δειγμάτων
• Χρησιμοποιείτε τα δείγματα ολικού αίματος αμέσως.
• Βεβαιωθείτε ότι όλα τα σωληνάρια περιέχουν τουλάχιστον 1 mL αίματος και είναι τελείως κλειστά.
• Περιδινήστε για 5 δευτερόλεπτα τα δείγματα αίματος που έχουν φυλαχθεί στους 2 - 8 °C για μία εβδομάδα ή έχουν καταψυχθεί στους - 80 °C.
ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ : Τα σωληνάρια πρέπει να είναι κλειστά με τα αντίστοιχα πώματα που είναι ειδικά για τη διαδικασία MINICAP
HEMOGLOBIN(E) με το όργανο MINICAP FLEX-PIERCING (βλ. ΑΠΑΙΤΟΥΜΕΝΟΣ ΕΞΟΠΛΙΣΜΟΣ ΚΑΙ ΕΞΑΡΤΗΜΑΤΑ).
Ειδικές περιπτώσεις (VS < 8.61) :
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Τα ακόλουθα δείγματα πρέπει να ταυτοποιούνται με την ετικέτα γραμμωτού κωδικού LOW VOLUME. Με τη συγκεκριμένη ετικέτα,
εμφανίζεται στην οθόνη ένα παράθυρο για την επιλογή του επιθυμητού τρόπου αραίωσης (αυτόματη ή χειροκίνητη) ανάλογα με το δείγμα, μέσα
σε χρονικό περιθώριο 30 δευτερολέπτων που υποδεικνύεται με χρονόμετρο. Τα δείγματα αυτά πρέπει να τοποθετούνται στον περιστρεφόμενο
δειγματολήπτη κατά την έναρξη μιας σειράς αναλύσεων. Αν δεν επιλεγεί τρόπος αραίωσης δεν θα αναλυθούν.
Ανάλυση δειγμάτων χωρίς Hb A ή Hb A2 (τα δείγματα αυτά είναι απόλυτα ποσοτικοποιημένα, αλλά όχι προσδιορισμένα κατά ζώνες) :
Για να προσδιορίσετε τα κλάσματα αιμοσφαιρίνης ενός δείγματος χωρίς αιμοσφαιρίνη A ή αιμοσφαιρίνη A2, συνιστάται να το προετοιμάσετε με
την ακόλουθη διαδικασία :
- Περιδινήστε το δείγμα ολικού αίματος για 5 δευτερόλεπτα.
- Σε ένα κωνικό σωληνάριο για δείγμα ελέγχου (ταυτοποιείται με μια ετικέτα γραμμωτού κωδικού LOW VOLUME), αναμίξτε έναν όγκο (100 µL)
ολικού αίματος για ανάλυση με έναν όγκο (100 µL) Φυσιολογικού δείγματος ελέγχου Hb A2 και κλείστε το σωληνάριο με το πώμα του.
- 245 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
- Περιδινήστε για 5 δευτερόλεπτα.
- Τοποθετήστε το σωληνάριο στον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη του οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING κατά την έναρξη μιας σειράς
αναλύσεων και ωθήστε αμέσως τον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη στο όργανο για να ξεκινήσει η ανάλυση.
- Κλείστε τις θύρες του οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING.
- Επιλέξτε LOW VOLUME με Automatic dilution στο παράθυρο που εμφανίζεται στην οθόνη και επικυρώστε.
Τα αποτελέσματα λαμβάνονται αυτόματα υπόψη από το λογισμικό για την ανάλυση των δεδομένων.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Για δείγμα χωρίς καθόλου Hb A ή Hb A2 που έχει ετοιμαστεί βάσει της συγκεκριμένης διαδικασίας, το αποτέλεσμα που θα
προκύψει με το αναμεμιγμένο δείγμα θα επιτρέψει τον προσδιορισμό των πιθανών παραλλαγών λόγω της θέσης των κλασμάτων αιμοσφαιρίνης
στις αντίστοιχες ζώνες προσδιορισμού. Μην αναφέρετε τη σχετική ποσοτικοποίηση από το αποτέλεσμα του αναμεμιγμένου δείγματος.
Αυτή η σχετική ποσοτικοποίηση αιμοσφαιρινών πρέπει να αναφέρεται χρησιμοποιώντας το αρχικό, αποτέλεσμα μη αναμεμιγμένου δείγματος
(χωρίς αραίωση στο δείγμα ελέγχου).
Ανάλυση δειγμάτων που φυλάσσονται στους - 80 °C :
Ολικό αίμα :
Περιδινήστε για 5 δευτερόλεπτα το σωληνάριο με το αποψυγμένο ολικό αίμα και εκτελέστε την ανάλυση σύμφωνα με την τυπική διαδικασία.
Ερυθρά αιμοσφαίρια :
Για να αναλύσετε ένα δείγμα ερυθρών αιμοσφαιρίων που φυλάσσεται στους - 80 °C, προετοιμάστε το ακολουθώντας την παρακάτω διαδικασία :
- Περιδινήστε το σωληνάριο με τα αποψυγμένα ερυθρά αιμοσφαίρια για 5 δευτερόλεπτα.
- Σε ένα κωνικό σωληνάριο για δείγμα ελέγχου (ταυτοποιείται με μια ετικέτα γραμμωτού κωδικού LOW VOLUME), αναμίξτε έναν όγκο (50 µL) ερυθρών
αιμοσφαιρίων με 8 όγκους (400 µL) διαλύματος αιμόλυσης MINICAP HEMOGLOBIN(E) και κλείστε το σωληνάριο με το πώμα του.
- Περιδινήστε για 5 δευτερόλεπτα.
- Τοποθετήστε το σωληνάριο στον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη του οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING κατά την έναρξη μιας σειράς αναλύσεων
και ωθήστε αμέσως τον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη στο όργανο για να ξεκινήσει η ανάλυση.
- Κλείστε τις θύρες του οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING.
- Επιλέξτε LOW VOLUME με Manual dilution στο παράθυρο που εμφανίζεται στην οθόνη και επικυρώστε.
Τα αποτελέσματα λαμβάνονται αυτόματα υπόψη από το λογισμικό για την ανάλυση των δεδομένων.
Ανάλυση δειγμάτων όγκου κάτω από 1 mL :
- Περιδινήστε το δείγμα ολικού αίματος για 5 δευτερόλεπτα και προετοιμάστε το δείγμα ανάλογα με τον όγκο του ακολουθώντας ένα από τα δύο
πρωτόκολλα.
1. Όγκος δείγματος από 200 µL έως 1 mL :
- Μεταφέρετε τουλάχιστον 200 µL ολικού αίματος για ανάλυση σε ένα κωνικό σωληνάριο για δείγμα ελέγχου (ταυτοποιείται με μια ετικέτα
γραμμωτού κωδικού LOW VOLUME) και κλείστε το πώμα.
- Τοποθετήστε το σωληνάριο στον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη του οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING κατά την έναρξη μιας σειράς
αναλύσεων και ωθήστε αμέσως τον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη στο όργανο για να ξεκινήσει η ανάλυση.
- Κλείστε τις θύρες του οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING.
- Επιλέξτε LOW VOLUME με Αutomatic dilution στο παράθυρο που εμφανίζεται στην οθόνη και επικυρώστε.
ή
2. Όγκος δείγματος κάτω από 200 µL :
- Μεταφέρετε 50 µL ολικού αίματος για ανάλυση σε ένα κωνικό σωληνάριο για δείγμα ελέγχου (ταυτοποιείται με μια ετικέτα γραμμωτού κωδικού
LOW VOLUME) και 250 µL διαλύματος αιμόλυσης MINICAP HEMOGLOBIN(E) και κλείστε το πώμα.
- Περιδινήστε για 5 δευτερόλεπτα.
- Τοποθετήστε το σωληνάριο στον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη του οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING κατά την έναρξη μιας σειράς
αναλύσεων και ωθήστε αμέσως τον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη στο όργανο για να ξεκινήσει η ανάλυση.
- Κλείστε τις θύρες του οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING.
- Επιλέξτε LOW VOLUME με Manual dilution στο παράθυρο που εμφανίζεται στην οθόνη και επικυρώστε.
Τα αποτελέσματα λαμβάνονται αυτόματα υπόψη από το λογισμικό για την ανάλυση των δεδομένων.
ΣΗΜΕΙΩΣΕΙΣ : Ο ελάχιστος όγκος δείγματος για ανάλυση σε ένα κωνικό σωληνάριο είναι 200 µL. Χωρίς την επικόλληση ετικέτας γραμμωτού κωδικού
στο κωνικό σωληνάριο δεν είναι δυνατή η ταυτοποίηση του δείγματος και η επιλογή της λειτουργίας αραίωσης (αυτόματη ή χειροκίνητη).
Ειδικές περιπτώσεις (VS ≥ 8.61) :
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Τα ακόλουθα δείγματα πρέπει να ταυτοποιούνται με την ετικέτα γραμμωτού κωδικού LOW VOLUME AUTO ή LOW VOLUME
MANUAL. Οι ετικέτες αυτές επιτρέπουν στο όργανο να χρησιμοποιεί τη λειτουργία αυτόματης ή χειροκίνητης αραίωσης ανάλογα με τη
διαδικασία προετοιμασίας των δειγμάτων. Τα δείγματα αυτά πρέπει να τοποθετούνται στον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη κατά την έναρξη
μιας σειράς ανάλυσης και ο γραμμωτός κωδικός κάθε ετικέτας πρέπει να είναι ορατός στο άνοιγμα του περιστρεφόμενου δειγματολήπτη. Χωρίς
ετικέτες γραμμωτού κωδικού μπορεί να επηρεαστεί η ανάλυση.
Ανάλυση δειγμάτων χωρίς Hb A ή Hb A2 (τα δείγματα αυτά είναι απόλυτα ποσοτικοποιημένα, αλλά όχι προσδιορισμένα κατά ζώνες) :
Για να προσδιορίσετε τα κλάσματα αιμοσφαιρίνης ενός δείγματος χωρίς αιμοσφαιρίνη A ή αιμοσφαιρίνη A2, συνιστάται να το προετοιμάσετε με
την ακόλουθη διαδικασία :
- Περιδινήστε το δείγμα ολικού αίματος για 5 δευτερόλεπτα.
- Σε ένα κωνικό σωληνάριο για δείγμα ελέγχου (ταυτοποιείται με μια ετικέτα γραμμωτού κωδικού LOW VOLUME AUTO), αναμίξτε έναν όγκο
(100 µL) ολικού αίματος για ανάλυση με έναν όγκο (100 µL) Φυσιολογικού Δείγματος Ελέγχου Hb A2 και κλείστε το σωληνάριο με το πώμα
του.
- Περιδινήστε για 5 δευτερόλεπτα.
- 246 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
- Τοποθετήστε το σωληνάριο στον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη του οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING κατά την έναρξη μιας σειράς
αναλύσεων και ωθήστε αμέσως τον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη στο όργανο για να ξεκινήσει η ανάλυση.
- Κλείστε τις θύρες του οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING. Η ανάλυση ξεκινά αυτόματα.
Τα αποτελέσματα λαμβάνονται αυτόματα υπόψη από το λογισμικό για την ανάλυση των δεδομένων.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Για δείγμα χωρίς Hb A ή Hb A2 που έχει ετοιμαστεί βάσει της συγκεκριμένης διαδικασίας, το αποτέλεσμα που θα προκύψει με
το αναμεμιγμένο δείγμα θα επιτρέψει τον προσδιορισμό των πιθανών παραλλαγών λόγω της θέσης των κλασμάτων αιμοσφαιρίνης στις
αντίστοιχες ζώνες προσδιορισμού. Μην αναφέρετε τη σχετική ποσοτικοποίηση από το αποτέλεσμα του αναμεμιγμένου δείγματος.
Η σχετική ποσοτικοποίηση αιμοσφαιρινών θα πρέπει να αναφέρεται χρησιμοποιώντας το αρχικό αποτέλεσμα μη αναμεμιγμένου δείγματος
(χωρίς αραίωση στο δείγμα ελέγχου).
Ανάλυση δειγμάτων που φυλάσσονται στους - 80 °C :
Ολικό αίμα :
Περιδινήστε για 5 δευτερόλεπτα το σωληνάριο με το αποψυγμένο ολικό αίμα και εκτελέστε την ανάλυση σύμφωνα με την τυπική διαδικασία.
Ερυθρά αιμοσφαίρια :
Για να αναλύσετε ένα δείγμα ερυθρών αιμοσφαιρίων που φυλάσσεται στους - 80 °C, προετοιμάστε το ακολουθώντας την παρακάτω διαδικασία :
- Περιδινήστε το σωληνάριο με τα αποψυγμένα ερυθρά αιμοσφαίρια για 5 δευτερόλεπτα.
- Σε ένα κωνικό σωληνάριο για δείγμα ελέγχου (ταυτοποιείται με μια ετικέτα γραμμωτού κωδικού LOW VOLUME MANUAL), αναμίξτε έναν όγκο
(50 µL) ερυθρών αιμοσφαιρίων με 8 όγκους (400 µL) διαλύματος αιμόλυσης MINICAP HEMOGLOBIN(E) και κλείστε το σωληνάριο με το
πώμα του.
- Περιδινήστε για 5 δευτερόλεπτα.
- Τοποθετήστε το σωληνάριο στον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη του οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING κατά την έναρξη μιας σειράς
αναλύσεων και ωθήστε αμέσως τον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη στο όργανο για να ξεκινήσει η ανάλυση.
- Κλείστε τις θύρες του οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING. Η ανάλυση ξεκινά αυτόματα.
Τα αποτελέσματα λαμβάνονται αυτόματα υπόψη από το λογισμικό για την ανάλυση των δεδομένων.
Ανάλυση δειγμάτων όγκου κάτω από 1 mL :
- Περιδινήστε το δείγμα ολικού αίματος για 5 δευτερόλεπτα και προετοιμάστε το δείγμα ανάλογα με τον όγκο του ακολουθώντας ένα από τα δύο
πρωτόκολλα.
1. Όγκος δείγματος από 200 µL έως 1 mL :
- Μεταφέρετε τουλάχιστον 200 µL ολικού αίματος για ανάλυση σε ένα κωνικό σωληνάριο για δείγμα ελέγχου (ταυτοποιείται με μια ετικέτα
γραμμωτού κωδικού LOW VOLUME AUTO) και κλείστε το σωληνάριο με το πώμα του.
- Τοποθετήστε το σωληνάριο στον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη του οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING κατά την έναρξη μιας σειράς
αναλύσεων και ωθήστε αμέσως τον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη στο όργανο για να ξεκινήσει η ανάλυση.
- Κλείστε τις θύρες του οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING. Η ανάλυση ξεκινά αυτόματα.
ή
2. Όγκος δείγματος κάτω από 200 µL :
- Μεταφέρετε 50 µL ολικού αίματος για ανάλυση σε ένα κωνικό σωληνάριο για δείγμα ελέγχου (ταυτοποιείται με μια ετικέτα γραμμωτού
κωδικού LOW VOLUME MANUAL) και 250 µL διαλύματος αιμόλυσης MINICAP HEMOGLOBIN(E) και κλείστε το σωληνάριο με το πώμα
του.
- Περιδινήστε για 5 δευτερόλεπτα.
- Τοποθετήστε το σωληνάριο στον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη του οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING κατά την έναρξη μιας σειράς
αναλύσεων και ωθήστε αμέσως τον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη στο όργανο για να ξεκινήσει η ανάλυση.
- Κλείστε τις θύρες του οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING. Η ανάλυση ξεκινά αυτόματα.
Τα αποτελέσματα λαμβάνονται αυτόματα υπόψη από το λογισμικό για την ανάλυση των δεδομένων.
ΣΗΜΕΙΩΣΕΙΣ : Ο ελάχιστος όγκος δείγματος για ανάλυση σε ένα κωνικό σωληνάριο είναι 200 µL. Χωρίς την επικόλληση ετικέτας γραμμωτού
κωδικού στο κωνικό σωληνάριο δεν είναι δυνατή η ταυτοποίηση του δείγματος και η επιλογή της λειτουργίας αραίωσης (αυτόματη ή χειροκίνητη
σύμφωνα με τη διαδικασία προετοιμασίας του δείγματος).
Δείγματα προς αποφυγή
• Αποφύγετε τα δείγματα αίματος που εμφανίζουν θρόμβωση.
• Αποφύγετε τη χρήση παλαιών δειγμάτων αίματος που έχουν αποθηκευτεί ακατάλληλα. Η αυτοματοποιημένη αιμόλυση των δειγμάτων μπορεί
να παρεμποδιστεί από ιξώδεις αθροίσεις στα ερυθρά αιμοσφαίρια. Στη συνέχεια, τα προϊόντα της αλλοίωσης (όπως παραμορφώσεις) μπορεί
να επηρεάσουν το ηλεκτροφορητικό πρότυπο.
Σε αυτές τις δύο περιπτώσεις, τα συσσωματώματα στα ερυθρά αιμοσφαίρια μπορεί να επηρεάσουν τη συλλογή του δείγματος από το
ακροφύσιο.
• Μην αναλύετε αμέσως σωληνάρια που περιέχουν δείγματα αίματος όγκου κάτω από 1 mL καθώς μπορεί να επηρεαστεί η ανάλυση (βλ.
Ειδικές περιπτώσεις).
ΣΗΜΕΙΩΣΗ : Τα σωληνάρια συλλογής και οι παράμετροι φυγοκέντρισηςγια βιολογικά δείγματα περιγράφονται στη διαθέσιμη τεκμηρίωση σχετικά
με την προαναλυτική φάση για βιοϊατρική ανάλυση (δεδομένα που παρέχονται από τους κατασκευαστές σωληναρίων, από οδηγούς και
συστάσεις σχετικά με τη συλλογή βιολογικών δειγμάτων). Εάν δεν υπάρχει ένδειξη στις οδηγίες χρήσης σχετικά με το είδος του σωληναρίου που
πρέπει να χρησιμοποιείται ή σχετικά με τη φυγοκέντριση, ανατρέξτε στην παρούσα τεκμηρίωση. Για τις διαστάσεις του σωληναρίου που πρέπει
να χρησιμοποιείται, ανατρέξτε στο έγγραφο της SEBIA "Χαρακτηριστικά των σωληναρίων που πρέπει να χρησιμοποιούνται ανάλογα με το
όργανο". Η π ροαναλυτική φάση π ρέπ ει να διενεργείται σύμφωνα με την τελευταία λέξη της τεχνικής, τις διάφορες συστάσεις,
συμπεριλαμβανομένων αυτών που παρέχονται από τους κατασκευαστές σωληναρίων, και τους ισχύοντες κανονισμούς.
- 247 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ
Το σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING είναι ένα όργανο πολλαπλών παραμέτρων για την ανάλυση αιμοσφαιρινών σε παράλληλα τριχοειδή.
Η ανάλυση των αιμοσφαιρινών χρησιμοποιεί 2 τριχοειδή για την επεξεργασία των δειγμάτων.
Η ακολουθία των αυτοματοποιημένων βημάτων έχει ως εξής :
• Ανάγνωση των γραμμωτών κωδικών του περιστρεφόμενου δειγματολήπτη και των σωληναρίων δειγμάτων (για έως και 26 σωληνάρια) ;
• Ανάμιξη των δειγμάτων αίματος πριν από την ανάλυση ;
• Αιμόλυση και αραίωση των δειγμάτων από τα πρωτογενή σωληνάρια στα δοχεία αντιδραστηρίου ;
• Έκπλυση τριχοειδών,
• Έγχυση δειγμάτων που έχουν υποβληθεί σε αιμόλυση,
• Διαχωρισμός αιμοσφαιρινών και άμεση ανίχνευση των διαχωρισμένων αιμοσφαιρινών σε τριχοειδή.
Τα χειροκίνητα βήματα της διαδικασίας είναι τα εξής :
• Τοποθέτηση των σωληναρίων δειγμάτων (με τα πώματα) στον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη στις θέσεις 1 έως 26 ;
• Τοποθέτηση του σωληναρίου διαλύματος αιμόλυσης (χωρίς πώμα) στον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη στη θέση 27 ;
• Τοποθετήστε το φυσιολογικό δείγμα ελέγχου Hb A2 στον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη στη θέση 28 ;
• Τοποθέτηση του περιστρεφόμενου δειγματολήπτη στο όργανο MINICAP FLEX-PIERCING ;
• Αφαιρέστε τα σωληνάρια δείγματος μετά την ανάλυση.
• Αφαιρέστε και κλείστε τους κάδους για τα χρησιμοποιημένα δοχεία.
ΠΑΡΑΚΑΛΟΥΜΕ ΔΙΑΒΑΣΤΕ ΠΡΟΣΕΚΤΙΚΑ ΤΟ ΕΓΧΕΙΡΙΔΙΟ ΧΡΗΣΗΣ ΤΟΥ ΣΥΣΤΗΜΑΤΟΣ MINICAP FLEX-PIERCING.
I. ΠΡΟΕΤΟΙΜΑΣΙΑ ΤΗΣ ΑΝΑΛΥΣΗΣ MINICAP
1. Ενεργοποιήστε το όργανο MINICAP FLEX-PIERCING και τον υπολογιστή.
2. Για εκκίνηση του οργάνου, τοποθετήστε τουλάχιστον ένα νέο δοχείο αντιδραστηρίου στο αυτοματοποιημένο σύστημα φόρτωσης δοχείων
του MINICAP FLEX-PIERCING (εάν δεν υπάρχει δοχείο αντιδραστηρίου θα εμφανιστεί ένα μήνυμα).
3. Ενεργοποιήστε το λογισμικό. Η λειτουργία του οργάνου ξεκινά αυτόματα.
4. Το κιτ MINICAP HEMOGLOBIN(E) προορίζεται για χρήση σε συνδυασμό με το πρόγραμμα ανάλυσης "HEMOGLOBIN(E)" από το
όργανο MINICAP FLEX-PIERCING. Για να επιλέξετε το πρόγραμμα ανάλυσης "HEMOGLOBIN(Ε)" και να τοποθετήσετε το φιαλίδιο
ρυθμιστικού διαλύματος MINICAP HEMOGLOBIN(E) στη θέση "B2" του οργάνου, διαβάστε προσεκτικά το εγχειρίδιο οδηγιών του
MINICAP FLEX-PIERCING και ακολουθήστε τις οδηγίες που εμφανίζονται στην οθόνη.
5. Τοποθετήστε νέα δοχεία αντιδραστηρίου στο αυτοματοποιημένο σύστημα φόρτωσης δοχείων του MINICAP FLEX-PIERCING (εάν δεν
υπάρχουν δοχεία αντιδραστηρίου θα εμφανιστεί ένα μήνυμα).
6. Τοποθετήστε έναν νέο κάδο για τα χρησιμοποιημένα δοχεία στο MINICAP FLEX-PIERCING στη θέση που προορίζεται για το
συγκεκριμένο σκοπό.
7. Ελέγξτε τη στάθμη πλήρωσης των φιαλιδίων αντιδραστηρίου, προσθέστε αντιδραστήριο, εάν απαιτείται, και αδειάστε το δοχείο
αποβλήτων. Στο παράθυρο Check reagent levels (Έλεγχος επιπέδων αντιδραστηρίων), ενημερώστε το λογισμικό μετακινώντας τα
κουμπιά δρομέα. Αντικαταστήστε το φίλτρο του συστήματος έκπλυσης, εάν χρειάζεται.
8. Ο περιστρεφόμενος δειγματολήπτης διαθέτει 28 θέσεις για τα σωληνάρια δειγμάτων :
• Τοποθετήστε έως και 26 κλειστά σωληνάρια δειγμάτων με ολικό αίμα στον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη με τους ειδικούς
δακτυλίους κεντραρίσματος (θέσεις 1 έως 26). Ο γραμμωτός κωδικός πρέπει να είναι ορατός στο άνοιγμα του περιστρεφόμενου
δειγματολήπτη.
• Ρίξτε το διάλυμα αιμόλυσης MINICAP HEMOGLOBIN(E) σε ένα σωληνάριο αιμόλυσης χωρίς πώμα που ταυτοποιείται με την ετικέτα
γραμμωτού κωδικού διαλύματος αιμόλυσης, χωρίς να εισέλθουν φυσαλίδες αέρα : 2 mL για την ανάλυση 1 ή 2 δειγμάτων, 5 mL για
την ανάλυση 12 δειγμάτων. Τοποθετήστε το σωληνάριο στη θέση 27 χωρίς ειδικό δακτύλιο κεντραρίσματος του περιστρεφόμενου
δειγματολήπτη (θέση Diluent / Solution).
ΣΗΜΕΙΩΣΗ : 5 mL διαλύματος αιμόλυσης σε σωληνάριο 13 x 75 mm επιτρέπουν τη διεξαγωγή 12 αναλύσεων, 10 mL διαλύματος αιμόλυσης
σε σωληνάριο 16 x 100 mm επιτρέπουν τη διεξαγωγή 24 αναλύσεων.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Πριν τοποθετήσετε το σωληνάριο στον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη βεβαιωθείτε ότι δεν υπάρχει αφρός στο
εσωτερικό του.
• Τοποθετήστε το φυσιολογικό δείγμα ελέγχου Hb A2 στη θέση 28 του περιστρεφόμενου δειγματολήπτη (θέση "Control") και επιλέξτε
τον αριθμό αναλύσεων προς εκτέλεση σύμφωνα με τις οδηγίες που περιγράφηκαν ανωτέρω. Βλ. παράγραφο "Φυσιολογικό δείγμα
ελέγχου Hb A", μέρος "Έλεγχος μετακίνησης".
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Εάν δεν υπάρχει σωληνάριο στη θέση 1 (σωληνάριο δείγματος), στη θέση 27 (σωληνάριο διαλύματος αιμόλυσης) και στη
θέση 28 (σωληνάριο αίματος ελέγχου), δεν είναι δυνατή η έναρξη της ανάλυσης και εμφανίζεται ένα μήνυμα.
9.
10.
11.
12.
ΣΗΜΕΙΩΣΗ : Όταν χρησιμοποιείτε αίμα ελέγχου, είναι απαραίτητη η χρήση της ειδικής ετικέτας γραμμωτού κώδικα.
Ωθήστε τον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη στο σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING.
Κλείστε τις θύρες του συστήματος MINICAP FLEX-PIERCING. Η ανάλυση ξεκινά αυτόματα.
Μετά την ανάλυση, αφαιρέστε τον περιστρεφόμενο δειγματολήπτη με τα σωληνάρια δειγμάτων που έχουν υποβληθεί σε ανάλυση.
Εάν χρειάζεται, αφαιρέστε προσεκτικά τον κάδο που περιέχει τα χρησιμοποιημένα δοχεία αντιδραστηρίου, κλείστε τον καλά με το ειδικό
καπάκι και απορρίψτε τον.
ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ : Οι κάδοι που περιέχουν δοχεία αντιδραστηρίων με βιολογικά δείγματα απαιτούν προσεκτικό χειρισμό.
ΑΡΑΙΩΣΗ - ΜΕΤΑΚΙΝΗΣΗ - ΠΕΡΙΓΡΑΦΗ ΤΩΝ ΑΥΤΟΜΑΤΟΠΟΙΗΜΕΝΩΝ ΒΗΜΑΤΩΝ
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Εκτελείται ανάγνωση των γραμμωτών κωδικών του περιστρεφόμενου δειγματολήπτη και των σωληναρίων δειγμάτων.
Ανάμιξη σωληναρίων.
Τα δείγματα αραιώνονται σε αιμολυτικό διάλυμα και το ακροφύσιο δειγματοληψίας εκπλένεται μετά από κάθε δείγμα.
Τα τριχοειδή υποβάλλονται σε πλύση.
Τα αραιωμένα δείγματα εγχέονται στα τριχοειδή.
Η μετακίνηση των πρωτεϊνών εκτελείται υπό σταθερή τάση για περίπου 8 λεπτά και η θερμοκρασία ελέγχεται με το φαινόμενο Peltier.
Οι αιμοσφαιρίνες ανιχνεύονται άμεσα με σάρωση στα 415 nm και το ηλεκτροφορητικό προφίλ εμφανίζεται στην οθόνη του συστήματος.
- 248 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
ΣΗΜΕΙΩΣΗ : Τα συγκεκριμένα αυτοματοποιημένα βήματα περιγράφονται για τα δύο πρώτα σωληνάρια δειγμάτων που υποβάλλονται σε
ανάλυση. Τα ηλεκτροφορητικά πρότυπα εμφανίζονται περίπου 20 λεπτά μετά την έναρξη της ανάλυσης. Για τα επόμενα σωληνάρια δειγμάτων,
τα δύο τρία βήματα (ανάγνωση γραμμωτών κωδικών, ανάμιξη και αιμόλυση των δειγμάτων αίματος) εκτελούνται κατά την ανάλυση των 2
προηγούμενων δειγμάτων.
II. ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ ΑΝΑΛΥΣΗΣ
Στο τέλος της ανάλυσης, πραγματοποιείται αυτόματα ο σχετικός ποσοτικός προσδιορισμός των μεμονωμένων κλασμάτων αιμοσφαιρίνης και τα
προφίλ τους μπορεί να αναλυθούν. Αναγνωρίζονται αυτόματα τα κλάσματα αιμοσφαιρίνης Hb A, Hb F, Hb A2 και Hb C. Το κλάσμα Hb A
κεντράρεται στη μέση του παραθύρου ανασκόπησης της απεικόνισης. Τα διαγράμματα ηλεκτροφόρησης που προκύπτουν αξιολογούνται
οπτικά για ανωμαλίες στο πρότυπό τους.
Οι δυνητικές θέσεις των διαφόρων παραλλαγών αιμοσφαιρίνης (που αναγνωρίζονται στις ζώνες με την ονομασία Ζ1 έως Ζ15) δείχνονται στην
οθόνη του συστήματος και υποδεικνύονται στο χαρτί αποτελέσματος. Ο πίνακας στην παράγραφο "Ερμηνεία" δείχνει γνωστές παραλλαγές οι
οποίες μπορεί να υπάρχουν στην κάθε αντίστοιχη ζώνη.
Όταν το λογισμικό αναγνωρίζει ένα κλάσμα αιμοσφαιρίνης σε μια καθορισμένη ζώνη, το όνομα της ζώνης περικλείεται από ένα πλαίσιο.
Τα προφίλ προσαρμόζονται αυτόματα σε σχέση με το κλάσμα Hb A ώστε να βοηθηθεί η ερμηνεία τους :
- όταν δεν εντοπίζονται κλάσματα Hb A ή/και Hb A2 σε ένα προφίλ ηλεκτροφόρησης, εμφανίζεται μια κίτρινη ένδειξη, δεδομένου ότι η
προσαρμογή πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας τη θέση του κλάσματος Hb A στα δύο προηγούμενα πρότυπα που λήφθηκαν με το ίδιο
τριχοειδές. Στην περίπτωση αυτή δεν εντοπίζεται κανένα κλάσμα (εκτός από τη περίπτωση όπου εντοπίζεται κλάσμα Hb C) : τότε,
εντοπίζονται κλάσματα Hb A2 και C).
- όταν εντοπίζεται κλάσμα Hb F σε ένα προφίλ ηλεκτροφόρησης, χωρίς εντοπισμό κλάσματος Hb A, η κίτρινη ένδειξη δεν εμφανίζεται, η
προσαρμογή πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας τη θέση του κλάσματος Hb F και ταυτοποιούνται τα κλάσματα Hb F ή/και Hb A ή/και Hb A2.
- όταν δεν είναι εφικτή η προσαρμογή, εμφανίζεται μια κόκκινη ένδειξη και τα κλάσματα Hb F και Hb A2 δεν ταυτοποιούνται (επικοινωνήστε με
τη SEBIA).
- όταν η οπτική πυκνότητα (OD) δεν επαρκεί σε ένα ηλεκτροφορητικό αποτύπωμα ελέγχου διάχυσης (λαμβάνεται με το φυσιολογικό δείγμα
ελέγχου Hb A2, το οποίο ταυτοποιείται με την αντίστοιχη ετικέτα γραμμωτού κωδικού και αναλύεται στη θέση αρ. 28 του περιστρεφόμενου
δειγματολήπτη), εμφανίζεται ένα προειδοποιητικό μήνυμα ούτως ώστε να ληφθεί υπόψη ή να αφαιρεθεί η συγκεκριμένη ανάλυση για τον
προσδιορισμό της θέσης του κλάσματος Hb A. Εμφανίζεται τότε ένα ιώδες προειδοποιητικό σήμα στο παράθυρο επιθεώρησης και δεν
αναγνωρίζονται τα κλάσματα Hb A και Hb A2.
Σε όλες τις περιπτώσεις, οι διαφορετικές ζώνες διάχυσης (Ζ1 έως Ζ15) δεν εμφανίζονται ούτε στην οθόνη του συστήματος ούτε στο χαρτί
αποτελέσματος.
Στο ηλεκτροφορητικό πρότυπο, οι καμπύλες των κλασμάτων Hb A2 και Hb C υπολογίζονται και ξανασχεδιάζονται με ρυθμισμένη προσαρμογή
(ή προσαρμόζονται) και υπερτίθενται στην αρχική καμπύλη. Η συγκεκριμένη απεικόνιση επιτρέπει την ποσοτικοποίηση του κλάσματος Hb A2,
εφόσον το Hb C είναι παρόν στο δείγμα.
ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ : Σε ορισμένες περιπτώσεις αιμοσφαιρίνης C (ομόζυγη) ή μετά από κάποιο τεχνικό πρόβλημα, οι τιμές των αιμοσφαιρινών
A2 και C δεν προσαρμόζονται. Τα συγκεκριμένα κλάσματα τότε υπο-ποσοτικοποιούνται. Στην περίπτωση αυτή συνιστάται η ποσοτικοποίηση
του κλάσματος Hb A2 με χρήση διαφορετικής τεχνικής.
ΠΑΡΑΚΑΛΟΥΜΕ ΔΙΑΒΑΣΤΕ ΠΡΟΣΕΚΤΙΚΑ ΤΟ ΕΓΧΕΙΡΙΔΙΟ ΧΡΗΣΗΣ ΤΟΥ ΣΥΣΤΗΜΑΤΟΣ MINICAP FLEX-PIERCING.
III. ΑΚΟΛΟΥΘΙΑ ΤΕΛΟΥΣ ΤΗΣ ΑΝΑΛΥΣΗΣ
Μετά το τέλος κάθε ακολουθίας ανάλυσης, ο χειριστής πρέπει να θέσει το σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING σε αναμονή ή να τερματίσει τη
λειτουργία του συστήματος, ώστε τα τριχοειδή να αποθηκευτούν σε βέλτιστες συνθήκες.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Τοποθετήστε τουλάχιστον ένα νέο δοχείο αντιδραστηρίου στο αυτοματοποιημένο σύστημα φόρτωσης δοχείων του MINICAP
FLEX-PIERCING (εάν δεν υπάρχει δοχείο αντιδραστηρίου θα εμφανιστεί ένα μήνυμα).
IV. ΠΛΗΡΩΣΗ ΤΩΝ ΔΟΧΕΙΩΝ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΩΝ
Το Σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING διαθέτει αυτόματο σύστημα ελέγχου αντιδραστηρίων.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ :
- Ανατρέξτε στις οδηγίες για την αντικατάσταση των δοχείων αντιδραστηρίων σύμφωνα με τη χρωματική κωδικοποίηση για τα φιαλίδια και τους
συνδετήρες.
- Αντικαθιστάτε το φίλτρο του συστήματος έκπλυσης κάθε 500 αναλύσεις, με ένα φίλτρο αντλίας για MINICAP FLEX-PIERCING (βλ.
παράγραφο ΑΠΑΙΤΟΥΜΕΝΟΣ ΕΞΟΠΛΙΣΜΟΣ ΚΑΙ ΕΞΑΡΤΗΜΑΤΑ).
Όταν πρέπει να εκτελεστεί ένα από τα παρακάτω βήματα εμφανίζεται ένα μήνυμα :
• Τοποθέτηση νέου φιαλιδίου ρυθμιστικού διαλύματος ή/και,
• Πλήρωση του δοχείου με διάλυμα πλύσης εργασίας ή/και,
• Πλήρωση του δοχείου με διηθημένο απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό για έκπλυση των τριχοειδών ή/και,
• Αδειάστε το δοχείο αποβλήτων ή/και ;
• Αντικαταστήστε το φίλτρο του συστήματος έκπλυσης.
ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ : Μη χρησιμοποιείτε απιονισμένο νερό που διατίθεται ευρέως στην αγορά, όπως, για παράδειγμα, νερό για σιδέρωμα
(κίνδυνος ζημιάς σημαντικών τριχοειδών). Χρησιμοποιείτε μόνο υπερκάθαρο νερό, όπως νερό κατάλληλο ειδικό για έγχυση.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Πριν από την πλήρωση του δοχείου έκπλυσης, συνιστάται η πλύση του δοχείου με άφθονο απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό.
ΠΑΡΑΚΑΛΟΥΜΕ ΔΙΑΒΑΣΤΕ ΠΡΟΣΕΚΤΙΚΑ ΤΟ ΕΓΧΕΙΡΙΔΙΟ ΧΡΗΣΗΣ ΤΟΥ ΣΥΣΤΗΜΑΤΟΣ MINICAP FLEX-PIERCING.
ΠΟΙΟΤΙΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ
Μετά την αλλαγή του αριθμού παρτίδας του ρυθμιστικού διαλύματος ανάλυσης, μετά από αλλαγή της τεχνικής, ή μετά από μια ακολουθία
καθαρισμού τριχοειδούς σωληναρίου με CAPICLEAN και πριν από την έναρξη νέας ακολουθίας ανάλυσης, είναι απαραίτητο να
πραγματοποιήσετε τουλάχιστον μία σειρά αναλύσεων με το Φυσιολογικό δείγμα ελέγχου Hb A2, SEBIA, PN 4778 (βλ. παράγραφο
ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΑ ΑΠΑΡΑΙΤΗΤΑ ΑΛΛΑ ΜΗ ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ).
- 249 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
Συστήνεται να συμπεριληφθούν σε κάθε κύκλο επεξεργασίας των δειγμάτων, ένα καθορισμένο δείγμα αίματος ως δείγμα ελέγχου (για
παράδειγμα, ένα δείγμα αίματος που περιέχει τις αιμοσφαιρίνες A, F, C και S, όπως είναι το Δείγμα Ελέγχου Hb AFSC, SEBIA, PN 4792, ή ένα
φυσιολογικό δείγμα αίματος, το Φυσιολογικό Δείγμα Ελέγχου Hb A2, SEBIA, PN 4778 ή το Παθολογικό Δείγμα Ελέγχου Hb A2l, SEBIA,
PN 4779).
ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ
Τιμές
Από την άμεση ανίχνευση στα 415 nm σε τριχοειδή προκύπτουν σχετικές συγκεντρώσεις (ποσοστά) μεμονωμένων ζωνών αιμοσφαιρινών.
Οι φυσιολογικές τιμές για μεμονωμένες ζώνες αιμοσφαιρίνης ηλεκτροφόρησης στο σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING έχουν καθοριστεί με
βάση υγιή πληθυσμό 113 ενηλίκων (άνδρες και γυναίκες) με φυσιολογικές τιμές αιμοσφαιρινών με χρήση τεχνικής HPLC :
Αιμοσφαιρίνη Α : μεταξύ 96,8 και 97,8 %
Αιμοσφαιρίνη F : < 0,5 % (*)
Aιμοσφαιρίνη A2 :μεταξύ 2,2 και 3,2 %
(*) Βλ. Παρεμβολές και περιορισμοί
Συνιστάται ο καθορισμός από κάθε εργαστήριο των δικών του τιμών κατωφλίου.
ΣΗΜΕΙΩΣΗ : Οι φυσιολογικές τιμές καθορίστηκαν με χρήση των τυπικών παραμέτρων του λογισμικού (εξομάλυνση 0 και αυτόματη
ποσοτικοποίηση των κλασμάτων αιμοσφαιρινών με το πρόγραμμα ανάλυσης HEMOGLOBIN(E)).
ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ : Οι φυσιολογικές τιμές (αναφοράς) πρέπει να λαμβάνονται υπόψη μόνο στην περίπτωση απουσίας παραλλαγών
αιμοσφαιρίνης.
Ερμηνεία
Δείτε ΗΛΕΚΤΡΟΦΟΡΗΤΙΚΑ ΠΡΟΤΥΠΑ, εικόνες 1 - 15.
Οι διαφορετικές ζώνες μετακίνησης των παραλλαγών αιμοσφαιρίνης (με την ονομασία Ζ1 έως Ζ15) δείχνονται στην οθόνη του συστήματος και
υποδεικνύονται στο χαρτί αποτελέσματος Η διέλευση του κέρσορα του ποντικιού πάνω από το όνομα μιας ζώνης απεικονίζει πληροφορίες για
το εικονίδιο οι οποίες αναφέρονται στις πιθανές παραλλαγές αιμοσφαιρίνης που θα μπορούσαν να παρατηρηθούν σε αυτήν τη ζώνη.
Για το κάθε κλάσμα, η μέγιστη θέση καθορίζει τη ζώνη μετακίνησης.
Δείτε τον πίνακα όπου αναφέρονται οι πιθανές παραλλαγές που βρίσκονται σε κάθε ζώνη.
1. Ποιοτική ανίχνευση : Αιμοσφαιρινοπάθειες
Οι περισσότερες αιμοσφαιρινοπάθειες οφείλονται στην υποκατάσταση διά μετάλλαξης ενός μόνο αμινοξέος σε έναν από τους τέσσερις τύπους
αλυσίδων πολυπεπτιδίων (1, 2, 4, 9, 12). Η κλινική σημασία μιας τέτοιας αλλαγής εξαρτάται από τον τύπο αμινοξέος και τη σχετική περιοχή (13). Στην
κλινικά σημαντική αλλαγή, επηρεάζεται είτε η αλυσίδα α είτε η αλυσίδα β.
Έχουν περιγραφεί περισσότερες από 1400 παραλλαγές της αιμοσφαιρίνης στους ενήλικες (6, 14). Οι πρώτες μη φυσιολογικές αιμοσφαιρίνες που
μελετήθηκαν και αυτές που συναντώνται συχνότερα φέρουν ένα τροποποιημένο ηλεκτρικό φορτίο, το οποίο οδηγεί σε εύκολη ανίχνευση με
ηλεκτροφόρηση.
Υπάρχουν πέντε βασικές μη φυσιολογικές αιμοσφαιρίνες που παρουσιάζουν ιδιαίτερο κλινικό ενδιαφέρον : S, C, E, O-Arab και D.
Το κιτ MINICAP HEMOGLOBIN(E) προορίζεται για την ταυτοποίηση των αιμοσφαιρινοπαθειών και των θαλασσαιμιών.
Αιμοσφαιρίνη S
H αιμοσφαιρίνη S είναι η συχνότερη. Οφείλεται στην αντικατάσταση του γλουταμικού οξέος (ένα οξικό αμινοξύ αρ. 6) της αλυσίδας β από βαλίνη
(ένα ουδέτερο αμινοξύ) : κατά τη σύγκριση με το Hb A, το ισοηλεκτρικό σημείο του ανυψώνεται και το ολικό αρνητικό φορτίο του μειώνεται με
την ανάλυση pH. Η ηλεκτροφορητική του κινητικότητα επομένως μειώνεται στο τριχοειδές και η συγκεκριμένη αιμοσφαιρίνη είναι ταχύτερη από
το κλάσμα Α.
Με τη διαδικασία του MINICAP HEMOGLOBIN(E) με χρήση αλκαλικού ρυθμιστικού διαλύματος, η αιμοσφαιρίνη S μετακινείται μεταξύ των
κλασμάτων A και A2, δίπλα στο Hb A2.
Αιμοσφαιρίνη C
Ένα γλουτανικό οξύ της αλυσίδας β αντικαθίσταται από λυσίνη (ένα βασικό αμινοξύ αρ. 6) : η κινητικότητά του μειώνεται σημαντικά. Κατά τη
σύγκριση με το Hb A, το ισοηλεκτρικό σημείο του ανυψώνεται σημαντικά και το ολικό αρνητικό φορτίο του μειώνεται με την ανάλυση pH. Η
ηλεκτροφορητική του κινητικότητα επομένως μειώνεται στο τριχοειδές και η συγκεκριμένη αιμοσφαιρίνη είναι ταχύτερη από το κλάσμα Α,
γεγονός που επιτρέπει τη διαφοροποίησή του. Οι αιμοσφαιρίνες C, E και O-Arab δεν υπερτίθενται στο ηλεκτροφορητικό πρότυπο και
ταυτοποιούνται εύκολα.
Αιμοσφαιρίνη Ε
Ένα γλουτανικό οξύ της αλυσίδας β (αρ. 26) αντικαθίσταται από λυσίνη. Με τη διαδικασία του MINICAP HEMOGLOBIN(E), η αιμοσφαιρίνη E
μετακινείται μόνο ανοδικά πίσω από την αιμοσφαιρίνη A2 και διαχωρίζεται πλήρως από αυτήν. Στη συνέχεια, όταν είναι παρούσα η
αιμοσφαιρίνη Ε, το κλάσμα A2 μπορεί να μετρηθεί για την ανίχνευση της β θαλασσαιμίας.
Αιμοσφαιρίνη O-Arab
Ένα γλουτανικό οξύ της αλυσίδας β (αρ. 121) αντικαθίσταται από λυσίνη. Με τη διαδικασία του MINICAP HEMOGLOBIN(E), η αιμοσφαιρίνη
O-Arab μετακινείται ακριβώς όπως η αιμοσφαιρίνη A2. Στην περίπτωση αυτή, δεν είναι δυνατή η ποσοτικοποίηση της αιμοσφαιρίνης Α2. Όταν
το συγκεκριμένο κλάσμα είναι > 9 %, θα πρέπει να εξετάζεται το ενδεχόμενο ύπαρξης της αιμοσφαιρίνης O-Arab.
Σημειώστε ότι η Hb O-Arab μετακινείται ξεχωριστά από τις αιμοσφαιρίνες C και E.
- 250 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
Αιμοσφαιρίνη D (-Los Angeles)
Ένα γλουτανικό οξύ της αλυσίδας β (αρ. 121) αντικαθίσταται από γλουταμίνη. Με τη διαδικασία του MINICAP HEMOGLOBIN(E), η αιμοσφαιρίνη
D (ονομάζεται D-Punjab, D-Los Angeles, D-Chicago ή D-Portugal) μετακινείται πίσω από την αιμοσφαιρίνη S. Η συγκεκριμένη ιδιότητά της
επιτρέπει τη διαφοροποίηση των αιμοσφαιρινών S και D.
2. Ποσοτικές ανωμαλίες : Θαλασσαιμίες
Οι θαλασσαιμίες αποτελούν μια αρκετά διαφορετική ομάδα γενετικών διαταραχών που χαρακτηρίζονται από μειωμένη σύνθεση ενός τύπου
αλυσίδας πολυπεπτιδίων. Ο μοριακός μηχανισμός της συγκεκριμένης μείωσης δεν έχει περιγραφεί πλήρως.
Υπάρχουν δύο τύποι συνδρόμων θαλασσαιμίας :
Άλφα-θαλασσαιμία
Χαρακτηρίζεται από μείωση στη σύνθεση των αλυσίδων α και συνεπώς μείωση στη σύνθεση όλων των φυσιολογικών αιμοσφαιρινών.
Η υπερβολικά αυξημένη σύνθεση των αλυσίδων β και γ σε σχέση με τις αλυσίδες α προκαλεί το σχηματισμό τετραμερών χωρίς αλυσίδα α :
• αιμοσφαιρίνη Bart = γ 4,
• αιμοσφαιρίνη H = β 4.
Η αιμοσφαιρίνη Η παρουσιάζει χαμηλό ισοηλεκτρικό σημείο. Με τη διαδικασία του MINICAP HEMOGLOBIN(E), μετακινείται πιο ανοδικά από
την αιμοσφαιρίνη Α (και μπορεί να εμφανίζεται ως ένα ή περισσότερα κλάσματα).
Βήτα-θαλασσαιμία
Χαρακτηρίζεται από μείωση στη σύνθεση των αλυσίδων β. Επηρεάζεται μόνο η σύνθεση της αιμοσφαιρίνης Α.
Επομένως, τα ποσοστά των αιμοσφαιρινών F και A2 αυξάνονται σε σχέση με αυτό της αιμοσφαιρίνης A.
Με τη διαδικασία του MINICAP HEMOGLOBIN(E), οι τιμές που λαμβάνονται για διαφορετικά κλάσματα αιμοσφαιρίνης επιτρέπουν την
ανίχνευση της βήτα-θαλασσαιμίας.
3. Ειδικές περιπτώσεις
• Όταν δεν υπάρχει αιμοσφαιρίνη Α στο δείγμα, μπορεί να παρατηρηθεί ένα μικρό κλάσμα στη ζώνη μετακίνησης. Το κλάσμα αυτό μπορεί να
είναι ακετυλιωμένη αιμοσφαιρίνη F που αντιπροσωπεύει περίπου 15 έως 25 % της αιμοσφαιρίνης F. Το σύστημα MINICAP FLEX-PIERCING
μπορεί να ταυτοποιήσει με ακρίβεια αυτή την ακετυλιωμένη αιμοσφαιρίνη ξεχωριστά από την αιμοσφαιρίνη A.
• Όταν ένα μικρό κλάσμα (περίπου 0,5 έως 3 %) μετακινείται μεταξύ των αιμοσφαιρινών F και δA’2 (παραλλαγή της Α2) αυτό μπορεί να
σημαίνει ότι υπάρχει μια παραλλαγή της A2. Τα ποσοστά της φυσιολογικής αιμοσφαιρίνης Α2 και της παραλλαγής είναι περίπου όμοια για
ετερόζυγους ασθενείς.
• Όταν εντοπίζεται μια παραλλαγή της αιμοσφαιρίνης A2 (δA’2 ή οποιαδήποτε άλλη μεταβλητή της A2) συνιστάται να προστίθεται το ποσοστό
της στην αιμοσφαιρίνη A2 για καλύτερη διάγνωση της βήτα-θαλασσαιμίας.
• Μερικές παραλλαγές αιμοσφαιρίνης (όπως η Hb Camperdown και Hb Okayama) μετακινούνται κοντά στην Hb A και μπορεί να μην μπορούν
να διαχωριστούν από αυτήν την αιμοσφαιρίνη.
• Μερικές παραλλαγές αιμοσφαιρίνης (όπως η Hb Porto-Alegre και η αποσυντιθεμένη Hb S) μετακινούνται κοντά στην Hb F και μπορεί να μην
μπορούν να διαχωριστούν από αυτήν την αιμοσφαιρίνη.
• Τα αδύναμα κλάσματα αιμοσφαιρίνης που μετακινούνται στη ζώνη Z12 συχνά δεν ποσοτικοποιούνται με ακρίβεια (για παράδειγμα, πολύ
ασύμμετρα κλάσματα Hb Bart). Απαιτείται, επομένως, η διαγραφή των αποτελεσμάτων αυτόματης ποσοτικοποίησης και η εν συνεχεία
χειροκίνητη ποσοτικοποίησή τους.
• Κατά την ανάλυση δειγμάτων αίματος από νεογέννητα μωρά, η Hb A από δείγματα που περιέχουν Hb F σε υψηλή συγκέντρωση μπορεί να
διαταραχθεί, ειδικά λόγω της παρουσίας αποσυντιθεμένης Hb F στη ζώνη μετακίνησής της. Το ποσοστό Hb A το οποίο υποδεικνύεται από
το λογισμικό μπορεί να είναι υπερεκτιμημένο. Επιπλέον, όταν οι παραλλαγές αιμοσφαιρίνης (> 4 %, όπως η Hb S, Hb C, Hb E ή Hb DPunjab) υπάρχουν σε δείγματα αίματος που περιέχουν υψηλά επίπεδα Hb F (> 60 %), είναι απαραίτητο να πραγματοποιήστε
συμπληρωματικές αναλύσεις προκειμένου να επιβεβαιώσετε την παρουσία της Hb A.
• Για τα νεογέννητα ηλικίας έως 6 - 9 μηνών, συνιστάται η ανάλυση διαφορετικών δειγμάτων αίματος (που συλλέγονται μηνιαίως, για
παράδειγμα) ώστε να ελέγχεται η συγκέντρωση Hb F. Αυτό θα επιτρέψει την επαλήθευση της συγκέντρωσης Hb F και της πιθανής παρουσίας
κάποιας παραλλαγής.
Σε περίπτωση αβεβαιότητας, συνιστάται η επιβεβαίωση με χρήση συμπληρωματικών μελετών και η ανάλυση δειγμάτων αίματος των γονέων.
• Κατά την ανάλυση δειγμάτων αίματος από μεταγγιζόμενους ασθενείς με δρεπανοκυτταρική νόσο, με χαμηλό επίπεδο Hb A (< 10 %), το
κλάσμα Hb S μπορεί να εμφανιστεί μετατοπισμένο από τη ζώνη Z(S) προς τη ζώνη Z(D). Είναι απαραίτητο να αναλυθεί η αιματολογική
κατάσταση και να πραγματοποιηθούν συμπληρωματικές εξετάσεις προκειμένου να επιβεβαιωθεί η παρουσία της Hb S.
• Κατά την ανάλυση δειγμάτων αίματος από ασθενείς με δρεπανοκυτταρική νόσο πριν από μετάγγιση, ενδέχεται να παρατηρηθεί παραλλαγή
κλάσματος Hb S για τις αναλύσεις του ίδιου ασθενούς λόγω της ανομοιογένειας αυτού τύπου δείγματος. Συνεπώς συνιστάται η
ομογενοποίηση αυτού του τύπου δείγματος αίματος πριν την ανάλυση.
• Παραδείγματα αυξημένης αιμοσφαιρίνης F (Hb F) (εκτός από νεογέννητα) :
- εγκυμοσύνη,
- ασθενείς με δρεπανοκυτταρική αναιμία, ηλικίας άνω των 2 ετών, που υποβάλλονται σε θεραπεία με Hydrea® (υδροξυουρία) ή/και σε
μετάγγιση ή/και παράγουν Hb F με φυσικό τρόπο η οποία ενισχύεται με αντιστάθμιση,
- ασθενείς ηλικίας άνω των 2 ετών, με HPFH (κληρονομικά μεταδιδόμενη εμμένουσα εμβρυακή αιμοσφαιρίνη με ποσοστό Hb F 20 έως 40
% για ετερόζυγους ασθενείς),
- ασθενείς ηλικίας άνω των 2 ετών, με λευχαιμία (οποιουδήποτε τύπου), κληρονομικά μεταδιδόμενη αιμολυτική αναιμία, διαβήτη, νόσο του
θυρεοειδούς, υποδραστηριότητα του μυελού των οστών, πολλαπλό μυέλωμα, καρκίνο με μεταστάσεις.
Για περισσότερες πληροφορίες, ανατρέξτε στην ακόλουθη ιστοθέση : http://www.answers.com/topic/fetal-hemoglobin-test.
- 251 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
Παρεμβολές και περιορισμοί
• Βλέπε ΔΕΙΓΜΑΤΑ ΠΡΟΣ ΑΝΑΛΥΣΗ.
• Αναλύετε μόνο δείγματα αίματος στα σωληνάρια συλλογής που υποδεικνύονται στην ενότητα ΑΠΑΙΤΟΥΜΕΝΟΣ ΕΞΟΠΛΙΣΜΟΣ ΚΑΙ
ΕΞΑΡΤΗΜΑΤΑ ή σωληνάρια αντίστοιχων διαστάσεων, εγκεκριμένα για κλινικές αναλύσεις. Για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τις
συγκεκριμένες συσκευές, επικοινωνήστε με το τεχνικό τμήμα της SEBIA.
• Μην αναλύετε αμέσως σωληνάρια που περιέχουν δείγματα αίματος όγκου κάτω από 1 mL.
• Αποφύγετε τη χρήση παλαιών δειγμάτων αίματος που έχουν αποθηκευτεί ακατάλληλα. Τα προϊόντα της αλλοίωσης (ή παραμορφώσεις)
μπορεί να επηρεάσουν το ηλεκτροφορητικό πρότυπο μετά από αποθήκευση διάρκειας 7 ημερών.
• Μετά από αποθήκευση διάρκειας 10 ημερών μπορεί να εμφανιστούν ιξώδεις αθροίσεις που δημιουργούνται στα ερυθρά αιμοσφαίρια, οι
οποίες θα πρέπει να απορρίπτονται πριν από την ανάλυση.
• Όταν εντοπίζεται μια μη φυσιολογική αιμοσφαιρίνη, χρησιμοποιήστε άλλα μέσα ταυτοποίησης (π.χ. ηλεκτροφόρηση αλυσίδας σφαιρίνης) ή
ζητήστε συμβουλές ή αποστείλετε το δείγμα σε ένα εξειδικευμένο εργαστήριο.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ : Είναι επίσης απαραίτητο να αναλυθεί η αιματολογική κατάσταση, ως συμπληρωματικό αποτέλεσμα.
• Η μετακίνηση μιας παραλλαγής αιμοσφαιρίνης κοντά στο Hb A προκαλεί υποτίμηση του κλάσματος Hb A και της παραλλαγής και συνεπώς
υπερτίμηση του κλάσματος Hb A2. Για την ακριβή ποσοτικοποίηση του Hb A2 πρέπει να διαγράφεται η ξεχωριστή ενσωμάτωση των
μεταβλητών και του Hb A και να γίνεται ποσοτικοποίηση των συγκεκριμένων κλασμάτων μαζί.
• Ορισμένοι ομόζυγοι ασθενείς "S" υποβάλλονται σε θεραπεία με Hydrea® (υδροξυουρία) που μπορεί να προκαλέσει σύνθεση της εμβρυακής
αιμοσφαιρίνης. Με τη διαδικασία του MINICAP HEMOGLOBIN(E), η κινητικότητα της αιμοσφαιρίνης F που προκύπτει δεν διαφέρει από αυτή
της φυσιολογικής αιμοσφαιρίνης F.
• Λόγω των ορίων διακριτικής ικανότητας και ευαισθησίας της ηλεκτροφόρησης ζώνης, είναι πιθανό κάποιες παραλλαγές της αιμοσφαιρίνης να
μην ανιχνεύονται με αυτήν τη μέθοδο.
Οι κοινοί παράγοντες παρεμβολής με τη διαδικασία MINICAP HEMOGLOBIN(E) όταν αυτή εκτελείται στο όργανο MINICAP FLEX-PIERCING
(τριγλυκερίδια και χολερυθρίνη) για την ανάλυση κλασμάτων αιμοσφαιρίνης αξιολογήθηκαν σε μελέτες βάσει της κατευθυντήριας οδηγίας EP7A2 «Interference Testing in Clinical Chemistry» του CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute / Ινστιτούτο κλινικών και εργαστηριακών
προτύπων) των ΗΠΑ.
Τα αποτελέσματα συνοψίζονται ως εξής :
- Δεν ανιχνεύθηκε καμία ποιοτική ή ποσοτική παρεμβολή με τη διαδικασία MINICAP HEMOGLOBIN(E) στο όργανο MINICAP FLEX-PIERCING
όταν η συγκέντρωση τριγλυκεριδίων είναι ίση ή μικρότερη από 15,57 g/L.
- Δεν ανιχνεύθηκε καμία ποιοτική ή ποσοτική παρεμβολή με τη διαδικασία MINICAP HEMOGLOBIN(E) στο όργανο MINICAP FLEX-PIERCING
όταν η συγκέντρωση χολερυθρίνης είναι ίση ή μικρότερη από 27,7 mg/L ή 473 µmol/L.
Αντιμετώπιση προβλημάτων
Επικοινωνήστε με την Τεχνική Υπηρεσία SEBIA του προμηθευτή εάν δεν είναι δυνατή η διεξαγωγή της ανάλυσης, ακόμη και εάν έχετε
ακολουθήσει προσεκτικά τις οδηγίες για την προετοιμασία και τη φύλαξη των υλικών καθώς και για την εκτέλεση της διαδικασίας.
Τα φύλλα δεδομένων ασφαλείας του κιτ και πληροφορίες για τον καθαρισμό και την απόρριψη αποβλήτων, τους κανόνες επισήμανσης και
ασφαλείας που εφαρμόζει η SEBIA, τη συσκευασία για τη μεταφορά βιολογικών δειγμάτων και τον καθαρισμό των οργάνων διατίθενται στο DVD
«ΦΥΛΛΑ ΟΔΗΓΙΩΝ ΚΑΙ ΔΕΔΟΜΕΝΩΝ ΑΣΦΑΛΕΙΑΣ».
ΔΕΔΟΜΕΝΑ ΑΠΟΔΟΣΗΣ
Ακρίβεια
Η ακρίβεια της διαδικασίας MINICAP HEMOGLOBIN(E) σε όργανο MINICAP FLEX-PIERCING αξιολογήθηκε σε μια μελέτη βάσει της
κατευθυντήριας οδηγίας EP5-A2 «Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurements Methods» (Αξιολόγηση της ακρίβειας της
απόδοσης των μεθόδων ποσοτικής μέτρησης) του CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute / Ινστιτούτο κλινικών και εργαστηριακών
προτύπων) των ΗΠΑ.
Οι μέσοι όροι, οι τυπικές αποκλίσεις και οι συντελεστές μεταβλητότητας (CV %) (n = 80) υπολογίστηκαν για τα ποσοστά (%) των κλασμάτων
αιμοσφαιρίνης για κάθε δείγμα, με τη χρήση των στατιστικών εργαλείων που συνιστώνται από το CLSI.
Τα αποτελέσματα που προέκυψαν με τη διαδικασία του MINICAP HEMOGLOBIN(E) καταδεικνύουν πολύ καλή αναπαραγωγιμότητα για την
ποσοτική ανάλυση κάθε συστατικού της αιμοσφαιρίνης. Όλα τα ηλεκτροφορήματα ερμηνεύθηκαν και οπτικά.
Τα αποτελέσματα που παρουσιάζονται παρακάτω προέκυψαν με χρήση των τυπικών παραμέτρων του λογισμικού PHORESIS (εξομάλυνση 0
και αυτόματη ποσοτικοποίηση των κλασμάτων αιμοσφαιρίνης με το πρόγραμμα ανάλυσης HEMOGLOBIN(E)).
Αναπαραγωγιμότητα μεταξύ τριχοειδών από το ίδιο όργανο
Αναλύθηκαν επτά (7) διαφορετικά δείγματα αίματος με χρήση της διαδικασίας MINICAP HEMOGLOBIN(E) και στα δύο τριχοειδή του ίδιου
οργάνου MINICAP FLEX-PIERCING και με μία παρτίδα κιτ MINICAP HEMOGLOBIN(E). Τα αναλυθέντα δείγματα αίματος περιλάμβαναν 2
δείγματα με φυσιολογικό επίπεδο Hb A2 (αρ. 1 και 5), 1 δείγμα με χαμηλό επίπεδο Hb A2 (αρ. 2), 2 δείγματα με αυξημένο επίπεδο Hb A2 (αρ.
3 και 6), 1 παθολογικό δείγμα με Hb F και Hb S (αρ. 4) και 1 παθολογικό δείγμα με Hb F, Hb S και Hb C (αρ. 7). Στη μελέτη αυτή, κάθε δείγμα
αίματος αναλύθηκε και στα δύο τριχοειδή του ίδιου οργάνου, με 40 αναλύσεις κατά τη διάρκεια 20 εργάσιμων ημερών (σε 2 διαφορετικές ώρες
της ημέρας). Στο πλαίσιο κάθε ανάλυσης, τα δείγματα αναλύθηκαν εις διπλούν.
Τα αποτελέσματα για τα ποσοστά Hb A, Hb A2, Hb F, Hb S και Hb C συνοψίζονται στους ακόλουθους πίνακες.
Μέση Hb A (%)
Αναπαραγωγιμότητα εντός ανάλυσης (CV %)
Αναπαραγωγιμότητα μεταξύ αναλύσεων (CV %)
Αναπαραγωγιμότητα μεταξύ ημερών (CV %)
Σύνολο (CV %)
Δείγμα 1
Δείγμα 2
Δείγμα 3
Δείγμα 4
Δείγμα 5
Δείγμα 6
Δείγμα 7
0,0
0,1
0,1
0,2
0,0
0,1
0,5
97,6
0,0
0,0
0,0
98,3
0,0
0,0
0,1
- 252 -
95,4
0,0
0,0
0,1
46,5
0,1
0,1
0,3
97,2
0,0
0,0
0,1
93,3
0,0
0,0
0,1
45,7
0,1
0,1
0,5
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
Μέση Hb A2 (%)
Αναπαραγωγιμότητα εντός ανάλυσης (CV %)
Αναπαραγωγιμότητα μεταξύ αναλύσεων (CV %)
Αναπαραγωγιμότητα μεταξύ ημερών (CV %)
Σύνολο (CV %)
Μέση Hb F (%)
Αναπαραγωγιμότητα εντός ανάλυσης (CV %)
Αναπαραγωγιμότητα μεταξύ αναλύσεων (CV %)
Αναπαραγωγιμότητα μεταξύ ημερών (CV %)
Σύνολο (CV %)
Μέση Hb S (%)
Αναπαραγωγιμότητα εντός ανάλυσης (CV %)
Αναπαραγωγιμότητα μεταξύ αναλύσεων (CV %)
Αναπαραγωγιμότητα μεταξύ ημερών (CV %)
Σύνολο (CV %)
Μέση Hb C (%)
Αναπαραγωγιμότητα εντός ανάλυσης (CV %)
Αναπαραγωγιμότητα μεταξύ αναλύσεων (CV %)
Αναπαραγωγιμότητα μεταξύ ημερών (CV %)
Σύνολο (CV %)
Δείγμα 1
Δείγμα 2
Δείγμα 3
Δείγμα 4
Δείγμα 5
Δείγμα 6
Δείγμα 7
1,8
3,1
1,1
1,8
1,7
1,0
4,0
2,4
0,0
0,0
1,8
1,8
0,0
0,7
3,1
4,6
0,0
0,5
1,2
2,8
2,8
0,0
0,7
0,3
0,0
1,8
1,8
6,7
0,2
0,0
1,1
2,8
0,0
1,6
4,3
Δείγμα 1
Δείγμα 2
Δείγμα 3
Δείγμα 4
Δείγμα 5
Δείγμα 6
Δείγμα 7
/
/
/
0.8
/
/
0.4
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
13.0
/
0.0
/
0.3
/
0.9
/
/
/
/
/
25.6
0.0
0.1
0.4
Δείγμα 1
Δείγμα 2
Δείγμα 3
Δείγμα 4
Δείγμα 5
Δείγμα 6
Δείγμα 7
/
/
/
0,4
/
/
0,7
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
37,7
/
0,0
/
0,2
/
0,5
/
/
/
/
/
18,9
0,0
0,2
0,8
Δείγμα 1
Δείγμα 2
Δείγμα 3
Δείγμα 4
Δείγμα 5
Δείγμα 6
Δείγμα 7
/
/
/
/
/
/
1,5
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
7,1
0,0
0,5
1,6
Επιπλέον, καμία από τις επαναληπτικές αναλύσεις δεν επέδειξε ψευδώς θετικές ή ψευδώς αρνητικές τιμές :
-
Δείγματα
Δείγματα
Δείγματα
Δείγματα
με
με
με
με
φυσιολογικό επίπεδο Hb A2 : όλες οι τιμές είναι φυσιολογικές,
μειωμένο επίπεδο Hb A2 : όλες οι τιμές είναι μειωμένες,
αυξημένο επίπεδο Hb A2 : όλες οι τιμές είναι αυξημένες,
παραλλαγές της αιμοσφαιρίνης : ανιχνεύθηκαν όλες οι παραλλαγές της αιμοσφαιρίνης.
Γραμμικότητα
Η γραμμικότητα της διαδικασίας MINICAP HEMOGLOBIN(E) σε όργανο MINICAP FLEX-PIERCING αξιολογήθηκε σε μια μελέτη βάσει της
κατευθυντήριας οδηγίας EP6-A «Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures : A statistical Approach» (Αξιολόγηση της
γραμμικότητας των διαδικασιών ποσοτικής μέτρησης : Μια στατιστική προσέγγιση) του CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute /
Ινστιτούτο κλινικών και εργαστηριακών προτύπων) των ΗΠΑ.
Τα αποτελέσματα για τα ποσοστά (%) των κλασμάτων αιμοσφαιρίνης αναλύθηκαν με τη χρήση των στατιστικών εργαλείων που συνιστώνται
από το CLSI.
Γραμμικότητα Hb A2
Ένα δείγμα αίματος εμπλουτισμένο με Hb A2 (που περιείχε 13,4 g/dL ολικής αιμοσφαιρίνης με 12,2 % Hb A2) αναμίχθηκε με ένα δείγμα αίματος
με έλλειψη Hb A2 (που περιείχε 12,8 g/dL ολικής αιμοσφαιρίνης με 0,0 % Hb A2) σε διαφορετικές αναλογίες και τα διαλύματα υποβλήθηκαν σε
ηλεκτροφόρηση με τη διαδικασία MINICAP HEMOGLOBIN(E) στο όργανο MINICAP FLEX-PIERCING.
Η διαδικασία MINICAP HEMOGLOBIN(E) που εκτελέστηκε με το όργανο MINICAP FLEX-PIERCING κατέδειξε καλή γραμμικότητα για τα Hb A
και Hb A2 εντός ολόκληρου του εύρους που μελετήθηκε με μέγιστη τιμή περίπου 1,6 g/dL για το Hb A2 (μεταξύ 0,0 και 12,2 % του Hb A2).
Επιπλέον, ένα δείγμα αίματος (που περιείχε 17,9 g/dL ολικής αιμοσφαιρίνης με 97,6 % Hb A και 2,4 % Hb A2) συγκεντρώθηκε και αραιώθηκε
διαδοχικά σε διάλυμα αιμόλυσης MINICAP HEMOGLOBIN(E) και υποβλήθηκε σε ηλεκτροφόρηση με τη διαδικασία MINICAP HEMOGLOBIN(E)
σε όργανο MINICAP FLEX-PIERCING.
Οι δοκιμές καθορίστηκαν ως γραμμικές εντός ολόκληρης της περιοχής τιμών που μελετήθηκε από 1,79 έως 45,90 g/dL. Τα ποσοστά ολικής
αιμοσφαιρίνης και κλασμάτων Hb A και Hb A2 δεν επηρεάστηκαν από τη συγκέντρωση αιμοσφαιρίνης του δείγματος.
- 253 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
Γραμμικότητα Hb F
Ένα δείγμα αίματος ομφαλίου λώρου με Hb A2 (που περιείχε 15,8 g/dL ολικής αιμοσφαιρίνης με 82,2 % Hb F) αναμίχθηκε με ένα φυσιολογικό
δείγμα αίματος (που περιείχε 11.6 g/dL ολικής αιμοσφαιρίνης με 0,0 % Hb F) σε διαφορετικές αναλογίες και τα διαλύματα υποβλήθηκαν σε
ηλεκτροφόρηση με τη διαδικασία MINICAP HEMOGLOBIN(E) στο όργανο MINICAP FLEX-PIERCING.
Η διαδικασία MINICAP HEMOGLOBIN(E) που εκτελέστηκε με το όργανο MINICAP FLEX-PIERCING κατέδειξε καλή γραμμικότητα για τα Hb A
και Hb F εντός ολόκληρου του εύρους που μελετήθηκε με μέγιστη τιμή περίπου 13,0 g/dL για το Hb F (μεταξύ 0,0 και 82,2 % του Hb F).
Επιπλέον, ένα δείγμα αίματος ομφαλίου λώρου (που περιείχε 17,9 g/dL ολικής αιμοσφαιρίνης με 14,7 % Hb A και 85,3 % Hb F) συγκεντρώθηκε
και αραιώθηκε διαδοχικά σε διάλυμα αιμόλυσης MINICAP HEMOGLOBIN(E) και υποβλήθηκε σε ηλεκτροφόρηση με τη διαδικασία MINICAP
HEMOGLOBIN(E) σε όργανο MINICAP FLEX-PIERCING.
Οι δοκιμές καθορίστηκαν ως γραμμικές εντός ολόκληρης της περιοχής τιμών που μελετήθηκε από 1,79 έως 28,87 g/dL. Τα ποσοστά ολικής
αιμοσφαιρίνης και κλασμάτων Hb A και Hb F δεν επηρεάστηκαν από τη συγκέντρωση αιμοσφαιρίνης του δείγματος.
Γραμμικότητα Hb S
Ένα παθολογικό δείγμα αίματος με Hb S(που περιείχε 9,1 g/dL ολικής αιμοσφαιρίνης με 86,2 % Hb S και 0,0 % Hb A) αναμίχθηκε με ένα
φυσιολογικό δείγμα αίματος (που περιείχε 13,5 g/dL ολικής αιμοσφαιρίνης με 0,0 % Hb S και 97,4 % Hb A) σε διαφορετικές αναλογίες και τα
διαλύματα υποβλήθηκαν σε ηλεκτροφόρηση με τη διαδικασία MINICAP HEMOGLOBIN(E) στο όργανο MINICAP FLEX-PIERCING.
Η διαδικασία MINICAP HEMOGLOBIN(E) που εκτελέστηκε με το όργανο MINICAP FLEX-PIERCING κατέδειξε καλή γραμμικότητα για το Hb S
εντός ολόκληρου του εύρους που μελετήθηκε με μέγιστη τιμή περίπου 7,8 g/dL για το Hb S (μεταξύ 0,0 και 86,2 % του Hb S) και καλή
γραμμικότητα για το Hb A εντός ολόκληρου του εύρους που μελετήθηκε με μέγιστη τιμή περίπου 13,1 g/dL για το Hb A (μεταξύ 0,0 και 97,4 %
του Hb A).
Επιπλέον, ένα παθολογικό δείγμα αίματος (που περιείχε 9,2 g/dL ολικής αιμοσφαιρίνης με 79,1 % Hb S) συγκεντρώθηκε και αραιώθηκε
διαδοχικά σε διάλυμα αιμόλυσης MINICAP HEMOGLOBIN(E) και υποβλήθηκε σε ηλεκτροφόρηση με τη διαδικασία MINICAP HEMOGLOBIN(E)
σε όργανο MINICAP FLEX-PIERCING.
Οι δοκιμές καθορίστηκαν ως γραμμικές εντός ολόκληρης της περιοχής τιμών που μελετήθηκε από 0,92 έως 31,72 g/dL. Τα ποσοστά ολικής
αιμοσφαιρίνης και κλάσματος Hb S δεν επηρεάστηκαν από τη συγκέντρωση ολικής αιμοσφαιρίνης του δείγματος.
Ακρίβεια – Εσωτερικός συσχετισμός
Η εσωτερική συμφωνία της διαδικασίας MINICAP HEMOGLOBIN(E) που πραγματοποιήθηκε με το όργανο MINICAP FLEX-PIERCING
αξιολογήθηκε σε μια μελέτη βάσει της κατευθυντήριας γραμμής EP09-A2 "Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples ;
Approved Guideline – Second Edition (Interim Revision)" (Ανάλυση μεθόδου και εκτίμηση αποκλίσεων με χρήση δειγμάτων ασθενών.
Εγκεκριμένη κατευθυντήρια οδηγία – Δεύτερη έκδοση (προσωρινή αναθεώρηση)) του CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute /
Ινστιτούτο κλινικών και εργαστηριακών προτύπων) των ΗΠΑ.
Τα αποτελέσματα για τα ποσοστά (%) των κλασμάτων αιμοσφαιρίνης αναλύθηκαν με τη χρήση των στατιστικών εργαλείων που συνιστώνται
από το CLSI.
ΣΗΜΕΙΩΣΗ : Τα αποτελέσματα που παρουσιάζονται παρακάτω έχουν προκύψει από μία μελέτη εσωτερικής ακρίβειας που διεξήχθη σε
εγκαταστάσεις της SEBIA. Τα αναλυθέντα δείγματα αίματος παρασχέθηκαν από 17 νοσοκομειακά εργαστήρια σε Γαλλία, ΗΠΑ και Ασία.
Ο χειρισμός όλων των δειγμάτων έγινε ακριβώς με τον ίδιο τρόπο και με τις δύο τεχνικές, ενώ τηρήθηκαν οι ίδιες κατευθυντήριες οδηγίες σχετικά
με την ακεραιότητα των δειγμάτων.
Μετρήθηκαν τα επίπεδα των κλασμάτων αιμοσφαιρίνης σε 116 δείγματα αίματος, συμπεριλαμβανομένων 54 δειγμάτων με παραλλαγές
αιμοσφαιρίνης, όπως αιμοσφαιρίνες S, C, D και E. Και οι δύο τύποι δειγμάτων αναλύθηκαν με τη διαδικασία του MINICAP HEMOGLOBIN(E)
στο όργανο MINICAP FLEX-PIERCING και μια τεχνική τριχοειδούς ηλεκτροφόρησης του εμπορίου για ανάλυση αιμοσφαιρινών.
Οι μετρηθείσες τιμές των κλασμάτων αιμοσφαιρίνης και από τις δύο διαδικασίες αναλύθηκαν με στατιστική διαδικασία γραμμικής
παλινδρόμησης. Τα αποτελέσματα της ανάλυσης γραμμικής παλινδρόμησης για τα Hb A, Hb A2, Hb F, Hb S, Hb C και Hb E παρουσιάζονται
παρακάτω υπό μορφή πίνακα (y = διαδικασία MINICAP HEMOGLOBIN(E) με όργανο MINICAP FLEX-PIERCING):
Κλάσμα Hb
Hb A
Hb A2
Hb F
Hb S
Hb C
Hb E
Αριθμός
δειγμάτων
Συντελεστής
συσχετισμού
Σημείο τομής του
άξονα των y
Κλίση
115
0,997
- 0,030
0,980
1,000
- 0,486
110
43
27
6
6
1,000
1,000
1,000
0,991
1,175
- 0,013
- 0,204
- 0,408
0,990
1,000
0,996
0,979
0,981
Περιοχή τιμών % MINICAP
HEMOGLOBIN(E) με το όργανο
MINICAP FLEX-PIERCING
12,1 – 98,6
0,2 – 6,6
0,3 – 80,0
7,8 – 90,8
6,9 – 36,6
21,7 – 25,7
Η συγκεκριμένη μελέτη κατέδειξε άριστη συσχέτιση μεταξύ των δύο διαδικασιών ανάλυσης για τον ποσοτικό προσδιορισμό της αιμοσφαιρίνης
A2 σε δείγματα χωρίς καμία παραλλαγή αιμοσφαιρίνης, με ευαισθησία 100,0 % και ειδικότητα της διαδικασίας MINICAP HEMOGLOBIN(E)
92,5 % σε σύγκριση με τη διαδικασία αναφοράς, τα οποία υπολογίστηκαν με χρήση της συνιστώμενης μεθόδου (Wendling, 1986).
Επιπλέον, η συγκεκριμένη μελέτη κατέδειξε άριστη συσχέτιση μεταξύ των δύο διαδικασιών ανάλυσης για τον ποσοτικό προσδιορισμό των μη
φυσιολογικών αιμοσφαιρινών, με ευαισθησία 100,0 % και ειδικότητα της διαδικασίας MINICAP HEMOGLOBIN(E) 100,0 % σε σύγκριση με τη
διαδικασία αναφοράς, τα οποία υπολογίστηκαν με χρήση της συνιστώμενης μεθόδου (Wendling, 1986). Όλες οι μη φυσιολογικές αιμοσφαιρίνες
(S, C, D, E και άλλες παραλλαγές) ή τα μη φυσιολογικά επίπεδα φυσιολογικών αιμοσφαιρινών που ανιχνεύθηκαν με τη διαδικασία MINICAP
HEMOGLOBIN(E) στο όργανο MINICAP FLEX-PIERCING συμφωνούσαν με την τεχνική τριχοειδούς ηλεκτροφόρησης σύγκρισης. Δεν
παρατηρήθηκε καμία περίπτωση ψευδώς θετικών αποτελεσμάτων, δηλ. ανίχνευση μη φυσιολογικής ζώνης ή μη φυσιολογικού επιπέδου μιας
φυσιολογικής ζώνης όπου δεν υπήρχε τέτοια ανωμαλία.
- 254 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
37.
BIBLIOGRAHIE / BIBLIOGRAPHY
J. Bardakdjian-Michau, J.-L. Dhondt, R. Ducrocq, F. Galactéros, A. Guyard, F.-X. Huchet, A. Lahary, D. Lena-Russo, P. Maboudou, M.-L. North,
C. Prehu, A.-M. Soummer, M. Verschelde, H. Wajcman (2003) Bonnes pratiques de l’étude de l’hémoglobine. Ann. Biol. Clin., 61, 401-409.
V.F. Fairbanks, ed. (1980) Hemoglobinopathies and thalassemia: Laboratory methods and case studies. Brian C. Decker, New York.
F. Galacteros (1986) Thalassémie, drépanocytose et autres hémoglobinopathies. Techniques et Biologie, 3, 174-178.
JM Hempe, JN Granger and RD Craver (1997) Capillary isoelectric focusing of hemoglobin variants. Electrophoresis, 18, 1785-1795.
T.H.J. Huisman and J.H.P. Jonxis (1977) The hemoglobinopathies: techniques of identification. Marcel Dekker, New York.
Jellum E et al. Diagnostic applications of chromatography and capillary electrophoresis. J. Chromatogr. B, 689, 155-164 (1997).
Joutovsky A, Hadzi-Nesic J and Nardi MA (2004) HPLC retention time as a diagnostic tool for hemoglobin variants and hemoglobinopathies : a
study of 60 000 samples in a clinical diagnostic laboratories. Clin. Chem., 50, 10, 1736-1747.
J.S. Krauss, P.A. Drew, M.H. Jonah, M. Trinh, S. Shell, L. Black and C.R. Baisden (1986) Densitometry and microchromatography compared for
determination of the hemoglobin C and A2 proportions in hemoglobin C and hemoglobin SC disease and in hemoglobin C trait. Clin. Chem. 32,
5, 860-863.
Landers JP. Clinical Capillary Electrophoresis. Clin. Chem., 41, 495-509 (1995).
C. Livingstone (1986) The hemoglobinopathies. Edit. London.M. Maier-Redelsberger, R. Girot (1989) Diagnostic biologique des maladies de l’hémoglobine. Feuillets de biologie, 170.
Oda RP et al. Capillary electrophoresis as a clinical tool for the analysis of protein in serum and other body fluids. Electrophoresis, 18, 17151723 (1997).
R.G. Schneider (1978) Methods for detection of hemoglobin variants and hemoglobinopathies in the routine clinical laboratory. CRC Crit. Rev.
Clin. Lab. Sci. 9, 243-271.
L. Vovan, D. Lara-Russo, A. Orsini (1985) Diagnostic biologique des hémoglobinoses. Ann. Pédiat. 32, 9, 780-789.
http://globin.cse.psu.edu/hbvar/menu.html : Hbvar : A Database of Human Hemoglobin Variants and Thalassemias.
http://www.isns-neoscreening.org/agenda.htm.
F Boemer, O Ketelslegers, JM Minon, V Bours, R Schoops (2008) Newborn screening for sickle cell disease using tandem mass spectrometry.
Clin. Chem., 54, 12, 2036-2041.
Lubin BH, Witkowska HE, Kleman K (1991) Laboratory diagnosis of hemoglobinopathies. Clin. Biochem., 24, 363-374.
B Gulbis, B Fontaine, F Vertongen, F Cotton (2003) The place of capillary electrophoresis techniques in screening for haemoglobinopathies. Ann.
Clin. Biochem., 40, 659-662.
Aguilar-Martinez P et al (2010) Arbres décisionnels pour le diagnostic et la caractérisation moléculaire des hémoglobinopathies. Ann. Biol. Clin.,
68 (4) : 455-464.
Wendling A. Procédures de diagnostic ou de dépistage : Justification et validité d’un test de diagnostic ou de dépistage-sensibilité-spécificité.
Impact-Internat, 1986 ; Sept : 93-97.
L. Guis, A. Chaumier, V. Le Gall, S. Havrez (Février 2013) Intégration du Capillarys 2 Flex Piercing (Sebia) dans un laboratoire de biologie
médicale spécialisée. Revue Francophone des Laboratoires, 449, 47 – 56.
I. Agouti, F. Merono, N. Bonello-Palot, C. Badens (2013) Analytical evaluation of the Capillarys 2 Flex piercing for routine haemoglobinopathies
diagnosis. Int. Jnl. Lab. Hem. 35, 217 – 221.
S. Altinier, M. Varagnolo, M. Zaninotto, M. Plebani. (2012) Identification and quantification of hemoglobins in whole blood: the analytical and
organizational aspects of Capillarys 2 Flex Piercing compared with agarose electrophoresis and HPLC methods. Clin. Chem. Lab. Med. DOI
10.1515/cclm-2012-0061.
M. Angastiniotis, J.L. Vives Corrons, E.S. Soteriades, A. Eleftheriou (2013) The Impact of Migrations on the Health Services for Rare Diseases
in Europe: The Example of Haemoglobin Disorders. The Scientific World Journal Volume 2013, Article ID 727905, 10 pages.
Nicole Borbely, Lorraine Phelan, Richard Szydlo, et al. (2012) Capillary zone electrophoresis for haemoglobinopathy diagnosis. J. Clin. Pathol.,
doi: 10.1136/jclinpath-2012-200946.
F. Cotton et al. (2009) Evaluation of an automated capillary electrophoresis system in the screening for hemoglobinopathies. Clin. Lab., 55 : 217 –
221.
D. Greene, A.L. Pyle, J.S. Chang, C. Hoke, T. Lorey (2012) Comparison of Sebia Capillarys Flex capillary electrophoresis with the BioRad Variant
II high pressure liquid chromatography in the evaluation of hemoglobinopathies. Clin. Chim. Acta 413, 1232 – 1238.
T. Higgins, M. Mack, A. Khajuria (2009) Comparison of two methods for the quantification and identification of hemoglobin variants. Clin.
Biochem., 42, 701 – 705.
D.F. Keren et al (2008) Comparison of Sebia Capillarys capillary electrophoresis with the Primus High-Pressure Liquid Chromatography in the
evaluation of hemoglobinopathies. Am. J. Clin. Pathol., 130 : 824 – 831.
D.F. Keren et al (2012) Expression of hemoglobin variant migration by capillary electrophoresis relative to Hemoglobin A2 improves precision.
Am. J. Clin. Pathol.,137 : 660 – 664.
Can Liao, Jian-Ying Zhou, Xing-Mei Xie, Jian Li, Ru Li, and Dong-Zhi Li (2010). Detection of Hb constant spring by a capillary electrophoresis
method. Hemoglobin, 34 (2) : 175 – 178.
D.M. Mais et al (2009) The range of hemoglobin A2 in hemoglobin E heterozygotes as determined by capillary electrophoresis. Am. J. Clin.
Pathol.,132 : 34 – 38.
T. Munkongdee et al (2010) Quantitative analysis of Hb Bart’s in cord blood by capillary electrophoresis system. Ann. Hematol. DOI
10.1007/s00277-010-1137-4.
R. Paleari, B. Gulbis, F. Cotton, A. Mosca (2012) Interlaboratory comparison of current high-performance methods for HbA2. Int. Jnl. Lab. Hem.
34, 362 – 368.
S. Sangkitporn et al (2011) Multicenter validation of fully automated capillary electrophoresis method for diagnosis of thalassemias and
hemoglobinopathies in Thailand. Southeast Asian J. Trop. Med. Public Health 42 (5), 1224 – 1232.
F. Wolff, F. Cotton, B. Gulbis (2012) Screening for haemoglobinopathies on cord blood : laboratory and clinical experience. J. Med. Screen., 19,
3, 116 - 122.
- 680 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
TABLEAU / TABLE
VARIANTS POTENTIELS PRÉSENTS DANS CHAQUE ZONE - POTENTIAL VARIANTS LOCATED IN EACH ZONE
Zone
Z1
Z(C)
Z(A2)
Z(E)
Hémoglobines / Hemoglobins (Hb)
Hb Santa Ana (pic mineur), Hb Mizuho (pic mineur), Hb delta A'2, Hb S-Oman, Hb T-Cambodia, Hb Poissy (pic mineur), variant de
Hb A2 "Savaria", variant de Hb A2 "Chad", variant de Hb A2 "Arya", variant de Hb A2 "Hasharon", variant de Hb A2 "Fort de France",
variant de Hb A2 "Ottawa", variant de Hb A2 "Shimonoseki", variant de Hb A2 "Russ" (alpha 1), variant de Hb A2 "Matsue-Oki", variant
de Hb A2 "Reims", variant de Hb A2 "Mizushi", variant de Hb A2 "Stanleyville-II", variant de Hb A2 "O-Indonesia", variant de Hb A2
"San Antonio", variant de Hb A2 "G-Audhali", variant de Hb A2 "Handsworth", variant de Hb A2 "G-Philadelphia", variant de Hb A2
"Memphis", variant de Hb A2 "Q-Iran", variant de Hb A2 "G-Waimanalo", variant de Hb A2 "Russ" (alpha 2), variant de Hb A2 "Ube-4",
variant de Hb A2 "Q-India", variant de Hb A2 "Watts", variant de Hb A2 "Spanish Town", variant de Hb A2 "Montgomery", variant de
Hb A2 "G-Norfolk" (alpha 1), variant de Hb A2 "Inkster", variant de Hb A2 "G-Pest", variant de Hb A2 "Winnipeg", variant de Hb A2
"Queens", variant de Hb A2 "Etobicoke", variant de Hb A2 "Chapel Hill", variant de Hb A2 "Park Ridge", variant de Hb A2 "Q-Thailand",
variant de Hb A2 "Delfzicht"
Hb Santa Ana (minor peak), Hb Mizuho (minor peak), Hb delta A'2, Hb S-Oman, Hb T-Cambodia, Hb Poissy (minor peak), "Savaria"
Hb A2 variant, "Chad" Hb A2 variant, "Arya" Hb A2 variant, "Hasharon" Hb A2 variant, "Fort de France" Hb A2 variant, "Ottawa" Hb A2
variant, "Shimonoseki" Hb A2 variant, "Russ" Hb A2 variant (alpha 1), "Matsue-Oki" Hb A2 variant, "Reims" Hb A2 variant, "Mizushi"
Hb A2 variant, "Stanleyville-II" Hb A2 variant, "O-Indonesia" Hb A2 variant, "San Antonio" Hb A2 variant, "G-Audhali" Hb A2 variant,
"Handsworth" Hb A2 variant, "G-Philadelphia" Hb A2 variant, "Memphis" Hb A2 variant, "Q-Iran" Hb A2 variant, "G-Waimanalo" Hb A2
variant, "Russ" Hb A2 variant (alpha 2), "Ube-4" Hb A2 variant, "Q-India" Hb A2 variant, "Watts" Hb A2 variant, "Spanish Town" Hb A2
variant, "Montgomery" Hb A2 variant, "G-Norfolk" Hb A2 variant (alpha 1), "Inkster" Hb A2 variant, "G-Pest" Hb A2 variant, "Winnipeg"
Hb A2 variant, "Queens" Hb A2 variant, "Etobicoke" Hb A2 variant, "Chapel Hill" Hb A2 variant, "Park Ridge" Hb A2 variant,
"Q-Thailand" Hb A2 variant, "Delfzicht" Hb A2 variant
Hb C-Ziguinchor, Hb F-Hull, Hb F-Texas-I, Hb Constant Spring, Hb C, Hb C-Harlem (C-Georgetown), variant de Hb A2 "Les Lilas",
variant de Hb A2 "Boumerdes", variant de Hb A2 "Dunn", variant de Hb A2 "Bassett", variant de Hb A2 "Tarrant", variant de Hb A2
"Sassari", variant de Hb A2 "St. Luke's", variant de Hb A2 "Verdun", variant de Hb A2 "Manitoba-I", variant de Hb A2 "Setif", variant de
Hb A2 "Sunshine Seth", variant de Hb A2 "Titusville", variant de Hb A2 "Swan River", variant de Hb A2 "Manitoba-II", variant de Hb A2
"Val de Marne"
Hb C-Ziguinchor, Hb F-Hull, Hb F-Texas-I, Hb Constant Spring, Hb C, Hb C-Harlem (C-Georgetown), "Les Lilas" Hb A2 variant,
"Boumerdes" Hb A2 variant, "Dunn" Hb A2 variant, "Bassett" Hb A2 variant, "Tarrant" Hb A2 variant, "Sassari" Hb A2 variant, "St.
Luke's" Hb A2 variant, "Verdun" Hb A2 variant, "Manitoba-I" Hb A2 variant, "Setif" Hb A2 variant, "Sunshine Seth" Hb A2 variant,
"Titusville" Hb A2 variant, "Swan River" Hb A2 variant, "Manitoba-II" Hb A2 variant, "Val de Marne" Hb A2 variant
Hb A2, Hb Chad (E-Keelung), Hb Hong Kong (cas anti-Lepore), Hb O-Tibesti, Hb O-Arab, Hb E-Saskatoon, variant de Hb A2
"Charolles", variant de Hb A2 "Roubaix", variant de Hb A2 "Dallas" *, variant de Hb A2 "Aztec" *, variant de Hb A2 "Boghé" *, variant
de Hb A2 "Bonn" *, variant de Hb A2 "Brugg" *, variant de Hb A2 "Buffalo" *, variant de Hb A2 "Chicago" *, variant de Hb A2 "Columbia
Missouri" *, variant de Hb A2 "Conakry" *, variant de Hb A2 "Fontainebleau" *, variant de Hb A2 "Frankfurt" *, variant de Hb A2
"Godavari" *, variant de Hb A2 "Gouda" *, variant de Hb A2 "Groene Hart" *, variant de Hb A2 "Hekinan" *, variant de Hb A2 "Kosovo"*,
variant de Hb A2 "Le Lamentin" *, variant de Hb A2 "Le Lamentin 2" *, variant de Hb A2 "Lisbon" *, variant de Hb A2 "Lyon-Bron" *,
variant de Hb A2 "M-Boston" *, variant de Hb A2 "Milledgeville" *, variant de Hb A2 "Mosella" *, variant de Hb A2 "Noko" *, variant de
Hb A2 "Owari" *, variant de Hb A2 "Ozieri" *, variant de Hb A2 "Riccarton" *, variant de Hb A2 "Rouen" *, variant de Hb A2 "Saclay" *,
variant de Hb A2 "Taybe" *, variant de Hb A2 "Toulon" *, variant de Hb A2 "Twin Peaks" *, variant de Hb A2 "Verona" *, variant de
Hb A2 "Westmead" *, variant de Hb A2 "Zoetermeer" *, variant de Hb A2 "Melusine" *, variant de Hb A2 "Jura", variant de Hb A2
"Nouakchott"
Hb A2, Hb Chad (E-Keelung), Hb Hong Kong (anti-Lepore case), Hb O-Tibesti, Hb O-Arab, Hb E-Saskatoon, "Charolles" Hb A2
variant, "Roubaix" Hb A2 variant, "Dallas" Hb A2 variant *, "Aztec" Hb A2 variant *, "Boghé" Hb A2 variant *, "Bonn" Hb A2 variant *,
"Brugg" Hb A2 variant *, "Buffalo" Hb A2 variant *, "Chicago" Hb A2 variant *, "Columbia Missouri" Hb A2 variant *, "Conakry" Hb A2
variant *, "Fontainebleau" Hb A2 variant *, "Frankfurt" Hb A2 variant *, "Godavari" Hb A2 variant *, "Gouda" Hb A2 variant *, "Groene
Hart" Hb A2 variant *, "Hekinan" Hb A2 variant *, "Kosovo" Hb A2 variant *, "Le Lamentin" Hb A2 variant *, "Le Lamentin 2" Hb A2
variant *, "Lisbon" Hb A2 variant *, "Lyon-Bron" Hb A2 variant *, "M-Boston" Hb A2 variant *, "Milledgeville" Hb A2 variant *, "Mosella"
Hb A2 variant *, "Noko" Hb A2 variant *, "Owari" Hb A2 variant *, "Ozieri" Hb A2 variant *, "Riccarton" Hb A2 variant *, "Rouen" Hb A2
variant *, "Saclay" Hb A2 variant *, "Taybe" Hb A2 variant *, "Toulon" Hb A2 variant *, "Twin Peaks" Hb A2 variant *, "Verona" Hb A2
variant *, "Westmead" Hb A2 variant *, "Zoetermeer" Hb A2 variant *, "Melusine" Hb A2 variant *, "Jura" Hb A2 variant, "Nouakchott"
Hb A2 variant
Hb Seal Rock, Hb Köln (Ube-1), Hb Buenos Aires (pic mineur), Hb E, Hb M-Saskatoon (pic mineur), Hb G-Siriraj, Hb A2-Babinga,
Hb F-Moyen Orient, Hb Agenogi, Hb Sabine, Hb Santa Ana, Hb Savaria, Hb Djelfa (pic 3), variant de Hb A2 "M-Iwate", variant de
Hb A2 "Saint Claude", variant de Hb A2 "Jackson" (alpha 2), variant de Hb A2 "Wayne" (pic 1), Hb C dégradée
Hb Seal Rock, Hb Köln (Ube-1), Hb Buenos Aires (minor peak), Hb E, Hb M-Saskatoon (minor peak), Hb G-Siriraj, Hb A2-Babinga,
Hb F-Moyen Orient, Hb Agenogi, Hb Sabine, Hb Santa Ana, Hb Savaria, Hb Djelfa (peak 3), "M-Iwate" Hb A2 variant, "Saint Claude"
Hb A2 variant, "Jackson" Hb A2 variant (alpha 2), "Wayne" Hb A2 variant (peak 1), denatured Hb C
- 681 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
TABLEAU / TABLE
VARIANTS POTENTIELS PRÉSENTS DANS CHAQUE ZONE - POTENTIAL VARIANTS LOCATED IN EACH ZONE
Zone
Z(S)
Z(D)
Z(F)
Z8
Hémoglobines / Hemoglobins (Hb)
Hb Arya, Hb Kenya (HPFH-7), Hb Hasharon (Sinai), Hb Dhofar (Yukuhashi), Hb Shimonoseki (Hikoshima), Hb O-Indonesia
(Buginese-X), Hb Machida, Hb Vexin, Hb Corbeil, Hb Ottawa (Siam), Hb Fort de France, Hb S, Hb Montgomery, Hb G-Copenhagen,
Hb S-Antilles, Hb Handsworth, Hb Poissy, Hb Hamadan, Hb Belfast, Hb Russ (alpha 1), Hb Russ (alpha 2), Hb Evanston, Hb
Stanleyville-II, Hb Cocody, Hb Reims, variant de Hb A2 "Tokoname", variant de Hb A2 "Pisa", variant de Hb A2 "Lombard", variant de
Hb A2 "Tatras", variant de Hb A2 "J-Cape Town" (alpha 2), variant de Hb A2 "Thionville", variant de Hb A2 "Cemenelum", variant de
Hb A2 "J-Cape Town" (alpha 1), variant de Hb A2 "Nikaia", variant de Hb A2 "Hopkins-II" (alpha 1), variant de Hb A2 "Jackson"
(alpha 1), variant de Hb A2 "Hopkins-II" (alpha 2), variant de Hb A2 "Singapore", Hb O-Arab dégradée
Hb Arya, Hb Kenya (HPFH-7), Hb Hasharon (Sinai), Hb Dhofar (Yukuhashi), Hb Shimonoseki (Hikoshima), Hb O-Indonesia
(Buginese-X), Hb Machida, Hb Vexin, Hb Corbeil, Hb Ottawa (Siam), Hb Fort de France, Hb S, Hb Montgomery, Hb G-Copenhagen,
Hb S-Antilles, Hb Handsworth, Hb Poissy, Hb Hamadan, Hb Belfast, Hb Russ (alpha 1), Hb Russ (alpha 2), Hb Evanston, Hb
Stanleyville-II, Hb Cocody, Hb Reims, "Tokoname" Hb A2 variant, "Pisa" Hb A2 variant, "Lombard" Hb A2 variant, "Tatras" Hb A2
variant, "J-Cape Town" Hb A2 variant (alpha 2), "Thionville" Hb A2 variant, "Cemenelum" Hb A2 variant, "J-Cape Town" Hb A2 variant
(alpha 1), "Nikaia" Hb A2 variant, "Hopkins-II" Hb A2 variant (alpha 1), "Jackson" Hb A2 variant (alpha 1), "Hopkins-II" Hb A2 variant
(alpha 2), "Singapore" Hb A2 variant, denatured Hb O-Arab
Hb Memphis, Hb G-Audhali, Hb G-Szuhu (Gifu), Hb Leiden, Hb Beograd (D-Camperdown), Hb Muravera, Hb D-Bushman, Hb MatsueOki, Hb D-Punjab (D-Los Angeles), Hb Osu Christiansborg, Hb Watts, Hb A2-Coburg, Hb G-Waimanalo (Aida), Hb Muskegon,
Hb D-Ibadan, Hb Buenos Aires (pic mineur), Hb Q-India, Hb Lepore-BW, Hb Q-Iran, Hb Summer Hill, Hb G-Philadelphia, Hb D-Ouled
Rabah, Hb Yaizu, Hb Kenitra, Hb San Antonio, Hb Ferrara, Hb Lepore-Hollandia, Hb Quin-Hai, Hb Fort Worth, Hb Mizushi, Hb LeporeBaltimore, Hb Djelfa (pic 2), Hb Spanish Town, Hb Korle-Bu (G-Accra), Hb Köln (Ube-1), Hb G-Norfolk (alpha 1), Hb Maputo,
Hb Etobicoke, Hb D-Iran, Hb G-Taipei, Hb Caribbean, Hb Ube-4, Hb St. Luke's, Hb G-Coushatta (G-Saskatoon), Hb Winnipeg,
Hb Inkster, Hb Zürich, Hb G-Pest, Hb P-Galveston, Hb Queens (Ogi), Hb Aubenas, Hb Setif, Hb P-Nilotic, Hb Sunshine Seth,
Hb Titusville, variant de Hb A2 "J-Sardegna", variant de Hb A2 "Suresnes", variant de Hb A2 "J-Meerut" (alpha 2), variant de Hb A2
"J-Broussais" (alpha 2), variant de Hb A2 "J-Rajappen", variant de Hb A2 "J-Anatolia", variant de Hb A2 "J-Oxford", variant de Hb A2
"J-Meerut" (alpha 1), variant de Hb A2 "Ube-2", variant de Hb A2 "J-Broussais" (alpha 1), variant de Hb A2 "J-Abidjan", variant de
Hb A2 "J-Toronto", variant de Hb A2 "Mexico" (alpha 1), variant de Hb A2 "Mexico" (alpha 2), variant de Hb A2 "Thailand", variant de
Hb A2 "J-Tongariki", variant de Hb A2 "Neuilly-sur-Marne", variant de Hb A2 "J-Wenchang-Wuming", variant de Hb A2 "J-Paris-I"
(alpha 2), variant de Hb A2 "J-Habana", variant de Hb A2 "J-Paris-I" (alpha 1), variant de Hb A2 "Wayne" (pic 2), Hb E dégradée
Hb Memphis, Hb G-Audhali, Hb G-Szuhu (Gifu), Hb Leiden, Hb Beograd (D-Camperdown), Hb Muravera, Hb D-Bushman, Hb MatsueOki, Hb D-Punjab (D-Los Angeles), Hb Osu Christiansborg, Hb Watts, Hb A2-Coburg, Hb G-Waimanalo (Aida), Hb Muskegon,
Hb D-Ibadan, Hb Buenos Aires (minor peak), Hb Q-India, Hb Lepore-BW, Hb Q-Iran, Hb Summer Hill, Hb G-Philadelphia, Hb D-Ouled
Rabah, Hb Yaizu, Hb Kenitra, Hb San Antonio, Hb Ferrara, Hb Lepore-Hollandia, Hb Quin-Hai, Hb Fort Worth, Hb Mizushi, Hb LeporeBaltimore, Hb Djelfa (peak 2), Hb Spanish Town, Hb Korle-Bu (G-Accra), Hb Köln (Ube-1), Hb G-Norfolk (alpha 1), Hb Maputo,
Hb Etobicoke, Hb D-Iran, Hb G-Taipei, Hb Caribbean, Hb Ube-4, Hb St. Luke's, Hb G-Coushatta (G-Saskatoon), Hb Winnipeg,
Hb Inkster, Hb Zürich, Hb G-Pest, Hb P-Galveston, Hb Queens (Ogi), Hb Aubenas, Hb Setif, Hb P-Nilotic, Hb Sunshine Seth,
Hb Titusville, "J-Sardegna" Hb A2 variant, "Suresnes" Hb A2 variant, "J-Meerut" Hb A2 variant (alpha 2), "J-Broussais" Hb A2 variant
(alpha 2), "J-Rajappen" Hb A2 variant, "J-Anatolia" Hb A2 variant, "J-Oxford" Hb A2 variant, "J-Meerut" Hb A2 variant (alpha 1),
"Ube-2" Hb A2 variant, "J-Broussais" Hb A2 variant (alpha 1), "J-Abidjan" Hb A2 variant, "J-Toronto" Hb A2 variant, "Mexico" Hb A2
variant (alpha 1), "Mexico" Hb A2 variant (alpha 2), "Thailand" Hb A2 variant, "J-Tongariki" Hb A2 variant, "Neuilly-sur-Marne" Hb A2
variant, "J-Wenchang-Wuming" Hb A2 variant, "J-Paris-I" Hb A2 variant (alpha 2), "J-Habana" Hb A2 variant, "J-Paris-I" Hb A2 variant
(alpha 1), "Wayne" Hb A2 variant (peak 2), denatured Hb E
Hb F, Hb Willamette, Hb Hoshida, Hb Languidic, Hb Sunnybrook, Hb Park Ridge, Hb Delfzicht, Hb Alabama, Hb Chapel Hill,
Hb Bunbury, Hb Tak, Hb Q-Thailand (G-Taichung), Hb Sabine, Hb Bassett, Hb Les Lilas, Hb Rampa, Hb G-Georgia, Hb Barcelona,
Hb G-San José, Hb Denmark Hill, Hb Pôrto Alegre, Hb Geldrop Santa Anna, Hb Ta-Li, Hb Richmond, Hb Abruzzo, Hb Verdun,
Hb Boumerdes, Hb Swan River, Hb Burke, Hb Tarrant, Hb Dunn, Hb Manitoba-I, Hb Manitoba-II, Hb Sassari, Hb Hazebrouck, Hb Port
Phillip, variant de Hb A2 "J-Rovigo", Hb S dégradée, Hb D-Punjab dégradée
Hb F, Hb Willamette, Hb Hoshida, Hb Languidic, Hb Sunnybrook, Hb Park Ridge, Hb Delfzicht, Hb Alabama, Hb Chapel Hill,
Hb Bunbury, Hb Tak, Hb Q-Thailand (G-Taichung), Hb Sabine, Hb Bassett, Hb Les Lilas, Hb Rampa, Hb G-Georgia, Hb Barcelona,
Hb G-San José, Hb Denmark Hill, Hb Pôrto Alegre, Hb Geldrop Santa Anna, Hb Ta-Li, Hb Richmond, Hb Abruzzo, Hb Verdun,
Hb Boumerdes, Hb Swan River, Hb Burke, Hb Tarrant, Hb Dunn, Hb Manitoba-I, Hb Manitoba-II, Hb Sassari, Hb Hazebrouck, Hb Port
Phillip, "J-Rovigo" Hb A2 variant, denatured Hb S, denatured Hb D-Punjab
Hb F acétylée, Hb Lansing, Hb Hinsdale, Hb Roanne, Hb Yakima, Hb Ypsilanti (Ypsi - pic 1), Hb Saint Mandé, Hb Alberta,
Hb Bruxelles, Hb Val de Marne (Footscray), Hb Kempsey, Hb Shelby (Leslie), Hb Atlanta, Hb Chemilly, Hb S-Clichy, Hb Sarrebourg,
Hb Charolles, Hb Ypsilanti (Ypsi - pic 2), Hb Rainier, Hb Athens-GA (Waco), Hb Debrousse, Hb Köln (Ube-1), Hb Aubagne
Acetylated Hb F, Hb Lansing, Hb Hinsdale, Hb Roanne, Hb Yakima, Hb Ypsilanti (Ypsi - peak 1), Hb Saint Mandé, Hb Alberta,
Hb Bruxelles, Hb Val de Marne (Footscray), Hb Kempsey, Hb Shelby (Leslie), Hb Atlanta, Hb Chemilly, Hb S-Clichy, Hb Sarrebourg,
Hb Charolles, Hb Ypsilanti (Ypsi - peak 2), Hb Rainier, Hb Athens-GA (Waco), Hb Debrousse, Hb Köln (Ube-1), Hb Aubagne
- 682 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
TABLEAU / TABLE
VARIANTS POTENTIELS PRÉSENTS DANS CHAQUE ZONE - POTENTIAL VARIANTS LOCATED IN EACH ZONE
Zone
Z(A)
Z10
Z11
Z12
Hémoglobines / Hemoglobins (Hb)
Hb A, Hb Presbyterian, Hb Roubaix (Poland), Hb Silver Springs *, Hb El Escorial *, Hb Dallas *, Hb Olympia *, Hb Phnom Penh *,
Hb La Coruna *, Hb Uzes *, Hb Bougardirey-Mali *, Hb Saint Nazaire *, Hb Alzette *, Hb Antibes-Juan-Les-Pins *, Hb Arta (pic
majeur) *, Hb Austin *, Hb Aztec *, Hb Beirut *, Hb Bethesda *, Hb Boghé *, Hb Bonn *, Hb Brem-sur-Mer *, Hb Brest *, Hb Brigham *,
Hb Brisbane (Great Lakes) *, Hb Brugg *, Hb Buenos Aires (Bryn Mawr - pic majeur) *, Hb Buffalo (Reeuwijk) *, Hb Bushwick *,
Hb Chicago *, Hb City of Hope *, Hb Coimbra (Ingelheim) *, Hb Columbia Missouri *, Hb Conakry *, Hb Djelfa (pic 1) *,
Hb Fontainebleau *, Hb Frankfurt *, Hb Fukuoka *, Hb Godavari *, Hb Gorwihl (Hinchingbrooke) *, Hb Gouda *, Hb Grange Blanche *,
Hb Groene Hart (Bernalda) *, Hb Hamilton *, Hb Heathrow *, Hb Hekinan *, Hb Iraq-Halabja *, Hb Kosovo *, Hb La Desirade *, Hb Le
Lamentin *, Hb Le Lamentin 2 *, Hb Linköping (Meilahti) *, Hb Lisbon *, Hb Little Rock *, Hb Lulu Island *, Hb Lyon-Bron *,
Hb M-Boston (M-Osaka) *, Hb M-Saskatoon (pic majeur) *, Hb McKees Rocks *, Hb Malmö *, Hb Marseille (Long Island) *,
Hb Milledgeville *, Hb Minneapolis Laos *, Hb Mizuho *, Hb Mosella *, Hb Noko *, Hb Okayama *, Hb Owari *, Hb Ozieri *, Hb Perth
(Abraham Lincoln) *, Hb Potomac *, Hb Puttelange *, Hb Raleigh *, Hb Ravenscourt Park *, Hb Regina *, Hb Rhode Island
(Southwark) *, Hb Riccarton *, Hb Rouen (Ethiopia) *, Hb Saclay *, Hb St Joseph's *, Hb San Diego *, Hb Santa Juana (Serres) *,
Hb Savannah *, Hb Sydney *, Hb Taybe *, Hb Templeuve *, Hb Toulon *, Hb Twin Peaks *, Hb Ty Gard *, Hb Valletta *, Hb Verona *,
Hb Villejuif *, Hb Villeparisis *, Hb Volga (Drenthe) *, Hb Westmead *, Hb Wood *, Hb Yaounde (Mataro) *, Hb Zoetermeer *,
Hb M-Milwaukee-I *, Hb Melusine *, Hb Pitie-Salpetriere *, Hb Syracuse *, Hb Hounslow, Hb Fort Dodge, Hb Old Dominion (OD/BuT),
Hb Camperdown, Hb Duarte, Hb Jura (Bamako)
Hb A, Hb Presbyterian, Hb Roubaix (Poland), Hb Silver Springs *, Hb El Escorial *, Hb Dallas *, Hb Olympia *, Hb Phnom Penh *,
Hb La Coruna *, Hb Uzes *, Hb Bougardirey-Mali *, Hb Saint Nazaire *, Hb Alzette *, Hb Antibes-Juan-Les-Pins *, Hb Arta (main
peak) *, Hb Austin *, Hb Aztec *, Hb Beirut *, Hb Bethesda *, Hb Boghé *, Hb Bonn *, Hb Brem-sur-Mer *, Hb Brest *, Hb Brigham *,
Hb Brisbane (Great Lakes) *, Hb Brugg *, Hb Buenos Aires (Bryn Mawr, major peak) *, Hb Buffalo (Reeuwijk) *, Hb Bushwick *,
Hb Chicago *, Hb City of Hope *, Hb Coimbra (Ingelheim) *, Hb Columbia Missouri *, Hb Conakry *, Hb Djelfa (peak 1) *,
Hb Fontainebleau *, Hb Frankfurt *, Hb Fukuoka *, Hb Godavari *, Hb Gorwihl (Hinchingbrooke) *, Hb Gouda *, Hb Grange Blanche *,
Hb Groene Hart (Bernalda) *, Hb Hamilton *, Hb Heathrow *, Hb Hekinan *, Hb Iraq-Halabja *, Hb Kosovo *, Hb La Desirade *, Hb Le
Lamentin *, Hb Le Lamentin 2 *, Hb Linköping (Meilahti) *, Hb Lisbon *, Hb Little Rock *, Hb Lulu Island *, Hb Lyon-Bron *,
Hb M-Boston (M-Osaka) *, Hb M-Saskatoon (main peak) *, Hb McKees Rocks *, Hb Malmö *, Hb Marseille (Long Island) *,
Hb Milledgeville *, Hb Minneapolis Laos *, Hb Mizuho *, Hb Mosella *, Hb Noko *, Hb Okayama *, Hb Owari *, Hb Ozieri *, Hb Perth
(Abraham Lincoln) *, Hb Potomac *, Hb Puttelange *, Hb Raleigh *, Hb Ravenscourt Park *, Hb Regina *, Hb Rhode Island
(Southwark) *, Hb Riccarton *, Hb Rouen (Ethiopia) *, Hb Saclay *, Hb St Joseph's *, Hb San Diego *, Hb Santa Juana (Serres) *,
Hb Savannah *, Hb Sydney *, Hb Taybe *, Hb Templeuve *, Hb Toulon *, Hb Twin Peaks *, Hb Ty Gard *, Hb Valletta *, Hb Verona *,
Hb Villejuif *, Hb Villeparisis *, Hb Volga (Drenthe) *, Hb Westmead *, Hb Wood *, Hb Yaounde (Mataro) *, Hb Zoetermeer *,
Hb M-Milwaukee-I *, Hb Melusine *, Hb Pitie-Salpetriere *, Hb Syracuse *, Hb Hounslow, Hb Fort Dodge, Hb Old Dominion (OD/BuT),
Hb Camperdown, Hb Duarte, Hb Jura (Bamako)
Hb Créteil, Hb Nouakchott, Hb Wayne (pic 1), Hb M-Iwate (M-Kankakee), Hb Camden (Tokuchi), Hb Hope
Hb Créteil, Hb Nouakchott, Hb Wayne (peak 1), Hb M-Iwate (M-Kankakee), Hb Camden (Tokuchi), Hb Hope
Hb A dégradée, Hb Vaasa, Hb Tacoma, Hb Providence (pic X-Asn), Hb Shepherds Bush, Hb Cook, Hb Corsica, Hb Pisa,
Hb K-Woolwich, Hb Lombard, Hb J-Guantanamo, Hb Andrew Minneapolis, Hb J-Cape Town (alpha 1), Hb Kaohsiung (New York),
Hb Fannin-Lubbock I, Hb Saint Claude, Hb Thionville, Hb Jackson (alpha 2), Hb J-Cape Town (alpha 2), Hb Strasbourg, Hb Osler
(Fort Gordon), Hb Pierre-Bénite, Hb J-Auckland, Hb Nancy, Hb Himeji, Hb Singapore, Hb Jackson (alpha 1), Hb Tatras, variant de
Hb A2 "I (I-Texas)"
Denatured Hb A, Hb Vaasa, Hb Tacoma, Hb Providence (X-Asn peak), Hb Shepherds Bush, Hb Cook, Hb Corsica, Hb Pisa,
Hb K-Woolwich, Hb Lombard, Hb J-Guantanamo, Hb Andrew Minneapolis, Hb J-Cape Town (alpha 1), Hb Kaohsiung (New York),
Hb Fannin-Lubbock I, Hb Saint Claude, Hb Thionville, Hb Jackson (alpha 2), Hb J-Cape Town (alpha 2), Hb Strasbourg, Hb Osler
(Fort Gordon), Hb Pierre-Bénite, Hb J-Auckland, Hb Nancy, Hb Himeji, Hb Singapore, Hb Jackson (alpha 1), Hb Tatras, "I (I-Texas)"
Hb A2 variant
Hb Bart, Hb Nikaia, Hb Cemenelum, Hb Tokoname, Hb J-Cubujuqui, Hb Wayne (pic 2), Hb Hopkins-II (alpha 1), Hb J-Calabria (J-Bari),
Hb J-Camagüey, Hb J-Tongariki, Hb J-Meerut (J-Birmingham - alpha 1), Hb Hopkins-II (alpha 2), Hb Zaïre, Hb J-Meerut
(J-Birmingham - alpha 2), Hb Trollhättan, Hb Pyrgos (Mizunami), Hb Providence (pic X-Asp), Hb Suresnes, Hb J-Broussais (Tagawa-I alpha 2), Hb Grady (Dakar - alpha 2), Hb Grady (Dakar - alpha 1), Hb Hikari, Hb J-Rajappen, Hb J-Anatolia, Hb J-Broussais (TagawaI - alpha 1), Hb J-Chicago, Hb J-Sardegna, Hb J-Cordoba, Hb J-Toronto, Hb J-Oxford (I-Interlaken), Hb J-Meinung (J-Bangkok),
Hb Ube-2, Hb Hofu, Hb J-Cambridge (Rambam), Hb J-Abidjan, Hb Ulm, Hb J-Iran, Hb Riyadh (Karatsu), Hb Mexico (J-Paris-II alpha 2), Hb Neuilly-sur-Marne, Hb Pontoise (J-Pontoise), Hb Ankara, Hb Mexico (J-Paris-II - alpha 1), Hb J-Paris-I (J-Aljezur alpha 1), Hb Thailand, Hb J-Habana, Hb J-Baltimore (N-New Haven), Hb J-Wenchang-Wuming, Hb J-Paris-I (J-Aljezur - alpha 2),
Hb K-Ibadan
Hb Bart, Hb Nikaia, Hb Cemenelum, Hb Tokoname, Hb J-Cubujuqui, Hb Wayne (peak 2), Hb Hopkins-II (alpha 1), Hb J-Calabria
(J-Bari), Hb J-Camagüey, Hb J-Tongariki, Hb J-Meerut (J-Birmingham - alpha 1), Hb Hopkins-II (alpha 2), Hb Zaïre, Hb J-Meerut
(J-Birmingham - alpha 2), Hb Trollhättan, Hb Pyrgos (Mizunami), Hb Providence (X-Asp peak), Hb Suresnes, Hb J-Broussais
(Tagawa-I - alpha 2), Hb Grady (Dakar - alpha 2), Hb Grady (Dakar - alpha 1), Hb Hikari, Hb J-Rajappen, Hb J-Anatolia,
Hb J-Broussais (Tagawa-I - alpha 1), Hb J-Chicago, Hb J-Sardegna, Hb J-Cordoba, Hb J-Toronto, Hb J-Oxford (I-Interlaken),
Hb J-Meinung (J-Bangkok), Hb Ube-2, Hb Hofu, Hb J-Cambridge (Rambam), Hb J-Abidjan, Hb Ulm, Hb J-Iran, Hb Riyadh (Karatsu),
Hb Mexico (J-Paris-II - alpha 2), Hb Neuilly-sur-Marne, Hb Pontoise (J-Pontoise), Hb Ankara, Hb Mexico (J-Paris-II - alpha 1),
Hb J-Paris-I (J-Aljezur - alpha 1), Hb Thailand, Hb J-Habana, Hb J-Baltimore (N-New Haven), Hb J-Wenchang-Wuming, Hb J-Paris-I
(J-Aljezur - alpha 2), Hb K-Ibadan
- 683 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
TABLEAU / TABLE
VARIANTS POTENTIELS PRÉSENTS DANS CHAQUE ZONE - POTENTIAL VARIANTS LOCATED IN EACH ZONE
Zone
Z13
Z14
Z15
Hémoglobines / Hemoglobins (Hb)
Hb J-Europa, Hb N-Baltimore (Hopkins-I), Hb J-Rovigo, Hb Arta (pic mineur), Hb J-Norfolk (Kagoshima), Hb J-Kaohsiung (J-Honolulu)
Hb J-Europa, Hb N-Baltimore (Hopkins-I), Hb J-Rovigo, Hb Arta (minor peak), Hb J-Norfolk (Kagoshima), Hb J-Kaohsiung (J-Honolulu)
Hb N-Seattle
Hb N-Seattle
Hb H, Hb I-Toulouse, Hb Sudbury, Hb Kurosaki (alpha 1), Poly A (A->G); AATAAA->AATAAG of the alpha2 gene alpha-Thal-2,
Hb Kurosaki (alpha 2), Hb F-Emirates, Hb N-Timone, Hb I (I-Texas, I-Philadelphia), Hb Shaare Zedek
Hb H, Hb I-Toulouse, Hb Sudbury, Hb Kurosaki (alpha 1), Poly A (A->G); AATAAA->AATAAG of the alpha2 gene alpha-Thal-2,
Hb Kurosaki (alpha 2), Hb F-Emirates, Hb N-Timone, Hb I (I-Texas, I-Philadelphia), Hb Shaare Zedek
* Pic non visible / Hidden peak
- 684 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
SCHÉMAS / FIGURES
PROFILS ÉLECTROPHORÉTIQUES - ELECTROPHORETIC PATTERNS
Figure 2
Figure 1
Z15
Z14 Z13
Z12
Z11 Z10 Z9
Hb A
Z8
Z7
Z6 Z5 Z4
Z3 Z2
Z15
Z1
Z14 Z13
Z12
Z11 Z10 Z9
Hb A
Z8
Z7
Z6 Z5 Z4
Z1
Hb A2
Hb A2
Sang bêta-thalassémique
Blood sample with beta-thalassemia
Sang normal
Normal blood sample
Figure 4
Figure 3
Z15
Z3 Z2
Z14 Z13
Z12
Z11 Z10 Z9
Hb A
Z8
Z7
Z6 Z5 Z4
Z3 Z2
Z15
Z1
Hb C
Hb A2
Sang avec variant Hb C
Blood sample with Hb C variant
Z14 Z13
Z12
Z11 Z10 Z9
Hb A
Z8
Z7
Z6 Z5 Z4
Hb S
Hb F
Sang avec variant hétérozygote Hb S
Blood sample with Hb S heterozygote variant
- 685 -
Z3 Z2
Hb A2
Z1
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
SCHÉMAS / FIGURES
PROFILS ÉLECTROPHORÉTIQUES - ELECTROPHORETIC PATTERNS
Figure 6
Figure 5
Z15
Z14 Z13
Z12
Z11 Z10 Z9
Z8
Z7
Hb F
Z6 Z5 Z4
Z3 Z2
Z15
Z1
Z14 Z13
Z12
Z11 Z10 Z9
Hb A
Z7
Hb F
Z6 Z5 Z4
Z3 Z2
Z1
Hb A
Hb Bart's
Hb A2
Sang de bébé avec Hb Bart's
Baby blood sample with Hb Bart's
Sang de bébé (agé de 3 semaines)
Baby blood sample (3 weeks old)
Figure 8
Figure 7
Z15
Z8
Z14 Z13
Z12
Z11 Z10 Z9
Hb A
Z8
Z7
Z6 Z5 Z4
Z3 Z2
Z15
Z1
Z14 Z13
Z12
Z11 Z10 Z9
Hb A
Z8
Z7
Z6 Z5 Z4
Z3 Z2
Hb F
Hb A2
Sang avec Hb F (jeune enfant)
Blood sample with Hb F (young child)
Hb H
Sang avec Hb H
Blood sample with Hb H
- 686 -
Hb A2
Z1
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
SCHÉMAS / FIGURES
PROFILS ÉLECTROPHORÉTIQUES - ELECTROPHORETIC PATTERNS
Figure 10
Figure 9
Z15
Z14 Z13
Z12
Z11 Z10 Z9
Hb A
Z8
Z7
Z6 Z5 Z4
Z3 Z2
Hb D-Punjab
Z15
Z1
Z14 Z13
Z12
Z11 Z10 Z9
Hb A
Z8
Z7
Z6 Z5 Z4
Hb A2
Z3 Z2
Hb A2
Z1
Hb
delta A'2
Sang avec variant delta Hb A'2
Blood sample with delta Hb A'2 variant
Sang avec variant Hb D-Punjab
Blood sample with Hb D-Punjab variant
Figure 12
Figure 11
Hb C
Hb E
Hb S
Hb F
Hb A2
Sang avec variant homozygote Hb E et fraction Hb F élevée
Blood sample with homozygote Hb E variant and elevated Hb F
Hb F
Hb A2
Sang avec variants hétérozygotes Hb S et Hb C
Blood sample with Hb S & Hb C heterozygote variants
- 687 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2014/06
SCHÉMAS / FIGURES
PROFILS ÉLECTROPHORÉTIQUES - ELECTROPHORETIC PATTERNS
Figure 13
Figure 14
Z15
Hb A2
Z12
Z11 Z10 Z9
Hb A
Z8
Z7
Z6 Z5 Z4
Hb Lepore
Hb F
Z8
Z7
Z6 Z5 Z4
Z3 Z2
Z1
Z3 Z2
Hb F
Hb A2
Sang avec Hb A dégradée (Hb A3) et Hb F faible
Blood sample with degradated Hb A (Hb A3) and faint Hb F
Figure 15
Z14 Z13
Z11 Z10 Z9
Hb A
dégradée
degradated
Sang avec variant homozygote Hb S (et Hb F)
Blood sample with Hb S homozygote variant (and Hb F)
Z15
Z12
Hb A
Hb S
Hb F
Z14 Z13
Z1
Hb A2
Sang avec variant Hb Lepore
Bood sample with Hb Lepo re variant
- 688 -

ΑΡΙΣΤΟΤΕΛΕΙΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΘΕΣΣΑΛΟΝΙΚΗΣ

CAPILLARYS HEMOGLOBIN(E) CAPILLARYS 2

MINICAP PROTEIN(E) 6

MINICAP IMMUNOTYPING

ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗ Α` ΓΥΜΝΑΣΙΟΥ ΕΝΟΤΗΤΑ 1η

Οδηγός Σπουδών - Εργαστήριο Φυσικής της Ατμόσφαιρας