The Mafia in Havana: A Caribbean Mob Story

L’ANALISI DELLA COCAINA IN MATRICI PILIFERE:
E’ SEMPRE POSSIBILE DIFFERENZIARE
LA CONTAMINAZIONE DAL CONSUMO?
C. Vignali1, M. Caligara2, C. Stramesi1, I. Angeli2, F. Gigli2, A. Groppi1
1 Dipartimento di Sanità Pubblica, Medicina Sperimentale e Forense – Sezione di Medicina Legale e Scienze
Forensi – Università degli Studi di Pavia
2 Dipartimento di Scienze Biomediche, Chirurgiche ed Odontoiatriche – Sezione di Tossicologia Forense –
Università degli Studi di Milano
XVI CONVEGNO NAZIONALE GTFI – Firenze 17-19 ottobre 2013
La principale criticità dell’analisi di matrici pilifere per la ricerca di
sostanze stupefacenti, in particolare per quanto riguarda la cocaina, è
relativa alla interpretazione dei risultati positivi
Criteri per valutare la positività(1)
Si raccomanda di utilizzare i seguenti quattro criteri per valutare
l’eventuale contaminazione passiva:
• Identificazione dei metaboliti
• Impiego dei rapporti metabolita/sostanza immodificata
• Analisi dei liquidi di lavaggio
• Impiego di valori soglia (cut-off)
Per la cocaina può essere usato il seguente rapporto metabolita/sostanza immodificata
benzoilecgonina/cocaina > 0.05
(1) Society of Hair Testing / Forensic Science International 84 (1997) 3-6
XVI CONVEGNO NAZIONALE GTFI – Firenze 17-19 ottobre 2013
Motivazioni dello studio
• Contestazione dei risultati per autoriferita assenza di
assunzione
• Discrepanza tra gli esiti di controlli urinari in ampio periodo
e quelli delle matrici pilifere
• Difficoltà nella valutazione di soggetti in età pediatrica
XVI CONVEGNO NAZIONALE GTFI – Firenze 17-19 ottobre 2013
Ci si è proposti, pertanto, di verificare attraverso prove di contaminazione di
matrici pilifere:
• la durata della rilevabilità della cocaina
• l’entità della sua degradazione a benzoilecgonina
• se i rapporti percentuali di concentrazione tra i due composti possano
essere analoghi a quelli ritrovati a seguito del consumo dello stupefacente.
Sono stati contaminati con cocaina “da strada”
con titolo pari al 30%, i capelli di tre soggetti
ed i peli pubici di altri due, tutti non
consumatori. La contaminazione è stata
eseguita in modo da simulare un inquinamento
casuale (appoggio delle dita su una superficie
“sporca” e rapido passaggio delle mani tra i
capelli ed i peli)
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TEMPI DI PRELIEVO DEI CAPELLI
SOGGETTO A
SOGGETTO B
SOGGETTO C
Capelli non trattati
Capelli tinti
Capelli tinti
Tempo 0
Tempo 0
Tempo 0
1 giorno
1 giorno
1 giorno
1 settimana
1 settimana
1 settimana
1 mese
1 mese
1 mese
2 mesi
5 mesi
2 mesi
5 mesi
Le analisi sono sempre state eseguite su 6 cm di capelli suddivisi in 2 segmenti.
Per i prelievi dopo 1, 2 e 5 mesi dalla contaminazione sono stati rispettivamente
analizzati anche 1, 2 e 5 cm prossimali. I prelievi sino ad un mese sono stati eseguiti
in tre punti diversi del capo (vertice e zone parietali).
XVI CONVEGNO NAZIONALE GTFI – Firenze 17-19 ottobre 2013
TEMPI DI PRELIEVO DEI PELI PUBICI
SOGGETTO D
SOGGETTO E
Pelo pubico
Pelo pubico
Tempo 0
Tempo 0
1 giorno
1 giorno
4 giorni
4 giorni
1 settimana
1 settimana
2 settimane
2 settimane
1 mese
1 mese
2 mesi
2 mesi
3 mesi
5 mesi
5 mesi (ricrescita)
Le analisi sono sempre state eseguite sul campione in toto.
XVI CONVEGNO NAZIONALE GTFI – Firenze 17-19 ottobre 2013
Tutti i campioni sono stati sottoposti alle procedure di “routine”, che sono
comuni nei due laboratori:
•
•
•
•
decontaminazione con cloruro di metilene (due lavaggi)
incubazione delle matrici “overnight” con HCl 0.1 N
estrazione SPE
analisi GC/MS con acquisizione in SIM mode
All’analisi GC/MS sono state sottoposte anche le soluzioni di lavaggio
XVI CONVEGNO NAZIONALE GTFI – Firenze 17-19 ottobre 2013
SOGGETTO A
1 GIORNO*
COC (BE)
ng/mg
1 SETTIMANA
COC (BE)
ng/mg
1 MESE
COC (BE)
ng/mg
2 MESI
COC (BE)
ng/mg
5 MESI
COC (BE)
ng/mg
A dx prox
17.08 (0.65)
3.43 (0.14)
0.79 (-)
A dx dist
8.65 (0.27)
2.97 (-)
NEG
A vertice prox
33.98 (1.27)
16.41 (0.83)
2.09 (0.28)
3.67 (0.93)
NEG
A vertice dist
28.89 (0.82)
11.80 (0.68)
1.47 (0.09)
6.33 (1.14)
NEG
A sin prox
4.07 (0.11)
0.56 (-)
0.31 (-)
A sin dist
0.61 (-)
NEG
NEG
* Liquidi di lavaggio positivi
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SOGGETTO A
1 GIORNO*
COC (BE)
ng/mg
1 SETTIMANA
COC (BE)
ng/mg
1 MESE
COC (BE)
ng/mg
2 MESI
COC (BE)
ng/mg
5 MESI
COC (BE)
ng/mg
A dx prox
17.08 (0.65)
3.43 (0.14)
0.79 (-)
A dx dist
8.65 (0.27)
2.97 (-)
NEG
A vertice prox
33.98 (1.27)
16.41 (0.83)
2.09 (0.28)
3.67 (0.93)
NEG
A vertice dist
28.89 (0.82)
11.80 (0.68)
1.47 (0.09)
6.33 (1.14)
NEG
A sin prox
4.07 (0.11)
0.56 (-)
0.31 (-)
A sin dist
0.61 (-)
NEG
NEG
* Liquidi di lavaggio positivi
XVI CONVEGNO NAZIONALE GTFI – Firenze 17-19 ottobre 2013
SOGGETTO B
1 GIORNO*
COC (BE)
ng/mg
1 SETTIMANA
COC (BE)
ng/mg
1 MESE
COC (BE)
ng/mg
2 MESI
COC (BE)
ng/mg
5 MESI
COC (BE)
ng/mg
B dx prox
17.22 (0.67)
18.54(1.22)
6.62 (1.28)
B dx dist
22.51 (0.85)
34.07 (2.37)
15.71 (3.06)
B vertice prox
81.65 (6.39)
51.39 (3.62)
5.77 (1.20)
1.07 (1.11)
B vertice dist
71.65 (3.6)
89.15 (6.52)
5.76 (1.17)
1.28 (1.63)
B sin prox
14.39 (0.49)
23.51 (1.39)
8.66 (1.62)
B sin dist
12.40 (0.34)
16.05 (1.13)
11.04 (1.99)
* Liquidi di lavaggio positivi
XVI CONVEGNO NAZIONALE GTFI – Firenze 17-19 ottobre 2013
SOGGETTO B
1 GIORNO*
COC (BE)
ng/mg
1 SETTIMANA
COC (BE)
ng/mg
1 MESE
COC (BE)
ng/mg
2 MESI
COC (BE)
ng/mg
5 MESI
COC (BE)
ng/mg
B dx prox
17.22 (0.67)
18.54(1.22)
6.62 (1.28)
B dx dist
22.51 (0.85)
34.07 (2.37)
15.71 (3.06)
B vertice prox
81.65 (6.39)
51.39 (3.62)
5.77 (1.20)
1.07 (1.11)
B vertice dist
71.65 (3.6)
89.15 (6.52)
5.76 (1.17)
1.28 (1.63)
B sin prox
14.39 (0.49)
23.51 (1.39)
8.66 (1.62)
B sin dist
12.40 (0.34)
16.05 (1.13)
11.04 (1.99)
* Liquidi di lavaggio positivi
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SOGGETTO C
1 GIORNO*
COC (BE)
ng/mg
1 SETTIMANA
COC (BE)
ng/mg
1 MESE
COC (BE)
ng/mg
2 MESI
COC (BE)
ng/mg
C dx prox
6.66 (0.76)
0.84 (0.07)
0.27 (0.05)
C dx dist
4.93 (0.22)
0.73 (0.07)
0.19 (-)
C vertice prox
14.11 (2.25)
4.81 (0.38)
2.33 (0.45)
NEG
C vertice dist
7.87 (0.39)
3.99 (0.31)
1.36 (0.26)
NEG
C sin prox
8.5 (0.82)
0.86 (0.08)
1.96 (0.35)
C sin dist
4.4 (0.21)
0.69 (-)
1.04 (0.2)
5 MESI
COC (BE)
ng/mg
* Liquidi di lavaggio positivi
XVI CONVEGNO NAZIONALE GTFI – Firenze 17-19 ottobre 2013
SOGGETTO C
1 GIORNO*
COC (BE)
ng/mg
1 SETTIMANA
COC (BE)
ng/mg
1 MESE
COC (BE)
ng/mg
2 MESI
COC (BE)
ng/mg
C dx prox
6.66 (0.76)
0.84 (0.07)
0.27 (0.05)
C dx dist
4.93 (0.22)
0.73 (0.07)
0.19 (-)
C vertice prox
14.11 (2.25)
4.81 (0.38)
2.33 (0.45)
NEG
C vertice dist
7.87 (0.39)
3.99 (0.31)
1.36 (0.26)
NEG
C sin prox
8.5 (0.82)
0.86 (0.08)
1.96 (0.35)
C sin dist
4.4 (0.21)
0.69 (-)
1.04 (0.2)
5 MESI
COC (BE)
ng/mg
* Liquidi di lavaggio positivi
XVI CONVEGNO NAZIONALE GTFI – Firenze 17-19 ottobre 2013
SOGGETTO D
SOGGETTO E
COC (BE)
ng/mg
COC (BE)
ng/mg
1 GIORNO*
130.17 (1.32)
1 GIORNO*
129.04 (1.03)
4 GIORNI
51.96 (4.28)
4 GIORNI
31.66 ( 2.08)
7 GIORNI
24.83 (2.81)
7 GIORNI
19.95 (1.68)
15 GIORNI
7.39 (1.08)
15 GIORNI
20.05 (8.79)
1 MESE
3.50 ( 1.30)
1 MESE
0.95(0.29)
2 MESI
1.03 (0.92)
2 MESI
0.03 (-)
3 MESI
0.21( 0.14)
5 MESI
NEG (-)
5 MESI
0.15 (0.09)
* Liquidi di lavaggio positivi
XVI CONVEGNO NAZIONALE GTFI – Firenze 17-19 ottobre 2013
SOGGETTO C DOPO 1 MESE
COC
BE
PROVA RIF. 1.5 ng/mg
COC
BE
XVI CONVEGNO NAZIONALE GTFI – Firenze 17-19 ottobre 2013
• Le concentrazioni di cocaina/benzoilecgonina misurate nei capelli hanno
mostrato un’ampia variabilità non solo tra soggetto e soggetto, ma anche
tra le varie zone del capo interessate dalla contaminazione
• Pur a fronte di tale disomogeneità rimane il fatto che dopo una settimana
dalla contaminazione nel 72% dei segmenti di capelli (13 su 18) e in
entrambi i campioni di peli pubici è stata rilevata la presenza di COC e di
BE con BE/COC>5%
• Dopo 1 mese dalla contaminazione la percentuale di capelli positivi è
ancora pari al 72% (13 su 18). Conservano memoria della contaminazione
anche i due campioni di peli pubici.
• Presenza di COC e BE è stata rilevata anche nel 44% dei segmenti
corrispondenti ad 1 cm prox (prelievo a 1 mese), un dato giustificabile solo
invocando fenomeni di “trascinamento” dello stupefacente
XVI CONVEGNO NAZIONALE GTFI – Firenze 17-19 ottobre 2013
ANDAMENTO DEI RAPPORTI % BE/COC NEL TEMPO
120
100
80
Capelli A
Capelli B
60
Capelli C
Peli D
40
Peli E
20
0
1 settimana
1 mese
2 mesi
5 mesi
I rapporti BE/COC si mantengono nell’intervallo tra il 5% ed il 20% nel 90%
dei segmenti in cui vi sia presenza di entrambe le molecole per quanto
riguarda i capelli, e nell’80% dei campioni relativamente ai peli pubici.
XVI CONVEGNO NAZIONALE GTFI – Firenze 17-19 ottobre 2013
UN CASO DI CONTAMINAZIONE
Soggetto Maschio pervenuto presso il Laboratorio di Tossicologia Forense di Milano con richiesta di
accertamento tossicologico da parte del SerT.
Il soggetto contesta il risultato dell’analisi effettuata nel mese di gennaio su una ciocca di capelli prelevati
allo stesso nella zona occipitale del cranio.
Effettua test presso altro laboratorio (fuori regione) dove gli viene prelevata una ciocca di capelli nella zona
parietale del cranio che fornisce esito negativo.
Si ripresenta presso il Laboratorio di Milano dove gli vengono prelevate due ciocche di capelli; una nella
zona occipitale, l’altra nella zona parietale.
Periodo prelievo
Zona prelievo
Porzione analisi
Risultati COC (BE)
ng/mg
Gennaio
Occipitale
cm 4
4.21 (0.27)
Giugno
Parietale
cm 5
NEG (-)
Luglio
Occipitale
cm 6
3.18 (0.31)
Luglio
Parietale
cm 5
NEG (-)
XVI CONVEGNO NAZIONALE GTFI – Firenze 17-19 ottobre 2013
• Il fenomeno della contaminazione gioca un importante ruolo nel
ritrovamento di cocaina e di benzoilecgonina nelle matrici pilifere che si
mantengono per lungo tempo superiori ai valori di cut-off
• I dati ottenuti, in relazione al rapporto percentuale BE/COC ed alla
contestuale negatività delle soluzioni di lavaggio sono interpretabili, senza
alcun dubbio, nell’ottica del consumo di cocaina
• La costante negatività dei liquidi di lavaggio dei prelievi successivi al primo
suggerisce che lo stupefacente venga rapidamente incorporato nel capello;
viene ribadita dalla nostra indagine la mancata perdita di cocaina/
metabolita a seguito di ripetuti lavaggi dei capelli
• Gli attuali processi interpretativi appaiono insufficienti per discriminare
tra uso di cocaina e contaminazione e necessitano pertanto di essere
integrati con altri elementi di valutazione (ricerca di altri metaboliti es.
cocaetilene o norcocaina*; in caso di contestazione analizzare altra matrice
pilifera o effettuare più prelievi da zone diverse del capo)
*Poon S et al Norcocaine in human hair differentiates cocaine use
from external exposure 18th SOHT Meeting- Geneva 2013
XVI CONVEGNO NAZIONALE GTFI – Firenze 17-19 ottobre 2013

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