SVEUČILIŠTE U ZAGREBU ŠUMARSKI FAKULTET Sanja Novak Agbaba MIKOFLORA ŽIRA HRASTA LUŽNJAKA (Quercus robur L.) U HRVATSKOJ Disertacija Mentor: Prof. dr. sc. Milan Glavaš Ova doktorska disertacija zaštićena je autorskim pravima. Svako kopiranje bilo kojeg dijela rada bez pristanka autora strogo je zabranjeno. Zagreb, 2006. S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... PREDGOVOR PREDGOVOR Istraživanja zdravstvenog stanja sjemena hrasta lužnjaka provedena su u okviru znanstvenoistraživačkog programa Šumarskog instituta Jastrebarsko u sklopu projekta: "Zaštita i unapređenje proizvodnje biomase u ulozi podržavanja višestrukih uloga i funkcija šuma" te potprojekta "Podržavanje učinkovitog razvoja šumskih površina" za razdoblje 1996-2000. godine da bi se u narednom petogodišnjem razdoblju tematika izdvojila kao zaseban zadatak pod naslovom "Bolesti i štetnici šumskog sjemena i mjere zaštite". Problematika sjemena hrasta lužnjaka sagledavana je do sada s aspekta sjemenarstva (proizvodnja sjemena, kakvoća sjemena), uzgoja (sjetva i sadnja), entomologije (štetnici žira) i zoologije (štete od glodavaca i metode zaštite). Do sada se žir hrasta lužnjaka nije detaljnije proučavao s aspekta gljivičnih uzročnika koji ga također oštećuju. Stoga se pokazala potreba da se obradi i mikološki kompleks koji napada i oštećuje žir. Iz te potrebe proizašla je i tema ove doktorske disertacije kako bi se problematika vezana uz žir sagledala i cjelovito obradila. Kroz razgovor s prof. dr. sc. Milanom Glavašem i dr. sc. Marijom Halambek dogovorena je tema i određeni su lokaliteti na kojima su sakupljani uzorci žira. Prišlo se analizi sakupljenih uzoraka žira, izolirane su gljivice s kojima se do sada nismo često ili uopće susretali, provedena je inventarizacija i determinacija gljivičnih organizama na osnovi morfologije i specifičnih fruktifikacija. Tražena je literatura o mikoflori na žiru. Za početak smo bili zadovoljni s nađenom literaturom ali kasnije smo shvatili da je početna nađena literatura gotovo i jedina o toj problematici. Radovi na koje smo kasnije nailazili uglavnom su se odnosili na problematiku vezanu uz poljoprivredne vrste sjemena koje su mnogo više obrađivane s obzirom na važnost sa stajališta ljudske prehrane te manji broj radova koji se odnose na bolesti sjemena četinjača. Ovim putem bih se željela zahvaliti mom mentoru prof. dr. sc. Milanu Glavašu koji mi je pomogao korisnim uputama i savjetima te prilikom pročišćavanja završnog teksta ovog rada. Dr. sc. Marija Halambek svojim savjetima, pomoći prilikom pregleda ruske i češke literature te razgovorima pomogla mi je u radu na čemu joj toplo zahvaljujem. Dr. sc. Karmelu Poštenjak i mr. sc. Mariji Gradečki, iz Odjela za oplemenjivanje i sjemenarstvo, zahvaljujem na korisnim informacijama. Stručnim suradnicima iz operative iz područja zaštite šuma i sjemenarstva koji su mi pomogli prilikom obavljanja terenskih radova i sakupljanja uzoraka žira ovim putem zahvaljujem na susretljivosti. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu I S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... PREDGOVOR Svojim kolegama iz Šumarskog instituta koji su mi na bilo koji način pomogli pri izradi ovog rada od srca zahvaljujem, posebno Pilaš Ivanu. Mr. sc. Ivanki Čizmić zahvaljujem na ljubaznosti, savjetima i stručnoj literaturi. Dr. sc. Zdenki Prohatzkovoj zahvaljujem na knjizi o bolestima i štetnicima šumskog sjemena čija je koautorica. Upravi Šumarskog instituta Jastrebarsko, dr. sc. Josi Gračanu te dr. sc. Miroslavu Benku, ravnatelju Šumarskog instituta, zahvaljujem na financijskoj potpori za istraživanje i opremanje ovog rada. Posebno zahvaljujem ravnatelju Šumarskog instituta dr. sc. Miroslavu Benko na savjetima, razumijevanju i podršci te dr. sc. Milanu Perneku, Pročelniku Odjela za zaštitu šuma i lovstvo, Šumarskog instituta na podršci. Svojoj obitelji i prijateljima zahvaljujem na strpljenju, poklonjenom vremenu i ljubavi. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu II S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... SADRŽAJ SADRŽAJ PREDGOVOR...........................................................................................................................I SADRŽAJ ...............................................................................................................................III TEMELJNA DOKUMENTACIJSKA KARTICA .............................................................VI BASIC DOCUMENTATION CARD ................................................................................. VII POPIS TABLICA................................................................................................................VIII POPIS GRAFIKONA ............................................................................................................XI POPIS SLIKA......................................................................................................................XIV 1. UVOD I PROBLEMATIKA.......................................................................................... 1 2. O OSNOVNIM ZNAČAJKAMA HRASTA LUŽNJAKA (Quercus robur L.)......... 7 3. DOSADAŠNJA ISTRAŽIVANJA MIKOZA HRASTOVA ŽIRA KOD NAS I U SVIJETU ................................................................................... 16 4. CILJ ISTRAŽIVANJA ................................................................................................ 22 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA.................................................................................... 24 5.1. Osnovni podaci o područjima istraživanja i lokalitetima sakupljanja uzoraka žira ........................................................................................ 29 5.1.1. Područja istraživanja i sakupljanja uzoraka žira u periodu od 1996. do 1998. godine .......................................................... 29 5.1.2. Područja sakupljanja uzoraka žira iz uroda 1999. godine ......................... 30 5.1.3. Područja sakupljanja uzoraka žira iz uroda 2000. godine ......................... 33 5.2. Urod žira na područjima istraživanja .................................................................... 38 5.3. Klima istraživanog područja ................................................................................. 40 6. MATERIJALI I METODE RADA ............................................................................. 42 6.1. Materijali i metode rada ........................................................................................ 43 6.2. Istraživanje zdravstvenog stanja i mikoflore žira.................................................. 43 6.2.1. Rad na terenu ............................................................................................. 43 6.2.2. Rad u laboratoriju ...................................................................................... 45 6.2.2.1. Makroskopska metoda analize zdravstvenog stanja i oštećenosti žira................................................................ 45 6.2.2.2. Mikroskopska odnosno fitopatološka analiza oboljelog žira ...... 49 6.2.2.3. Determinacija gljiva izoliranih sa žira......................................... 53 6.3. Izmjera dimenzija spora najčešćih vrsta gljiva izoliranih sa žira.......................... 53 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu III S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... SADRŽAJ 6.4. Izmjera brzine rasta štetnih vrsta gljiva izoliranih sa žira u različitim temperaturnim uvjetima ..................................................................... 54 6.5. Ispitivanje zaštite žira od gljivičnih bolesti primjenom fungicida ........................ 56 6.5.1. Pokus zaštite žira hrasta lužnjaka u laboratoriju ....................................... 56 6.5.2. Pokus zaštite žira hrasta lužnjaka u polju.................................................. 58 6.6. Obrada podataka.................................................................................................... 60 7. REZULTATI RADA .................................................................................................... 61 7.1. Analiza zdravstvenog stanja žira u periodu istraživanja od 1996-1998. godine ... 62 7.1.1. Zdravstveno stanje prema kategorijama oštećenosti žira .......................... 62 7.1.2. Analiza mikoflore žira ............................................................................... 82 7.2. Zdravstveno stanje i mikoflora zrelog žira iz uroda 1999. i 2000. godine.......... 104 7.2.1. Mikoflora zrelog žira iz uroda 1999. godine ........................................... 104 7.2.2. Zdravstveno stanje i mikoflora zrelog žira iz uroda 2000. godine .......... 109 7.3. Vrste utvrđenih gljiva na žiru.............................................................................. 116 7.3.1. Ophiostoma spp. ...................................................................................... 119 7.3.2. Chaetomium globosum Kunze ................................................................ 125 7.3.3. Ciboria batschiana (Zopf) Buchw. .......................................................... 128 7.3.4. Stereum hirsutum (Willd) Pers. ............................................................... 132 7.3.5. Schizophyllum commune Fries. .............................................................. 134 7.3.6. Penicillium spp. ....................................................................................... 136 7.3.7. Verticillium spp. ...................................................................................... 141 7.3.8. Trichoderma viride Pers. ......................................................................... 143 7.3.9. Trichothecium roseum Link. ................................................................... 147 7.3.10. Aspergillus spp. ....................................................................................... 149 7.3.11. Alternaria tenuis Nees. ............................................................................ 152 7.3.12. Botrytis cinerea Pers................................................................................ 154 7.3.13. Fusella olivacea (Corda.) Sacc. ............................................................... 156 7.3.14. Stysanus stemonitis (Pers.) Corda ........................................................... 157 7.3.15. Arthrobotrys spp. ..................................................................................... 158 7.3.16. Fusarium spp. .......................................................................................... 162 7.3.17. Pestalotia spp. .......................................................................................... 172 7.3.18. Gloeosporium quercinum West. .............................................................. 178 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu IV S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... SADRŽAJ 7.3.19. Phomopsis quercella Sacc. Et Roum. Diedicke....................................... 180 7.4. Veličine izmjere spora najčešćih vrsta gljiva primjenom kompjuterskog programa DP-SOFT kao pomoć prilikom njihove determinacije ....................... 186 7.5. Ispitivanje brzine rasta štetnih vrsta gljiva izoliranih sa žira u različitim temperaturnim uvjetima ................................................................... 203 7.6. Zaštita žira fungicidima....................................................................................... 211 7.6.1. Laboratorijski pokus ................................................................................ 211 7.6.2. Poljski pokus ........................................................................................... 212 8. RASPRAVA ................................................................................................................ 217 8.1. Zdravstveno stanje prema kategorijama oštećenosti žira .................................... 218 8.2. Mikoflora i bolesti žira ........................................................................................ 220 8.3. Utjecaj vremenskih prilika na urod žira i pojavu bolesti..................................... 227 8.4. Rast nekih značajnih vrsta gljiva žira u različitim temperaturnim uvjetima ....... 229 8.5. Izmjera spora računalnim programom ................................................................ 231 8.6. Zaštita žira od gljiva i gljivičnih bolesti.............................................................. 232 9. ZAKLJUČAK ............................................................................................................. 234 10. LITERATURA............................................................................................................ 239 SAŽETAK............................................................................................................................. 249 SUMMARY........................................................................................................................... 251 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu V S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... TEMELJNA DOKUMENTACIJSKA KARTICA TEMELJNA DOKUMENTACIJSKA KARTICA UDK Naslov rada Sažetak Ključne riječi Znanstveno područje 630.443.2 Mikoflora žira hrasta lužnjaka (Quercus robur L.) u Hrvatskoj Zdravo i kvalitetno sjeme osnova je za uspješnu prirodnu i umjetnu obnovu lužnjakovih sastojina. Žir hrasta lužnjaka u svim fazama razvoja kao i proizvodnog procesa ugrožen je od biotskih i abiotskih čimbenika. Biotske čimbenike čine kukci, gljive, glodavci i više životinje, a abiotske klimatski elementi. U ovom radu istraživani su gljivični organizmi, uzročnici bolesti žira. Istraživanje je obavljeno s ciljem utvrđivanja zdravstvenog stanja žira, određivanja postotnog udjela oštećenosti od gljiva, determiniranja gljivičnih organizama koji dolaze na žiru, prikaza njihovih karakteristika proučavanjem postojeće literature uz nadopunjavanje vlastitim saznanjima, te ispitivanja mogućnosti zaštite žira fungicidima i njihove djelotvornosti. Prilikom determinacije mjerene su spore odabranih vrsta gljiva primjenom kompjuterskog programa Dp-soft uz statističku analizu izmjera radi dokazivanja vrsta. Istraživana je brzina rasta gljiva u dva temperaturna uvjeta; 22-25 °C i 11-15 °C kako bi se ustanovila brzina rasta micelija, a time i brzina širenja zaraze žira.Rezultati analiza zdravstvenog stanja završnog razvojnog stadija tj. zrelog žira u odabranim sjemenskim sastojinama pokazuju slijedeće: postotak zdravog žira kretao se od 15,33 do 45,95%, oštećenost kukcima iznosila je između 29,13 do 62,77% a oštećenost gljivama od 10,70 do 42,91%. Analizom mikoflore žira utvrđeno je 19 rodova sa 29 vrsta. Na mladom žiru većinom su se nalazile gljive: Fusarium, Alternaria, Penicillium, Trichothecium, Trichoderma, Opohiostoma, Phomopsis, Chaetomium, Botrytis i Fusella. Na žiru završne faze sazrijevanja i zrelom žiru najčešće su dolazile gljive: Ophiostoma, Ciboria, Fusarium, Penicillium, Gloeosporium, Pestalotia, Stereum, Schizophyllum i dr. Znanje o mikozama na sjemenu poslužit će u iznalaženju najpogodnijih metoda zaštite žira od bolesti a time i očuvanje žira za sjetvu pri popunjavanju i umjetnoj obnovi te prirodnoj obnovi hrastovih šuma kao i prilikom sjetve u rasadnicima u proizvodnji biljaka za sadnju. Prilikom istraživanja razrađena je metodika analize zdravstvenog stanja žira i determinacije gljivičnih organizama na žiru što će poslužiti prilikom analiza kvalitete šumskog sjemena. Osim toga istraživanja mikoflore sjemena hrasta lužnjaka su značajna za fitopatologiju jer daju svojevrstan prilog poznavanju mikoflore Hrvatske. Hrast lužnjak (Quercus robur L.), žir, zdravstveno stanje, mikoflora, zaštita Biotehničke znanosti Znanstveno polje Šumarstvo Institucija u kojoj Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu je rad izrađen Mentor rada Prof. dr. sc. Milan Glavaš Broj stranica 252 Broj tablica 64 Broj slika 108 Broj grafikona 77 Broj korištenih bibliografskih jedinica 102 Datum obrane Povjerenstvo Doc. dr. sc. Danko Diminić Prof. dr. sc. Milan Glavaš Doc. dr. sc. Dušan Jurc Institucija u kojoj Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu je rad pohranjen Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu VI S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... BASIC DOCUMENTATION CARD BASIC DOCUMENTATION CARD UDK Title Summary Key words Scientific area Scientific field Dissertation was made at Mentor Number of pages Number of tables Number of figures Number of graphs Number of literature units Date of oral examination Dissertation committee Dissertation is archived at 630.443.2 Mycoflora of common oak (Quercus robur L.) in Croatia A sound and a quality seed is a basis for a successful natural and artificial restocking of common oak stands. The common oak acorn is threatened in all stages of development and a production process as well by biotic and abiotic factors. The biotic factors are made up of insects, fungi, rodents and higher animals and the abiotic ones are climatic elements. In this degree essay, the fungus organisms, the causative agents of diseases of acorn, are examined. The research was done for the purpose of establishing a state of health of acorn, defining a percentage portion of damage due to fungi, determining of fungi organisms occurring on acorn, surveying of their characteristics by studying the present literature, supplementing it with own understanding and investigating possibilities of acorn protection with fungicides and their efficacy. During the determination, the spores of selected species of fungi have been measured by applying the Dp-soft computer program with a statistical analysis of measurements, for the purpose of proving the species. A rate of growth of the fungi has been studied under the two temperature conditions: 22-25 °C and 11-15 °C in order to establish a rate of growth of mycelium and through this a spreading rate of acorn infection. The research was carried out in a period from the year 1996 to 2000. In the first three years, a state of health and mycoflora of the acorn were analyzed in five seed stands during its development from July to October in the forestries of Jastrebarsko, Lipovljani, Čazma, Donji Miholjac and Otok. In the subsequent two years, a state of health of a ripe acorn was analyzed, after it had been kept in a refrigerator, gathered on several localities of the common oak forests all over Croatia. The acorn was analyzed by a macroscopic method and a phytopathological analysis. An experiment of testing the acorn protection with fungicides was set up in a laboratory and in the field of the Institute of Forestry. The results of a state of health in the final stage of development, i.e. of a ripe acorn in the seed stands selected have shown, as follows: the percentage of a sound acorn ranged from 15.33 to 45.95%, a level of damage by insects amounted between 29.13 to 62.77% and a level of damage by fungi from 10.70 to 42.91%. By analysis of the acorn mycoflora, 19 genera with 29 species were determined. On the early acorn, the prevailing fungi were: Fusarium, Alternaria, Penicillium, Trichothecium, Trichoderma, Opohiostoma, Phomopsis, Chaetomium, Botrytis and Fusella. On the acorn in its final stage of ripening and on a ripe acorn the most frequent fungi were: Ophiostome, Ciboria, Fusarium, Penicillium, Gloeosporium, Pestalotia, Stereum, Schizophyllum and the other. The knowledge about mycoses on seed will serve in finding most appropriate methods of acorn protection against diseases, thereby the acorn will be preserved for sowing when filling up and performing the artificial restocking and the natural restocking of oak forests, as well as when sowing in nursery-gardens for the production of seedlings. In the research, the methods of the analysis of the acorn state of health and the determination of fungus organisms on acorn have been elaborated, that will serve in the analyses of a forest seed quality. Besides, the research of mycoflora of the common oak seed is important for phytopathology, since it makes a contribution of its kind to the knowledge of mycoflora of Croatia. Common oak (Quercus robur L.), acorn, health condition, mycoflora, protection Biotechnological sciences Forestry Faculty of Forestry, University of Zagreb Professor Milan Glavaš, Ph. D. 252 64 108 77 102 Assistant professor Danko Diminić, Ph.D. Professor Milan Glavaš, Ph.D. Assistant professor Dušan Jurc, Ph. D. Faculty of Forestry, University of Zagreb Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu VII S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... POPIS TABLICA POPIS TABLICA Tablica 5.1. Područja sakupljanja uzoraka žira u periodu od 1996. do 1998. godine .......... 26 Tablica 5.2. Područja sakupljanja uzoraka žira u jesen 1999. godine .................................. 26 Tablica 5.3. Područja sakupljanja uzoraka žira u jesen 2000. godine .................................. 27 Tablica 5.4. Količine sakupljenog lužnjakovog žira (u kg) u razdoblju istraživanja ........... 39 Tablica 7.1. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Jastrebarsko 1996. godina................... 65 Tablica 7.2. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Lipovljani 1996. godina ...................... 66 Tablica 7.3. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Čazma 1996. godina ........................... 67 Tablica 7.4. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Donji Miholjac 1996. godina .............. 68 Tablica 7.5. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Otok 1996. godina............................... 69 Tablica 7.6. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Jastrebarsko 1997. godina................... 71 Tablica 7.7. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Lipovljani 1997. godina ...................... 72 Tablica 7.8. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Čazma 1997. godina ........................... 73 Tablica 7.9. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Donji Miholjac 1997. godina .............. 74 Tablica 7.10. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Otok 1997. godina............................... 75 Tablica 7.11. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Jastrebarsko 1998. godina................... 77 Tablica 7.12. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Lipovljani 1998. godina ...................... 78 Tablica 7.13. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Čazma 1998. godina ........................... 79 Tablica 7.14. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Donji Miholjac 1998. godina .............. 80 Tablica 7.15. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Otok 1998. godina............................... 81 Tablica 7.16. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Jastrebarsko, 1996. godina....... 84 Tablica 7.17. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Lipovljani, 1996. godina .......... 85 Tablica 7.18. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Čazma, 1996. godina................ 86 Tablica 7.19. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Donji Miholjac, 1996. godina .. 87 Tablica 7.20. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Otok, 1996. godina................... 88 Tablica 7.21. Zastupljenost gljiva izoliranih sa žira u postocima po područjima istraživanja i srednja vrijednost za sva područja zajedno, 1996. godina .......... 89 Tablica 7.22. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Jastrebarsko, 1997. godina....... 91 Tablica 7.23. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Lipovljani, 1997. godina .......... 92 Tablica 7.24. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Čazma, 1997. godina................ 93 Tablica 7.25. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Donji Miholjac, 1997. godina .. 94 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu VIII S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... POPIS TABLICA Tablica 7.26. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Otok, 1997. godina................... 95 Tablica 7.27. Zastupljenost gljiva izoliranih sa žira u postocima po područjima istraživanja i srednja vrijednost za sva područja zajedno, 1997. godina .......... 96 Tablica 7.28. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Jastrebarsko, 1998. godina....... 98 Tablica 7.29. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Lipovljani, 1998. godina .......... 99 Tablica 7.30. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Čazma, 1998. godina.............. 100 Tablica 7.31. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Donji Miholjac, 1998. godina 101 Tablica 7.32. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Otok, 1998. godina................. 102 Tablica 7.33. Zastupljenost gljiva izoliranih sa žira u postocima po područjima istraživanja i srednja vrijednost za sva područja zajedno, 1998. godina ........ 103 Tablica 7.34. Mikoflora skladištenog žira iz uroda 1999. godine ........................................ 105 Tablica 7.35. Rezultati ispitivanja klijavosti i zdravstvenog stanja sjemena, urod 2000. god................................................................................................ 110 Tablica 7.36. Mikoflora skladištenog žira, urod 2000. god.................................................. 111 Tablica 7.37. Broj i postotak uzoraka u kojima se nalaze navedene gljive na žiru.............. 112 Tablica 7.38. Sistematski prikaz gljiva utvrđenih na lužnjakovom žiru............................... 118 Tablica 7.39. Dimenzije spora gljiva prema autorima i prema izmjerama........................... 186 Tablica 7.40. Veličine izmjerenih spora najčešćih vrsta gljiva sa žira primjenom programa DP – Soft............................................................... 187 Tablica 7.41. Dijametralan rast kolonija gljiva (mm) po danima na temperaturi 22-25 °C. 205 Tablica 7.42. Srednje vrijednosti rasta gljiva (mm) po danima na temperaturi 22-25 °C.... 206 Tablica 7.43. Prosječna brzina rasta micelija u jednom danu, temperatura 22-25 °C.......... 206 Tablica 7.44. Dijametralan rast kolonija gljiva (mm) po danima na temperaturi 11-15 °C. 207 Tablica 7.45. Srednje vrijednosti rasta gljiva (mm) po danima na temperaturi 11-15 °C.... 208 Tablica 7.46. Prosječna brzina rasta micelija u jednom danu, temperatura 11-15 °C.......... 208 Tablica 7.47. Opis izgleda kolonije Ciboria batschiana i njenog razvoja tijekom izmjere rasta na temperaturi 22-25 °C............................................... 209 Tablica 7.48. Opis izgleda kolonije Graphium roboris i njenog razvoja tijekom izmjere rasta na temperaturi 22-25 °C............................................... 209 Tablica 7.49. Opis izgleda kolonije Fusarium avenaceum i njenog razvoja tijekom izmjere rasta ...................................................................................... 210 Tablica 7.50. Opis izgleda kolonije Phomopsis quercella i njenog razvoja tijekom izmjere rasta ...................................................................................... 210 Tablica 7.51. Opis izgleda kolonije Trichoderma viride i njenog razvoja tijekom izmjere rasta ...................................................................................... 210 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu IX S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... POPIS TABLICA Tablica 7.52. Zdravstveno stanje žira nakon tretiranja fungicidima .................................... 211 Tablica 7.53. Broj i postotak proklijalih žirova.................................................................... 212 Tablica 7.54. Visine klijanaca u pokusu tretiranja fungicidima ........................................... 213 Tablica 7.55. Struktura podataka u slučajnom blok dizajnu s 5 blokova i 6 tretmana ......... 214 Tablica 7.56. Analiza varijance za podatke klijavosti žira prikazane u tablici 1.................. 214 Tablica 7.57. Randomizirani blok dizajn (prema Bhattacharyya i Johnson, 1977.)................. 214 Tablica 7.58. Skupni prikaz t-vrijednosti pri testiranje hipoteze o razlikama između dva tretmana uz značajnost (signifikantnost) p = 0.01 ...................... 215 Tablica 8.1. Oštećenost žira prema raznim autorima ......................................................... 219 Tablica 8.2. Tipovi bolesti sjemena prema Prisjažnik, Regent i Glavaš ............................ 221 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu X S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... POPIS GRAFIKONA POPIS GRAFIKONA Grafikon 7.1. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Jastrebarsko 1996. godina................................................................................ 65 Grafikon 7.2. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Lipovljani 1996. godina ................................................................................. 66 Grafikon 7.3. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Čazma 1996. godina....................................................................................... 67 Grafikon 7.4. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Donji Miholjac 1996. godina ......................................................................... 68 Grafikon 7.5. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Otok 1996. godina .......................................................................................... 69 Grafikon 7.6. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Jastrebarsko 1997. godina ............................................................................... 71 Grafikon 7.7. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Lipovljani 1997. godina ................................................................................. 72 Grafikon 7.8. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Čazma 1997. godina....................................................................................... 73 Grafikon 7.9. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Donji Miholjac 1997. godina ......................................................................... 74 Grafikon 7.10. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Otok 1997. godina .......................................................................................... 75 Grafikon 7.11. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Jastrebarsko 1998. godina .............................................................................. 77 Grafikon 7.12. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Lipovljani 1998. godina ................................................................................. 78 Grafikon 7.13. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Čazma 1998. godina....................................................................................... 79 Grafikon 7.14. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Donji Miholjac 1998. godina ......................................................................... 80 Grafikon 7.15. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Otok 1998. godina .......................................................................................... 81 Grafikon 7.16. Gljive izolirane sa žira (%), Jastrebarsko, VII-X mjesec, 1996. godina .......... 84 Grafikon 7.17. Gljive izolirane sa žira (%), Lipovljani, VII-X mjesec, 1996. godina ........... 85 Grafikon 7.18. Gljive izolirane sa žira (%), Čazma, VII-X mjesec, 1996. godina................. 86 Grafikon 7.19. Gljive izolirane sa žira (%), Donji Miholjac, VII-X mjesec, 1996. godina ... 87 Grafikon 7.20. Gljive izolirane sa žira (%), Otok, VII-X mjesec, 1996. godina.................... 88 Grafikon 7.21. Srednja vrijednost (%) gljiva izoliranih sa žira za sva područja istraživanja, 1996. godinu .............................................................................. 89 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu XI S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... POPIS GRAFIKONA Grafikon 7.22. Gljive izolirane sa žira (%), Jastrebarsko, VII-X mjesec, 1997. godina ........ 91 Grafikon 7.23. Gljive izolirane sa žira (%), Lipovljani, VII-X mjesec, 1997. godina ........... 92 Grafikon 7.24. Gljive izolirane sa žira (%), Čazma, VII-X mjesec, 1997. godina................. 93 Grafikon 7.25. Gljive izolirane sa žira (%), Donji Miholjac, VII-X mjesec, 1997. godina ... 94 Grafikon 7.26. Gljive izolirane sa žira (%), Otok, 1997. godina............................................ 95 Grafikon 7.27. Srednja vrijednost gljiva izoliranih sa žira u % za sva područja istraživanja, 1997. godina................................................................ 96 Grafikon 7.28. Gljive izolirane sa žira (%), Jastrebarsko, VII-X mjesec, 1998. godina ........ 98 Grafikon 7.29. Gljive izolirane sa žira (%), Lipovljani, VII-X mjesec, 1998. godina ........... 99 Grafikon 7.30. Gljive izolirane sa žira (%), Čazma, VII-X mjesec, 1998. godina............... 100 Grafikon 7.31. Gljive izolirane sa žira (%), Donji Miholjac, VII-X mjesec, 1998. godina . 101 Grafikon 7.32. Gljive izolirane sa žira (%), Otok, 1998. godina.......................................... 102 Grafikon 7.33. Srednja vrijednost gljiva izoliranih sa žira u % za sva područja istraživanja, 1998. godina............................................................................. 103 Grafikon 7.34. Mikoflora žira, U.š.p. Zagreb, urod 1999. god............................................. 106 Grafikon 7.35. Mikoflora žira, U.š.p. Bjelovar, urod 1999. god. ......................................... 106 Grafikon 7.36. Mikoflora žira, U.š.p. Koprivnica, urod 1999. god...................................... 106 Grafikon 7.37. Mikoflora žira, U.š.p. N. Gradiška, urod 1999. god..................................... 107 Grafikon 7.38. Mikoflora žira, U.š.p. Našice, urod 1999. god. ............................................ 107 Grafikon 7.39. Mikoflora žira, U.š.p. Osijek, urod 1999. god. ............................................ 107 Grafikon 7.40. Mikoflora žira sveukupnih uzoraka, urod 1999. god. .................................. 108 Grafikon 7.41. Postotak uzoraka u kojima su prisutne navedene gljive............................... 108 Grafikon 7.42. Mikoflora žira, U.š.p. Karlovac, urod 2000. god. ........................................ 113 Grafikon 7.43. Mikoflora žira, U.š.p. Zagreb, urod 2000. god............................................. 113 Grafikon 7.44. Mikoflora žira, U.š.p. Bjelovar, urod 2000. god. ......................................... 113 Grafikon 7.45. Mikoflora žira, U.š.p. Koprivnica, urod 2000. god...................................... 114 Grafikon 7.46. Mikoflora žira, U.š.p. N. Gradiška, urod 2000. god..................................... 114 Grafikon 7.47. Mikoflora žira, U.š.p. Vinkovci, urod 2000. god. ........................................ 114 Grafikon 7.48. Mikoflora žira sveukupnih uzorka, urod 2000. god. .................................... 115 Grafikon 7.49. Postotak uzoraka u kojima su prisutne navedene gljive............................... 115 Grafikon 7.50. Alternaria tenuis – duljina spora.................................................................. 190 Grafikon 7.51. Alternaria tenuis – širina spora .................................................................... 190 Grafikon 7.52. Arthrobotrys arthrobotryoides – duljina spora ............................................ 191 Grafikon 7.53. Arthrobotrys arthrobotryoides – širina spora............................................... 191 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu XII S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... POPIS GRAFIKONA Grafikon 7.54. Fusarium avenaceum – duljina spora........................................................... 193 Grafikon 7.55. Fusarium avenaceum – širina spora............................................................. 193 Grafikon 7.56. Fusarium moniliforme – duljina spora ......................................................... 194 Grafikon 7.57. Fusarium moniliforme – širina spora ........................................................... 194 Grafikon 7.58. Graphium roboris – duljina spora................................................................ 196 Grafikon 7.59. Graphium roboris – širina spora .................................................................. 196 Grafikon 7.60. Pestalotia funerea – duljina spora................................................................ 197 Grafikon 7.61. Pestalotia funerea – širina spora.................................................................. 197 Grafikon 7.62. Pestalotia funerea – privjesci spora ............................................................. 197 Grafikon 7.63. Phomopsis quercella – duljina spora ........................................................... 199 Grafikon 7.64. Phomopsis quercella – širina spora.............................................................. 199 Grafikon 7.65. Phomopsis quercella – duljina stilospora..................................................... 200 Grafikon 7.66. Phomopsis quercella – širina stilospora....................................................... 200 Grafikon 7.67. Trichoderma viride – promjer spora ............................................................ 202 Grafikon 7.68. Trichothecium roseum – duljina spora ........................................................... 202 Grafikon 7.69. Trichothecium roseum – širina spora.............................................................. 202 Grafikon 7.70. Srednje vrijednosti rasta gljiva po danima, temperatura 22-25 °C .............. 206 Grafikon 7.71. Srednje vrijednosti rasta gljiva po danima, temperatura 11-15 °C .............. 208 Grafikon 8.1. Mikoflora žira, 1996. godina (VII-X mjesec)................................................ 223 Grafikon 8.2. Mikoflora žira, 1997. godina (VII-X mjesec) .............................................. 223 Grafikon 8.3. Mikoflora žira, 1998. godina (VII-X mjesec) .............................................. 224 Grafikon 8.4. Mikoflora žira, 1996-1998. godine, X mjesec............................................... 224 Grafikon 8.5. Mikoflora žira, 1999. godina, X mjesec....................................................... 225 Grafikon 8.6. Mikoflora žira, 2000. godina, X mjesec....................................................... 225 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu XIII S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... POPIS SLIKA POPIS SLIKA Slika 2.1. Rasprostranjenost hrasta lužnjaka (Quercus robur L.) u Hrvatskoj (Trinajstić, 1996.).............................................................................. 8 Slika 2.2. Šumski sjemenski rajoni hrasta lužnjaka (prema Gračan, 1996.) ......................... 9 Slika 2.3. Hrast lužnjak ....................................................................................................... 11 Slika 2.4. Uzdužni presjek ženskog cvijeta......................................................................... 11 Slika 2.5. Vanjski izgled žira .............................................................................................. 13 Slika 2.6. Uzdužni presjek žira i njegova građa (Olson, 1974. u Joung i Young, 1992.) ... 14 Slika 2.7. Klijanac hrasta lužnjaka peti dan nakon klijanja ................................................ 15 Slika 5.1. Područje istraživanja ........................................................................................... 28 Slika 5.2. Količine sakupljenog lužnjakovog žira (kg) na području istraživanja po upravama šuma za razdoblje od 1996-2000. godine...................................... 39 Slika 6.1. Platneno postolje za sakupljanje žira .................................................................. 44 Slika 6.2. Analiza zdravstvenog stanja žira, skidanje ljuske, kategoriziranje i stavljanje oboljelog žira u petrijeve zdjelice..................................................... 46 Slika 6.3. Izgled kotiledona ispod ljuske okularno zdravog žira ........................................ 47 Slika 6.4. Uzorci žira uroda 2000. godine u termostat klijalici na naklijavanju i potenciranju rasta gljiva ...................................................................................... 47 Slika 6.5. Radni uzorak žira na vlažnom steriliziranom pijesku treći tjedan nakon stavljanja u termostat klijalicu.................................................................. 48 Slika 6.6. Uzorak žira, četvrti tjedan praćenja klijanja i pojave simptoma bolesti. Uslijed bubrenja žira proraštenog gljivom došlo je do raspucavanja perikarpa . 48 Slika 6.7. Žir nakon ljuštenja ljuske.................................................................................... 48 Slika 6.8. Odvajanje žira po kategorijama: normalno isklijali žir, bolestan i gnjio te svježe neisklijali žir. .............................................................. 49 Slika 6.9. Kotiledoni žira sa simptomima oboljenja na inkubaciji u Petrijevim zdjelicama na vlažnom filtar papiru.................................................................... 50 Slika 6.10. Formiranje vegetativnog tijela gljive na kotiledonima žira u uvjetima vlažne komore u Petrijevoj zdjelici na filtar papiru............................................ 51 Slika 6.11. Kolonije različitih vrsta gljiva izoliranih sa žira i nasađenih na PDA hranjivu podlogu u Petrijevim zdjelicama ................................................. 51 Slika 6.12. Reizolacija gljiva u čiste kulture u besprašnoj komori ....................................... 52 Slika 6.13. Čiste kulture gljiva izoliranih sa žira. ................................................................. 52 Slika 6.14. Rast gljiva u Petrijevim zdjelicama u uvjetima temperature 12-15 °C............... 55 Slika 6.15. Prikaz dijametralne izmjere kulture gljive na PDA hranjivoj podlozi................ 55 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu XIV S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... POPIS SLIKA Slika 6.16. Ispitivanja rasta gljiva u uvjetima sobne temperature 22-25 °C (šesti dan) ....... 55 Slika 6.17. Laboratorijski pokus zaštite žira nakon dva tjedna............................................. 57 Slika 6.18. Uzorci žira u pokusu nakon četiri tjedna ............................................................ 57 Slika 6.19. Gljive na bolesnom žiru ...................................................................................... 57 Slika 6.20. Plan pokusa zaštite žira ....................................................................................... 59 Slika 6.21. Pokus zaštite žira u polju .................................................................................... 59 Slika 7.1. Ophiostoma roboris, periteciji na ljusci žira (× 7,5)......................................... 121 Slika 7.2. Ophiostoma roboris, sive pjege na kotiledonima zrelog žira (× 7,5) ............... 121 Slika 7.3. Kultura Graphium roboris, konidijski stadij gljive O. roboris......................... 122 Slika 7.4. Graphium roboris, detalj, koremiji s mliječnim glavicama (× 7,5).................. 122 Slika 7.5. Konidijski stadij Graphium roboris, koremiji iz kulture (× 100) ..................... 123 Slika 7.6. Graphium roboris, konidije iz koremija (× 200) .............................................. 123 Slika 7.7. Ophiostoma roboris, vrat peritecija s cilijama na vrhu i askospore (× 200)..... 124 Slika 7.8. Ophiostoma roboris, baza peritecija loptastog oblika (× 100) ......................... 124 Slika 7.9. Kolonija gljive Chaetomium globosum na prerano otpalom žiru (× 7,5) ......... 126 Slika 7.10. Chaetomium globosum, periteciji, detalj........................................................... 126 Slika 7.11. Chaetomium globosum, peritecij s dlačicama (× 100)...................................... 127 Slika 7.12. Chaetomium globosum, askospore (× 400)....................................................... 127 Slika 7.13. Ciboria batschiana, početni simptomi oboljenja, žute obrubljene pjege na kotiledonima ............................................................. 129 Slika 7.14. Ciboria batschiana, žir prorašten hifama gljive i prekriven smeđe-crnim micelijem..................................................................................... 130 Slika 7.15. Ciboria batschiana, kultura gljive na PDA stara 3 dana .................................. 130 Slika 7.16. Ciboria batschiana, kultura gljive stara 21 dan, formiraju se sklerociji, agar je crno obojen....................................................... 131 Slika 7.17. Ciboria batschiana, sklerociji (× 7,5)............................................................... 131 Slika 7.18. Plodište gljive Stereum hirsutum na žiru .......................................................... 133 Slika 7.19. Formiranje gljive Stereum hirsutum ispod ljuske žira ...................................... 133 Slika 7.20. Plodno tijelo gljive Schizophyllum commune formirano na uskladištenom žiru....................................................................... 135 Slika 7.21. Kolonija Penicillium divergens na žiru, vide se dugački koremiji ................... 138 Slika 7.22. Kultura Penicillium divergens izolirana sa žira ................................................ 138 Slika 7.23. Penicilium divergens, na površini kolonije starosti 5 dana vide se bezbojne kapljice .................................................................................. 139 Slika 7.24. Kolonija Penicillium luteo-viride na žiru oštećenom od insekata .................... 140 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu XV S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... POPIS SLIKA Slika 7.25. Izolirana kultura gljive Penicillium luteo-viride na PDA (krumpir dekstroza agar)................................................................................... 140 Slika 7.26. Verticillium albo-atrum, iz čiste kulture A i B konidiofori, C – konidije....................................................................................................... 142 Slika 7.27. Verticillium spp., konidije (100×) ..................................................................... 142 Slika 7.28. Žir zaražen gljivom Trichoderma viride........................................................... 144 Slika 7.29. Kultura gljive Trichoderma viride, vide se koncentrični krugovi bijelog i zelenog micelija s obzirom na noćni i dnevni rast.............................. 144 Slika 7.30. Trichoderma viride, žućkasti jastučići sporulirajućih konidiofora (× 7,5) ....... 145 Slika 7.31. Trichoderma viride, konidije (× 200) ............................................................... 145 Slika 7.32. Trichoderma viride, konidije (× 400) ............................................................... 146 Slika 7.33. Trichothecium roseum, kultura gljive na PDA, praškasta kolonija – stara 5 tjedana i pahuljasta – stara 3 dana)....................... 148 Slika 7.34. Trichothecium roseum, konidije (× 400) .......................................................... 148 Slika 7.35. Kolonija Aspergillus ochraceus na žiru (× 7,5) ................................................ 150 Slika 7.36. Aspergillus ochraceus, konidiofori i konidijalne glavice, detalj ...................... 150 Slika 7.37. Aspergillus ochraceus na PDA, nezrele i zrele konidijalne glavice (× 7,5) ..... 151 Slika 7.38. Konidije Aspergillus ochraceus (× 400) ........................................................... 151 Slika 7.39. Alternaria alternata, konidije (× 200) .............................................................. 153 Slika 7.40. Alternaria alternata, konidije (bocaste, eliptične, jajolike) (× 400)................. 153 Slika 7.41. Žir zaražen gljivom Botrytis cinerea (prema Prochazkova u Kristek i drugi, 1992.) .................................................. 155 Slika 7.42. Botritys cinerea, konidiofori i konidije (× 100)................................................ 155 Slika 7.43. Fusella olivacea, 1: kolonija gljive na površini žira, 2: konidije (Prochazkova u Kristek i drugi,1992.) .............................................................. 156 Slika 7.44. Stysanus stemonites........................................................................................... 157 Slika 7.45. Stysanus spp. ..................................................................................................... 157 Slika 7.46. Kolonija gljive Arthrobotrys arthrobotryoides na uskladištenom žiru............. 159 Slika 7.47. Kultura gljive Atrhbotrys arthrobotryoides na PDA (stara 5 dana).................. 160 Slika 7.48. Kultura gljive Atrhrobotrys arthrobotryoides na PDA (stara 5 dana) s donje strane petri-zdjelice............................................................................... 160 Slika 7.49. Atrhrobotrys arthrobotryoides, konidiofor i konidije (× 200).......................... 161 Slika 7.50. Kolonija gljive Arthrobotrys superba na prerano otpalom žiru (× 7,5)............ 161 Slika 7.51. Micelij gljive F. sambucinum u kapici nezrelog žira........................................ 164 Slika 7.52. Kolonija gljive F. sambucinum na protrulom žiru iz skladišta ......................... 164 Slika 7.53. Kultura gljive F. sambucinum izolirana sa žira ................................................ 165 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu XVI S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... POPIS SLIKA Slika 7.54. Kultura gljive F. avenaceum, starosti 10 dana, bijeli vatasti micelij s tragovima roskaste boje...................................................................... 166 Slika 7.55. Kultura gljive F. avenaceum s donje strane, pigmentacija boje vina i žućkasto smeđa................................................................................ 167 Slika 7.56. F. avenaceum, masne nakupine u kojima se formiranju makrokomidije ......... 167 Slika 7.57. Fusarium moniliforme, kultura na PDA s formiranim pionotama (želatinoznim nakupinama) (× 7,5)................................................................... 169 Slika 7.58. Fusarium moniliforme, mikro i makro konidije (× 400)................................... 169 Slika 7.59. Fusarium oxysporum, kolonija izolirana sa žira ............................................... 171 Slika 7.60. Fusarium oxysporum, mikrokonidije i makrokonidije iz kulture (× 400) ........ 171 Slika 7.61. Kultura gljive Pestalotia castagnei s formiranim acervulima .......................... 173 Slika 7.62. Konidije gljive Pestalotia castagnei (× 200) .................................................... 173 Slika 7.63. Izolat gljive P. funerea na PDA (detalj) s formiranim plodnim tijelima acervulima ............................................................................. 174 Slika 7.64. Kultura gljive P. funerea na PDA, stara 7 dana (gornja strana) ....................... 175 Slika 7.65. Kultura gljive P. funerea na PDA, stara 7 dana (donja strana)......................... 175 Slika 7.66. P. funerea, konidije (× 200) .............................................................................. 176 Slika 7.67. P. funerea, konidije (× 400) .............................................................................. 176 Slika 7.68. Gloeosporium quercinum.................................................................................. 179 Slika 7.69. Izgled zaraženog žira gljivom Gloeosporium quercinum ................................. 179 Slika 7.70. Početni simptomi zaraze žira gljivom Phomopsis quercella ............................ 181 Slika 7.71. Phomopsis quercella, zaraženi žir prekriven bijelim micelijem 14 dana nakon stavljanja na vlagu, na sobnoj temperaturi ............................... 181 Slika 7.72. Phomopsis quercella, piknide i vijugave vitice konidija 8 tjedana nakon stavljanja na vlagu, na sobnoj temperaturi ............................. 183 Slika 7.73. Phomopsis quercella na PDA, kultura stara 3 dana.......................................... 183 Slika 7.74. Phomopsis quercella na PDA, kultura stara 2 tjedna........................................ 184 Slika 7.75. Phomopsis quercella, kultura stara 6 tjedana, formirane crne piknide............. 184 Slika 7.76. Phomopsis quercella, kultura stara 8 tjedana, iz piknida izlaze vitice konidija 185 Slika 7.77. Phomopsis quercella, konidije (obične i stilospore), u običnim konidijama vide se dvije uljne kapi (× 400) .................................... 185 Slika 7.78. Primjeri računalne izmjere spora ...................................................................... 188 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu XVII S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 1. UVOD I PROBLEMATIKA 1. UVOD I PROBLEMATIKA Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 1 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 1. UVOD I PROBLEMATIKA U obnovi šuma svih šumskih vrsta drveća, pa tako i šuma hrasta lužnjaka (Quercus robur L.), sjeme ima vrlo značajnu ulogu. O urodu žira, njegovoj kvaliteti i zdravstvenom stanju ovisi kvaliteta buduće lužnjakove sastojine. Kvalitetno sjeme osnova je za uspješnu prirodnu ili umjetnu obnovu sastojina i njihov daljnji razvoj. Isto tako je i preduvjet za proizvodnju kvalitetnih hrastovih sadnica u rasadnicima. Urod žira hrasta lužnjaka je posljednjih desetljeća u Hrvatskoj slab, neredovit i često slabe kvalitete. Uzroci tome leže najčešće u poremećenim ekološkim i sastojinskim uvjetima. Izostanak ili slabi urod kvalitetnog žira znatno otežava radove na prirodnom pomlađivanju lužnjakovih sastojina zbog čega se često pribjegava njihovoj umjetnoj obnovi bilo sadnjom uzgojenih sadnica, sadnjom žira ili sjetvom žira po površini. Često se kombinira prirodna i umjetna obnova sastojina. U provođenju takvih zahvata potrebne su velike količine kvalitetnog i zdravog žira. U gospodarenju lužnjakovim šumama posvećuje se sve veća pažnja urodu žira, njegovom skupljanju, uskladištenju, brizi za očuvanje kvalitete i zdravstvenog stanja do pripreme za sjetvu odnosno sadnju. Žir je u svim fazama razvoja od cvatnje, oplodnje, dozrijevanja, te poslije otpadanja, sakupljanja i uskladištenja, ugrožen od raznih biotskih i abiotskih čimbenika. Među biotskim čimbenicima najznačajniju ulogu imaju štetni kukci i gljivični organizmi. Štete uzrokovane od gljivičnih organizama, kako općenito na šumskom i drugom sjemenu, tako i na žiru su ogromne. Sjeme žira može biti kontaminirano na svojoj površini i u unutrašnjosti velikim brojem najrazličitijih vrsta gljiva, koje umanjuju njegovu vitalnost, odnosno klijavost i energiju klijavosti ili ga potpuno razaraju. Neke vrste gljiva prelaze i na klijance, te uzrokuju štete i gubitke, kao na primjer traheomikoze. Kod nas i za naše uvjete dosadašnja istraživanja gljivičnih uzročnika oboljenja na šumskom sjemenu su malobrojna i nedostatna. To se odnosi i na žir hrasta lužnjaka. S obzirom da su već i prethodna istraživanja kao i podaci dobiveni putem dijagnostičko prognozne službe Odjela za zaštitu šuma i lovstvo pri Šumarskom institutu Jastrebarsko ukazali na važnost i mnogobrojnost mikoflore na žiru hrasta lužnjaka, izabrana je ova problematiku za temu disertacije. Kada govorim o zdravstvenom stanju i gljivama uzročnicima bolesti sjemena ne mogu, a da se ne osvrnem na problematiku šumskog sjemenarstva. Šumskim sjemenarstvom, nadzorom nad proizvodnjom i uporabom šumskog sjemena te utvrđivanjem kakvoće sjemena bavi se Odjel za oplemenjivanje i šumsko sjemenarstvo unutar Šumarskog instituta Jastrebarsko. Organizirano šumsko sjemenarstvo u Hrvatskoj postoji već više Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 2 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 1. UVOD I PROBLEMATIKA od četrdeset godina, od osnivanja Zavoda za kontrolu šumskog sjemena 1959. godine u Rijeci te nastavlja rad osnivanjem Šumarskog instituta u Jastrebarskom 1974. godine unutar Odjela za oplemenjivanje i šumsko sjemenarstvo pa sve do danas (Gradečki, 1999. i Poštenjak, 1999.). Od tada pa do danas istraživanja ukazuju na trend rasta potrošnje žira po desetgodištima s razmjerom 1:18:62 te blagi pad kvalitativnih svojstava – klijavosti, vitaliteta i apsolutne težine što je vjerojatno posljedica narušenog vitaliteta sastojina (Gradečki, Poštenjak, Topolovec, 1993, 1997.). Na višestruko povećanje potrošnje šumskog sjemena utjecao je izostanak očekivane i planirane prirodne obnove lužnjakovih šuma (Gradečki, Poštenjak, 1996.). Žir lužnjaka koristi se u umjetnoj obnovi lužnjakovih šuma preko stoljeća i pol, što ovisi o površinama koje se obnavljaju, a isto tako o količini, kakvoći te periodicitetu uroda (Gradečki, Poštenjak i Topolovec, 1997.). Gradečki i Poštenjak (1996.) pretpostavljaju da se za godišnje potrebe jednostavne biološke reprodukcije upotrijebi 700 000 kg žira za pošumljavanje i 1 050 000 kg za popunjavanje, a za obaveznu proširenu biološku reprodukciju upotrijebi se 1 0 50 000 kg odnosno sveukupno 2 800 000 kg žira. Paralelno s povećanjem potrošnje šumskog sjemena povećao se i broj uzoraka žira za analizu (Gradečki i Poštenjak, 1996.), a s time i potreba iznalaženja brzih metoda analize kakvoće sjemena. Prilikom ispitivanja kvalitete sjemena utvrđuje se i zdravstveno stanje. Zaraženost sjemena gljivicama, prisutnost odnosno odsutnost zaraze, utvrđuje se makroskopski (golim okom ili lupom). Mikroskopske ili fitopatološke analize koje uključuju determinacije vrsta gljiva se za sada ne provode. Zbog važnosti porijekla sjemena koje se koristi za sjetvu na terenu i proizvodnju sadnica, u Hrvatskoj je napravljena sjemenska rajonizacija za hrast lužnjak kao i za druge značajne autohtone i alohtone vrste drveća. Šumske površine podijeljene su na oblasti (područja), zone i rajone (jedinice). Razdjelbu je izradila Komisija za rajonizaciju "Hrvatskih šuma" d.o.o. Zagreb na temelju Zakona o šumskom sjemenu i šumskom sadnom materijalu, NN 11/1009., (Gračan i dr., 1999.). Rajonizacija se temelji na područjima provenijencija pojedine vrste šumskog drveća, prirodnom rasprostranjenju, genetičkoj izdiferenciranosti i uspijevanju. Sjeme ili sadnice hrasta lužnjaka mogu se upotrebljavati samo pri obnovi lužnjakovih sastojina ili pretvorbi sastojinskih oblika i pri tom je dopuštena uporaba sjemena i sadnica unutar jednog sjemenskog rajona, iznimno između susjednih rajona iste sjemenske zone (Matić, Orlić i Harapin, 1996.). Unutar sjemenskih rajona hrasta lužnjaka izdvojeno je 60 priznatih sjemenskih sastojina na 2 895 ha i 68 izabranih sjemenskih sastojina na 8 697 ha što ukupno čini 11 592 ha sjemenskih objekata (Matić, Orlić i Harapin, 1996.). Sjemenske sastojine hrasta lužnjaka, prema Gračanu (1996.), Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 3 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 1. UVOD I PROBLEMATIKA su plus sastojine tj. dobro razvijene srednjodobne i stare sastojine, kvalitetnih i zdravih stabala, fenotipski dobrog izgleda, velikog prirasta, prorjeđivane i tretirane kako bi proizvele velike količine žira dobre kvalitete. Priznate sjemenske sastojine namijenjene proizvodnji sjemena za potrebe umjetne obnove lužnjakovih šuma ne mogu uvijek zadovoljiti potrebe za sjemenom i zbog toga su pojedine gospodarske šume izdvojene i registrirane kao izabrane sjemenske sastojine za sakupljanje šumskog sjemena. Matić (1976, 1990.) i Matić, Orlić i Harapin (1996.) smatraju da pri skupljanju sjemena u lužnjakovim šumama treba odrediti samo one sastojine iz kojih se ne bi smjelo sakupljati sjeme zbog njihove loše kvalitete jer, po njihovom mišljenju, većina lužnjakovih šuma je kvalitetno. Sjeme sakupljeno u prirodnim šumskim sastojinama naziva se normalno šumsko sjeme čija genetička dobit u potomstvu iznosi 3-5%. Da bi genetska dobit bila 15-30% potrebno je proizvesti selekcionirano sjeme (Gradečki, 1999.). Selekcionirano sjeme potječe iz sjemenske plantaže tj. kulture genetski superiornih stabala. Zadnjih godina zbog potrebe za kvalitetnim sjemenom počelo se s osnivanjem sjemenskih plantaža (Littvay, 1999. i Žgela, 1999.). Na takvim objektima posebno je važno usmjeriti pažnju na zdravost sjemena i njegovo očuvanje od raznih štetnih čimbenika. Uporaba sjemena značajno ovisi o njegovoj kakvoći i zdravstvenom stanju. Na temelju mnogogodišnjih laboratorijskih istraživanja kakvoće lužnjakovog žira Odjela za sjemenarstvo Šumarskog instituta, Gradečki, Poštenjak i Topolovec (1997.) dolaze do podataka da klijavostvitalitet lužnjakovog žira iznosi 80-85% i da ima trend blagog opadanja te da se u 1 kg žira nalazi 150-200 komada sjemena. Količina uroda sjemena znatno ovisi o pojavi abiotskih i biotskih čimbenika. Sjeme hrasta lužnjaka u svojoj ranoj fazi razvoja osjetljivo je na negativan utjecaj abiotskih čimbenika posebno klimatskih poput mraza, suše i tuče koji ga mogu znatno oštetiti i izazvati prijevremeno otpadanje. Žir je bogat hranjivim tvarima i kao takav privlačan je za hranu mnogim životinjskim vrstama (ptice, šumski glodavci, divljač), za hranu i stanište kukcima (žirotoč, savijačima, osama šiškaricama) a pogodan je i kao supstrat za razvoj mnogih gljivičnih organizama. Analizirajući oštećenost lužnjakovog žira razni autori navode podatke vezane uz svoja specifična istraživanja. U svim tim istraživanjima podaci o oštećenosti gljivama samo se usputno spominju i stoga su manjkavi i nedovoljni. Ispitivanjem oštećenja lužnjakovog žira u sjemenskoj sastojini Kupinske grede na području Šumskog gospodarstva Sremska Mitrovica, Maksimović i dr. (1982.) nalazili su najviše trulog žira od kraja lipnja do polovice kolovoza, a manje do kraja vegetacije i ustanovili su da gljivice Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 4 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 1. UVOD I PROBLEMATIKA mogu uništiti petinu uroda žira (4,2-24%) ali pri tom nisu određivali uzročnike truleži. Smanjenje uroda uslijed šteta od viših životinja iznosilo je 22,1-61,6%. Ukupne štete od insekata kretale su se od 25-55,8% uroda. Postotak zdravog žira iznosio je 1978-1980. godine samo 0,8-5,8%, a 1981. 15-20% ukupnog uroda. Hrašovec (1991.) prilikom istraživanja biologije žirotoča ustanovio je da su uzročnici šteta na žiru, sakupljenom na području Gornje Posavine, Jastrebarski i Turopoljski lug, vrste iz roda Balaninus 10-25%, savijači Cydia spp. 10-12%, šumski glodavci 8-18% te ostali uzročnici 3-4%. U Šumariji Veliki Grđevac u proljeće 1996. godine je zapaženo da je više od 50% žira iz uroda 1995., skladištenog u prirodnim uvjetima u šumi, propalo. Analizom uzorka žira u fitopatološkom laboratoriju Šumarskog instituta Jastrebarsko, ustanovljeno je da se radi o bolesti mumifikacija žira čiji uzročnik je gljiva Ciboria batschiana (Zapf.) Buchv. Harapin i dr. (1996.) tijekom istraživanja izostanka uroda žira došli su do zaključka da biotički čimbenici mogu smanjiti urod žira do 79%, od toga žirotoči 30%, savijači 15%, ose šiškarice 12% te ostali potrošači 22% tako da zdravog žira preostaje svega 21%. Osim toga može se dogoditi da samo jedna skupina između biotičkih čimbenika uništi 75% i više uroda žira. Hrašovec i dr. (1996.) prilikom istraživanja štetnika i bolesti najvažnijih vrsta drveća Hrvatske na hrastovom žiru napadnutom žirotočem često su nalazili gljive: Ophiostoma quercus (Georgev) Naunf., Gloeosporium quercinum West., Trichoderma viride Pers. Ex Gray., Alternara spp. i Penicilium spp. Margaletić (1998.) analizirajući veličine štete od glodavaca na lužnjakovom sjemenu s područja Turopoljskog luga utvrdio je da je u uzorku 82,9% sjemena bilo zdravo, dok je ostatak bio oštećen i to: od mišolikih glodavaca 2,35%, žirotoča (Balaninus spp.) 6,70%, savijača (Cydia spp.) 6,29% i gljiva 1,76%. Prilikom istraživanja kvantitativnih i kvalitativnih osobina žira hrasta lužnjaka u sastojinama sliva rijeke Česme Saračević (2002.) između ostalog ustanovila je da učešće okularno zdravog žira iznosi od 31,64% do 69,16% odnosno prosječno 50,89% te zaključuje da na istraživanom području 1998. godine nije bila značajnija gradacija štetnika hrastova žira. Uočila je da su stare sastojine najbolje rodile žirom, ali najveće učešće okularno zdravog žira imali su uzorci iz srednje Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 5 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 1. UVOD I PROBLEMATIKA dobnih sastojina. Poštenjak i Gradečki (2001.) su prilikom istraživanja uroda žira i utvrđivanja parametara kakvoće sjemena dobili sljedeće podatke glede obavljene kategorizacije žira: zdravi žir sudjeluje s 63,68%, bolesni, gnjili i neupotrebljivi (koji je napadnut od insekata i gljivičnih oboljenja s 36,32%. Nadalje, od zdravog žira, samo 40,42% se može upotrebljavati za sjemenarstvo, tj. gotovo 60% količine žira nije upotrebljivo. Za razlog navode izostanak pravovaljane zaštite sastojine i plodonošenja. Iz svih ovih podataka može se vidjeti koliko je žir ugrožen od različitih štetnika i gljiva ali isto tako da zaraza gljivičnim organizmima i definiranje njihovih vrsta koje dolaze na žiru nije dovoljno istraženo. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 6 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 2. O OSNOVNIM ZNAČAJKAMA HRASTA LUŽNJAKA... 2. O OSNOVNIM ZNAČAJKAMA HRASTA LUŽNJAKA (Quercus robur L.) 2. O OSNOVNIM ZNAČAJKAMA HRASTA LUŽNJAKA (Quercus robur L.) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 7 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 2. O OSNOVNIM ZNAČAJKAMA HRASTA LUŽNJAKA... Hrast lužnjak je šumsko-gospodarski najvrjednija i najvažnija vrsta drveta hrvatskih šuma, poznata u svijetu kao slavonska hrastovina. Od ukupnog drvnog fonda u Hrvatskoj na lužnjak otpada 15,7%, što ga po zastupljenosti svrstava odmah iza bukve (Matić, 1989.). Drvna zaliha lužnjaka na panju (Klepac, 1996.) iznosi 41,5 milijuna m3. Glavna je vrsta nizinskih šuma u porječju rijeke Save i Drave, od rijeke Kupe na zapadu, pa do Dunava na istoku Hrvatske (Starčević, 1999.), a dolazi i u poplavnim područjima kraških polja (Ličko, Imotsko, Sinjsko i Vrličko) te u dolini rijeke Mirne u Istri (slika 2.1.). Sastojine hrasta lužnjaka u Hrvatskoj zauzimaju 150 000 ha, od čega šumski bazen u Spačvi prema Raušu (1986.) čini kompleks od 60 000 ha. Slika 2.1. Rasprostranjenost hrasta lužnjaka (Quercus robur L.) u Hrvatskoj (Trinajstić, 1996.) Šuma hrasta lužnjaka podijeljena je, prema grupi autora Gračan, Krstinić, Matić, Rauš i Seletković (1995.), na sjemenske oblasti, zone i rajone. Većina lužnjakovih šuma nalazi se u sjemenskoj oblasti nizinskih šuma (oznake I), koja pripada eurosibirsko-sjevernoameričkoj šumskoj regiji, a dijeli se na dvije sjemenske zone i šest sjemenskih rajona. To su: Sjemenska zona nizinskih Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 8 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 2. O OSNOVNIM ZNAČAJKAMA HRASTA LUŽNJAKA... šuma u Podravini i Podunavlju (I.1.) s rajonima Baranja, đakovački i vukovarski ravnjak (I.1.1.), srednja Podravina (I.1.2.) i gornja Podravina (I.1.3.) te Sjemenska zona nizinskih šuma u Posavini, srednjoj Hrvatskoj i Pokuplju (I.2.) s rajonima donja Posavina (I.2.1.), srednja Posavina (I.2.2.) te gornja Posavina i Pokuplje (I.2.3.). Mali dio naših lužnjakovih šuma nalazi u sjemenskoj oblasti mediteranskih šuma (oznake IV) u sjemenskoj zoni jugozapadna Istra (IV.1.) u rajonu Motovunska šuma (slika 2.2.). Slika 2.2. Šumski sjemenski rajoni hrasta lužnjaka (prema Gračan, 1996.) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 9 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 2. O OSNOVNIM ZNAČAJKAMA HRASTA LUŽNJAKA... Unutar svog nizinskog cjelovitog areala hrast lužnjak u Hrvatskoj pripada dvjema glavnim šumskim zajednicama s nekoliko podzajednica (Rauš, 1996.). To su: Šuma hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quercetum roboris Anić 1959, Rauš 1969.) s podzajednicama: tipična (typicum, Rauš 1971.), s bukvom (fagetosum Rauš 1971.), s cerom (quercetosum cerris Rauš 1969.) i s lipom (tilietosum tomentosae Rauš 1969.) te Šuma hrasta lužnjaka s velikom žutilovkom (Genisto elate – Quercetum roboris Ht. 1938.) s podzajednicama: s drhtavim šašem (caricetosum brizoides Ht. 1938.), rastavljenim šašem (caricetosum remote Ht. 1938.) i sa žestiljem (aceretosum tatarici Rauš 1988.). Hrast lužnjak je hidrofilna i heliofilna vrsta. Zahtjeva duboka, svježa do vlažna pjeskovito glinasta tla, bogata hranjivima. Lužnjak je visoko listopadno drvo, naraste i do 50 m visine, prsnog promjera do 250 cm, pa i više kod vrlo starih i soliternih stabala. Razvija bogato razgranjenu krošnju s jakim granama. Soliterna stabla imaju kratko deblo sa široko ovalnom krošnjom, dugim i debelim granama. U sklopu sastojina ima dugo ravno deblo i slabije razvijenu krošnju. Hrast lužnjak je monoecijska vrsta, tj. muški i ženski cvjetovi su smješteni na istom domaćinu (Slika 2.3.). Cvate u prosjeku u travnju i u svibnju. Za početak cvatnje važne su dnevne prosječne temperature. Muški su cvjetovi sjedeći na resama 2-5 cm dužine, imaju 6-8 prašnika s golim filamentima. Perigon im je sastavljen od 5-8 žućkastozelenih linealno lancetastih, u gornjem dijelu naglo ušiljenih, pri dnu sraslih listića. Razvijaju se na vrhu prošlogodišnjeg izbojka i pojavljuju se prije listanja. Ženski cvjetovi se razvijaju na vrhu ovogodišnjih izbojaka. Oni su pojedinačni ili u čupercima do pet cvjetova raspoređenih u rahlu resu na dugoj stapci (Trinajstić, 1974.). Ženski cvijet sastoji se od cvjetne lože (čašica cvjetišta), perigona (cvjetnog omotača) s 3 – 9 jednakih listića i tučka kojeg čine plodnica, vrat i njuška tučka. Prema Jovanović i Vukičević (1983.) plodnicu čine tri srasle karpele (plodni listovi) sa 6 sjemenih zametaka koji obično svi osim jednoga zakržljaju, a tučak najčešće završava s 3 – 4 žiga (njuška, stigma) koji se ponekad zadrže i na plodu. Na slici 2.4. prikazan je presjek cvijeta prema Magdefrau i Ehrendorfer (1978.) na kojem se vide stigme (njuške tučka), vrat tučka, perigon, sjemeni zameci i kupula (čašica). Na cvatnju i dobar urod žira utječu dob stabala, njihovo zdravstveno stanje, razvijenost krošnje, tj. količina svjetla koja dospijeva u unutrašnjost krošnje, vremenske prilike u prethodnoj vegetaciji, tj. u vrijeme formiranja cvjetnih pupova, zatim dovoljan broj muških i ženskih cvjetova kao i povoljan odnos broja muških i ženskih cvjetova. Ove je podatke moguće procijeniti prije kretanja vegetacije, odnosno cvatnje, tako da se sa vrha stabala skinu grane, koje se Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 10 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 2. O OSNOVNIM ZNAČAJKAMA HRASTA LUŽNJAKA... stavljaju u vodu i drže na temperaturi 20-25o C. Kroz 15-20 dana razviju se cvjetni pupovi i na osnovu njihove pojave prognozira se intenzitet cvatnje. Šumarski institut prati pojavu cvatnje uporedo sa praćenjem intenziteta napada defolijatora na hrastovim granama, a u svrhu prognoze i dijagnoze napada štetnika, uzročnika golobrsta u hrastovim sastojinama. Slika 2.3. Hrast lužnjak. 1a – graničice s muškim i ženskim cvjetovima, 1b – grančica s plodovima, 1c – zimska grančica, 1d – muški cvijet (2,5×), 1e – vrh izbojke sa ženskim cvjetovima (2,5×), 1f – žir, 1g – žirova kupula (Jovanović, Vukičević, 1983.) Slika 2.4. Uzdužni presjek ženskog cvijeta: a-stigme, b-vrat, c-perigon, d-tučak, e-kupula, f-sjemeni zameci (Mägdefrau i Ehrendorfer, 1978.) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 11 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 2. O OSNOVNIM ZNAČAJKAMA HRASTA LUŽNJAKA... Hrast lužnjak je alogamna vrsta, odnosno vrsta stranooplodnje, iako se smatra da je moguća i samooplodnja. Na muškim resama se proizvode velike količine polena, koji se vjetrom raznosi na velike udaljenosti, 60-70 km, a u visinu 2000-3000 m. Količina polena u zraku ovisna je o temperaturi, vjetrovima i oborinama. Povoljno je da u vrijeme masovne cvatnje bude određeno vrijeme bez kiše. Štete u vrijeme cvatnje mogu nastati i od niskih temperatura i mrazeva. Osim abiotskih čimbenika na uspjeh oprašivanja utječu i biotski čimbenici, koji mogu znatno smanjiti ili uništiti cvatnju. Plod hrasta lužnjaka je žir. Žir dolazi pojedinačno ili po 3-5 žirova na 3-6-(16) cm dugim zajedničkim stapkama. Žir dozrijeva iste godine kad i cvate, krajem rujna i tijekom listopada i osipa se sve do prosinca. Žir pripada skupini plodova pod nazivom pojedinačni plodovi čija karakteristika je da se razvijaju iz jedne plodnice; u podskupinu nepucavci za koje je karakteristično da nastaju iz jednog ili više plodničkih listova, ostaju trajno zatvoreni, sjemenke se obavijaju čitavim perikarpom ili samo njegovim dijelovima; te u grupu suhi nepucavci (orah, oraščić, orašica, nux) nadrastao plod kod kojeg sjemenka nije srasla s usplođem, otpada čitav i odvaja se pomoću posebnog staničja kao npr. plodovi obavijeni kupulom (Plavšić-Gojković, 1983.). Pod nazivom plod u botaničkom smislu podrazumijevamo sjeme s usplođem (perikarp), koje može biti sočno, drvenasto, kožasto, mesnato itd. (Regent, 1980.). Plod može sadržavati jednu, dvije ili više sjemenki. Žir je jednosjemeni plod. Sjeme je čvrsto obavijeno perikarpom i ne vadi se jer praktički čitav plod predstavlja sjemenku. Dolazi pojedinačno ili u skupinama 3-5 na zajedničkoj peteljci. U vrijeme razvoja žir je općenito zelen, dok u vrijeme dozrijevanja postaje svjetlo smeđe do smeđe boje, na površini je lagano uzdužno isprugan. Žir lužnjaka je duguljast do elipsoidan, na vrhu ima kratko istaknuto ispupčenje. Žir je pokriven ljuskavom polukuglastom kapicom (modificirana ovojnica) nazvanom kupula. Kapica pokriva oko 1/3 dužine žira. Na bazi, koju pokriva kapica, žir ima hrapavu okruglu brazgotinu svjetlije boje koja se naziva hilum ili pupak. Hilum je mjesto s kojim je sjemenka pričvršćena za dršku odnosno matičnu biljku. Na vrhu žira nalazi se mikropila, mjesto na kojem sjemenska ljuska puca kada sjeme počne klijati (slika 2.5.). Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 12 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 2. O OSNOVNIM ZNAČAJKAMA HRASTA LUŽNJAKA... Slika 2.5. Vanjski izgled žira Žir se sastoji od sjemena i vanjske sjemene ljuske (perikarpa). Perikarp je odrvenio, gol i sjajan. Sjeme se sastoji od embrija i unutarnje sjemenske ljuske (testa). Nema endosperma a ulogu skladišta hrane, koja daje energiju potrebnu za klijanje i početni razvoj biljčice, preuzeli su kotiledoni. Embrij predstavlja malu, potpunu biljčicu. Embrij kod žira ispunjava čitavu unutrašnjost sjemenke a sastoji se od: kotiledona (sjemenski listovi, supke), epikotila (sjemenski pup, vegetacijski vršak, plumula), hipokotila (stručak) i radikule (sjemenski korjenčić) (slika 2.6.). Kotiledoni su jedini izvor hranjiva za vrijeme prve godine i imaju važan utjecaj na rast klijanaca posebno na siromašnom tlu ili u slučaju oštećenja mlade biljčice (Brookes i drugi, 1980. u Andersson i Frost, 1996.). Epikotil tj. plumula razvija se između stapki kotiledona. Predstavlja ishodište za produženje stabljičice, stvara prve prave listove tzv. primarme listove (slika 2.7.). Hipokotil se nalazi između ishodišta kotiledona i korjenčića. Iz njega i plumule nastaje biljčica koja nosi prve listove. Radikula je smještena na vršnom ušiljenom dijelu hipokotila. Iz nje se razvija korijen. Sjemenska ljuska se razvija iz integumenta (zaštitni sloj oko jezgre ovule). Njena zadaća je štititi sjeme od nepovoljnih vanjskih utjecaja (gnječenje, isušenje, napad kukaca, gljiva, bakterija i sl.). Vanjska sjemenska ljuska je tvrda i inkrustirana a unutrašnja je tanka i membranasta. Žir klija hipogeično, tj. kotiledone ostaju ispod površine tla. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 13 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 2. O OSNOVNIM ZNAČAJKAMA HRASTA LUŽNJAKA... Slika 2.6. Uzdužni presjek žira i njegova građa (Olson, 1974. u Joung i Young, 1992.) Hrast lužnjak spada u sekciju bijelih hrastova za koje je karakteristično da su slabo dormantni ili da uopće nisu dormantni i počinju klijati ubrzo nakon opadanja (Young i Young 1992.). Žirove bijelih hrastova treba sakupiti odmah nakon opadanja da se uspori rano klijanje kao i da se zaštiti od napada insekata, zaraze gljivama te od glodavaca. Žir posijan u jesen može klijati iste godine ali većinom klije u rano proljeće. Ako nije posijan iste jeseni nakon sakupljanja mora biti djelomično prosušen i mora se čuvati na način sličan stratifikaciji tj. u podrumu u smjesi sa suhim pijeskom na temp. od 0,5 do 2 °C prema Jovanović (1983.) ili jednostavnije u hladnjači u PVC vrećama na temp. 0 do 2 °C prema Ocvirek, Orlić (1990.). Žir može klijati i za vrijeme skladištenja ali to nije problem jer otkidanje malih korjenčića pomaže razvoju razgranjenog korjenovog sistema (Jovanović i Tucović, 1975.). Da bi žir mogao klijati sadržaj vlage unutar žira mora iznositi 30 do 50% (Young i Young 1992.). Klijavost žira prema Jovanović i Vukićević (1983.) kreće se od 60-70%, a prema Gradečki i dr. (1996.) iznosi 78,6%. Veličina žira hrasta lužnjaka je prilično varijabilna, što ovisi o staništu, provenijenciji, ishranjenosti stabala i drugim čimbenicima. Dužina mu je od 1,5-5 cm, a promjer od 0,7-2,7 cm (Trinajstić, 1974.). Broj žireva u jednom kilogramu je također varijabilan. Regent (1980.) daje podatke od 130 do 290, prosječno 180 komada u jednom kilogramu. Jovanović i Tucović (1978.) daju podatke od 250 do 300 komada. Prema Gradečki, Poštenjak i Topolovac (1993. i 1996.) 1 kilogram sadrži 150-220 odnosno prosječno 159 komada žira dok Roth (1999.) navodi 172 komada u sjemenskoj zoni Podravine i Podunavlja. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 14 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 2. O OSNOVNIM ZNAČAJKAMA HRASTA LUŽNJAKA... Težina 1000 komada žira (apsolutna težina) iznosi 3,5-4 kg prema Vidakoviću (1996.), prosječno 4,4 kg prema Matić (1996.), odnosno od 5,0 do 8,2 kg, prosječno 6,4 kg prema Gradečki i dr. (1996.). Razvoj žira, do vremena sazrijevanja i nadalje je pod utjecajem abiotskih (naročito klimatskih uvjeta) i biotskih čimbenika, od kojih insekti i gljive u velikoj mjeri mogu utjecati na kvantitet i kvalitet zrelog žira. Puni urod žira javlja se periodično, ovisno o klimatskim i drugim uvjetima, u razmacima od 5-10 godina. Posljednjih 20-tak godina sve su duži i nepravilniji vremenski razmaci punog uroda žira. Sastojine hrasta lužnjaka uzgojene iz sjemena počinju rađati sjemenom između 60-70 godine, dok u panjačama počinju ranije, od 30-50 godine (Vidaković, 1996.). Slika 2.7. Klijanac hrasta lužnjaka peti dan nakon klijanja Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 15 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 3. DOSADAŠNJA ISTRAŽIVANJA MIKOZA HRASOTVA ŽIRA... 3. DOSADAŠNJA ISTRAŽIVANJA MIKOZA HRASTOVA ŽIRA KOD NAS I U SVIJETU 3. DOSADAŠNJA ISTRAŽIVANJA MIKOZA HRASTOVA ŽIRA KOD NAS I U SVIJETU Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 16 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 3. DOSADAŠNJA ISTRAŽIVANJA MIKOZA HRASOTVA ŽIRA... Žir je u tijeku svog razvojnog ciklusa od zametka do sjetve i sadnje ugrožen od raznih biotičkih i abiotičkih čimbenika. Među biotičkim čimbenicima gljive imaju značajnu ulogu jer mogu pod određenim uvjetima potpuno obezvrijediti sjeme. Gljive na žiru uzrokuju različita oboljenja poput pjegavosti, pljesnivosti, truleži, mumifikacije i dr. te tako utječu na smanjenje uroda i količine žira za prirodnu i umjetnu obnovu šuma. Mikoflora žira hrasta lužnjaka gotovo da i nije u Hrvatskoj do sada detaljnije istraživana. Stoga je literatura o mikoflori hrastovog sjemena kod nas relativno malobrojna i spominje se uglavnom u kontekstu drugih radova. Glavaš (1984.) daje prikaz gljiva iz roda Ceratocystis (Ophiostoma) i njihove važnosti za različite vrste hrastova a posebno naglašava značaj gljiva ovog roda koje uzrokuju oboljenje žira i mladih biljaka poput Ophiostoma coeruleum, O. roboris, O. valachicum i O. quercus koju je detaljno proučio i prikazao u svom magistarskom radu (Glavaš, 1980.). Glavaš (1986.) je osim toga istraživao i bolesti lišća i žira hrasta crnike. Na žiru sakupljenom u jesen s tla utvrdio je nekoliko vrsta gljiva: Phoma glandicola, Pestalotia funerea, Alternaria spp., Penicillium spp. i Gloeosporium quercinum te zaključio da ove gljive u prirodnim uvjetima imaju ulogu u procesu kruženja materije u prirodi ali i da predstavljaju potencijalnu opasnost u rasadnicima kao i prilikom skladištenja, gdje bi mogle nanijeti određene štete. Spaić i Glavaš (1988.) prikazali su biotske i abiotske uzročnike šteta na našem hrastu lužnjaku. Od gljivičnih organizama između ostalog spominju se i oni koji uzrokuju bolesti žira, mladih biljaka i venuće hrasta. Na žiru su utvrđene gljive O. quercus na unutrašnjoj površini vanjske ljuske žira, Penicillium spp. koje uzrokuju pljesnivost žira i Gloeosporium quercinum koja uzrokuje suhu trulež žira i smanjuju mu klijavost. Glavaš i Halambek (1992.) istraživali su mikoze na hrastu lužnjaku u Hrvatskoj te su dotakli i problematiku mikoza žira. Na hrastovom žiru najčešće su nalazili plijesni iz rodova Penicillium i Alternaria te gljivu O. quercus koja može prijeći sa žira na mladu biljku i uzrokovati njeno venuće. Glavaš (1989.) iznosi rezultate istraživanja gljiva koje sudjeluju u procesu sušenja hrasta lužnjaka. Naglašava važnost gljiva iz roda Ophiostoma koje uzrokuju bolesti provodnih elemenata i izazivaju venuće. Gljiva O. quercus izolirana je sa žira na više lokaliteta i značajna je u procesu propadanja lužnjaka. Od gljiva utvrđenih na granama hrasta posebno naglašava gljivu Colpoma quercinum koja dovodi do sušenja grančica i time do redukcije krošnje. U Šumarskom institutu Jastrebarsko provedeni su pokusi uskladištenja i višegodišnjeg čuvanja žira. Dokuš (1986.) u stručnom izvještaju o tim pokusima navodi da se za višegodišnje čuvanje žira ne može preporučiti niti jedna od ispitivanih metoda. Ocvirek i Orlić (1990.) izvijestili su o nastavku spo- Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 17 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 3. DOSADAŠNJA ISTRAŽIVANJA MIKOZA HRASOTVA ŽIRA... menutih istraživanja i višegodišnjeg čuvanja sjemena hrasta lužnjaka u PVC vrećama, kartonskim kutijama i jutenoj vreći, koja nisu donijela konačno rješenje ali su ukazala da se žir lužnjaka može sačuvati jednu godinu u plastičnim vrećama 50×100 cm na temperaturi od 0 do 2 °C uz prethodno tretiranje fungicidom Bayleton, uz klijavost 80-94%. U stručnim periodičnim i godišnjim izvještajima Šumarskog instituta Jastrebarsko, Odjela za zaštitu šuma i lovstvo, za Uprave šuma Bjelovar i Vinkovci (1989., 1990., 1991.) o istraživanju uzroka izostanka uroda žira (Halambek i dr., 1991.), dati su između ostalog rezultati fitopatološke i entomološke analize uzoraka grana i žira uzimanih s vrha krošnje i žira s kontrolnih ploča. Na granama i pupovima utvrđena su oštećenja od insekata (hipertrofije, izlazne rupice, ličinke, osice, savijači i sovice) te gljivični uzročnici oštećenja (Colpoma quercum i Botryospheria quercina koji se javljaju kao fakultativni paraziti te Alternaria spp., Trichoderma viride i Botrytis spp. kao saprofiti). Fitopatološkom analizom žira s grana i s kontrolnih ploča ustanovljene su saprofitske gljive: Penicillium spp., Alternaria spp. i Botrytis spp. Harapin i suradnici (1996.) u istraživanju uzročnika izostanka uroda žira na širem području Hrvatske metodom uzimanja uzoraka hrastovih grana za vrijeme vegetacijskog mirovanja, ustanovili su oštećenost pupova, listova i cvjetova od defolijatora (savijači, mrazovci, ose listarice, hrastov tuljčar), kornjaša, stjenica te lisnih i štitastih uši. Na takvim oštećenjima javljaju se gljivične bolesti koje ubrzaju propadanje. Na uzorcima sakupljenog žira nađena su oštećenja od žirotoča, savijača i osa šiškarica. Mladi žir oštećuje i pepelnica (Microsphaera alphitoides). Ustanovljeno je da biotski čimbenici mogu smanjiti urod žira i do 79%. Oštećenja žira od viših životinja, insekata i gljiva ispitivali su i Maksimović, Milivojević i Pekić (1982.). Najviše truleži konstatirali su na mladom žiru, veličine 0,6-1 cm, dok se još nije pojavio iz kapice. Ustanovili su da je opadanje trulog mladog žira posljedica oštećenja pri ishrani insekata, glodavaca i drugih životinja. U svom radu spominju istraživanja Zemkove (1972.) koja kao uzročnike truleži navodi gljivice roda Penicillium, Mucor i Fusarium koje ulaze u žir kroz mehanička oštećenja. Zabilježili su najveći postotak opadanja trulog žira krajem mjeseca srpnja i u kolovozu. Povećanu pojavu truleži žira povezali su s vlažnošću kojoj je ispitivana sastojina redovno izložena uslijed poplava. Mikloš (1991.) razmatra pitanje štetnog djelovanja polutanata tj. onečišćenja zraka na urod žira u našim šumama hrasta lužnjaka. Rašireno je mišljenje da su štete na drveću, pa tako i slaba fruktifikacija hrasta lužnjaka, primarno posljedica djelovanja polutanata i da se na fiziološki oslabljelim stablima sekundarno pojavljuju patogeni insekti i gljive pa tako i raza- Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 18 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 3. DOSADAŠNJA ISTRAŽIVANJA MIKOZA HRASOTVA ŽIRA... rači žira. Autor smatra da polutanti štetno djeluju ne samo na drveće, i na žir, već i na insekte i uzročnike biljnih bolesti tj. na čitavu šumsku biocenozu te da polutanti pogoršavaju trofičke uvjete za žirotoč i patogene gljivice koji preferiraju zdravi žir. O korisnosti i opravdanosti poduzimanja odgovarajućih zaštitnih mjera u sjemenskim sastojinama radi povećanja uroda žira piše Mikloš (1992.). Autor iznosi podatke o povećanju uroda žira u sjemenskim sastojinama nakon višekratnog suzbijanja defolijatora kemijskim preparatima provedenog u sklopu 6-godišnjeg istraživanja (od 1981.-1986.) na području Vinkovaca, Našica i Slavonskog Broda. Suzbijanjem defolijatora mogu se stvoriti bolji uvjeti za cvatnju i oplodnju ali da bi se osigurao puni urod zdravog žira potrebno je suzbijati žirotoča i druge razarače žira poput gljiva koji oštećuju žir od njegova formiranja do zrelosti. Naglašava da pri tom treba primjenjivati ekološki prihvatljive pesticide i voditi brigu o očuvanju šumske biocenoze. Hrašovec i dr. (1996.) pišu o štetnicima i bolestima sjemena hrasta, obične jele, smreke i crnog bora. Utvrdili su da su najznačajniji štetnici žira žirotoči iz roda Curculio koji su uništili 1/4 uroda, zatim šumski glodavci (zastupljeni s 18%) i savijači (12%). Na hrastovom žiru napadnutom žirotočom često su nalazili gljive, kao što je već spomenuto u uvodu: Gloeosporium quercinum, Alternaria spp., Penicillium spp., Trichoderma viride te O. quercus koja napada žir u svim razvojnim stadijima. Glavaš (1999.) u svojoj knjizi "Gljivične bolesti šumskog drveća" u zasebnom poglavlju daje pregled bolesti plodova i sjemenja šumskih vrsta drveća i navodi najvažnije gljive koje ih izazivaju. Literatura o mikološkim istraživanjima sjemena hrasta lužnjaka u svijetu, posebno u zemljama Istočne Europe, nešto je bogatija ali ne i obilna. Tom problematikom bave se većinom ruski, češki, slovački i mađarski istraživači. Radovi su uglavnom starijeg datuma. Novijeg datuma spominju se autori koji se bava istraživanjem zaštite žira i u zemljama zapadne Europe iz potrebe očuvaja genofonda i traženje načina za produženje vremena skladištenja. O mikozama sjemena i plodova nekih šumskih vrsta drveća pisao je još Prisjažnik A. A. 1949. iz tadašnjeg SSSR. On navodi glavne vrste gljiva koje izazivaju bolesti sjemena i plodova poput pjegavosti, deformacije, mumifikacije, pljesnivosti, hrđavosti te polijeganja ponika. Od bolesti žira posebno spominje mumifikaciju koju uzrokuje gljiva Sclerotinia pseudotuberosa. Urošević (1957.) je istraživao gljive na različito uskladištenom žiru. Determinirao je mnoge saprofitske i parazitske vrste. Osim toga ustanovio je da niti jedna od metoda skladištenja ne može spriječiti nastanak šteta od gljive S. pseudotiberosa. Stanescu i Vlase (1969.) su u Rumunjskoj istraživali oštećenja od gljiva i bakterija na žiru tijekom skladištenja u različitim uvjetima. Od štetnih gljivičnih organizama identificirali Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 19 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 3. DOSADAŠNJA ISTRAŽIVANJA MIKOZA HRASOTVA ŽIRA... su Phomopsis quercella, Penicillium spp., Cytospora glandicola, Sclerotinia pseudotuberosa, Trichothecium roseum, a od bakterija Erwinia glandicola. Čeremisov, Negrucki i Leškovceva (1970.) napravili su opsežan popis vrsta gljiva koje mogu zaraziti hrastov žir. Delatour i Morelet (1979.) ustanovili su da je najvažnija bolest žira različitih hrastova, uključujući lužnjak i kitnjak, u Francuskoj crna trulež uzrokovana gljivom Ciboria batschiana. Po njihovom mišljenju zaraza utječe na smanjenje prirodne regeneracije a infekcija je manja ako je veći razmak između rodnih godina. Kontrola zaraze u sjemenskim sastojinama moguća je sakupljanjem i spaljivanjem starog inficiranog žira. Autori daju preporuku za kontrolu uskladištenog sjemena tretiranjem s fungicidima Benomyl i Thiram a kod jake infekcije prethodnim namakanjem u vodi na 38 °C. Delatour (1978.) je istraživao metode zaštite žira od gljive C. batschiana i došao do zaključka da osam satno tretiranje žirova vodom temperature 38 °C smanjuje zarazu a da istovremeno ne oslabljuje klijavost. Urošević (1957. i 1983.) je istraživao uzročnike venuća hrasta lužnjaka u rasadnicima u tadašnjoj Čehoslovačkoj. Mikološkim istraživanjima ustanovio je da gljive O. valachicum i O. roboris te Phomopsis quercella koje su prisutne na kotiledonima žira, prelaze na klijance i uzrokuju njihovo venuće. U sklopu mikoloških istraživanja o propadanju hrasta lužnjaka i kitnjaka u Mađarskoj Hangyal-Balul (1984.) analizirala je i uzorke žirova. Na gotovo svim uzorcima nalazila je vrste gljiva iz roda Ophiostoma, a stupanj zaraženosti uzoraka bio je 30-80%. Žir je bio zaražen i vrstama gljiva iz roda Cytospora, Phomopsis i Fusarium. Hangyal-Balul (1986.) determinirala je sastav mikoflore na cvjetovima i žiru hrasta lužnjaka i kitnjaka različitog stadija zrelosti na području Mađarske u periodu od 1981-1984. godine. Najčešće su bile prisutne slijedeće vrste gljiva: Alternaria tenuis, Ceratocystis spp., Cytospora intermedia, Fusarium spp. i Phomopsis pseudoacacie. Za zaštitu od bolesti savjetuje tretiranje sjemenskih sastojina, od cvatnje do sazrijevanja žira, fungicidima te tretiranje sjemena prije skladištenja s Dithane M-45. Anderson i Miller (1989.) pišu, u sklopu izvještaja o bolestima u šumskim rasadnicima U. S., da sjeme svih šumskih vrsta drveća oštećuju gljive, naročito vrste rodova Aspergillus, Diplodia, Penicillium, Fusarium, Pestalotia, Trichoderma i brojne vrste iz razreda Phycomycetes. Neke gljive poput vrsta rodova Diplodia i Fusarium su patogene i mogu usporiti klijanje sjemena, uzrokovati polijeganje i trulež korijena klijanaca. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 20 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 3. DOSADAŠNJA ISTRAŽIVANJA MIKOZA HRASOTVA ŽIRA... Prochazkova (1990.) naglašava da je za uspješnu zaštitu sjemena potrebno poznavati spektar gljiva koje dolaze na površini i u unutrašnjosti sjemena i ustanoviti njihov utjecaj na klijavost stoga je provela analizu mikoflore sjemena i plodova nekih vrsta listača u Čehoslovačkoj. U ispitivanim uzorcima utvrdila je prisutnost 72 vrste gljiva od kojih su najviše zastupljene saprofitske i saproparazitske vrste. Ustanovila je da su gotovo sve utjecale na sniženje klijavosti sjemena. Pojavu gljiva na sjemenu više vrsta šumskog drveća istraživala je Prochazkova (1991.) u razdoblju od 1986. do 1991. godine u Češkoj. Ukupno je izolirala 85 vrsta gljiva, najviše na sjemenu jasena i bukve. Na hrastovom žiru determinirala je 27 vrsta gljiva. Najzastupljenije gljive u uzorcima, koje je analizirala, bile su Ciboria batschiana, Fusarium spp., Botrytis cinerea i Ophiostoma spp. Osim toga Prochazkova (1995.) daje osnovne informacije o gljivama koje se javljaju na žiru i kao najznačajnije patogene navodi gljive Ciboria batschiana, Ophiostoma species i Diaporthe insularis. Werres i dr. (1992.) su izolirali gljivu Cylindrocarpon didymum (Hartig) Wollenw. iz oboljelog žira hrasta lužnjaka i kitnjaka nakon njihovog skladištenja. U pokusu umjetne infekcije dokazali su patogenost ove gljive i naglasili njenu važnost kao patogena uskladištenog žira. Andersson (1992.) je ispitivao oštećenost žira hrasta lužnjaka, sakupljenog u južnoj Švedskoj, od žirotoča i gljiva i testirao je njegovu sposobnost da proklije. Ustanovio je da se postotak neoštećenog žira kretao između 33 i 69% a da je klijavost viša kod neoštećenog žira i žira oštećenog gljivama u odnosu na žir oštećen žirotočem. Gille i Nowag (1995.) su ispitivali mogućnost zaštite žira hrasta lužnjaka i kitnjaka metodom termoterapije. Rezultati su ukazali da je mnogo teže sačuvati kitnjakov žir od lužnjakova. Termoterapijom su zaštitili žir od gljive Ciboria batschiana ali ne i od drugih štetnih gljiva. Ustanovili su da je zaštita termoterapijom uspješna prilikom zimskog skladištenja dok je za skladištenje žira na dulji rok, dvije do tri godine, potrebno primijeniti fungicid. Žitnik, Muller i Kraigher (1999.) ispitivali su različite načine zaštite žira primjenom termoterapije, kemijske zaštite te utjecaj različitih temperatura na žir prilikom skladištenja. Zaključili su da je zaštita i višegodišnje skladištenje žira još uvijek neriješen problem. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 21 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 4. CILJ ISTRAŽIVANJA 4. CILJ ISTRAŽIVANJA 4. CILJ ISTRAŽIVANJA Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 22 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 4. CILJ ISTRAŽIVANJA U okviru općeg cilja gospodarenja lužnjakovim šumama koje podrazumijeva očuvanje ovih sastojina zdravima i očuvanje njihove reproduktivne sposobnosti, naš je cilj istražiti zdravstveno stanje žira odnosno postotke oštećenosti posebno gljivičnim organizmima te kukcima, glodavcima i pticama. Glavni cilj je utvrditi koji gljivični organizmi napadaju žir hrasta lužnjaka u Hrvatskoj u njegovim razvojnim fazama, od mladog do zrelog žira, i nakon kraćeg čuvanja u hladnjaku odnosno skladištenja te u kojoj su mjeri štetni za njegovu kvalitetu. Osim toga cilj je opisati vrste gljiva koje dolaze na žiru te sakupiti što više podataka o simptomima bolesti koje izazivaju i o njihovoj morfologiji te biologiji iz dostupne literature i vlastitih zapažanja. U uzgoju i mjestimice u podizanju lužnjakovih sastojina problem predstavljaju povremeni i smanjeni urodi žira To dovodi do potrebe stvaranja zalihe sjemena i osiguranja kontinuirane proizvodnje sadnica za pošumljavanje. Uz insekte koji oštećuju žir u znatnoj mjeri gljivični organizmi igraju također važnu ulogu u njegovom zdravstvenom stanju kako za vrijeme razvoja na stablu tako i na tlu i u skladištu. Gljivični organizmi mogu biti limitirajući faktor za klijavost a mogu biti preneseni i na mlade klijance na kojima mogu izazvati sušenje odnosno odumiranje. Stoga je cilj istražiti zaštitu žira fungicidima postavljanjem pokusa primjenom različitih vrsta fungicida i ustanoviti njihovu djelotvornost. Brzina rasta gljiva ima ulogu u širenju zaraze unutar žira i između žirova te je cilj istražiti brzinu rasta odabranih gljiva na hranjivoj podlozi na različitim temperaturama koliko uvjeti istraživanja dozvoljavaju. Krajnji cilj ovog rada je istražiti mikološki kompleks žira hrasta lužnjaka u Hrvatskoj odnosno inventarizirati i determinirati gljive koje dolaze na žiru. Osim toga ovo istraživanje bi dalo i svojevrstan prilog poznavanju mikoflore u Hrvatskoj. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 23 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA Vinkovci 900000 Osijek Našice 800000 N.Gradiška Koprivnica 700000 Bjelovar Zagreb 600000 Karlovac 500000 kg 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA 400000 Karlovac 300000 Zagreb Bjelovar 200000 Koprivnica 100000 N.Gradiška Našice 0 Osijek 1996 1997. Godine 1998. Vinkovci 1999. 2000. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 24 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA Za istraživanje mikoflore žira hrasta lužnjaka odabrano je pet sjemenskih sastojina u različitim dijelovima Hrvatske koje su uzeti kao reprezentanti lužnjakovih šuma. Odabrane sjemenske sastojine nalaze se na području pet uprava šuma podružnica, pet šumarija i pet odjela. To su: UŠP Vinkovci, Šumarija Otok; UŠP Našice, Šumarija Donji Miholjac; UŠP Bjelovar, Šumarija Čazma; UŠP Zagreb, Šumarija Lipovljani i UŠP Karlovac, Šumarija Jastrebarsko. Podaci o područjima istraživanja i sakupljanja žira s pripadajućim gospodarskim jedinicama, odjelima i odsjecima te ekološkogospodarskim tipovima (EGT) i oznakom sjemenskog rajona prikazani su u tablici 5.1. Uzorci žira sakupljani su u srpnju, kolovozu, rujnu i listopadu u periodu od 1996. do 1998. godine. Da bi se dobio što bolji uvid u mikofloru žira analizirano je sjeme sakupljeno na širem području lužnjakovih šuma u jesen 1999. i 2000. godine. Uzorci žira sakupljeni u jesen 1999., za potrebe istraživanja oštećenosti od glodavaca koja je provodio dr. sc. Josip Margaletić, upotrebljeni su i za analizu oštećenosti od gljivičnih organizama. Uzorci su sakupljeni na području 6 uprava šuma podružnica, 12 šumarija i 18 odjela. Područja na kojima su sakupljani uzorci za analizu su: UŠP Bjelovar (Šumarije Vrbovec i Čazma), UŠP Zagreb (Šumarija Zagreb, Velika Gorica i Popovača), UŠP Koprivnica (Šumarija Križevci, Koprivnica i Đurđevac), UŠP Nova Gradiška (Šumarija Nova Gradiška), UŠP Našice (Šumarija Koška i Đurđenovac) i UŠP Osijek (Šumarija Đakovo). Te godine urod je bio vrlo slab te je sakupljeno malo žira. Godine 2000. urod hrasta lužnjaka je bio dobar te su u Odjel za oplemenjivanje i sjemenarstvo u jesen iste godine poslani uzorci sjemena na redovnu analizu određivanja kvalitete i klijavosti. Od tih uzoraka odvojen je dio za analizu zdravstvenog stanja i određivanje gljivičnih organizama na zaraženom sjemenu. Uzorci potječu s područja 6 uprava šuma podružnica, 18 šumarija i 25 odjela. Područja na kojima su sakupljeni uzorci žira su: UŠP Vinkovci (Šumarije: Vrbanja, Otok, Gunja i Županja), UŠP Nova Gradiška (Šumarije: Trnjani, Stara Gradiška, Novska i Jasenovac), UŠP Koprivnica (Šumarije: Križevci, Repaš i Koprivnica), UŠP Bjelovar (Šumarije: Grđevac, Garešnica, Čazma i Vrbovec), UŠP Zagreb (Šumarija: Kutina) i UŠP Karlovac (Šumarije: Pisarovina i Karlovac). Svaki uzorak ima analitički broj pod kojim je upisan u knjizi uzoraka Odjela za oplemenjivanje i sjemenarstvo. Podaci o područjima sakupljanja žira s pripadajućim gospodarskim jedinicama i odjelima te ekološko-gospodarskim tipom i oznakom sjemenskog rajona prikazani su u tablicama 5.2. i 5.3. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 25 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA Na slici 5.1. prikazana su područja istraživanja mikoflore žira u periodu od 1996. do 1998. te područja sakupljanja žira u jesen 1999. i 2000. za zdravstvenu i fitopatološku analizu. Sveukupno uzorci žira sakupljeni su na području 8 uprava šuma podružnica, 29 šumarija i 48 odjela. U slijedećem poglavlju prikazani su osnovni podaci o istraživanim područjima. Podaci potječu iz Programa gospodarenja za priznate sjemenske sastojine hrasta lužnjaka te iz Gospodarskih osnova. Tablica 5.1. Područja sakupljanja uzoraka žira u periodu od 1996. do 1998. godine Br. Uprava šuma Šumarija Gospod. jedinica Odjel/odsjek EGT Sjemenski rajon 1 Karlovac Jastrebarsko Jastrebarski lugovi 8c II-G-10 I-2.3. 2 Zagreb Lipovljani Josip Kozarac 43a II-G-12 I-2.3. 3 Bjelovar Čazma Čazmanske nizinske šume 3a II-G-10 I-2.3. 4 Našice Donji Miholjac Kapelački lug – Karaš 21a II-G-10 I-1.2. 5 Vinkovci Otok Slavir 66c II-G-21 I-2.1 Tablica 5.2. Područja sakupljanja uzoraka žira u jesen 1999. godine Br. uz. Uprava šuma 1 2 Zagreb 3 4 5 Bjelovar 6 7 Koprivnica 8 9 10 11 12 Nova Gradiška Našice Osijek Šumarija Gospod. jedinica Odjel/ odsjek EGT Zagreb Šiljakovački lug 17a II-G-10 Velika Gorica Turupoljski lug 44a II-G-10 Popovača Popov. niz. šume 57a, 99a II-G-12 Vrbovec Česma 71c II-G-10 Čazma Čazman. niz. šume 9a II-G-10 Križevci Jazmak-Kosturač 41a, 70b II-G-10 Koprivnica Kopr. niz. šume 24a, 25f II-G-10 Đurđevac Đurđev. niz. šume 26a, 74b II-G-10 Nova Gradiška Ključevi 20a II-G-20 Koška Lacić Gložđe 112a, 118a II-G-10 Đurđenovac Đurđ. niz. šume. 40a II-G-12 Đakovo Kuj. R. Mačkovac 119a, 120a II-G-11 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu Sjemenski rajon I.2.3. I.2.3. I.1.3. I.2.2. I.1.2. I.1.1. 26 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA Tablica 5.3. Područja sakupljanja uzoraka žira u jesen 2000. godine Br. uz Analitički Uprava šuma br. uzorka Šumarija Gospodarska jedinica Odjel/ odsjek EGT Pisarovina Pisarovinski lugovi 2c, d II-G-20 1 6283 2 6286 Karlovac Rečički lugovi 48a, b II-G-20 3 6267 Kutina 1 Kutinske nizinske šume 30b II-G-20 Kutina 2 Kutinske nizinske šume 30b II-G-20 4a II-G-10 26a II-G-10 Karlovac I.2.3. Zagreb 4 6268 5 6115 6 6109 Vel. Grđevac Trupinski-Pašijanski gaj I.2.3. Garešnica Međuvođe – Ilovski lug 3a II-G-10 Bjelovar I.2.3. 7 6105 Čazma Čazmanske nizinske šume 8 6259 Vrbovec Varoški lug 16b II-G-20 9 6235 Križevci Jazmak-Kosruač 41a II-G-10 10 6238 Repaš Repaš-Gabajeva greda 34h II-G-21 11 6250 Koprivnica Đurđevačke nizinske šume 73a II-G-20 12 6317 Trnjani 12, 13 II-G-20 13 6321 Koprivnica Sjemenski rajon Ilijanska-Jelas Stara Gradiška Ljeskovače 17a, 18b,e II-G-20 30c, 44c, II-G-12 Nova Gradiška I.1.3. I.2.2. 14 6322 Novska Trstika 15 6324 Jasenovac Žabarski bok 16 6178 Vrbanja Vrbanjske šume 17 6197 Otok Slavir 11a II-G-10 113a, 114a II-G-10 35d II-G-10 Vinkovci I.2.1. 18 6232 Gunja Trizlovi-Rastovo 9b, 9d II-G-12 19 6341 Županja Kusare 1a, 3a II-G-10 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 27 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA Slika 5.1. Područje istraživanja { Područje istraživanja u periodu od 1996-1998. U Područje sakupljanja uzoraka žira, jesen 1999. Područje sakupljanja uzoraka žira, jesen 2000. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 28 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA 5.1. Osnovni podaci o područjima istraživanja i lokalitetima sakupljanja uzoraka žira 5.1.1. Područja istraživanja i sakupljanja uzoraka žira u periodu od 1996. do 1998. godine 1. Uprava šuma podružnica Karlovac (Sjemenski rajon I.2.3.) Šumarija: Jastrebarsko Gospodarska jedinica: Jastrebarski lugovi Odjel/odsjek: 8c Sastojina pripada ekološko gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici tipična šuma hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quercetum roboris Typicum (Anić) Rauš). Nalazi se na površini od 10,15 ha, nadmorske visine 118 m i starosti 126 godina. 2. Uprava šuma podružnica Zagreb (Sjemenski rajon I.2.3.) Šumarija: Lipovljani Gospodarska jedinica: Josip Kozarac Odjel/odsjek: 43 a Sastojina pripada ekološko gospodarskom tipu II-G-12, biljnoj zajednici šuma hrasta lužnjaka i običnog graba s poljskim jasenom (Carpino betuli – Quercetum roboris Anić/Rauš var. Fraxinus parvifolia). Nalazi se na površini od 33,49 ha, nadmorske visine 97,6 m i starosti 158 godina. 3. Uprava šuma podružnica Bjelovar (Sjemenski rajon I.2.3.) Šumarija: Čazma Gospodarska jedinica: Čazmanske nizinske šume Odjel/odsjek: 3a Sastojina pripada ekološko gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici tipična šuma hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quercetum roboris Typicum (Anić) Rauš). Nalazi se na površini od 34,6 ha, nadmorske visine 100 m i starosti 110 godina. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 29 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 4. 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA Uprava šuma podružnica Našice (Sjemenski rajon I.1.2.) Šumarija: Donji Miholjac Gospodarska jedinica: Kapelački lug – Karaš Odjel/odsjek: 21 a Sastojina pripada ekološko gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici tipična šuma hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quercetum roboris Typicum (Anić) Rauš). Nalazi se na površini od 68,50 ha, nadmorske visine 99 m i starosti 98 godina. 5. Uprava šuma podružnica Vinkovci (Sjemenski rajon I.2.1.) Šumarija: Otok Gospodarska jedinica: Slavir Odjel/odsjek: 66 c Sastojina pripada ekološko gospodarskom tipu II-G-21, biljnoj zajednici Šuma hrasta lužnjaka s velikom žutilovkom i žestiljem (Genisto elate – Quercetum roboris Horvat subass. Aceretosum tatarici Rauš). Nalazi se na površini od 8,81 ha, nadmorske visine 85 m i starosti 138 godina. 5.1.2. Područja sakupljanja uzoraka žira iz uroda 1999. godine 1. Uprava šuma podružnica Zagreb (Sjemenarski rajon I.2.3.) Šumarija: Velika Gorica Gospodarska jedinica: Turopoljski lug Odjel/odsjek: 44 a Sastojina pripada ekološko-gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quetcetum roboris /Anić/ Rauš). Nalazi se na površini od 15,57 ha, nadmorske visine 97-100 m, obrasta 0,9 i starosti 100 godina. Šumarija: Popovača Gospodarska jedinica: Popovačke nizinske šume Odjel/odsjek: 57 a i 99 a Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 30 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA Sastojine pripadaju ekološko-gospodarskom tipu II-G-12, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba s poljskim jasenom (Carpino betuli – Quetcetum roboris /Anić/ Rauš var. Fraxinus parvifolia). Nalaze se na površini od 33,9 i 11 ha, nadmorske visine 94-108 m, obrasta 0,8 i starosti 104 i 120 godina. NPŠO: Zagreb Gospodarska jedinica: Šiljakovački lug Odjel/odsjek: 17 a Sastojina pripada ekološko-gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quetcetum roboris /Anić/ Rauš.). Dolazi na površini 20,4 ha, nadmorskoj visini 120 m, obrast iznosi 0,9, starosti 105 godina. 2. Uprava šuma podružnica Bjelovar (Sjemenarski rajon I.2.3.) Šumarija: Vrbovec Gospodarska jedinica: Česma Odjel/odsjek: 71 c Sastojina pripada ekološko-gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quetcetum roboris /Anić/ Rauš.). Nalazi se na površini od 23,81 ha, nadmorske visine 105 m, obrasta 0,99 i starosti 138 godina. Šumarija: Čazma Gospodarska jedinica: Čazmanske nizinske šume Odjel/odsjek: 9a Sastojina pripada ekološko-gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quetcetum roboris /Anić/ Rauš.). Nalazi se na površini od 35,92 ha, nadmorske visine 100 m, obrasta 1,03 i starosti 93 godine. 3. Uprava šuma podružnica Koprivnica (Sjemenarski rajon I.1.3.) Šumarija: Križevci Gospodarska jedinica: Jazmak – Kosturač Odjel/odsjek: 41 a i 70 b Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 31 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA Sastojine pripadaju ekološko-gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quetcetum roboris /Anić/ Rauš). Nalaze se na površini od 20,7 i 29,2 ha, nadmorske visine 150 i 120 m, obrasta 1,1 i starosti 124 i 93 godine. Šumarija: Koprivnica Gospodarska jedinica: Koprivničke nizinske šume Odjel/odsjek: 24 a i 25 f Sastojine pripadaju ekološko-gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quetcetum roboris /Anić/ Rauš). Nalaze se na površini od 2,15 i 11,13 ha, nadmorske visine 130 m, obrasta 1,0 i starosti 104 i 107 godina. Šumarija: Đurđevac Gospodarska jedinica: Đurđevačke nizinske šume Odjel/odsjek: 26 a i 74 b Sastojine pripadaju ekološko-gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quetcetum roboris /Anić/ Rauš). Nalaze se na površini od 32,9 i 5,2 ha, nadmorske visine 115 m, obrasta 1,0 i starosti 100 i 90 godina. 4. Uprava šuma podružnica Nova Gradiška (Sjemenarski rajon I.2.2.) Šumarija: Nova Gradiška Gospodarska jedinica: Ključevi Odjel/odsjek: 20 a Sastojina pripada ekološko-gospodarskom tipu II-G-20, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka s velikom žutilovkom (Genisto elate – Quetcetum roboris Horvat). Nalazi se na površini od 40,3 ha, nadmorske visine od 0 - 96 m, obrasta 0,79 i starosti 107 godina. 5. Uprava šuma podružnica Našice (Sjemenarski rajon I.1.2.) Šumarija: Koška Gospodarska jedinica: Lacić Glođe Odjel/odsjek: 112 a i 118 a Sastojine pripadaju ekološko-gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quetcetum roboris /Anić/ Rauš). Nalaze se na površini od 30,6 i 30,9 ha, nadmorske visine od 120 m, obrasta 0,9 i 0,8 te starosti 105 godina. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 32 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... Šumarija: 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA Đurđenovac Gospodarska jedinica: Đurđenovačke nizinske šume Odjel/odsjek: 40 a Sastojina pripada ekološko-gospodarskom tipu II-G-12, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba s poljskim jasenom (Carpino betuli – Quetcetum roboris /Anić/ Rauš var. Fraxinus parvifolia). Nalazi se na površini od 45,89 ha, nadmorske visine 100 m, obrasta 0,9 te starosti 100 godina. 6. Uprava šuma podružnica Osijek (Sjemenski rajon I.1.1.) Šumarija: Đakovo Gospodarska jedinica: Kujnjak Rakovac Mačkovac Odjel/odsjek: 119 a i 120 a Sastojine pripadaju ekološko-gospodarskom tipu II-G-11, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba s cerom (Carpino betuli – Quetcetum roboris /Anić/ Rauš subass. quercetosum cerris). Nalaze se na površini od 16,5 i 19,4 ha, nadmorske visine od 100-110 m, obrasta 0,7 te starosti 110 i 105 godina. 5.1.3. Područja sakupljanja uzoraka žira iz uroda 2000. godine 1. Uprava šuma podružnica Karlovac (Sjemenski rajon I.2.3.) Šumarija: Pisarovina Gospodarska jedinica: Pisarovinski lugovi Odjel/odsjek: 2 c, d Sastojina pripada ekološko-gospodarskom tipu II-G-20, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka s velikom žutilovkom (Genisto elate – Quetcetum roboris Horvat). Nalazi se na površini od 55,5 ha, nadmorske visine od 107 m, obrasta 0,9 te starosti 120 godina. Šumarija: Karlovac Gospodarska jedinica: Rečički lugovi Odjel/odsjek: 48 a, b Sastojina pripada ekološko-gospodarskom tipu II-G-20, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka s velikom žutilovkom (Genisto elate – Quetcetum roboris Horvat). Nalazi se na površini od 44,9 ha, nadmorske visine od 108 m, obrasta 0,8 te starosti 110 godina. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 33 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 2. 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA Uprava šuma podružnica Zagreb (Sjemenski rajon I.2.3.) Šumarija: Kutina Gospodarska jedinica: Kutinske nizinske šume Odjel/odsjek: 30 b Sastojina pripada ekološko-gospodarskom tipu II-G-20, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka s velikom žutilovkom (Genisto elate – Quetcetum roboris Horvat). Nalazi se na površini od 15,2 ha, nadmorske visine od 96 m, obrasta 0,8 te starosti 111 godina. 3. Uprava šuma podružnica Bjelovar (Sjemenski rajon I.2.3.) Šumarija: V. Grđevac Gospodarska jedinica: Trupinski – Pašijanski gaj Odjel/odsjek: 4a Sastojina pripada ekološko-gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quetcetum roboris /Anić/Rauš). Nalazi se na površini od 32,1 ha, nadmorske visine od 141 m, obrasta 0,75 te starosti 126 godina. Šumarija: Garešnica Gospodarska jedinica: Međuvođe – Ilovski lug Odjel/odsjek: 26 a Sastojina pripadaju ekološko-gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quetcetum roboris Anić/Rauš). Nalazi se na površini od 18 ha, nadmorske visine od 106 m, obrasta 0,8 te starosti 138 godina. Šumarija: Čazma Gospodarska jedinica: Čazmanske nizinske šume Odjel/odsjek: 3a Sastojina pripadaju ekološko-gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quetcetum roboris Anić/Rauš). Nalazi se na površini od 40 ha, nadmorske visine od 105 m, obrasta 0,5 te starosti 120 godina. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 34 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... Šumarija: 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA Vrbovec Gospodarska jedinica: Varoški lug Odjel/odsjek: 16 b Sastojina pripada ekološko-gospodarskom tipu II-G-20, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka s velikom žutilovkom (Genisto elate – Quetcetum roboris Horvat). Nalazi se na površini od 16 ha, nadmorske visine od 103 m, obrasta 0,9 te starosti 135 godina. 4. Uprava šuma podružnica Koprivnica (Sjemenski rajon I.1.3.) Šumarija: Križevci Gospodarska jedinica: Jazmak – Kosturač Odjel/odsjek: 41 a Sastojina pripada ekološko-gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quetcetum roboris /Anić/Rauš). Nalazi se na površini od 20,7 ha, nadmorske visine od 150 m, obrasta 1,15 te starosti 124 godine. Šumarija: Repaš Gospodarska jedinica: Repaš – Gabajeva Greda Odjel/odsjek: 34 h Sastojina pripada ekološko-gospodarskom tipu II-G-21, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka s velikom žutilovkom subasocijacija sa žestiljem (Genisto elate – Quetcetum roboris Horvat subass. aceretosum tatarici Rauš). Nalazi se na površini od 76,9 ha, nadmorske visine od 117 m, obrasta 0,75 te starosti 135 godina. Šumarija: Koprivnica Gospodarska jedinica: Đurđevačke nizinske šume Odjel/odsjek: 73 a Sastojina pripada ekološko-gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quetcetum roboris Anić/Rauš). Nalazi se na površini od 45,3 ha, nadmorske visine od 113 m, obrasta 1,07 te starosti 130 godina. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 35 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 5. 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA Uprava šuma podružnica Nova Gradiška (Sjemenski rajon I.2.2.) Šumarija: Trnjani Gospodarska jedinica: Ilijanska – Jelas Odjel/odsjek: 12 i 13 Sastojine pripadaju ekološko-gospodarskom tipu II-G-20, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka s velikom žutilovkom (Genisto elate – Quetcetum roboris Horvat). Nalaze se na površini od 78,13 ha, nadmorske visine od 86 m, obrasta 0,9 te starosti 95 godina. Šumarija: Stara Gradiška Gospodarska jedinica: Ljeskovače Odjel/odsjek: 18 b, e, 14 b, 17 a Sastojine pripadaju ekološko-gospodarskom tipu II-G-20, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka s velikom žutilovkom (Genisto elate – Quetcetum roboris Horvat). Nalaze se na površini od 91,25 ha, nadmorske visine od 98 m, obrasta 0,9 te starosti 140 godina. Šumarija: Novska Gospodarska jedinica: Trstika Odjel/odsjek: 30 c, 44 c Sastojine pripadaju ekološko-gospodarskom tipu II-G-12, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba s poljskim jasenom (Carpino betuli – Quetcetum roboris Anić var. Fraxinus parvifoilia). Nalaze se na površini od 2,81 i 7,23 ha, nadmorske visine od 0-107 m, obrasta 0,97 i 1,05 te starosti 134 godine. Šumarija: Jasenovac Gospodarska jedinica: Žabarski bok Odjel/odsjek: 11 a Sastojina pripada ekološko-gospodarskom tipu II-G-12, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba s poljskim jasenom (Carpino betuli – Quetcetum roboris Anić var. Fraxinus parvifoilia). Nalazi se na površini od 9,5 ha, nadmorske visine od 97 m, obrasta 0,9 te starosti 145 godina. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 36 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA Uprava šuma podružnica Vinkovci (Sjemenski rajon I.2.1.) Šumarija: Vrbanja Gospodarska jedinica: Vrbanjske šume Odjel/odsjek: 113 a i 114 a Sastojine pripadaju ekološko-gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quetcetum roboris /Anić/Rauš). Nalaze se na površini od 25,9 i 6,5 ha, nadmorske visine od 85 m, obrasta 1,0 te starosti 103 godine. Šumarija: Otok Gospodarska jedinica: Slavir Odjel/odsjek: 35 d Sastojina pripada ekološko-gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quetcetum roboris/Anić/Rauš). Nalazi se na površini od 29,6 ha, nadmorske visine od 85 m, obrasta 1,0 te starosti 109 godina. Šumarija: Gunja Gospodarska jedinica: Trizlovi – Rastovo Odjel/odsjek: 9bi9d Sastojine pripadaju ekološko-gospodarskom tipu II-G-12, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba s poljskim jasenom (Carpino betuli – Quetcetum roboris /Anić/Rauš var. Fraxinus parvifolia). Nalaze se na površini od 15,7 i 22,6 ha, nadmorske visine od 75 m, obrasta 0,9 i 1,0 te starosti 99 godina. Šumarija: Županja Gospodarska jedinica: Kusare Odjel/odsjek: 1ai3a Sastojine pripadaju ekološko-gospodarskom tipu II-G-10, biljnoj zajednici hrasta lužnjaka i običnog graba (Carpino betuli – Quetcetum roboris /Anić/Rauš). Nalaze se na površini od 33,2 i 24,2 ha, nadmorske visine od 85 m, obrasta 1,0 te starosti 140 godina. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 37 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA 5.2. Urod žira na područjima istraživanja Hrast lužnjak obilnije rađa sjemenom svake 3. do 5. godine (Jovanović i Vukičević,1983.). Prema Vidakoviću (1996.) urod žira više nije regularan kao što je bio nekada kada se obično svake 5. ili 6. godine pojavio jedan puni urod, a između toga jedan ili dva manja uroda već se sada na obilan urod čeka 10 ili više godina. Harapin i dr. (1996.) navode da su najznačajniji uzroci izostanka žira: nedostatno plodonošenje kao posljedica izostanka cvatnje ili prijevremenog opadanja žira, djelovanje nepovoljnih abiotskih čimbenika (mraz, tuča, suša), defolijacija kao posljedica golobrsta, potrošnja žira od velikog broja potrošača i utjecaj onečišćenja okoliša. Područje istraživanja i područje sakupljanja sjemena sve zajedno obuhvaća osam uprava šuma. Podaci o količinama sakupljenog lužnjakovog žira na tim područjima za period istraživanja od 1996-2000. godine prikazani su na grafikonu 5.2. i priloženoj tablici 5.4. kako bi bili što pregledniji. Prema količinama skupljenog i otkupljenog žira na područjima uprava šuma podružnica zaključujemo kakav je bio urod određene godine. Godine 1996. količine sakupljenog žira kretale su se od 20 165 kg za Karlovac do 273 107 kg za Bjelovar. Urod je bio osrednji. Slijedeće godine 1997. uroda gotovo da i nije bilo odnosno bio je veoma slab, na području Zagreba evidentirano je 1 401 kg žira a na području Našica 14 058 kg. Godine 1998. urod je uglavnom bio slab do osrednji, količine sakupljenog žira iznosile su od 10 000 u Osijeku do 125 438 kg u Zagrebu, dok je na području Bjelovara urod bio veoma dobar s 840 948 kg otkupljenog žira. Na području Našica bio je osrednji sa sakupljenih 103 410 kg žira. Slijedeće godine 1999. urod je bio posvuda veoma slab i kretao se od 0 kg u Karlovcu i Vinkovcima do 4 087 kg u Zagrebu, jedino je u Osijeku sakupljeno nešto više 16 000 kg žira. Godine 2000. urod je na gotovo čitavom području lužnjakovih šuma bio dobar do veoma dobar. Sakupljeno je od 50 032 kg žira u Karlovcu do 610 104 kg u Vinkovcima te 619 302 kg žira u Bjelovaru. Analizirajući količine žira u ovom petogodišnjem razdoblju može se zaključiti da su urodi 1996. i 1998. bili djelomični a 2000. bi se moglo reći da je bio puni urod. Svake slijedeće godine 1997. i 1999. nakon obilnijeg uroda bila je godina vrlo slabog uroda. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 38 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA Tablica 5.4. Količine sakupljenog lužnjakovog žira (u kg) u razdoblju istraživanja Uprava šuma podružnica Godina Vinkovci Osijek Našice N. Gradiška Koprivnica Bjelovar Zagreb Karlovac 1996. 224 726 30 000 120 297 237 578 – 289 477 44 860 20 165 1997. 0 0 14 058 0 – 0 1 404 0 1998. 71 182 10 000 103 410 13 410 97 182 840 948 125 438 31 500 1999. 0 16 000 3 999 3 627 2 500 3 149 4 087 0 2000. 610 104 85 000 151 451 367 416 176 500 616 639 244 535 50 032 Oznake: – nema podatka 0 nema uroda Vinkovci Osijek 900000 Našice N.Gradiška 800000 Koprivnica 700000 Bjelovar Zagreb 600000 Karlovac 500000 kg 400000 Karlovac 300000 Zagreb Bjelovar 200000 Koprivnica 100000 N.Gradiška Našice 0 Osijek 1996 1997. 1998. Godine Vinkovci 1999. 2000. Slika 5.2. Količine sakupljenog lužnjakovog žira (kg) na području istraživanja po upravama šuma za razdoblje od 1996-2000. godine. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 39 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA 5.3. Klima istraživanog područja Klima predstavlja sveukupnost meteoroloških pojava koje karakteriziraju srednje stanje atmosfere na određenom mjestu u određenom vremenskom razdoblju prema definiciji Hanna (Margetić 1983.). Karakteristike klime određenog područja utvrđuju se višegodišnjim motrenjem vremenskih pojava. Osnovno klimatsko obilježje određenog područja daje temperatura zraka, zatim oborine i relativna vlažnost. Područje istraživanja mikoflore hrasta lužnjaka nalazi se u zoni umjerene kontinentalne klime za koju su karakteristične srednje godišnje vrijednosti temperature zraka 10,0-11,5 °C. Značajke ove klime su dosta česta pojava ekstremnih vrijednosti pojedinih klimatskih elemenata, te velika kolebanja temperature zraka između ljetnog i zimskog razdoblja, te između pojedinih godina. Količina oborina kreće se od oko 900 mm u zapadnom dijelu areala Hrvatske do oko 600 mm u istočnom dijelu (Seletković, 1996.). U arealu hrasta lužnjaka u Hrvatskoj prevladavaju prema Koppenovoj podjeli dva tipa klime: Cfwbx" – umjereno topla kišna klima koja obuhvaća zapadni dio Hrvatske i Cfwb"x" – umjereno topla kišna klima s izraženim jednim maksimumom padalina koja obuhvaća istočni dio međuriječja Save i Drave (Seletković, 1996.). Obilježje Cfwbx" klime: jednoličan raspored padalina. Nema suhog razdoblja, najmanje padalina padne u hladnom dijelu godine, maksimumi padalina pojavljuju se u kasno proljeće ili jesen a između njih je suše razdoblje. Srednja temperatura najhladnijeg mjeseca (siječanj) ne spušta se ispod –0,4 °C. Ljeta su svježija a srednja mjesečna temperatura najtoplijeg mjeseca je ispod 22,2 °C. Obilježje Cfwb"x" klime: toplija ljeta, nema suhog razdoblja, padaline se prema istoku postepeno smanjuju i prisutan je jači utjecaj hladnih istočnih vjetrova u zimskom razdoblju. Klima istraživanog područja analizirana je na bazi podataka klimatskih elemenata najbližih meteoroloških stanica: Jastrebarsko (138 m n/v), Opeke (96 m n/v), Čazma (144 m n/v), Donji Miholjac (97 m n/v) i Vinkovci (85 m n/v). Klimatski elementi: srednje mjesečne i godišnje temperature zraka, mjesečna i godišnja količina padalina i srednja mjesečna i godišnja relativna vlaga zraka korišteni su iz analize klime za razdoblje 1983-1992. prema Seletkoviću (1966.). Analizirajući klimu uočava se povećanje temperature od zapada prema istoku tj. od 10,0 °C u Jastrebarskom do 11,5 °C u Vinkovcima. Temparaturni apsolutni maksimumi se povećavaju idući od zapada (35,5 °C u Jastrebarskom) prema istoku (37,6 °C u D. Miholjcu) dok se Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 40 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 5. PODRUČJE ISTRAŽIVANJA apsolutni minimumi smanjuju (–25,5 °C u Jastrebarskom do –20,5 °C u D. Miholjcu). Što se tiče godišnje količine oborina uočavamo smanjenje oborina od zapada prema istoku (900 mm u Jastrebarskom, 580 mm u Vinkovcima). Godišnja relativna vlaga je u zapadnom dijelu istraživanog područja viša (Jastrebarsko 92%) nego u istočnom dijelu (D. Miholjac i Vinkovci 80%). Prema stupnjevima za relativnu vlagu po Juričiću (1942.) u Bertoviću (1975.) godišnja relativna vlaga na području istraživanja je visoka (kreće se između granica od 80 do 84%) i jako visoka (viša je od 85%). Praćenjem količine padalina (Seletković, 1966.) od početka stoljeća do danas uočava se da su se padaline značajno smanjile za 120 do 185 mm godišnje. Analiza klime i vremenskih prilika značajna je za dijagnozu i prognozu bolesti i štetnika šumskog drveća jer je klima bitan čimbenik koji utječe na pojavu i intenzitet zaraze gljivama i insektima pa tako i mikofloru hrasta lužnjaka. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 41 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA 6. MATERIJALI I METODE RADA 6. MATERIJALI I METODE RADA Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 42 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA 6.1. Materijali i metode rada Rad na istraživanju mikoflore žira hrasta lužnjaka odvijao se na terenu i u laboratoriju u nekoliko cjelina: nakon sakupljanja uzoraka prvo se analiziralo zdravstveno stanje žira odnosno njegova oštećenost, zatim su se utvrđivali rodovi i vrste gljiva na žiru i njihov udio u uzorku, provodila se dopunska izmjera spora nekih vrsta gljiva za potvrdu determinacije te se ispitivala brzina rasta značajnih rodova gljiva izoliranih sa žira kako bi se bolje upoznale neke njihove osobine i mogućnosti zaraze zdravih žirova i na kraju postavljen je pokus zaštite žira od gljivičnih bolesti. 6.2. Istraživanje zdravstvenog stanja i mikoflore žira Zdravstveno stanje sjemena odnosi se na prisutnost ili odsutnost organizama koji uzrokuju bolesti i štete poput gljiva, bakterija, virusa, životinjskih štetnika ličinki, gusjenica, glodavaca i dr. Zdravstveno stanje je određeno brojem oštećenih sjemenki u uzorku. Testiranje zdravstvenog stanja je važno zbog utvrđivanja uzročnika bolesti i štetnika koji mogu izazvati značajnije štete i smanjiti vrijednost uroda, zatim u slučajevima uvoza sjemena kada se bolest preko sjemena može proširiti u novu regiju te prilikom određivanja vrijednosti sjemena i uzroka slabije klijavosti. Istraživanje zdravstvenog stanja provodilo se na uzorcima žira različitih stadija razvoja iz uroda 1996., 1997. i 1998. godine te na uzorcima zrelog žira iz uroda 1999. i 2000. skladištenih u hladnjaku. 6.2.1. Rad na terenu U odabranim reprezentativnim sjemenskim sastojinama u upravama šuma podružnica Karlovac (Šumarija Jastrebarsko), Zagreb (Šumarija Lipovljani), Bjelovar (Šumarija Čazma), Našice (Šumarija Donji Miholjac) i Vinkovci (Šumarija Otok) izabrano je pet stabala s razvijenom, dobro osvijetljenom krošnjom. Ispod svake krošnje postavljeno je platneno postolje površine 1 m2 na visini 1 m od tla (slika 6.1.). Platnena postolja postavljena su u srpnju 1996. godine. Uzorci žira sakupljani su s postavljenih platnenih ploha zatim s tla na površini veličine 1m2 pokraj platnenih postolja te kao slučajan uzorak s tla širom odjela. U svakoj sjemenskoj sastojini u jednom obilasku sakupljeno je 11 uzoraka osim u srpnju 1996. godine kada je sakupljeno 5 uzoraka manje jer su platnena postolja tek bila postavljena. Uzorci su sakupljani u periodu od 1996. do 1998. godine sredinom srpnja, kolovoza, rujna i listopada u različitim stadijima razvoja odnosno zrelosti žira od nerazvijenih žirića veličine 0,5 cm do Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 43 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA zrelih žirova veličine 2,5-4,0 cm. U tom periodu sakupljeno je i obrađeno 624 uzorka, odnosno 18 629 žirova. Broj uzoraka 624 odnosi se na sveukupni broj sakupljenih uzoraka koji je manji za 25 uzorka jer prve godine u srpnju nije sakupljan žir s kontrolnih ploča i za 11 uzoraka manje jer u listopadu 1997. godine u Otoku nije bilo žira. Uzorci su stavljani u papirnate vrećice s upisanim datumom, oznakom lokaliteta i mjestom sabiranja te su dopremani u Šumarski institut Jastrebarsko na analizu. Uzorke čini: 1. Žir sakupljan s platnenog postolja (1 postolje – 1 uzorak), 2. Žir sakupljen s površine tla 1 m2 (1 m2 – 1 uzorak), 3. žir sakupljen slučajno širom odjela – 1 uzorak. Za određivanje mikoflore zrelog žira nakon čuvanja u hladnjaku odnosno skladištenja, korišteni su uzorci sakupljeni sa tla u jesen 1999. godine, s područja 12 šumarija i 6 uprava šuma, ukupno 12 uzoraka oboljelog žira od 14 do 70 komada odnosno sve zajedno 429 žirova. Uzorak čini slučajno sakupljeni žir na području jedne šumarije. Uzorak je sakupljen u jednom ili u dva odjela. S obzirom da su uzorci bili mali zbog veoma slabog uroda provedena je analiza zrelog žira iz uroda 2000. godine, koji je bio dobar. Od sakupljenih uzoraka žira s tla širom odabranih odjela, za analizu je izabrano 19 uzoraka s područja 18 šumarija i 6 uprava šuma. Od svakog uzorka analiziran je radni uzorak veličine 120 žirova slučajno odabranih što je ukupno iznosilo 2280 žirova. To znači da uzorak čini 120 slučajno odabranih žirova iz prosječnih uzoraka žira. Takav uzorak naziva se u Sjemenarstvu radni uzorak jer se izdvaja za analizu nekog od elemenata kvalitete sjemena. Prosječan uzorak žira prema Regentu (1980.) čini žir uzet na propisan način iz partije sjemena tako da što vjernije prikazuje njenu kvalitetu. Pod partijom sjemena podrazumijeva se sjeme iste vrste koja potječe iz istog sjemenskog objekta i koje je na isti način i iste sezone brano, dorađeno i uskladišteno. Slika 6.1. Platneno postolje za sakupljanje žira Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 44 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA 6.2.2. Rad u laboratoriju Uzorci sakupljeni na terenu analizirani su u fitopatološkom laboratoriju Šumarskog instituta Jastrebarsko primjenom makroskopske metode i mikroskopske odnosno fitopatološke metode. Metode rada prilagođene su uvjetima i raspoloživoj opremi. 6.2.2.1. Makroskopska metoda analize zdravstvenog stanja i oštećenosti žira Makroskopskom metodom uzorci su direktno ispitani sa ili bez steroskopskog mikroskopa i evidentirana su oštećenja kao i prisutne bolesti i štetnici na sjemenu. Sjeme je ispitano na površini i u unutrašnjosti. Žirovi iz uzoraka sakupljenih u periodu od 1996. do 1998. godine pregledani makroskopskom metodom, okularno i uz pomoć binokulara, kategorizirani su u grupe: zdravi žir, žir oštećen kukcima, kukcima i gljivama, gljivama te glodavcima i pticama. Prilikom analize žiru je skidana ljuska (slika 6.2.). Razlog je tome što analiza sjemena u ljusci ne pokazuje realnu sliku. Žiru koji djeluje izvana zdravo, a njegova vanjska ljuska neoštećeno često su unutarnji dijelovi ljuske i kotiledoni zaraženi gljivom (slika 6.3.), ličinkom ili gusjenicom. Uzorci s ploha na platnu i na tlu analizirani su u cijelosti dok se iz slučajnog uzorka širom odjela izdvojilo od 100 do 200 žirova za analizu ovisno o količini sakupljenog uzorka. Žir iz uroda 1999. i 2000. čuvan je u hladnjaku u PVC vrećicama na temperaturi 4-5 °C. Nakon tri mjeseca skladištenja uzorci su analizirani makroskopski, a nakon toga i mikroskopski. Uzorke žira uroda 1999. godine činili su bolesni žirovi odvojeni prilikom istraživanja oštećenja od glodavaca. Nakon skidanja ljuske žira opisivani su simptomi oboljenja i morfologija postojećih gljiva. Iz prosječnih uzoraka sjemena iz uroda 2000. godine, odvojen radni uzorak veličine 120 komada žirova analiziran je metodom ispitivanja sjemena na pijesku uz inkubaciju. Žir je složen na metalne podloške (tace) na vlažan sterilizirani pijesak na odgovarajući razmak kako bi se izbjeglo sekundarno širenje gljivičnih organizama a zatim je stavljen u termostat klijalicu (inkubator) na naklijavanje i potenciranje rasta gljiva kojima je eventualno zaražen (slika 6.4.). Temperatura u termostat klijalici bila je promjenjiva od 20 °C do 30 °C, temperatura od 20 °C u trajanju od 16 sati a temperatura od 30 °C u trajanju od 8 sati dnevno. Naklijavanje je trajalo 35 dana. Za to vrijeme 7., 14., 21., 28. i 35. dan brojane su normalno isklijale sjemenke a na bolesnom žiru praćena je pojava i razvoj gljiva (slika 6.5.) i pri tom su sva zapažanja bilježena. Zadnji dan svim sjemenkama Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 45 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA oljuštena je ljuska i zatim su odvajane po kategorijama: normalno isklijale sjemenke, svježe neisklijale sjemenke te bolesne i gnjile sjemenke (slike 6.7. i 6.8.). Određivan je broj i učešće kategorija u pojedinom uzorku. Normalno isklijale sjemenke su one bez tragova bolesti, s vitalnim kotiledonima i normalno razvijenim korjenčićem koji izbija kroz mikropilu. Svježe neisklijale su one sjemenke koje su potpuno zdrave ali nisu isklijale. Bolesne i gnjile sjemenke su one koje su prekrivene vegetativnim ili plodnim tijelima gljivica ili su progrižene od larvi kukaca. Nakon određivanja zdravstvenog stanja i oštećenosti žira pristupilo se mikroskopskoj tj. fitopatološkoj analizi bolesnog sjemena. Slika 6.2. Analiza zdravstvenog stanja žira, skidanje ljuske, kategoriziranje i stavljanje oboljelog žira u petrijeve zdjelice Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 46 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA Slika 6.3. Izgled kotiledona ispod ljuske okularno zdravog žira Slika 6.4. Uzorci žira uroda 2000. godine u termostat klijalici na naklijavanju i potenciranju rasta gljiva Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 47 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA Slika 6.5. Radni uzorak žira na vlažnom steriliziranom pijesku treći tjedan nakon stavljanja u termostat klijalicu Slika 6.6. Uzorak žira, četvrti tjedan praćenja klijanja i pojave simptoma bolesti. Uslijed bubrenja žira proraštenog gljivom došlo je do raspucavanja perikarpa Slika 6.7. Žir nakon ljuštenja ljuske Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 48 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA Slika 6.8. Odvajanje žira po kategorijama: normalno isklijali žir, bolestan i gnjio te svježe neisklijali žir. 6.2.2.2. Mikroskopska odnosno fitopatološka analiza oboljelog žira Metodom fitopatološke analize žir, iz kategorije oštećenosti gljivama, ispitivan je na prisutnost uzročnika bolesti – gljive u uvjetima koji su povoljni za razvoj mikroorganizama tj. primjenom inkubacije u Petrijevim zdjelicama promjera 9 cm na dva tipa podloge: filtar papiru i hranjivoj podlozi Potato Dextrosa Agar (PDA) kako bi se potaknuo rast patogena iz lužnjakovog sjemena i omogućilo ispitivanje karakteristika kolonija gljiva radi njihove identifikacije. Žir je analiziran na površini i u unutrašnjosti. Prilikom fitopatološkog ispitivanja neophodna je upotreba binokulara i svjetlosnog mikroskopa. Nakon skidanja ljuske sa žira, kotiledoni sa raznim simptomima bolesti stavljani su u sterilne Petrijeve zdjelice na sterilizirani filtar papir koji je prethodno navlažen prokuhanom destiliranom vodom (slike 6.9. i 6.10.) kako bi se potaknuo rast i sazrijevanje gljiva na žiru. Prije stavljanja u Petrijeve zdjelice žir je dezinficiran uranjanjem u 0,1% vodenu otopinu HgCl (sublimat) ili u 1% vodenu otopinu NaOCl (natrijevhipoklorit) na 5 minuta nakon čega je tri puta ispiran u steriliziranoj destiliranoj vodi. Kotiledoni i ljuske žira na kojima je već formirano vegetativno tijelo gljive također su stavljani na vlažan steriliziran filtar papir na daljnji razvoj gljiva i formiranje reproduktivnih organa no u tom slučaju žir nije prethodno dezinficiran da se ne unište postojeći gljivični organizmi. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 49 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA Petrijeve zdjelice držane su u laboratoriju na sobnoj temperaturi od 22-24 °C. Vlaga u Petrijevim zdjelicama je konstantno održavana. Uzorci su nakon stavljanja na vlagu pregledavani svaki 3., 5., 7., 10., 14. dan pa sve do 30. dana a po potrebi i duže. Na nekim uzorcima žira razvilo se samo vegetativno tijelo gljive (micelij) dok su se na nekima formirale i fruktifikacije. Ponekad je bio potreban period od 40 dana da bi se razvila plodna tijela na žiru. Kako bi se ustanovio uzročnik oboljenja žira sa simptomima oboljenja ali bez razvijenog tijela gljive bilo je potrebno potaknuti razvoja gljiva što je učinjeno tako da su mali komadići nekrotiziranog tkiva kotiledona, prethodno dezinficiranih, nasađivani na hranjivu podlogu Potato Dextrosa Agar u Petrijevim zdjelicama u besprašnoj komori (laminaru) i držani u uvjetima sobne temperature (slika 6.11.). Osim toga vegetativni i plodni dijelovi tijela gljiva skidani su sa sjemena i stavljani su također na PDA hranjivu podlogu. Kolonije gljiva izrasle na hranjivoj podlozi pojedinačno su reizolirane i pročišćavane presađivanjem u čiste kulture (slike 6.12. i 6.13.). Tako dobivene čiste kulture su analizirane i opisivane. Praćen je rast i razvoj čistih kultura gljiva 3., 5., 7., 10., 14. dan a prema potrebi i duže. Razlog tako dugog praćenja je taj što je nekim gljivama trebalo više vremena za njihovo sazrijevanje i za stvaranje fruktifikacija. Gljivični organizmi formirani na ljuskama žira, kotiledonima ili u čistoj kulturi na hranjivoj podlozi analizirani su pomoću binokulara povećanja 7,5x do 20x i svjetlosnog mikroskopa pod povećanjem 100x do 400x. Na osnovi simptoma oboljenja i morfoloških karakteristika gljiva na žiru provedena je determinacija gljivičnih organizama. Slika 6.9. Kotiledoni žira sa simptomima oboljenja na inkubaciji u Petrijevim zdjelicama na vlažnom filtar papiru Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 50 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA Slika 6.10. Formiranje vegetativnog tijela gljive na kotiledonima žira u uvjetima vlažne komore u Petrijevoj zdjelici na filtar papiru Slika 6.11. Kolonije različitih vrsta gljiva izoliranih sa žira i nasađenih na PDA hranjivu podlogu u Petrijevim zdjelicama Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 51 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA Slika 6.12. Reizolacija gljiva u čiste kulture u besprašnoj komori Slika 6.13. Čiste kulture gljiva izoliranih sa žira. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 52 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA 6.2.2.3. Determinacija gljiva izoliranih sa žira Prilikom identifikacije i determinacije gljiva proučavani su i opisivani simptomi bolesti (sive, crne, smeđe ili žućkaste pjege, pjege oštrog ili nejasnog ruba, uleknute pjege, crni tvrdi žir, mumificirani žir), zatim morfologija kolonija gljiva i način rasta micelija (vatasta, vunasta, paučinasta, praškasta, polegla, čupava, lepezasta), boja micelija (crna, narančasta, ljubičasta, maslinasto zelena), obojenje hranjive podloge (crna, žuta, boja mesa), oblik plodnih tijela (piknida, acervul). Mikroskopiranjem hifa i spora utvrđivane su njihove karakteristike (veličina, boja, oblik). Veličine spora mjerene su mikrometrom, mjernim instrumentom koji se pričvrsti za okular mikroskopa te pomoću računala i programa DP-Soft. Svi dobiveni podaci uspoređivani su s podacima iz dostupne literature o mikrogljivama i na temelju njihove analize izvršena je determinacija gljiva sa žira. 6.3. Izmjera dimenzija spora najčešćih vrsta gljiva izoliranih sa žira S obzirom da je izmjera spora na starom tipu mikrometra bila nepraktična i spora odlučeno je izmjeriti spore odabranih vrsta gljiva, koliko je vrijeme dozvoljavalo, u Olympus-ovom uredu na njihovom novom uređaju pripremljenom za demonstraciju rada. Uređaj se sastojao od svjetlosnog mikroskopa, digitalne kamere, osobnog računala i računalnog programa DP – SOFT. To je program za profesionalne fotografije koji uključuje kontrolu digitalne kamere, spremanje fotografija, obradu slike i analizu funkcija podataka sa slike. Odabrano je devet različitih vrsta gljiva koje najčešće dolaze na žiru i obilno sporuliraju, a bile su izolirane u čistu kulturu na hranjivoj podlozi u stadiju fruktifikacije: Alternaria alternata, Arthrobotrys arthrobotryoides, Fusarium avenaceum, Fusarium moniliforme, Graphium roboris, Pestalotia funerea, Phomopsis quercella, Trichoderma viride i Trichothecium roseum. Uzorak spora pojedinačnih vrsta gljiva prebačen je na objektno stakalce i stavljen pod objektiv mikroskopa. Pomoću osobnog računala i programa DP – SOFT uzorak je fotografiran aktiviranjem digitalne kamere, slika spora odmah je prikazana na monitoru računala, spremljena je u bazu podataka a zatim su izmjereni željeni elementi: dužine i širine spora. Izmjera uključuje primjenu kursora koji pokazuje udaljenost koju treba izmjeriti. Izmjerene vrijednosti automatski su pohranjene u tabele. Dobiveni podaci su obrađeni i provjerena je determinacija analiziranih vrsta gljiva. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 53 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA 6.4. Izmjera brzine rasta štetnih vrsta gljiva izoliranih sa žira u različitim temperaturnim uvjetima Za izmjeru brzine rasta odabrano je pet vrsta gljiva koje su često prisutne na žiru i mogu izazvati znatne štete. To su: Ciboria batschiana, Fusarium avenaceum, Graphium roboris, Phomopsis quercella i Trichoderma viride. Iz izolata navedenih gljiva proizvedene su čiste kulture na hranjivoj podlozi Potato dextrose agar (PDA) u Petrijevim zdjelicama. Kockice agara prorasle micelijem veličine 5 × 5 mm uzetih s ruba sedam dana starih kultura gljiva inokulirane su, s micelijem položenim na hranjivu podlogu, centralno u Petrijeve zdjelice promjera 9 cm. Svaka vrsta gljiva inokulirana je na 10 Petrijevih zdjelica. Petrijeve zdjelice stavljene su na inkubaciju u uvjete s različitim temperaturama: jedna polovica uzoraka držana je u sobnim uvjetima na temperaturi 22-25 °C (slika 6.16.), dok je druga polovica uzoraka držana na temperaturi 12-15 °C (slika 6.14.) u uvjetima zatvorenog balkona u zimsko godišnje doba. Rast gljiva ispitivan je linearnom izmjerom razvijajuće kolonije. Dijametar kolonije gljiva mjeren je svakodnevno sedam dana od nasađivanja inokuluma ili do dana kada je gljiva prorasla Petrijevu zdjelicu (slika 6.15.). Za svaku opažanu vrstu gljiva za određene temperaturne uvjete, proračunata je srednja vrijednost dijametralnog rasta i prosječna brzina rasta u jednom danu. Paralelno s izmjerom rasta zapažane su i promjene u morfologiji kolonija ispitivanih gljiva. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 54 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA Slika 6.14. Rast gljiva u Petrijevim zdjelicama u uvjetima temperature 12-15 °C Slika 6.15. Prikaz dijametralne izmjere kulture gljive na PDA hranjivoj podlozi Slika 6.16. Ispitivanja rasta gljiva u uvjetima sobne temperature 22-25 °C (šesti dan) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 55 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA 6.5. Ispitivanje zaštite žira od gljivičnih bolesti primjenom fungicida Sjeme hrasta lužnjaka podložno je djelovanju različitih gljivičnih organizama koji ga oštećuju, razaraju i uništavaj te tako smanjuju njegovu vrijednost. Štete nastaju u svim fazama razvoja sjemena a posebno su značajne za vrijeme skladištenja. Kako bi žir zaštitili od štetnog djelovanja gljiva i time osigurali veći broj proklijalih sjemenki, potrebno je provoditi mjere zaštite žira u vidu tretiranja fungicidima. Da bi dobili konkretne podatke o zaštiti žira upotrebom fungicida proveden je pokus tretiranja žira različitim vrstama fungicida. Pokus je proveden u laboratoriju i u polju. 6.5.1. Pokus zaštite žira hrasta lužnjaka u laboratoriju Za pokus je korišten žir iz uroda 1998. godine porijeklom iz gospodarske jedinice Jastrebarske nizinske šume, Šumarije Jastrebarsko, Uprave šuma Podružnice Karlovac. Žir je skladišten u hladnjači Šumarskog instituta Jastrebarsko na temperaturi od 0 do 5 °C. Pokus je postavljen u malom priručnom laboratoriju na sobnoj temperaturi od 22 do 25 °C. Za pokus je odabran okularno zdrav žir koji je opran u toploj vodi, prosušen na zraku i zatim tretiran fungicidima. Od četiri uzorka veličine 120 komada žira tri su tretirana s različitim fungicidima a četvrti netretirani služio je za kontrolu. Na slikama 6.17. i 6.18. prikazan je jedan uzorak u laboratorijskom pokusu zaštite žira nakon dva i četiri tjedna. U pokusu su upotrijebljeni slijedeći fungicidi: Cuprablau Z u koncentraciji 0,3%, Dithane S60 u dozi 2 g/kg i Vitavax 200 FF u dozi 3,5 ml/kg. Cuprablau Z je kontaktno sredstvo na osnovi bakra, sadrži dvije aktivne tvari: bakar 35% i cink 2% u formulaciji koncentrata za suspenziju. Dithane S60 ulazi u grupu organskih sredstava, njegovu djelatnu tvar čini mankozeb 60% a formuliran je kao prašivo za zaprašivanje sjemena. Vitavax 200 FF je sistemični fungicid koji sadrži djelatne tvari tiram 200 g/L i karboksin 200 g/L, formuliran je kao tekuća suspenzija za izravnu primjenu na sjemenu. Žir je stavljen u plastične kutije na podlogu od steriliziranog pijeska, natopljenog destiliranom vodom. Sjeme i zrak vlaženi su malom ručnom prskalicom. Nakon pet tjedna obavljena je registracija proklijalih sjemenki, neproklijalih sjemenki, bolesnog žira te prisutnih gljiva na bolesnom žiru. Tada su izmjerene i visine klijanaca. Gljive koje izbijaju iz bolesnog žira vide se na slici 6.19. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 56 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA Slika 6.17. Laboratorijski pokus zaštite žira nakon dva tjedna Slika 6.18. Uzorci žira u pokusu nakon četiri tjedna Slika 6.19. Gljive na bolesnom žiru Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 57 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA 6.5.2. Pokus zaštite žira hrasta lužnjaka u polju Za poljski pokus zaštite sjemena fungicidima korišten je žir iz uroda 1998. godine sakupljen na području Gospodarske jedinice Draganićki lugovi, Šumarije Draganić, Uprave šuma Podružnice Karlovac. Sjeme je skladišteno u hladnjači Šumarskog instituta Jastrebarsko na temperaturi od 0 do 5 °C. U proljeće u ožujku 1999. godine proveden je pokus zaštite žira po sistemu slučajnih blokova. Plan pokusa prikazan je na slici 6.20. U četiri varijante sjeme je tretirano s različitim fungicidima, u petoj varijanti sjeme je netretirano sijano u steriliziranu zemlju a šesta varijanta je netretirano sjeme kao kontrola. Sjeme je sijano u zemlju nabavljenu u rasadniku Šumarskog instituta Jastrebarsko. U pokusu su korišteni slijedeći fungicidi: Vitavax 200 FF u dozi 3,5 ml/kg žira, Vitavax extra u dozi 2,0 ml/kg žira, Captan WP 50 u koncentraciji 0,3% i Dithane S 60 u dozi 2 g/kg žira. Vitavax extra je sistemični fungicid sačinjen od tri djelatne tvari karboksin 300 g/L, tiabendazol 25 g/L i imazalil 20 g/L a formuliran je kao tekuća suspenzija za izravnu primjenu. Captan WP 50 pripada grupi organskih sredstava sadrži djelatnu tvar kaptan 50% i pripremljen je kao močivo prašivo za suspenziju. Osobine fungicida Vitavax 200 FF i Dithane S 60 opisani su u prethodnom pokusu. Žir je ispran u toploj vodi temperature 35-42 °C kako bi se odstranila eventualna površinska zaraza. Žirovi oštećeni insektima su odstranjeni. Za pokus su upotrijebljeni samo okularno zdravi žirovi. Nakon što je prosušen na zraku žir je tretiran fungicidima u plastičnoj posudi tako da je preparat prskan ili posut po žiru. Žir je miješan oko 5 min do ravnomjernog raspoređivanja preparata po uzorku a zatim je sađen u plastične kontejnere koji sadrže 33 sadna mjesta (stanice). Za svaku varijantu tj. tretman posađeno je ukupno 165 žirova u pet kontejnera (slika 6.21.). Znači da je svaka varijanta posađena u pet blokova. Registracija pokusa obavljena je nakon četiri mjeseca u srpnju 1999. godine. U pokusu je utvrđen broj proklijalih sjemenki i dužina klijanaca. Rezultati koji se odnose na proklijali broj sjemenki statistički su obrađeni. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 58 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA I II III IV V Sz K V2 D C K Sz K V2 D C V2 D V1 Sz D C V1 K V2 V2 V1 C Sz V1 V1 D Sz C K Slika 6.20. Plan pokusa zaštite žira (Objašnjenje oznaka: V1 – Vitavax extra, V2 – Vitavax 200FF, D – Dithane S-60, C – Captan WP-50, Sz – sterilizirano tlo, K – kontrola) Slika 6.21. Pokus zaštite žira u polju Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 59 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6. MATERIJALI I METODE RADA 6.6. Obrada podataka Disertacija je napisana pomoću operacijskog sustava Microsoft Windows XP. Tekst je pisan i uređivan u programu Microsoft Office Word 2003 dok su tabelarni prikazi i obrada podataka rađeni u programu Microsoft Office Excel 2003. Za statističku obradu podataka primijenjeni su računalni programi Statistica 6.1. (StatSoft, Inc 2003.) i Mathematica v 4.0 (Wolfram Research, 1999.). Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 60 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7. REZULTATI RADA 100% 0,00 10,38 0,00 0,00 4,06 10,33 4,06 27,33 80% 1,55 24,53 60% 89,62 40% 0,00 25,13 0,80 22,46 5,08 81,55 Zdravi žir Glodavci i ptice Gljive Kukci i gljive 7. REZULTATI RADA Kukci 46,58 46,52 IX X 20% 0% VII VIII Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 61 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.1. Analiza zdravstvenog stanja žira u periodu istraživanja od 1996-1998. godine Rezultati analize zdravstvenog stanja i mikoflore žira prikazani su po godinama istraživanja (1996., 1997. i 1998.) za odabrana područja istraživanja na kojima su uzorci sakupljani (Jastrebarsko, Lipovljani, Čazma, Donji Miholjac i Otok). Prvo je prikazano zdravstveno stanje prema kategorijama oštećenosti: oštećenost kukcima, kukcima i gljivama, gljivama te glodavcima i pticama i učešću zdravog žira u uzorcima a zatim su na djelu uzorka žira kategorije oštećenost gljivama prikazane utvrđene vrste gljiva na žiru. Rezultati su prikazani tabelarno i grafički. 7.1.1. Zdravstveno stanje prema kategorijama oštećenosti žira Uzorci žira sakupljani su tijekom navedenih godina sredinom srpnja, kolovoza, rujna i listopada u različitim razvojnim stadijima od mladih, nerazvijenih, zelenih žirića do zrelog žira. Sakupljani su s platnenih postolja, s tla pokraj postolja i širom odjela. Analiza se sastojala od utvrđivanja broja oštećenih žirova prema uzročnicima oštećenja i zdravih žirova. Rezultati analize uzoraka s jednog područja istraživanja prikazani su prema mjestu sakupljanja odvojeno za uzorke s platnenih postolja, odvojeno za uzorke s tla pokraj postolja te za slučajan uzorak s tla i zatim sveukupno tj. svi obrađeni uzorci zajedno. Rezultati su prikazani po mjesecima sakupljanja uzoraka. Uzorci su sakupljani s platnenih postolja i s tla jer se smatralo da će biti veća zaraza gljivama i to saprofitskim na uzorcima s tla nego na uzorcima s platna ali uspoređujući podatke analiza nije se uočila pravilnost u njihovim međusobnim razlikama. Štete od kukaca očitovale su se u vidu ubodnih ožiljaka i jedva vidljivih rupica nastalih prilikom polaganja jajašaca žirotoča u žir, ličinke žirotoča i gusjenice savijača unutar sjemena, izlaznih rupica ličinki i gusjenica, hodnici ispunjeni ekskrementima ili izgrižena unutrašnjost žira. Oštećenja od kukaca i gljiva očitovala su se u praznim hodnicima ličinaka ispunjenih sivosmeđim, sivo-crnim, zelenkastim ili žućkastim micelijem gljiva, izlazne rupice ispunjene zelenkastim ili žućkastim micelijem, ubodne ranice oko kojih su se razvile prevlake zalenkastog ili žućkastog micelija ili bjelkaste smolaste nakupine pune spora. Oštećenja od gljiva javljala su se u vidu pjegica i pjega sivih, crnih, smeđih, zatim u vidu crnog tvrdog žira, crnog protrulog žira, ljubičastog tkiva oko klice, nekroze tkiva kotiledona, posmeđene Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 62 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA klice, crnog vrha klice, kotiledona prekrivenih micelijem gljive, tkivo prorašteno micelijem, fruktifikacije ispod ljuske, micelij na klici, ljubičasti micelij ispod kapice, na hilumu, narančasti micelij na kapici i u unutrašnjosti kapice, raspucala ljuska žira iz koje izbija tijelo gljive. Žir oštećen glodavcima i pticama prepoznao se po oštrim zasjecima na kapici žira kod mladog žira, oguljenim dijelovima ljuske, tragovima zubiju, odgriženim dijelovima žira. Zdravi žir imao je neoštećenu ljusku, smeđe sjajne boje, svijetlo žute jedre kotiledone i čvrstu klicu. Prateći oštećenja kroz mjesece od srpnja do listopada mogli smo uočiti promjene u postotnim iznosima po kategorijama oštećenosti žira. Sredinom srpnja veličina otpalog sakupljenog žira iznosila je između 0,7 i 1,5 cm odnosno prosječno 1,1 cm. Žirići su bili nezreli zelene boje ili potamnjeli uslijed oštećenja, većina je imala na sebi kapicu dok je manjem broju kapica otpala. Na mladom žiru registrirana je najveća oštećenost od kukaca u vidu ubodnih ranica nastalih prilikom ulaganja jajašaca Balaninus spp. Ubodi su se većinom nalazili uz rub kapice i ispod kapice jer je tu najmekši dio perikarpa, zatim u bazi žira a prolazili su i kroz kapicu. Uočavani su i izlazni otvori ličinaka većinom uz rub kapice ili u bazi žira uz hilum. Unutrašnjost žira bila je izgrižena, ispunjena ekskrementima, prazna s proraslim micelijem gljive ili je u njoj bila ličinka. Na dijelu žira uz kapicu vidjeli su se oštri zarezi i grizotine od ptica i glodavaca. Gljive su se nalazile na hilumu, unutar kapice, s vanjske strane kapice, na ljusci, uz ubodne rupice, izlazne otvore i unutar žira. Analizom žira utvrđena je oštećenost kukcima od 41,32% do 90,62%, a gljivama od 1,28% do 28,43%. U kolovozu veličina otpalog žira kretala se između 1,0 do 2,6 cm, prosječno 1,8 cm. Žirovi su bili razvijeniji i poprimali su smeđkastu boju. Većina otpalih žirova bila je oštećena kukcima s ubodnim rupicama, izlaznim rupama većinom uz rub kapice. Neki žirovi bili su iznutra potpuno izgriženi i prazni ili ispunjeni ekskrementima, dok su u drugima kroz kotiledone prolazili hodnici s aktivnim ličinkama. Gljive su nalažene na sličnim dijelovima žira kao i prethodni mjesec a uočavani su i simptomi bolesti poput pjegica i uleknuća u kotiledonima. Unutar praznog žira mogao se naći sivo crni paučinasti ili smeđi micelij. Na nekim pokusnim područjima istraživanja otpadao je i zdravi žir. Oštećenost žira kukcima bila je još uvijek vrlo visoka i iznosila je od 55,59% do 85,45%, dok je oštećenost gljivama bila između 6,96% i 24,29%. Sredinom rujna žirovi su već gotovo razvijeni, većina je posmeđila ali mogao se pojedinačno naći i zeleni žir. Veličina žira iznosila je od 1,0 do 3,5 cm, prosječno 2,3 cm. Uz bolesne i oštećene žirove otpadali su i zdravi žirovi. Sredinom listopada žirovi su gotovo potpuno razvijeni i zreli. Mnogim otpalim žirovima počela je izbijati klica. Veličina žira je dosta različita i iznosi od 1,6 do 4,2 cm, prosječno 2,9 cm. U rujnu i listopadu od žirova oštećenih kukcima nalaze se žirovi Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 63 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA s jedva vidljivim ubodnim mjestom, naoko zdravi, a iznutra sa ličinkama i gusjenicama. Mnogo je vidljivih oštećenja žirova s izlaznim okruglim otvorima ličinki Curculio spp. i ovalnim otvorima gusjenica Cydia spp. Oštećenost gljivama koja je odmah vidljiva: micelij gljive na izlaznoj rupici, na hilumu, na ljusci žira i na klici. Oštećenost gljivama na kotiledonima i ispod ljuske koju vidimo prilikom ljuštenja žira su razni simptomi bolesti, razvijena vegetativna i plodna tijela na kotiledonima i ispod ljuske, crni kotiledoni ili njihovi dijelovi, trula unutrašnjost žira. Primijećeno je da ličinke prilikom bušenja hodnika i hranjenja izbjegavaju mjesta sa simptomima zaraze gljivom kao što su npr. crne dubinske pjege. Oštećenost žira kukcima u rujnu je iznosila između 45,49% i 76,19%, a gljivama između 11,79% i 29,70%. Zdravog žira bilo je između 9,24% i 27,33%. U listopadu je zabilježeno oštećenje kukcima od 29,13% do 62,77% a zaraženost gljivama bila je od 10,70% do 42,91%. Postotak zdravog žira u listopadu varirao je od 15,33% do 45,95% ovisno o području sakupljanja uzoraka. Zdravstveno stanje žira 1996. godine za svih pet područja istraživanja prikazano je u tablicama od 7.1. do 7.5. i na grafikonima od 7.1. do 7.5. U mjesecu srpnju 1996. godine otpao je samo oštećen žir. Oštećenost žira kukcima kretala se od 71,57% u Donjem Miholjcu do 89,62% u Jastrebarskom a zaraženost gljivama iznosila je od 10, 38% u Jastrebarskom do 28,43% u Donjem Miholjcu. U kolovozu oštećenost kukcima je isto bila visoka od 61,50 u Lipovljanima do 81,55% u Jastrebarskom. Zaraženost gljivama kretala se od 10,33% u Jastrebarskom do 24,29% u Donjem Miholjcu. Oštećenost kukcima i gljivama zajedno bila je 4,06% u Jastrebarskom do 9,46% u Lipovljanima. Oštećenost žira glodavcima i pticama iznosila je 4,06% u Jastrebarskom do 5,38% u Lipovljanima. U Lipovljanima je među otpalim žirom bilo 5,38% zdravog. U rujnu je osim oštećenog žira otpadao i zdravi žir. Zdravog žira utvrđeno je od 9,24% u Čazmi do 27,33% u Jastrebarskom. Žira oštećenog kukcima bilo je u uzorcima od 46,58% u Jastrebarskom do 69,28% u Otoku. Zaraženost gljivama iznosila je 14,73% u Otoku do 26,38% u Lipovljanima. Oštećenost žira glodavcima iznosila je 0,86% u Donjem Miholjcu do 3,36% u Lipovljanima. Oštećenost kukcima i gljivama zajedno registrirana je u rasponu od 0,00% u Jastrebarskom do 5,94% u Čazmi. U listopadu je otpadao smeđi zreli žir. Zdravog žira bilo je od 25,13% u Jastrebarskom do 33,17% u Donjem Miholjcu. Žira oštećenog insektima iznosilo je 29,13% u Donjem Miholjcu do 51,79% u Otoku. Tragovi glodavaca i ptica vidjeli su se na 0,12% žireva u Donjem Miholjcu do 3,33% u Lipovljanima. Kukci i gljive zajedno nađeni su na 0,25% u Donjem Miholjcu do 6,45% u Čazmi. Oštećenost gljivama iznosila je od 11,75% u Lipovljanima do 37,33% u Donjem Miholjcu. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 64 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.1. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Jastrebarsko 1996. godina VII mjesec Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s tla – ukupno 87,20 0,00 12,80 0,00 0,00 78 Slučajan uzorak 91,40 0,00 8,60 0,00 0,00 105 Sveukupno 89,62 0,00 10,38 0,00 0,00 183 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe na platnu – ukupno 88,60 0,00 11,40 0,00 0,00 35 Plohe s tla – ukupno 94,60 0,00 3,60 1,80 0,00 56 Slučajan uzorak 76,10 6,10 12,20 5,60 0,00 180 Sveukupno 81,55 4,06 10,33 4,06 0,00 271 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe na platnu – ukupno 39,60 0,00 30,20 0,00 30,20 96 Plohe s tla – ukupno 53,60 0,00 23,80 2,40 20,20 84 Slučajan uzorak 47,20 0,00 21,10 2,10 29,60 142 Sveukupno 46,58 0,00 24,53 1,55 27,33 322 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe na platnu – ukupno 52,50 0,00 26,30 0,00 21,20 80 Plohe s tla – ukupno 41,60 6,90 22,80 1,00 27,70 101 Slučajan uzorak 46,60 6,20 20,70 1,00 25,40 193 Sveukupno 46,52 5,08 22,46 0,80 25,13 374 VIII mjesec IX mjesec X mjesec 100% 0,00 10,38 0,00 0,00 4,06 10,33 4,06 27,33 80% 1,55 24,53 60% 25,13 0,80 22,46 Zdravi žir Glodavci i ptice 89,62 40% 0,00 5,08 81,55 Gljive Kukci i gljive Kukci 46,58 46,52 IX X 20% 0% VII VIII Grafikon 7.1. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Jastrebarsko 1996. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 65 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.2. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Lipovljani 1996. godina VII mjesec Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s tla – ukupno 82,54 0,00 11,11 6,35 0,00 63 Slučajan uzorak 75,00 0,00 15,40 7,70 1,90 104 Sveukupno 77,84 0,00 13,77 7,19 1,20 167 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe na platnu – ukupno 66,20 14,00 8,50 8,50 2,80 71 Plohe s tla – ukupno 63,90 7,70 18,60 2,50 7,20 194 Slučajan uzorak 57,50 9,50 21,50 7,00 4,50 200 Sveukupno 61,50 9,46 18,28 5,38 5,38 465 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe na platnu – ukupno 40,50 11,00 26,40 2,50 19,60 163 Plohe s tla – ukupno 57,90 3,70 25,70 3,20 9,50 380 Slučajan uzorak 44,50 5,50 27,50 4,50 18,00 200 Sveukupno 50,47 5,79 26,38 3,36 14,00 743 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe na platnu – ukupno 43,80 6,80 8,20 1,40 39,70 146 Plohe s tla – ukupno 48,60 6,00 11,60 2,80 31,00 284 Slučajan uzorak 50,50 4,00 14,50 5,50 25,50 200 Sveukupno 48,10 5,55 11,75 3,33 31,27 630 VIII mjesec IX mjesec X mjesec 100% 90% 80% 1,20 7,19 13,77 0,00 70% 5,38 5,38 18,28 9,46 14,00 3,36 31,27 26,38 3,33 11,75 60% 5,79 50% 40% 5,55 77,84 Glodavci i ptice Gljive Kukci i gljive Kukci 61,50 30% Zdravi žir 50,47 48,10 IX X 20% 10% 0% VII VIII Grafikon 7.2. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Lipovljani 1996. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 66 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.3. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Čazma 1996. godina VII mjesec Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s tla – ukupno 83,00 0,60 16,40 0,00 0,00 177 Slučajan uzorak 81,50 0,00 18,50 0,00 0,00 108 Sveukupno 82,46 0,35 17,19 0,00 0,00 285 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe na platnu – ukupno 67,20 10,30 22,40 0,00 0,00 58 Plohe s tla – ukupno 78,80 5,90 15,30 0,00 0,00 85 Slučajan uzorak 75,00 7,70 16,00 1,30 0,00 156 Sveukupno 74,58 7,69 17,06 0,67 0,00 299 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe na platnu – ukupno 73,20 0,00 22,00 2,40 2,4 41 Plohe s tla-ukupno 62,75 7,84 18,63 0,00 10,78 102 Slučajan uzorak 62,50 6,25 20,00 1,25 10,00 160 Sveukupno 64,03 5,94 19,80 0,99 9,24 303 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe na platnu – ukupno 58,33 5,56 16,67 0,00 19,44 36 Plohe s tla – ukupno 37,70 10,20 19,40 3,10 29,60 98 Slučajan uzorak 49,80 4,80 15,90 1,00 28,50 207 Sveukupno 47,21 6,45 17,01 1,47 27,86 341 VIII mjesec IX mjesec X mjesec 100% 0,00 0,00 0,67 17,19 17,06 9,24 0,99 7,69 19,80 0,35 80% 5,94 27,86 1,47 17,01 60% 6,45 40% 82,46 Zdravi žir Glodavci i ptice Gljive Kukci i gljive 74,58 64,03 Kukci 47,21 20% 0% VII VIII IX X Grafikon 7.3. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Čazma 1996. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 67 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.4. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Donji Miholjac 1996. godina VII mjesec Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir Plohe s tla – ukupno 69,00 0,00 31,00 0,00 0,00 84 Slučajan uzorak 72,50 0,00 27,50 0,00 0,00 222 Sveukupno 71,57 0,00 28,43 0,00 0,00 306 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe na platnu – ukupno 73,10 16,10 10,80 0,00 0,00 93 Plohe s tla – ukupno 82,10 0,00 17,90 0,00 0,00 95 Slučajan uzorak 61,10 3,10 35,80 0,00 0,00 162 Sveukupno 70,00 5,71 24,29 0,00 0,00 350 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe na platnu – ukupno 65,30 4,10 16,30 2,00 12,20 49 Plohe s tla – ukupno 63,20 2,60 18,40 0,00 15,80 114 Slučajan uzorak 57,60 4,90 19,10 1,10 17,40 184 Sveukupno 60,52 4,03 18,44 0,86 16,14 347 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe na platnu – ukupno 26,20 0,80 41,80 0,00 31,20 237 Plohe s tla – ukupno 32,80 0,00 32,80 0,30 34,20 366 Slučajan uzorak 26,20 0,00 40,20 0,00 33,60 214 Sveukupno 29,13 0,25 37,33 0,12 33,17 817 VIII mjesec IX mjesec X mjesec 100% 0,00 0,00 28,43 24,29 0,00 5,71 80% 16,14 0,86 33,17 18,44 4,03 60% 0,12 Zdravi žir Glodavci i ptice 37,33 40% N 71,57 70,00 Gljive Kukci i gljive 60,52 20% 0,25 Kukci 29,13 0% VII VIII IX X Grafikon 7.4. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Donji Miholjac 1996. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 68 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.5. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Otok 1996. godina VII mjesec Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s tla – ukupno 71,90 1,70 25,10 1,20 0,00 171 Slučajan uzorak 80,60 0,00 19,40 0,00 0,00 149 Sveukupno 75,94 0,94 22,50 0,63 0,00 320 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe na platnu – ukupno 71,60 1,40 27,00 0,00 0,00 74 Plohe s tla – ukupno 78,00 8,00 14,00 0,00 0,00 100 Slučajan uzorak 72,50 3,30 23,50 0,70 0,00 153 Sveukupno 74,01 4,28 21,40 0,31 0,00 327 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe na platnu – ukupno 74,60 7,00 12,70 1,40 4,20 71 Plohe s tla – ukupno 66,70 4,60 13,90 0,00 14,80 108 Slučajan uzorak 68,70 2,10 16,40 1,40 11,40 140 Sveukupno 69,28 4,08 14,73 0,94 10,97 319 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe na platnu – ukupno 51,10 0,00 22,30 0,30 26,20 309 Plohe s tla – ukupno 54,80 0,80 21,40 0,40 22,60 248 Slučajan uzorak 48,50 1,20 18,30 0,00 32,00 169 Sveukupno 51,79 0,55 21,07 0,28 26,31 726 VIII mjesec IX mjesec X mjesec 100% 0,00 0,63 0,00 0,31 90% 22,50 21,40 80% 0,94 4,28 70% 10,97 0,94 4,08 60% 50% 40% 26,31 14,73 0,28 21,07 Zdravi žir 0,55 Glodavci i ptice Gljive 75,94 74,01 Kukci i gljive 69,28 30% 51,79 Kukci 20% 10% 0% VII VIII IX X Grafikon 7.5. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Otok 1996. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 69 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Zdravstveno stanje žira 1997. godine za svih pet područja istraživanja prikazano je u tablicama od 7.6 do 7.10. i na grafikonima od 7.6. do 7.10. U srpnju je najviše kukcima oštećenog žira bilo u Otoku 90,62% a najmanje u Donjem Miholjcu 72,07%. Zaraza gljivama bila je prisutna na 9,38% uzoraka u Otoku do 21,17% u Donjem Miholjcu. Glodavci i ptice oštetili su 2,25% žira u D. Miholjcu do 14,08% u Jastrebarskom. Kukci i gljive zajedno nađeni su na uzorcima iz D. Miholjca 4,50% i 4,94% iz Čazme. U kolovozu oštećenost žira kukcima kretala se od 67,74% u D. Miholjcu do 85,45% u Jastrebarskom. Zaraza gljivama bila je prisutna na 10,13% uzoraka u Otoku do 16,13% uzoraka u D. Miholjcu. U uzorcima iz Čazme nađeno je 13,98% zdravog žira prerano otpalog. Uzorci oštećeni od glodavaca i ptica nađeni su u Lipovljanima 13,94%. Oštećenja od kukaca i gljiva zajedno bila su prisutna na uzorcima iz Otoka 10,76% i D. Miholjca 15,48%. U rujnu je oštećenost žira kukcima iznosila od 54,55% u Jastrebarskom do 66,19% u Lipovljanima. Zaraženost gljivama kretala se od 12,77% u Otoku do 21,15% u Čazmi. Oštećenost od glodavaca i ptica bila je najveća u Otoku 31,91%, u Lipovljanima je iznosila 9,35% a u Čazmi 1,92%. Kukci i gljive zajedno utvrđeni su na uzorcima iz Jastrebarskog 6,70%, Lipovljanima 6,47, D. Miholjac 4,31% i Čazmi 2,56%. Zdravi žira je bilo 10,34% u Donjem Miholjcu do 18,65% u Jastrebarskom. U Lipovljanima i Otoku nije bilo zdravog otpalog žira. U listopadu oštećenost žira kukcima kretala se od 36,41% u Čazmi do 62,77% u Lipovljanima. Zaraženost gljivama iznosila je 18,02% u Jastrebarskom do 28,80 u Čazmi. Zdravog žira bilo je 15,33% u Lipovljanima do 28,26% u Čazmi. Oštećenost od glodavaca i ptica kretala se od 0,73% u Lipovljanima do 4,95% u D. Miholjcu. Zaraza kukcima i gljivama zajedno kretala se od 2,19% do 5,43%. U Otoku u listopadu nije se mogao naći otpali žir na tlu. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 70 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.6. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Jastrebarsko 1997. godina VII mjesec Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 100,00 0,00 0,00 0,00 0,00 70 Plohe s tla – ukupno 100,00 0,00 0,00 0,00 0,00 43 Slučajan uzorak 70,00 0,00 0,00 30,00 0,00 100 Sveukupno 85,92 0,00 0,00 14,08 0,00 213 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 95,30 0,00 4,70 0,00 0,00 64 Plohe s tla – ukupno 96,30 0,00 3,70 0,00 0,00 54 Slučajan uzorak 76,60 5,10 18,30 0,00 0,00 137 Sveukupno 85,49 2,75 11,76 0,00 0,00 255 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 43,70 9,40 25,00 0,00 21,90 32 Plohe s tla – ukupno 62,90 3,70 22,20 0,00 11,10 27 Slučajan uzorak 55,30 6,70 18,70 0,00 19,30 150 Sveukupno 54,55 6,70 20,10 0,00 18,65 209 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 42,30 0,00 26,90 0,00 30,80 26 Plohe s tla – ukupno 58,30 0,00 25,00 0,00 16,70 36 Slučajan uzorak 60,90 0,00 13,60 2,70 22,70 110 Sveukupno 57,56 0,00 18,02 1,74 22,67 172 VIII mjesec IX mjesec X mjesec 100% 14,08 0,00 11,76 0,00 2,75 0,00 18,65 22,67 0,00 80% 1,74 20,10 18,02 60% 6,70 85,92 0,00 Zdravi žir Glodavci i ptice Gljive 85,49 Kukci i gljive 40% Kukci 54,55 57,56 IX X 20% 0% VII VIII Grafikon 7.6. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Jastrebarsko 1997. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 71 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.7. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Lipovljani 1997. godina VII mjesec Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 100,00 0,00 0,00 0,00 0,00 41 Plohe s tla – ukupno 79,21 0,00 17,82 2,97 0,00 101 Slučajan uzorak 76,00 0,00 17,00 7,00 0,00 100 Sveukupno 81,40 0,00 14,46 4,13 0,00 242 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 78,80 0,00 21,10 0,00 0,00 33 Plohe s tla – ukupno 78,10 3,10 18,80 0,00 0,00 32 Slučajan uzorak 62,00 0,00 15,00 23,00 0,00 100 Sveukupno 68,48 0,61 16,97 13,94 0,00 165 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 100,00 0,00 0,00 0,00 0,00 6 Plohe s tla – ukupno 72,70 9,10 18,20 0,00 0,00 33 Slučajan uzorak 62,00 6,00 19,00 13,00 0,00 100 Sveukupno 66,19 6,47 17,99 9,35 0,00 139 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 100,00 0,00 0,00 0,00 0,00 7 Plohe s tla – ukupno 60,00 0,00 20,00 3,33 16,67 30 Slučajan uzorak 61,00 3,00 20,00 0,00 16,00 100 Sveukupno 62,77 2,19 18,98 0,73 15,33 137 VIII mjesec IX mjesec X mjesec 100% 0,00 4,13 14,46 80% 0,00 0,00 13,94 16,97 0,61 0,00 9,35 17,99 6,47 15,33 0,73 18,98 2,19 60% Zdravi žir Glodavci i ptice Gljive 40% 81,40 Kukci i gljive 68,48 66,19 62,77 VIII IX X Kukci 20% 0% VII Grafikon 7.7. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Lipovljani 1997. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 72 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.8. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Čazma 1997. godina VII mjesec Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 78,80 5,60 13,10 2,50 0,00 160 Plohe s tla – ukupno 86,70 6,00 8,30 0,00 0,00 84 Slučajan uzorak 73,00 3,00 19,00 5,00 0,00 100 Sveukupno 78,78 4,94 13,66 2,62 0,00 344 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 84,00 0,00 16,00 0,00 0,00 25 Plohe s tla – ukupno 78,60 0,00 14,30 0,00 7,10 42 Slučajan uzorak 63,20 2,60 11,80 0,00 22,40 76 Sveukupno 71,33 1,40 13,29 0,00 13,98 143 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 57,90 0,00 21,10 0,00 21,00 19 Plohe s tla – ukupno 56,80 2,70 24,30 0,00 16,20 37 Slučajan uzorak 58,00 3,00 20,00 3,00 16,00 100 Sveukupno 57,69 2,56 21,15 1,92 16,67 156 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 48,10 7,40 25,90 0,00 18,50 27 Plohe s tla – ukupno 31,60 8,80 28,10 0,00 31,50 57 Slučajan uzorak 36,00 3,00 30,00 2,00 29,00 100 Sveukupno 36,41 5,43 28,80 1,09 28,26 184 VIII mjesec IX mjesec X mjesec 100% 0,00 2,62 13,66 80% 4,94 13,98 0,00 13,29 1,40 16,67 1,92 21,15 2,56 60% 28,26 1,09 28,80 Zdravi žir Glodavci i ptice Gljive 40% 78,78 5,43 71,33 Kukci i gljive Kukci 57,69 36,41 20% 0% VII VIII IX X Grafikon 7.8. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Čazma 1997. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 73 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.9. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Donji Miholjac 1997. godina VII mjesec Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 83,30 0,00 14,90 1,80 0,00 114 Plohe s tla – ukupno 81,80 0,00 18,20 0,00 0,00 33 Slučajan uzorak 50,70 13,30 32,00 4,00 0,00 75 Sveukupno 72,07 4,50 21,17 2,25 0,00 222 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 60,00 20,00 20,00 0,00 0,00 15 Plohe s tla – ukupno 60,00 22,50 15,00 2,50 0,00 40 Slučajan uzorak 72,00 12,00 16,00 0,00 0,00 100 Sveukupno 67,74 15,48 16,13 0,65 0,00 155 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 83,30 0,00 16,60 0,00 0,00 18 Plohe s tla – ukupno 48,10 18,50 18,50 0,00 0,00 23 Slučajan uzorak 62,70 0,00 21,30 0,00 16,00 75 Sveukupno 64,66 4,31 20,69 0,00 10,34 116 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 75,00 0,00 12,50 0,00 12,50 8 Plohe s tla – ukupno 53,80 0,00 23,10 0,00 23,10 13 Slučajan uzorak 52,50 3,80 20,00 6,20 17,50 80 Sveukupno 54,45 2,97 19,80 4,95 17,82 101 VIII mjesec IX mjesec X mjesec 100% 0,00 2,25 0,00 0,65 16,13 21,17 80% 4,50 15,48 10,34 0,00 17,82 20,69 4,95 4,31 19,80 60% 2,97 Zdravi žir Glodavci i ptice Gljive 40% Kukci i gljive 72,07 67,74 Kukci 64,66 54,45 20% 0% VII VIII IX X Grafikon 7.9. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Donji Miholjac 1997. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 74 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.10. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Otok 1997. godina VII mjesec Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 93,79 0,00 6,21 0,00 0,00 145 Plohe s tla – ukupno 90,80 0,00 9,20 0,00 0,00 163 Slučajan uzorak 83,10 0,00 16,90 0,00 0,00 65 Sveukupno 90,62 0,00 9,38 0,00 0,00 373 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 71,00 19,40 9,60 0,00 0,00 31 Plohe s tla – ukupno 88,90 0,00 11,10 0,00 0,00 36 Slučajan uzorak 78,00 12,10 9,90 0,00 0,00 91 Sveukupno 79,11 10,76 10,13 0,00 0,00 158 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 100,00 0,00 0,00 0,00 0,00 6 Plohe s tla – ukupno 50,00 0,00 50,00 0,00 0,00 2 Slučajan uzorak 48,70 0,00 12,80 38,50 0,00 39 Sveukupno 55,32 0,00 12,77 31,91 0,00 47 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0 Plohe s tla – ukupno 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0 Slučajan uzorak 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0 Sveukupno 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0 VIII mjesec IX mjesec X mjesec 100% 90% 0,00 9,38 0,00 0,00 10,13 0,00 10,76 31,91 80% 70% 50% Zdravi žir 12,77 0,00 60% Glodavci i ptice Gljive 90,62 79,11 40% 30% Kukci i gljive Kukci 55,32 20% 10% 0,00 0% VII VIII IX X Grafikon 7.10. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Otok 1997. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 75 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Zdravstveno stanje žira 1998. godine za svih pet područja istraživanja prikazano je u tablicama od 7.11. do 7.15. i na grafikonima od 7.11. do 7.15. U srpnju oštećenost kukcima iznosila je 41,32% u Čazmi do 78,34% u Otoku. Oštećenost gljivama kretala se od 1,28% u Jastrebarskom do 20,60 u D. Miholjcu. Oštećenost glodavcima i pticama bila je prisutna u D. Miholjcu i Lipovljanima 2,62% i 2,83%. Zaraza kukcima i gljivama zajedno bila je najveća u D. Miholjcu (6,00%) i u Lipovljanima (8,91%). U analiziranim uzorcima otpalog žira u Lipovljanima bilo je 45,78% zdravog žira i u Čazmi 49,31% dok na drugim lokaliteteima nije bilo zdravog žira. U kolovozu je oštećenost kukcima iznosila od 55,59% u Čazmi do 80,90% u Jastrebarskom. Zaraza gljivama iznosila je od 6,90% u Jastrebarskom do 20,82% u D. Miholjcu. Otpalog zdravog žira bilo je u Lipovljanima, Jastrebarskom i Čazmi u iznosima 6,73%, 10,88% i 24,47%. Oštećenost glodavcima i pticama bila je vrlo mala a zaraza kukcima i gljivama zajedno iznosila je 1,6% u D. Miholjcu do 8,19% u Lipovljanima. U rujnu oštećenost kukcima bila je još uvijek dosta visoka od 45,49% u Lipovljanima do 76,19% u Jastrebarskom. Zaraza gljivama kretala se od 11,79% u D. Miholjcu do 29,70% u Lipovljanima. Zdravog žira bilo je malo od 10,54% u Jastrebarskom do 19,55% u Lipovljanima. Oštećenost od glodavaca i ptica bila je vrlo malo zastupljena. Oštećenost kukcima i gljivama zajedno iznosila je od 0,71% do 4,05%. U listopadu je u analiziranim uzorcima zdravog žira bilo od 23,88% u Lipovljanima do 45,95% u Jastrebarskom. Oštećenost kukcima iznosila je 30,12% u Jastrebarskom do 42,86% u Čazmi. Zaraženost gljivama kretala se od 10,70% u D. Miholjcu do 42,91% u Lipovljanima. Oštećenost glodavcima i pticama bila je vrlo mala, a postotak zaraze kukcima i gljivama zajedno iznosio je od 1,49% do 2,34%. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 76 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.11. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Jastrebarsko 1998. godina VII mjesec Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 42,10 0,00 0,00 0,00 57,90 152 Plohe s tla – ukupno 40,20 0,00 0,00 0,00 59,80 122 Slučajan uzorak 80,30 0,00 4,30 0,00 15,40 117 Sveukupno 52,94 0,00 1,28 0,00 45,78 391 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 72,90 4,20 6,20 0,00 16,70 96 Plohe s tla – ukupno 82,00 3,60 4,50 0,00 9,90 111 Slučajan uzorak 84,70 0,00 7,10 0,00 8,20 170 Sveukupno 80,90 2,12 6,10 0,00 10,88 377 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 64,30 0,00 35,70 0,00 0,00 28 Plohe s tla – ukupno 80,30 0,00 19,70 0,00 0,00 66 Slučajan uzorak 76,50 0,00 8,00 0,00 15,50 200 Sveukupno 76,19 0,00 13,27 0,00 10,54 294 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 69,20 0,00 23,10 0,00 7,70 13 Plohe s tla – ukupno 69,60 0,00 13,00 0,00 17,40 46 Slučajan uzorak 18,50 0,00 25,50 1,00 55,00 200 Sveukupno 30,12 0,00 23,17 0,77 45,95 259 VIII mjesec IX mjesec X mjesec 100% 80% 60% 10,88 0,00 6,10 2,12 45,78 10,54 0,00 13,27 0,00 45,95 Zdravi žir 0,00 1,28 0,00 0,77 Glodavci i ptice Gljive 80,90 40% 76,19 23,17 0,00 52,94 20% Kukci i gljive Kukci 30,12 0% VII VIII IX X Grafikon 7.11. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Jastrebarsko 1998. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 77 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.12. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Lipovljani 1998. godina VII mjesec Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 65,10 15,20 16,70 3,00 0,00 66 Plohe s tla – ukupno 71,60 8,60 18,50 1,20 0,00 81 Slučajan uzorak 70,00 5,00 21,00 4,00 0,00 100 Sveukupno 69,23 8,91 19,03 2,83 0,00 247 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 53,10 12,20 30,60 0,00 4,10 49 Plohe s tla – ukupno 60,18 7,96 25,66 0,00 6,19 113 Slučajan uzorak 68,89 7,22 13,33 2,78 7,78 180 Sveukupno 63,74 8,19 19,88 1,46 6,73 342 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 55,41 2,70 25,68 2,70 13,51 74 Plohe s tla – ukupno 48,80 2,30 29,10 1,20 18,60 86 Slučajan uzorak 35,85 3,77 33,02 2,83 24,53 106 Sveukupno 45,49 3,01 29,70 2,26 19,55 266 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 29,40 0,00 47,10 0,00 23,50 34 Plohe s tla – ukupno 32,04 3,88 40,78 0,00 23,30 103 Slučajan uzorak 32,10 0,00 43,50 0,00 24,40 131 Sveukupno 31,72 1,49 42,91 0,00 23,88 268 VIII mjesec IX mjesec X mjesec 100% 0,00 2,83 90% 19,03 80% 6,73 1,46 19,88 19,55 2,26 8,91 0,00 8,19 70% 29,70 60% Zdravi žir 42,91 50% 40% 23,88 3,01 Glodavci i ptice Gljive Kukci i gljive 69,23 30% 1,49 63,74 Kukci 45,49 20% 31,72 10% 0% VII VIII IX X Grafikon 7.12. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Lipovljani 1998. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 78 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.13. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Čazma 1998. godina VII mjesec Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 40,60 10,20 5,10 0,00 44,10 59 Plohe s tla – ukupno 52,50 5,10 7,10 0,00 35,30 99 Slučajan uzorak 33,08 0,00 4,62 0,00 62,31 130 Sveukupno 41,32 3,82 5,56 0,00 49,31 288 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 68,10 0,00 14,50 0,00 17,40 69 Plohe s tla – ukupno 64,30 0,00 13,40 0,00 22,30 112 Slučajan uzorak 43,30 5,30 20,00 2,00 29,30 150 Sveukupno 55,59 2,42 16,62 0,91 24,47 331 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 61,50 0,00 17,90 0,00 20,50 78 Plohe s tla – ukupno 55,30 5,30 27,30 2,30 9,80 132 Slučajan uzorak 51,90 5,00 24,40 1,90 16,90 160 Sveukupno 55,14 4,05 24,05 1,62 15,14 370 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 49,30 0,00 18,70 0,00 32,00 75 Plohe s tla – ukupno 44,30 3,10 20,00 1,30 31,30 160 Slučajan uzorak 38,00 2,70 22,00 2,00 35,30 150 Sveukupno 42,86 2,34 20,52 1,30 32,99 385 VIII mjesec IX mjesec X mjesec 100% 15,14 90% 80% 24,47 49,31 0,91 70% 16,62 60% 2,42 50% 1,62 32,99 24,05 1,30 4,05 0,00 5,56 3,82 Zdravi žir 20,52 2,34 40% Gljive Kukci i gljive Kukci 55,59 30% 20% Glodavci i ptice 55,14 42,86 41,32 10% 0% VII VIII IX X Grafikon 7.13. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Čazma 1998. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 79 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.14. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Donji Miholjac 1998. godina VII mjesec Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 72,80 6,50 15,20 5,40 0,00 92 Plohe s tla – ukupno 65,30 5,30 29,30 0,00 0,00 75 Slučajan uzorak 73,00 6,00 19,00 2,00 0,00 100 Sveukupno 70,78 6,00 20,60 2,62 0,00 267 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 75,20 0,00 24,00 0,80 0,00 258 Plohe s tla – ukupno 75,30 3,10 21,00 0,60 0,00 162 Slučajan uzorak 80,50 3,40 13,60 2,50 0,00 118 Sveukupno 76,39 1,67 20,82 1,11 0,00 538 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 73,00 0,00 11,90 0,00 15,10 126 Plohe s tla – ukupno 75,60 3,40 11,60 1,20 8,20 86 Slučajan uzorak 74,10 0,00 11,80 1,90 12,20 212 Sveukupno 74,05 0,71 11,79 1,18 12,26 424 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 34,09 0,00 6,82 2,27 56,82 44 Plohe s tla – ukupno 46,70 0,00 12,20 0,00 41,10 90 Slučajan uzorak 46,10 0,00 10,90 1,00 41,90 193 Sveukupno 44,65 0,00 10,70 0,92 43,73 327 VIII mjesec IX mjesec X mjesec 100% 80% 0,00 2,62 0,00 1,11 20,60 20,82 6,00 12,26 1,67 1,18 11,79 0,71 Zdravi žir 60% 40% 43,73 0,92 10,70 0,00 70,78 76,39 Glodavci i ptice Gljive Kukci i gljive 74,05 Kukci 44,65 20% 0% VII VIII IX X Grafikon 7.14. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Donji Miholjac 1998. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 80 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.15. Zdravstveno stanje žira (%), Šumarija Otok 1998. godina VII mjesec Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 85,50 0,00 14,50 0,00 0,00 256 Plohe s tla – ukupno 78,40 2,80 18,80 0,00 0,00 218 Slučajan uzorak 62,40 15,40 22,20 0,00 0,00 117 Sveukupno 78,34 4,06 17,60 0,00 0,00 591 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 82,30 4,10 13,60 0,00 0,00 147 Plohe s tla – ukupno 73,90 4,90 21,10 0,00 0,00 142 Slučajan uzorak 78,90 0,00 21,10 0,00 0,00 76 Sveukupno 78,36 3,56 18,08 0,00 0,00 365 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 69,60 2,60 18,30 0,00 9,50 115 Plohe s tla – ukupno 60,45 3,73 23,88 0,00 11,94 134 Slučajan uzorak 57,34 3,50 23,78 3,50 11,89 143 Sveukupno 61,99 3,32 22,19 1,28 11,22 392 Kukci Kukci i gljive Gljive Glodavci i ptice Zdravi žir N Plohe s platna – ukupno 52,90 0,00 25,50 0,00 21,60 51 Plohe s tla – ukupno 49,50 1,98 25,25 0,99 22,28 202 Slučajan uzorak 46,93 2,63 23,25 1,75 25,44 228 Sveukupno 48,65 2,08 24,32 1,25 23,70 481 VIII mjesec IX mjesec X mjesec 100% 90% 80% 0,00 0,00 17,60 18,08 4,06 3,56 70% 11,22 1,28 23,70 22,19 1,25 3,32 24,32 60% 2,08 50% 40% 78,34 Glodavci i ptice Gljive Kukci i gljive 78,36 Kukci 61,99 30% Zdravi žir 48,65 20% 10% 0% VII VIII IX X Grafikon 7.15. Zdravstveno stanje žira (%) za sveukupne iznose po mjesecima, Otok 1998. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 81 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.1.2. Analiza mikoflore žira Nakon određivanja postotka zaraženosti sjemena gljivama u uzorcima pristupilo se fitopatološkoj analizi žira. Žirovi zaraženi gljivama, s prisutnim vegetativnim ili plodnim tijelom gljiva ili sa simptomi oboljenja, odvajani su i analizirani kako bi se utvrdili uzročnici oboljenja. Rezultati fitopatološke analize prikazani su za sveukupni uzorak po područjima istraživanja, koji su činili uzorci s platnenih ploha, ploha s tla i slučajan uzorak s tla, nakon što se ustanovilo da nema razlike između uzoraka s platna i s tla. Podaci su prikazani prema mjesecima sakupljanja žirova odnosno prema razvojnim stadijima žira od mladog do zrelog žira te zajedno za cjelokupni period sakupljanja od sedmog do desetog mjeseca. Iz rezultata se vidi da je utvrđeno 19 rodova gljiva na žiru. Unutar tih rodova registrirano je 29 vrsta koje su opisane u zasebnom poglavlju. Gljive većinom pripadaju polifagnim vrstama koje dolaze posvuda u prirodi. Mnoge dolaze kao saprofiti ali ima i dosta parazita, uzročnika bolesti, od kojih su neke specijalizirani paraziti, nekrotrofni paraziti ili fakultativni paraziti o čemu će biti pisano kasnije. Na mladim zelenim žirovima i smeđkastom žiru u srpnju i kolovozu, nalazile su se većinom sljedeće gljive iz rodova: Fusarium, Alternaria, Penicillium, Trichothecium, Trichoderma, Ophiostoma i Phomopsis. Od drugih gljiva prisutnih na žiru zapažene su gljive iz rodova Chaetomium, Doratomices, Botrytis, Fusella i Verticillium. Na ubodnim ranicama nastalim prilikom polaganja jaja žirotoča uz rub kapice često bi se naselila gljiva iz roda Fusarium. U praznim mladim žirovima nalazile su se hife s konidijama gljive iz roda Alternaria i bijeli micelij gljive iz roda Fusarium. Na ljusci većinom mladog žira razvile bi se gljive iz rodova Chaetomium, Arthrobotris, Doratomyces, Fusella, Ophiostoma i Verticillium. Na žiru u završnoj fazi sazrijevanja i na zrelom žiru, u rujnu i listopadu, najčešće su se pojavljivale gljive iz rodova Ophiostoma, Ciboria, Phomopsis, Fusarium i Penicillium. Između ostalih gljiva nalažene su gljive iz rodova Gloeosporium, Pestalotia, Stereum, Schizophyllum i druge. Na kotiledonima zrelog žira nalazile bi se pjege iz kojih su se kasnije razvile gljive iz rodova Ciboria, Graphium (nesavršeni stadij Ophiostoma-e) ili Phomopsis. Isto tako nalazile su se i nekroze uzrokovane gljivom iz roda Gloeosporium. Na pocrnjelim ili posmeđenim vrhovima izraslih klica razvile su se gljive iz rodova Fusarium ili Penicillium. Između ljuske žira i kotoledona često bi se nalazila gljiva iz roda Alternaria. Na površini ljuske uz raspukline i u vršnom dijelu žira izrasla bi gljiva iz roda Aspergillus. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 82 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Na mladom kao i na zrelom žiru u napuštenim hodnicima ličinki dolazile bi gljive iz rodova Penicillium, Botrytis i Alternaria. Na izlaznim rupicama od ličinki ili gusjenica nalazile bi se gljive iz rodova Penicillium i Trichoderma. S vanjske strane kapice žira često se nalazila gljiva iz roda Trichothecium. Ličinke koje buše hodnike u žiru izbjegavale su područja oštećenog tkiva žira od gljiva poput gljiva iz rodova Ophiostoma, Phomopsis i Ciboria. Unutar kapice u njenoj bazi i na hilumu žira naselile bi se gljive iz rodova Fusarium, Trichothecium i Trichoderma. Rezultati fitopatološke analize za 1996. godinu prikazani su u tablicama br. 7.16.-7.20. Mikoflora žira cjelokupnog perioda sakupljanja uzoraka po područjima istraživanja prikazana je na grafikonima br. 1-5. U tablici br. 7.21. prikazana je zastupljenost gljiva izoliranih sa žira u postocima po područjima istraživanja i njihova srednja vrijednost. Na grafikonu br. 7.21. prikazana je njihova srednja vrijednost za sva područja zajedno. Na području istraživanja Jastrebarsko, za cjelokupni period sakupljanja, najčešće su bile zastupljene slijedeće gljive: Ciboria batschiana (46,67%), Phomopsis quercella (21,90%), Fusarium spp. (7,14%), Penicillium spp. (5,71%) i Trichothecium roseum (2,86%). U uzorcima s područja istraživanja Lipovljani najčešće izolirane gljive bile su: Ciboria batschiana (22,49%), Penicillium spp. (17,72%), Phomopsis quercella (17,46%), Ophiostoma spp. (12,43%), Fusarium spp. (9,52%) i Trichothecium roseum (6,08%). Rezultati analize uzoraka s područja istraživanja Čazma pokazuju da su najzastupljenije gljive bile: Fusarium spp. (29,36%), Ciboria batschiana (16,97%), Penicillium spp. (8,72%), Alternaria alternata (8,26%) i Ophiostoma spp. (7, 34%). Najčešće prisutne gljive u uzorcima iz Donjeg Miholjca su bile: Ciboria batschiana (28,84%), Phomopsis quercella (21,44%), Ophiostoma spp. (13, 49%), Fusarium spp. (12,20%) i Penicillium spp. (7,95%). Najzastupljenije gljive u uzorcima iz Otoka su: Phomopsis quercella (20,76%), Penicillium spp. (18,71%), Ciboria batschiana (16,37%), Alternaria alternata (12,28%) i Fusarium spp. (10,82%). Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 83 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.16. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Jastrebarsko, 1996. godina VII mjesec Sveukupno Mikoflora n Alternaria alternata Arthrobotryis spp. Aspergillus spp. Botrytis cinerea Ciboria batschiana Chaetomium globosum Doratomyces stemonitis Fusarium spp. Fusella olivacea Gloeosporium quercinum Ophiostoma spp. Penicillium spp. Pestalotia spp. Phomopsis quercella Schizophyllum commune Stereum hirsutum Trichoderma viride Trichothecium roseum Verticillium spp. Ukupno Ukupni broj žirova u uzorku % od ukupnog broj žirova u uzorku 9 2 % 47,37 10,53 1 5,26 VIII mjesec Sveukupno n % 6 2 1 21,43 7,14 3,57 2 1 3 7,14 3,57 10,71 6 21,43 1 3,57 3 4 15,79 21,05 2 2 2 7,14 7,14 7,14 19 183 10,38 100 28 271 10,33 100 IX mjesec Sveukupno n % X mjesec Sveukupno n % 53 67,09 45 53,57 2 2,53 1 1,19 1 1,27 21 2 26,58 2,53 2 3 5 2 24 2,38 3,57 5,95 2,38 28,57 2 2,38 84 374 22,46 100 79 322 24,53 100 VII - X Sveukupno n % 6 2 1 2,86 0,95 0,48 98 2 1 15 2 2 4 12 2 46 2 2 5 6 2 46,67 0,95 0,48 7,14 0,95 0,95 1,90 5,71 0,95 21,90 0,95 0,95 2,38 2,86 0,95 210 1150 18,26 100 50 45 40 35 30 % 25 20 15 10 5 A lte r na A ria rth al ro ter bo na A try ta sp i e s sp Bo rgill p. u t C ry s s Ch ibo tis c pp . r i a D eto ia b nere or m at i at s a om um chi g yc l an es obo a st em sum Fu on G sa itis lo eo Fus ri um sp ell or a s pp iu oli . m v qu ace O ph a e io rcin sto u m Pe n i ma ci s p l p P lium . Sc Pho esta s hi m lo pp. zo op tia ph sis sp yl p lu que . m rc e c St er om lla Tr eum mu Tr i ch h ne i c od irs ho er ut th ma um ec iu vir m id e r V er ose tic um ill iu m sp . 0 Grafikon 7.16. Gljive izolirane sa žira (%), Jastrebarsko, VII-X mjesec, 1996. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 84 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.17. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Lipovljani, 1996. godina VII mjesec Sveukupno VIII mjesec Sveukupno IX mjesec Sveukupno X mjesec Sveukupno Mikoflora n % n % n % Alternaria alternata Arthrobotryis spp. Aspergillus spp. Botrytis cinerea Ciboria batschiana Chaetomium globosum Doratomyces stemonitis Fusarium spp. Fusella olivacea Gloeosporium quercinum Ophiostoma spp. Penicillium spp. Pestalotia spp. Phomopsis quercella Schizophyllum commune Stereum hirsutum Trichoderma viride Trichothecium roseum Verticillium spp. 2 6 8,70 26,09 6 7,06 2 1,02 1 1,18 3 60 1,53 30,61 25 33,78 16 8,16 3 4,05 1 20 17 1,35 27,03 22,97 6 8,11 2 2,70 74 630 11,75 100 Ukupno Ukupni broj žirova u uzorku % od ukupnog broj žirova u uzorku 5 1 21,74 4,35 1 4,35 6 1 12 7 7,06 1,18 14,12 8,24 9 8 10,59 9,41 8 9,41 1 7 4,35 30,43 11 16 12,94 18,82 23 167 13,77 100 85 465 18,28 100 17 42 2 52 8,67 21,43 1,02 26,53 2 1,02 196 743 26,38 100 n % VII - X Sveukupno n % 10 6 2,65 1,59 4 85 6 1 36 8 1 47 67 2 66 1,06 22,49 1,59 0,26 9,52 2,12 0,26 12,43 17,72 0,53 17,46 2 14 23 0,53 3,70 6,08 378 2005 18,85 100 25 20 % 15 10 5 thr Ar Al te r na r ia al te ob rna ta otr A s y is pe s rg pp . Bo illu ss tr pp Ci ytis . b c in or Ch er ia ae ea b Do tom atsc i hi ra a to um my glo na ce bo ss s tem um o Fu ni sa tis Gl Fu ri um oe o s sella s pp po riu oliv . ac m ea O qu e ph rci io n um st Pe om a ni ci l spp . li Pe um sp sta Ph om lo t p . Sc ia op hi sp zo s p. ph is q ue yl lu m rcel S t c o m la er m e T r um un i ch hi e rs Tr o i ch d er ut u oth m a m v ec ium irid e r Ve o s rti eum c il liu m sp . 0 Grafikon 7.17. Gljive izolirane sa žira (%), Lipovljani, VII-X mjesec, 1996. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 85 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.18. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Čazma, 1996. godina VII mjesec Sveukupno VIII mjesec Sveukupno Mikoflora n % n % Alternaria alternata Arthrobotryis spp. Aspergillus spp. Botrytis cinerea Ciboria batschiana Chaetomium globosum Doratomyces stemonitis Fusarium spp. Fusella olivacea Gloeosporium quercinum Ophiostoma spp. Penicillium spp. Pestalotia spp. Phomopsis quercella Schizophyllum commune Stereum hirsutum Trichoderma viride Trichothecium roseum Verticillium spp. 5 2 10,20 4,08 13 1 25,49 1,96 Ukupno Ukupni broj žirova u uzorku % od ukupnog broj žirova u uzorku 2 2 18 7 4,08 4,08 36,73 14,29 4 8,16 19 3 37,25 5,88 1 7 1,96 13,73 2 7 4,08 14,29 3 4 5,88 7,84 49 285 17,19 100 51 299 17,06 100 IX mjesec Sveukupno n % 5 18 1 8,33 30,00 1,67 22 5 36,67 8,33 2 4 2 1 3,33 6,67 3,33 1,67 60 303 19,80 100 X mjesec Sveukupno n VII - X Sveukupno % 19 32,76 5 8,62 11 10 1 11 18,97 17,24 1,72 18,97 1 1,72 58 341 17,01 100 n % 18 3 8,26 1,38 5 37 3 2 64 15 2,29 16,97 1,38 0,92 29,36 6,88 16 19 5 13 1 1 5 11 7,34 8,72 2,29 5,96 0,46 0,46 2,29 5,05 218 1228 17,75 100 35 30 25 % 20 15 10 5 A lte rn a A ria rth a ro lter bo na A try ta sp i e ss Bo rgil pp. lu C try s Ch ibo tis s pp ci . r a D eto ia b ner or m at ea at s om ium chi yc glo ana es b s t osu em m Fu on G sa itis lo F eo us ri um sp ell or a s pp iu oli m v . qu ace O ph a e io rcin Pe stom um ni ci a sp lli p Ph Pes um . Sc om tal sp hi p zo op otia . ph sis sp yl p q lu ue . m rc St co ell e m a m Tr reu m un i Tr ch i c od hirs e ho er ut th ma um ec iu vir m id e V er rose tic um ill iu m sp . 0 Grafikon 7.18. Gljive izolirane sa žira (%), Čazma, VII-X mjesec, 1996. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 86 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.19. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Donji Miholjac, 1996. godina VII mjesec Sveukupno VIII mjesec Sveukupno Mikoflora n % n % Alternaria alternata Arthrobotryis spp. Aspergillus spp. Botrytis cinerea Ciboria batschiana Chaetomium globosum Doratomyces stemonitis Fusarium spp. Fusella olivacea Gloeosporium quercinum Ophiostoma spp. Penicillium spp. Pestalotia spp. Phomopsis quercella Schizophyllum commune Stereum hirsutum Trichoderma viride Trichothecium roseum Verticillium spp. 13 14,94 6 7,06 5 5,88 Ukupno Ukupni broj žirova u uzorku % od ukupnog broj žirova u uzorku 3 2 24 18 3,45 2,30 27,59 20,69 9 10,34 2 11 1 1 11 4 1,18 1,18 12,94 4,71 2,30 12,64 4 26 10 12 4,71 30,6 11,76 14,12 3 2 3,45 2,30 3 2 3,53 2,35 87 306 28,43 100 85 350 24,29 100 IX mjesec Sveukupno n % X mjesec Sveukupno n % 1 20 1,56 31,25 136 44,59 18 28,13 13 4,26 1 2 1,56 3,13 11 59 15 3,61 19,34 4,92 22 34,38 71 23,28 64 347 18,44 100 305 817 37,33 VII - X Sveukupno 100 n % 19 3,51 6 156 4 3 66 22 11 73 43 12 116 1,11 28,84 0,74 0,55 12,20 4,07 2,03 13,49 7,95 2,22 21,44 6 4 1,11 0,74 541 1820 29,73 100 35 30 25 % 20 15 10 5 A lte rn a A r ia rth al ro ter b o na A try ta sp is e sp Bo rg ill p . u t C ryt s s Ch ib o is c pp . in ri a D etom a ba ere a or t at ium sch om i a y c glo na es b s t o su em m Fu o n it s G lo Fu ari u is eo m s e sp or lla o s pp iu . m liv O qu acea ph er io cin s Pe tom um ni ci a sp lli p. P e um P Sc h om stal sp p o hi zo op s tia . ph is sp p yl q lu uer . m c e St co ll er m a Tr eum m u i Tr ch o h i n e r ic h o d er sut th m a um ec iu viri m de V er ro se tic um ill iu m sp . 0 Grafikon 7.19. Gljive izolirane sa žira (%), Donji Miholjac, VII-X mjesec, 1996. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 87 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.20. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Otok, 1996. godina VII mjesec Sveukupno VIII mjesec Sveukupno Mikoflora n % n % Alternaria alternata Arthrobotryis spp. Aspergillus spp. Botrytis cinerea Ciboria batschiana Chaetomium globosum Doratomyces stemonitis Fusarium spp. Fusella olivacea Gloeosporium quercinum Ophiostoma spp. Penicillium spp. Pestalotia spp. Phomopsis quercella Schizophyllum commune Stereum hirsutum Trichoderma viride Trichothecium roseum Verticillium spp. 23 31,94 19 2 27,14 2,86 1 1,39 2 2,86 19,44 5,56 1 1 9 4 1,43 1,43 12,86 5,71 Ukupno Ukupni broj žirova u uzorku % od ukupnog broj žirova u uzorku 14 4 IX mjesec Sveukupno n % 2 46 1,31 30,07 8 17,02 6 3,92 4,26 19,15 14,89 2,13 14,89 10 32 8 49 6,54 20,92 5,23 32,03 2,86 20,00 2,86 10,00 1,39 9,72 2,78 5 2 7,14 2,86 1 2,13 100 70 327 21,40 100 47 319 14,73 100 8 11,11 1 7 2 72 320 22,50 153 729 21,07 VII - X Sveukupno % 4,26 21,28 2 14 2 7 1,39 15,28 n 2 10 2 9 7 1 7 1 11 X mjesec Sveukupno 100 n % 42 2 12,28 0,58 7 56 1 1 37 8 2 22 64 11 71 2,05 16,37 0,29 0,29 10,82 2,34 0,58 6,43 18,71 3,22 20,76 6 10 2 1,75 2,92 0,58 342 1695 20,18 100 25 20 % 15 10 5 Al te rn a A r ia rth al ro ter b o na A try ta sp is er sp Bo g ill p . u t Ci r yti s s p s b Ch c p. o ae ria in e Do tom ba rea ts ra to ium ch i my g an ce lo b a s s os um te Fu mo n i s G F ari tis lo eo u se um sp l s or la o pp . iu m liv a O qu cea ph er io cin s Pe tom um ni ci a sp l Pe lium p . Ph s t sp Sc a o h i m o lo ti p . zo ps a s ph is pp yl q lum uer . St co cell er m a Tr eum m u i Tr ch o h ir n e ic h o d er sut u th m a m ec ium viri d Ve ro e rti seu ci m lli um sp . 0 Grafikon 7.20. Gljive izolirane sa žira (%), Otok, VII-X mjesec, 1996. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 88 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.21. Zastupljenost gljiva izoliranih sa žira u postocima po područjima istraživanja i srednja vrijednost za sva područja zajedno, 1996. godina Mikoflora Jastrebarsko Čazma D. Miholjac Otok Lipovljani Srednja vr. 2,86 8,26 3,51 12,28 2,65 5,91 Arthrobotrys spp. 0,95 1,38 0,58 1,59 1,13 Aspergillus spp. 0,48 Alternaria alternata Botrytis cinerea 0,48 2,29 1,11 2,05 1,06 1,63 Ciboria batschiana 46,67 16,97 28,84 16,37 22,49 26,27 Chaetomium globosum 0,95 1,38 0,74 0,29 1,59 0,99 Doratomyces stemonitis 0,48 0,92 0,55 0,29 0,26 0,50 Fusarium spp. 7,14 29,36 12,20 10,82 9,52 13,81 Fusella olivacea 0,95 6,88 4,07 2,34 2,12 3,27 Gloeosporium quercinum 0,95 2,03 0,58 0,26 0,96 Ophiostoma spp. 1,90 7,34 13,49 6,43 12,43 8,32 Penicillium spp. 5,71 8,72 7,95 18,71 17,72 11,76 Pestalotia spp. 0,95 2,29 2,22 3,22 0,53 1,84 Phomopsis quercella 21,90 5,96 21,44 20,76 17,46 17,50 Schizophyllum commune 0,95 0,46 Stereum hirsutum 0,95 0,46 Trichoderma viride 2,38 2,29 Trichothecium roseum 2,86 5,05 Verticillium spp. 0,95 0,71 0,53 0,65 1,75 3,70 2,53 1,11 2,92 6,08 3,60 0,74 0,58 0,76 30 25 20 % 15 10 5 A lte r na A ria rth al ro ter bo na A try ta sp i e s sp Bo rgil p. lu t C ryt s s Ch ibo is c pp. ri in a D eto a ba ere or m t s a at i om um chia yc glo na es b s t osu em m Fu on G sa itis lo F eo us ri um sp ell or a s pp iu oli m v . qu ace O ph a e io rcin sto u Pe m ni ma ci lli spp P Pe um . Sc hom stal sp p o hi zo ops tia . ph is sp p q yl lu uer . m ce co lla St e m Tr reum mu Tr i ch h ne i c od irs ho er ut th ma um ec iu vir m id e V er rose tic um ill iu m sp . 0 Grafikon 7.21. Srednja vrijednost (%) gljiva izoliranih sa žira za sva područja istraživanja, 1996. godinu Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 89 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Rezultati fitopatološke analize za 1997. godinu prikazani su u tablicama 7.22.-7.26. U grafikonima 7.22.-7.26. prikazane su gljive na žiru za cijeli period od srpnja do listopada. Tablica 7.27. prikazuje zastupljenost gljiva izoliranih sa žira u postocima po područjima istraživanja i njihovu srednju vrijednost koja je prikazana i na grafikonu 7.27. Na području istraživanja Jastrebarsko najčešće su bile zastupljene slijedeće gljive: Fusarium spp. (17,48%), Ciboria batschiana (14,56%), Penicillium spp. (14,56%), Phomopsis quercella (13,59%), Alternaria alternata (9,71%) i Trichoderma viride (7,77%). Na području istraživanja Lipovljani najčešće izolirane gljive bile su: Fusarium spp. (17,54%), Ophiostoma spp. (13,16%), Penicillium spp. (12,28%), Trichothecium roseum (11,40%), Alternaria alternata (10,53%), Phomopsis quercella (8,77%) i Fusella olivacea (7,89%). Najzastupljenije gljive u uzorcima s područja istraživanja Čazma bile su: Fusarium spp. (16,45%), Ciboria batschiana (15,13%), Ophiostoma spp. (12,50%), Phomopsis quercella (12,50%), Trichothecium roseum (12,50) i Penicillium spp. (10,53%). U uzorcima iz Donjeg Miholjca najčešće determinirane gljive bile su: Fusarium spp. (25,86%), Alternaria alternata (21,55%), Phomopsis quercella (20,69%), Ciboria batschiana (16,38%), Botrytis cinerea (3,45%) i Penicillium spp. (2,59%). U uzorcima iz Otoka najzastupljenije gljive bile su: Fusarium spp. (56,14%), Ophiostoma spp. (12,28%), Alternaria alternata (10,53%), Fusella olivacea (8,77%) i Botrytis cinerea (7,01%). Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 90 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.22. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Jastrebarsko, 1997. godina VII mjesec Sveukupno Mikoflora n % Alternaria alternata Arthrobotryis spp. Aspergillus spp. Botrytis cinerea Ciboria batschiana Chaetomium globosum Doratomyces stemonitis Fusarium spp. Fusella olivacea Gloeosporium quercinum Ophiostoma spp. Penicillium spp. Pestalotia spp. Phomopsis quercella Schizophyllum commune Stereum hirsutum Trichoderma viride Trichothecium roseum Verticillium spp. Ukupno Ukupni broj žirova u uzorku % od ukupnog broj žirova u uzorku VIII mjesec Sveukupno 0 X mjesec Sveukupno VII - X Sveukupno n % n % n % n % 6 20,00 3 7,14 1 3,22 10 9,71 1 2,38 7 16,67 8 25,81 1 3 15 9,71 2,91 14,56 5 11,90 3 9,68 1 2 6 2,38 4,76 14,29 1 3 5 3,22 9,68 16,13 7 2 16,67 4,76 7 22,58 18 2 2 6 15 2 14 2 17,48 1,94 1,94 5,83 14,56 1,94 13,59 1,94 3 0 IX mjesec Sveukupno 10,00 10 2 33,33 6,67 1 4 2 3,33 13,33 6,67 2 6,67 4 4 9,52 9,52 2 1 6,45 3,22 8 5 7,77 4,85 30 255 11,76 100 42 209 20,10 100 31 172 18,02 100 103 636 16,19 100 20 18 16 14 % 12 10 8 6 4 2 A lte rn a A r ia r th a l ro ter b o na A tr y ta sp is er sp Bo g ill p . us t Ci rytis s pp b Ch or cin . ia a e D etom ba rea or t at ium sch om ia y c glo na bo es s te su m Fu mo n it s G F ari is lo eo u se um sp s l or la o pp . iu m liv a O qu cea ph er io cin s Pe tom um ni a ci l sp p Pe lium . Ph sta s Sc o p h i m o lo tia p . ps zo s ph is pp q yl . lu uer m ce S t c o lla er m Tr eum m u T r i ch o h i n e i ch d rsu ot erm t um he ci a vi um rid Ve ro e rti seu c il m liu m sp . 0 Grafikon 7.22. Gljive izolirane sa žira (%), Jastrebarsko, VII-X mjesec, 1997. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 91 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.23. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Lipovljani, 1997. godina VII mjesec Sveukupno VIII mjesec Sveukupno Mikoflora n % n % Alternaria alternata Arthrobotryis spp. Aspergillus spp. Botrytis cinerea Ciboria batschiana Chaetomium globosum Doratomyces stemonitis Fusarium spp. Fusella olivacea Gloeosporium quercinum Ophiostoma spp. Penicillium spp. Pestalotia spp. Phomopsis quercella Schizophyllum commune Stereum hirsutum Trichoderma viride Trichothecium roseum Verticillium spp. 11 31,43 1 2 3,57 7,14 Ukupno Ukupni broj žirova u uzorku % od ukupnog broj žirova u uzorku 2 IX mjesec Sveukupno n 1 1 6 n 28,57 17,14 17,14 35 242 14,46 100 8 3 n % 4 15,38 12 3 1 2 4 10,53 2,63 0,88 1,75 3,51 2 7,69 2 4 4 1 8 7,69 15,38 15,38 3,85 30,77 1 3,85 1 20 9 2 15 14 1 10 2 1 3 13 1 0,88 17,54 7,89 1,75 13,16 12,28 0,88 8,77 1,75 0,88 2,63 11,40 0,88 26 137 18,98 100 114 683 16,69 100 4,00 4,00 4,00 28,57 10,71 2 2 7,14 7,14 2 7,14 3 8 12,00 32,00 2 8,00 1 6 1 3,57 21,43 3,57 2 7 8,00 28,00 28 165 16,97 100 25 139 17,99 100 VII - X Sveukupno % 5,71 1 10 6 % X mjesec Sveukupno 20 18 16 14 12 % 10 8 6 4 2 A lte r na r i A rth a al ro ter b o na A try i ta sp ss er p Bo gill p. try us C s t Ch ibo is c pp. ae ria in e t r D b or om ats ea i at c o m um hia y c glo na b es s t o su em m Fu o n it s G lo Fu ari u is eo m sp sell or a o s pp iu m liva . c q O ph uer ea io cin s Pe tom um ni ci a sp lli um p . P Pe Sc h om stal spp o hi zo op s tia . ph is sp p q yl lu uer . m ce St c er o m lla Tr eum mu Tr i ch o h i ne r ic ho der sut u th ma m ec iu viri m de r V er ose tic um ill iu m sp . 0 Grafikon 7.23. Gljive izolirane sa žira (%), Lipovljani, VII-X mjesec, 1997. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 92 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.24. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Čazma, 1997. godina VII mjesec Sveukupno Mikoflora n % Alternaria alternata Arthrobotryis spp. Aspergillus spp. Botrytis cinerea Ciboria batschiana Chaetomium globosum Doratomyces stemonitis Fusarium spp. Fusella olivacea Gloeosporium quercinum Ophiostoma spp. Penicillium spp. Pestalotia spp. Phomopsis quercella Schizophyllum commune Stereum hirsutum Trichoderma viride Trichothecium roseum Verticillium spp. 6 12,77 2 4,26 Ukupno Ukupni broj žirova u uzorku % od ukupnog broj žirova u uzorku 5 10,64 11 4 23,40 8,51 7 14,89 VIII mjesec Sveukupno n % IX mjesec Sveukupno n % X mjesec Sveukupno n % 1 5,26 1 3,03 2 10,53 2 6,06 19 35,85 1 5,26 7 21,21 6 11,32 3 3 15,79 15,79 1 4 6 3,03 12,12 18,18 2 12 3,77 22,64 5 26,32 4 1 12,12 3,03 2 10 3,77 18,87 2 3,77 53 184 28,80 100 2 10 4,26 21,28 1 2 1 5,26 10,53 5,26 47 344 13,66 100 19 143 13,29 100 7 21,21 33 156 21,15 100 VII - X Sveukupno n % 6 3,95 2 2 23 5 1,32 1,32 15,13 3,29 25 4 3 19 16 2 19 1 2 3 19 1 16,45 2,63 1,97 12,50 10,53 1,32 12,50 0,66 1,32 1,97 12,50 0,66 152 827 18,38 100 18 16 14 % 12 10 8 6 4 2 A lte rn a A r ia rth al ro ter b o na A try ta sp is sp e Bo rg il p . try lus C s Ch ib o tis c pp ae ria in . e t D or om bats rea iu at c om m hi y c glo ana es b s t o su em m Fu o n i s G lo Fu ari u tis eo m s e sp or lla o s pp iu m li v . O qu ace ph er a io cin Pe stom um ni ci a sp lli p Ph Pes um . ta Sc s o p h i mo lo t p . i zo ph p sis a sp p yl q lu ue . m rc e S t c o ll e m a Tr reum m u i c Tr h o h i n e rs ic d h o er ut th ma um ec iu viri m de V er ro se tic um ill iu m sp . 0 Grafikon 7.24. Gljive izolirane sa žira (%), Čazma, VII-X mjesec, 1997. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 93 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.25. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Donji Miholjac, 1997. godina VII mjesec Sveukupno VIII mjesec Sveukupno Mikoflora n % n % Alternaria alternata Arthrobotryis spp. Aspergillus spp. Botrytis cinerea Ciboria batschiana Chaetomium globosum Doratomyces stemonitis Fusarium spp. Fusella olivacea Gloeosporium quercinum Ophiostoma spp. Penicillium spp. Pestalotia spp. Phomopsis quercella Schizophyllum commune Stereum hirsutum Trichoderma viride Trichothecium roseum Verticillium spp. 18 38,30 7 28,00 3 6,38 1 4,00 Ukupno Ukupni broj žirova u uzorku % od ukupnog broj žirova u uzorku IX mjesec Sveukupno n % 12 60,00 2 10,00 8 3 32,00 12,00 4 16,67 1 2,13 2 8,00 1 3 4,17 12,50 1 7 2,13 14,89 4 16,00 9 37,50 1 2,13 47 222 21,17 100 24 116 20,69 100 4 2 20 101 19,80 VII - X Sveukupno % 29,17 34,04 100 n 7 16 25 155 16,13 X mjesec Sveukupno n % 25 21,55 4 19 3,45 16,38 30 3 25,86 2,59 4 3 1 24 2 3,45 2,59 0,86 20,69 1,72 1 0,86 116 594 19,53 100 20,00 10,00 100 30 25 % 20 15 10 5 A lte rn A aria rth a ro lter bo n A try ata sp is e s Bo rg il pp . lu t r C y s Ch ibo tis s pp ae ria cin . D or tom bat erea at o m ium sch y c glo iana es b s t o su em m Fu o n G sa iti lo F eo us ri um s sp ell or a s pp iu oli m v . O qu ace ph a e io rci n s t u Pe om m ni ci a sp ll p Ph Pes ium . Sc t o s a hi m o lo pp t . zo ph p sis ia sp yl p lu que . m r St co cel la e Tr reu mm m i u n Tr ch i c od hirs e h o er ut th ma um ec iu vir m id e V er ro s tic eu ill m iu m sp . 0 Grafikon 7.25. Gljive izolirane sa žira (%), Donji Miholjac, VII-X mjesec, 1997. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 94 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.26. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Otok, 1997. godina VII mjesec Sveukupno VIII mjesec Sveukupno IX mjesec Sveukupno Mikoflora n % n % Alternaria alternata Arthrobotryis spp. Aspergillus spp. Botrytis cinerea Ciboria batschiana Chaetomium globosum Doratomyces stemonitis Fusarium spp. Fusella olivacea Gloeosporium quercinum Ophiostoma spp. Penicillium spp. Pestalotia spp. Phomopsis quercella Schizophyllum commune Stereum hirsutum Trichoderma viride Trichothecium roseum Verticillium spp. 5 3 14,28 8,57 1 6,25 4 11,43 19 3 54,29 8,57 9 2 56,25 12,50 4 1 2,86 4 25,00 35 373 9,38 100 16 158 10,13 100 Ukupno Ukupni broj žirova u uzorku % od ukupnog broj žirova u uzorku n % X mjesec Sveukupno n VII - X Sveukupno n % 6 3 10,53 5,26 4 7,01 66,67 32 5 56,14 8,77 2 33,33 7 12,28 6 47 12,77 100 57 578 9,86 100 0 0 0 % 0 60 50 % 40 30 20 10 A lte rn A aria rth a ro lte b rn A otry ata sp is e Bo rg il spp . l t r C y us Ch ib o tis s pp r c . D aeto ia b in er or m at ea at iu sc om m h y c gl iana es o b s t o su e Fu mo m G sa nit lo eo Fu s ri um is sp ell or a o s pp iu . m li O qu v ace ph e io rc a Pe stom in um ni ci a sp ll Ph Pes ium p . Sc t o a h i m o lo spp t zo . ph p sis ia sp yl p q lu ue . St m c rcel er o m la T r eu m T r i ch m h un i c od irs e h o er u th m a t um ec iu vir V m ro ide er tic seu ill m iu m sp . 0 Grafikon 7.26. Gljive izolirane sa žira (%), Otok, 1997. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 95 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.27. Zastupljenost gljiva izoliranih sa žira u postocima po područjima istraživanja i srednja vrijednost za sva područja zajedno, 1997. godina Mikoflora Jastrebarsko Čazma D. Miholjac Otok Lipovljani Srednja vr. 9,71 3,95 21,55 10,53 10,53 11,25 Aspergillus spp. 9,71 1,32 Botrytis cinerea 2,91 1,32 3,45 Ciboria batschiana 14,56 15,13 16,38 Alternaria alternata Arthrobotrys spp. 5,26 Chaetomium globosum 7,01 2,63 3,95 0,88 3,97 1,75 3,29 3,51 12,40 3,29 3,29 Doratomyces stemonitis 0,88 0,88 Fusarium spp. 17,48 16,45 25,86 56,14 17,54 26,69 Fusella olivacea 1,94 2,63 2,59 8,77 7,89 4,76 Gloeosporium quercinum 1,94 1,97 1,75 1,89 Ophiostoma spp. 5,83 12,50 3,45 13,16 9,44 Penicillium spp. 14,56 10,53 2,59 12,28 9,99 12,28 Pestalotia spp. 1,94 1,32 0,86 0,88 1,25 Phomopsis quercella 13,59 12,50 20,69 8,77 13,89 Schizophyllum commune 1,94 0,66 1,72 1,75 1,52 1,32 0,88 1,10 Trichoderma viride 7,77 1,97 2,63 4,12 Trichothecium roseum 4,85 12,50 11,4 9,58 0,88 0,80 Stereum hirsutum Verticillium spp. 0,66 0,86 30 25 % 20 15 10 5 Al te r n A r a r ia th a l ro te b rn As otry ata p e is Bo rg il spp l . C try us Ch ib o tis s pp r c D aeto ia b in er . or m at ea ato iu sc my m h ia ce glo na s s bo te su Fu mo m Gl s n o e Fu ari u itis o s se m p o lla s riu ol pp . m i O qu v ace ph e io rc a Pe stom in um ni ci l a s l p Ph Pes ium p . Sc t o h i m o alo spp t zo . ph p sis ia sp yl p q lu ue . St m c r cel e r o m la T r eu m Tr i ch m h un i ch od ir s e ot erm ut u he ci a vi m u r V m ro ide er s tic eu ill m ium sp . 0 Grafikon 7.27. Srednja vrijednost gljiva izoliranih sa žira u % za sva područja istraživanja, 1997. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 96 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Rezultati fitopatološke analize za 1998. godinu za sva područja istraživanja prikazani su u tablicama od 7.28. do 7.32. te grafikonima od 7.28. do 7.32. U tablici 7.33. prikazana je zastupljenost gljiva izoliranih sa žira u postocima po područjima istraživanja i njihova srednja vrijednost koja se vidi i na grafikonu 7.33. Na području istraživanja Jastrebarsko najčešće zastupljene gljive bile su: Ciboria batschiana (25,98%), Penicillium spp. (22,83%), Phomopsis quercella (11,02%), Fusarium spp. (10,24%), Alternaria alternata (7,87%), Ophiostoma spp. (7,87%) i Chaetomium globosum (4,72%). Na području istraživanja Lipovljani najčešće su bile prisutne gljive: Ciboria batschiana (29,13%), Phomopsis quercella (17,80%), Fusarium spp. (12,62%), Ophiostoma spp. (8,74%), Trichoderma viride (6,80%), Penicillium spp. (5,83%) i Trichothecium roseum (5,18%). Na području istraživanja Čazma najzastupljenije gljive u uzorcima bile su: Fusarium spp. (18,83%), Penicillium spp. (14,23%), Ophiostoma spp. (13,39%), Phomopsis quercella (10,04%), Ciboria batschiana (9,62%), Chaetomium globosum (5,02%) i Alternaria alternata (4,60%). Na području istraživanja Donji Miholjac najčešće prisutne gljive bile su: Phomopsis quercella (21,43%), Fusarium spp. (12,30%), Alternaria alternata (11,90%), Trichoderma viride (11,51%), Trichothecium roseum (9,92%), Penicillium spp. (9,92%) i Ciboria batschiana (5,95%). Na području istraživanja Otok najzastupljenije gljive bile su: Ciboria batschiana (27,54%), Phomopsis quercella (22,72%), Fusarium spp. (12,83%), Penicillium spp. (9,63%), Trichothecium roseum (6,68%), Ophiostoma spp. (5,34%) i Fusella olivacea (4,27%). Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 97 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.28. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Jastrebarsko, 1998. godina VII mjesec Sveukupno Mikoflora n Alternaria alternata Arthrobotryis spp. Aspergillus spp. Botrytis cinerea Ciboria batschiana Chaetomium globosum Doratomyces stemonitis Fusarium spp. Fusella olivacea Gloeosporium quercinum Ophiostoma spp. Penicillium spp. Pestalotia spp. Phomopsis quercella Schizophyllum commune Stereum hirsutum Trichoderma viride Trichothecium roseum Verticillium spp. Ukupno Ukupni broj žirova u uzorku % od ukupnog broj žirova u uzorku 3 % 60,00 1 1 20,00 20,00 5 391 1,28 100 VIII mjesec Sveukupno IX mjesec Sveukupno X mjesec Sveukupno n % n % 5 1 1 21,74 4,35 4,35 5 12,82 n 1 2,56 7 6 17,95 15,38 26 VII - X Sveukupno % n % 10 1 2 7,87 0,79 1,57 43,33 33 6 25,98 4,72 3 1 13,04 4,35 4 2 10,26 5,13 3 5,00 13 3 10,24 2,36 8 34,78 2 10 5,13 25,64 8 11 13,33 18,33 10 29 7,87 22,83 2 5,13 12 20,00 14 11,02 1 5 0,79 3,94 127 1321 9,61 100 4 17,39 23 377 6,10 100 39 294 13,27 100 60 259 23,17 100 30 25 % 20 15 10 5 Al te r n A r a r ia th a l ro te b rn As otry ata p e is Bo rg il spp l . C try us Ch ib o tis s pp r c D aeto ia b in er . or m at ea ato iu sc my m h ia ce glo na s s bo te su Fu mo m Gl s n o e Fu ari u itis o s se m p o lla s riu ol pp . m i O qu v ace ph e io rc a Pe stom in um ni ci l a s l p Ph Pes ium p . Sc t o h i m o alo spp t zo . ph p sis ia sp yl p q lu ue . St m c r cel e r o m la T r eu m Tr i ch m h un i ch od ir s e ot erm ut u he ci a vi m u r V m ro ide er s tic eu ill m ium sp . 0 Grafikon 7.28. Gljive izolirane sa žira (%), Jastrebarsko, VII-X mjesec, 1998. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 98 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.29. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Lipovljani, 1998. godina VII mjesec Sveukupno VIII mjesec Sveukupno IX mjesec Sveukupno Mikoflora n % n % Alternaria alternata Arthrobotryis spp. Aspergillus spp. Botrytis cinerea Ciboria batschiana Chaetomium globosum Doratomyces stemonitis Fusarium spp. Fusella olivacea Gloeosporium quercinum Ophiostoma spp. Penicillium spp. Pestalotia spp. Phomopsis quercella Schizophyllum commune Stereum hirsutum Trichoderma viride Trichothecium roseum Verticillium spp. 3 3 6,38 6,38 5 3 3 7,35 4,41 4,41 4,41 5,88 23 29,11 64 Ukupno Ukupni broj žirova u uzorku % od ukupnog broj žirova u uzorku n % X mjesec Sveukupno n VII - X Sveukupno % n % 8 6 3 2,59 1,94 0,97 55,65 90 7 29,13 2,27 3 6,38 3 4 6 6 12,77 12,77 13 5 19,12 7,35 11 13,92 9 7,83 39 11 12,62 3,56 8 17,02 3 7 4,41 10,29 2 4,26 5 7,35 16 1 2 24 1 20,25 1,27 2,53 30,38 1,27 8 2 3 24 6,96 1,74 2,61 20,87 8 8 17,02 17,02 9 8 13,24 11,76 1 1,27 2 3 1,74 2,61 27 18 5 55 1 2 21 16 8,74 5,83 1,62 17,80 0,32 0,65 6,80 5,18 47 247 19,03 100 68 342 19,88 100 79 266 29,70 100 115 268 42,91 100 309 1123 39,28 100 35 30 25 % 20 15 10 5 A lte rn a A ria rth al ro ter b o na A try ta sp is e s Bo rgil pp . try lus C s Ch ibo tis c pp ae ria ine . D t or om bat rea s at i o m um chi yc glo ana es b s t osu em m Fu on G sa itis lo F eo us ri um sp ell or a s pp iu oli m v . O qu ace ph a io erci n s t u Pe om m ni ci a sp lli p P Pe um . Sc ho sta s hi m o lot pp . zo i ph psis a sp p. yl q u lu m er c St co ell e m a Tr reum m u Tr i ch h n i c od irs e ho er ut th ma um ec iu vir m id e V er rose tic um ill iu m sp . 0 Grafikon 7.29. Gljive izolirane sa žira (%), Lipovljani, VII-X mjesec, 1998. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 99 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.30. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Čazma, 1998. godina VII mjesec Sveukupno VIII mjesec Sveukupno IX mjesec Sveukupno Mikoflora n % n % n % Alternaria alternata Arthrobotryis spp. Aspergillus spp. Botrytis cinerea Ciboria batschiana Chaetomium globosum Doratomyces stemonitis Fusarium spp. Fusella olivacea Gloeosporium quercinum Ophiostoma spp. Penicillium spp. Pestalotia spp. Phomopsis quercella Schizophyllum commune Stereum hirsutum Trichoderma viride Trichothecium roseum Verticillium spp. 3 1 18,75 6,25 6 5 1 10,91 9,09 1,82 2 2 2,25 2,25 1 6,25 3 12 3 2 17 3,37 13,48 3,37 2,25 19,10 3 15 13 3,37 16,85 14,61 12 13,48 Ukupno Ukupni broj žirova u uzorku % od ukupnog broj žirova u uzorku 6 1 2 37,50 6,25 12,50 9 3 8 3 1 2 6 2 1 16,36 5,45 14,55 5,45 1,82 3,64 10,91 3,64 1,82 X mjesec Sveukupno n VII - X Sveukupno % 11 13,92 14 17,72 3 15 14 3 11 1 3,80 18,99 17,72 3,80 13,92 1,27 n % 11 8 1 4 23 12 5 45 3 7 32 34 7 24 1 4,60 3,35 0,42 1,67 9,62 5,02 2,09 18,83 1,26 2,93 13,39 14,23 2,93 10,04 0,42 1 1 6,25 6,25 4 3 1 7,27 5,45 1,82 2 1 2 2,25 1,12 2,25 3 4 3,80 5,06 10 9 3 4,18 3,77 1,26 16 288 5,56 100 55 331 16,62 100 89 370 24,05 100 79 385 20,52 100 239 1374 17,39 100 20 18 % 16 14 12 10 8 6 4 2 A lte rn A aria rth a ro lte b o rn A try ata sp is e s Bo rg il pp . lu t r C y s Ch ib o tis s pp ae ria cin . D or tom bat erea at iu sc om m h y c gl iana es o b s t o su e m Fu mo n G i s t a i lo eo Fu s ri um s sp ell s or a o pp iu m liv . O qu ace ph e io rci a Pe stom n um ni ci a sp ll p Ph Pes ium . Sc t o s a h i m o lo pp t . zo ph p sis ia sp yl lu q ue p . m St c rcel er o m la T r eu m Tr i ch m h un e i c od irs h o er u th m a t um ec iu vir m id V e er ro s tic eu ill m iu m sp . 0 Grafikon 7.30. Gljive izolirane sa žira (%), Čazma, VII-X mjesec, 1998. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 100 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.31. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Donji Miholjac, 1998. godina VII mjesec Sveukupno VIII mjesec Sveukupno IX mjesec Sveukupno X mjesec Sveukupno Mikoflora n % n % n % Alternaria alternata Arthrobotryis spp. Aspergillus spp. Botrytis cinerea Ciboria batschiana Chaetomium globosum Doratomyces stemonitis Fusarium spp. Fusella olivacea Gloeosporium quercinum Ophiostoma spp. Penicillium spp. Pestalotia spp. Phomopsis quercella Schizophyllum commune Stereum hirsutum Trichoderma viride Trichothecium roseum Verticillium spp. 4 7,27 18 16,07 8 1 16,00 2,00 4 3,57 3 4 6,00 8,00 11 31,43 1 4 2,00 8,00 2 5,71 2 4 1 5,71 11,43 2,86 13 37,14 2 35 327 10,70 Ukupno Ukupni broj žirova u uzorku % od ukupnog broj žirova u uzorku 2 3,64 3 2,68 11 3 20,00 5,45 14 7 12,50 6,25 1 9 1,82 16,36 3 7 2,68 6,25 4 8 2 11 8,00 16,00 4,00 22,00 1 1,82 29 25,89 11 12 1 20,00 21,82 1,82 14 13 12,50 11,61 4 8,00 55 267 20,60 100 112 538 20,82 100 50 424 11,80 100 n VII - X Sveukupno % n % 30 1 4 3 15 5 1 31 10 2 12 25 2 54 11,90 0,40 1,59 1,19 5,95 1,98 0,40 12,30 3,97 0,79 4,76 9,92 0,80 21,43 5,71 2 29 25 1 0,80 11,51 9,92 0,40 100 252 1556 16,20 100 25 20 % 15 10 5 A lte rn a A ria rth al ro ter bo n A try ata sp is e s Bo rg il pp . lu t r s C y s Ch ib o tis c pp . ae ria in e D or tom bats rea at iu o m m ch i y c glo ana es b s t o su em m Fu o n G sa iti lo F eo u s ri um s sp ell or a o s pp iu m liv . O qu ace ph e a io rci n s t Pe om um ni ci a sp lli p P P e um . Sc h om stal sp o hi p zo op s tia . ph is sp p yl q lu uer . m St co cell e a Tr reum mm u i c n Tr h i c od h irs e h o er ut th m a um ec iu vir m id e V er ro se tic u m ill iu m sp . 0 Grafikon 7.31. Gljive izolirane sa žira (%), Donji Miholjac, VII-X mjesec, 1998. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 101 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.32. Gljive izolirane sa žira, područje istraživanja Otok, 1998. godina VII mjesec Sveukupno VIII mjesec Sveukupno Mikoflora n % n % Alternaria alternata Arthrobotryis spp. Aspergillus spp. Botrytis cinerea Ciboria batschiana Chaetomium globosum Doratomyces stemonitis Fusarium spp. Fusella olivacea Gloeosporium quercinum Ophiostoma spp. Penicillium spp. Pestalotia spp. Phomopsis quercella Schizophyllum commune Stereum hirsutum Trichoderma viride Trichothecium roseum Verticillium spp. 5 4,81 7 10,61 3 2,88 Ukupno Ukupni broj žirova u uzorku % od ukupnog broj žirova u uzorku 3 4,55 IX mjesec Sveukupno n X mjesec Sveukupno % n VII - X Sveukupno % 34 39,08 69 58,97 n % 12 3,20 3 103 3 0,80 27,54 0,80 15 10 14,42 9,62 12 6 18,18 9,09 10 11,49 11 9,40 48 16 12,83 4,27 5 20 1 13 4,81 19,23 0,96 12,50 3 9 1 18 4,55 13,64 1,52 27,27 7 6 3 26 8,05 6,90 3,45 29,99 5 1 1 28 2 4,27 0,85 0,85 23,93 1,71 1 1,15 13 19 12,50 18,27 1 6 1 1,52 9,09 1,52 20 36 6 85 2 1 14 25 1 5,34 9,63 1,60 22,72 0,53 0,26 3,74 6,68 0,26 104 591 17,60 100 66 365 18,08 100 87 392 22,19 100 117 481 24,32 100 374 1829 20,45 100 30 25 % 20 15 10 5 Al te r n A r a r ia th a l ro te b rn As otry ata p e is Bo rg il spp l . C try us Ch ib o tis s pp r c D aeto ia b in er . or m at ea ato iu sc my m h ia ce glo na s s bo te su Fu mo m Gl s n o e Fu ari u itis o s se m p o lla s riu ol pp . m i O qu v ace ph e io rc a Pe stom in um ni ci l a s l p Ph Pes ium p . Sc t o h i m o alo spp t zo . ph p sis ia sp yl p q lu ue . St m c r cel e r o m la T r eu m Tr i ch m h un i ch od ir s e ot erm ut u he ci a vi m u r V m ro ide er s tic eu ill m ium sp . 0 Grafikon 7.32. Gljive izolirane sa žira (%), Otok, 1998. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 102 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.33. Zastupljenost gljiva izoliranih sa žira u postocima po područjima istraživanja i srednja vrijednost za sva područja zajedno, 1998. godina Mikoflora Alternaria alternata Jastrebarsko Čazma D. Miholjac Otok Lipovljani Srednja vr. 7,87 4,60 11,90 3,20 2,59 6,03 Arthrobotrys spp. 0,79 3,35 0,40 1,94 1,62 Aspergillus spp. 1,57 0,42 1,59 0,97 1,14 1,67 1,19 0,80 Botrytis cinerea 1,22 Ciboria batschiana 25,98 9,62 5,95 27,5 29,13 19,64 Chaetomium globosum 4,72 5,02 1,98 0,80 2,27 2,96 2,09 0,40 Doratomyces stemonitis 1,25 Fusarium spp. 10,24 18,83 12,30 12,80 12,62 13,36 Fusella olivacea 2,36 1,26 3,97 4,27 3,56 3,08 2,93 0,79 Gloeosporium quercinum 1,86 Ophiostoma spp. 7,87 13,39 4,76 5,34 8,74 8,02 Penicillium spp. 22,83 14,23 9,92 9,63 5,83 12,49 2,93 0,80 1,60 1,62 1,74 11,02 10,04 21,43 22,70 17,80 16,60 0,53 0,32 0,42 Pestalotia spp. Phomopsis quercella Schizophyllum commune 0,42 Stereum hirsutum 0,80 0,26 0,65 0,57 Trichoderma viride 0,79 4,18 11,51 3,74 6,80 5,40 Trichothecium roseum 3,94 3,77 9,92 6,68 5,18 5,90 1,26 0,40 0,26 Verticillium spp. 0,64 25 20 % 15 10 5 Ar Al te r na r ia th alt r o er b o na As tr y ta p e is s Bo rg ill pp . u t Ci r ytis s s p b Ch c p. ae oria in e Do tom ba rea t ra to ium sch i my g a ce lo b na s s os te um Fu mo n sa iti Gl o e Fu ri um s o s se p o lla s pp riu ol . m iv Op qu ace h i erc a o s in Pe tom um ni as ci lli pp . u P m e P Sc h om stal sp p o hi zo op s tia . sp ph is p yl q lum uer . c e St co lla er m Tr eum m u i Tr ch o h i n e i ch d r su oth erm t um ec a v iu m ir i Ve ro de rti seu cil m liu m sp . 0 Grafikon 7.33. Srednja vrijednost gljiva izoliranih sa žira u % za sva područja istraživanja, 1998. godina Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 103 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.2. Zdravstveno stanje i mikoflora zrelog žira iz uroda 1999. i 2000. godine 7.2.1. Mikoflora zrelog žira iz uroda 1999. godine Žir sakupljen s tla u jesen 1999. godine metodom slučajnih uzoraka, nakon tri mjeseca čuvanja u hladnjaka u PVC vrećicama na temperaturi 4-5 °C, analiziran je makroskopski i mikroskopski kako bi se utvrdila prisutna mikoflora. Rezultati analize prikazani su u tablici 7.34. kao i na grafikonima od 7.34. do 7.39. Na grafikonu br. 7.40. prikazana je mikoflora sveukupnih uzoraka dok je na grafikonu 7.41. prikazan postotak uzoraka u kojima su prisutne pojedine vrste gljiva. Od 12 analiziranih uzoraka Penicillium spp. prisutan je u svim uzorcima, Ciboria batschiana se nalazi u 83,33% uzoraka, Botrytis cinerea dolazi u 50% uzoraka, Fusarium spp. i Phomopsis quercella dolaze u 41,66% uzoraka dok Stereum hirsutum, Trichothecium roseum i bakterijska trulež dolaze u 8,33% uzoraka. Gljiva Ciboria batschiana najzastupljenija je u uzorcima iz Zagreba, Velike Gorice, Popovače, Vrbovca, Čazme i Đurđevca (57,41% - 67,31%). Penicillium spp. je u najvećem postotku prisutan u uzorcima iz Koške, Đurđenovca i Đakova (65,22-92,86%). Gljiva Phomopsis quercella nađena je na najviše žirova u uzorcima iz Nove Gradiške i Čazme (74,14% i 26,67%). Botrytis cinerea nađena je na uzorcima žira iz Čazme, Križevaca, Koprivnice i Đurđevaca u postotku od 10,00 do 21,43. Na grafikonu 7.40. koji prikazuje podatke za sve uzorke zajedno uočava se da je najveći postotak žira zaražen s gljivama Ciboria batschiana, zatim Penicillium spp. te Phomopsis quercella. Za njima slijede Botrytis cinerea, Fusarium spp. i Trichothecium roseum. Registrirana je i bakterijska trulež na uzorku iz Đakova koja se prepoznaje po vlažnom mekanom žiru i karakterističnom mirisu vrenja. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 104 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.34. Mikoflora skladištenog žira iz uroda 1999. godine Lokalitet Šumarija Veličina uzorka (N) Botrytis cinerea n % Ciboria batschiana n Fusarium spp. % n % Penicillium spp. n % Phomopsis quercella n % Stereum hirsutum n % 1 1,92 Trichothecium roseum n % 1 2,56 Bakterijska trulež n % 7 30,43 Uprava šuma podružnica Zagreb Zagreb 70 V. Gorica 52 Popovača 54 4 2 5,71 3,70 46 65,71 35 31 2 2,86 15 21,43 67,31 16 30,77 57,41 21 38,89 3 4,28 Uprava šuma podružnica Bjelovar Vrbovec 36 Čazma 15 4 11,11 25 69,44 9 60,00 2 5,56 4 11,11 1 2,78 2 13,33 4 26,67 Uprava šuma podružnica Koprivnica Križevci 20 2 10,00 5 25,00 Koprivnica 14 3 21,43 7 50,00 Đurđevac 20 4 20,00 13 65,00 1 1,72 13 65,00 3 21,43 3 15,00 Uprava šuma podružnica Nova Gradiška N. Gradiška 58 1 1,72 14 24,14 43 74,14 Uprava šuma podružnica Našice Koška 28 Đurđenovac 39 2 3 7,14 7,69 26 92,86 31 79,49 4 10,26 Uprava šuma podružnica Osijek Đakovo 23 UKUPNO 429 19 4,43 1 4,35 175 40,79 8 1,86 15 65,22 163 38,00 55 12,82 1 0,23 1 0,23 7 1,63 8,33 1 8,33 1 8,33 Broj i postotak uzoraka u kojima su prisutne navedene gljive Ukupno uzoraka 12 6 50,00 10 83,33 5 41,66 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 12 100,0 5 41,66 1 105 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Mikoflora žira, U.š. Zagreb, urod 1999.god. 70 60 50 % 40 Zagreb 30 V.Gorica 20 Popovača 10 0 Botrytis cinerea Ciboria batschiana Fusarium Penicillium Phomopsis St ereum spp. spp. quercella hirsut um Grafikon 7.34. Mikoflora žira, U.š.p. Zagreb, urod 1999. god. Mikoflora žira, U.š. Bjelovar, urod 1999. god. 70 60 50 % 40 Vrbovec 30 Čazma 20 10 0 Botrytis cinerea Ciboria batschiana Fusarium spp. Penicillium spp. Phomopsis quercella Grafikon 7.35. Mikoflora žira, U.š.p. Bjelovar, urod 1999. god. Mikoflora žira, U.š.Koprivnica, urod 1999. god. 70 60 50 % 40 Križevci 30 Koprivnica 20 Đurđevac 10 0 Botrytis cinerea Ciboria batschiana Fusarium spp. Penicillium spp. Grafikon 7.36. Mikoflora žira, U.š.p. Koprivnica, urod 1999. god. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 106 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Mikoflora žira, U.š. N.Gradiška, urod 1999. god. 80 70 60 50 % 40 30 20 10 0 N.Gradiška Fusarium spp. Penicillium spp. Phomopsis quercella Grafikon 7.37. Mikoflora žira, U.š.p. N. Gradiška, urod 1999. god. Mikoflora žira, U.š. Našice, urod 1999. god 100 80 60 Koška % 40 Đurđenovac 20 0 Ciboria Fusarium spp. Penicillium batschiana spp. Phomopsis T richothecium quercella roseum Grafikon 7.38. Mikoflora žira, U.š.p. Našice, urod 1999. god. Mikoflora žira, U.š. Osijek, urod 1999. god. 70 60 50 % 40 Đakovo 30 20 10 0 Ciboria batschiana Penicillium spp. Bakterijska trulež Grafikon 7.39. Mikoflora žira, U.š.p. Osijek, urod 1999. god. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 107 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Mikoflora žira sveukupnih uzoraka, urod 1999. god. 45 40 35 30 % 25 20 15 10 5 0 Botry tis cinerea Ciboria batschiana Fusarium spp. Penicillium spp. Phom opsis quercella Stereum hirsutum Trichothecium roseum Bakterij ska trulež Grafikon 7.40. Mikoflora žira sveukupnih uzoraka, urod 1999. god. Postotak uzoraka u kojima su prisutne navedene gljive 100 % 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 Botrytis Ciboria cinerea batschiana Fusarium spp. P enicillium spp. P homopsis Stereum quercella hirsutum Trichothecium Bakterijska roseum trulež Grafikon 7.41. Postotak uzoraka u kojima su prisutne navedene gljive Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 108 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.2.2. Zdravstveno stanje i mikoflora zrelog žira iz uroda 2000. godine Iz prosječnih uzoraka žira uroda 2000. godine sakupljanog za potrebe pošumljavanja i rasadničkog uzgoja izdvojeni su radni uzorci za analizu zdravstvenog stanja uz fitopatološku analizu za utvrđivanje mikoflore na žiru. Pri tom je određivana i klijavost žira. Naglašava se da je sakupljan samo okularno zdrav i neoštećen žir. Žir je čuvan u PVC vrećicama u hladnjaku. Nakon tri mjeseca uzorci su analizirani. U tablici 7.35. prikazani su rezultati analiza zdravstvenog stanja i klijavosti. Zdravo sjeme sadržano je u kategorijama normalno isklijalo sjeme i svježe neisklijalo sjeme. Analizirajući podatke prema danim uzorcima po upravama šuma može se reći da se postoci zdravog sjemena kreću od 66,39% za Upravu šuma podružnica Koprivnica do 91,25% za Upravu šuma podružnica Karlovac, prosječno 83,10%. Bolesno i gnjilo sjeme kretalo se od 8,75% za Upravu šuma podružnica Karlovac do 33,61% za Upravu šuma podružnica Koprivnica a prosječno za sve uzorke iznosi 17,68%. Klijavost sjemena iznosila je od 24,72% za Upravu šuma podružnica Koprivnica do 70% za Upravu šuma podružnica Karlovac, prosječno 37,98%. Klijavost sjemena je relativno niska što se objašnjava primjenom metode naklijavanja cijelog žira na podlozi od pijeska koja je korištena zbog primarnog cilja utvrđivanja mikoflore na žiru. Zbog krupnoće žira i premalo vlage klijavost je usporena. Svježe neisklijalo sjeme kreće se u rasponu od 21,25% za Upravu šuma podružnica Karlovac do 56,46% za Upravu šuma podružnica Vinkovci, prosječan iznos je 44,34%. Iz iskustva stručne službe Odjela za sjemenarstvo i oplemenjivanja smatra se da će iz ove kategorije isklijati još barem 30% žira. Rezultati fitopatoloških analiza prikazani su u tablici 7.36. i na grafikonima od 7.42 do 7.47. kako bi bili što pregledniji. Rezultati su prikazani za uprave šuma po pojedinim šumarijama. Zastupljenost gljiva u sveukupnim uzorcima zajedno prikazana je u grafikonu 7.48. Najzastupljenije gljive u sveuklupnim uzorcima su Ciboria batschiana, Penicillium spp., Ophiostoma spp. i Phomopsis quercella. Broj i postotak uzoraka u kojima su nađene pojedine vrste gljiva na žiru vidi se u tablici 7.37. i na grafikonu 7.49. Od ukupno 19 analiziranih uzoraka Ciboria batschiana je prisutna u svima, Penicillium spp. dolazi u 94,74% uzoraka, Ophiostoma spp. i Phomopsis quercella dolaze u 26,32% uzoraka, Fusarium spp. i Stereum hirsutum dolaze u 15,79% uzoraka, Botrytis cinerea u 10,53% uzoraka te Pestalotia spp. u 5,26% uzoraka. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 109 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.35. Rezultati ispitivanja klijavosti i zdravstvenog stanja sjemena, urod 2000. god. Analitički broj uzorka Veličina uzorka Šumarija N Normalno isklijalo sjeme N % Bolesno i gnjilo sjeme Svježe neisklijalo sjeme N % N % Uprava šuma podružnica Karlovac 6283 Pisarovina 120 93 77,50 9 7,50 18 15,00 6286 Karlovac 120 75 62,50 12 10,00 33 27,50 Srednja vrijednost 70,00 8,75 21,25 Uprava šuma podružnica Zagreb 6267 Kutina 120 78 65,00 7 5,83 35 29,17 6268 Kutina 120 41 34,17 15 12,50 64 53,33 Srednja vrijednost 49,59 9,17 41,25 Uprava šuma podružnica Bjelovar 6115 V. Grđevac 120 50 41,66 13 10,83 57 47,50 6109 Garešnica 120 31 25,83 70 58,33 19 15,83 6105 Čazma 120 18 15,00 17 14,17 85 70,83 6259 Vrbovec 120 37 30,83 26 21,67 57 47,50 Srednja vrijednost 28,33 26,25 45,42 Uprava šuma podružnica Koprivnica 6235 Križevci 120 15 12,50 33 27,50 72 60,00 6238 Repaš 120 56 46,67 57 47,50 7 5,83 6250 Koprivnica 120 18 15,00 31 25,83 71 59,17 Srednja vrijednost 24,72 33,61 41,67 Uprava šuma podružnica Nova Gradiška 6317 Trnjani 120 45 37,50 9 7,50 66 55,00 6321 Stara Gradiška 120 50 41,66 5 4,17 65 54,17 6322 Novska 120 67 55,83 10 8,33 43 35,83 6324 Jasenovac 120 32 26,67 40 33,33 48 40,00 Srednja vrijednost 40,42 13,33 46,25 Uprava šuma podružnica Vinkovci 6178 Vrbanja 120 54 45,00 1 0,83 65 54,17 6197 Otok 120 17 14,17 13 10,83 90 75,00 6232 Gunja 120 62 51,67 9 7,50 49 40,83 6341 Županja 120 27 22,50 26 21,67 67 55,83 Srednja vrijednost 33,34 10,21 56,46 37,98 17,68 44,34 Sveukupno Srednja vrijednost Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 110 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.36. Mikoflora skladištenog žira, urod 2000. god. Analitički broj uzorka Šumarija (Gospodarska Jedinica) 6283 Pisarovina 6286 Karlovac 6267 Kutina1 6268 Kutina2 6115 V. Grđevac 6109 Garešnica 6105 Čazma 6259 Vrbovec 6235 Križevci 6238 Repaš 6250 Koprivnica 6317 6321 6322 Bolesno i Gljiva gnjilo sjeme N Uprava šuma podružnica Karlovac 9 Ciboria batschiana Ophiostoma spp. Penicillium spp. i kukci 12 Ciboria batschiana Penicillium spp. i kukci Pestalotia spp. Uprava šuma podružnica Zagreb 7 Ciboria batschiana Ophiostoma spp. Penicillium spp. 15 Botrytis cinerea Ciboria batschiana Penicillium spp. i kukci Phomopsis quercella Stereum hirsutum Uprava šuma podružnica Bjelovar 13 Ciboria batschiana Penicillium spp. i kukci 70 Ciboria batschiana Penicillium spp. 17 Botrytis cinerea Ciboria batschiana Penicillium spp. Penicillium spp. i kukci 26 Ciboria batschiana Fusarium spp. Penicillium spp. Penicillium spp. i kukci Stereum hirsutum Uprava šuma podružnica Koprivnica 33 Ciboria batschiana Penicillium spp. i kukci 57 Ciboria batschiana Penicillium spp. Penicillium spp.. i kukci 31 Ciboria batschiana Penicillium spp. i kukci Uprava šuma podružnica Nova Gradiška 9 Ciboria batschiana Ophiostoma spp. Penicillium spp. Penicillium spp. i kukci Stara Gradiška 5 Ciboria batschiana Penicillium spp. i kukci Phomopsis quercella Novska 10 Ciboria batschiana Trnjani Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu Zaraženi žirovi N % 6 1 2 8 1 3 66,67 11,11 22,22 66,67 8,33 25,00 5 1 1 3 9 1 1 1 71,43 14,28 14,28 20,00 60,00 6,67 6,67 6,67 11 2 66 4 3 6 2 6 12 1 7 4 2 84,62 15,38 94,29 5,71 17,65 35,29 11,76 35,29 46,15 3,85 26,92 15,38 7,69 21 12 34 4 19 11 20 63,64 36,36 59,65 7,02 33,33 35,48 64,52 2 2 2 3 2 2 1 5 22,22 22,22 22,22 33,33 40,00 40,00 20,00 50,00 111 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 6324 6178 6197 6232 6341 7. REZULTATI RADA Uprava šuma podružnica Nova Gradiška (nastavak) Penicillium spp. Penicillium spp. i kukci Phomopsis quercella Jasenovac 40 Ciboria batschiana Ophiostoma spp. Penicillium spp. Phomopsis quercella Stereum hirsutum Uprava šuma podružnica Vinkovci Vrbanja 1 Ciboria batschiana Otok 13 Ciboria batschiana Penicillium spp. Penicillium spp. i kukci Gunja 9 Ciboria batschiana Penicillium spp. i kukci Fusarium spp. Županja 26 Ciboria batschiana Fusarium spp. Ophiostoma spp. Penicillium spp. Penicillium spp. i kukci Phomopsis quercella Sveukupno 403 Botrytis cinerea Ciboria batschiana Fusarium spp. Ophiostoma spp. Penicillium spp. Penicillium spp. i kukci Phomopsis quercella Pestalotia spp. Stereum hirsutum 1 2 2 31 3 2 2 2 10,00 20,00 20,00 77,50 7,50 5,00 5,00 5,00 1 7 4 2 4 4 1 10 2 4 3 2 5 100 53,85 30,77 15,38 44,44 44,44 11,11 38,46 7,69 15,38 11,54 7,69 19,23 6 251 4 11 30 82 11 3 5 1,49 62,28 0,99 2,73 7,44 20,35 2,73 0,74 1,24 Tablica 7.37. Broj i postotak uzoraka u kojima se nalaze navedene gljive na žiru Ukupan broj uzoraka 19 Gljiva Uzorci u kojima se nalaze navedene gljive N % Botrytis cinerea 2 10,53 Ciboria batschiana 19 100 Fusarium spp. 3 15,79 Ophiostoma spp. 5 26,32 Penicillium spp. 10 52,63 Penicillium spp. i kukci 15 78,95 Penic. spp. i Penic. spp i kukci 18 94,74 Phomopsis quercella 5 26,32 Pestalotia spp. 1 5,26 Stereum hirsutum 3 15,79 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 112 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Mikoflora žira, U.š. Karlovac, urod 2000. god. 70 60 50 % 40 Pisarovina 30 Karlovac 20 10 0 Ciboria batschiana Ophiostoma sp. Penicillium spp. i kukci Pestalotia sp. Grafikon 7.42. Mikoflora žira, U.š.p. Karlovac, urod 2000. god. Mikoflora žira, U.š. Zagreb, urod 2000. god. 80 70 60 50 % 40 Kutina1 30 Kutina2 20 10 0 Botrytis Ciboria cinerea batschiana Ophiostoma P enicillium P enicillium P homopsis sp. spp. i kukci spp. quercella Stereum hirsutum Grafikon 7.43. Mikoflora žira, U.š.p. Zagreb, urod 2000. god. Mikoflora žira, U.š. Bjelovar, urod 2000. god. 100 80 V. Grđevac 60 Garešnica % Čazma 40 Vrbovec 20 0 Botry tis cinerea Ciboria batschiana Fusarium sp. Penicillium spp. Penicillium spp. i kukci Stereum hirsutum Grafikon 7.44. Mikoflora žira, U.š.p. Bjelovar, urod 2000. god. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 113 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Mikoflora žira, U.š. Koprivnica, urod 2000. god. 70 60 50 % 40 Križevci 30 Repaš Koprivnica 20 10 0 Ciboria batschiana Penicillium spp. i kukci Penicillium spp. Grafikon 7.45. Mikoflora žira, U.š.p. Koprivnica, urod 2000. god. Mikoflora žira, U.š. N. Gradiška, urod 2000. god. 80 70 60 Trnjani 50 Stara Gradiška % 40 30 Novska 20 Jasenovac 10 0 Ciboria Ophiostoma P enicillium P enicillium P homopsis batschiana spp. spp. i kukci spp. quercella Stereum hirsutum Grafikon 7.46. Mikoflora žira, U.š.p. N. Gradiška, urod 2000. god. Mikoflora žira, U.š. Vinkovci, urod 2000. god. 100 80 Vrbanja 60 Otok % Gunja 40 Županja 20 0 Ciboria batschiana Fusarium sp. Ophiostom a sp. Penicillium spp. Penicillium spp. i kukci Phom opsis quercella Grafikon 7.47. Mikoflora žira, U.š.p. Vinkovci, urod 2000. god. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 114 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Mikoflora žira sveukupnih uzoraka, urod 2000. god. 70 60 50 40 % 30 20 10 0 Botry tis cinerea Ciboria batschiana Fusarium spp. Ophiostom a Penicillium sp. spp. Penicillium spp. i kukci Phom opsis Pestalotia sp. quercella Stereum hirsutum Grafikon 7.48. Mikoflora žira sveukupnih uzorka, urod 2000. god. Postotak uzoraka u kojima su prisutne navedene gljive 100 90 80 70 60 % 50 40 30 20 10 0 Botry tis cinerea Ciboria batschiana Fusarium spp. Ophiostom a Penicillium sp. spp. Penicillium spp. i kukci Phom opsis Pestalotia sp. quercella Stereum hirsutum Grafikon 7.49. Postotak uzoraka u kojima su prisutne navedene gljive Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 115 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3. Vrste utvrđenih gljiva na žiru Gljive nađene na uzorcima žira hrasta lužnjaka na području Hrvatske pripadaju uglavnom pododjelu Fungi imperfecti (Deuteromycotina) skupini nesavršenih gljiva s konidijskim stadijem dok su manje zastupljene gljive pododjela Ascomycotina i Basidiomycotina skupine savršenih gljiva. U pododjelu Deuteromycotina zastupljene su važne gljive od kojih su nekima poznati i savršeni (perfektni) stadiji dok kod nekih ne poznajemo spolni rasplod već samo nesavršeni odnosno anamorfni stadiji. Rodovi Penicillium i Aspergillus imaju poznati savršeni stadij i pripadaju redu savršenog stadija Eurotiales. Savršeni stadij roda Trichoderma pripada redu Hypocreales. Fusarium ima perfektni stadij koji pripada porodici Nectriaceae (rodu Nectria i Giberella). Većina gljiva iz ovog pododjela pripada razredima Hyphomycetes i Coelomycetes. Gljive iz razreda Hyphomycetes ne stvaraju plodišta već spore nastaju direktno na miceliju odnosno konidioforima, koji dolaze pojedinačno ili su grupirani u sinematu (Stysanus) ili sporodohij (Fasarium), dok gljive iz razreda Coelomycetes stvaraju plodišta i to acervule (red Melanconiales) i piknide (red Sphaeropsidales) (Glavaš, 1996.). U pododjelu Ascomycotina, čija karakteristika je dobro razvijen micelij i tvorba askokarpa, askusa i askospora, dolazi manji broj gljiva nađenih na žiru. One pripadaju razredima Plectomycetes za koji je karakteristična tvorba više-manje okruglog plodnog tijela nazvanog kleistotecij, Pyrenomycetes s plodnim tijelom oblika tikvice odnosno opletene boce nazvanog peritecij i Discomycetes s askokarpom oblika tanjurića ili šalice nazvanog apotecij. Pododjelu Basidiomycotina pripadaju tek dvije vrste gljiva nađene na žiru. Za ovaj pododjel je karakteristično da se spolne spore (bazidiospore) stvaraju na posebnim stanicama bazidijama, koje mogu biti jedno ili više stanične. Utvrđene gljive pripadaju razredu Holobasidiomycetes koje stvaraju jednostanične bazidije (holobazidije), redu Aphyllophorales, koji obuhvaća većinom saprofite – uzročnike truleži drva, i porodici Corticiaceae, grupi gljiva koja stvara korticioidna plodna tijela. Većina gljiva koje dolaze na sjemenu, prema načinu života, su saprofiti i paraziti. Pojedine gljive provode život kao saprofiti koji u određenom trenutku u povoljnim uvjetima prelaze na parazitski način života poput gljiva iz rodova Fusarium i Alternaria. Neke gljive pripadaju skupini nekrotrofnih parazita koji prvo oslabe i ubiju žive stanice da bi se na njima naselili i crpili hranu poput gljiva iz rodova Ciboria, Chaetomium i Trichoderma. Od slabih parazita koji napadaju Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 116 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA oštećeno i fiziološki oslabljeno sjeme dolaze gljive iz rodova poput Aspergillus i Pestalotia. Posebno su značajne gljive koje mogu prijeći na sadnice hrasta, izazvati njihovo venuće u obliku traheomikoznog oboljenja poput gljiva iz rodova Diaporthe, Ophiostoma i Verticillium. Gljive iz rodova Ciboria i Diaporthe (nesavršeni stadij Phomopsis ubrajaju se u specijalizirane parazite. To su parazitske gljive koje su se prilagodile na fiziološke, anatomske i histološke karakteristike njihovih biljaka domaćina (Glavaš, 1996.) Sve gljive koje su nađene na lužnjakovom sjemenu uzrokuju njegovo slabljenje i smanjuju klijavost. Prema rezultatima pokusa umjetne infekcije sjemena smreke i bora, koji je proveo Urošević, 1979. u Kristek i drugi (1992.) gotovo sve ovdje opisane gljive snižavaju klijavost sjemena za 5% pa čak do 40% u slučaju Fusarium. Gospodarski značaj nekih gljiva na sjemenu je zanemariv (Doratomyces) dok su neke gospodarski i ekonomski značajne s obzirom na štetu koju mogu nanijeti poput gljive iz rodova Fusarium i Ciboria. Opis gljiva baziran je na istraživanjima ruskih znanstvenika (Brežnev i drugi, 1962.) te čeških i slovačkih istraživača poput Jančarik i Prohatzkova u Kristek i drugi (1992.) jedni od rijetkih koji su se bavili sustavnim proučavanjem gljivičnih organizama na više vrsta šumskog sjemena pa tako i na sjemenu hrasta lužnjaka. Opisi su upotpunjivani vlastitim istraživanjima te raspoloživom literaturom o dotičnim rodovima i vrstama gljiva (autori: Ainsworth i drugi, (1973.), Bessey (1950.), Butin (1973.), Dennis, (1960., 1976.), Jacobs i drugi, (1960.). U opisima je prikazana njihova sistematska pripadnost, simptomi koje stvaraju na hrastovom žiru, morfološke karakteristike, makroskopske i mikroskopske, način života i oštećenja koja uzrokuju. Obim opisa ovisio je o raspoloživoj literaturi i postojećim saznanjima o određenim gljivama. Na primjer za opis Fusarium vrsta korišteni su podaci iz Booth, (1972.), za opise mikroskopskih karakteristika gljiva poslužila sam se opisima iz Barnet, Hunter, (1972.), za prikaz biologija gljiva iz rodova Penicillium i Botrytis koristila sam CMI-opise patogenih gljiva, (1966. i 1974.). Opisi gljiva u daljnjem tekstu poredani su prema njihovoj sistematskoj pripadnosti baziranoj na sistematici prema Glavaš, 1996. Sistematski pregled gljiva nađenih na lužnjakovom žiru prikazan je u tablici 7.38. gljive su prikazane u savršenom, odnosno nesavršenom stadiju već prema tome kako su nađene na žiru. Rodovi upisani u tablici tamnom bojom prikazani su u tekstu istim redosljedom kao što su navedeni u tablici. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 117 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.38. Sistematski prikaz gljiva utvrđenih na lužnjakovom žiru ASCOMYCOTINA PLECTOMYCETES EUROTIALES Eurotiaceae Eurotium (konid. stadij: Aspergillus Penicillium) MICROASCALES Ophiostomataceae Ophiostoma PYRENOMYCETES DISCOMYCETES SPHAERIALES Chaetomiaceae Chaetomium DIAPORTHALES Gnomoniaceae Gnomonia (konid. stadij: Gloeosporium) Diaportaceae Diaporthe (konid. stadij: Phomopsis) HYPOCREALES Nectriaceae Nectria (konidijski stadij: Fusarium) HELOTIALES Sclerotinaceae Sclerotinia Ciboria BASIDIOMYCOTINA HOLOBASIDIOMYCETES APHYLLOPHORALES Stareaceae Stereum Schyzophyllacea Schyzophyllum DEUTEROMYCOTINA (FUNGI IMPERFECTI) HYPHOMYCETES HYPHALES Penicillium Verticillium Trichoderma Trichothecium Aspergillus Alternaria Botrytis Fusella Stysanus Arthrobotrys STILBALALES Graphium (savršeni stadij: Ophiostoma) TUBERCULARIALES Fusarium Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu COELOMYCETES MELANCONIALES Pestalotia Gloeosporium SPHAEROPSIDALES Phomopsis 118 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.1. Ophiostoma spp. Od vrsta gljiva iz roda Ophiostoma na žiru dolazi nekoliko koje kasnije nanose štete i mladim biljkama: O. coeruleum, O. valachicum, O. roboris, O. quercus i Ceratocystis fagacearum (Glavaš, 1984.). Gljive mogu zaraziti nerazvijeni žir i žir oštećen insektima još na stablu, razvoj se nastavlja na uskladištenom žiru gdje izaziva crnu trulež, gubitak klijavosti i propadanje žira. Zaraza se očituje u stvaranju sivih nepravilnih mrlja nejasna ruba (slika 7.2.) koje kasnije postaju smeđe do tamno crne boje, povećavaju se i spajaju, tkivo žira postepeno mekša i trune. Crna trulež na žiru naziva se još i ofiostomoza. Osim na žiru mogu se naći i na sjemenu bukve i smreke. U našim uzorcima utvrđena je prisutnost dvaju vrsta gljiva: O. roboris i O. valachicum. Ševčenko, (1978.) u Glavaš, (1980.) navodi da infekcija nastaje još u šumi i da ove gljive uzrokuju najopasnije bolesti žira jer iz žira mogu prelaziti na mlade biljke. One su uzročnici bolesti provodnih elemenata hrasta i mogu uzrokovati venuće raznih vrsta hrastova (Glavaš, 1980.). Ophiostoma roboris C. Georgescu et I. Teoderu Ova gljiva može zaraziti sve dijelove žira: peteljku, kapicu, ljusku, kotiledone i klicu. Na zaraženim dijelovima formiraju se periteciji (slika 7.1.). Periteciji su slobodni, pojedinačni, rasijani, površinski, s utisnutom loptastom bazom, veličine (prema Brežnev i drugi, 1962.) 95-135×160 μm. Vrat peritecija je dugačak, nitast, veličine 476-2000 × 6-30 μm (prema Brežnev i drugi, 1962.) završava s kistićem bezbojnih, nježnih resica-cilija. Tkivo peritecija je crno, od kožaste do drvenaste konzistencije, parenhimske građe. Periteciji se u kulturi rijetko razvijaju. Inače kad se razvijaju na prirodnim i umjetnim supstratima pojavljuju se za 1-5 tjedana (prema Glavaš, 1980.). Unutar peritecija razvijaju se vrećasto-eliptični askusi s vrlo kratkom, savijenom stapkom koja je vidljiva u ranom stadiju razvoja plodnog tijela, a zatim brzo isčezava. Askospore se sakupljaju na vrhu vrata peritecija u sluzastoj masi koja podsjeća na kapljicu. One su jednostanične, bezbojne, nalik na pupoljak, veličine 1-3 μm (slike 7.7. i 7.8.). Ophiostoma roboris ima dva nesavršena stadija: Graphium roboris i Hyalodendron roboris. Graphium roboris formira koremij, koji se sastoji od stručka hifa boje tamne kave. Hife su paralelno raspoređene i međusobno čvrsto slijepljene i čine stapku visine (prema Brežnev i drugi, 1962.) 336-1000 μm i debljine 7,6-35 μm. Vršni dio koremija završava lepezom koja postaje bez- Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 119 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA bojna (slika 7.5.). Hife su u toj lepezi trihotomno razgranjene, a na svakoj grančici se razvija do tri niza konidija. Konidije su bezbojne, jednostanične, izdužene, veličine 4,9 × 1,2 μm (slika 7.6.). Konidiofori i konidije se nalaze u sluzi koja čini glavicu mliječne boje, veličine 49,6-41 μm. Istovremeno se razvija drugi konidijski stadij iz roda Hyalodendron. U tom obliku konidije su bezbojne, raspoređene u nizove koji čine pupoljke. Konidije su raznolike po obliku i veličini: u bazi lanca su produžene, veličine 21,2-48×2,2-2,5 μm, na vrhu lanca su jednostanične, veličine 3,5-5×1,2-2 μm, katkada se nađu i višestanične konidije. Ovu gljivu smo nalazili na zrelom žiru u vrijeme njegovog opadanja i nakon uskladištenja. u savršenoj i nesavršenoj formi. Gljiva je parazit, česta kao vaskularni patogen koji uzrokuje venuće biljke, a može doći i kao saprofit. Gljiva je u svom nesavršenom obliku Graphium roboris izolirana iz sive pjegice nejasna ruba sa kotiledona stavljanjem tankih listića oboljelog tkiva na hranjivu podlogu. Kolonija na PDA je tamno-smeđe boje, polegla, s bijelim rubom. U koloniji gljive smjenjuju se tamni i svjetliji prstenovi micelija u skladu s dnevnim i noćnim ritmom (slika 7.3.). Nakon tri do pet dana počinju se formirati prvi koremiji koji stoje pojedinačno ili po nekoliko izraste iz iste baze. Karakteristične su mliječne nakupine, pravilno raspoređene po "godovima" a koje su najgušće u centru kulture (slika 7.4.). Ophiostoma valachicum C. Georgesku, I. Teoderu et Badea Gljiva stvara, na površini ljuske i rjeđe na kotiledonima, crne pjege veličine 2-3 mm koje su u početku oštro ocrtane, a kasnije postaju nejasne. Pjege se formiraju u vrijeme razvoja žira, ali se isto tako mogu razviti na uskladištenom žiru i uzrokovati njegovo propadanje. Ali mogu uzrokovati propadanje žira i na mjestima uskladištenja. Prema Brežnev i drugi, 1962., kolonija na hranjivoj podlozi je bijelo-krem boje, u sredini paučinasta, a na krajevima glatka. U kulturi se u početku formira konidijski stadij Rhinotrichum valachicum C. Georgesku, I. Teoderu et Badea. Konidiofori su bezbojni, dugački ili u obliku kratkih bočnih grančica. Konidije se formiraju grupimično, rjeđe pojedinačno. Konidije su trokutaste, jajolike ili okrugle, veličine 3-8 × 1 μm. Kroz neko vrijeme u kulturi se pojavljuju peritecji smeđe boje, promjera 85-220 μm. Periteciji su utisnuti u supstrat. Na površini supstrata vidljivi su golim okom vratići peritecija, dužine 360-750 μm, promjera u bazi 19-21 μm, u sredini 12 μm i na vrhu 8-10 μm. Na vrhu vrata peritecija formiraju se kistići koji se sastoje od 10-15 nitastih resica dužine 18-40 μm. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 120 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Askusi su vidljivi samo u mladim peritecijima, kasnije se rastvaraju i vide se samo askospore. Askospore su jednostanične, bezbojne, lagano povinute, veličine 3,2-4×0.9 μm. Askospore izlaze iz vrata i na izlaznom otvoru gomilaju se u obliku kapljica. Gljive iz roda Ophiostoma pripadaju u parazitske gljive koje uzrokuju trulež žira i traheomikozu šumskog drveća ali isto tako pripadaju i saprofitskim gljivama koje uzrokuju plavilo drva. Slika 7.1. Ophiostoma roboris, periteciji na ljusci žira (× 7,5) Slika 7.2. Ophiostoma roboris, sive pjege na kotiledonima zrelog žira (× 7,5) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 121 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.3. Kultura Graphium roboris, konidijski stadij gljive O. roboris Slika 7.4. Graphium roboris, detalj, koremiji s mliječnim glavicama (× 7,5) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 122 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.5. Konidijski stadij Graphium roboris, koremiji iz kulture (× 100) Slika 7.6. Graphium roboris, konidije iz koremija (× 200) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 123 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.7. Ophiostoma roboris, vrat peritecija s cilijama na vrhu i askospore (× 200) Slika 7.8. Ophiostoma roboris, baza peritecija loptastog oblika (× 100) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 124 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.2. Chaetomium globosum Kunze Sin.: Chaetomium kunzeanum Zopf. Rod Chaetomium ima mnogo vrsta koje rastu u prirodi na biljnom materijalu, na sjemenu i plodovima. Chaetomium globosum je česta na žiru, bukvici i jeli, dolazi kao saprofit ili nekrotrofni parazit. Prema Kristeku i drugi, 1992., Urošević, 1979. je umjetnom inokulacijom sjemena smreke ustanovio da snižava klijavost za 5-10%, a bora 6-20%. Neke gljive iz roda Chaetomium imaju antagonistički učinak na druge patogene gljive produkcijom antibiotika. Gljiva Chaetomium globosum javlja se u periodu vegetacije, ali i nakon opadanja žira sa stabla u periodu sakupljanja. Poslije zimskog skladištenja žir može djelovanjem gljive istrunuti. U našim istraživanjima utvrđena je na nezrelom otpalom žiru (slika 7.9.). Na uskladištenom žiru nije nađena. Na površini sjemena gljiva razvija plodna tijela – peritecije. Peritecij je okruglastog do eliptičnog oblika, tamno-smeđe do crne boje i nema vrata (slike 7.10. i 7.11.). Prekriven je smeđim do crnim dlačicama koje mogu biti valovite i spiralne. Prema Brežnev i drugi, 1962. veličina peritecija iznosi 250-300 μm. Zajedno sa snopom dlačica promjer mu je 1 mm. Na vrhu peritecija nalazi se ostiola (okrugli otvar) kroz koji izlaze askospore. Askospore su jednostanične, limunastog oblika (slika 7.12.). Izlaze iz otvora na periteciju poput paste iz tube (Carlile, Watkinson, 1994.). Askus je buzdovanast i sadržava 8 askospora veličine, prema Brežnev i drugi, 1962., 11-13×8-9 μm. Širenju askospora pogoduje kiša. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 125 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.9. Kolonija gljive Chaetomium globosum na prerano otpalom žiru (× 7,5) Slika 7.10. Chaetomium globosum, periteciji, detalj Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 126 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.11. Chaetomium globosum, peritecij s dlačicama (× 100) Slika 7.12. Chaetomium globosum, askospore (× 400) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 127 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.3. Ciboria batschiana (Zopf) Buchw. Sin.: Sclerotinia pseudotuberosa Rehm. Stromatinia pseudotuberosa (Rehm.) Boud. Ova gljiva izaziva oboljenje poznato pod imenom mumifikacija žira (G. Dorogin, 1914.) i siva plijesan (H. G. Baranej, 1938.). R. Volkov je 1952. godine (u Brežnev i drugi, 1962.) ovu gljivu svrstao u rod Stromatinia jer formira sklerocije iz spleta tkiva žira i gljivice i ima konidijski stadij Monilia. Ovo oboljenje primijećeno je prvi puta na uzorcima skladištenog žira iz uroda 1995. g. sakupljenog u Velikom Grđevcu. Žir se može zaraziti u vrijeme vegetacije. Bolest je najčešća na mjestima uskladištenja gdje se vrlo brzo širi. Pri povišenoj vlažnosti micelij gljive zahvaća čitavu partiju žira koja se nalazi u skladištu jer se gljiva lako širi sa bolesnih na zdrave žirove. Kao rezultat životne aktivnosti gljive žir potpuno gubi klijavost. Gljiva se ubraja u specijalizirane parazite i napada zdravo sjeme i u nekrotrofne parazite jer prvo uništi biljne stanice, a zatim crpi hranu. U početku oboljenja na kotiledonima se formiraju male, žute pjege s oštrim rubovima smeđe boje (slika 7.13.), kasnije se pjege stapaju, a žir poprima smeđe-maslinastu do crnu boju. Kotiledoni na vlazi jako nabujaju i formiraju sklerocij crne boje i spužvaste su strukture (slika 7.14.). Na površini mumificiranog žira stvara se gusti smeđe crni baršunasti ili vatasti micelij. Ljuska žira puca, nastaju pukotine, a zatim se ljuska odvaja od kotiledona. Zaraženi otpali žir koji zimuje ispod listinca ili u skladištu prorasta sklerocij i slijedeće godine iz njega se formiraju apoteciji, od jedan do tri. Apoteciji su na stapkama dužine 2 do 7 cm. Dužina stapke ovisi od dubine na kojoj se nalazi žir ispod listinca. Unutar apotecija formira se himenij koji sadrži gusti zbijeni sloj askusa s parafizama. Rasijavanje askospora i zaraza zbiva se u jesen u peridu sazrijevanja i opadanja novog žira. Razvoju bolesti pogoduju kišni periodi. Micelij gljive dobro se razvija na hranjivom supstratu PDA. Na hranjivoj podlozi formira pahuljastu sivu koloniju s bijelim rubom koja s vremenom potamni (slika 7.15.). Hife se šestog dana uzdižu i grupiraju da bi se nakon dva tjedna od grupiranih hifa započeli formirati sklerociji. Nakon tri tjedna formirani su sklerociji (slike 7.16. i 7.17.). Prema podacima u Brežnev i drugi, 1962. sedmog dana pojavljuju se zadebljani i razgranjeni konidiofori na kojima se formiraju okrugle konidije koje predstavljaju konidijski stadij tipa Monilia. Prilikom obnavljanja kulture gljive suhim micelijem uzetim sa mumificiranog žira (čuvanog u petrijevoj zdjelici godinu dana u suhim uvjetima na sobnoj temperaturi) očitovala se Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 128 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA velika otpornost i dugotrajna životna sposobnost gljive kao i njena agresivnost i veliki potencijal zaraze. Micelij stavljen na PDA hranjivu podlogu brzo se aktivirao i za sedam dana prerastao cijelu površinu agara. Delatour, 1984. je promatrao žir zaražen gljivom Ciboria batschiana, ostavljen u šumi u periodu od 1974. do 1983. godine. Ustanovio je da je gljiva svake godine proizvodila apotecije na mumificiranom žiru i kao takva predstavljala izvor zaraze za novi otpali žir. Razmak između dviju rodnih godina sastojine ne predstavlja zapreku za ponovnu infekciju. Prema našim opažanjima zaraženost žira ovom gljivom bila je velika, posebno nakon skladištenja. Gotovo su svi uzorci analiziranog žira bili zaraženi. Zbog mogućnosti brzog širenja zaraze preporučuje se u vrijeme sazrijevanja i opadanja žira njegovo sabiranje u kratkom roku, pravilno uskladištenje i prethodno tretiranje fungicidom. Slika 7.13. Ciboria batschiana, početni simptomi oboljenja, žute obrubljene pjege na kotiledonima Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 129 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.14. Ciboria batschiana, žir prorašten hifama gljive i prekriven smeđe-crnim micelijem Slika 7.15. Ciboria batschiana, kultura gljive na PDA stara 3 dana Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 130 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.16. Ciboria batschiana, kultura gljive stara 21 dan, formiraju se sklerociji, agar je crno obojen Slika 7.17. Ciboria batschiana, sklerociji (× 7,5) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 131 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.4. Stereum hirsutum (Willd) Pers. Sin.: Telephora hirsuta Willd. Corticium subzonatum Fries. Gljiva se često nalazi na drvu raznih listača, na otpalim granama, panjevima i na deblu. Može zaraziti i žir. Nalazili smo je na uskladištenom žiru kao i na zrelom žiru sakupljenom s tla. Gljiva se razvija između unutarnje i vanjske ljuske žira. Površina ljuske mijenja boju u svijetlo žutu, a na prerezu je tamno smeđa (slika 7.19.). Gljiva prodire u žir i na kotiledonima formira svijetlo smeđu prevlaku koja se sastoji od hifa. Plodno tijelo je kožasto i tvrdo, ima oblik pločica čiji krajevi se kroz neko vrijeme uzdignu; pričvršćeno je bokom ili priliježe stvarajući raspoređene klobuke (slika 7.18.). Gornja površina plodnog tijela je gusto dlakava, s koncentričnim prugama, bijele, sive ili svijetlo narančasto-smeđe boje. Himenijalni sloj je gladak i sastoji se samo od bazidija; u svježem je stanju narančast, a u suhom crvenkastosmeđ. Bazidiospore su cilindrične sa zaobljenim krajevima, veličine 6-8×2,5-3 nm, glatke su i vrlo izmjenjive po obliku i boji. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 132 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.18. Plodište gljive Stereum hirsutum na žiru Slika 7.19. Formiranje gljive Stereum hirsutum ispod ljuske žira Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 133 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.5. Schizophyllum commune Fries. Sin.: Schizophyllum commune Fr. v. multifidum Masee. Schizophyllum alneum Schr. Ova gljiva se često nalazi u šumi na mrtvom drvetu, na otpalim i suhim granama, na panjevima i kao takva predstavlja izvor infekcije. Može se naseliti i na hrastovom žiru. U našim istraživanjima nalazili smo je na zrelom žiru u šumi i na uskladištenom žiru. Na kotiledonima djelovanjem gljive nastaju smeđe pjege koje se prekrivaju gustim slojem bijelog samtastog micelija. Hife mogu prekriti cijelu površinu kotiledona. Uslijed pritiska, zbog rasta gljive, na površini žira često se javljaju pukotine. Gljiva razvija razgranjenje nepravilne forme, bjelkaste ili roskaste boje. Iz tih formacija nastaje klobuk koji je gibak i kožast (slika 7.20.). S gornje strane klobuk je naboran ili prekriven svijetlo sivim pahuljicama koje se sastoje od spleta hifa micelija. Himenijalni sloj sastoji se od radijalno raspoređenih lamela. Lamele su lepezaste, uzdužno razgranjene sa zavrnutim rubom, kožaste i ljubičasto smeđe. Klobuk se postepeno spuša s ekscentrične ili bočne, rijetko centralne stapke ili sjedi sasvim bez stapke, raspoređen po supstratu. Plodna tijela se formiraju u zimsko i proljetno vrijeme, a mogu se naći i na uskladištenom žiru. Djelovanje gljive na žiru se može različito ispoljiti: 1. gljiva se može razrasti pod ljuskom i formirati micelij. Rezultat toga je nadizanje ljuske i nepravilno raspucavanje. Kod povišene vlažnosti ljuska žira može puknuti uzdužno na nekoliko mjesta razotkrivajući kotiledone; 2. djelovanjem gljive može doći do razgradnje kotiledona. Na površini žira tada se formiraju tamnosmeđe pjege koje su duboko prožete hifama. Na prerezu takvi kotiledoni imaju narušenu strukturu; 3. na kotiledonima s narušenom strukturom mogu se formirati plodna tijela, raspoređena pojedinačno ili u grupama. Na jednom žiru može se formirati i više klobuka. Gljiva može naći na žiru kao parazit ili kao saprofit. Na mrtvim kotiledonima plodišta se brže razvijaju na nego na živim. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 134 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.20. Plodno tijelo gljive Schizophyllum commune formirano na uskladištenom žiru Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 135 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.6. Penicillium spp. Gljive iz roda Penicillium sreću se prilično često na žiru. Penicillium-i su uobičajene, kozmopolitske gljive, njihove konidije se nalaze svuda u zraku i u tlu i lako se šire. Penicillium spp. dolaze na najrazličitijim organskim supstratima, sjemenju, plodovima, tlu. Dolazi i na žiru. Zaraza se javlja na svim dijelovima žira, a kao rezultat životne aktivnosti gljive je gubitak klijavosti žira. Oboljenje se ispoljava pojavom pjega, koje su prekrite prevlakom koja je često plavo-zelene boje i sastoji se od hifa i konidija. Micelij raste i prodire u unutarnje tkivo kotiledona. Na granici pjege i živog tkiva zapaža se uska smeđa zona. Plod s vremenom poprima svijetlo smeđu boju i spužvastu strukturu. Određivanje vrsta iz roda Penicillium obavlja se u čistoj kulturi na podlozi krumpir-dekstroza agaru pet do šest dana nakon nasađivanja. Micelij stvara jednostavne, duge, uspravne konidiofore, koji se granaju u blizini vrha, u karakteristične simetrične ili asimetrične metličaste oblike. Tako formirani konidiofori dobili su naziv penicullus što znači mali kist i po toj karakterističnoj strukturi se prepoznaje rod Penicillium. Višestruko grananje konidiofora završava u grupama sterigmi (fialida) koje nose duge konidijske lance (Alexopoulos, 1962.). Grananje je važna karakteristika za prepoznavanje vrsta iz roda Penicillium. Jedne su nerazgranjene i nose grupicu fialida na vrhu. Druge su jednostruko razgranjene (čine jedan niz sterigmi) i svaka grana nosi grupicu fialida. Treće se dvostruko granaju (čine dva niza sterigmi) i svaka grana nosi grupicu fialida. Ta tri tipa grananja nazvana su: monoverticilarni, biverticilarni i triverticilarni tip (ili tipični, jednopršljenasti i dvopršljenasti tip). Konidije, takozvane fialospore, su okrugle ili jajolike, pod mikroskopom nalikuju staklenim kuglicama, jednostanične su, bezbojne, u masi svijetlo obojane. Konidije se tvore u bazipetalnom lancu iz vrha fialida što znači da je najmlađa spora na bazi lanca. Vrste gljiva iz roda Penicillium pojavljuju se na mehanički oštećenom sjemenu, na sjemenu smanjene životne aktivnosti i sa sniženom vlagom, na uskladištenom sjemenu ali može se naći i na žiru normalne kao i povećane vlažnosti. Većina vrsta iz roda Penicillium spada u tipične saprofite, zastupnike sekundarne mikoflore, ali neke vrste imaju patogena svojstva i smanjuju klijavost sjemena (Kristek i drugi, 1992.). U pokusima umjetne infekcije smreke i bora, smanjuju klijavost sjemena od 5-20%. U literaturi se spominje veliki broj Penicillium vrsta na žiru hrasta lužnjaka. Brežnjev et al, 1962. spominju, između ostalih, slijedeće vrste: P. cyclopium Westl., P. granulatum Bain., P. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 136 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA claviforme Bain., P. italicum Wehm., P. expansum Link., P. flavo-glaucum Biourge, P. divergens Bain et Sart., P. martensii Boiur., P. flavum Masch., P. luteum Zukal, P. luteo-viride Biour., P. roseum Link. Najčešće vrste koje smo nalazili u našim uzorcima su: P. divergens Bain et Sart., P. expansum Link., P. flavum March. i P. luteo-viride Biour. Penicillium divergens Bain. et Sart. Sin.: P. glandicola (Oud.) Seifert et Samson Na žiru stvara sjajne crveno-smeđe pjege na kojima se formira kolonija plavo-zelene boje (slika 7.21.). Kultura na krumpirovom agaru je u početku bijele boje, a zatim sa starošću postaje plavo-zelena (slika 7.22.). Na površini kolonije stvaraju se bezbojne kapljice koje s vremenom nestaju (slika 7.23.). Hife i konidiofori se sjedinjuju u snopove ili koremije. U kulturi prevladavaju koremiji dužine 5 i više mm. Kistići imaju priljubljene grane. Pigmentacija agara djelovanjem gljive je tamno žuta. Gljiva P. divergens može se naći na žiru normalne i povećane vlažnosti (Kristek i drugi, 1992.). P. divergens ima patogena svojstva i snižava klijavost sjemena (Urošević 1979. u Kristek i drugi, 1992.). Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 137 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.21. Kolonija Penicillium divergens na žiru, vide se dugački koremiji Slika 7.22. Kultura Penicillium divergens izolirana sa žira Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 138 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.23. Penicilium divergens, na površini kolonije starosti 5 dana vide se bezbojne kapljice Penicillium expansum Link ex F. S. Gray Sin.: Coremium glaucum Link P. glaucum Link Plijesan formira na plodu svijetlo do žuto-smeđe vlažne površine. Kolonije su u početku bijele, ubrzo postaju žuto-zelene do sivo-zelene, s radijalnom zonacijom i naborima. Rub kolonije mladog micelija je limunaste boje. U kolonijama se razvijaju konidiofori koji mogu biti pojedinačni, grupirani u kiticu ili razvijaju zasebne koremije. Kistići (konidijalne glavice) se sastoje od metula i fialida, nesimetrični su i jednostruko ili dvostruko razgranjene, nose lanac konidija. Konidije su bezbojne do žućkasto-smeđe, eliptične, veličine 4-5×2,5-3,5 μm (prema C. M. I. Descriptions No. 97). Kad konidije dozriju površina kolonije poprima praškastu strukturu. Penicillium flavum March. Kolonije su žute boje, baršunaste, u sredini dobivaju pamučastu strukturu. Kistići su uspravni, nesimetrični, s dva ili češće tri pršljena. Konidije su malo produžene, veličine, prema Brežnev i drugi, 1962., 4,2-6×3-4 μm. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 139 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Penicillium luteo-viride Biour. Kolonije su ravne, pustenaste, modro-zelene do maslinasto-zelene boje s uskim žućkastim rubom (slike 7.24. i 7.25.). Konidiofori su glatki i kratki. Kistići su simetrični i dvopršljenasti. Konidije su eliptične, veličine, prema Brežnev i drugi, 2,5-4×2-3,2 μm. Slika 7.24. Kolonija Penicillium luteo-viride na žiru oštećenom od insekata Slika 7.25. Izolirana kultura gljive Penicillium luteo-viride na PDA (krumpir dekstroza agar) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 140 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.7. Verticillium spp. Verticilium vrste dolaze na sjemenu listača pa tako i na hrastovom žiru. Njihovom razvoju pogoduju vlažni uvjeti sredine. Gljiva u početku razvija bijeli a kasnije maslinasti micelij. Rast gljive je ograničen i uz samu površinu sjemena. Na istom sjemenu može rasti više vrsta iz roda Verticillium, one su veoma slične i identifikacija je teška te se provodi primjenom posebnih tehnika. Prema Brežnev i drugi, 1962. na žiru dolaze slijedeće vrste: V. candelabrum Bonard. u momentu sakupljanja i u skladištu, V. epimyces Berk. et Br. u periodu vegetacije, zatim V. minutissimum Corda i V. sphaeroideum Sacc. te Verticilium spp. na sjemenu koje opada i na skladištenom sjemenu. Prema Kristek i drugi, 1992. na žiru se javljaju vrste: V. alboatrum Rke. et. Berth, V. lateritium Berk., V. tenuissimum Corda i V. sphaeroideum Sacc. Urošević, 1979. u Kristek i drugi, 1992. je dokazao u pokusu umjetne infekcije da Verticilium izolat s bukvice snižava klijavost sjemena 14%. U prirodi i biljnoj patologiji najveće značenje ima gljiva V. alboatrum koja unutar stanica napadnutog domaćina razvija tamno-smeđe hife i može formirati mikrosklerocije. Konidiofori se pršljenasto granaju i obično ima 3-5 pršljena. Konidije su bezbojne, veličina im je (prema Brežnev i drugi, 1962.) 5-6×2,3 μm a prema Filipov i drugi, 1980. iznosi 2,8-8,5×1,4-4,2 μm. Verticilium vrste razvijaju malo micelija. Konidiofori su im tanki, bezbojni, jednostavni ili razgranjeni, formiraju se slobodno na površini supstrata. Gljive iz roda Verticilium karakterizira pršljenasto razgranjenje konidionosnih stanica (Popkova, 1989.) (slika 7.26.). Vjenčić fialida se većinom razdvoji pod stakalcem prilikom mikroskopiranja. Na vrhu fialida formiraju se konidije koje dolaze pojedinačno ili u malim vlažnim hrpicama koje imaju izgled malih, bezbojnih, loptastih vodenih kapljica. Konidije su jajolike do elipsoidne, bezbojne, jednostanične, rijetko imaju jednu septu (Barnett, Hunter, 1972.) (slika 7.27.). Osim konidija proizvode i odmarajuće strukture (mikrosklerocije, hlamidospore i tamne debelostijene hife) koje služe za preživljavanje u nepovoljnim uvjetima (Kiraly, 1970.). Gljive iz roda Verticillium mogu živjeti kao saprofiti na sjemenu, biljnim ostacima, u tlu i kao nekrotrofni paraziti. Ujedno su i patogeni koji uzrokuju venuće biljaka ulaskom u stanice provodnog sistema – traheomikozu odnosno verticilozu. Zaraza sa sjemena može prijeći na klijance i mladu biljku, preko sjemena gljiva se može zadržati u tlu. Preživljavanje i saprofitski rast gljiva u tlu je važan problem, posebno s epidemiološke strane gledanja jer sklerocije mogu nakon dugo vremena mirovanja formirati nekoliko konidija, pod povoljnim uvjetima, što je dovoljno da iniciraju infekciju (Kiraly, 1970.). Venuće biljaka mogu uzrokovati više vrsta a najraširenija je V. alboatrum. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 141 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Kolonije gljiva iz roda Verticillium u našim istraživanjima nađene su na žiru u ranom stadiju razvoja tj. na nerazvijenom žiru. Možda su bile prisutne i na zrelom žiru ali zbog slabog micelija nisu došle do izražaja jer su ih prerasle druge gljive. Slika 7.26. Verticillium albo-atrum, iz čiste kulture A i B konidiofori, C – konidije, (Barnett, Hunter, 1972.) Slika 7.27. Verticillium spp., konidije (100×) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 142 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.8. Trichoderma viride Pers. Sin.: Trichoderma lignorum (Tode) Harz Trichoderma glaucum Abbott Gljiva iz roda Trichoderma može se naći na sjemenu i plodovima različitih vrsta šumskog drveća pa tako i na hrastovom žiru. Često se nalazi na raspadajućem drvnom materijalu i u različitim tlima. Ubraja se u saprofite i nekrotrofne parazite. T. viride na zaraženom sjemenu razvija bijele, zelene ili žućkaste micelarne prevlake sporulirajućih filamenata ili konidiofora (slika 7.28.). Konidiofori su bezbojni, jako razgranjeni, proizvode bočne grane koje nose kratke fialide. Fialide rastu pojedinačno ili u grupi i iz njihovih vrhova se proizvode konidije (fialospore) i skupljaju se u hrpici koju čini 10-20 konidija. Konidije su bezbojne, jednostanične, okruglaste do jajolike, veličine (prema Brežnev i drugi, 1962.) 2,5-4 μm (slike 7.31. i 7.32.). Konidije su u masi tamnozelene boje. Za T. viride je karakterističan brzi rast kolonije. Optimalna temperatura za rast iznosi oko 25 °C. Kolonija na PDA podlozi proizvede radijus od 8 do 33 mm za vrijeme od 48 sati a na 30 °C 18 do 32 mm. Kolonija raste u koncentričnim krugovima, naizmjenično bijelim i zelenim, s obzirom na noćni i dnevni ritam (slika 7.29.). Kolonija u tami formira bijeli micelij na površini agara bez konidija tj. formira vegetativni micelij (Samuels i drugi, 1999.). Za formaciju reproduktivnih struktura i produkciju spora potrebno joj je svjetlo (More-Landecker, 1972.). Jastučići konidija obično se formiraju na rubovima koncentričnih krugova (slika 7.30.). Vrste iz roda T. su antagonisti s drugim gljivama koje ubijaju toksinima i konzumiraju upotrebom kombinacije encima. Zbog tog antagonističkog svojstva upotrebljavaju se u biološkoj kontroli gljivičnih biljnih bolesti. Gljivu T. viride nalazili smo često na nerazvijenom, prerano otpalom žiru ali i na uskladištenom žiru. Prema Urošević u Kristek i drugi, 1992. u pokusu inokulacije ustanovljeno je da snižava klijavost sjemena smreke i bora 13-17%. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 143 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.28. Žir zaražen gljivom Trichoderma viride Slika 7.29. Kultura gljive Trichoderma viride, vide se koncentrični krugovi bijelog i zelenog micelija s obzirom na noćni i dnevni rast Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 144 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.30. Trichoderma viride, žućkasti jastučići sporulirajućih konidiofora (× 7,5) Slika 7.31. Trichoderma viride, konidije (× 200) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 145 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.32. Trichoderma viride, konidije (× 400) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 146 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.9. Trichothecium roseum Link. Sin.: Puccinia rosea Corda. Cephalothecium candidum Bonard. Dactylium roseum Berk. Zaraza ovom gljivom javlja se na žiru, u krošnji drveća, od njegovog razvoja do punog sazrijevanja. Gljiva zarazi peteljku i zatim žir i uzrokuje njegovo prijevremeno opadanje. Osim toga zaraza se javlja i na otpalom zrelom žiru. Veoma često se nalazi na uskladištenom žiru gdje se veoma lako širi i prelazi sa sjemena na sjeme. Osim na žiru česta je i na drugim vrstama šumskog sjemena (bukvica, lijeska, jela). Snižava klijavost sjemena smreke i bora 15-20%. U početnim fazama oboljenja na kotiledonima se pojavljuju crne pjege, bez sjaja, oštro ograničene. Gljiva na sjemenu formira praškasto rasprostrte busenove ružičasto-narančaste boje. Micelij se rasprostire površinom ali je slabo razvijen. Na PDA podlozi kolonija je roskasto narančasta, pahuljasta dok je mlada a sa starošću postaje praškasta (slika 7.33.). Konidiofori su višestanični, uspravni, nerazgranjeni, promjera 3-3,6 μm. Konidije dvostanične, jajolike ili elipsoidne, bilateralno simetrične, bezbojne, u masi roskaste, veličine 10,8-18 × 7-8 μm (slika 7.34.). Konidije se formiraju na vrhu konidiofora pojedinačno, u grupici ili u lancu. Na vrhu konidiofora formira se konidija, konidiofor nastavlja rasti i formira slijedeću konidiju. Na taj način, sukcesivnim rastom, formira se klasić u kojem sjede mnogobrojne u nizu raspoređene konidije. Najmlađa konidija je na bazi lanca i uvijek je spojena pod kosim kutom. Zbog svoje uočljive i karakteristične boje lako se prepoznaje. Ona je jedna od najraširenijih gljiva, dolazi na žiru kao saprofit i parazit. Lenti 1990. proučavao je ulogu ovog fakultativnog parazita u procesu klijanja sjemena Vicia faba L. (bob) i ustanovio je da je gljiva inhibirala klijanje. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 147 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.33. Trichothecium roseum, kultura gljive na PDA, praškasta kolonija – stara 5 tjedana i pahuljasta – stara 3 dana) Slika 7.34. Trichothecium roseum, konidije (× 400) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 148 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.10. Aspergillus spp. Gljive iz roda Aspergillus dolaze na površini i unutar šumskih plodova. Na površini inficiranog ploda gljiva stvara kolonije koje su, ovisno o vrsti, različito obojene od svijetlo žute, tamno žute, zelene do smeđe. Rod Aspergillus prepoznatljiv je po karakterističnim konidioforama koja se sastoji od nožice i vršnog dijela oblika glavice koja nosi bocaste fialide. Ovisno o vrsti fijalide se mogu formirati direktno na glavici ili nastaju na međurednim sterigmama (metulama). Konidije se stvaraju u dugim lancima iz kraja fialida. Osim na sjemenu nalazi se i u tlu i biljnim ostacima. Često ih nalazimo na uskladištenom sjemenu, ali i na nezrelom otpalom žiru. Od predstavnika vrsta iz roda Aspergillus na žiru se spominju, prema Brežnev i drugi, (1962.), slijedeće vrste: A. glaucus Link, A. niger Tiegh., A. ochraceus Wilh. i A. wentii Wehm. Kod nas su utvrđene vrste A. glaucus i A. ochraceus. Aspergillus glaucus Link Sin.: Monilia glauca Pers. Mucor glaucus L. Savršeni stadij: Eurotium herbariorum Link. Žir zaražen ovom gljivom ima suhe, smežurane kotiledone s čvrsto priležećom ljuskom i sjemenom opnom. Micelij je u početku bijel, a kroz neko vrijeme požuti. Kolonije imaju boju zelenih tonova no ponekad prevladavaju žuto-narančasti pigmenti. Prema Brežnev i drugi, (1962.) na fialidama se razvijaju eliptične konidije veličine 6,6-7,9×9,411,0 μm. Konidije su jednostanične i stoje u suhom bazipetalnom lancu. Prema istom autoru oboljenje se javlja u vrijeme opadanja i sabiranja žira. Mi smo nalazili simptome ovog oboljenja na nezrelom otpalom žiru. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 149 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Aspergillus ochraceus Wilh. Ova vrsta stvara konidijske glavice oker boje (slike 7.35. i 7.36.). Stapka konidiofora je hrapava. Konidiofori su žućkaste boje, dužina im je 15 μm. Prema Brežnev i drugi, (1962.) sterigme su većinom dvoredne Prve sterigme su septirana, duge 70 μm, a druge sterigme su dugačke 10-12 μm. Konidije su okrugle i na površini malo neravne, veličine 3,5-4,5 μm (slika 7.38.). Nezrele konidijske glavice su bijele do žućkaste, a zrele su oker boje (slika 7.37.). Gljiva je nađena na skladištenom zrelom žiru. Gljive iz roda Aspergillus indiciraju smanjenu količinu vode u sjemenu. Ubrajaju se u slabe patogene i utječu na smanjenje klijavosti sjemena te s gospodarskog gledišta nisu zanemarive. Slika 7.35. Kolonija Aspergillus ochraceus na žiru (× 7,5) Slika 7.36. Aspergillus ochraceus, konidiofori i konidijalne glavice, detalj Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 150 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.37. Aspergillus ochraceus na PDA, nezrele i zrele konidijalne glavice (× 7,5) Slika 7.38. Konidije Aspergillus ochraceus (× 400) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 151 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.11. Alternaria tenuis Nees. Sin.: Alternaria alternata (Fr.) Kisler Gljiva Alternaria alternata (Fr.) Kisler je često prisutna na šumskom sjemenu. Oboljenje uzrokovano ovom gljivom javlja se u periodu vegetacije, u periodu sazrijevanja žira i njegovog opadanja. Napadnuti žir prekriven je prevlakom sivo zelene do tamno maslinaste boje (slika 7.39.). Na hranjivoj podlozi, na temperaturi 25 °C, kolonije su tamno smeđe maslinaste boje gotovo crne su na nižim temperaturama 13-15 °C izrazito maslinaste boje (slika 7.40.) (prema vlastitim istraživanjima). Konidiofore su tamne, jednostavne, kratke, rjeđe dugačke, nose jednostavan ili razgranjen lanac konidija. Konidije su tamne, višestanične s poprečnim, uzdužnim i kosim septama, različito oblikovane (bocaste, obrnutobuzdovanaste, eliptične, jajolike, loptaste, slike 7.39. i 7.40.). Često se formiraju u dugim lancima, a rjeđe dolaze pojedinačno. Nove spore se produciraju na vrhu prethodne spore – akropetalno (Barnett i Hunter, 1972.). Kljunovi (vršni dio konidija) također variraju, mogu biti kratki do dugi, često su iste boje kao konidija ili nešto svjetliji, 2-19 μm dugi (Mathur i Kongsdal, 2002.). Veličina spora prema Neergaardu (1945.) u Mathur i Kongsdal, (2002.), iznosi 10-58×7-19 μm. Prema Brežnev i drugi, (1962.) veličina spora je 32×8-16 μ, a prema Ellis, (1972.) 20-63 μ × 9-18 (13) μm. Na biljnom materijalu gljiva može boraviti kao saprofit ili kao parazit. Prema Kristek i drugi, (1992.), Alternaria alternata je i nekrotrofni parazit koji može biti veoma agresivan. Prilikom umjetne infekcije sjemena smreke snižava klijavost do 10%. Gljiva je naročito štetna u uvjetima veće vlažnosti zraka, povećane vlage i smanjene vitalnosti sjemena. U skladišnim uvjetima lako se prenosi s bolesnog na zdravo sjeme. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 152 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.39. Alternaria alternata, konidije (× 200) Slika 7.40. Alternaria alternata, konidije (bocaste, eliptične, jajolike) (× 400) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 153 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.12. Botrytis cinerea Pers. Sin.: Botrytis vulgaris Link. Monilia vulgaris Pers. Savršeni stadij: Botryotinia fuckeliana (de Bary) Whetzel Sclerotinia fuckeliana (de Bary) Fuckel Botrytis spp. dolazi kao parazit ili kao saprofit, uzrokujući sivu plijesan na mnogim biljnim vrstama. U našim istraživanjima gljiva je nalažena u ranijim stadijima razvoja žira ali i na zrelom i uskladištenom žiru. Zaraženi žir pokriven je gustim, u početku blijedo sivim, a kasnije tamno sivim micelijem (slika 7.41.). Gljiva je sposobna duboko prodrijeti u plod, a zatim razviti gustu pustenastu prevlaku na površini. Ozljede su žuto-smeđe ili smeđe, vlažne, a kad se osuše posive. Na hranjivoj podlozi stvara sivkasto-maslinastu koloniju. Konidiofore su duge, tanke, bezbojne ili pigmentirane, razgranjene, ponekad dihotomno u blizini vrha. Vršne stanice su povećane ili okruglaste i nose hrpicu konidija na kratkim sterigmama. Konidije su bezbojne ili pepeljaste, u masi su sive, jednostanične, jajolike. Prema Brežnev i drugi, 1962. veličine konidija iznose 8,8-9,1×5-6,5 μm (slika 7.42.). Konidije se prenose zrakom ili na površini kišne kapljice. Za vrijeme vlažnog vremena sporulacija je obilna. Često proizvodi nepravilne sklerocije različitih oblika i veličina. Sklerocije su crne boje, veličine 0,2-0,5 mm i sliuže za preživljavanje u nepovoljnim uvjetima (Kristek i drugi, 1992.). Osim u vidu sklerocija, gljiva prezimljuje i kao micelij na ostacima biljnog materijala ili u obliku spora ili micelija u sjemenu. U povoljnim uvjetima iz sklerocija izrasta sivi vatasti micelij s mnoštvom konidija. Pri umjetnoj infekciji sjemena bora smanjuje klijavost do 21% (Urošević u Kristek i drugi, 1992.). S obzirom na prisutnost na uskladištenom sjemenu, njen značaj za šumsko gospodarstvo nije zanemariv. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 154 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.41. Žir zaražen gljivom Botrytis cinerea (prema Prochazkova u Kristek i drugi, 1992.) Slika 7.42. Botritys cinerea, konidiofori i konidije (× 100) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 155 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.13. Fusella olivacea (Corda.) Sacc. Gljiva dolazi na žiru hrasta, na njegovoj površini u obliku zeleno-crnih hrpica konidija bez micelija (slika 7.43.). Nađena je na žiru slavonskog hrasta (Prochazkova u Kristek i drugi, 1992.). Zanimljiva je kao pojava ali je bez gospodarskog značaja. Detaljniji opisi gljive nisu nađeni u dostupnoj literaturi niti na web stranicama. Zaraza ovom gljivom najčešće je zabilježena na nezrelom žiru. Slika 7.43. Fusella olivacea, 1: kolonija gljive na površini žira, 2: konidije (Prochazkova u Kristek i drugi, 1992.) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 156 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.14. Stysanus stemonitis (Pers.) Corda Sin.: Periconia stemonitis Pers. Doratomyces stemonitis Pers. Gljiva je u prirodi dosta česta na biljnom materijalu, na sjemenu i plodovima listača (žir, jasen, javor, grab). Na površini zaraženog sjemena formira crno-smeđe koremije visoke 1,6 mm. Hife su tamne cilindrične do kijačaste. Konidiofore su tamne, pojedinačne ili spojene u sinematu (koremij) s gustim glavicama sporogenoznih stanica i lanaca konidija (slika 7.44.). Gornji dijelovi konidiofora su granati i na vrhovima stvaraju masu suhih spora na sporogenoznim stanicama. Konidije su bezbojne do većinom tamne, jednostanične i jajolike (slika 7.45.). Na žiru se javlja pojedinačno i uzrokuje njegovo prerano opadanje. Gljiva je slabi parazit ili saprofit. Lako se prepoznaje, dolazi na sjemenu ali njen gospodarski značaj je, prema Kristek i drugi, 1992., zanemariv. Slika 7.44. Stysanus stemonites, 1: koremiji na žiru, 2: koremij, konidiofore i konidije (iz Kristek i drugi, 1992.) Slika 7.45. Stysanus spp. A: koremij; B: konidiofori; C: konidije; (iz Barnett, Hunter, 1972.) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 157 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.15. Arthrobotrys spp. Arthrobotrys artrobotryoides (Berl.) Lind. Arthrobotrys superba Corda Od predstavnika vrsta iz roda Arthrobotrys, na sjemenu se najčešće nalaze vrste A. arthrobotryoides i A. superba. Ove vrste se mogu naći na sjemenu listača (hrast, lipa, bukva, javor, jasen i breza) kao i na sjemenu četinjača (smreka, obični bor i ariš). Inficirano sjeme i plodovi pokriveni su bijelom ili ružičasto-samtastom prevlakom micelija (slike 7.46. i 7.50.). Slična im je gljiva Trichothecium roseum Link. po svom svijetlo ružičastom do narančastom miceliju, koji je ipak više praškastog karaktera, kao i po obliku spora. Mikroskopski se obje vrste razlikuju rasporedom i formiranjem konidija. Kultura gljiva na PDA je bijela, gusta i baršunasta (slike 7.47. i 7.48.). Konidiofore roda Arthrobotrys su dugačke, tanke, jednostavne, septirane, lagano proširene na vrhu u području formiranja spora. Sporogene stanice nastavljaju rast simpodijalno nakon produkcije vršnih spora. Konidije su bezbojne, nejednoliko dvostanične, obrnuto jajolike, formirane na vrhu konidiofora, gdje su pričvršćene zupcima, u rahloj suhoj hrpici (Barnett, Hunter, 1972.), (slika 7.49.). Prochazkova u Kristek i drugi, 1992. spominje vrstu A. superba Corda var. oligospora (Fres.) Coemans na prerano otpalom žiru i A. superba Corda f. irregularis Matr. koju je u Češkoj Urošević, 1961. pojedinačno nalazio na žiru. Obično su vrste iz roda Arthrobotrys svrstane među saprofite ali kod umjetne infekcije sjemena smreke i običnog bora s vrstama A. arthrobotryoides i A. superba smanjena je klijavost sjemena smreka za 5-10%, a sjemena običnog bora za 10-15% (Urošević 1979. u Kristek i drugi, 1992.). Ove vrste se javljaju i na sjemenu smanjene životne aktivnosti kod dugotrajnog skladištenja i tada utječu na vitalnost sjemena (Kristek i drugi, 1992.). Mi smo nalazili navedne gljive iz roda Arthrobotrys najčešće u srpnju i kolovozu na prerano otpalom žiru i pojedinačno na uskladištenom žiru. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 158 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.46. Kolonija gljive Arthrobotrys arthrobotryoides na uskladištenom žiru Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 159 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.47. Kultura gljive Atrhbotrys arthrobotryoides na PDA (stara 5 dana) Slika 7.48. Kultura gljive Atrhrobotrys arthrobotryoides na PDA (stara 5 dana) s donje strane petri-zdjelice Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 160 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.49. Atrhrobotrys arthrobotryoides, konidiofor i konidije (× 200) Slika 7.50. Kolonija gljive Arthrobotrys superba na prerano otpalom žiru (× 7,5) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 161 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.16. Fusarium spp. Gljive iz roda Fusarium izazivaju propadanje mnogih biljaka. Prilagođene su parazitiranju na provodnom sistemu biljaka. Isto tako su značajne i kao uzročnici truleži žira i bolesti klijanaca. Žir se može zaraziti u vrijeme vegetacije, sabiranja i uskladištenja. Brežnev i drugi, (1962.) zapazio je da od brojnih vrsta iz roda Fusarium na žiru se u periodu vegetacije javljaju F. merismoides Corda, F. sarcochroum (Desm.) Sacc., F. semitectum Berk. et Rav. i F. scirpi Lamb. et Fautur. Djelovanjem gljive tkivo žira postaje smeđe, ljuska trune i plod opada. Žir u listincu predstavlja hranjiv supstrat za daljnji razvoj gljive. Isti autor je zapazio da se u periodu sabiranja i na mjestima skladištenja javljaju slijedeće vrste: F. avenaceum (Fr.) Sacc., F. sambucinum Fuck. i F. culmorum (W. G. Sm.) Sacc. Kod zaraze ovim vrstama žir je obavijen micelijem, tkivo žira duboko je prožeto hifama i mijenja boju u crvenu do purpurno crvenu, a rezultat zaraze je gubitak klijavosti žira. Prema iskustvima Prochazkova u Kristek i drugi, 1992. među brojnim vrstama koje napadaju sjeme i plodove najštetnije su F. oxysporum i F. moniliforme. Pri umjetnoj infekciji sjemena smreke i bora snižavaju klijavost do 40%. Rod Fusarium je veoma velik i varijabilan. Micelij je u kulturi prostran, gust i pamučast, često s ružičastim, tamnoljubičastim ili žutim tragovima boja u miceliju ili hranjivoj podlozi. Konidiofore su raznolike, mogu biti tanke i jednostavne ili debele i kratke, mogu biti nepravilno razgranjene ili mogu nositi vjenčić fialida, mogu stajati pojedinačno ili biti grupirane u sporodohij (jastučić). Konidije su bezbojne, promjenjive i mogu se nalaziti u želatinoznoj masi. Uglavnom postoje dvije vrste konidija: makrokonidije koje su višestanične i blago zavijene na krajevima te imaju oblik kanua i mikrokonidije koje su jednostanične, jajolike ili eliptične, nastale pojedinačno ili u lancima te konidije intermedijarne po osobinama koje su dvo ili tro stanične, eliptične ili lagano zakrivljene. Osim toga, tvori i hlamidospore čija uloga je preživljavanje gljive u nepovoljnim uvjetima i novi izvor zaraze. Nastaju na miceliju, unutar ili na vrhu hifa te u sklopu makrokomidija. Gljive ovog roda mogu se razvijati na biljnom materijalu kao paraziti ili kao saprofiti. Mnoge gljive iz roda Fusarium imaju perfektni stadij koji pripada porodici Nectriaceae (rodu Nectria, Calonectria, Hypomyces i Gibberella). U našim istraživanjima od gljiva iz roda Fusarium nađeno je više vrsta od kojih su prepoznatljive F. sambucinum, F. avenaceum, F. moniliforme i F. oxysporum. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 162 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Fusarium sambucinum Fuck. Sin.: Sphaeria pulicaris Fries Selenosporium sarcochroum Desm F. sarcochroum (Desm.) Sacc Savršeni stadij: Gibberella pulicaris (Fries) Sacc. Kultura Fusarium sambucinum na hranjivoj podlozi PDA je ružičaste boje, a sa starošću postaje krvavo crveno riđe boje (slika 7.53.). Brzina rasta je, u promjeru, 5,2 cm nakon 4 dana na temperaturi od 22-25 °C. Zračni micelij je čupav, bijel s tragovima ružičastog. Supstrat oboji purpurnom nijansom. Formira jednu vrstu konidija i to makrokonidije. Makrokonidije nastaju u početku iz prilično složenih konidiofora raspršenih u zračnom miceliju, a kasnije u sporodohijima ili pionotama. One su vretenaste, srpolike, s kratkom, suženom vršnom stanicom i jasno izraženom nožicom. Imaju tri do pet septi u zreloj dobi. Prema Booth, 1971. veličina makrokonidije s tri do četiri septi iznosi 30-45×4-5 μm, a s pet septi 40-55×5-5,5 μm. Prema Brežnev i drugi, 1962., veličina makrokonidija je 35-43×5-6 μm. Hlamidospore se rijetko formiraju, dolaze kao pojedinačne okrugle stanice ili u lancima, mogu biti interstanične i vršne ili unutar stanica makrokonidija. U odgovarajućim uvjetima razvit će se periteciji. U prirodi se formiraju na mrtvom otpalom drvu u stromama koje nastaju ispod periderme i izbijaju kroz površinu kore ili ljuske. F. sambucinum nalazili smo na nezrelom žiru s unutarnje strane kapice i na hilumu žira (slika 7.51.). Isto tako, nalazila se na zrelom otpalom žiru kao i na uskladištenom (slika 7.52.). Osim što izaziva trulež sjemena i plodova u skladištu, uzrokuje trulež korijena i venuće klijanaca te rak na šumskom drveću i kao takva ima gospodarsku i ekonomsku važnost. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 163 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.51. Micelij gljive F. sambucinum u kapici nezrelog žira Slika 7.52. Kolonija gljive F. sambucinum na protrulom žiru iz skladišta Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 164 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.53. Kultura gljive F. sambucinum izolirana sa žira Fusarium avenaceum (Corda ex Fr.) Sacc. Sin.: Fusiporium avenaceum Fr. Savršeni stadij: Giberrela avenacea Cook Gljiva može ekstremno varirati s obzirom na izgled i boju kulture. Najčešća boja kulture je boja breskve (roskasto bijela) (slika 7.54.), a dominantna pigmentacija s donje strane je crvena, maslinasto-žuta i tamna boja vina (slika 7.55.). Zračni micelij je u početku bijel, s vremenom u tragovima poprima boju breskve ili crveno-smeđu i postaje pustenast. U centralnom dijelu kultura postaje žuto-smeđa. Konidiofori nastaju u zračnom miceliju ili u sporodohijama odnosno pionotama. Pionote, masne – želatinozne nakupine (slika 7.56.), svijetlo narančaste do gotovo crvene boje, mogu u biti odsutne, isprekidane ili obilne. U njima se formiraju makrokonidije koje su u masi narančasto obojene. Makrokonidije su podjednake, vretenaste, savijene, s produženom vršnom stanicom i naznačenom stopalnom stanicom, imaju 4-7 septi. Njihova veličina iznosi 40-80×3,5-4 μm (Booth, 1972.). Schneider, (1958.) u Booth, (1972.), je utvrdio da veličina 5 septiranih konidija iznosi prosječno 48-74×2,9-4,3 μm, a ekstremne veličine su 31-90×2-5 μm. Varijabilnost F. avenaceum u kulturi reflektira se na morfologiju konidija. Prema Mathur, Kongsdal, 2002., veličina makrokonidija iznosi 28-72×2,5-4 μm. Prema Brežnjev i drugi, 1962., veličina makrokonidija iznosi 46-62 × 3-5 μm. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 165 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Peritecijski stadij, Gibberella avenacea, formira se iz malog površinskog čuperka micelija. U većini slučajeva iz jednog stromatskog jastučića razvije se samo jedan peritecij koji može biti nepravilno okrugao do kruškolik. Boja peritecija varira od tamno plave, jarko crvene do žućkasto smeđe. F. avenaceum je široko rasprostranjen i ima veliki krug domaćina. Osim što uzrokuje trulež korijena, uzrokuje bolest i polijeganje klijanaca u rasadniku, patogen je na sjemenu (kroz oštećenu ljusku sjemena prodire u kotiledone). Uglavnom se prenosi sjemenom, putem tla ili zrakom. U našim istraživanjima nalazili smo ovu gljivu na zrelom i uskladištenom žiru. Slika 7.54. Kultura gljive F. avenaceum, starosti 10 dana, bijeli vatasti micelij s tragovima roskaste boje Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 166 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.55. Kultura gljive F. avenaceum s donje strane, pigmentacija boje vina i žućkasto smeđa Slika 7.56. F. avenaceum, masne nakupine u kojima se formiranju makrokomidije Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 167 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Fusarium moniliforme Sheldon Savršeni stadij: Gibberella fujikuroi Sawada Kultura gljive je u početku rasta bezbojna i poput vela. S vremenom može poprimiti ljubičastu boju, ponekad svjetliju lila boju, poput vina ili čak kremastu (slika 7.57.). Zračni micelij je gust, nježno čupav do pustenast, bijele boje do boje vina s pojavom praha koji čine mikrokonidije. Mikrokonidije se formiraju u lancima, vretenastog do kijačastog su oblika, veličine, prema Booth, 1972., 5-12×1, 5-2,5 μm. Makrokonidije se rijetko formiraju, mogu nastati iz konidiofora formiranih bočno na hifama ili u sporodohiju odn. pionotama kao želatinozna masa koja sadrži mikro i makro konidije (slika 7.58.). Makrokonidije su vretenaste, nježne, tankostjene s lagano savijenom vršnom stanicom, s 3-7 septi, veličine, prema Booth, 1972., 25-60×2,5-4 μm. Hlamidospora nema. Zadebljale stromatske inicijalne stanice agregiraju u nepravilno okrugle sklerocije iz kojih se mogu formirati inicijali peritecija. Periteciji se obično razvijaju na mrtvom biljnom materijalu. F. moniliforme dolazi na širokom rasponu domaćina i može uzrokovati bolesti poput plijesan klijanaca, trulež baze stabljike, trulež korijena, truleži sjemena u skladišnim uvjetima, hipertrofije izbojaka i zaustavljanja rasta (giberelin). U našim ispitivanjima utvrđena je na skladištenom žiru. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 168 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.57. Fusarium moniliforme, kultura na PDA s formiranim pionotama (želatinoznim nakupinama) (× 7,5) Slika 7.58. Fusarium moniliforme, mikro i makro konidije (× 400) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 169 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Fusarium oxysporum Schlecht ex Fries Sin.: F. angustum Sherb. F. bostrycoides Wollenw. F. bulbigenum Cooke & Massee F. conglutinans Wollenw. F. orthoceras Appel & Wollenw. F. vasinfectum Atk. F. lini Bolley F. dianthi Prill. Fusarium oxysporum je jedna od najnestabilnijih i najpromjenjivijih vrsta što se može izraziti nizom morfoloških sojeva. Neko vrijeme bili su prikazani kao odvojene vrste dok se nije uvidjelo da selektivna patogenost nije povezana s morfološkim varijantama i tako su vrste reducirane na sinonime. Micelij je bijel ili boje breskve često s ljubičastim tragovima, rijedak do gust, čupav, vremenom postaje pustenast (slika. 7.59.). Prosječan rast kulture je 4,5 cm promjera za četiri dana na 25 °C. Mikrokonidije nastaju na jednostavnim fialidama koje se bočno uzdižu na hifama ili iz kratkih konidiofora. One mogu biti ovalne, elipsoidne, ravne do zakrivljene, veličine (prema Booth, 1972.) 5-12×2,2-3,5 μm. Makrokonidije se u nekim sojevima javljaju rijetko. Nastaju na granatim konidioforama na površini sporodohija. One su tankostjene, s 3-5 septi, vretenaste, sužene na vrhovima, savijene poput oštrice kose s lagano savijenom vršnom stanicom (slika 7.60.). Veličina prema Boothu, 1972., iznosi 27-66×3-5,5 μm. Najčešće su s tri septe veličine 27-46×3-4,5 μm. Hlamidospore dolaze terminalno ili unutar hifa, same ili u paru ili lancima. Sterilne stromatske pustule svijetlo do tamno ljubičaste stvaraju peritecije poput Gibberella. F. oxysporum je ekonomski najznačajnija gljiva iz roda Fusarium. Brojni sojevi ove vrste su opasni patogeni venuća. Dolazi i kao saprofit u tlu, nepovoljne uvjete preživljava kao micelij ili hlamidospora. Ova gljiva nađena je u našim istraživanjima na zrelom otpalom žiru i na žiru u skladištu. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 170 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.59. Fusarium oxysporum, kolonija izolirana sa žira Slika 7.60. Fusarium oxysporum, mikrokonidije i makrokonidije iz kulture (× 400) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 171 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.17. Pestalotia spp. Gljive iz roda Pestalotia često dolaze na sjemenu i plodovima pa tako i na žiru hrasta lužnjaka. Gljiva ulazi u žir, prorasta ga, a inficirani dijelovi postaju smeđi do tamno smeđi. Napada većinom oštećeno i oslabljelo sjeme i često dolazi u zajednici s drugim gljivama poput Phomopsis i Cytospora. Gljiva ima karakter veoma slabog parazita ili saprofita. U posebnim okolnostima može biti i fakultativni parazit. Ponekad može izazvati oboljenja traheomikoznog tipa. Neke vrste gljiva iz roda Pestalotia dolaze na hrastovom lišću odakle mogu prijeći na nedozreli žir. U našim istraživanjima nalazili smo gljive iz roda Pestalotia na dozrijevajućem i na zrelom žiru. To su vrste P. castagnei i P. funerea. Pestalotia castagnei Desm. Sin.: Robillardia glandicola Cast. Pestalotia glandicola (Cast.) Guba Na zaraženom žiru pojavljuju se pjege ili je žir prekriven bijelom prevlakom micelija. Na površini prevlake razbacane su grupe crnih raspuknutih loža (acervula), promjera 1-1,5 mm. Na hranjivoj podlozi PDA (krumpir dekstroza agar) formira se raširena, ravna, bijela kolonija na kojoj se razvijaju acervuli (slika 7.61.). Acervuli se formiraju na dobro razvijenom miceliju. Konidije su vretenaste, rjeđe buzdovanaste s 3-5 pregrada, srednje stanice su maslinasto obojene, krajnje su bezbojne, veličine 20-25×6-8 μm (prema Brežnev i drugi, 1962.). Od srednjih stanica konidije centralna je nešto tamnija (slika 7.62.). Na vrhu konidija nalaze se 2-3 jednostavne ili razgranjene, bezbojne resice (privjesci) dugački 26-30 μm. Javlja se na žiru u periodu uskladištenja kao i na oslabljelom žiru. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 172 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.61. Kultura gljive Pestalotia castagnei s formiranim acervulima Slika 7.62. Konidije gljive Pestalotia castagnei (× 200) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 173 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Pestalotia funerea Desm. Sin.: Pestalotia conigena Lev. Na PDA hranjivoj podlozi formira bijeli isprepleteni micelij. Micelij je gust, pamučast, valovit (slika 7.64.). Pigmentacija s donje strane je krem do svjetlo smeđe boje (slika 7.65.). Nakon sedam do deset dana počinju se formirati acervuli crne boje, poput polukuglastih do eliptičnih jastučića (slika 7.63.), koji su puni konidija. Konidije su elipsoidne, vretenaste ili buzdovanaste s 4 pregrade, veličina im je (prema Brežnjev i drugi, 1962.) 21-27×6-9 μm, srednje stanice su malo sužene na septama, prljavo maslinaste boje, od kojih je niža nešto svjetlija i sužena (slike 7.66. i 7.67.). Krajnje stanice konidija su bezbojne. Vršna stanica je uska i slabo primjetna, s 3 do 5, rijetko 6 resica (privjesaka) koje su najčešće nerazgranjene i ravne, duge 5-20 μm. Bazna stanica je bezbojna, produženo konična, s ravnom stapkom dugom 2-7 μm. Gljiva s vremenom stvara crne, savinute, tvrde, končaste strukture koje su pune konidija. Slika 7.63. Izolat gljive P. funerea na PDA (detalj) s formiranim plodnim tijelima acervulima Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 174 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.64. Kultura gljive P. funerea na PDA, stara 7 dana (gornja strana) Slika 7.65. Kultura gljive P. funerea na PDA, stara 7 dana (donja strana) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 175 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.66. P. funerea, konidije (× 200) Slika 7.67. P. funerea, konidije (× 400) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 176 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Osim ovih vrsta koje dolaze na žiru u literaturi (Brežnev i drugi, 1962. Prochazkova u Kristek i drugi, 1992.) spominju se P. gracilis Kleb., P. truncata Lev., P. hartigii Tubeuf. i P. quercina Guba. Od ovih se vrsta P. hartigii posebno naglašava jer može zaraziti klijance hrasta i izazvati oboljenje "usukanost vrata korijena". Gljiva je parazit slabosti (Kišpatić, 1974.) i zaraza se javlja nakon prethodnog oštećivanja tkiva biljke uslijed niskih temperatura ili suncožara. P. truncata je česta u prirodi na bukovim, hrastovim i topolovim grančicama te na sjemenu i plodovima, osobito na žiru (Glavaš, 1999.). Osim toga pri nicanju klijanaca može izazvati traheomikozno oboljenje (Kristek i drugi, 1992.). Ustanovljeno je da P. quercina, u pokusima umjetne infekcije snižava klijavost smrekova sjemena 20 do 35%, a P. glandicola i do 41%, a P. glandicola i do 41%. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 177 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.18. Gloeosporium quercinum West. Sin.: Gl. umbrinellum Berk et Br. Gl. marginans Bulb et Sin. Gl. canadense Ell. Et Ev. Savršeni stadij: Gnomonia quercina Kleb. Na površini zaraženog žira nastaju raspršene sivo-smeđe ili smeđe pjege koje su oštro ograničene od zdravog tkiva. Manje pjege se spajaju i zahvaćaju veći dio sjemena stvarajući rane. Na površini takve ranice razviju se mali jastučići ili diskovi (stromatske lože – acervuli) raspoređeni u koncentrične krugove (slike 7.68. i 7.69.). Jastučići su u početku subepidermalni, zatim se probijaju, boja im je žuta, tamno-smeđa do crna. Iz tih jastučića izlaze spore u obliku ekskudata mliječne boje. Unutar plodnog tijela, acervula, nalaze se konidiofori koji su jednostavni, variraju u dužini ali nisu puno veći od konidija. Konidije su dvojakog tipa: makrokonidije koje su jajolike, ovalne, bezbojne, ponekad blago savijene, jednostanične, veličine 8-17×3,5-7,5 μm; mikrokonidije su klinaste ili cilindrične, veličine 4-8,7×1,5-2 μm (prema Brežnev i drugi, 1962.). Gljiva je nađena na žiru u nesavršenom stadiju. Oboljenje uzrokovano ovom gljivom javlja se u periodu sakupljanja i uskladištenja žira. Zaraza se u skladištu širi s bolesnog na zdravi žir. Sa žira može prelaziti na klijance gdje u slučaju jake infekcije može uzrokovati njihovo odumiranje. Gljiva dolazi i kao parazit na biljnom materijalu (na lišću) u svom savršenom stadiju. Sa žira može prijeći i na klijance gdje u slučaju jake infekcije može izazvati njihovo odumiranje. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 178 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.68. Gloeosporium quercinum, 1: izgled zaraženog žira, 2: jastučić s konidioforama, α: makrokonidije, β: mikrokonidije (Brežnev et al, 1962.) Slika 7.69. Izgled zaraženog žira gljivom Gloeosporium quercinum Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 179 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.3.19. Phomopsis quercella Sacc. Et Roum. Diedicke Savršeni stadij: Diaporte eres Nitschke Sin.: Diaporthe insularis Nit. Diaporthe fasciculate Nit. Gljiva Phomopsis quercella često dolazi na hrastovom žiru. U našim uzorcima nalazili smo je na dozrijevajućem, zrelom i uskladištenom žiru. Ovu gljivu su prvi puta opisali Saccardo i Roum 1880. godine kao Phoma quercella. Diedicke ju je 1911. godine opisao kao Phomopsis quercella. Šafranskaja je 1950. godine (u Brežnev i drugi, 1962.) istraživala nove bolesti žira i prvi puta je zapazila ovu gljivu u šumskim oblastima Bjelorusije i Kavkaza. Štrauh je 1951. (u Brežnev i drugi, 1962.) opisivala biologiju gljive P. quercella i ustanovila vezu s askusnim stadijem Diaporthe insularis. Kod zaraze s P. quercella ljuska žira postaje tamnija i krhka. Na kotiledonima žira se razvijaju sive, kasnije crno-smeđe pjege ili plitki smeđi ograničeni ožiljak (slika 7.70.). Pjege se šire i spajaju i na kraju se rašire po čitavoj površini ploda. Kod povećane vlažnosti ove se pjege prekrivaju bujnim bijelim micelijem (slika 7.71.) na kojem se razvijaju mnogobrojne piknide sklerocijske građe sa širokom bazom. Piknide su crne, često gole, ponekad ispletene hifama. Stvaraju se pod ljuskom koju tijekom razvoja probijaju i ostaju otkrivene. Veličina i oblik jako variraju ovisno od uvjeta u kojima se razvijaju. Njihove veličine su 1,2-1,6×0,8 mm. Katkada se piknide javljaju u grupama koje podsjećaju na stromu. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 180 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.70. Početni simptomi zaraze žira gljivom Phomopsis quercella Slika 7.71. Phomopsis quercella, zaraženi žir prekriven bijelim micelijem 14 dana nakon stavljanja na vlagu, na sobnoj temperaturi Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 181 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Konidije se razvijaju u velikim količinama i izlaze iz otvora (ostiole) u jantarno-crvenkastim ili žućkastim vijugavim viticama (slika 7.72.). Kod izlaza iz piknida vitice se brzo osuše i u takvom obliku ostaju dugo vremena. Kod povišene vlažnosti brzo se raspadaju i raspršuju te izazivaju nove infekcije žira. P. quercella može razviti dvije vrste konidija u piknidama: običnekratke, bezbojne, eliptične ili jajolike, s zaobljenim krajevima, veličine 5-7,5×2-3,5 μm i stilospore – nitasto produžene, vretenaste, na jednom kraju kukasto savijene (poput bumeranga), veličine 16-27×0,41,3 μm (slika 7.77.). Kultura izolirane gljive sa žira je bijele boje, micelij je lepezastog rasta, najmlađi rubovi micelija su bezbojni, lagano uzdignuti zbog višestrukog grananja hifa (slika 7.73.). Na sobnoj temperaturi 22-25 °C nakon 9 do 14 dana u najstarijim dijelovima kulture (centralni dio petrijeve zdjelice) formiraju se plodna tijela – piknide (slika 7.74.). Piknide su u početku smeđe i s vremenom postaju crne. Nakon osam tjedana na piknidama se formiraju jantarno žute vitice konidija (slika 7.76.). Savršeni stadij Diaporthe eres formira na zaraženim kotiledonima stromu koja zahvaća veliku površinu i žir postaje crn. Unutar strome nalaze se periteciji veličine 0,7-1,0 mm. Oni su crni, loptasti s dugim vratovima lagano savijenim pri kraju. Askusi, koji se razvijaju u peritecijima, su cilindrični ili buzdovanasti veličine 45-58×6-8 μm. Askospore su raspoređene u askusu u dva dijela, dvostanične su, bezbojne, vretenaste ili malo cilindrične, na oba kraja tupe, lagano stegnute uz septu, imaju četiri uljne kapi, veličina im je 12-14×3-4 μm. Periteciji se formiraju kod sniženja vlažnosti žira. D. eres se razvija i na mladim dijelovima kore, na mladom drvu grana i na liku starih hrastova. Zaraza se uglavnom širi pomoću spora konidijskog stadija. Zaraza nastupa u vrijeme vegetacije i na mjestima uskladištenja. Žir zaražen gljivom opada i predstavlja izvor infekcije, osobito nakon smještaja u skladište gdje se gljiva širi veoma brzo. Optimalni temperaturni uvjet za razvoj gljive je temperatura 20-21 °C. Gljiva se može razviti na oslabljenim i na otpalim granama, na lišću hrasta klena, brijesta i jasena, te na sadnicama hrasta i jasena. Može izazvati venuće sadnica hrasta i klena. U zavisnosti od uvjeta obitavanja gljiva se može javiti saprofitski ili parazitski. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 182 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.72. Phomopsis quercella, piknide i vijugave vitice konidija 8 tjedana nakon stavljanja na vlagu, na sobnoj temperaturi Slika 7.73. Phomopsis quercella na PDA, kultura stara 3 dana, razvija bijeli lepezasti micelij Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 183 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.74. Phomopsis quercella na PDA, kultura stara 2 tjedna, počinju se formirati piknide Slika 7.75. Phomopsis quercella, kultura stara 6 tjedana, formirane crne piknide Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 184 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.76. Phomopsis quercella, kultura stara 8 tjedana, iz piknida izlaze vitice konidija Slika 7.77. Phomopsis quercella, konidije (obične i stilospore), u običnim konidijama vide se dvije uljne kapi (× 400) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 185 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.4. Veličine izmjere spora najčešćih vrsta gljiva primjenom kompjuterskog programa DP-SOFT kao pomoć prilikom njihove determinacije Prilikom determinacije vrsta gljiva mjerene su dimenzije njihovih spora i uspoređivane s podacima iz dostupne literature. Za odabrane vrste gljiva izmjera spora učinjena je u Olympusovom uredu pomoću računalnog uređaja i programa DP – Soft kao što je već rečeno u poglavlju metode rada. U tablici 7.39. prikazane su dimenzije spora koje su nađene u literaturi te granične vrijednosti (minimum i maksimum) dimenzija izmjerenih pomoću navedenog programa. Pojedinačne izmjere mogu se vidjeti u tablici 7.40. Na slici 7.78. prikazani su primjeri računalne izmjere spora. Tablica 7.39. Dimenzije spora gljiva prema autorima i prema izmjerama Dimenzije prema autorima (μm) Ime gljive Alternaria alternata Arthrobotrys arthrobotyoides Autor Brežnev i dr. 1962. Neergard 1975. Izmjerene dimenzije (μm) dužina širina dužina širina min – max min - max min - max min – max 32 8 – 16 10 – 58 7 – 19 23,7 – 48,4 8,6 – 16,0 18,4 – 22,3 9,5 – 13,2 39,2 – 78,3 3,0 – 5,9 Nema podataka Brežnev i dr.1962. 46 – 62 3–5 Booth 1971. 40 – 80 3,5 – 4 Fusarium moniliforme (mikrokonidije) Booth 1971. 5 – 17 1,5 – 2,5 4,5 – 8,8 2,2 – 3,5 Graphium roboris Brežnev i dr.1962. 4,9 1,2 2,5 – 4,8 1,7 – 2,3 Pestalotia funerea Brežnev i dr.1962. 21 – 27 6–9 17,6 – 24,4 4,5 – 6,1 Brežnev i dr.1962. 5 – 7,5 2 – 3,5 5,1 – 7,1 1,2 – 2,1 Phomopsis quercella (stilospore) Brežnev i dr.1962. 16 – 27 0,4 – 1,3 28,4 – 39,8 0,5 – 1,3 Trichoderma viride Brežnev i dr.1962. 2,5 – 4 * Trichothecium roseum Brežnev i dr.1962. 10,8 – 18 Fusarium avenacium (makrokonidije) Phomopsis quercella (obične spore) * 2,7 – 3,6* 7–8 12,7 – 20,8 6,3 – 10,9 promjer spora Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 186 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.40. Veličine izmjerenih spora najčešćih vrsta gljiva sa žira primjenom programa DP – Soft Alternaria alternata Dužina Širina Arthrobotrys arthrobotryoides Dužina μm Fusarium avenaceum Širina Dužina μm Fusarium moniliforme Širina Dužina μm Širina Graphium roboris Dužina μm Širina μm 48,37 12,04 20,43 13,17 59,37 3,28 8,82 2,73 3,66 2,11 23,68 10,86 21,05 12,08 64,23 4,24 7,08 2,17 4,17 2,14 37,63 13,58 18,39 11,54 56,87 3,92 6,47 2,26 3,68 1,94 25,26 10,74 19,85 11,86 62,34 5,18 5,15 2,29 4,09 2,07 29,44 8,61 20,08 11,07 55,73 4,85 7,14 2,93 3,82 2,15 27,25 11,58 20,07 11,68 39,21 3,03 4,49 2,29 2,87 2,01 25,05 11,87 18,62 11,43 50,53 5,88 6,35 2,85 4,76 2,03 26,76 14,20 20,99 12,22 46,03 5,45 7,35 3,09 2,50 1,87 27,68 14,14 22,30 12,07 58,04 5,26 7,59 2,66 3,79 2,31 30,65 13,73 20,07 11,31 54,58 3,30 6,75 3,48 4,22 2,16 26,11 13,26 20,85 11,46 58,84 5,37 4,97 2,26 4,40 1,92 36,57 12,31 20,68 10,20 49,18 4,99 5,45 2,47 3,50 2,06 34,14 16,00 18,75 9,46 54,70 5,84 8,41 3,44 3,81 2,03 23,95 11,06 19,42 11,75 55,90 3,49 7,03 2,26 4,25 1,68 34,56 11,46 19,75 12,29 78,30 3,92 5,66 3,07 3,73 2,01 Phomopsis quercella Pestalotia funerea Dužina Širina obične spore Privjesci Dužina μm Širina stilospore Dužina μm Širina μm Trichoderma viride Promjer Trichotecium roseum Dužina μm Širina μm 19,15 4,87 22,13 6,02 1,66 37,22 1,35 3,32 20,85 10,97 24,07 5,44 30,22 7,02 1,18 28,44 0,95 2,87 17,59 9,51 23,92 4,50 18,72 5,18 1,86 32,47 1,15 2,78 17,53 8,91 24,13 4,81 23,67 5,63 1,86 39,78 0,98 3,21 16,94 8,67 21,98 5,66 25,39 7,11 2,06 33,64 1,03 3,26 15,24 8,01 18,57 6,10 20,19 30,47 0,92 3,19 17,26 9,47 22,72 5,79 21,36 38,94 0,83 3,53 19,56 9,64 22,48 5,54 33,04 0,83 3,48 17,87 9,49 19,59 5,77 35,54 1,03 3,48 19,50 9,14 24,40 5,86 33,14 1,15 3,46 15,69 6,35 19,64 5,31 37,53 1,15 3,16 15,10 9,28 20,86 5,47 35,23 0,98 3,24 19,93 9,09 23,80 4,45 32,09 0,65 3,59 12,76 8,40 17,58 5,04 38,23 0,52 3,33 14,83 8,10 21,81 5,06 35,85 0,83 3,07 15,40 7,24 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 187 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Slika 7.78. Primjeri računalne izmjere spora Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 188 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Dobiveni podaci: dužine i širine spora, promjer spora kod Trichoderma viride kao i privjesci spora Pestalotia funerea, obrađeni su i analizirani primjenom programa Statistica 6.1. a prikazani su grafički u stilu Box Plots (grafikoni od 7.50. do 7.69.) gdje se vide minimalni i maksimalni iznosi, centralna vrijednost medijana i interkvartilni opseg, odnosno donja i gornja kvartila. Interpretacija je dana prema izmjerenim vrijednostima po pojedinim vrstama gljiva: Alternaria alternata Duljina izmjerenih spora leži u intervalu od 23,6757 do 48,3719 μm što pokazuju slaganje s rezultatima Brežnev i dr. 1962. (32 μm) i Neergard 1975. (10-58 μm). Medijan izmjerenih veličina iznosi 27,6765, dok mjera centralne tendencije iznosi 29,9099. S obzirom na mjeru disperzije od 4,647 μm, može se zaključiti kako se duljina 50% izmjerenih spora nalazi u intervalu 29,9099 ± 4,647 μm (grafikon 7.50.). Širina izmjerenih spora leži u intervalu od 8,6147 do 16,0023 μm što pokazuje grupiranje rezultata oko srednje vrijednosti prema Brežnev i dr. 1962. (8-16 μm) i Neergard 1975. (7-19 μm). Medijan izmjerenih veličina iznosi 12,0446 μm što daje apsolutno odstupanje od 0,0446 μm, odnosno relativno odstupanje od samo 0,37% u odnosu na srednju vrijednost intervala prema Brežnev i dr. 1962. (grafikon 7.51.) Arthrobotrys arthrobotyoides Izmjerene duljine spora unutar su intervala od 18,3291 do 22,2999 μm. Interkvartilni raspon izmjerenih vrijednosti iznosi 1,4312 μm, što je u odnosu na vrijednost medijana od 20,0685 μm relativno odstupanje od 7,13% za 50% izmjerenih spora. Koeficijent kvartilne devijacije iznosi samo 0,035 što pokazuje vrlo malu disperziju izmjerenih duljina (grafikon 7.52.). Izmjerene širine spora su unutar inervala od 9,46 do 13,1674 μm. Interkvartilni raspon izmjerenih vrijednosti iznosi 0,7623 μm, što je u odnosu na vrijednost medijana od 11,6829 μm relativno odstupanje od 6,52% za 50% spora. Koeficijent kvartilne devijacije iznosi samo 0,03 što pokazuje i vrlo malu disperziju izmjerenih širina (grafikon 7.53.). Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 189 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Grafikon 7.50. Alternaria tenuis – duljina spora Grafikon 7.51. Alternaria tenuis – širina spora Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 190 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Grafikon 7.52. Arthrobotrys arthrobotryoides – duljina spora Grafikon 7.53. Arthrobotrys arthrobotryoides – širina spora Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 191 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Fusarium avenaceum (makrospore) Sve izmjerene vrijednosti duljine spora su u intervalu od 39,2055 do 78,2977 μm. 50% izmjerenih duljina spora pada u intervalu od 50,5255 do 59,3674 μm s medijanom 55,9032 μm. Mjera disperzije u iznosu od 4,421 μm pokazuje slaganje s vrijednostima prema Brežnev i dr. 1962. od 46-62 μm. Koeficijent kvartilne devijacije nešto je veći i iznosi 0,08 premda nije toliko izražen zbog veličine kvartila (grafikon 7.54.). Izmjerene vrijednosti širina su u intervalu od 3,0347 do 5,8825 μm. Mjera centralne tendencije izmjerenih širina spora iznosi 4.4291 μm. Interval 3,4916 do 5,3665 μm u kojem je 50% izmjerenih vrijednosti, poklapa se s vrijednostima prema Brežnev i dr. 1962. od 3-5 μm, pri čemu relativno odstupanje mjere centralne tendencije od srednje vrijednosti intervala prema Brežnev i dr. 1962. iznosi 9,68%. Koeficijent kvartilne devijacije dosta je veći i iznosi 0,21, ali je u suglasnosti s prijašnjim istraživanjima pokazujući značajnu mjeru disperzije ovog obilježja (grafikon 7.55.). Fusarium moniliforme (mikrokonidije) Sve izmjerene vrijednosti duljina su u intervalu između 4,4853 do 8,8165 μm. Minimum izmjerenih vrijednosti duljina iznosi 4.4853 μm i leži izvan intervala prema Booth 1971. 5-17 μm dok je maksimum od 8,8165 μm unutar intervala. Medijan u iznosu 6,7517 μm međutim, zajedno s mjerom centralne tendencije od 6,3998 μm, pokazuje da više od 50% izmjerenih duljina spora leži unutar intervala od 5-17 μm. Koeficijent kvartilne devijacije je velik i iznosi 0,24. U radovima drugih autora mjera disperzije ovog obilježja je još izraženija. Preciznost determiniranja je time znatno umanjena, posebno uzimajući u obzir veliku devijaciju drugog karakterističnog obilježja – širine (grafikon 7.56.). Interval određen ekstremima izmjerenih širina (2,174-3,4827 μm) kao i medijan u iznosu 2,6587 μm izvan su intervala prema Booth 1971. 1,5-2,5 μm. Središnjih 50% izmjernih vrijednosti je u intervalu od 2,2644 do 3,0675 μm. Uzevši u obzir relativnu širinu interkvartilnog raspona prema medijanu u iznosu od 30,2%, te koeficijent kvartilne devijacije od 0,15 ne može se isključiti da je na odstupanje rezultata ovdje u znatnijoj mjeri utjecala pogreška mjerenja (grafikon 7.57.). Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 192 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Grafikon 7.54. Fusarium avenaceum – duljina spora Grafikon 7.55. Fusarium avenaceum – širina spora Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 193 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Grafikon 7.56. Fusarium moniliforme – duljina spora Grafikon 7.57. Fusarium moniliforme – širina spora Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 194 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Graphium roboris Izmjerene vrijednosti duljina spora nalaze se u intervalu od 2,4964 do 4,7595 μm. Premda je odstupanje rezultata mjerenja od vrijednosti prema Brežnev i dr.1962. (4,9 μm) i ovdje izraženo; medijan iznosi 3,8063 μm, a mjera centralne tendencije 3,9395 μm, relativna širina interkvartilnog raspona ne ukazuje na rasipanje mjernih rezultata, što potvrđuje i koeficijent kvartilne devijacije 0,07. Obilježje je jasno izraženo (grafikon 7.58.). Uz pretpostavku da nema velikih apsolutnih pogrešaka u mjerenjima Brežnev i dr.1962., usporedbom dane vrijednosti širine spora od 1,2 μm i medijana od 2.0307 μm dobiva se relativno odstupanje od 40,9%. Promatrajući cijeli interkvartil, vidljivo je da mjera disperzije od 0,0975 μm što je relativno prema medijanu 4,8%. Na osnovu ovakvih vrijednosti može se zaključiti da su vrijednosti širine spora vrlo dobro grupirane oko medijana i isključuju mogućnost pogreške mjerenja (grafikon 7.59.). Pestalotia funerea Sve se izmjerene duljine nalaze između ekstrema u iznosu 17,5782 i 24,4017 μm, dok je središnjih 50% vrijednosti u intervalu od 19,5915 do 23,8199 μm. Medijan izmjerenih vrijednosti duljina spora u iznosu 21,9817 μm pada unutar intervala prema Brežnev i dr. 1962. (21-27 μm). Mjera disperzije iznosi ±2,1642 što daje preklapanje interkvartilnog raspona s intervalom 21-27 μm od 48,67%. Koeficijent kvartilne devijacije iznosi 0,1, ali je sam interkvartilni raspon pokazao dobro slaganje s prijašnjim istraživanjima. Ovdje je dosta izražen utjecaj ekstremnih vrijednosti, osobito minimuma koji povećava varijaciju (grafikon 7.60.). Interval u kojem su sve izmjerene širine spora iznosi 4,4542 do 6,1032. Medijan izmjerenih širina u iznosu 5,4385 μm pokazuje relativno odstupanje od donje granice intervala prema Brežnev i dr. 1962. (6-9 μm) od 9,36% što omogućuje determiniranje unatoč malom rasipanju vrijednosti. Koeficijent kvartilne devijacije iznosi 0.09 (grafikon 7.61.). Izmjerene vrijednosti privjesaka su u intervalu od 18,7176 do 30,2234 μm. Središnjih 50% vrijednost su u intervalu od 20,1889 do 25,3911 μm. Mjera centralne tendencije izmjerenih vrijednosti iznosi 22,79 μm i ima relativno odstupanje od medijana 22,1334 μm u iznosu od samo 2,96%. Koeficijent kvartilne devijacije iznosi 0,11. Uzorci pokazuju rasipanje iznad gornjeg kvartila (grafikon 7.62.). Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 195 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Grafikon 7.58. Graphium roboris – duljina spora Grafikon 7.59. Graphium roboris – širina spora Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 196 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Grafikon 7.60. Pestalotia funerea – duljina spora Grafikon 7.61. Pestalotia funerea – širina spora Grafikon 7.62. Pestalotia funerea – privjesci spora Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 197 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Phomopsis quercella (obične spore) Čitav interval izmjerenih vrijednosti duljina spora od 5,1849 do 7,1079 μm pokazuje vrlo dobro podudaranje sa rezultatima prema Brežnev i dr. 1962. (5-7,5 μm). Relativna širina interkvartilnog raspona upućuje na određeno rasipanje uzoraka, ali je u okviru prijašnjih mjerenja budući da je središnjih 50% vrijednosti u intervalu od 5,6328 do 7,0172 μm. Medijan iznosi 6,0167 μm, a koeficijent kvartilne devijacije 0,11 kao što se može naslutiti iz interkvartilnog raspona (grafikon 7.63.). Sve vrijednosti širina spora su u intervalu od 1,1765 do 2,0637 μm. Središnjih se 50% vrijednosti nalazi u intervalu 1,6638 do 1,8602 μm. Medijan izmjerenih vrijednosti iznosi 1,8602 μm, a mjera centralne tendencije 1,762 μm. Zbog malog interkvartilnog raspona relativno je odstupanje tih vrijednosti samo 5,28%. S obzirom da se medijan preklapa s gornjim kvartilom, a minimum intervala izmjerenih vrijednosti odstupa od donjeg kvartila za 29,29% ispravno je uzeti gornji kvartil kao reprezentativnu vrijednost uzorka koja se približava vrijednostima izmjerenim prema Brežnev i dr. 1962. (2-3,5 μm). Koeficijent kvartilne devijacije iznosi 0,05 (grafikon 7.64.). Phomopsis quercella (stilospore) Čitav raspon izmjerenih vrijednosti duljina spora od 32,4672 do 37,5281 μm s medijanom 35,2252 μm pokazuje značajna apsolutna odstupanja prema prije objavljenim mjerenjima Brežnev i dr. 1962. (16-27 μm). Središnjih 50% vrijednosti leži u intervalu od 32,4672 do 37,5281 μm. Koeficijent kvartilne devijacije u iznosu od 0,07 ide u prilog izmjerenim vrijednostima kao karakterističnima za promatrano obilježje (grafikon 7.65.). Za izmjerene vrijednosti širina spora gotovo cijeli raspon od 0,5159 do 1,3454 μm preklapa se s rezultatima prema Brežnev i dr. 1962. (0,4-1,3 μm). Medijan iznosi 0,9789 μm, a raspon varijacije središnjih 50% vrijednosti u intervalu od 0,8319 do 1,1536 μm relativno prema medijanu iznosi 15,26%. Koeficijent kvartilne devijacije ima vrijednost 0,16, ali dopušta determiniranje budući da i prijašnji rezultati pokazuju sličan interkvartilni raspon (grafikon 7.66.). Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 198 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Grafikon 7.63. Phomopsis quercella – duljina spora Grafikon 7.64. Phomopsis quercella – širina spora Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 199 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Grafikon 7.65. Phomopsis quercella – duljina stilospora Grafikon 7.66. Phomopsis quercella – širina stilospora Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 200 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Trichoderma viride Za izmjerene vrijednosti promjera cijeli raspon od 2,771 do 3,5855 μm preklapa se s rezultatima prema Brežnev i dr. 1962. (2,5-4 μm). Medijan iznosi 3,2645 μm, a interkvartilni raspon 0,3226 μm u intervalu od 3,1575 do 3,4801 μm. Mjera centralne tendencije 3,3188 ukazuje na malo rasipanje izmjerenih vrijednosti, što potvrđuje i koeficijent kvartilne devijacije u iznosu od 0,05 (grafikon 7.67.). Trichothecium roseum Relativno preklapanje cijelog raspona izmjerenih vrijednosti duljine od 12,763 do 20,8477 μm s intervalom prema Brežnev i dr. 1962. (10,8-18 μm) iznosi 64,78%, dok relativno preklapanje raspona varijacije središnjih 50% izmjerenih vrijednosti duljine od 15,2352 do 19,4976 μm iznosi 64,86%. Postoji mala asimetrija varijacije vrijednosti s tendencijom prema gornjem ekstremu raspona. Koeficijent kvartilne devijacije iznosi 0,12 i u skladu je sa već prije utvrđenim rasipanjem vrijednosti obilježja (grafikon 7.68.). Sve izmjerene vrijednosti širina spora nalaze se unutar intervala od 6,3483 do 10.9685 μm. Relativno preklapanje cijelog raspona izmjerenih vrijednosti širina s intervalom prema Brežnev i dr. 1962. (7-8 μm) iznosi 14,11%, a preklapanje raspona varijacije središnjih 50% izmjerenih vrijednosti širina koje su u intervalu od 8,1017 do 9,4937 μm ne postoji. Simetričnost interkvartila prema cijelom rasponu i mali interkvartilni raspon pokazuje male varijacije vrijednosti s mjerom centralne tendencije 8,7977 μm koja relativno odstupa od vrijednosti prema Brežnev i dr. 1962. za 9,07%. Koeficijent kvartilne devijacije iznosi 0,08 (grafikon 7.69.). Na temelju analiza podataka dimenzija spora može se zaključiti da su gotovo sva mjerenja pokazala male koeficijente kvartilne devijacije dokazujući ovu metodu kao relativno pouzdanu za determiniranje gljiva upravo na osnovu tih obilježja. S obzirom da je za većinu mjerenja interkvartilni raspon bio mali, vidljivo je da su upravo ta obilježja karakteristična za pojedinu gljivu. Rezultati su pokazali dobro slaganje s prijašnjim istraživanjima prije svega prema Brežnev i dr. 1962., što je i potvrda prethodne tvrdnje. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 201 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Grafikon 7.67. Trichoderma viride – promjer spora Grafikon 7.68. Trichothecium roseum – duljina spora Grafikon 7.69. Trichothecium roseum – širina spora Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 202 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.5. Ispitivanje brzine rasta štetnih vrsta gljiva izoliranih sa žira u različitim temperaturnim uvjetima Pokus ispitivanja rasta odabranih vrsta gljiva proveden je kako bi se upoznale njihove karakteristike brzina rasta i razvoja koja utječe na širenje zaraze zdravih žirova i kako bi se uočile razlike u rastu između pojedinih vrsta. Ispitivan je rast pet vrsta gljiva koje često dolaze na žiru i koje mogu uzrokovati veće štete posebno u vrijeme skladištenja. Promjene u dijametralnom rastu razvijajuće kolonije mjerene su i promatrane u periodu od 7 dana ili do dana kada je kolonija gljive dorasla do ruba petrijeve zdjelice. Rast kolonija gljiva i izmjera promjera u mm praćen je u dva različita temperaturna uvjeta: 22-25 i 11-15 °C. Variranje temperatura u vrijeme izmjera razlog je neujednačenog linearnog prirasta kolonija. Rezultati izmjere dijametralnog rasta gljiva po danima na temperaturi od 22-25 °C prikazani su u tablici 7.41. Izračunate srednje vrijednosti prikazane su i u posebnoj tablici br. 7.42. te u priloženom grafikonu 7.70. radi bolje preglednosti. U tablici 7.43. prikazano je koliko je milimetara izrasla kolonija gljiva u jednom danu i srednje vrijednost za sve dane praćenja rasta. Prema brzini rasta uočava se da je na PDA hranjivoj podlozi najbrže rasla kolonija gljive Trichoderma viride koja je za svega dva dana prorasla cijelu petrijevu zdjelicu. Micelij Ciboria batschiana također ima vrlo brzi rast i u pet dana je dorasla do ruba petrijeve zdjelice. Phomopsis quercella je za šest dana dorasla do ruba petrijeve zdjelice dok je Fusarium avenaceum trebala sedam dana da doraste gotovo do ruba zdjelice. Graphium roboris najsporije raste i za sedam dana dijametralni rast je iznosio 38,8 mm. Za usporedbu prosječnog dijametra rasta uzete su vrijednosti četvrtog dana izmjere koje su iznosile za Ciboria batschiana 70,8 mm, Phomopsis quercella 58,8 mm, Fusarium avenaceum 45,6 mm i Graphium roboris 25,2 mm dok je za Trichoderma viride vrijednost dijametralne izmjere drugog dana iznosila 82 mm. Srednja vrijednost rasta micelija gljiva u jednom danu iznosila je za Trichoderma viride 56 mm, za Ciboria batschiana 17,5 mm, Phomopsis quercella 15,3 mm, Fusarium avenaceum 12,1 mm i za Graphium roboris 4,8 mm. Isto tako za temperaturne uvjete 11-15 °C rezultati izmjere dijametralnog rasta prikazani su u tablici 7.44., srednje vrijednosti u tablici 7.45. i grafikonu 7.71. a prosječni rast u jednom danu i srednje vrijednosti za sve dane vide se u tablici 7.46. U uvjetima temperature 11 do 15 °C gljive su rasle sporije. Trichoderma viride jedina je dorasla do ruba petrijeve zdjelice i to peti dan. Uspoređujući četvrti dan dijametralnog rasta dobiveni su slijedeći rezultati: Trichoderma viride izrasla je 71,4 mm, Phomopsis quercella 29,4 mm Ciboria batschiana 25,8 mm, Fusarium avenaceum Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 203 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 19 mm i Graphium roboris 17,8 mm. Srednja vrijednost rasta micelija gljiva u jednom danu iznosila je za Trichoderma viride 18,2 mm, za Phomopsis quercella 7,6 mm, Ciboria batschiana 6 mm,, Fusarium avenaceum 4,6 mm i za Graphium roboris 2,8 mm. Paralelno s izmjerom rasta bilježen je i izgled odnosno morfologija kultura gljiva u temperaturnim uvjetima 22-25 °C što je prikazano u tabelama od 7.47. do 7.51. Sa rastom kolonija uočavaju se promjene u boji, izgledu i obojenosti agara. Daljnjim praćenjem, poslije sedmog dana, razvoja kulture Ciboria batschiana uočeno je da su se 14-og dana od grupiranih hifa počeli formirati sklerociji a hranjiva podloga poprimati crnu boju. U kulturi Graphium roboris 10-og dana rasta koremiji s mliječnim kapljicama nalazili su se po cijeloj površini kolonije. Kultura Fusarium avenaceum držana u uvjetima 22-25 °C nije formirala plodna tijela ali u uzorcima uzgajanim na nižim temperaturama (11-15 °C) koji su prebačeni u uvjete sobne temperature, što je izazvalo temperaturni šok, formirale su se masne želatinozne nakupine (pionote) s makrokonidijama. U kulturi Phomopsis quercella devetog do desetog dana počele su se formirati piknide bijele boje koje su kasnije poprimile tamno smeđu do crnu boju. Plodna tijela počela su se prvo formirati u centralnom dijelu kolonije gdje je ona najstarija. Četvrtog dana rasta kulture Trichoderma viride uočeni su zeleni i bijeli krugovi koji se smijenjuju slijedeći ritam dana i noći. Na rubovima zelenih krugova formirale su se nakupine tj. jastučići konidija tamno zelene boje. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 204 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.41. Dijametralan rast kolonija gljiva (mm) po danima na temperaturi 22-25 °C Broj uzorka Dani 0 1 2 3 4 5 6 7 Ciboria batschiana 1 5 14 37 54 70 85 2 5 14,5 39 55 70 85 3 5 16 39 56 73 85 4 5 15,5 37 56 70 85 5 5 15 39 55 71 85 x 5 15 38,2 55,2 70,8 85 Graphium roboris 1 5 10 18 22 26 30 36 40 2 5 11 21 24 27 32 38 42 3 5 9,5 18 22 26 30 35 39 4 5 10 18 21 24 28 32 36 5 5 9 15 19 23 28 32 37 x 5 9,9 18 21,6 25,2 29,6 34,6 38,8 Fusarium avenaceum 1 5 11 23 36 48 61 72 84 2 5 7 20 34 45 57 69 81 3 5 7 18 33 44 56 68 80 4 5 13 26 39 48 60 71 83 5 5 7 19 33 43 57 69 81 x 5 9 21,2 35 45,6 58,2 69,8 81,8 Phomopsis quercella 1 5 7 26 42 58 74 84 2 5 7 31 43 60 70 80 3 5 7 29 48 62 73 83 4 5 7 25 42 57 75 85 5 5 7 25 41 57 80 85 x 5 7 27,2 43,2 58,8 74,4 83,4 Trichoderma viride 1 5 30 85 2 5 30 85 3 5 22 70 4 5 23 85 5 5 25 85 x 5 26 82 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 205 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.42. Srednje vrijednosti rasta gljiva (mm) po danima na temperaturi 22-25 °C Dani Gljiva 0 1 2 3 4 5 6 7 Ciboria 5 15 38,2 55,2 70,8 85 Graphium 5 9,9 18 21,6 25,2 29,6 34,6 38,8 Fusarium 5 9 21,2 35 45,6 58,2 69,8 81,8 Phomopsis 5 7 27,2 43,2 58,8 74,4 83,4 Trichoderma 5 26 82 90 80 70 Ciboria mm 60 Graphium 50 Fusarium 40 Phomopsis 30 Trichoderma 20 10 0 1 2 3 4 5 6 Dani Grafikon 7.70. Srednje vrijednosti rasta gljiva po danima, temperatura 22-25 °C Tablica 7.43. Prosječna brzina rasta micelija u jednom danu, temperatura 22-25 °C Dani Gljiva 1. do 2. 2. do 3. 3. do 4. 4. do 5. 5. do 6. 6. do 7. Srednja vrijednost mm/dan Trichoderma 56,0 56,0 Ciboria 23,2 17,0 15,6 14,2 Phomopsis 20,2 16,0 15,6 15,6 9,0 Fusarium 12,2 13,8 10,6 12,6 11,6 12,0 12,1 Graphium 8,1 3,6 3,6 4,4 5,0 4,2 4,8 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 17,5 15,3 206 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.44. Dijametralan rast kolonija gljiva (mm) po danima na temperaturi 11-15 °C Dani Broj uzorka 0 1 5 6 12 20 2 5 7 12 3 5 7 4 5 5 x 1 2 3 4 5 6 7 28 35 40 44 17 25 32 35 39 11 19 27 35 40 45 7 10 16 25 35 38 42 5 7 11 17 25 34 39 43 5 6,8 11,2 17,8 26 34,2 38,4 42,6 Ciboria batschiana Graphium roboris 1 5 7 11 14 17 20 22 24 2 5 9 13 15 18 21 23 25 3 5 8 12 14 18 21 24 26 4 5 10 13 16 18 21 23 26 5 5 9 13 16 18 20 23 25 x 5 8,6 12,4 15 17,8 20,6 23 25,2 29 35 39 Fusarium avenaceum 1 5 8 11 15 20 2 5 8 9 15 22 26 32 37 3 5 8 11 15 19 29 33 37 4 5 8 9 11 16 25 30 34 5 5 7 9 13 18 24 29 34 x 5 7,8 9,8 13,8 19 26,6 31,8 36,2 Phomopsis quercella 1 5 10 20 28 38 45 50 55 2 5 5 7 14 27 39 46 52 3 5 5 7 14 24 34 40 46 4 5 6 11 19 30 42 50 55 5 5 7 10 18 28 40 48 54 x 5 6,6 11 18,6 29,4 40 46,8 52,4 Trichoderma viride 1 5 12 35 54 75 85 2 5 13 35 54 75 85 3 5 12 28 45 64 85 4 5 12 32 50 71 85 5 5 13 33 52 72 85 x 5 12,4 32,6 51 71,4 85 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 207 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.45. Srednje vrijednosti rasta gljiva (mm) po danima na temperaturi 11-15 °C Dani Gljiva 0 1 2 3 4 5 6 7 Ciboria 5 6,8 11,2 17,8 25,8 34,2 38,4 42,6 Graphium 5 8,6 12,4 15 17,8 20,6 23 25,2 Fusarium 5 7,8 9,8 13,8 19 26,6 31,8 36,2 Phomopsis 5 6,6 11 18,6 29,4 40 46,8 52,4 Trichoderma 5 12,4 32,6 51 71,4 85 90 80 70 Ciboria mm 60 Graphium 50 Fusarium 40 Phomopsis 30 Trichoderma 20 10 0 1 2 3 4 5 6 7 Dani Grafikon 7.71. Srednje vrijednosti rasta gljiva po danima, temperatura 11-15 °C Tablica 7.46. Prosječna brzina rasta micelija u jednom danu, temperatura 11-15 °C Dani Gljiva 1. do 2. 2. do 3. 3. do 4. 4. do 5. 5. do 6. 6. do 7. Srednja vrijednost mm/dan Trichoderma 20,2 18,4 20,4 13,6 Ciboria 4,4 7,6 10,6 10,6 6,8 5,7 7,6 Phomopsis 4,4 6,6 8,0 8,4 4,2 4,2 6,0 Fusarium 2,0 3,0 5,2 7,6 5,2 4,4 4,6 Graphium 3,8 2,6 2,8 2,8 2,4 2,2 2,8 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 18,2 208 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.47. Opis izgleda kolonije Ciboria batschiana i njenog razvoja tijekom izmjere rasta na temperaturi 22-25 °C Ciboria batschiana Dani Opis morfologije kolonije gljive 1. dan Micelij bezbojan do nježno bijel, rijedak, čupav i zrakast, na rubovima se višestruko grana i uzdiže 2. dan Micelij je bezbojan do bijel, zrakast, centralni dio se zgušnjava i postaje vatast, na rubovima je rjeđi i zrakasto se grana 3. dan Centralni dio kolonije poprima sivkastu boju a hife se okomito uzdižu, poprima vatastu strukturu, rubovi su rjeđi s bezbojnim micelijem 4. dan Micelij sa starošću poprima sivu boju i postaje sve tamniji, najtamniji je u centru 5. dan Kultura postaje tamno siva, centralni dio je crno sive boje, hife se u najstarijem dijelu kulture uzdižu i pomalo grupiraju, micelij je izrasao do ruba petrijeve zdjelice Tablica 7.48. Opis izgleda kolonije Graphium roboris i njenog razvoja tijekom izmjere rasta na temperaturi 22-25 °C Graphium roboris Dani Opis morfologije kolonije gljive 1. dan Micelij je bijelo kremaste boje, gusti i polegli 2. dan Micelij je gusti i polegli, počinje se pojavljivati smeđa pigmentacija, 3. dan U centru kulture se počinju formirati tamno smeđi koremiji, uočava se smeđi prsten micelija iza kojeg slijedi kremasti rubni prsten 4. dan Kultura poprima smeđu boju, u centru kolonije se pojavljuju mliječne kapljice u kojima se nalaze konidiofori s konidijama 5. dan Kultura sve više tamni, raste u "godovima" – prstenovima, smijenjuje se tamno smeđi i kremasti micelij, mliječne kapljice se šire od centra kako kolonija stari 6. dan Prstenasti rast jače dolazi do izražaja, uočavaju se koremiji s mliječnim kapljicama u centralnom dijelu kolonije 7. dan Isto kao i prethodni dan Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 209 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.49. Opis izgleda kolonije Fusarium avenaceum i njenog razvoja tijekom izmjere rasta Fusarium avenaceum Dani Opis morfologije kolonije gljive 1. dan Bezbojan, zrakast micelij 2. dan Micelij postaje bijele boje, gust je i vatast 3. dan Micelij je bijel, gust, vatast, agar poprima žućkastu boju 4. dan Isto kao i prethodni dan 5. dan Micelij poprima roskastu boju, agar je žućkasto crvenkaste boje 6. dan Isto kao i prethodni dan 7. dan Isto kao i prethodni dan, centralni dio kulture poprima lagano žućkastu boju, kultura izrasla do ruba petrijeve zdjelice Tablica 7.50. Opis izgleda kolonije Phomopsis quercella i njenog razvoja tijekom izmjere rasta Phomopsis quercella Dani Opis morfologije kolonije gljive 1. dan Bezbojan micelij 2. dan Bezbojan, rijedak, polegli micelij 3. dan Bezbojan, polegli micelij, na rubovima pagano uzdignut zbog grananja hifa 4. dan Micelij bijele boje, poleglog, lepezastog rasta, najmlađi rub kolonije bezbojan 5. dan Izrazito bijeli, polegli micelij, lepezastog rasta 6. dan Isto kao i prethodnog dana, kolonija prorasla do ruba petrijeve zdjelice Tablica 7.51. Opis izgleda kolonije Trichoderma viride i njenog razvoja tijekom izmjere rasta Trichoderma viride Dani Opis morfologije kolonije gljive 1. dan Bezbojan do blago zelenkast micelij 2. dan Bezbojan do blago zelenkast micelij, rijedak, vrlo brzo se širi, prorastao je cijelu petrijevu zdjelicu Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 210 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA 7.6. Zaštita žira fungicidima Pokusi zaštite žira fungicidima postavljeni su u priručnom laboratoriju i u polju Šumarskog instituta "Jastrebarsko" s ciljem utvrđivanje djelotvornosti fungicida u zaštiti žira od gljiva. 7.6.1. Laboratorijski pokus Analizom laboratorijskog pokusa zaštite žira fungicidima (pet tjedana nakon postavljanja pokusa) dobiveni su sljedeći rezultati (tablica 7.52.): klijavost tretiranog žira iznosila je od 53,33% do 66,67% dok je na kontrolnom uzorku bila 35,83%. Raspucavanjem ljuske žira, uslijed bubrenja kotiledona, prilikom stavljanja u vlažne uvjete i razvijanja klice, izbijale su gljive koje su se nalazile ispod ljuske i na ili u kotiledonima. Zaraza gljivama iznosila je od 22,50% do 28,33% kod tretiranih uzoraka te 51,66% kod netretiranog uzorka. Najčešće prisutne bile su gljive iz rodova: Penicillium, Ciboria, Fusarium i Phomopsis. U grupu ostalo ubrojen je truli žir bez vidljivog tijela gljive te žir s nedefiniranim micelijem. Visine svih klijanaca varirale su od minimalno 3 do maksimalno 31 cm zbog različitih vremena izbijanja klice. Srednje visine klijanaca kod svih tretmana iznosile su od 17,1 do 18,5 cm. Tablica 7.52. Zdravstveno stanje žira nakon tretiranja fungicidima Zdravstveno stanje Normalno isklijalo sjeme Neisklijalo sjeme Bolesno sjeme Cuprablau Z 11.5. n% 80 66,67 6 5,95 34 28,33 Ukupno 120 Penicillium spp. Ciboria batschiana Fusarium spp. Phomopsis quercella Botrytis cinerea Stereum hirsutum Ostalo 8 7 5 6 1 Ukupno bolesno 34 min max sredina Fungicidi Dithane S60 Vitavax 200 11.5. 11.5. n% n% 67 55,83 64 53,33 23 19,17 29 24,17 30 25,00 27 22,50 100 120 100 Gljive na bolesnom žiru 23,53 7 23,33 20,59 6 20,00 14,70 6 20,00 17,64 8 26,67 2,94 7 20,58 3 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 120 100 120 100 6 8 7 6 22,22 29,63 25,93 22,22 16 12 15 10 3 2 18 25,81 19,35 24,19 16,13 4,84 3,23 29,00 27 100 62 100 10,00 100 30 100 Visine klijanaca (cm) 3,0 5,5 31,0 28,0 18,5 17,1 Kontrola 11.5. n% 43 35,83 15 12,50 62 51,66 6,0 32,0 17,6 3,0 29,0 17,7 211 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA U kontrolnom netretiranom uzorku bilo je najmanje proklijalog žira, a najviše zaraženog gljivama. Uzorak tretiran fungicidom Vitavax imao je najmanje proklijalih žirova (53,3%) i najviše neproklijalih zdravih sjemenki (24,17%) što se može protumačiti inhibitornim djelovanjem fungicida u datim uvjetima. Cuprablau Z je u laboratorijskim uvjetima pokazao najbolje rezultate (66,7%) zdravih proklijalih sjemenki s najvećom srednjom visinom klijanaca (18,5 cm). Uzorak žira tretiran Dithanom S60 imao je 55,83% zdravih proklijalih sjemenki i najmanju srednju visinu rasta (17,1 cm). 7.6.2. Poljski pokus Registracijom pokusa, četiri mjeseca nakon sadnje tretiranih žirova u kontejnere u polju, utvrđen je broj proklijalih žirova. Broj proklijalih žirova prikazan je u postocima po blokovima i u ukupnom iznosu za sve blokove zajedno kao što se vidi u tablici 7.53. Tablica 7.53. Broj i postotak proklijalih žirova Fungicidi Ponavljanje (Blokovi) Vitavax extra Vitavax 200 Dithane Captan Sterilizirano tlo Kontrola n % n % n % n % n % n % I 21 63,64 23 69,70 26 78,79 21 63,64 21 63,64 17 51,52 II 25 75,76 23 69,70 23 69,70 26 78,79 25 75,76 19 57,58 III 20 60,61 21 63,64 23 69,70 23 69,70 23 69,70 15 45,45 IV 21 63,64 21 63,64 28 84,85 22 66,67 22 66,67 21 63,64 V 26 78,79 24 72,73 28 84,85 20 60,61 24 72,73 17 51,52 Ukupno 113 68,48 112 67,88 128 77,58 112 67,88 115 69,70 89 53,94 Od ukupnog broja žirova tretiranih fungicidom Vitavax extra proklijalo je 68,48%. Tretman s žirova Vitavax 200 dao je 67,88% proklijalih žirova, Dithane 77,58% i Captan 67,88%. Klijavost netretiranog žira posađenog u steriliziranu zemlju iznosila je 69,70% dok je klijavost netretiranog žira u kontrolnoj sadnji imala najniži iznos od 53,95%. Paralelno s utvrđivanjem broja proklijalog žira mjerene su visine klijanaca. U tablici 7.54. prikazane su minimalne, maksimalne i srednje visine po blokovima i tretmanima te srednje vrijednosti po tretmanima za sve blokove zajedno. Srednje visine različitih tretmana su priŠumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 212 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA lično ujednačene i međusobno se razlikuju za 0,5 do 1,0 cm osim kod Captana gdje su visine 2 do 3 cm niže od drugih tretmana. Visine unutar tretmana i blokova su vrlo raznolike i velike su razlike minimuma i maksimuma jer je žir vrlo neujednačeno nicao. Visine se kreću od 5 do 35 cm. Tablica 7.54. Visine klijanaca u pokusu tretiranja fungicidima Fungicidi Ponavljanje (blokovi) Visina klijanaca (cm) min 8 12 10 I max 32 28,5 28 x 21,10 20,33 20,35 min 12 10,5 9 II III IV V Ukupno Vitavax extra Vitavax 200 Dithane Sterilizirano tlo Kontrola 6 11 11,5 21,5 29 26 17,55 20,90 19,56 5 6 11 Captan max 32 25 26 29 26 30 x 20,30 18,78 18,09 16,38 16,68 19,16 min 10 9 5 6 9,5 8 max 35 22,5 33.5 22,5 29 33 x 21,03 17,35 19,39 16,83 21,28 20,2 min 13 4,5 3 6 8 7 max 26 25 25 23 30 25 x 20,45 19,07 18,00 15,86 18,59 18,76 min 5 11 4 5 8 6 max 26 29 27 28,5 28 24,5 x 17,17 19,87 16,84 16,47 19,42 17,44 min 5 4,5 3 5 6 6 max 35 29 33,5 29 30 33 x 20,01 19,08 18,53 16,62 19,37 19,02 Da bismo ustanovili da li postoji signifikantna razlika između tretmana (četiri različita fungicida, sadnja u sterilizirano tlo i kontrola) i između blokova (I – V) podaci o broju proklijalih sjemenki obrađeni su metodom analize varijance za slučajni blok dizajn za usporedbu n tretmana (Bhattacharyya i Johnson, 1977.). Uz pomoć računalnog programa Mathematica v4.0, Wolfram Research, 1999. određene su p-vrijednosti koje nam govore da li se podaci razlikuju ili ne. Rezultati statističke obrade podataka, proklijalih žirova u šest različitih tretmana, prikazani su u tablicama 7.55., 7.56. i 7.58. U tablici 7.55. podaci o broju proklijalih sjemenki strukturirani su prema slučajnom blok dizajnu sa prikazom srednjih vrijednosti za blokove i tretmane. Analiza varijance prikazana je u tablici 7.56. Podaci su izračunati prema formulama prikazanim u tablici 7.57. (Bhattacharyya i Johnson, 1977.) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 213 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Tablica 7.55. Struktura podataka u slučajnom blok dizajnu s 5 blokova i 6 tretmana Fungicidi Vitavax extra Vitavax 200 Dithane Captan Sterilizirano tlo Kontrola n n n n n n Blok Srednja vrijednost Tretman 1 Tretman 2 Tretman 3 Tretman 4 Tretman 5 Tretman 6 BLOK I 21 23 26 21 21 17 21,5 BLOK II 25 23 23 26 25 19 23,5 BLOK III 20 21 23 23 23 15 20,8 BLOK IV 21 21 28 22 22 21 22,5 BLOK V 26 24 28 20 24 17 23,2 Tretman Srednja vrijednost 22,6 22,4 25,6 22,4 23,0 17,8 22.3 Tablica 7.56. Analiza varijance za podatke klijavosti žira prikazane u tablici 1. Porijeklo Suma kvadrata Br. stupnjeva slobode Sredina kvadrata F – omjer p vrijednost Tretmani 258.7000 5 31.7400 7.6054 0.000382 Blokovi 30.1333 4 7.5333 1.8051 0.167476 Pogreška 83.46667 20 4.1733 Ukupno 272.3000 29 Tablica 7.57. Randomizirani blok dizajn (prema Bhattacharyya i Johnson, 1977.) Suma kvadrata Porijeklo Broj stupnjeva slobode k Tretiranje SST = b∑ ( y. j − y.. ) 2 j =1 b Blokovi SS B = k ∑ ( yi . − y ..) 2 b k SSE = ∑∑ ( yij − yi . − y . j + y ..) i =1 j =1 b Ukupno k ∑∑ ( y i =1 j =1 ij − y..) 2 2 F omjer k −1 MST = SST k −1 MST MSE b −1 MSB = SSB b −1 MSB MSE i =1 Pogreška Sredina kvadrata ( b − 1)( k − 1) MSE = SSE ( b -1)( k − 1) bk − 1 gdje je: yi . – srednja vrijednost i-tog retka (bloka) y. j – srednja vrijednost j-tog stupca (tretmana) y.. – srednja vrijednost svih podataka k b – ukupan broj tretmana – ukupan broj blokova Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 214 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Određena p-vrijednost nam kazuje da li razlika između tretmana ili između blokova postoji ili ne. Ako je p-vrijednost manja od 0.01 smatramo da razlika postoji. Kod nas je p-vrijednost znatno manja od 0.01 tj. ona iznosi 0.000382 što znači da postoji razlika u tretmanima dok je p-vrijednost za blokove veća od 0.01, ona iznosi 0.167476, pa smatramo da razlike između blokova nema. Nakon što smo ustanovili da postoji razlika između tretmana, testirali smo razlike između dva tretmana koristeći se t-testom, s brojem stupnjeva slobode d. f. = ( b − 1)( k − 1) , kako je prikazano u tablici 7.58. Tablica 7.58. Skupni prikaz t-vrijednosti pri testiranje hipoteze o razlikama između dva tretmana uz značajnost (signifikantnost) p = 0.01 Tretmani Tretmani 1 1 2 3 4 5 6 0.1548 – 2.3219 0.1548 – 0.3096 3.1751 – 2.4667 0.000 – 0.4644 3.5603 2.4767 2.0123 6.0370 – 0.4644 3.5603 2 3 4 5 4.0247 6 t-vrijednosti izračunate su prema formuli: t= ( y. j − y.k ) − ( β j − β k ) MSE 2 / b gdje je: β j – očekivana vrijednost za j-ti tretman, β k – očekivana vrijednost za k-ti tretman, y. j – sredina uzorka j-tog tretmana, b – ukupni broj blokova. Svaki tretman ima neku svoju očekivanu vrijednost βj (za j-ti tretman). Vrijednost y. j (sredina uzorka j-tog tretmana) dobijemo na temelju konkretnog uzorka u pokusu. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 215 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 7. REZULTATI RADA Naša hipoteza je da nema razlike između j-tog i k-tog tretmana, pa je stoga βj – βk = 0. Naša t-vrijednost nam služi za testiranje hipoteze da nema razlike između dva tretmana. Ako je t < t * (t kritično), koju odredimo iz tablica Studentove razdiobe za 20 ( ( b − 1)( k − 1) ) stupnjeva slobode i odgovarajuću značajnost, smatramo da razlike nema, a u suprotnom da razlika postoji. Za značajnost 1% je t* = 2.845. Naša t-vrijednost za razlike između tretmana 1,2,3,4 i 5 nije značajna te smatramo da razlike kod klijavosti žira pri tretiranju različitim fungicidima nema, a također smatramo da nema ni razlike u klijavosti žira kod žirova tretiranih nekim fungicidom i onih koji su posađeni u sterilizirano tlo. S druge strane, t-vrijednosti za razlike između kontrole i ostalih tretmana su veće od t* što znači da postoji značajna razlika u klijavosti žira tretiranog fungicidom ili posađenog u sterilizirano tlo i netretiranog žira posađenog u obično tlo. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 216 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 8. RASPRAVA 8. RASPRAVA 8. RASPRAVA Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 217 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 8. RASPRAVA 8.1. Zdravstveno stanje prema kategorijama oštećenosti žira Oštećenost žira po kategorijama, navedenim u rezultatima, analizirana je na otpalom sjemenu od srpnja do listopada, sredinom mjeseca u periodu od tri godine, na odabranim lokacijama i pokusnim plohama metodom slučajnih uzoraka. Oštećenja nisu praćena u svibnju i lipnju jer je bilo neizvedivo sakupljanje cvatova i zametaka žirića iz krošanja a njihovo sakupljanje s tla ne bi dalo odgovarajuće rezultate. Zapaženo je da se u svibnju moglo naći mnogo otpalih ocvalih muških resa dok su u lipnju otpadale čitave peteljke sa zamecima žirića veličine približno 3 mm. Na peteljkama su uočene ubodne ranice, najvjerojatnije nastale kod ishrane imaga žirotoča prilikom isisavanja sokova, neke peteljke su bile deformirane na mjestima uboda dok na nekima nisu bila vidljiva oštećenja. Uzrok opadanja vjerojatno je oštećenost žirotočcima ali isto tako može biti i uslijed vjetra, kiše ili mraza. Simptomi gljivičnih oštećenja na peteljkama nisu zapažena. Analiza oštećenosti žira po razvojnim stadijima od mladih nerazvijenih žirića u srpnju do zrelog žira u listopadu pokazala je promjenu i variranje postotaka kategorija oštećenosti. U srpnju i kolovozu otpadao je uglavnom oštećen žir, oštećenost insektima bila je najveća (41,32% do 90,62%) ali i postotak zaraženosti gljivama nije bio zanemariv (1,28% do 28,43%). S razvojem i sazrijevanjem žira, u rujnu i listopadu, bilo je sve više otpalog zdravog žira (9,24% do 45,95%), oštećenost kukcima bila je nešto manja nego na nezrelim žirićima ali još uvijek visoka (29,13% do 76,19%) dok se oštećenost gljivama povećala povećanjem mase kotiledona tj. količine hranjiva (10,70% do 42,91%). Uspoređujući podatke oštećenosti zrelog žira raznih autora (tablica 8.1.) uočavaju se razlike koje ovise o načinu sakupljanja i analize uzoraka tj. o tome da li je sakupljan slučajan uzorak ili samo okularno zdrav žir te da li je učinjena analiza žira u ljusci ili skidanjem ljuske. Svi autori (osim Novak Agbaba) analizirali su cjelovit žir u ljusci. Metode sakupljanja su se razlikovale: Maksimović i dr.(1982.) sakupljali su žir s pokusnih ploha veličine 1 m2 ispod krošanja stabala. Hrašovec (1991.) je sakupljao žir sa pokusnih površina tamo gdje ga je bilo te s platna pod krošnjama. Harapin i dr. uzimali su slučajan uzorak grana s nasumično odabranih stabala i pratili oštećenost pupova, cvjetova i žirića. Margaletić (1998.) sabirao je žir s cijele površine metodom uzorkovanja s površina veličine 3 × 3 m ispod krošanja bogatog uroda. Saračević (2002.) sakupljala je sav žir s tla s ploha veličine 2 × 2 m postavljenih po sistematskom uzorku. Poštenjak i Gradečki (2001.) analizirali su žir za sakupljen za potrebe sjemenarstva. S obzirom da je u našim istraživanjima zapaženo da su često kotiledoni, kod okularno zdravog žira kojem se skine ljuska, oštećeni djelomično ili čak potpuno, ustanovljeno je Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 218 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 8. RASPRAVA da je bitno prilikom analize zdravstvenog stanja žira skidati ljusku i utvrditi zdravost unutrašnjosti žira. U tablici oštećenosti žira ubilježeni su podaci onako kako su ih autori navodili u svojim radovima. Oni su radili istraživanja sa svojih stanovišta. Svima je zajedničko da im bolesti žira nisu bile primarne. U ovom slučaju težište je na bolesti, pa je i pristup drugačiji. Iz tih razloga i pokazatelji tj. rezultati su različiti. Matić i dr. (1996.) kažu da je manji ili obilniji urod rezultat pojave abiotskih i biotskih čimbenika koji se mijenjaju u prostoru i vremenu u relativno velikom arealu hrasta lužnjaka. To se isto tako može reći i za oštećenost žira na koju utječe niz čimbenika koji se razlikuju ovisno o lokalitetima istraživanja. Ipak se može zapaziti određeno podudaranje u postocima kategorija oštećenosti kako u rezultatima ovog rada tako i prema raznim autorima. Tablica 8.1. Oštećenost žira prema raznim autorima Autor Područje istraživanja Gljive Kukci Više životinje Ostali uzročnici Glodavci Ukupne štete Zdravi žir % Maksimović i dr. 1982. Hrašovec 1991. G. j. Sremska Mitrovica 4,2-24 25-55,8 Balaninus 10-25 G. Posavina Jastreb. Lug Cydia 10-12 Turopolj. lug 1980. god.: 0,8-5,8 22,1-61,6 8-18 1981. god.: 15-20 3-4 Žirotoč 30 Harapin i dr. 1996. Savijač 15 Područje Hrvatske Biotički čimb. 79 Osa šiškarica 12 21 Ostali 22 Margaletić 1998. Saračević 2002. Žirotoč 6,7 Turopoljski lug 1,79 Savijač 6,29 2,35 Sliv rijeke Česme 31,64-69,16 Poštenjak i Gradečki 2001. Novak Agbaba 2003. 82,9 36,32 Jastrebarsko, Lipovljani, Čazma, D. Miholjac, Otok 10,70-42,91 Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 29,23-62,77 0,00-4,95 63,68 15,33-45,95 219 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 8. RASPRAVA 8.2. Mikoflora i bolesti žira Žir je bogat šećerima, škrobom i drugim hranjivim tvarima i kao takav posebno je pogodan kao supstrat za rast gljivičnih organizama. Osim toga sadrži veću količinu vlage (40 – 48%) što također pogoduje razvoju i rastu gljiva. Većina vrsta gljiva koje dolaze na žiru su vrste koje stvaraju veliko mnoštvo spora i naseljavaju supstrate bogate šećerima i hranjivima. Gljive koje su ovim istraživanjem utvrđene na žiru pripadaju grupi saprofita, parazita, fakultativnih parazita i saprofita, nekrotrofnih parazita i specijaliziranih parazita. Saprofiti i nekrotrofni paraziti imaju sposobnost enzimatske razgradnje mrtvih stanica, napadaju ostatke raslinja i odumrla biljna tkiva, stvaraju mnoštvo spora koje se prenose pretežno zrakom kao sastavni dio aeroplanktona (Prochazkova u Kristek i drugi, 1992.). Nekrotrofni paraziti i fakultativni saprofiti osim toga sposobni su napadati i žive stanice domaćina. Od nekrotrofnih parazita koji dolaze na žiru nađeni su Ciboria batschiana, Chaetomium globosum i Alternaria alternata. Gljiva C. batschiana je ujedno i specijalizirani parazit koji napada zdravi žir i predstavlja veliku opasnost za urod žira. To je ujedno i najčešće prisutna gljiva na žiru sakupljenim u listopadu, od ukupno zaraženog žira ona je zastupljena s 35 do 60%. Saprofiti kao i paraziti mogu sudjelovati u oštećivanju sjemena i u smanjenju njegove kvalitete tj. klijavosti i vitalnosti. Saprofitske gljive Penicillium spp., u skladišnim uvjetima, zarazom žira i posebno dijela gdje se nalazi klica utječe na smanjenje klijavosti, a time i količine sjemena za pošumljavanje. Fakultativne gljive dio života provedu kao saprofiti na odumrloj organskoj tvari a dio života provode kao paraziti na živom organizmu poput gljiva iz rodova Fusarium i Pestalotia stoga su one uvijek potencijalna opasnost kako za mlade tako i za otpale žirove. Većina saprofitskih gljiva i nekrotrofnih parazita mogu se uzgajati na umjetnom hranjivom supstratu što je olakšavalo njihovo istraživanje. Razne vrste gljiva uzrokuju na žiru različite ili slične simptome bolesti. Iste gljive mogu stvarati različite simptome i djelovati na različite načine kao npr. gljive iz roda Fusarium koje uzrokuju pljesnivost i trulež žira, te traheomikozu klijanaca sa žira. Gljive iz roda Ophiostoma uzrokuju trulež žira i traheomikozu. Verticillium spp. uzrokuje pljesnivost i traheomikozu nazvanu verticiloza. Zbog sličnih simptoma potrebno je provoditi detaljnu fitopatološku analizu žira stavljanjem u vlažne uvjete na filter papir, nasađivanjem na hranjivu podlogu kako bi se dobila kultura gljiva koja omogućava točnu determinaciju. Bolesti na žiru uzrokovane utvrđenim gljivama, s obzirom na simptome koje izazivaju, prema Prisjažniku (1949.), Regentu (1980.) i Glavašu 1999. mogu se svrstati u određene tipove bolesti poput pljesnivost, pjegavost, mumifi- Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 220 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 8. RASPRAVA kacija, trulež, traheomikoza (ofiostomoza, verticiloza). U tablici 8.2. prikazane su vrste gljiva i simptomi bolesti žira koje uzrokuju. Ovakav prikaz bolesti sjemena, prema simptomima i tipovima, može poslužiti za orijentaciono određivanje o kojim se gljivama na žiru radi. Tablica 8.2. Tipovi bolesti sjemena prema Prisjažnik, Regent i Glavaš Tip bolesti žira Gljiva – uzročnik Pjegavost Gloeosporium quercinum Phoma spp. Mumifikacija Sclerotinia pseudotuberosa Pljesnivost (paučina, bodlje, plijesan) Alternaria spp. Aspergillus spp. Botrytis cinerea Fusarium spp. Penicillium spp. Trichothecium roseum Stereum hirsutum Verticillium spp. Ostale bolesti – trulež (smeđe ili crne mrlje) Fusarium spp. Gloeosporium quercinum Ophiostoma spp. Pestalotia glandicola Phomopsis quercella Schizophyllum commune Stereum hirsutum Traheomikoza (venuće biljaka) Fusarium spp. Ophiostoma spp. Verticillium spp. Ofiostomoza Ophiostoma spp. Verticiloza Verticillium spp. Gljivične uzročnike bolesti (Čizmić, 1987. i 1990.) nalazimo: na površini sjemena, u sjemenoj ovojnici, u unutrašnjosti sjemena i na zaraženim biljnim ostacima pomiješanim sasjemenom. Na površini sjemena gljiva dolazi u obliku spora ili micelija. Tada govorimo o kontaminaciji sjemena. Gljiva miruje na sjemenu dok ne dođe u pogodne uvjete kada počinje rasti, razmnažati se i širiti zarazu. Na površini žira utvrđene su gljive Alternaria spp. i Fusarium spp. Kada se gljiva nalazi pliće ili dublje u sjemenoj lupini u obliku dormantnog micelija govorimo o zarazi. Česte gljive koje smo nalazili u sjemenoj lupini su Alternaria spp., Botrytis cinerea i Verticillium spp. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 221 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 8. RASPRAVA O unutarnjoj zarazi sjemena govorimo u slučaju kada gljiva naseli unutrašnjost sjemena (endosperm, kotiledone, embrij). Gljive koje su uzrokovale unutarnju zarazu na kotiledonima žira su Alternaria spp., Fusarium spp., Ciboria batschiana, Phomopsis quercella i dr. Kada su gljive prisutne na biljnim ostacima pomiješanim sa sjemenom ili dolaze u obliku spora, sklerocija, gala ili plodnih tijela govorimo o kontaminaciji. Najčešća gljiva prisutna na biljnim ostacima pomiješanim sa žirom bila je C. batschiana. Kontaminacija sjemena odvija se najčešće jednostavnim širenjem inokuluma tj. spora vjetrom, kišom, insektima, pticama, dodirom zaraženog i zdravog materijala ili nekim drugim načinima. Zaraza tj. unutarnja infekcija sjemena mnogo je kompliciranija. Razni čimbenici, osobito fiziološka stanja kako patogena tako i domaćina te vremenske prilike moraju djelovati zajedno kako bi se ostvarila infekcija. Poznavanjem rodova i vrsta gljiva na žiru te da li se radi o kontaminaciji, zarazi ili unutarnjoj zarazi možemo pretpostaviti kakve štete možemo očekivati i na koji način ih suzbiti, koje mjere zaštite primijeniti i tako sačuvati urod. Praćenjem mikoflore kroz mjesece (razvojne faze žira) i godine te zrelog žira nakon čuvanja u hladnjaku može se zapaziti promjena u mikoflori. Na nerazvijenom žiru pojavljivale su se najčešće gljive iz rodova Fusarium, Alternaria, Trichothecium, Trichoderma, Penicillium i Chaetomium. One se nalaze posvuda u prirodi, na biljnim ostacima, stvaraju mnoštvo spora i lako se šire vjetrom i kišom te tako mogu zaraziti nježno tkivo mladih žirića. Na zrelom žiru najčešće nalazili smo gljive iz rodova Ophiostoma, Phomopsis, Ciboria, Fusarium i Penicillium. One mogu zaraziti žir nošene vjetrom i kišom ali isto tako zaraza može nastupiti u ranoj fazi razvoja žira ulaskom u plodnicu kroz njušku tučka gdje spora ili micelij čekaju povoljne uvjete za razvoj. Gljive unutrašnjosti žira tj. kotiledona su ujedno i najopasnije jer ih je najteže suzbiti s obzirom da su zaštićene ljuskom žira i fungicid teško može prodrijeti do njih. Na zrelom žiru nakon čuvanja u hladnjaku najčešće su se razvile gljive iz rodova Penicillium, Ciboria, Phomopsis, Ophiostoma, Fusarium i Stereum. Te gljive su već bile prisutne u kotiledonima i ispod ljuske, mogle su biti unešene biljnim ostacima (trulim lišćem, kapicama žira) ili su naknadno zarazile žir zračnim strujanjima. Mikoflora po godinama istraživanja u slijedu od najvećeg do najmanjeg postotka pridolaska na žiru prikazana je u tablicama od 1 do 6. U grafikonima 8.1., 8.2. i 8.3. prikazana je cjelokupna mikoflora žira sakupljanog od VII do X mjeseca odvojeno po godinama: 1996., 1997. i 1998. Uočava se velika raznolikost mikoflore iz 19 rodova gljiva. U grafikonu 8.4. prikazana je mikoflora žira sakupljena u X mjesecu za sve te tri godine zajedno koju čini 13 vrsta i rodova gljiva. U grafikonima 8.5. i 8.6. prikazana je mikoflora žira sakupljanog u listopadu 1999. ispod krošanja bogatog urodom i 2000. godine kada je sakupljan okularno zdrav žir. Analiza je Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 222 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 8. RASPRAVA učinjena nakon čuvanja žira u hladnjaku. Mikoflora je siromašnija, čini je 8 vrsta i rodova gljiva, uglavnom gljive unutrašnjosti žira i saprofitske gljive od kojih se najčešće javljaju gljive iz roda Penicillium. Žir sakupljan metodom slučajnog uzorkovanja bez selekcije pokazuje veću raznolikost mikoflore od sakupljanog okularno zdravog žira čuvanog u PVC vrećicama u hladnjaku. Aspergillus spp. Doratomyces Stereum hirsutum Schizophyllum Verticillium sp. Gloeosporium Chaetomium globosum Arthrobotryis spp. Botrytis cinerea Pestalotia spp. Trichoderma viride Fusella olivacea Trichothecium roseum Alternaria alternata Ophiostoma spp. Penicillium spp. Fusarium spp. Phomopsis quercella Ciboria batschiana 0 5 10 % 15 20 25 30 Grafikon 8.1. Mikoflora žira, 1996. godina (VII-X mjesec) Verticillium sp. Doratomyces stemonitis Stereum hirsutum Pestalotia spp. Schizophyllum commune Gloeosporium Chaetomium globosum Botrytis cinerea Arthrobotryis spp. Aspergillus spp. Trichoderma viride Fusella olivacea Ophiostoma spp. Trichothecium roseum Penicillium spp. Alternaria alternata Ciboria batschiana Phomopsis quercella Fusarium spp. 0 5 10 % 15 20 25 30 Grafikon 8.2. Mikoflora žira, 1997. godina (VII-X mjesec) Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 223 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 8. RASPRAVA Schizophyllum commune Stereum hirsutum Verticillium sp. Aspergillus spp. Botrytis cinerea Doratomyces stemonitis Arthrobotryis spp. Pestalotia spp. Gloeosporium quercinum Chaetomium globosum Fusella olivacea Trichoderma viride Trichothecium roseum Alternaria alternata Ophiostoma spp. Penicillium spp. Fusarium spp. Phomopsis quercella Ciboria batschiana 0 5 10 % 15 20 25 Grafikon 8.3. Mikoflora žira, 1998. godina (VII-X mjesec) Botrytis cinerea Alternaria alternata Trichothecium roseum Stereum hirsutum Trichoderma viride Schizophyllum commune Gloeosporium quercinum Pestalotia spp. Fusarium spp. Penicillium spp. Ophiostoma spp. Phomopsis quercella Ciboria batschiana 0 5 10 15 20 % 25 30 35 40 Grafikon 8.4. Mikoflora žira, 1996-1998. godine, X mjesec Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 224 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 8. RASPRAVA Trichothecium roseum Bakterijska trulež Fusarium spp. Botrytis cinerea Phomopsis quercella Penicillium spp. Penicillium glandicola Ciboria batschiana 0 5 10 15 20 % 25 30 35 40 Grafikon 8.5. Mikoflora žira, 1999. godina, X mjesec Pestalotia sp. Fusarium spp. Stereum hirsutum Botrytis cinerea Phomopsis quercella Ophiostoma sp. Penicillium spp. Penicillium spp. i kukci Ciboria batschiana 0 10 20 30 40 50 60 70 % Grafikon 8.6. Mikoflora žira, 2000. godina, X mjesec Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 225 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 8. RASPRAVA Žir je u svim fazama radova: od proizvodnje u sastojinama, sakupljanja i dorade, postupka sa sjemenom, skladištenja tj. čuvanja u različitim uvjetima, rukovanja od proizvođača do potrošača te do pripreme za sjetvu i sadnju podložan zarazi gljivama i pojavi bolesti. Sa promjenom uvjeta u kojima se žir nalazi mijenja se i mikoflora uslijed fizioloških promjene anatomije i hranjiva unutar žira kao i uvjeta vlage žira i okoline. Još dok je na stablu žir biva zaražen različitim gljivama prilikom formiranja cvjetnih pupova, prilikom cvjetanja, kod tvorbe ploda i tijekom njegova dozrijevanja. U vrijeme polaganja jaja kukaca (npr. Curculio spp.) različite gljive bivaju unešene u žir. Zaraza može nastati prolaskom spore kroz tučak sve do plodnice, naseljavanjem spora i razvoja micelija na i u hilumu, ulaskom spora kroz provodne elemente koji vode do cvijeta odnosno ploda u formiranju, kroz mehanička oštećenja nastala djelovanjem insekata i na razne druge načine. Žir se kod nas najčešće sabire s tla ručno. Dok leži na tlu, na listincu, okružen ranije otpalim oštećenim i zaraženim žirom zaraza nastaje direktnim kontaktom sa zaraženim materijalom i sporama nošenim strujanjem zraka, vjetrom, kišom i insektima. Što se žir kasnije sabire sa šumskog tla to je zaraženiji gljivama (Potlajčuk, 1953.). Prilikom transporta žir može izgubiti na vlazi, koja mora iznositi minimalno 40%, čime se umanjuje njegova kvaliteta i omogućava naseljavanje plijesni pogotovo gljive iz roda Penicillium spp. Osim toga mogu nastati mehanička oštećenja koja predstavljaju ulazna mjesta za gljivičnu zarazu. Kod skladištenja veoma je važan sadržaj vlage u žiru, inicijalni gljivični inokulum na već postojećem zaraženom žiru, metoda skladištenja, sadržaj vlage i temperatura na mjestu skladištenja jer sve to utječe na širenje zaraze gljivama. U skladištu se zaraza veoma lako i brzo širi s bolesnog na zdravi žir. Prilikom predsjetvene pripreme zaraza žira može se proširiti iz materijala za posipanje sjemena i stratifikaciju kao što su: pijesak, zemlja i humusni materijal. Kod sjetve žira zaraza je moguća sjetvenim supstratom ili kroz zemlju u rasadnicima zemljišnim gljivama. Važni čimbenici za razvoj gljiva, njihovo širenje i infekciju su visoka vlaga sjemena, zračna vlaga i visoka temperatura okoliša. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 226 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 8. RASPRAVA 8.3. Utjecaj vremenskih prilika na urod žira i pojavu bolesti Vanjski faktori kao što su vremenske prilike poput topline, vlage i oborina značajno utječu na proces klijanja spora gljiva, na samu infekciju i tok bolesti (Kišpatić 1991.). Opći meteorološki podaci prikazuju makroklimu za cijelo područje i daju opću prognozu. Unutar svake šumske populacije postoji i lokalna mikroklima koja se djelomično razlikuje od makroklime. Prema Medvedoviću (1996.) mikroklimatske osobitosti neke šumske zajednice određene su makroklimatskim prilikama šireg područja, flornim sastavom zajednice i sastojinskom strukturom. Utjecaj opće klime šireg prostora najjači je u vrhu krošanja drveća a prema dolje sve je jači utjecaj sastojina (Medvedović 1996.). Ovdje je prodiskutirano kako su vremenske prilike u makroklimatskim relacijama mogle utjecati na urod žira i njegovo zdravstveno stanje. Mikroklimatske izmjere u koliko bi bile moguće za takvu analizu bile bi pogodnije. U šumi gdje vladaju mikroklimatski uvjeti na koje utječu biljke, tlo, pokrov tla i sklop, vlaga je uvijek viša nego na mjernim meteorološkim stanicama. Za rast i razvoj gljiva potrebna je visoka vlaga i stoga su šumski uvjeti pogodni za infekciju žira gljivama. Šumska područja koja imaju vlažnu i relativno toplu klimu i rastu na vlažnim tlima izložena su čestoj zarazi gljivama i oštećenjima (Vajda 1974.). Kišpatić 1991. kaže da je za samu fruktifikaciju gljiva najvažniji faktor relativna zračna vlaga koja iznosi kao optimum za veliku većinu u nas patogenih gljiva 85-90% i više te da prevlažno nije praktički nikada tj. da se optimum za klijanje i infekciju poklapa s maksimumom vlage, kišom, rosom ili maglom. Vajda iznosi da životna sposobnost gljiva raste od 0 °C na više i da je maksimum između 20 i 30 °C. Vremenske prilike osim na gljive utječu i na aktivnosti kukaca kojima odgovara toplo i suho vrijeme. Usporedbom vremena, uroda i oštećenosti moglo se zapaziti i raspraviti slijedeće: Vremenske prilike za istraživana područja u razdoblju 1996. do 2000. razmatrane su u odnosu na količinu uroda odnosno količinu sakupljenog žira i njegovu oštećenost tih godina. Pri tom su korišteni podaci Državnog hidrometeorološkog zavoda u Zagrebu (DHMZ) klimatski parametri i ocjena klime koja se temelji na odstupanju temperature i oborina od srednjih "normalnih" tridesetogodišnjih vrijednosti (1961-1990. godine) u Hrvatskoj (Prikazi 1997, 1998, 1999, 2000, 2001). Prema DHMZ ocjeni klime za 1996. godinu na području istraživanja temperatura je bila uglavnom u klasi hladno osim na području Karlovca gdje je bilo ekstremno hladno. Što se tiče oborina veći dio područja kontinentalnog istraživanog dijela ocijenjen je klasom normalno, a područje Bjelovara kišno. Ožujak je bio hladan i ekstremno sušan i stoga nepovoljan za aktiviranje gljiva koje prezimljuju na biljnim ostacima. U vrijeme cvjetanja u travnju bilo je umjereno toplo s normalnim tj. umjerenim količinama oborina što je moglo pogodovati oslobađanju spora Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 227 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 8. RASPRAVA sa zaraženog otpalog lišća, grana, prošlogodišnjeg žira s tla te infekciju dijelova cvijetova. Za vrijeme formiranja ploda bilo je uglavnom toplo, u lipnju je bilo ekstremno sušno što je moglo pogodovati aktivnosti kukaca. U srpnju i kolovozu je bilo normalno kišno i toplo te pogodno za razvoj gljiva. U zadnjoj fazi razvoja ploda u rujnu bilo je ekstremno hladno i kišno s osrednjom i nadosrednjom vlagom. U listopadu je bilo umjereno kišno te umjereno toplo što omogućuje razvoj gljiva kao i kukaca. Rezultat ovakvih vremenskih prilika bio je osrednji urod žira. Godina 1997. bila je u većem dijelu toplija od prosjeka, zima je bila toplijom od uobičajene što je moglo utjecati na povećanu brojnost štetnih kukaca, proljeće je bilo nešto hladnije, ljeto toplije a jesen u granicama normale. Ekstremna odstupanje temperatura zabilježena su u travnju (7-8 °C) kada je ujedno na cijelom području istraživanja registrirano 5-9 dana s mrazom što je moglo negativno utjecati na cvatnju. U vrijeme formiranja ploda, od lipnja do kolovoza bilo je toplo s različitim količinama oborina, od malo kišno do vrlo kišno, što je omogućilo djelovanje štetnika kao i gljivičnih organizama. U rujnu je bilo toplo i sušno s nadosrednjom vlagom i pogodno za život kukaca. Listopad je uglavnom bio hladan i kišan s nadosrednjom vlagom. Posljedica niskih temperatura s mrazom u vrijeme cvjetanja može biti uzrokom izostanka uroda i veoma slabog uroda. Područje istraživanja 1998. godine bilo je u sjevernom dijelu zemlje u klasi toplo dok je u južnom dijelu bilo vrlo toplo. Što se tiče oborina sjeverno zapadni dio i istočni dio Hrvatske bili su normalno kišni dok je središnji dio bio u klasi kišno. Općenito Hrvatska je 1998. godine bila mnogo toplija i s više oborina od dugogodišnjeg prosjeka. U vrijeme cvatnje bilo je toplo s normalnom količinom kiše što je omogućavalo razvoj gljiva i kukaca. Cvatnji je prethodilo hladno do umjereno hladno te sušno do malo kišno vrijeme s niskom do osrednjom vlagom što nije bilo pogodno za razvoj gljiva i kukaca. Za vrijeme razvoja žira bilo je vrlo toplo s oborinama u klasi kišno i vrlo kišno što je moglo biti uzrokom opadanja mladog zdravog žira posebno na području Jastrebarskog u kolovozu a isto tako moglo je pogodovati i razvoju biljnih bolesti. U rujnu je bilo toplo, kišno te vrlo kišno a u vrijeme opadanja žira bilo je toplo i kišno te pogodno za nove infekcije i širenje gljiva. Relativna vlaga u proljetnim, ljetnim i jesenskim mjesecima je bila niska da nadosrednja a u zimi je bila visoka kao i uvijek. Urod je 1998. godine bio većinom slab do osrednji, jedino je u Bjelovaru bio veoma dobar. Godina 1999. okarakterizirana je kao vrlo topla i ekstremno topla s oborinama u klasi normalno, kišno te vrlo kišno. U periodu cvatnje bilo je toplo (prosječno 12,1 °C) s pretežno malom do umjerenom količinom oborina što je bilo povoljno za kukce i gljive. Cvatnji je prethodilo umjereno toplo (prosječno 8,2 °C) i sušno (prosječno 32 mm kiše) s osrednjom do visokom vlagom što odgovara razvoju kukaca i gljiva. Za vrijeme razvoja žira temperature su bile uglavnom visoke s Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 228 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 8. RASPRAVA oborinama u klasi normalno i kišno što je povoljno za gljive dok je bio rujan topao s malo kiše pogodan za kukce. U godini 1999. uroda nije bilo ili je bio veoma slab na što su utjecale i vremenske prilike s obzirom na visoke temperature i visoku vlagu tokom cijele godine te umjerenu količinu oborina, vrijeme pogodno za razvoj i širenje bolesti. Godina 2000. na cijelom području Hrvatske bila je u klasi ekstremno topla te u najvećem dijelu u klasi sušno. Urod te godine bio je dobar do veoma dobar. Za vrijeme cvatnje bilo je toplo (prosječno 14,3 °C) te normalno kišno do kišno. Cvatnji je prethodilo umjereno hladno s malo oborina i malo vlage. U periodu razvoja žira bilo je toplo do vruće s malo padalina i niskom do osrednjom vlagom. Tijekom proljeća i ljeta vlaga je bila niska do nadosrednja dok je u jesen i zimi bila nadosrednja do jako visoka. Vremenske prilike nisu pogodovale razvoju gljiva na žiru u vremenu njegova sazrijevanja zbog niske vlage i malo oborina. Prateći urod žira tokom ovih pet godina uočavamo da je svake druge godine urod izostao ili je slab te možemo zaključiti da je to rezultat kako nepovoljnih vremenskih prilika tako i potrebe stabala za obnovom hranjivih tvari potrebnih za plodonošenje. Analiza vremenskih prilika i procjena uroda žira pomogla bi u donošenju odluka o potrebi za zaštitom žira još u vrijeme njegova razvoja na stablu. 8.4. Rast nekih značajnih vrsta gljiva žira u različitim temperaturnim uvjetima Prilikom istraživanja mikoflore uočeno je da neke gljive, na hranjivoj podlozi u laboratoriju, rastu brzo dok se druge sporo razvijaju što navodi na razmišljanje da o brzini rasta ovisi i brzina širenja zaraze i prorašćivanje tkiva žira te da neke gljive vrlo lako šire zarazu i predstavljaju opasnost posebno u uvjetima skladištenja. Da bi se utvrdila brzina rasta postavljen je pokus s najčešćim gljivama koje dolaze na žiru u prilagođenim sobnim uvjetima. Najjednostavnija metoda ispitivanja rasta gljive je linearna izmjera (More-Landecker 1972.). Promjene u dijametralnom rastu razvijajuće kolonije na hranjivoj podlozi mjere se i promatraju u određenom periodu. Kod micelarnih gljiva rast je ograničen na hifalne vrhove koji rastu više manje konstantno linearno i šire rubove kolonija u linearnom odnosu. Rast micelija može se podijeliti na slijedeće faze: faza mirovanja u kojoj micelij ne raste, faza linearnog rasta sa brzim i približno linearnim rastom i faza odumiranja kada prestaje rast ili dolazi do odumiranja micelija. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 229 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 8. RASPRAVA Za laboratorijsko kultiviranje gljiva i ispitivanje rasta i razvoja koriste se odgovarajući supstrati a u našem slučaju to je bila hranjiva podloga Potato Dextrosa Agar (PDA). Za rast gljiva potrebna je odgovarajuća temperatura. Prema More-Landecker 1972. gljive imaju slične temperaturne potrebe, iako ima i iznimaka. Većina gljiva treba minimalnu temperaturu za rast od 0-5 °C. U većini slučajeva optimalni temperaturni raspon nalazi se približno između 15 i 30 °C. Rast gljiva povećava se povećavanjem temperature dok ne dostigne optimum. Vršna točka kod koje dolazi do smrti za većinu gljiva nalazi se između 50 i 60 °C u vrućoj parnoj kupelji ali da se unište gljive truležnice drveta potrebna je temperatura od 105 °C u vremenu od 12 sati. Za rast gljive trebaju visok nivo vlage. Maksimalni rast za većinu gljiva postiže se na relativnoj vlazi između 95-100% a rast se smanjuje ili prestaje na vlazi od 80-85%. Samo neke gljive će rasti na relativnoj vlazi od 65% i niže. U laboratorijskim analizama uvjeti za potrebnu vlagu su zadovoljavajući jer agar tj. hranjiva podloga sadrži vodu vezanu unutar gela i atmosfera unutar petrijeve zdjelice sadrži relativnu vlagu oko 100%. U prirodi mogućnost rasta gljiva na postojećem supstratu (biljci domaćinu) djelomično je određena i vlagom koju sadrži supstrat. Žir je dobra podloga jer može sadržavati dovoljno vlage za rast gljiva. Od ispitivanih gljiva Trichoderma viride najbrže raste i kao nekrotrofni parazit može utjecati na smanjenje klijavosti žira kako u prirodi tako i u uvjetima skladišta a kao saprofit može rasti na žiru oštećenom kukcima i predstavljati novi izvor zaraze za zdravi žir. Rast gljive na 22-25 °C iznosio je 56 mm/dan a na 11-15 °C 18,2 mm/dan. Gljiva Ciboria batschiana na PDA hranjivoj podlozi u petrijevoj zdjelici vrlo brzo raste na temperaturi 22-25 °C prosječno 17,5 mm/dan a na temperaturi 11-15 °C prosječno 6,0 mm/dan. Njen brzi rast omogućava brzo širenje zaraze za vrijeme transporta, na mjestima skladištenja ali isto tako i u šumi gdje se nalazi na prošlogodišnjem žiru sa kojeg prelazi na novootpao zdravi žir. Čest slučaj zaraze i to masovne, gdje strada velika količina žira nastaje prilikom čuvanja žira u šumi pod prostirkom te u skladištu u plastičnim vrećama u uvjetima povećane vlage zraka i žira. Gljiva može potpuno uništiti urod žira. Zaraženi žir ispod listinca na sebi nosi sklerocije iz kojih se u jesen formiraju apoteciji koji predstavljaju novi izvor zaraze. Tako zaražen žir može stajati nekoliko godina pod listincem i biti stalni izvor zaraze za žir slijedećih rodnih godina. Površinska zaštita fungicidima može djelomično zaustaviti širenje zaraze ali ne i potpuno jer se gljiva razvija ispod ljuske i širi se zračnim micelijem. Gljiva Phomopsis quercella, specijalizirani parazit, uzročnik truleži žira, na temperaturi od 22-25 °C raste prosječno 15,3 mm/dan a na nižim temperaturama 11-15 °C 7,6 mm/dan što ukazuje da može relativno brzo prorasti i uništiti žir. Rast Fusarium avenaceum na temperaturi 22-25 °C iznosi 12,1 mm/dan a na 11-15 °C 4,5 mm/dan. Raste nešto sporije ali još uvijek dovoljno brzo i ostavljajući dovoljno vremena, prije nego uništi žir, za prelazak na klijance. To je parazitska gljiva i uzročnik traheomikoze klijanaca. Gljiva Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 230 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 8. RASPRAVA prorasta tkivo žira i ako zahvati klicu onemogućava klijanje uzrokujući trulež. Za rast i razvoj gljive Graphium roboris (nesavršeni stadij gljive Ophiostoma roboris) na hranjivoj podlozi pa tako i u tkivu žira tj. kotiledima potrebno je duže vrijeme. Na temperaturi 22-25 °C raste 4,8 mm/dan a na 11-15 °C 2,8 mm/dan. Početna zaraza na žiru razvija se sporo, kada žir dođe na tlo i proklije te se razvije mlada biljka, gljiva napreduje i zaraza može prijeći na klijance i mlade biljke i uzrokovati opasnu bolest venuće. Osim temperature i vlage na rast i razvoj gljiva djeluju i mnogi drugi faktori. MoreLandecker 1972. kaže da je rast gljiva skupni rezultat zajedničkog međudjelovanja različitih faktora hranjiva i okolišnih faktora (temperatura, vlaga, svjetlo, kiselost, prozraka) a svaki kontrolira mnogobrojne funkcije stanica i njihove metaboličke procese. Što se tiče kiselosti gljive imaju širok pH opseg na kojem mogu rasti ali optimum pH za većinu gljiva je na kiseloj strani skale ispod pH 7 a tome je prilagođena kiselost hranjive podloge koja se koristi za laboratorijska ispitivanja. Aerobne gljive mogu koristiti samo slobodan kisik iz atmosfere dok im visoka koncentracija CO2 inhibira rast. Gljive nisu uglavnom osjetljive na svjetlo iako ono može utjecati na rast i na formaciju reproduktivnih struktura. Najveći utjecaj svjetla na rast gljiva očituje se u inhibiranju rasta na jakom svjetlu. Optimalni uvjeti za vegetativni rast ne moraju se poklapati i sa optimalnim uvjetima za reprodukciju. Optimalni uvjeti za sporulaciju mogu biti viši ili niži nego za vegetativni rast i razlikuju se od vrste do vrste a mogu se razlikovati i za tvorbu različitih spora. Mnoge gljive stvaraju koncentrične krugove vegetativnog micelija i spora ili fruktifikacija kada su izložene smjeni svjetla i tame. Trichoderma viride na svjetlu stvara zeleni vegetativni micelij i reproduktivne strukture dok u tami formira bijeli do blijedo zeleni micelij. Graphium roboris stvara tamnije i svjetlije koncentrične krugove slijedeći smjenu dana i noći. Nagla promjena temperature kod Fusarium avenaceum bila je uzrokom stvaranja reproduktivnih tijela. Gljive će u laboratoriju i u prirodi plodonositi samo ako su potrebe za hranjivom i svi okolišni uvjeti unutar opsega tolerancije tj. ako su zadovoljavajući. 8.5. Izmjera spora računalnim programom Kao pomoć prilikom determinacije gljiva i za ispitivanje mogućnosti novih tehnika kod izmjere spora, odabrane su najčešće gljive koje dolaze na žiru i izmjerene su dimenzije spora primjenom računala i programa DP-Soft. Izmjerene dimenzije spora gotovo svih vrsta gljiva su unutar granica već postojećih izmjera autora Brežnev i drugi, 1962. i Booth 1971. Kod nekih izmjera postoje manja odstupanja a razlog tome mogu biti nedovoljno jasni uzorci na objektnom stakalcu Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 231 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 8. RASPRAVA zbog čega su rubne granice spora nejasne kao kod npr. mikrospora te premalog broj spora u samom uzorku kao i prekratkog vremena predviđenog za izmjeru u Olympusovom uredu. Kod izmjere stilospora oblika bumeranga gljive Phomopsis, izmjere računalnom tehnikom su preciznije jer je lakše slijediti zaobljenu liniju spora nego klasičnim načinom te su stoga izmjere duljina spora odstupaju od izmjere prema Brežnev i drugi 1962. Prilikom izmjera treba imati kvalitetne uzorke na objektnom stakalcu kako bi se mogle učiniti jasne snimke. Metoda je brza i pouzdana, izmjere se automatski upisuju u računalo, odmah se mogu statistički obraditi stoga se preporučuje za primjenu u fitopatološkom laboratoriju. Analiza podataka govori da su rezultati pokazali dobro slaganje s prijašnjim izmjerama drugih autora i da je ova metoda relativno pouzdana za determinaciju gljiva na osnovu obilježja duljina i širina spora. 8.6. Zaštita žira od gljiva i gljivičnih bolesti Biljne bolesti, uzrokovane gljivama iz sjemena, umanjuju proizvodnju sjemena, njegovu kvalitetu, onemogućuju razvoj sjemena i klijanje, uzrokuju propadanje klica i klijanaca te ugibanje biljaka. Da bi dobili kvalitetno sjeme i dovoljnu količinu sjemena za obnovu šuma potrebno je sjeme zaštititi. U zaštiti sjemena u našoj šumarskoj praksi najčešće se upotrebljavaju fungicidi Cuprablau, Dithane, Panoctine, Captan, Thiram i Vitavax. U ovom radu u pokusu zaštite sjemena žir je tretiran fungicidima primjenom nekoliko metoda: Vitavax je primijenjen metodom vlaženja sjemena gotovom tekućom suspenzijom pri čemu sušenje sjemena nije bilo potrebno. Dithane S60 primijenjen je metodom suhog tretiranja utrljevanjem praha u sjeme. Captan WP 50 i Cuprablau Z primijenjeni su vlažnim zaprašivanjem tj. muljanjem guste suspenzije. U šumarskoj praksi prilikom tretiranja žira najčešće se koristi suho tretiranje prašenjem te tretiranje vlaženjem i vlažnim zaprašivanjem. Pokus tretiranja sjemena fungicidima postavljen je u cilju ispitivanja djelotvornosti zaštite sjemena od gljivičnih bolesti primjenom fungicida kao i ispitivanje djelotvornisti različitih vrsta fungicida. Unatoč tretiranju žira fungicidima u uzorcima žira laboratorijskog pokusa utvrđena je prisutnost gljiva i truleži ispod ljuske. Fungicidi kojima je žir tretiran mogu površinski djelovati tako da uništavaju spore na površini žira i time onemogućuju razvoj gljiva. Osim toga mogu spriječiti širenje micelija gljive sa zaraženog na zdravi žir. Ali ne mogu zaštiti žir u cijelosti jer gljive koje se već nalaze u samom sjemenu, ispod ljuske, na i u kotiledonima poput Phomopsis, Ciboria, Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 232 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 8. RASPRAVA Ophiostoma i Fusarium nesmetano će nastavit svoj rast i razvoj koristeći sjeme kao hranjivu podlogu. Fungicidi dezinficiraju mali dio tla oko sjemena i time mogu samo djelomično spriječiti da gljive iz tla zaraze sjeme. Iz poljskog pokusa, statističkom analizom, zaključili smo da svi fungicidi imaju pozitivno djelovanje na zaštitu sjemena odnosno da su svi ispitani fungicidi više manje djelotvorni i da ne postoji značajna razlika među njima ali da postoji značajna razlika između tretiranog i netretiranog sjemena što upućuje na obaveznu potrebu tretiranja sjemena prije sjetve i prije skladištenja. Prema Prochazkova i Jančarik u Kristek i drugi, (1992.) problem kod primjene fungicida je u tome što aktivna tvar ne prodire dovoljno do kotiledona i ne može spriječiti propadanje već zaraženog žira. Primjena fungicida usporava ili spriječava širenje zračnog micelija između uskladištenog žira. Osim kemijske zaštite žira Prochazkova preporučuje fizičku zaštitu koja se sastoji u močenju plodova u vodi 8-10 dana u borbi protiv crne truleži jer je gljiva osjetljiva na nedostatak kisika. Fizička zaštita uključuje i termoterapiju tj. močenje sjemena u toploj vodi temperature 42 °C kroz vrijeme od 10 sati. Ova zaštita posebno je uspješna u borbi protiv patogene gljive Ciboria batschiana na žiru. Najbolja je kompleksna zaštita od sabiranja do sjetve. Prilikom sabiranja treba sakupljati sjeme iz zdravih sastojina, što se može utvrditi određivanjem učešća napadnutog sjemena još u vrijeme proizvodnje. Osim toga trebalo bi očistiti sjemenske sastojine odstranjivanjem prethodno otpalog oštećenog i zaraženog sjemena pred glavno opadanje zdravog, dozrelog sjemena. Moguće je i sakupljanje sjemena s plastične folije ili mreže kako bi se izbjegao kontakt s tlom. Nakon sabiranja žir bi trebalo dopremiti do mjesta obrade i uskladištenja u najkraćem roku kako bi se spriječilo isušivanje ili zaparivanje žira. Prilikom transporta žir treba prevoziti u prozračnim, čistim i suhim kontejnerima. Kod predsjetvene pripreme žir treba tretirati kemijskim sredstvima i/ili fizičkim metodama. Pred skladištenje treba provesti kemoterapiju, termoterapiju ili oboje. Prilikom skladištenja treba osigurati optimalne uvjete (čistoća, prozraka) temperatura skladišta za duže čuvanje žira treba iznositi između –1 i 3 °C a vlaga žira ne smije biti manja od 40%. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 233 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 9. ZAKLJUČAK 9. ZAKLJUČAK 9. ZAKLJUČAK Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 234 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 9. ZAKLJUČAK Temeljem istraživanja i analiza dobivenih podataka mogu se donijeti slijedeći zaključci: Istraživanje mikoflore žira učinjeno je u reprezentativnim sjemenskim sastojinama hrasta lužnjaka raspoređenim u različitim dijelovima lužnjakovog areala i na uzorcima žira sakupljenim s više različitih lokaliteta. Da bi se utvrdio cjelokupan spektar vrsta gljiva u uzorcima žira, žir je analiziran raznim metodama i u uvjetima koji omogućuju razvoj prisutnih gljivičnih organizama na površini i u unutrašnjosti žira. Žir je analiziran u svim razvojnim fazama (od mladog do zrelog žira) i nakon skladištenja u hladnjaku. Zdravstveno stanje žira odnosno oštećenost žira po razvojnim stadijima, od srpnja do listopada, razlikuje se po postocima kategorija oštećenosti (kukci, gljive, gljive i kukci, glodavci i ptice). Sa razvojem žira smanjivao se postotak oštećenosti kukcima a povećavao se postotak zaraženosti gljivama i učešće zdravog žira. Zastupljenost glodavaca i ptica bila je u manjem postotku kao i kategorija kukci i gljive zajedno. Analizom mikoflore žira utvrđeno je 19 rodova sa 29 vrsta gljiva koje većinom pripadaju polifagnim vrstama što dolaze posvuda u prirodi. Većina gljiva ubraja se u saprofite ali ima i značajnih parazita od kojih su neki specijalizirani paraziti, nekrotrofni paraziti i fakultativni paraziti. Sve vrste gljiva bilo paraziti ili saprofiti utječu u većem ili manjem postotku na smanjenje klijavosti žira. Mladi žir, prosječne veličine 1,1 cm, sakupljen sredinom srpnja imao je najveći postotak oštećenosti kukcima 41,32 do 90,62% dok je oštećenost gljivama iznosila 1,28 do 28,43%. Oštećenost glodavcima i pticama kretala se od 0 do 14,08%, a kukcima i gljivama zajedno od 0 do 8,91%. Nezreli žir, prosječne veličine 1,8 cm, sakupljen sredinom kolovoza još uvijek je imao visok postotak oštećenosti kukcima koji se kretao od 55,59 do 85,45% a oštećenost gljivama iznosila je između 6,96 do 24,29%. Oštećenost glodavcima i pticama bila je između 0 i 13,94%, a kukcima i gljivama od 0,61 do 15,48%. Na mladom i nezrelom žiru sakupljenom u srpnju i kolovozu utvrđene su gljive iz rodova Fusarium, Alternaria, Penicillium, Trichothecium, Trichoderma, Ophiostoma, Phomopsis, Chaetomium, Botrytis, Doratomices, Fusella i Verticilium. Sredinom rujna žirovi su gotovo razvijeni, prosječne veličine 2,3 cm. Oštećenost kukcima iznosila je od 45,49 do 76,19%, gljivama 11,79 do 29,79%, zdravog žira bilo je između 9,24 do 27,33%, oštećenost glodavcima i pticama kretala se od 0 do 31,91% te kukcima i gljivama zajedno od 0 do 6,70%. Zreli žirovi, prosječne veličine 2,9 cm, sakupljeni sredinom kolovoza bili su oštećeni kukcima od 29,13 do 62,77%, gljivama 10,70 do 42,91%. Postotak zdravog žira kretao se od 15,33 do 45,95%. Oštećenost kukcima i gljivama iznosio je od 0,12 do 4,9 5% a kukcima i Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 235 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 9. ZAKLJUČAK gljivama zajedno 0 do 6,45%. Na gotovo razvijenom i razvijenom zrelom žiru sakupljenom u rujnu i listopadu najčešće su dolazile gljive: Ophiostoma, Ciboria, Phomopsis, Fusarium, Penicilium. U manjem postotku nalažene su gljive Gloeosporium, Pestalotia, Stereum, Schizophillum te Aspergillus. Gljive nađene na žiru uglavnom pripadaju pododjelu Fungi imperfecti (Deuteromycotina) skupini nesavršenih gljiva a manji broj pripada pododjelima Ascomycotina i Basidiomycotina skupinama savršenih gljiva. Većina gljiva pododjela Fungi imperfecti pripada razredima Hyphomycetes i Coelomycetes. U pododjelu Ascomycotina utvrđene gljive pripadaju razredima Plectomycetes, Pyrenomycetes i Discomycetes. Samo dvije utvrđene gljive ulaze u pododjel Basidiomycotina i razred Holobasidiomycetes. Gljive koje dolaze na žiru u najvećem postotku pripadaju rodovima Ciboria, Phomopsis, Fusarium, Penicillium, Ophiostoma, Alternaria, Trichothecium i Trichoderma. Na mladom zelenom žiru prevladavaju gljive poznate kao slabi paraziti kao što su gljive iz rodova Fusarium, Botrytis i Alternaria. Tijekom sazrijevanja žira pojavljuju se gljive poznate kao opasni uzročnici bolesti kao što su gljive iz rodova Ophiostoma, Phomopsis i Verticillium. Moglo bi se pretpostaviti da je tome razlog povećanje mase kotiledona i hranjiva u njima koja pogoduju kao supstrat za rast i razvoj gljiva kojima je potrebna veća količina hranjiva. Analiza mikoflore žira iz uroda 1999. godine nakon čuvanja u hladnjaku pokazuje da je od 12 analiziranih uzoraka u svima prisutna gljiva iz roda Penicillium; Ciboria batschiana utvrđena je u 83,33% uzoraka, Botrytis cinerea dolazi u 55% uzoraka, gljive iz rodova Fusarium i Phomopsis u 41,66% uzoraka, dok su gljive Stereum hirsutum i Treichothecium roseum te bakterijska trulež utvrđeni u 8,33% uzoraka. Zdravstveno stanje okularno zdravog žira iz uroda 2000. sakupljanog za pošumljavanje, nakon čuvanja u hladnjaku, prosječno za sve analizirane uzorke iznosi 83,10% zdravog žira (isklijali i svježe neisklijali) i 17,68% bolesnog i gnjilog žira. Prosječna klijavost iznosila je svega 37,68%, a razlog je metoda naklijavanja cijelog žira koja je korištena zbog praćenje razvoja i rasta gljiva na žiru. Analiza mikoflore žira iz uroda 2000. godine pokazuje da je od 19 analiziranih uzoraka u svima prisutna gljiva Ciboria batshiana, gljive iz rodova Penicillium dolaze u 94,74% uzoraka, Ophiostoma i Phomopsis prisutne su u 26,32% uzorka, Fusarium i Stereum u 15,79% uzoraka, Botrytis cinerea u 10,53% uzoraka i gljive iz roda Pestalotia u 5,26% uzoraka. Gospodarski i ekonomski najznačajnije gljive s obzirom na štetu koju mogu nanijeti su gljive iz rodova Ciboria, Phomopsis, Fusarium i Ophiostoma. U skladišnim uvjetima osim navedenih Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 236 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 9. ZAKLJUČAK gljiva i ostale gljive iz rodova poput Penicillium, Trichoderma i Trichothecium mogu utjecati na smanjenje klijavosti žira. Ciboria batschiana je opasna gljiva, uzročnik je bolesti nazvane mumifikacija žira i čini velike štete u šumi i u skladištu. Lako prelazi sa žira na žir šireći zarazu i ima sposobnost višegodišnjeg preživljavanja na starom otpalom žiru u listincu tako da uvijek dočeka slijedeći puni urod žira uzrokujući novu zarazu. Gljive iz rodova Phomopsis i Ophiostoma su uzročnici truleži žira a osim toga i traheomikozne gljive koje prelaze sa žira na mlade klijance izazivajući njihovo venuće. Gljive iz roda Fusarium znatno smanjuju klijavost žira, uzrokuje pljesnivost, trulež žira te traheomikozu i venuće klijanaca. Gospodarski značaj nekih gljiva poput Stysanus stemonitis i Fusella olivacea je zanemariv. Gljive antagonisti koje dolaze na žiru su Chaetomium globosum i Trichoderma viride. Analizirajući i uspoređujući podatke o zdravstvenom stanju i mikoflori žira pojedinih područja istraživanja, ekološko gospodarskih tipova i šumskih sjemenskih rajona možemo zaključiti da ono uglavnom ovisi o lokalnim uvjetima, klimatskim prilikama, fiziološkom stanju stabala i stanju sastojina. Može se uočiti pravilnost u kategorijama oštećenosti i pojavi vrsta gljiva prema razvojnim stadijidima žira ali ne i pravilnost između istih ekološko gospodarskih tipova šuma. Uspoređujući mikofloru žira pojedinih godina istraživanja može se zaključiti da su sve navedene gljive bile prisutne svih godina istraživanja. Što se tiče zdravstvenog stanja uočeno je da je u godinama slabijeg uroda bila veća oštećenost žira kukcima, glodavcima i pticama. Prilikom determinacije gljiva preporučuje se primjena kompjutorske tehnike i programa Dp-soft koji omogućuju bržu i precizniju izmjeru, pohranjivanje fotografija, automatsko upisivanje izmjerenih podataka i njihovu analizu. Izmjerom brzine rasta nekih značajnih vrsta gljiva koje dolaze na žiru, na sobnoj temperaturi uočeno je da najbrže raste gljiva Trichoderma viride (u dva dana proraste petrijevu zdjelicu tj. 85 mm), zatim Ciboria batschiana (za pet dana proraste 85 mm), Phomopsis quercella za šest dana a Fusarium avenaceum za sedam dana. Gljiva Graphium roboris raste najsporije i za sedam dana njen dijametralni rast iznosio je 38,8 mm. Iz toga se može zaključiti da brzi rast gljiva Trichoderma viride, Ciboria batschiana i Phomopsis quercella omogućava i brzo širenje zaraze posebno za vrijeme transporta i skladištenja žira. Fusarium avenaceum raste nešto sporije i Graphium roboris najsporije što im omogućava da prorastaju tkivo žira, prodiru u klicu te da u trenutku klijanja prijeđu na klijance uzrokujući traheomikozu. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 237 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 9. ZAKLJUČAK Pokus zaštite žira fungicidima pokazao je da je klijavost žira tretiranog fungicidima iznosila od 53,33% do 66,67% dok je na kontrolnom uzorku iznosila 35,83%. Zaraza gljiva tretiranih uzoraka iznosila je od 22,50% do 28,33% a netretiranih 51,66%. I nakon tretiranja fungicidima u unutrašnjosti žira bile su prisutne gljive: Penicillium, Ciboria, Fusarium i Phomopsis. Može se zaključiti da su u žiru na kotiledonima prisutne gljive i nakon tretiranja fungicidima. Fungicidi zaštićuju žir na njegovoj površini i sprječavaju širenje zaraze. Ispitivanje djelotvornosti fungicida Vitavax extra, Vitavax 200, Dithane i Captan u zaštiti žira pokazuje da ne postoji značajna razlika u klijavosti žira između tretmana različitim fungicidima, ali da postoji značajna razlika između tretiranog i netretiranog žira. Zaštita žira fungicidima bitna je metoda kontrole bolesti kao i zaštita klijanaca od zaraze gljivama. Analiza zdravstvenog stanja žira, makroskopskim i fitopatološkim metodama, važna je za dobivanje podataka o oštećenosti žira i pregled mikoflore na žiru te utvrđivanja dominantnih gljiva. To nam je ujedno i pokazatelj stanja u lužnjakovim sastojinama kao i uvjeta skladištenja te pomoć u odabiru i primjeni metoda i sredstva za zaštitu žira. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 238 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 10. LITERATURA 10. LITERATURA 10. LITERATURA Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 239 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 10. LITERATURA Ainsworth, G. C., Sparow, K. F., Sussman, A. S., 1973: The Fungi (An Advanced Treatise). Academic press, New York, San Francisco, London, 621 str. Alexopoulos C. J.,1962: Introductory Mycology, John Willey&Sons New York, London, Sydney, 613 str. Anderson, R. L. i Miller, T., 1989: Seed Fungi. In: Forest Nursery Pests, U. S. Department of Agriculture, 126-127. Andersson, C., 1992: The effects of weevil and fungal attacks on the germination of Quercus robur acorns. Forest Ecology and Management, Uppsala, Sweden, 50 (3-4), 247-251. Andersson, C., Frost, I., 1996: Growth of Quercus robur seedlings after experimental grazing and cotyledon removal. Acta Bot. Neerl. 45(1): 85-94. (Royal Botanical Society of the Netherlands) Barnett, H. L. i Hunter B. B., 1972: Illustrated Genera of Imperfect Fungi, Burgess Publishing Company, Mineapolis, Minnessota, 239 str. Bertović, S., 1975: Prilog poznavanja odnosa klime i vegetacije u Hrvatskoj: Acta Biologica VII/2, Zagreb, 197. str. Bessey, E. A., 1950: Morphology and taxonomy of the fungi. The Blaki ston Company, Toronto, 325 str. Bhattacharyya, G. K., Johnson, R. A., 1977: Statistical Concepts and Methods. New York, 639 str. Booth, C., 1971: The Genus Fusarium, Commonwealth Mycological Institute Kew, Surrey, England, 233 str. Brežnev, I. E., Ibragimov, G. R., Potlaičuk, V. I., 1962: Gribov na plodah i semenah drevesnih i kustarnikovih porod, Moskva, 414 str. Butin, H. i Zycha, H., 1973: Forstpathologie fur Studium und Praxis. Georg Thieme Verlag Stuttgart, 170 str. Carlile, M. J., Watkinson, S. C., 1994: The Fungi. Academic Press, London, 482 str. Čeremisinov, N. A., Negruckij, S. F., Leškovceva, I. I., 1970: Griby i gribnie bolezni derevev i kustarnikov. Lesnaja promišlenost, Moskva, 390 str. Čizmić, I., 1987: bolesti povrća koje se prenose sjemenom i njihovo suzbijanje. U: Maceljski, M. i dr., Zaštita povrća, Znanje, Zagreb, 66-72. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 240 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 10. LITERATURA Čizmić, I., 1990: Primjena fungicida u tretiranju sjemena nekih ratarskih i povrćarskih kultura, Bilten poljodobra (11-12), 211-218. Delatour, C. & Morelet, M., 1979: Black root of acorns. Revue Forestiere Francaise, 31: 2, 101-115. Delatour, C., 1978: A curative control method for Ciboria batschiana on acorn. European Journal of Forest Pathology, 8: 4, 193-200. Delatour, C., 1984: Persistence of Ciboria in acorns left on the ground. Revone Forestiese Française. 36:3, 248-249. France Dennis, R. W. G., 1960: British cup fungi and their allies (An introduction to the Ascomycetes). Ray society, London, str. Dennis, R. W. G., 1976: British Ascomycetes, Cramer, J., 585 str. Dokuš, A. 1986: Problem višegodišnjeg uskladištenja žira hrasta lužnjaka, Šumarski institut Jastrebarsko. Ellis M. B., 1971: Dematiaceous Hyphomicetes, Commonwealth Mycological Institute Kew, Surrey, England, 595 str. Filipov, V. V., 1980: Fitopatogenbie gribi roda Verticillium. Nauka, Moskva, 447 str. Gille, K. & Nowag, A., 1995: Results of storing acorns after three winters. Allgemeine Forst Zeitschrift, 50: 18, 962-963. Glavaš, M, 1984: Ceratocystis (Ophiostoma) gljive na hrastovima, Šumarski list, 108(11-12): 505-514, Zagreb Glavaš, M. i Halambek, M, 1992: Mikoze hrasta lužnjaka i kitnjaka, Glasnik za šumske pokuse, 28: 237-244, Zagreb. Glavaš, M., 1980: Prilog poznavanju gljive Ophiostoma quercus (Georgev.) Nannf. u našim hrastovim šumama. Šumarski fakultet Zagreb. Glavaš, M., 1986: Bolesti lišća i žira hrasta crnike (Quercus ilex L.), Glasnik za šumske pokuse, posebno izdanje, 2: 207-213, Zagreb Glavaš, M., 1989: Fitopatološka istraživanja uzročnika sušenja hrasta lužnjaka (Quercus robur L.). Glasnik za šumske pokuse, Zagreb, 25, 145-154. Glavaš, M., 1996: Osnove šumarske fitopatologije, Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu, 140 str. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 241 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 10. LITERATURA Glavaš, M., 1999: Gljivične bolesti šumskog drveća. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu, 281 str. Gračan, J., 1996: Masovna selekcija. U: Klepac, D. (ur.), Hrast lužnjak (Quercus robur L.) u Hrvatskoj, HAZU Centar za znanstveni rad Vinkovci i Hrvatske šume p.o. Zagreb, 118-127. Gračan, J., Krstinić, A., Matić, S., Rauš, Đ. & Seletković, Z., 1999: Šumski sjemenski rajoni (jedinice) u Hrvatskoj. Šumarski institut Jastrebarsko, Radovi, 34: 1, 55-95. Gradečki, M. i Poštenjak, K., 1996: Opravdanost upotrebe rengenografije žira lužnjaka. 41 th ISTA Seminar on statistic in seed testing, Budapest. Gradečki, M., 1999: Uloga i značaj kakvoće sjemena kod njegove uporabe. Radovi, Šumarski institut Jastrebarsko, 34: 1, 95-105. Gradečki, M., Poštenjak, K., Topolovec, V., 1993: Analiza nekih kvalitativnih osobina sjemena hrasta lužnjaka iz sjemenskih sastojina u Hrvatskoj. Radovi, Šumarski institut Jastrebarsko, 28: 1, 37-54. Gradečki, M., Poštenjak, K., Topolovec, V., 1996: Istraživanje laboratorijske i rasadničke klijavosti sjemena hrasta lužnjaka iz sjemenskih sastojina u Hrvatskoj. Zagreb. U: Mayer, B., (ur.), Unapređenje proizvodnje biomase šumskih ekosustava, Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu i Šumarski institut Jastrebarsko, 271-281. Halambek, M. i Harapin, M., 1991: Istraživanja uzroka izostanka uroda žira hrasta lužnjaka, Izvještaj o stručnoj suradnji s U. š. Bjelovar, Šumarski institut, Jastrebarsko. Halambek, M., Harapin, M., Novak Agbaba, S. i Liović, B., 1996: Utjecaj biotskih čimbenika na zdravstveno stanje šumskih vrsta drveća, 19-29. Hangyal – Balul, W., 1984: Mikološka istraživanja o propadanju hrasta. Az Erdo, Erfoliam, Hungary, 8: 359-362. Hangyal – Balul, W., 1986: Fungi causing deterioration of acorns and germinating oak seedlings and methods against them. Erdeszeti Kutatasok, Matrafured, Hungary, 76-77: 293-304. Harapin, M., Androić, M., 1996: Sušenje i zaštita šuma hrasta lužnjaka. U: Klepac, D. (ur.), Hrast lužnjak (Quercus robur L.) u Hrvatskoj, HAZU Centar za znanstveni rad Vinkovci i Hrvatske šume p.o. Zagreb, 227-257 Prpić, 273-298. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 242 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 10. LITERATURA Harapin, M., Halambek, M., Liović, B., Novak – Agbaba, S., Matošević, D., 1996: Svestrane metode suzbijanja biljnih bolesti, kukaca i korova. Knjiga 2. Šum. fakultet, Šum. institut, Zagreb. 11-18 Harapin, M., Halambek, M., Liović, B., Novak Agbaba, S. i Matošević, D., 1996: Uzroci izostanka uroda žira u Hrvatskoj u razdoblju 1991-1995. U: Sever, S., (ur.), Zaštita šuma i pridobivanje drva, Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu i Šumarski institut Jastrebarsko, 75-81. Hrašovec, B., 1991: Prilog poznavanja bioekologije insekata iz roda Balaninus germ., štetnika žira hrasta lužnjaka (Quercus robur L.), Magistarski rad, sveučilište u Zagrebu, Šumarski fakultet, str. 95. Hrašovec, B., Glavaš, M., Diminić, D. i Margaletić, J., 1996: Štetnici i bolesti sjemena hrasta, obične jele, smreke i crnog bora. U: Sever, S., (ur.), Zaštita šuma i pridobivanje drva, Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu i Šumarski institut Jastrebarsko, 35 - 45. Jacobs, M. B. i Gerstein, M. J., 1960: Handbook of Microbiology, D. van Nostrand Company Canada, 456. str. Jovanović, M., Tucović, A., 1975: Genetics of common and sessile oak (Quercus robur L. and Q. petraea Liebl.), Annales forestales, Zagreb, VII/2: 23-53. Jovanović, M., Vukičević, A., 1983: Hrast. U: Potočić, Z. (mr.), Šumarska eniciklopedija 2; Zagreb, 66-78. Kiraly, Z., Klement, Z., Solymosy, F., Voros, J., 1970: Methods in Plant Patholog. Akademiai Kiado, Budapest, 509 str. Kišpatić, J., 1974: Šumarska fitopatologija. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu, 281 str. Kišpatić, J., 1991: Šumarska fitopatologija, Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu, 356 str. Klepac, D., 1996: Stare šume hrasta lužnjaka i njihov doprinos razvoju Hrvatske. U: Klepac, D. (mr.), Hrast lužnjak (Q. r. L.) u Hrvatskoj, HAZU Centar za znanstveni rad Vinkovci i Hrvatske šume p. o. Zagreb, 13-26. Kristek, J. i dr., 1992: Škudci semen, šišek a plodu lesnich drevin, Ministerstvo zemedelstvi Česke republiky, 286 str. Lenti, I., 1990: Fitopatološki značaj Trichotecium roseum Link. ex. Fries. na domaćinu konjskom bobu (Vicia faba L.). Zaštita bilja XXVI. godina, 10, 441-447. Kalmanhaza Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 243 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 10. LITERATURA Littvay, T., 1999: Proizvodnja i uporaba selekcioniranog šumskog sjemena. Šumarski institut Jastrebarsko, Radovi, 34: 1, 43-55. Mägdefrau, K., Ehrendorfer, F., 978: Sistematika, evolucija i geobotanika. Prijevod – Školska knjiga, Zagreb. Maksimivić, M., Milivojević, B. i Pekić, R., 1982: Štetočine hrastovog žira u semenskoj sastojini Kupinske grede. Zaštita bilja, Beograd, 161: 221-257. Margaletić, J.,1998: Rodents and their harmful effects on Turopoljski Lug (Turopolje Grove) and on Croatian forests. Glasnik za šumske pokuse, 35: 143-189. Margetić, F., 1983: Klima i klimatologija. Šumarska enciklopedija. Jugoslavenski leksikografski zavod. Zagreb, 260-262. Mathur, S. B., Kongsdal, O., 2002: Common Laboratory Seed Health Testing Methods for Detecting Fungi. ISTA, Bassersdorf, 409 str. Matić, S., 1976: Povijest šumarstva Hrvatske 1846-1976. Šumarski list, Zagreb, 67-77. Matić, S., 1989: Uzgojne mjere u sastojinama narušenim sušenjem hrasta lužnjaka. Glas. šum. pokuse, Zagreb, Vol 25: 67-77. Matić, S., 1990: Šume i šumarstvo Hrvatske – jučer, danas, sutra. Glasnik za šumske pokuse, 26: 33-56. Matić, S., 1996: Uzgojni radovi na obnovi i njezi sastojina hrasta lužnjaka. U: Klepac, D. (ur.), Hrast lužnjak (Quercus robur L.) u Hrvatskoj, HAZU Centar za znanstveni rad Vinkovci i Hrvatske šume p.o. Zagreb, 1167-212. Matić, S., Orlić, S. i Harapin, M., 1996: Sjeme hrasta lužnjaka kao temeljni uvjet nastanka i opstanka lužnjakovih šuma. U: Klepac, D. (ur.), Hrast lužnjak (Quercus robur L.) u Hrvatskoj, HAZU Centar za znanstveni rad Vinkovci i Hrvatske šume p.o. Zagreb, 145-157. Medvedović, J., 1996: Mikroklima staništa hrasta lužnjaka. U: Klepac, D. (ur.), Hrast lužnjak (Quercus robur L.) u Hrvatskoj, HAZU Centar za znanstveni rad Vinkovci i Hrvatske šume p.o. Zagreb, 83-90. Mikloš, I., 1991: Onečišćenje zraka i urod žira u našim šumama hrasta lužnjaka. Šumarski list, 3-5: 151-162. Mikloš, I., 1992: Kemijsko suzbijanje štetnika u sjemenskim sastojinama hrasta lužnjaka. Šumarski list, Zagreb, 116: 523-529. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 244 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 10. LITERATURA Moore – Landecker, E., 1972: Fundamentals of the Fungi. Prectice-hall, inc., London 482 str. Ocvirek, M., Orlić, S., 1990: Uskladištenje žira hrasta lužnjaka, Radovi, 25, (2): 311-321. Plaušić – Gojković, N., 1983: Plod. U:Potočić, Z., (mr.), Šumarska enciklopedija 2, Jugoslavenski leksikografski zavod "M. Krleža", Zagreb, 727-730. Popkova, K. V., 1989: Obšaja fitopatologija. Agropromizdat, Moskva, 399 str. Poštenjak, K., 1999: Četrdeset godina šumskog sjemenarstva u Hrvatskoj. Šumarski institut Jastrebarsko, Radovi, 34: 1, 11-43. Poštenjak, K., Gradečki, M., 2001: Neki uzroci oštećenja i kakvoća sjemena lužnjaka (Quercus robur L.) i nizinskog brijesta (Ulmus minor Rich.) tijekom plodonošenja u ekološko gospodarskim tipovima II-G-10 i II-G-20. Znanstvena knjiga, Šum. fakultet Zagreb, Šum. inst. Jasterbarsko, "Hrvatske Šume", 233-243. Potlaicuk, V. I., 1953: The harmful microflora of acorns and its development in relation to their origin and storage conditions. Bot. Z, Moskva, 38 (1): 135-142. Prisjažnik, A. A., 1949: Bolezni i vrediteli semen drevesnih i kustarnikkovih porod i meri borbi s nimi. Vserosiskoe obšestvo ohrani prirodi, Moskva, 67 str. Prochazkova, Z., 1995: Mykoflora žaludu (Literarni prehled), Zpravy Lesnickeho Vyzkum, 40: 1, 3-5. Prochazkova, Z.,1990: Mycoflora of seeds and fruits of broadleaved trees, Zpravy-LesnickehoVyzkumu, 35:1, 20-25. Prochazkova, Z.,1991: The occurrence of seed-borne fungi on forest tree seeds in the years 1986-1991, Communicationes-Instituti-Forestalis-Cechoslovaca, 17, 107-123. Rauš, Đ., 1986: Slavonska hrastova šuma. U: Šume i prerada drveta Jugoslavije, Beograd, 59-63. Rauš, Đ., 1996: Šumske zajednice i sinekološki uvjeti hrasta lužnjaka. U: Klepac, D. (ur.), Hrast lužnjak (Quercus robur L.) u Hrvatskoj, HAZU Centar za znanstveni rad Vinkovci i Hrvatske šume p.o. Zagreb, 27-54. Regent, B., 1980: Šumsko sjemenarstvo. Jugoslovenski poljoprivredni šumarski centar, Beograd, 196 str. Roth, V., 1999: Neka svojstva sjemena hrasta lužnjaka (Quercus robur L.) iz različitih sjemenskih zona i rajona Hrvatske. Šumarski institut Jastrebarsko, Radovi, 34: 2, 53-77. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 245 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 10. LITERATURA Samuels, G., Lieckfeldt, E., Nirenberg., 1999: Trichoderma asperellum, a new species with warthed conidia and redescription of T. viride (http:// nt.ars-grin.gov) Saračević, S., 2002: Kvantitativne i kvalitativne osobine žira hrasta lužnjaka (Quercus robur L.) u sastojinama sliva rijeke Česme, Magistarski rad, Sveučilište u Zagrebu, Šumarski fakultet, str. 117. Seletković, Z., 1996: Klima lužnjakovih šuma. U: Klepac, D. (ur.), Hrast lužnjak (Quercus robur L.) u Hrvatskoj, HAZU Centar za znanstveni rad Vinkovci i Hrvatske šume p.o. Zagreb, 71- 83. Spaić, I. i Glavaš, M., 1988: Uzročnici šteta na lužnjaku u Jugoslaviji. Glasnik za šumske pokuse, 24: 199-226. Stanescu, E., Vlase, I., 1969: Damage by fungi and bacteria to acorn during prolonged storage in various conditions of moisture, temperature and ventilation. Rev. Padulirov, Rumania, 84 (3): 129-132. Starčević, T., 1999: Problemi gospodarenja sa hrastom u Hrvatskoj. Izvještaj, III. delavnica Javne gozdarske službe z mednarodno udeležbo, Raziskave nižinskih hrastovih gozdov, 86-87. Trinajstić, I., 1974: Quercus L. U: I. Trinajstić (ed.), Analitička flora Jugoslavije, Zagreb, 1 (3): 460-481. Urošević, B., 1957: Some important diseases of oak seedlings in nuseries. Prace vyzkum. Ust. lesn. CSZ, 13: 92-123. Urošević, B., 1957a: The mycoflora of stored acorns. Prace vyzkum. Ust. Lesn. CSR, 13: 149-200. Urošević, B., 1983: Tracheomycotic diseases in oak. Communicationes – Instituti – Forestalis – Cechosloveniae, publ. 1987, 13:85 – 100. Vajda, Z., 1974: Nauka o zaštiti šuma. Školska knjiga, Zagreb, 482 str. Vidaković, M., 1996: Generativna reprodikcija. U: Klepac, D. (mr.), Hrast lužnjak u Hrvatskoj, HAZU Centar za znanstveni rad Vinkovci i Hrvatske šume p.o. Zagreb, 104-108. Vidaković, M., 1996: Podizanje klonske sjemenske plantaže hrasta lužnjaka. U: Klepac, D. (mr.), Hrast lužnjak u Hrvatskoj, HAZU Centar za znanstveni rad Vinkovci i Hrvatske šume p.o. Zagreb, 127-139. Werres, S., 1992: Cylindrocarpon Didymum (Hartig) Wollenw., a previously unknown pathogen of stored oak seeds. Nachrichtenblatt des Deutschen Pflanzenschutzdienstes, 44: 11, 238-242. Young, J. A., Young, C. G., 1992: Seeds of Woody Plants in North America Dioscordies Press, Oregon, USA, str. 630. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 246 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 10. LITERATURA Žgela, M., 1999: Proizvodnja šumskog sjemena u sjemenskim plantažama. Radovi – Šumar. inst. Jastreb., 34:1, 105-121. Žitnik, S., Muller, C. & Kraigher, H., 1999: Shranjevanje želoda gradna (Quercus petraea (Matt.) Liebl.) in doba (Quercus robur L.). Zbornik posvetovanja, Raziskave nižinskih hrastovih gozdov, Murska Sobota, Slovenija, 65-67. ***** Program gospodarenja za priznatu sjemensku sastojinu hrasta lužnjaka (Quercus robur L) u G. j. Josip Kozarac 43 a, Uprava šuma Zagreb, Šumarija Lipovljani, od 1998-2007. god. ***** Program gospodarenja za priznatu sjemensku sastojinu hrasta lužnjaka (Quercus robur L) u G. j. Slavir 66 c, Uprava šuma Vinkovci, Šumarija Otok, od 1996-2005. god. ***** Program gospodarenja za priznatu sjemensku sastojinu hrasta lužnjaka (Quercus robur L), poljskog jasena i velelisne lipe (Fraxinus angustifolia Vahl.) i velelisne lipe (Tilia platyphyllos Scop.) u G. j. Kapelački lug – Karaš 21 a, Uprava šuma Našice, Šumarija Donji Miholjac, od 1997-2006. god. ***** Program gospodarenja za priznatu sjemensku sastojinu hrasta lužnjaka (Quercus robur L) u G. j. Čazmanske nizinske šume 3a, Uprava šuma Bjelovar, Šumarija Čazma, od 20012010. god. ***** Osnova gospodarenja, Gospodarska jedinica Jastrebarski lugovi, 1994-2003, Šumarija Jastrebarsko, Uprava šuma Karlovac. ***** 1989: Analiza vršnih grana ROŠ "Slavonska šuma", Odjel za zaštitu šuma, Šumarski institut Jastrebarsko. ***** 1990: Istraživanje uzroka izostanka uroda žira hrasta lužnjaka na području ROŠ "Slavonska šuma", OOUR za uzgoj i zaštitu šuma "Hrast Vinkovci", Izvještaj o stručnoj suradnji. ***** 1991: Istraživanje uzroka izostanka uroda žira hrasta lužnjaka. Izvještaj o stručnoj suradnji s Upravom šuma Bjelovar za 1991. godinu, Odjel za zaštitu šuma, Šumarski institut Jastrebarsko. ***** Penicillium expansum, 1966. – Descriptions of Pathogenic Fungi and Bacteria No 97, C. M. I. Surrey, England. ***** Sclerotinia fuckeliana (conidial state: Botrytis cinerea), 1974. – Descriptions of Pathogenic Fungi and Bacteria No 431, C. M. I. Surrey, England. ***** Prikazi 5 – Klimatske anomalije temperature i oborina u Hrvatskoj za 1996. godinu, 1997., DHMZ, Zagreb Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 247 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... 10. LITERATURA ***** Prikazi br. 6. – Klimatske anomalije temperature i oborina u Hrvatskoj za 1997. godinu, 1998., DHMZ, Zagreb ***** Prikazi br. 8. – Praćenje i ocjena klime u 1998. godini, 1999, DHMZ, Zagreb ***** Prikazi br. 9. – Praćenje i ocjena klime u 1999. godini, 2000, DHMZ, Zagreb ***** Prikazi br. 10. – Praćenje i ocjena klime u 2000. godini, 2001, DHMZ, Zagreb Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 248 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... SAŽETAK MIKOFLORA ŽIRA HRASTA LUŽNJAKA (QUERCUS ROBUR L.) U HRVATSKOJ Sanja Novak Agbaba Sažetak Zdravo i kvalitetno sjeme osnova je za uspješnu prirodnu i umjetnu obnovu lužnjakovih sastojina. Žir hrasta lužnjaka u svim fazama razvoja kao i proizvodnog procesa ugrožen je od biotskih i abiotskih čimbenika. Biotske čimbenike čine kukci, gljive, glodavci i više životinje, a abiotske klimatski elementi. U ovom radu istraživani su gljivični organizmi, uzročnici bolesti žira. Istraživanje je obavljeno s ciljem utvrđivanja zdravstvenog stanja žira, određivanja postotnog udjela oštećenosti od gljiva, determiniranja gljivičnih organizama koji dolaze na žiru, prikaza njihovih karakteristika proučavanjem postojeće literature uz nadopunjavanje vlastitim saznanjima, te ispitivanja mogućnosti zaštite žira fungicidima i njihove djelotvornosti. Prilikom determinacije mjerene su spore odabranih vrsta gljiva primjenom kompjuterskog programa Dp-soft uz statističku analizu izmjera radi dokazivanja vrsta. Istraživana je brzina rasta gljiva u dva temperaturna uvjeta; 22-25 °C i 11-15 °C kako bi se ustanovila brzina rasta micelija, a time i brzina širenja zaraze žira. Istraživanje je provedeno u periodu od 1996. do 2000. godine. Prve tri godine analizirano je zdravstveno stanje i mikoflora žira tijekom njegova razvoja od srpnja do listopada u pet sjemenskih sastojina u šumarijama Jastrebarsko, Lipovljani, Čazma, Donji Miholjac i Otok. Slijedeće dvije godine analizirano je zdravstveno stanje zrelog žira nakon čuvanja u hladnjaku, koji je sakupljen sa više lokaliteta lužnjakovih šuma diljem Hrvatske. Žir je analiziran makroskopskom metodom i fitopatološkom analizom. Pokus ispitivanja zaštite žira fungicidima postavljen je u laboratoriju i u polju Šumarskog instituta. Rezultati analiza zdravstvenog stanja završnog razvojnog stadija tj. zrelog žira u odabranim sjemenskim sastojinama pokazuju slijedeće: postotak zdravog žira kretao se od 15,33 do 45,95%, oštećenost kukcima iznosila je između 29,13 do 62,77% a oštećenost gljivama od 10,70 do 42,91%. Analizom mikoflore žira utvrđeno je 19 rodova sa 29 vrsta. Na mladom žiru većinom su se nalazile gljive: Fusarium, Alternaria, Penicillium, Trichothecium, Trichoderma, Opohiostoma, Phomopsis, Chaetomium, Botrytis i Fusella. Na žiru završne faze sazrijevanja i zrelom žiru najčešće su dolazile gljive: Ophiostoma, Ciboria, Fusarium, Penicillium, Gloeosporium, Pestalotia, Stereum, Schizophyllum i dr. Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 249 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... SAŽETAK Znanje o mikozama na sjemenu poslužit će u iznalaženju najpogodnijih metoda zaštite žira od bolesti a time i očuvanje žira za sjetvu pri popunjavanju i umjetnoj obnovi te prirodnoj obnovi hrastovih šuma kao i prilikom sjetve u rasadnicima u proizvodnji biljaka za sadnju. Prilikom istraživanja razrađena je metodika analize zdravstvenog stanja žira i determinacije gljivičnih organizama na žiru što će poslužiti prilikom analiza kvalitete šumskog sjemena. Osim toga istraživanja mikoflore sjemena hrasta lužnjaka su značajna za fitopatologiju jer daju svojevrstan prilog poznavanju mikoflore Hrvatske. Ključne riječi: Hrast lužnjak (Quercus robur L.), žir, zdravstveno stanje, mikoflora, zaštita Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 250 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... SUMMARY MYCOFLORA OF COMMON OAK (QUERCUS ROBUR L.) IN CROATIA Sanja Novak Agbaba Summary A sound and a quality seed is a basis for a successful natural and artificial restocking of common oak stands. The common oak acorn is threatened in all stages of development and a production process as well by biotic and abiotic factors. The biotic factors are made up of insects, fungi, rodents and higher animals and the abiotic ones are climatic elements. In this degree essay, the fungus organisms, the causative agents of diseases of acorn, are examined. The research was done for the purpose of establishing a state of health of acorn, defining a percentage portion of damage due to fungi, determining of fungi organisms occurring on acorn, surveying of their characteristics by studying the present literature, supplementing it with own understanding and investigating possibilities of acorn protection with fungicides and their efficacy. During the determination, the spores of selected species of fungi have been measured by applying the Dp-soft computer program with a statistical analysis of measurements, for the purpose of proving the species. A rate of growth of the fungi has been studied under the two temperature conditions: 22-25 °C and 11-15 °C in order to establish a rate of growth of mycelium and through this a spreading rate of acorn infection. The research was carried out in a period from the year 1996 to 2000. In the first three years, a state of health and mycoflora of the acorn were analyzed in five seed stands during its development from July to October in the forestries of Jastrebarsko, Lipovljani, Čazma, Donji Miholjac and Otok. In the subsequent two years, a state of health of a ripe acorn was analyzed, after it had been kept in a refrigerator, gathered on several localities of the common oak forests all over Croatia. The acorn was analyzed by a macroscopic method and a phytopathological analysis. An experiment of testing the acorn protection with fungicides was set up in a laboratory and in the field of the Institute of Forestry. The results of a state of health in the final stage of development, i.e. of a ripe acorn in the seed stands selected have shown, as follows: the percentage of a sound acorn ranged from 15.33 to 45.95%, a level of damage by insects amounted between 29.13 to 62.77% and a level Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 251 S. Novak Agbaba: Mikoflora žira hrasta lužnjaka... SUMMARY of damage by fungi from 10.70 to 42.91%. By analysis of the acorn mycoflora, 19 genera with 29 species were determined. On the early acorn, the prevailing fungi were: Fusarium, Alternaria, Penicillium, Trichothecium, Trichoderma, Opohiostoma, Phomopsis, Chaetomium, Botrytis and Fusella. On the acorn in its final stage of ripening and on a ripe acorn the most frequent fungi were: Ophiostome, Ciboria, Fusarium, Penicillium, Gloeosporium, Pestalotia, Stereum, Schizophyllum and the other. The knowledge about mycoses on seed will serve in finding most appropriate methods of acorn protection against diseases, thereby the acorn will be preserved for sowing when filling up and performing the artificial restocking and the natural restocking of oak forests, as well as when sowing in nursery-gardens for the production of seedlings. In the research, the methods of the analysis of the acorn state of health and the determination of fungus organisms on acorn have been elaborated, that will serve in the analyses of a forest seed quality. Besides, the research of mycoflora of the common oak seed is important for phytopathology, since it makes a contribution of its kind to the knowledge of mycoflora of Croatia. Key words: Common oak (Quercus robur L.), acorn, health condition, mycoflora, protection Šumarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 252
© Copyright 2024 Paperzz