ΚΥΤΤΑΡΟΠΟΣΙΑ Με μεσολάβηση υποδοχέων

ΒΙΟΛΟΓΙΑ ΚΥΤΤΑΡΟΥ
ΟΡΓΑΝΙΔΙΑ ΜΕΤΑΤΡΟΠΗΣ ΚΑΙ
ΑΠΟΙΚΟΔΟΜΗΣΗΣ ΒΙΟΜΟΡΙΩΝ:
Υπεροξυσώματα - Λυσοσώματα
Μαριάννα Χ. Αντωνέλου, Ph.D.
Λέκτορας Τμήματος Βιολογίας,
Πανεπιστημίου Αθηνών
09-01-2015
YΠΕΡΟΞΥΣΩΜΑΤΑ
Συμμετέχουν σε οξειδωτικές διαδικασίες μεταβολισμού
Προστασία έναντι επικίνδυνων μεταβολιτών πχ. H2O2
Οξείδωση αλκοολών-Αποτοξίνωση
Σύνθεση πλασμαλογόνων
(σημαντική κατηγορία φωσφολιπιδίων που βρίσκονται στις μεμβράνες ιστών
όπως η καρδιά και ο εγκέφαλος)
ΛΥΣΟΣΩΜΑΤΑ
Αποικοδόμηση βιομορίων (κυτταροποσία-κυτταροφαγία-αυτοφαγία)
Ανακύκλωση μεταβολιτών
Κυτταρικός θάνατος
2
Β. Λυσοσώματα
Καταβολικά (πεπτικά)
οργανίδια
ευκαρυωτικών κυττάρων
They degrade extracellular
material that has been
internalized by endocytosis and
intracellular components that
have been sequestered by
autophagy
"suicide bags" or "suicide sacs"
of the cell
the “stomach” of the cell
3
1955- Biochemistry Journal 60:604-617; 1955
Christian de Duve (Belgian biologist, 1917-2013)
(Nobel Prize in Physiology or Medicine in 1974, with A. Claude and G. Palade for their discoveries
“concerning the structural and functional organization of the cell”)
Insulin, glucagon
The enzyme activity of glucose-6-phosphatase was mostly
associated with ΕΔ  Τhe cell contains distinct compartments
with characteristic enzyme activities
Acid phosphatase (easily measured)
Lysosome
(His Lab) Peroxisome (enzymes involved on oxidation)
“only when considered as part of a system
involved directly or indirectly in intracellular
digestion does the term lysosome describe a
physiological unit”,
4
ΜΟΡΦΟΛΟΓΙΑ
25nm-1μm
Προέρχονται από το σύμπλεγμα Golgi
Απλή λιπιδική διπλοστοιβάδα
(Η.Μ) (στοιχειώδη μεμβράνη)
Σχεδόν σε όλους τους τύπους ζωικών κυττάρων
5
Χαμηλό pH (μεμβρανική αντλία υδρογόνου)
Περιέχουν όλα σχεδόν τα υδρολυτικά ένζυμα του
κυττάρου (άριστο pH δράσης =5)
Ανενεργά (?) σε ουδέτερο pH (άριστο για τα υπόλοιπα κυτταρικά
διαμερίσματα και τα περισσότερα εξωκυττάρια υγρά)-Leakage
(θετική ιστοχημική αντίδραση)
counter transport of Cl- ions by Cl-/H+ antiporter
Δραστικότητα όξινης φωσφατάσης-(ιστοχημική ανίχνευση): ορισμός Lys
Lys-tag: specifically tagged with mannose 6-phosphate to differentiate them
from other enzymes (receptors in Golgi)
6
ΜΟΡΦΟΛΟΓΙΑ
Τεράστια μορφολογική ετερογένεια
(μέγεθος, εσωτερική οργάνωση)
Ως πεπτικά οργανίδια Διαδοχικές μορφολογικές φάσεις ανάλογα:
Στάδιο πέψης
Είδος ενζύμων
Είδος μορίων/οργανιδίων που αποικοδομούν
7
Ενδοσώματα
Δίκτυο κυστιδίων – Περιέχουν υλικό ενδοκύττωσης
(Μορφολογικά/Λειτουργικά ) Είδη Λυσοσωμάτων:
Πρωτογενή λυσοσώματα
(αρχική βιογένεση από ΕΔ και Golgi)
Δευτερογενή λυσοσώματα
Από σύντηξη 1ο γενούς Λ (+) ενδοσώματος
Φαγοσώματα (πεπτικά /
κυτταροφαγικά χυμοτόπια)
Από σύντηξη με κυτταροφαγικό κυστίδιο
Αυτοφαγικά χυμοτόπια
Προκύπτουν κατά την πέψη οργανιδίων και
άλλων cyt υλικών
Πολυκυστιδιακά σωμάτια
Μεμβρανικά σφαιρικά κατάλοιπα
(προκύπτουν κατά την πέψη)
Υπολειπόμενα σωμάτια
Με αδιάλυτες ουσίες
8
(Μορφολογικά/Λειτουργικά ) Είδη Λυσοσωμάτων:
Πρωτογενή λυσοσώματα
Γεμάτα από υδρολυτικά ένζυμα αλλά δεν έχουν
ακόμα εμπλακεί σε διαδικασία πέψης
(αχρησιμοποίητη συλλογή υδρολυτικών ενζύμων)
Δευτερογενή λυσοσώματα
Προέρχονται από τη σύντηξη ενός
πρωτογενούς Lys με ένα φαγόσωμα
Δευτερογενή λυσοσώματα
Φαγοσώματα (πεπτικά /
Από σύντηξη με κυτταροφαγικό κυστίδιο
κυτταροφαγικά κενοτόπια ή
ετεροφαγοσώματα)
(αυτοφαγικά κενοτόπια)
Προκύπτουν κατά την πέψη οργανιδίων και
άλλων cyt υλικών
Υπολειπόμενα σωμάτια
Με αδιάλυτες ουσίες
Αυτοφαγοσώματα
9
Ειδικού τύπου Λυσοσώματα:
Σύνθεση μελανίνης
Μελανοσώματα
(μελανοκυττάρων
επιδερμίδας)
Χυμοτόπια φυτικών
κυττάρων και μυκήτων
diverse in structure and
function
Τα λυσοσώματα των φυτικών
κυττάρων?
(??? Όχι κλασσικά Lys ζωικών
κυττάρων)
Enzymes, lack of exocytosis
Περιβάλλονται από τονοπλάστη (κυτταροπλασματική
μεμβράνη)
Αποκόπτονται από την πλευρά εξόδου του Golgiσυγχωνεύονται σε μεγαλύτερα οργανίδια (30-90%)
«Αποθήκη» χρήσιμων ή άχρηστων για το κύτταρο ουσιών
(νερό, ανόργανα άλατα, σάκχαρα, αμινοξέα, μεταλλικά ιόντα,
υδατοδιαλυτές πρωτεΐνες και χρωστικές πχ. ανθοκυάνες)
Υδρολυτικά ένζυμα σε όξινο περιβάλλον (V-ATPάση):
Αποικοδόμηση κυτταρικών συστατικών (αυτοφαγία),
προγραμματισμένη αυτόλυση φυτικού κυττάρου
ΩΣΜΩΡΥΘΜΙΣΗ
10
ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑ
Κυτταρικές δραστηριότητες που συμμετέχουν:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
Θρέψη
Άμυνα
Πέψη
Ανακύκλωση μεταβολιτών (molecular turnover)
Διαφοροποίηση
Aνακύκλωση υποδοχέων
Αυτοφαγία
Κυτταρικός θάνατος
Εξωκυττάριες δράσεις (εξωκυττάρωση/έκκριση σε ορισμένους
τύπους κυττάρων)
11
ΠΕΨΗ ΥΛΙΚΩΝ
Τα υδρολυτικά ένζυμα Lys πέπτουν συνήθως υλικό:
1) που προέρχεται από το εξωτερικό περιβάλλον του κυττάρου
(ΕΤΕΡΟΦΑΓΙΑ)
Κυτταροποσία / Κυτταροφαγία (ενδοκύτωση)
Ολόκληρα κύτταρα (ΚΥΤΤΑΡΟΦΑΓΙΑ)
2) Συστατικά του ίδιου του κυττάρου (ΑΥΤΟΦΑΓΙΑ)
12
ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑ
13
Πληθυσμός Lys/cell:
Όσα προσλαμβάνουν πολλά μακρομόρια (απορροφητικά κύτταρα πχ.
εντερικό επιθήλιο): άφθονα
Λιγότερο απορροφητικά (πχ. κύτταρα παγκρέατος): λίγα
14
ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑ
Αποικοδόμηση Βιομορίων
Διάσπαση βιομορίων/μακρομορίων
στους δομικούς τους λίθους
(προϊόντα υδρόλυσης)
 διαπερνούν Λ-μεμβράνη  κυτοσόλιο
Πρωτεΐνες: εγκλωβίζονται σε 2oγενή Lys  διπεπτίδια cyt  aa
Yδατάνθρακες: μονοσακχαρίτες
(δεξτράνη, σελλοβιόζη, ινουλίνη: δεν πέπτονται στα Lys)
The breakdown products are then transported back to the cytosol by specific transporter
proteins embedded in the Lys membrane — a pathway which facilitates the egress
of Lys degradation products to other cell organelles and membranes for subsequent
use in biosynthetic processes
15
ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑ
ΛΥΣΟΣΩΜΑ + ΚΥΣΤΙΔΙΟ  ΠΕΨΗ διάμεσου υδρολυτικών ενζύμων Λ
Σύντηξη δύο μεμβρανών (τα βιομόρια δεν διαπερνούν τη Λ-μεμβράνη)
Αναγνώριση της μιας μεμβράνης από την άλλη
16
ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑ
Σε ορισμένες περιπτώσεις (συγκεκριμένα
κύτταρα και βιολογικές ανάγκες) τα
υδρολυτικά ένζυμα δρουν στο
εξωτερικό περιβάλλον του κυττάρου
Εξωκυττάρωση Lys ενζύμων από το
1ο-γενές λυσόσωμα με μεσολάβηση
ειδικών υποδοχέων μεταφοράς
(και ελεγχόμενη λύση cyt πρωτεϊνών)
17
ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑ
Γονιμοποίηση σε ζωικούς οργανισμούς
ΣΠΕΡΜΑΤΟΖΩΑΡΙΟ
ΑΚΡΟΣΩΜΙΚΟ ΚΥΣΤΙΔΙΟ (ακρόσωμα)
Υδρολυτικά ένζυμα (υαλουρονιδάση και όξινη φωσφατάση) διάτρησης
μεμβράνης ωαρίου
Δημιουργία διαύλου εισαγωγής σπερματοζωαρίου
18
Ενδοκυτάρωση-εξωκυττάρωση
https://www.youtube.com/watch?v=A7z3EehvIKA
https://www.youtube.com/watch?v=4gLtk8Yc1Zc
19
ΛΥΣΟΣΩΜΑΤΑ ΚΑΙ ΚΥΤΤΑΡΟΠΟΣΙΑ – ΚΥΤΤΑΡΟΦΑΓΙΑ
Ενδοκυττάρωση: είσοδος εξωκυττάριου υλικού στο κύτταρο
Κυτταροποσία
Video-2
20
ΛΥΣΟΣΩΜΑΤΑ ΚΑΙ ΚΥΤΤΑΡΟΠΟΣΙΑ – ΚΥΤΤΑΡΟΦΑΓΙΑ
Κυτταροποσία
Κυτταροφαγία
Γρήγορη πρόσληψη: υγρού,
διαλυτού εξωκυττάριου υλικού
(ιόντα, μικρά μόρια & πρωτεΐνες)
Πρόσληψη: αδιάλυτων, μεγάλων
διακριτών υλικών ή ολόκληρων
κυττάρων
Κυστίδια: 0.1-0.2 μm (150nm)
Κυστίδια: 1-2 μm
21
ΛΥΣΟΣΩΜΑΤΑ ΚΑΙ ΚΥΤΤΑΡΟΠΟΣΙΑ – ΚΥΤΤΑΡΟΦΑΓΙΑ
Ενδοκυτάρωση:
Φαγοκυττάρωση: Πρωτογενή – Δευτερογενή
(πεπτικά/φαγόσωμα) Λυσοσώματα
https://www.youtube.com/watch?v=lam7btcxnY0
22
ΛΥΣΟΣΩΜΑΤΑ ΚΑΙ ΚΥΤΤΑΡΟΠΟΣΙΑ – ΚΥΤΤΑΡΟΦΑΓΙΑ
Ενδοκυτάρωση:
1. εσωτερικοποίηση (internalization) τμημάτων πλασματικής μεμβράνης
(100% σε 1h!)
2. ανακύκλωση συστατικών μεμβράνης (γρήγορη ανακατανομή
υποδοχέων, σημάτων αναγνώρισης κλπ)
3. Λ: διάσπαση βιομορίων στους δομικούς τους λίθους, διαπερνούν τη
μεμβράνη, χρησιμοποιούνται στο cyt
23
ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑ
70 Υδρολυτικά Ένζυμα (υδρολάσες)
Ενεργά σε όξινο περιβάλλον Λ
Α1Α2 (+) Η2Ο

Α1Η (+)
Α2ΟΗ
Λυσοσωμική Υδρολάση
Αντλία εισαγωγής Η+ (ΑΤΡ-άση)
(διατηρεί χαμηλό pH στο Λ)
Μεμβρανικές, όξινες, γλυκοζυλιωμένες
IgpA, IgpB (προστασία μεμβράνης Λ από
αποικοδόμηση λόγω επαφής με υδρολυτικά
ένζυμα)
24
ΚΥΤΤΑΡΟΠΟΣΙΑ
1. Υγρής φάσης (FPP, Fluid Phase
Pinocytosis) – Μη εκλεκτικήΑπορροφώνται μεγάλες ποσότητες
εξωκυττάριου υγρού – Εξωκυττάρια
ουσία που διεγείρει τη μεμβράνη
2. Με μεσολάβηση υποδοχέων
(RMP, Receptor Mediated
Pinocytosis) – Υψηλής
αποδοτικότητας και εκλεκτικότητας
πρόσληψη- Απορροφώνται υψηλές
συγκεντρώσεις πρωτεΐνης
Πρωταρχικός μηχανισμός διατροφής για μονοκύτταρους οργανισμούς πχ αμοιβάδα
25
ΚΥΤΤΑΡΟΠΟΣΙΑ
Με μεσολάβηση υποδοχέων
εξωκυττάρια πρωτεΐνη
καλυμμένες εσοχές
εγκόλπωση εσοχών
καλυμμένα κυστίδια
κλαθρίνης
(50-250nm)
adaptins
ανακύκλωση
υποδοχέα
2) αποθήκευση σε κυστίδια
πρώιμο ενδόσωμα
26
ΚΥΤΤΑΡΟΠΟΣΙΑ
Με μεσολάβηση υποδοχέων
Καλυμμένα κυστίδια κλαθρίνης: πακετάρισμα, διαλογή και ενδοκυττάρια μεταφορά μορίων.
Με σωματίδια ψυκτοεξάχνωσης 20% μεγαλύτερα σε σχέση με αυτά πλασματικής μεμβράνης
27
ΚΥΤΤΑΡΟΠΟΣΙΑ
Με μεσολάβηση υποδοχέων
Ταχεία διαδικασία πρόσληψης μακρομορίων πχ. πρωτεϊνών (1g
πρωτεΐνης/ημέρα, πχ. ωοκύτταρα όρνιθας)
Συνήθης χρόνος εσωτερίκευσης προσλαμβανόμενης ουσίας: 10 min
Προσλαμβανόμενη ουσία:
1) Διάσπαση από Lys
2) Αποθήκευση σε
κυστίδια
28
ΚΥΤΤΑΡΟΠΟΣΙΑ
(πεπτικά Λ)
δομικοί λίθοι
(αμινοξέα,
σάκχαρα κλπ)
 cyt
29
ΚΥΤΤΑΡΟΠΟΣΙΑ
Εξαιρέσεις:
1. Διακύτωση: ενδοκυττωτικά κυστίδια
κυτταροποσίας διασχίζουν το κύτταρο και
φτάνουν στην «απέναντι» πλευρά της
πλασματικής μεμβράνης όπου μετά από
σύντηξη εξωκυτταρώνουν το περιεχόμενό
τους
(μεταφορά ουσιών σε επιθηλιακά και ενδοθηλιακά
κύτταρα)
2. Απευθείας πρόσληψη/έξοδος μακρομορίων
χωρίς τη μεσολάβηση κυστιδίων
(καλυμμένων ή εκκριτικών)
(Ανταλλαγή DNA ανάμεσα σε βακτήρια,
ενσωμάτωση cyt πρωτεϊνών σε οργανίδια)
Predescu S A et al. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 2007;293:L823-L842
30
ΚΥΤΤΑΡΟΠΟΣΙΑ
Με μεσολάβηση υποδοχέων
Πρόσληψη χοληστερόλης (σύνθεση μεμβρανών) από τα ζωικά κύτταρα
(TSH, insulin, Fe (transferin) κλπ)
Χοληστερίνη (παράγεται στο ήπαρ, λαμβάνεται από τροφές)
Αδιάλυτη στο νερό και στα υγρά σώματος  Μεταφέρεται στο αίμα με τη μορφή ενός
γιγαντιαίου συμπλόκου: LDL
Διάμετρος: 22nm
1500 μόρια εστεροποιημένης σε λιπαρά
οξέα χοληστερίνης, 800 φωσφολιπίδια,
500 μόρια μη-εστεροποιημένης
χοληστερίνης, Απολιποπρωτεϊνη-Β
(ειδική δέσμευση στους υποδοχείς της
στην κυτταρική επιφάνεια)
Low Density Lipoprotein particle (type-B)
Because blood is an aqueous solution, transportation of non-polar lipids to specific target cells is performed by
special transport mechanisms.
Αpolipoproteins A, B, and E serve to bind the lipoprotein particle to receptors expressed by target cells that
require the cargo of the particle.
31
ΚΥΤΤΑΡΟΠΟΣΙΑ
Με μεσολάβηση υποδοχέων
Πρόσληψη χοληστερόλης (σύνθεση μεμβρανών)
από τα ζωικά κύτταρα (TSH, insulin κλπ)
Atherosclerosis (αρτηριοσκλήρυνση): οι αρτηρίες παχαίνουν και χάνουν την ελαστικότητά τους
Εναπόθεση χοληστερίνης στα τοιχώματα αρτηριών
LDL: παράγεται στο ήπαρ, μεταφέρει την χοληστερίνη στο αίμα και σε κύτταρα-στόχους. Το σύμπλοκο
LDL-χοληστερίνη μπορεί να διηθείται από τα τοιχώματα των αρτηριών. Στα σημεία διήθησης
προσελκύονται μακροφάγα, πολλαπλασιάζονται διάφορα μη-φυσιολογικά κύτταρα στα οποία
επικάθονται άλατα ασβεστίου και σχηματίζεται ένα ινώδες δίκτυο  δημιουργία αθηρωματικής
πλάκας και παρεμπόδιση κυκλοφορίας αίματος
HDL (υψηλής πυκνότητας λιποπρωτεΐνες): τραβούν έξω από τα τοιχώματα των αρτηριών τη
χοληστερίνη και τη μεταφέρουν πίσω στο ήπαρ όπου μεταβολίζεται
32
ΚΥΤΤΑΡΟΠΟΣΙΑ
Με μεσολάβηση υποδοχέων
Πρόσληψη χοληστερόλης (σύνθεση μεμβρανών)
από τα ζωικά κύτταρα
Αποικοδόμηση LDL
33
ΚΥΤΤΑΡΟΠΟΣΙΑ
Με μεσολάβηση υποδοχέων
Πρόσληψη χοληστερόλης (σύνθεση μεμβρανών)
από τα ζωικά κύτταρα
Έλλειψη υποδοχέα (γενετική ασθένεια): η χοληστερόλη εγκλωβίζεται
στο αίμα (αθηροσκλήρωση, δυσλειτουργία αγγείων)
34
Lipoprotein receptors mediate uptake of lipoprotein-bound cholesterol.
Vertebrate lipoproteins are taken up by the LDL receptor via binding of apolipoproteins B or E
present in the shell of the lipoprotein particle. Following endocytosis, the receptor discharges the
lipoprotein particle in endosomes before recycling back to the cell surface. Internalized
apolipoproteins are degraded in lysosomes, while cholesterol enters the cellular membrane pool via
the endoplasmic reticulum (ER) or is converted into steroid hormones in mitochondria or is stored as
cholesterol esters in cytoplasmic lipid droplets.
The exit of cholesterol from lysosomes requires the activity of Niemann-Pick type C1 (NPC1), an
integral membrane protein that acts as transporter for sterols.
35
ΚΥΤΤΑΡΟΦΑΓΙΑ
Κύτταρα, μικροοργανισμοί,
σωματίδια, μεγάλα
μακρομόρια
Διάσπαση από ένζυμα Λυσοσωμάτων
Πρωτόζωα
Αποκλειστικός τρόπος πρόσληψης τροφής
Ανώτεροι οργανισμοί
Ειδικά/εξειδικευμένα κύτταρα
(μακροφάγα, πολυμορφοπύρηνα ουδετερόφιλα)
Video-1
36
ΚΥΤΤΑΡΟΦΑΓΙΑ
2 ΦΑΣΕΙΣ:
ΑΝΑΓΝΩΡΙΣΗ Μορίων ή Κυττάρων προς «Φάγωμα»
Ενίοτε προηγείται ΚΑΛΥΨΗ με ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΑ προ της πρόσληψης
από τα ΦΑΓΟΚΥΤΤΑΡΑ
ΜΕΤΑΚΙΝΗΣΗ Φαγοκυττάρων προς ΞΕΝΑ Μόρια ή Κύτταρα
Αναδιάρθρωση ΚΥΤΤΑΡΙΚΟΥ ΣΚΕΛΕΤΟΥ
37
ΚΥΤΤΑΡΟΦΑΓΙΑ
Εκκαθάριση γηρασμένων RBCs από μακροφάγα σπλήνα
Erythrophagocytosis where RBC are coated with IgG and C3
38
Figure 10.3 Electron micrographs of the splenic specimens examined by TEM.
A: exocytosis in a red cell is shown by an arrow.
B: marked endocytosis in a spherocyte is indicated by arrows.
C: Three phagocytized spherocytes (Sph) by a macrophage in the spleen.
D: Red cells (R), which are phagocytized, are partially digested in the cyt of macrophage.
N: nucleus.
39
ΚΥΤΤΑΡΟΦΑΓΙΑ
Όταν δεν υπάρχουν τα κατάλληλα LYS ένζυμα για διάσπαση (πχ. φαγοκυττάρωση χαλαζία),
οι ουσίες παραμένουν μέσα στα λυσοσώματα που μετατρέπονται σε
ΥΠΟΛΕΙΠΟΜΕΝΑ ΣΩΜΑΤΙΑ
Κατάλοιπα λυσοσωμικής πέψης
Χαρακτηριστικό γήρανσης ή
λυσοσωμικών ασθενειών
1ο γενή-ΛΥΣ (χωρίς ένζυμα) +
ετεροφαγικό ή αυτοφαγικό κυστίδιο
Τα υπολειπόμενα σωμάτια (ανάλογα
με τον κυτταρικό τύπο):
1) Αποβάλλονται από το κύτταρο
(πχ. αμοιβάδα)
2) Παραμένουν εκεί (σωμάτιο που
περιέχει κοκκία λιποφουσκίνης)
Αιτία γήρανσης κυττάρων, ιδιαίτερα όσων ζουν για μεγάλο χρονικό
διάστημα (πχ. νευρικά κύτταρα)
40
ΚΥΤΤΑΡΟΦΑΓΙΑ
Ανάλογα με το είδος του κυττάρου:
Σύντηξη με
«κυτταροφαγικό
κυστίδιο» (περιέχει
ολόκληρα κύτταρα)
«Πεπτικό χυμοτόπιο»
(2ο-γενές Λυσόσωμα)
κυστίδιο με
Αυτοφαγία
Εγκόλπωση
κυτταρικών
συστατικών
«αυτοφαγικό
κυστίδιο»
(2ο γενές
Λυσόσωμα)
41
ΑΥΤΟΦΑΓΙΑ
1. Πέψη ενδοκυτταρικών συστατικών / μακρομορίων/
οργανιδίων (που δεν είναι πλέον απαραίτητα ή είναι βλαπτικά)
(mit, ΕΔ, ριβοσώματα, γλυκογόνο, Υπεροξυσώματα κλπ)
Γενική ιδιότητα ευκαρυωτικών κυττάρων-Εξελικτικά συντηρημένη
Φυσιολογική λειτουργία κυττάρου για ανανέωση κυτταρικών συστατικών Μηχανισμός ανακύκλωσης βιομορίων (δομικοί λίθοι για νέες συνθέσεις)
Οργανίδια κυττάρου: σε δυναμική ισορροπία (συνεχώς δημιουργούνται νέα και
συνεχώς καταστρέφονται)
t1/2 mit =5-6d, Perox= 4-5d, rRNA: 5 Ημέρες (σε Ηπατοκύτταρα) κλπ
Ένα μιτοχόνδριο κάθε 10’ μπαίνει σε διαδικασία αυτοφαγίας
«Απαλλαγή» κυττάρου από περιττά οργανίδια
2. Παραγωγή ενέργειας σε συνθήκες μεταβολικού stress: Σε
συνθήκες στέρησης θρεπτικών συστατικών: τα κύτταρα αυτοφαγοκυτταρώνουν (αποικοδομούν)
συστατικά του cyt και οργανίδια για να χρησιμοποιήσουν τα δομικά υλικά που θα προκύψουν
έτσι ώστε να συντηρήσουν τα μεταβολικά τους επίπεδα (και την ενέργεια) σε επίπεδα συμβατά
42
με τη βιωσιμότητα
ΑΥΤΟΦΑΓΙΑ
Αυτοφαγικό
κενοτόπιο
(2ο-γενές
Λυσόσωμα)
1) formation and elongation of isolation membranes, or phagophores.
2) (involves the LC3B protein): the cytoplasmic cargo is sequestered, and the double-membrane
autophagosome is formed.
3) Fusion of a lysosome with the autophagosome to generate the autolysosome (αυτοφαγικά
χυμοτόπια = δευτερογενή Lys), is the penultimate step.
4) Degradation of the cargo
43
ΑΥΤΟΦΑΓΙΑ
Στάδια αυτοφαγικής πέψης:
Autophagy, can be divided into:
Macroautophagy: organelle or cytoplasm enclosed in a double membrane
Microautophagy: cytoplasmic degradation following engulfment by the lysosome
Chaperone-mediated autophagy (CMA): selective transport of cytosolic proteins one-byone to the Lys via specific chaperones
Vellodi, A., 2005. Lysosomal storage disorders. Br. J. Haematol. 128, 413–431.
Ballabio, A., Gieselmann, V., 2009. Lysosomal disorders: from storage to cellular damage.
Biochim. Biophys. Acta 1793, 684–696
Schultz,M.L., Tecedor, L., Chang,M., Davidson, B.L., 2011. Clarifying lysosomal storage diseases.
Trends Neurosci. 34, 401–410
Micsenyi, M.C.,Walkley, S.U., 2012. The lysosomal system: physiology and pathology, In: Metha,
A.,Winchester, B. (Eds.), Lysosomal Storage Disorders — A Practical Guide, 1th edition WileyBlackwell (John Wiley & Sons, Ltd).
Kaushik, S., Cuervo, A.M., 2012. Chaperone-mediated autophagy: a unique way to enter the
lysosome world. Trends Cell Biol. 22, 407–417.
44
ΑΥΤΟΦΑΓΙΑ
Παρότι γενικό φαινόμενο, επάγεται
σε συγκεκριμένες περιβαλλοντικές
συνθήκες ή αναπτυξιακά στάδια
(υποξία, ανώμαλη κυτταρική αύξηση,
μικροβιακή λοίμωξη κλπ)
Ο ρυθμός αυξάνεται σε καταστάσεις
stress ή τραυματισμού ή έλλειψης
τροφής
Κατά την ωρίμανση των RBCs
καταστρέφονται όλα τα οργανίδιά τους
Μήτρα: 2kg κατά τη γέννηση. Μέσα σε
9days 50g
(ορμονικά ελεγχόμενη αύξηση αυτοφαγίας και
υδρολυτικών ενζύμων)
45
ΑΥΤΟΦΑΓΙΑ
Στους ανώτερους ευκαρυωτικούς οργανισμούς:
1. η αυτοφαγία είναι μηχανισμός απομάκρυνσης δυνητικά επιζήμιων πρωτεϊνών
για προστασία των κυττάρων έναντι ασθενειών και μολύνσεων από διάφορα
παθογόνα.
2. Η αυτοφαγία διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στις αναπτυξιακές και αντιγηραντικές λειτουργικότητες και δράσεις των ζωικών κυττάρων
ακαδημαϊκό και βιοϊατρικό ενδιαφέρον
46
ΑΥΤΟΛΥΣΗ
Εκλεκτική αυτοκαταστροφή κυττάρων (ΠΚΘ ή παθολογικές καταστάσεις)
Κύτταρα που έχουν επιτελέσει το σκοπό τους και η παρουσία τους είναι
πλέον βλαπτική για τον οργανισμό
Απελευθέρωση υδρολυτικών ενζύμων στο κύτταρο
Cancer cell lysosomes are less stable than normal lysosomes…….
47
ΛΥΣΟΣΩΜΑΤΑ ΚΑΙ ΚΥΤΤΑΡΙΚΟΣ ΘΑΝΑΤΟΣ
Διάφορα ερεθίσματα/κυτταρική
σηματοδότηση  άμεση ή έμμεση
αύξηση διαπερατότητας Lys μεμβράνης
(lysosomal membrane permeabilization,
LMP)  απελευθέρωση περιεχομένου lys
στο cyt.
Οι Lys υδρολάσες (πχ. cathepsins)
δυνητικά μεσολαβούν γεγονότα
Κυτταρικού Θανάτου:
1) ανεξάρτητα από τα mit
2) είτε διαμέσου ενεργοποίησης (με
πρωτεόλυση) μελών της οικογένειας
των αποπτωτικών παραγόντων Bcl-2
και ακόλουθη απελευθέρωση άλλων
αποπτωτικών παραγόντων (πχ.
cytochrome c and AIF) από τα mit.
(Groth-Pedersen et al., Cancer Lett 2010)
48
ΣΥΜΒΟΛΗ ΤΩΝ ΛΥΣΟΣΩΜΑΤΩΝ ΣΕ ΔΙΑΦΟΡΕΣ ΚΥΤΤΑΡΙΚΕΣ
ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΕΣ
ΚΡΙΝΟΦΑΓΙΑ (crinophagy)
Ενδοκυττάρια πέψη του περιεχομένου των εκκριτικών κυστιδίων
ύστερα από σύντηξη των κυστιδίων με Λυσοσώματα
stimulated διακοπή της έκκρισης (εξωκύτωσης) εκκριτικών κυττάρων
Υπόφυση, σιελογόνοι αδένες DM, παγκρεατικά κύτταρα κλπ
49
ΣΥΜΒΟΛΗ ΤΩΝ ΛΥΣΟΣΩΜΑΤΩΝ ΣΕ ΔΙΑΦΟΡΕΣ ΚΥΤΤΑΡΙΚΕΣ
ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΕΣ
ΠΑΡΑΓΩΓΗ ΘΥΡΟΞΙΝΗΣ (T4) ΑΠO ΤΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΘΥΡΕΟΕΙΔΟΥΣ ΑΔΕΝΑ
ΘΥΡΕΟΣΦΑΙΡΙΝΗ (dimeric glycoprotein, 660kDa)
Έκκριση και Αποθήκευση στον ΕΞΩΚΥΤΤΑΡΙΟ ΧΩΡΟ
Boron WF (2003). Medical Physiology: A Cellular And
Molecular Approach. Elsevier/Saunders. p. 1300
thyroid follicular cells
(epithelial cells, thyrocytes)
follicular lumen
(θυρεοσφαιρίνη +T4 or T3)=colloid
50
ΣΥΜΒΟΛΗ ΤΩΝ ΛΥΣΟΣΩΜΑΤΩΝ ΣΕ ΔΙΑΦΟΡΕΣ ΚΥΤΤΑΡΙΚΕΣ
ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΕΣ
ΠΑΡΑΓΩΓΗ ΘΥΡΟΞΙΝΗΣ (T4) ΑΠO ΤΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΘΥΡΕΟΕΙΔΟΥΣ ΑΔΕΝΑ
Παρουσία ερεθίσματος TSH υπόφυσης (Θυρεοτρόπος Ορμόνη)
ΕΝΔΟΚΥΤΩΣΗ Θυρεοσφαιρίνης (colloid)
Ενδοκυτωτικά Κυστίδια 
Σύντηξη με Πρωτογενή Λυσοσώματα 
thyroid follicular cells
(epithelial cells, thyrocytes)
follicular lumen
Διάσπαση Θυρεοσφαιρίνης σε ΘΥΡΟΞΙΝΗ T4 
T4 in thyrocyte cyt 
 Απελευθέρωση σε Τριχοειδή Αγγεία (ΤSH)
Επίδραση στην μεταβολική δραστηριότητα πολλών τύπων
κυττάρων
51
ΣΥΜΒΟΛΗ ΤΩΝ ΛΥΣΟΣΩΜΑΤΩΝ ΣΕ ΔΙΑΦΟΡΕΣ ΚΥΤΤΑΡΙΚΕΣ
ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΕΣ
ΙΝΟΒΛΑΣΤΕΣ και ΟΣΤΕΟΚΛΑΣΤΕΣ: Εξωκυττάρια απελευθέρωση
Λυσοσωμικών υδρολυτικών ενζύμων
1. Διάσπαση ΣΥΝΔΕΤΙΚΟΥ Ιστού (προ της ΟΣΤΕΟΠΟΙΗΣΗΣ)
2. Οστική Αναδόμηση
52
ΣΥΜΒΟΛΗ ΤΩΝ ΛΥΣΟΣΩΜΑΤΩΝ ΣΕ ΔΙΑΦΟΡΕΣ ΚΥΤΤΑΡΙΚΕΣ
ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΕΣ
ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑ ΑΝΟΣΟΠΟΙΗΤΙΚΟΥ ΣΥΣΤΗΜΑΤΟΣ
Φαγοκυττάρωση (ή ενδοκύτωση) ΑΝΤΙΓΟΝΩΝ
από ΜΑΚΡΟΦΑΓΑ
Διάσπαση σε ΜΙΚΡΑ ΠΕΠΤΙΔΙΑ στα ΛΥΣΟΣΩΜΑΤΑ
Έκθεση στη Μεμβράνη μέσω του MHC class-II
Σύνδεση με Υποδοχέα TCR CD4+ Τ-κυττάρου
Ανοσολογική Απόκριση
53
ΑΣΘΕΝΕΙΕΣ ΠΟΥ ΟΦΕΙΛΟΝΤΑΙ ΣΤΑ ΛΥΣΟΣΩΜΑΤΑ
Λυσοσωμικές ασθένειες «αποθήκευσης» στον άνθρωπο
Θεραπεία: κυτταροποσική εισαγωγή λιποσωμάτων (τεχνητών μεμβρανικών
κυστιδίων) γεμάτων από το ένζυμο που λείπει
54
ΑΣΘΕΝΕΙΕΣ ΠΟΥ ΟΦΕΙΛΟΝΤΑΙ ΣΤΑ ΛΥΣΟΣΩΜΑΤΑ
Λυσοσωμικές ασθένειες «αποθήκευσης» στον άνθρωπο
The first clinical reports describing what were later shown to be Lysosomal Storage
Disorders (LSDs) were published around a hundred years ago (Tay, 1881; Gaucher, 1882;
Fabry, 1898; Niemann, 1914; Hunter, 1917).
The lysosome itself, however, was only discovered five decades later, by Christian de
Duve (de Duve et al., 1955)
Pompe disease, a glycogen storage disorder, was due to deficiency of a lysosomal enzyme
(acid maltase deficiency; Hers, 1963).
lipid storage: lipidoses
Sphingolipids: sphingolipidoses
Oligosaccharides: oligosaccharidoses
55
Συμπεράσματα
The Lys is not actually only a “body”, but the central coordinator of a remarkably diverse and
dynamic system collectively known as the endosomal–lysosomal system
This organelle and the constituent pathways to which it is linked comprise a processing and
recycling center essential to all cells
1. Lysosomes are now known to contain more than 50 acid hydrolases (phosphatases,
nucleases, glycosidases, proteases, peptidases, sulfatases and lipases) responsible for the
cellular digestion of most macromolecules- Use in biosynthetic processes.
2. The biosynthetic pathway: which is involved in the transport of newly synthesized
proteins from the Golgi complex to Lys
3. The endocytic pathway: where extracellular components are internalized linking cells
with their external environment
4. The autophagic pathway: an ubiquitous cellular route by which long-lived proteins and
whole organelles are sequestered for lysosomal degradation.
Operating in close parallel with these pathways is an additional mechanism:
the ubiquitin–proteasome system (UPS), which is functionally allied with the lysosomal
system in maintaining proteolytic quality control mechanisms in eukaryotic cells
Coutinho et al., 2015. Gene 555:50-58
56
Συμπεράσματα
The endosomal–lysosomal system is also intimately involved in the processes of
phagocytosis and antigen presentation, which are necessary for regulation of
inflammation and control of the immune response against foreign bodies (bacteria,
viruses, etc.)
It plays a major role in the regulation of apoptotic processes within the cytosol
via signal transduction
in the secretion of cellular cargo (eg. signaling molecules as neurotransmitters or
toxic cellular metabolites) by exocytosis, factors that are all involved in inflammation,
oncogenesis and neurodegenerative disorders
Lys can also be implied in processes such as cholesterol homeostasis, cell
membrane repair (calcium regulated), fertilization, receptor recycling and regulation,
cell division, skin pigmentation as well as in bone and tissue remodeling
As a whole, the lysosomal system functions as a highly efficient and
coordinated network essential for the metabolic homeostasis of the cell
Coutinho et al., 2015. Gene 555:50-58
57
Συμπεράσματα
Disruption of such carefully orchestrated processes leads necessarily, to catastrophic
consequences for cells, organs, and individuals, with nearly 60 different types of lysosomal
diseases documented to date (Micsenyi and Walkley, 2012. The lysosomal system: physiology
and pathology, In: Metha, A.,Winchester, B. (Eds.), Lysosomal Storage Disorders — A Practical
Guide, 1th edition Wiley-Blackwell (John Wiley & Sons, Ltd)
Over the years the use of combined biochemical, morphological, cellular and molecular
methodologies to study the lysosome and its related diseases have been crucial
not only to clarify their complex pathobiology but also to expand our view of the lysosome
from a degradative organelle to one intimately linked to multiple cellular processes.
Nowadays, the lysosome is far from being a “stationary” compartment.
Novel genes and proteins contributing to lysosome function continue to be identified and
the list of lysosomal and lysosomal-associated diseases continues to grow.
Further understanding of the molecular and cellular pathogenesis of lysosomal diseases will
broaden the range of therapeutic targets for LSDs, as well as the opportunity to improve
knowledge about the endossomal–lysosomal system.
The lysosome is no longer viewed as just an end-point degradative
compartment, but rather as part of a very complex and interactive set of
intracellular organelles that have a wide array of specialized functions
58
Coutinho et al., 2015. Gene 555:50-58