CURRICULUM VITAE Personale Nome: Sarah Vascellari Data e luogo di nascita: 12 Gennaio 1976, Cagliari (Italia) Cittadinanza: Italiana Precedenti posizioni lavorative 2013 Assegno di ricerca presso l’Università degli Studi di Cagliari, Dipartimento di Scienze Biomediche. Titolo del progetto: “Patologie infettive del sistema nervoso centrale: caratterizzazione di processi cellulari e molecolari per lo sviluppo di prodotti diagnostici e nuovi farmaci”. 2012 Co-Principal Investigator del progetto di ricerca finanziato dalla fondazione Alliance Biosecure, presso i Rocky Mountain Laboratories (NIH/NIAID, USA), Laboratory of Persistent Viral Diseases, TSE/Prion Biochemistry Section. Titolo progetto: Utilizzo della Real Time QuIC e Enhanced QuIC per la diagnosi ante-mortem e pre-sintomatica della vCJD, sCJD, scrapie classica e atipica. 2011-2012 Postdoctoral Visiting Fellow, con borsa di studio finanziata dal National Institutes of Health (NIH), presso i Rocky Mountain Laboratories (NIH/NIAID, USA), Laboratory of Persistent Viral Diseases, TSE/Prion Biochemistry Section. Senior Investigator: Dr Byron Caughey, Ph.D. Progetto di Ricerca: Adattamento della reazione Real Time Quaking-induced conversion (RT-QuIC) e Enhanced QuIC (eQuIC) per il rilevamento della proteina prionica in campioni biologici di animali affetti con la scrapie sperimentale e naturale (i.e. tessuti cerebrali, plasma). 2010-2012 Vincitrice di un assegno di ricerca finanziato dalla Regione Sardegna come percorso di rientro del programma Master & Back, presso l’Università degli Studi di Cagliari, Dipartimento di Scienze Biomediche. Titolo del progetto: “Studio del ruolo del metabolismo lipidico nel processo di generazione/deposizione di proteina prionica in modelli in vitro e in vivo di TSE mediante uso di farmaci modulatori del metabolismo/traffico del colesterolo”. 2009 Contratto di diritto privato (co.co.co) con l’Università degli Studi di Cagliari, Dipartimento di Scienze Biomediche, Sezione di Microbiologia e Virologia, per lo svolgimento di una attività di collaborazione col progetto da titolo “Sviluppo di metodologie per la modelizzazione e lo studio di farmaci e biofarmaci 1 2008 Maturato Stage nell’ambito del programma Master and Back della Regione Sardegna presso l’Istituto Superiore di Sanita’, Dipartimento di Biologia Cellulare e Neuroscienze, Reparto Clinica Diagnostica e Terapia delle malattie Degenerative del Sistema Nervoso Centrale, Roma, Italia. Studi 2007-2010 Conseguito il Dottorato di Ricerca in “Sviluppo e Sperimentazione di Farmaci antivirali” presso l’Università degli Studi di Cagliari, Dipartimento di Scienze Biomediche, Sezione di Microbiologia e Virologia: Tesi dal titolo “Studi sul ruolo del colesterolo nella patogenesi dei disordini da prione”. 2007 Esame di Stato di abilitazione all’esercizio della professione di biologo 2007 Tirocinio facoltativo presso la società Biofarmitalia S.p.a nella sede di Pula Polaris-Parco Scientifico e Tecnologico-Loc.Piscinamanna col Progetto di ricercadal titolo “ Attività inibitoria di farmaci antinfiammatori per applicazione sottolinguale nelle allergie”. Tirocinio facoltativo post-lauream presso i laboratori del Dipartimento di Scienze 2007 Biomediche, Sezione di Microbiologia e Virologia, Università degli Studi di Cagliari. Laurea Summa Cum Laude in Scienze Biologiche (VO) presso l’Università degli Studi di 2006 Cagliari Dipartimento di Scienze Biomediche, Sezione di Microbiologia e Virologia, con tesi dal titolo “Malattie da protein misfolding e omeostasi intracellulare del colesterolo”. Internato di tesi presso il Dipartimento di Scienze Biomediche dell’Università degli Studi di 2005 Cagliari (un anno); Collaborazioni Scientifiche Rocky Mountain Laboratories, National Institutes of Health (NIH/NIAID), Hamilton (USA) o Obiettivo del progetto: Sviluppo di un test per la diagnosi ante-mortem e pre-sintomatica della nuova variante di Creutzfeldt - Jakob, della sua forma sporadica di Creutzfeldt - Jakob, e delle forme genetiche delle malattie da prione nell'uomo. o Collaboratori: Dr Byron Caughey (Principal Investigator, Laboratory of Persistent Viral Diseases, TSE/Prion Biochemistry Section). Istituto Superiore di Sanitá, Roma, Italia o Obiettivo del progetto: sviluppo di un saggio per la diagnosi pre-sintomatica della malattia Creutzfeldt-Jakob disease (CJD) nelle sue forme sporadiche e infettive. o Collaboratori: Dr Maurizio Pocchiari (Dirigente di ricerca, Dipartimento di Biologia Cellulare e Neuroscienze), Dr Franco Cardone (Dipartimento di Biologia Cellulare e Neuroscienze). 2 Istituto Superiore di Sanitá, Roma, Italia o Obiettivo del progetto: sviluppo di un saggio per la diagnosi pre-sintomatica della scrapie atipica negli ovini. o Collaboratori: Romolo Nonno, DVM (Dipartimento di Sanità Pubblica Veterinaria e Sicurezza Alimentare. Istituto di Roslin, Universita’ di Edimburgo, Roslin, Midlothian, UK. o Obiettivo del progetto: sviluppo della RT-QuIC e eQuIC per il rilevamento della scrapie sperimentale nel topo. o Collaboratori: Rona Barron, (Dipartimento di Neurobiologia). Corsi di Formazione Professionale 2011-2012 corso di “Responsible Conduct in Research” sponsorizzato dal National Institutes of Health (NIH), Rocky Mountain Laboratories (RML), USA. 2011-2012 corso di “Using Animals in Intramural Research” sponsorizzato dal National Institutes of Health (NIH), Rocky Mountain Laboratories (RML), USA. 2011-2012 corso di “NEMS Awareness” sponsorizzato dal National Institutes of Health (NIH), Rocky Mountain Laboratories (RML), USA. 2009 corso in “Biosicurezza e Radioprotezione”, Università degli Studi di Cagliari, Italia. Competenze Tecniche • Esperienza di lavoro in laboratori con livello di biosicurezza 2 e 3 (BL2, BL3) • Isolamento, identificazione e caratterizzazione biochimica di batteri e funghi Saggio Kirby Bauer • Metodologie per colture cellulari: - isolamento e subcultura di colture cellulari primarie da campioni biologici umani e animali - mantenimento di linee cellulari sia umane che animali; - congelamento cellule; - clonaggio cellulare; • Saggi di citotossicita` e vitalita` cellulare: - Saggio MTT; - Saggio di incorporazione di 3H-TdR in DNA; - metodo di esclusione col trypan blue; • Metodiche Biochimiche: C - Purificazione della proteina prionica ricombinante PrP Sc - Purificazione della PrP Sc - Estrazione della PrP dal CNS; con la streptomicina da tessuti cerebrali; Sc - Saggi di amplificazione in vitro della proteina prionica patogena (PrP ) quali Standard (quakinginduced conversion) QuIC, Real Time QuIC ed Enhanced QuIC (eQuIC); 3 -Determinazione delle proteine totali mediante saggio BCA, colorazione in gel Deep Purple, Silver Staining e Comassie Blue; • Saggi sui lipidi - Estrazione dei lipidi da colture cellulari e tessuti cerebrali col metodo di Folch; - Separazione dei lipidi con la Thin Layer Chromatography; - Saggio enzimatico per la quantificazione dei lipidi; - Determinazione del contenuto intracellulare di lipidi col metodo dell’Oil Red O per la colorazione intracellulare degli esteri del colesterolo; • Biologia Molecolare: - Western e Dot blot; - Saggio ELISA; • Procedure di stabulazione: contenzione animale; anestesia intraperitoneale, inoculo intracerebrale con omogenato cerebrale infettato sperimentalmente con la scrapie, prelievo dei principali organi sede dell’accumulo della proteina prionica patogena. Conoscenze linguistiche Italiano: madrelingua Inglese: livello buono Competenze informatiche WINDOWS; MS WORD, MS EXCEL, MS POWER POINT Pubblicazioni 1 Pivetta T., Trudu F., Valletta E., Isaia F., Castellano C., Demartin F., Tuveri R., Vascellari S., Pani A. Novel Copper (II) complexes with 1,10-phenanthroline derivatives as new promising antitumoural agents: synthesis, solution study, antitumour properties and DNA binding investigations. Crystal structure of [Cu(1,10-phenanthroline-5,6-dione)2(OH2)(OClO3)](ClO4). Chem. Eur. J. 2014 doi:10.1002/chem.200..(in press). 2 Vascellari S., Orru’ CD, Hughson AG, Wilham JM., Baron GS., Race B., Pani A., Caughey B. Prion Sc seeding activities of mouse-adapted scrapie strains with divergent PrP ultrastructures and protease sensitivities using RT-QuIC and eQuIC. Plos One 2012, 7 (11): e48969 doi:10.1371/journal.pone.0048969. 3 Wilham JM., Orru’ CD, Vascellari S., Hughson AG., Caughey B. Prions and Prion Diseases: Quaking-induced conversion (QuIC) assays for the detection and diagnosis of TSE prion diseases. Springer, Volume 2, Animals, Humans and the Environment ISBN 978-1-4614-5337-6, Due: November 30, 2012. 4 Orru’ C. D., Wilham JM, Vascellari S, Hughson AG., Caughey B. New generation QuIC assays for prion seeding activity. Prion, 2012, 6:2, 1-6; doi.org/10.4161/pri.6.2.19430. 4 5 Vascellari S and. Pani A.. Studies on role of cholesterol in the pathogenesis of prion disorders. Lambert Academic Publishing (2012). 6 Pani A., Vascellari S., Orru’ C.D., Abete C., Mandas A., Dessi’ S.. Systemic Alteration Of Cholesterol Homeostasis In Experimental And Natural Scrapie. J Antivir Antiretrovir 2011 vol. 3, p. 148, ISSN: 1948-5964, doi: http://dx.doi.org/10.4172/1948-5964.S1.14. 7 Vascellari S., Banni S, Vacca C, Vetrugno V, Cardone F, A Di Bari M, La Colla P and Pani A. Accumulation and aberrant composition of cholesteryl esters in Scrapie-infected N2a cells and C57BL/6 mouse brains. Lipids in HeaIth and Disease, 2011, 10:132, ISSN: 1476-511X; doi:10.1186/1476-511X-10-132. 8 Pivetta T., Cannas M.D, Demartin F., Castellano C., Vascellari S., Verani G., Isaia F.. Syntesis, Structural Characterisation, Formation Constants and in vitro cytotoxicity of phenantroline and imidazoli dine-2-thione copper (II) complexs. Journal of Inorganic Biochemistry, 105, 2011, 329– 338; doi:10.1016/j.jinorgbio. 2010.11.017. 9 Peiretti E., Mandas A., Cocco P., Norfo C., Abete C., Angius F., Pani A., Vascellari S., Del Fiacco G., Cannas D., Diaz G., Dessì S., Fossarello M.. Glucose-6-phosphate-dehydrogenase Deficiency as a Risk Factor for Pterygium. Investigative Ophthalmology & Visual Science, 2010, Vol. 51, No. 6; doi: 10.1167/iovs.09-4426. 10 Orru’ C. D., Cannas M.D.,Vascellari S., Abete C., Angius F., Cocco P.L., Norfo C., Mandas A., La Colla P., Dessi S., Pani A.. Pharmacologic-induced cholesterol homeostasis affects prion generation in a synergistic manner. The Open Conference Proceedings Journal, 2010, 1, 54-60. 11 Orrù, C.D., Cannas, M.D., Vascellari, S., Angius, F., Cocco, P.L., Norfo, C., Mandas, A., La Colla, P., Diaz, G., Dessì, S., Pani, A.. In vitro synergistic anti-prion effect of cholesterol ester modulators in combination with chlorpromazine and quinacrine. Central European Journal of Biology, 2010, vol. 5(2); p. 151-165, ISSN: 1895-104X, doi: 10.2478/s11535-009-0070-9. 12 Orru’ C. D., Abete C., Cannas M.D., Mulas C., Norfo C., Mandas A., Vascellari S., La Colla P., Dessi S., Pani A. ACAT-1, Cav-1 and PrP expression in scrapie susceptible and resistant sheep. Central European Journal of Biology, 2010, vol. 5(1); p. 31-37, ISSN: 1895-104X; doi: 10.2478/s11535009-0076-3 13 Orru C. D., Cannas M. D., Vascellari S., Angius F., Cocco P. L., Norfo C., Mandas A., La Colla P., Dessi S., Pani A. In vitro synergistic antiprion effect of cholesterol ester modulators. Nature Precedings 2009. 14 Pani A., Norfo C., Abete C., Mulas C., Putzolu M., Laconi S., Orru C. D., Cannas M. D., Vascellari S., La Colla P., Dessi S.. Accumulation of cholesterol esters in ex vivo lymphocytes from scrapiesusceptible sheep and in scrapie-infected mouse neuroblastoma cell lines. American Journal of Infectious Diseases, 2007, 3(3): 165-168. 15 Pani A., Norfo C., Abete C., Mulas C., Putzolu M., Laconi S., Orru’ C. D., Cannas M. D., Vascellari S., La Colla P., Dessi S. Anti-prion activity of cholesterol esterification modulators: a comparative study in ex vivo sheep fibroblasts and lymphocytes and in mouse neuroblastoma cell lines. Antimicrobial Agents and Chemotherapy 2007, 51(11): 4141-4147. doi:10.1128/AAC.00524-07. Partecipazioni a Congressi 1 Vascellari S., Hughson AG., Cardone F., Pocchiari M., Caughey B., Orrù CD., Pani A. RT-QuIC sCJD spiked into human urine. Prion Conference, May 27-30, 2014 Trieste (Italy). detection of PrP 2 Marshall KE, Vascellari S, Baron JS. Transmembrane anchoring of the prion protein in a Prnp knockout cell line: the effects of plasma membrane subdomain location on PrPres. 27 Novembre-1 Dicembre, 2012, Mexico. 3 Orrù CD, Vascellari S, Wilham JM, Hughson AG, Raymond LD, Raymond GJ, Pani A, Caughey B. Ultrasensitive detection of prion seeding activity by RT-QuIC and eQuIC assays for early diagnosis 5 of prion diseases. 15° Convegno degli Istituti Zooprofilattici Sperimentali sulle Encefalopatie Spongiformi Animali, 4-5 Ottobre 2012, Sala Conferenze Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte Liguria e Valle d’Aosta, Torino (Italia). 4 Orrù CD, Vascellari S, Wilham JM, Hughson AG, Raymond LD, Raymond GJ, Pani A, Caughey B. Ultrasensitive detection and quantitation of prion seeding activity by RT-QuIC and eQuIC assays. XII Congresso Federazione Italiana Scienze della Vita (FISV). 24-27 Settembre 2012, Universita` La Sapienza Roma (Italia). 5 Orrù CD, Wilham JM, Vascellari S, Hughson AG, Raymond LD, Raymond GJ, Caughey B. Ultrasensitive detection and quantitation of prion seeding activity by RT-QuIC and eQuIC assays. 1920 Settembre 2012, Hokkaido University, Sapporo, Japan. 6 Orrù CD, Wilham JM, Vascellari S, Hughson AG, Raymond LD, Raymond GJ, Caughey B. Ultrasensitive detection and quantitation of prion seeding activity by RT-QuIC and eQuIC assays. o 11 Congresso Nazionale della Societa` Italiana di Virologia, 17-19 Settembre 2012,Palazzo del Capitano del Popolo, Orvieto (TR, Italia). 7 Caughey B., Orrù CD., Wilham JM., Vascellari S., Hughson, AG., Raymond LD., Raymond GJ. Prion-seeded conversion of recombinant PrP: implications for prion biology and diagnostics. Prion Conference, May 9-12, 2012 Amsterdam. 8 Vascellari S., Manca M, Pilla F, Banni S, Vacca C, Vetrugno V, Cardone F, Di Bari MA, La Colla P and Pani A. Accumulation and aberrant composition of cholesteryl esters in Scrapie-infected N2a cells and C57BL/6 mouse brains. In: SIV congress,12-14 Sept. 2011; Orvieto (Italy). 9 Pani A., Vascellari S., Orru’ C.D., Abete C., Mandas A., Dessi’ S.. Systemic Alteration Of Cholesterol Homeostasis In Experimental And Natural Scrapie. International Conference and Exhibition on Virology. 5-7 Sept. 2011, Baltimora, USA 10 McGuire J., Wilham JM., Vascellari S.and Baron G.S. Visualization of Prion Protein Trafficking in Primary Neurons. Mechanisms of Neurodegeneration in CNS Diseases. 18-19 Aug, 2011, Hamilton, MT (USA). 11 Pani A, Orru CD, Cannas MD, Vascellari S., Abete C, Angius F, Cocco PL, Norfo C, Mandas A, La Colla P, Dessi S. Lipid derangement and prion misfolding in prion infected mouse neuroblastoma cells lines and in brains and skin fibroblasts from scrapie-susceptible sheep. In: 14th European Congress of Virology. 7-11 Apr. 2010, Cernobbio, Italy. 12 Orru CD, Cannas MD, Vascellari S., Abete C, Angius F, Cocco PL, Norfo C, Mandas A, La Colla P, Dessi S, Pani A. Pharmacologic-induced cholesterol homeostasis affects prion generation in a synergistic manner. In: 2nd International conference on drug discovery and therapy . Dubai, UAE, 14 Feb. 2010. 13 Cannas MD, Orru’CD, Vascellari S., Abete C, Angius F, Cocco PL, Norfo C, La Colla P, Dessi’S, Pani A. Cholesterol homeostasis and prion misfolding: a comparative study in mouse neuroblastoma cells and in sheep brains and skin fibroblasts. . In: 11th FISV congress. Riva del Garda, Italy, 23-25 Sept, 2009. 14 Orru C D.,. Cannas MD., Basciu M., Manconi F., Vascellari S., Abete C., Mulas C., Norfo C., Putzolu M., Saba A.. Neurodegenerative diseases and protein misfolding: new inhibitors and novel targets. XVI Sardianian Scientific week, March 2006, Cagliari, Italy. Referenze Telefono: +1 4063639264, e-mail: [email protected] Alessandra Pani, Ph.D. Professore Associato di Microbiologia Generale, Dipartimento di Scienze Biomediche, Università di Cagliari, Italia. 6 Telefono: +39 070 675 4209, Fax: +39 070 675 4210, e-mail: [email protected] Paolo La Colla, Ph.D. Professore Ordinario di Microbiologia Generale , Dipartimento di Scienze Biomediche, Università di Cagliari, Italia. Telefono: +39 070/675 4147 Fax: +39 070/675 4210, e-mail: [email protected] Byron Caughey, Ph.D. Senior Investigator presso Rocky Mountain Laboratories, TSE/Prion Biochemistry Section, National Institutes of Health (NIH/NIAID). Con la sottoscrizione della presente autorizzo il trattamento dei dati personali ai sensi della Legge 675/96, ed altresì dichiaro la veridicità delle informazioni riportate, consapevole delle sanzioni penali di cui all’Art. 12 del D.Lgs. n°157/1995 modificato dall’Art. 10 del D.Lgs. n° 65/2000. Oltre al trattamento dei dati personali, il presente curriculum è stato redatto sotto forma di dichiarazione sostitutiva di certificazione ai sensi dell’art. 2 Legge n.15 del 04/01/1968, come modificato dall’art. 3 della Legge n.127/1997, DPR N.403 del 20/10/1998 e DPR n:445/2000. Cagliari, 4 Luglio 2014 In fede: Dott.ssa Sarah Vascellari 7
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