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ウェスタンの抗体反応を自動化−
ハンドリング削減とデータ品質向上を同時に実現
iBind™ Western System
iBind™ Western Systemは、ウェスタン解析のブロッキング∼2次
抗体反応後の洗浄までのプロセスを自動化したシステムです。
(SLF)
技術を使用し、反応の順に
新しいSequential Lateral Flow
抗体液・洗浄液のリリースをコントロールします。
また、システムは外部電源を必要としないので、実験室のどこでも
使えて、全くの無音で反応が進みます。
iBind™ Western System は、ハンズフリーによる利便性に加え、
マニュアル法よりも感度および再現性に優れたデータが得られます。
1. 自動化・ハンズフリー
・すべての抗体反応・洗浄ステップを自動化
・最初に抗体と洗浄液をセットしたら、あとは反応終了するまで待つ
だけ
(約2.5時間)
・そのまま一晩放置することも可能。メンブレンは翌日に検出できる
・煩雑な作業から解放されることで、
他の実験・研究に使える新たな時間を確保
・研究スピードの加速・効率化
・人的ミスやバラつきを回避し、やり直しの
リスクを低減
2. 時間を節約
・従来の非常に長く、一晩かけていた抗体反応を、約2.5時間に短縮
・最初のセットアップ作業はたった15分
【操作の流れ】
① i Bind™ DeviceにiBind™ Cardと
メンブレンをセット
② 装置の4つのウェルに
抗体液・洗浄液をセット
③ 約2.5時間、静置する
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メンブレン
ウェルカバー
iBind™ カード
1. 1次抗体
3. 2次抗体
2. iBInd™ Solution 4. iBInd™ Solution
新技術
Sequential Lateral Flow(SLF)
新しいSLF技術は、
システム本体から iBind™ Card に加えられる機械的な圧力によって、
各溶液が適切なタイミングでリリースされます。 iBind™ Card に埋め込まれたグラス
ファイバーによって、
抗体液および洗浄液がウェスタンメンブレン上を一定速度で流れます。
iBind™ Card の一方の端に取り付けられたろ紙スタックが、カードおよびメンブレンを
通して溶液を引き寄せる役割を果たします。
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④ メンブレンを取り出し、
APまたはHRPで検出
3. マニュアル法よりも優れたパフォーマンス
・多くの抗体において、マニュアル法よりも高感度に検出(図1)
クリアなウェスタンデータ
・高いS/N比で、
ブロット間でのバラツキが無く、再現性の高い結果が得られる
・自動処理プロセスにより、
iBind™ システム: CVs= 5% マニュアル法: CVs= 13%
Phospho-Akt
A iBind™ システム
B Manual法
図1. iBind™ システムによる検出はマニュアル法に比べてより優れた感度を実現
Phospho-Akt:
リン酸化Aktに対してウェスタンブロットを実施(左レーンより30μg‐500ng
の細胞抽出物を泳動)。iBind™および抗体メーカー規定のプロトコールに従
い検出した(抗 phospho-Akt[Thr308][C31E5E]モノクローナル一次抗
体;HRPコンジュゲート抗ウサギ二次抗体)。マニュアル法(B)ではリン酸化
Aktが4μgの細胞抽出物中で検出されたのに対し、iBind™ システム(A)では
500ngの細胞抽出物中でも検出できた。
CREB
C iBind™ システム
CREB :
CREBを発現する細胞溶解液を用いてウェスタンブロットを実施(左レーンよ
り30μg‐1μg細胞溶解液を泳動)。iBind™ Systemおよび抗体メーカー規定
のプロトコールに従い検出した
(抗CREBポリクローナル一次抗体;HRPコン
ジュゲート抗ウサギ二次抗体)。マニュアル法(D)ではCREBの検出に10μg
の細胞溶解液が必要なのに対し、 iBind™ システム
(C)
では6μgの細胞溶解
液中でCREBを検出した。
A-Dの全てのブロットは、Bolt® 電気泳動システムを用いてタンパク質を分離し、
わずか7分で転写可能なiBlot® システム を用いてPVDF膜へ転写を行なった。
D Manual法
Ordering Information
製品名
サイズ
製品番号
1 セット
iBind Starter Kit
™
・iBind Device(SLF1000)
:1台
:10枚
・iBind Cards(SLF1010)
:1キット
・iBind Solution Kit(SLF1020)
iBind™ Western Device
iBind™ Cards
iBind™ Solution Kit
AP Mouse Chemiluminescent Detection Kit
AP Rabbit Chemiluminescent Detection Kit
iBind™ Western Device 4 Pack
1台
10 枚 / 箱
1 キット(10反応分)
1 キット(10反応分)
1 キット(10反応分)
4台
SLF1000S
¥ 168,000
SLF1000
SLF1010
SLF1020
SLF1021
SLF1022
SLF10004PK
¥ 158,000
* 記載の価格は2013年9月現在の価格です。消費税は含まれておりません。価格は予告なしに変更する場合がありますので予めご了承ください。
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