/ OLYMPUS R レーザー走査型顕微鏡 FV1200 B X 6 1 クイックスター卜 c . ι 、 、 、 FV1200 B X 6 1 クイックスタート 目次 dE J 4E 4E に1 u 4E I 守 ﹄品T ,ι η,ι η L n,ι n ,ι nun に Jv nHunζ 円 φ8ι 寸 F hJvauau φ 円 qLndnd 司 dnd 2 fnwM41η4nd 設定条件のリロード 守 ZP r o j e c t i o nの20View作成 。 内 −補足説明− 30立体画像構築 2DViewウインドウについて 取得画像の Export 取得波長範囲の調整 ( VBF)(SPD仕様のみ〉 HardD i s kレコーテ、 イング伶 aaTFHJUFO ー画像取得応用編− XYT画像取得(シングルスキャナで光刺激) XYT画像取得( SIMスキャナで光刺激) (SIM仕様のみ〉 XY画像の取得( V i同u a lChannelで4重染色) 画像の取得( HDRi) ・ 唱・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ −画像取得基礎編ー システムの立ち上げ 顕微鏡での目視観察 画像取得操作パネル概略 XY 画像の取得(単染色) XY画 像 の 取 得 ( 多重染色)Sequentialスキャン XYZ画 像 の 取 得 XYT画 像 の 取 得 XY画像の取得(単染色+ DIC) XYλ 画像の取得( SPD仕織のみ〉 システムの終了 2 / / 画像取得 一基礎編− 3 3 \ 、 システムの立ち上げ 2-8,C,D 1 .集中電源を ONrこしてからコントローラを ONにします。 2 レーザーを立ち上げます。 −− e . A . . .・ . タ ﹄ . . .. . . I A:MCPSU( 4 0 5 / 4 4 0 / 4 7 3 / 5 5 9 / 6 3 5 n m )I 通常は集中電源につながっているので、 操作は不要です。 IB:LD559 I ①主電源を ONにします。 PL ランプが緑色に点灯します。 ②キースイッチを時計方向に回してONIこします。 IC:MultiArレーザ| キースイッチを時計方向に回してONにします。 B:LD559レーザ I D:HeNe(G)レーザ(543nm)I キースイッチを時計方向に回してONにします。 D:HeNe(G)レーザ 3 .水銀ランプ電源装置の電源スイッチを ONrこします D ※目視観察に使用します。 4 .ユーザー名・パスワードを入力し、 WindowsヘLogonします。 ユーザー名 パスワード Windows7( 6 4 b i t ) olympus olympus その他 f l u o v i e w f l u o v i e w OS をダブ jレクリックし、 FVIO-ASW ソフトウェア起動します。 FV10-ASW 5 Ver . OX.XX 出町 I D:[ Adminis 廿呂町 ヨ Passw o r d : 立 竺斗 4 jユーザー名: A d m i n i s t r a t o r パスワード: A d m i n i s t r a t o r i 一竺」 三竺~ 4 顕微鏡での目視観察 ・・蛍光画像の観察・・ ・ メ モ ・ 蛍光ミラーユニットについて 1.I、ンドスイッチで、対物レンズ、を選択します。 WBV:青紫色勘起( ECFP 等 ) NIBA; 青色励起/ 緑色蛍光 ( 例: FITC、EGFP等 ) ハンドスイッチ WIG : 緑色励起/ 赤色蛍光 ( 倒: Rhodamine、 DsRedW) W U: UV 励起 2.FVlO-ASWソフトウエアの 図 クリックします o を 3.I、ンドスイッチで蛍光ミラーユニットを 選択します。 F冒曹開殉型開閉帽曹胃咽曹' I I " ' ーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーーー・園町 ・ 4.フォーカスを合わせます。 5 観察後園 をクリツ礼蛍光ランプの シャッターを閉じます。 ・ J ・・微分干渉画像の観察・・ A.ハンドスイッチで、 対物レンズを選びます。 4J ) ( ノ6 t >メ B.ポラライザを挿入します。 J B 届闘 l . / C .DICスライダを挿入します。 ι レ ラ7 ぐ町k つ3 1 " ) . . 1 < . A i . : r t ~l .ι 匂山 ' ※ご使用の対物レンズに応じ、プリズム位置切替レバーを 「 BF P IJ または「NORMALJ に切り替えます。 D.F川 ASWソ ノ フ クリツクします。 E フォーカスを合わせます。 到割 5 F 観察後、国 をクリックいロゲン ランプのシャッターを閉じます。 5 \ 薗像取得操作パネル概略 ・ ・ ・ A c q u i s i t i o nS e t t i n 2 , ー’ ー − . 1Moae • ロ~ユj スキャンモード I ~で 上 スキャン速度 !些j 五百 | P. 刊. O us L : 0 . 0 1 0 m s F : O . O O O s S. 0 . 0帥 s 散・ 素一 画一 目的当 「 剖h 耐 剖Y ’ 甲 「ーヨ i 12 図上/令、 、 一1 ・ l Rot.lt~o!’ ( Zoom&Pan 斗」 二J 主j 1 . 0. ! J ~ …J p, ) I ! : " .. .. 川 斗 u 国 I P ' SH e − 一 ~ ~ τ S t . 1 1 1r : =− ; :. ' … .・ ・ 5 . 0・ . 斗 5 . 0 一ー’o . o -・. rーーーτ= 士 ・ ラムダスキャン般定 旦 i 占b ~盟 | 晶 弘出 品 笠J~ I 品 包当 | 晶 弘笥 0 . ー| 橿ー | 一 一|l 一一三 回J一− ・一一 一三」一三J一三」 | ーヱ」ーとJ ーと」 | 一三JニJ一三」 一三」 三」 | 一三」ょ 」三 1 雪角川出 ;o·.~I~ ~-0~~1酌 λl此 よ 53 円 B 戸 t 1 4I11 0 1 oI 98 カルマン積算股定 勺 _J 「 Sequen t i. l l 対物レンズ TR CA 1 oI1 2 2 口” 州 Im , F 刊 剛 山 E川 oI 2 4 3 1 o uu 山 内 ~ SU U ︶川 主j 10. 0' • ・4 5 . 0− ・ ’ レーザー出力股定 「 バ寸﹂ Lase• −一一一一 「 ~0 5 ~ rg 圏「ゴ1 r a 国「つ l r E 盟F つ1 r 1 m 1 1 r ーヨ 1 r 1 国「寸 −一 − 、てご三プ ゴ ・ ImageA c q u i s i t i o nC o n t r o l H . udDiskRe 削刷抑制。 1 HardD i s kR e c .段定 (補足脱明資料参照) 仁 二亙ζ二 コ コンフオーカルアパー ヤ (ピンホール径) 透過ランプ翻光 . . . . . i i i 画幽』ー 盟主j 竺j "i;1 C•M ~日 '" ( '耳 鳴 , .コ v 品 目 司叩玲’M 条件取得のロード (補足説明資料参照) ‘’ ト一一一一一一 -’_xdOblさ ・~ "' ー‘ ,h" ' ' " " " ' H° 岬 . , , , ゐ E x p l o r e rWindow (画像ファイルのサムネール表示) zT l zL j LT l , ° ' J1 Tl c , .L 日 c 川ZI Tl il . . ., ・ 1 1 0 1o c n o 瑚 1 nJ印 印刷 IW刷 電子− ゴllnM.j 叶 = : : J lnM.「’j T ll n M .j ゴ 旦 印刷 mn s :咽 畑 山 盟 主l 叩 褒 の 川 叫 州 臼 山 同 m 立宮 一 川 li m HV −m m 叶寸 | 和 v − r t Rd 斜、 る m 一 山 一 引 −巾 川万 崎町山知一 ぁ =町 口 会且.、園 園町回 M a 6 「 h 山一 ⋮− 則 r QN 喧|ム 自珂一 吋 陥! 子 一一ーで1 圃 . h 一 山 r o . 1 P 1 o ne ¥ l l ew 6 / XY画像の取得(単染色〉 例:緑色蛍光( Alexa488)の単染色 墨| 1 .D y e L i s tパネルから観察する蛍光試薬を 選びダブルクリックします。 2 . Applyボタンをクリックします o とj 否両尋 M竺 j 3 .XYR epeatボタン 表 J を押して、 連続スキャンします。 2 ※生細胞などのサンプルで連続スキャンによる 退色やダメージが気になる場合は、 FocusX2・ X4ボタン ~ゴ Focusx4 r e :画像を間引き しながら撮影することをお勧めします。 Chグループボックスの調整 HY:検出器の感度調整をします Gain:設定倍率で画像を明るくします O f f s e t:背景を暗くします L a s e r 強度の調整 Lase1 「 .tOS 「 p 「 p 同 一 一 一 一 主J1 0 . 0'• • I 主J5. 0∼「 主J 5 . 0 主J3 0 .0 u 主J 5 . 0e 1 53 1 8 8 ・ 。 一 ・ ・ゴ 515 543 6R o t a t i o n ~ -畠『 『、11L 1 6千 当治 | 白 山 ( i . f ) ポ : : , .I ¥ R ・t σi l lI o n l 1 司t P, 1 ) _J I.~?~.:J 史プゴ o~ ” x M 4 .焦準ハンドルを動かしフォーカス調整 を行います。 5 .緑色( A lexa488)画像の調整をします。 < L a s e r 強度、 HV、O f f s e t など) 6 .必要に応じて、 Zoom、ローテーションを 設定します。 Zoom Z : ; J I ~ o j ~1 7 画像調整後、 STOPボタン 置 スキャンを停止させます。 で 8 .AutoHV を選択して、 ScanSpeedを選択 します。 l T ) _•1 ,ム' A w l・ : ・ ・ M叩 h叫 7 崎 町 問 。 '1-:-1 . . 2 ,官 ※ Slow側にする程現在の明るさを保ちながら ノイズを除去することができます。 また、別の方法として Kalman積算があります。 詳細はP8【キレイな画像を取得する POINT】 を ご参照下さい。 7 、 、 、 XY画像の取得(単染色〉 例:緑色蛍光( A le xa488)の単染色 9 9.XYボタンを押して、画像取得します。 10.画像の保存:右クリック、若しくはF il e メニューで SaveAsを選択しOIB/ OI F 形式で保存します。 ・ メ モ ・ FV1 frASW 専用ファイル形式について 旦I E 盈量一 : 「 画像が入ったフォルダ ( 16bi tTI F F) Jと「 付属ファイ が作成されます。これら2つがないと、 ファイルを ルJ 開くことができません。 Sa veAnimatio n . . 旦l 旦並去一 P ri nt . . OIF形式を 1つのファイルにまとめたもの。ファイルの 移 動などをする際は、こちらが便利です。 S e l e c tA l lROis Can celS e l e ct i o n Fl i pSele ct i on n , , , , , , ,AllRm~ . . . 均 , . . . nrn. , 1 r o : 1為、1 1. . . ., 画像をTIFF・ J PEG等 l こE xo o r t する方法は 補 足 説 明資料をご参考下さいの 【キレイな画像を取得する POINT】 |画像が暗い場合| HV を上げる : 検出器の感度を上げます。700V以上にしても十分な明るさが得られない場合は 別の方法も行ってください。 レーザ強度を上げる:励起光の出力が増加し蛍光の明るさが増します。強度を上げすぎると 蛍光が退色したりサンプルへのダメージが大きくなります。 CA を上げる : 通常は 鷹 j ボタンが押されており最適なピントル径を自動で設定します。 [ 葱:!を外閃A(コ ことで明るくなります。 Ga i nを上げる : 画像取込み時に設定した倍率で、画像を明るくします。 |ノイズが多い場合| Kalman 積算・ ・・指定した回数の画像取り込みを行いながら画像の平均化をします。 または Frame) を選択します。 区 単盟 主 旦をクリックし、 Line( 画像の積算回数(スキャン回数)を入力します。 F i l t e 1Mode ~ K t l l n 削 8 σ L i n e 0J~ +色℃ rF 1 t l 附 −一一− 吐4 つ レ し . . . . . . . .~;) ;, しe.し t . , " { j ペ 'u , : . − 台、 ι \ . 8 / XY画像の取得〈多重染色〉 S e a u e n t i a lスキャン 1 .D y e L i s t パネルから観察する蛍光試薬を 選びダブルクリックします。 r r 2 .Appl yボタンをクリックします o J 三竺三 . ! . I . 」 鮎 . .. 剛 ,,. 臥 鉱 . . . . . . . , A拘回 向剛岨"" " 随 " ' ・ ” . , . . . 刷 印 A l exaF A FM 555 2 j 4 .X YR e p e a tボタン 衰 帥 岡 山剛 5 68 「 − F 6 J抑 叫 白色 一 1 1 . . .~Pu.“ Z周 国 三j 7Rotation l2ID 彊罰E 告 雪 ‘ ‘ 三E 主J1 0 . 0。 。バ 主J 5 . 0。 。「 之1 5. 0 . 一 .・ 主J30 . 0 主1 5 . 00 ・斗 Zoom 9ow>> ……一一 ・ 叫 柑 “同~酬. '" − 一 c 砂 ・ 川 州 ー オ』 固l : ,全ぐ 嗣 ’・ : : : − . 一 一 ・ − , t舗 例 P•o~ ・ : : ' ’ p , . ,, y ・ I . . ・ , 宝 庫 ' " ・ . f 0 5 u , , ""' 行います。 6 . 1CH・ 2CHの画像を調整します。 (La se r 強度、 HV、Of f s e t など) 7 .必要に応じて、 Zoom、ローテーションを . 9 $.• "" 刷 ' 同, − ・ '幡 止虫 随 色 錘 受佐 一 一 一 町 加 川 崎 白 ' 白 羽. v一、 ・. a .相 .’ ・ ・ ・ “ 日− 一 − ・ o . w 14 衡訓 ! ' . 5M 酬 旬 ” 一・・ 曹" ' ≫.OO ’・ 剛6 ー; ・・・ 0側 M 0••§闘訓駒両 M楢 山 蜘 曲 L 相 ・ 、 . , . _ s . ; , * u.5 一 一 一 刷 ーヲ ' " 耐 P: 陶 ”叫 τ高 石 川( 寸 J t ; .G 9 『 咽削除 f Dt : : 1" -I ÷| ・ ・ ・ 砂 ・ 園 田 司4 ・ ・ ・4 砂 ≪F . 1 s t . 極 ・e 一”一一.” T 剛 ・ 匂 . . 8 . 画像調整後、 STOP ボタン 直 j で スキャンを停止させます。 E 同,.鵬 M 同 包 ・ 主 ・ ・ . 孤 • ~-, 0 ’・. ” '・ 凶 ・ ・ − ・ ・ t ・ ・・ 砂 咽・ き ‘ しながら撮影することをお勧めします。 • Im a 脳細 " < : ・ : _ I 設定します。 ( ' "•• ~.吋 J ※生細胞などのサンプルで連続スキャンによる 退色やダメージが気になる場合は、 FocusX2・ X4 ボタン丘 竺 F o c u sx J .~画像を間引き 5 .焦準ハンドルを動かしフォーカス調整を a s e r強度の調整 L, 1 ser . t 0 5 . t 53 . t 8 8 515 5 . t 3 を押して、連続 スキャンします。 Chグループボックスの掴整 HV:検出器の感度調整をします Gain:設定倍率で画像を明るくします O f f s e t:背景を暗くします 「 「 P " 「 P " L i n eを 選 択 します。 − ・ . " c ' " . 宙 博白描 ・ 明 「一一τ~ 3 .S e q u e n t i a lをチェックし、 < l 1 2 . 5 nsP以e l −一一一一一ーー 9 .AutoHVを選択して、 S c a nSpeedを選択 します。 ※S l ow側にする程現在の明るさを保ちながら ノイズを除去することができます。 また、別の方法として Ka l ma n積算があります。 詳細は P8【キレイな画像を取得する POINT】 を ご参照下さい。 9 、 XY薗像の取得(多重染色) L i n eS e a u e n t i a l スキャン 10 10.XYボタンを押して、画像取得します。 11.画像の保存:右クリック、若しくはF i l e メニューで、 SaveAsを選択しOIB/ OIF 形式で保存します。 . z ・ メ モ ・ FV10-ASW 専用ファイル形式について 11 旦I E 並重一 「画像が入ったフォルダ ( 1 6 b i tTIFF)J と「付属ファイ が作成されます。これら 2つがないと、ファイルを ルJ 開くことができません。 SaveD isp l ay SaveAnimation P r i n t T or cnr同 '' ?>" ,、.r (・削 c~ in· o 旦16_並韮− Sel ec tA l lRO!s Can celSel ect i o n F l i pS e l e c t i o n O I F形式を 1つのファイルにまとめたもの。ファイルの 移動などをする際は、こちらが便利です。 n .1 . .1 . .A l l ~nr~ 画像をTIFF・ J PEG等 l こE x o o r t する方法は 補足説明資料杢ご参考下さい n ・画像の明るさ調整・ キーボード上で℃trl+Hkeyを押すことにより画像をHi-Low表示で、きます。 強度4095のピクセルは赤色表示されます。 またHi-Lowから通常の表示に戻す際もC t r l+H Key を押すことにより再び もとの色に戻すことができます。 斗﹂ 斗 S田引滋引 l~f'(498 • l・)lnt.75 Zoom: 1 0 0 1 ' 唱EEA AU 唱EEA υ ハ xxz 画像の取得 1 .XY 画像の調整をしておきます。 3 (P6∼、もしくは P8∼を参照) 司副制 U 11 ここでは連続断層画像の上限と下隈を決定します 2 .C l e a rS t e r t / Endを押して取込み開始位置と e t0を押し 終了位置の設定を消去した後、 S 1こする。 て現在の Z位置の表示値を0 3 .XYR e p e a t ボタンを押してスキャンします o ヨ 1 1 4 - ~~ をクリックしていき、ピントをずらします。 ( 参照・メモ聞 ) 5 .画像にサンプル上限が表示されたら、 S e t ボタンで決定します。 6 E o 4 ~ ( 参照・メモ・ ) e E a H . . .s t c o r r l . J t 生i をクリックしていき、ピントをずらします。 7 .画像にサンプル下限が表示されたら、 S e t ボタンで決定します。 ・メモ・ 8 .S t o pボタンでスキャン停止します。 : 1クリックで S t e p Si z eに入力した値ずつ進みます。 1クリックで S t 叩 Si z eI こ入力した 1 / 2値ずつ進みます。 9 .S t e p S i z e又は S l i c eを入力してチェックボックス にチェック 日 を入れます。 (Opボタンで、推奨値をご参考いただけます) 10. D epthを選択します。 11. XYZ ボタンをクリックし、画像取得します。 12 12 .S e r i e sDoneをクリックし、画像を保存します。 3D画像の表示は、補足説明資料をご参照ください。 11 1 1 、 ‘ 、 XYT園像取得 1 .XY画像の調整をしておきます。 ( P6∼、もしくは P8∼を参照) 2 .シリーズボタンの[ Time]を選択します。 』幽幽岨仙』園田園圃園田園田・4 3 .I n t e r v a lボックスに取込み開始から次の取 込み開始までの時間(単位:秒)を入力しま す 。 ~呈J I 百到ヒリ ヨセ戸竺竺ー蜘~~竺J~ P : 1 0 . 0 u s t0 . 0山 崎 F 怠 帥b 匂 S iu S : C U )肺. ’ri .J A句 ,e e l R a t防 r .1 −fル: ri a ’ 耐 , . , M アプ片~ _!]日,,~r一つ 【例】インタ A lt a 回 ,......__ ~ゴ 削捜嗣. " 二 A ' ' : ' ” J 1 1分→「 60Jを入力し[ Enter] - l .J 司2 ・ ・ ・M _ ,旦1 4 リ '..!.l.:.I ····~叫む P 「 ・ '! .周 4 r : ’m 48 8 ~ •• 、 之J1. 0 ~• I 5.~: ∼ ··コ 竺 − ~:刷 、 J . l l . '. . ! f . 圃ーー主 」 J・ ' 占』ーーーーーーーー四ー 4 .Numボックスに取込み回数を入力します。 「 引S i 「TimeScan : I 1 n t e 1 va lIF 1州 un 」固 ま呈~~ --· _!!!!J - N山 5.XYT ボタンをクリックし、画像取得します。 ーーーーーーーー . 利£ 円 九, ' . . l’山岨 "~ "~~·・- 主」 6 .S e r i e sDone をクリックし、画像を保存しま す 。 「蜘民・戸百弓・ 剛 主重詰~ 「 山 「τヨ L' F石 市高石ア」主主ー ル <~·:· ,. : I ' 都世叫司世岨酔l l l , Z 却 脚. , Append Next 品 . 、 e I 1 6 1 2 1 2 / XY画像の取得〈単染色 ±DIC) 例:緑色蛍光+微分干渉像 昆| 1 .DyeList パネルから観察する蛍光試薬を 選びダブルクリックします。 .選択した蛍光 Dyel こ適したスリットの幅や位置などが決まります。 スリットの幅や位置はマニュアルで可変できます。 詳細は補足説明資料をご参考下さい。 2 . Applyボタンをクリックします o 3.TDll こチェックをします。 ポラライザとプリズ、ムスライダが光路に入っていること を確認してください ~ 4 .XYRepeatボタン j 烹 2 •• F 開削側 Co• を押して、 連続スキャンします。 jLJ 桐列 す; まか 都引﹂れ 調撒忌 度 時J q 感トド暗 即 邸 主 BI .訓MH 検.d l − v HGO ※生細胞などのサンプルで連続スキャンによる 退色やダメージが気になる場合は、 Focus X2・ X4 ボタン F o 2 F o c u sx . JI t : <画像を間引き …J しながら撮影することをお勧めします。 5 .焦準ハンドルを動かしフォーカス調整 C3 此 を行います。 6 .緑色( Alexa488)画像とTD画像の調整 をします。 5 . 0% . ! . . . 告呈J I 白 到 とJ ヱ J ヨ斗土~~旦l 呈l ……一一 ”d 一 一 「一一− . . . . . 「 一 つ ・因. 企~』相官 .!.I _ . i a ( 」守圃到 → ! J y dd ~§ ・ .~ .s p .., . ; J . . i . . i 3 . 1 吋叫す』 r~~ , .、ゴ 7Rotation 7 .必要に応じて、 Zoom、ローテーションを Zoom 昨今、t : I 日 | 当 ~~ ド ~ I 七 M 「 ー宙剛,_「可否酬 町抽・「一τ剛 山 「一τ ・ B酬 輔副「一石酬盟E 1 ・ ・ 4 ‘ ・J・ ゆ 今n< 蚕 扇・ 町 6 ・ l 豆I J一 一ー . . . . ! . . 」 J J. l ' : . . J 「一両ヨ酬且 J : ; r同 嗣f ' L i 弓明主 ・ j d亘 副 「 町 「 「 ヨ 立j 「百石百 日ー一主主 」− − − − ' ! ! ! _ 」 k調副M・...、暗”S・M・• Z:JOI 創”・・・ h ・ .. 陶 .....内高官山「 寸 盆 1 3 I tで、 スキャンを停止させます。 一一一 します。 ゴ 側 一当主E 士ヨ刷 主」 〉考 8 . 画像調整後、 STOPボタン 9 .AutoHVを選択して、 ScanSpeedを選択 . . i . . iu、 ニ』 1 酬凧刷耐‘“ 設定します。 l 金 口々\ | − 叶 ※S l ow側にする程現在の明るさを保ちながら ノイズを除去することができます。 l m a n 積算があります。 また、別の方法として Ka 詳細は P8【キレイな画像を取得する POINT】 を ご参照下さい。 1 3 、 ‘ XY画像の取得(単染色+ DIC) 例:緑色蛍光+微分干渉像 10 10.XY ボタンを押して、画像取得します。 11.画像の保存:右クリック、若しくはF i le メニューで、SaveAsを選択しOIB/ OIF 形式で保存します。 ・ メ モ ・ FYI0・ASW専用ファイル形式について SaveAn imati o n . . P r i n t Se l e ctA l lROi s Can celS e l e c ti on F li pSel ect i on Q!E 監量一 「画像が入ったフォルダ ( 1 6 b i tT IFF) J と「付属ファイ ル」が作成されます。これら 2つがないと、ファイルを 開くことができません。 旦l 旦盈孟一 : OIF形式を1つのファイルにまとめたもの。ファイルの 移動などをする際は、こちらが便利です。 n. .1 .t. .A l l~n 1. . 画像をT I F F ・J PEG等にExo o r t する方法は 補足説明資料巷ご参考下きいの } , , 乞 へ J t ι r窃 \ ~ t乙 の 歩高乞 ‘ ' CrA しメ「/1,- ヲ3 Dl レペ ど り1 J t7 い ↓ む/ しr i〆℃ P じい<API下 J 1 4 . f ; O Lし えい)'0't1-ズヤl l . 1 4 SPD仕様のみ|| XYλ 画像の取得 スペクトル画像の取得 m胃 胃 帽 開 閉 胃 ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 「冒情曹型,, 1.匝a r 前日 : t aをクリックします o ※シーケンシャルにチェックが入っている場合、 Lambdaボタンは グレーアウトしています。チェックをはずしてください。 2.使用するレーザにチェックを入れます。 3 . をクリックし、光路図を表示します。 4 .BS20 / 80、もしくは励起波長に合ったD M を選択します。 例 : 473で、 励起する場合→DM405/ 473 5 重劃 をクリックして S p e c t 凶V iewを表示 させます。 6 .S t a r t ボックス/ End ボックス l こ画像の取込み 5 を開始/ 終了する波長を入力します。 Spect r al V iewグラフ上の赤いパーと連動しています。 6 ・・ 7.BandWidth ボックスに l フレームで取込む 波長の範囲を設定します。(例: 20nm) 吉川,Wi'N l eu慣 1 508' " " CHS1 三l:J二~ ~仙”” I 川吋 ~80 刷 Jj 「)」 St . l i tL.111叫》 ~ .1 Se t I Eml L. 1 剛叫"' "S e t I Cl o s e ~ la1?申告fl.~ ••, . .・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 園 田 , . . . . . . . . .担制「 n mt 1百 -~~!;~に二百.!~·!~] 8 .( S t e p S iz e)ボックスに取込みを開始する 波長から次に取込みを開始する波長まで の間隔を設定します。(例: lOnm) 設定可能な最小単位は l . Onmです。 i 主陪?に二;If..11~ ~·!.: 何時m f一寸工 ~8 1 5 7[?~'.~明~:cご引汚 1 5 \ XYλ 画像の取得 スペクトル画像の取得 9 .X YRepea t f 表 ボタンを押してスキャン します。 10. 左側のスリットをクリックし、画像を観察 しながら蛍光の一番明るい波長域を 探します。 11.画像を調整します。 l ν を 像 画 ク ッ ク を o bけ ボい 工得 取 FA η f﹄ 判一 」E,問団・l\11 ·~ーーーーーーーーーー•S置悶 13 . SeriesDones e 『i e s O o n el をクリックし λ画像 ~」 1 6 を保存します。 1 6 / システムの終了 1.F i l e / Ex i t で、 FVI OASWソフトウェアを 凹 ’B 。 。 持 F i l e 防 制 御 Proce事錦、q 卯叫ys i S0 p 終了します。 器 i ; JSave 2.Wi ndowsを終了します。 SaveAs 白 内叩 e t t y 3.レーザーをOFFにします。 A: MCPSU(405/ 440 / 473 / 635nmレーザ) 刷出 通常は集中電源につながっているので、 操作は不要です。 山 C 帥’抑伊 問剖 E 湾曲 . . @〆 . . 司聞 , Dold > B: LD559nm キースイッチをOFFして、主電源をOFFします。 ' " 叫at<> C: Mu l t iAr レーザ キースイッチをOFFして、主電源をOFFします。 D: HeNe(G)レーザ( 543nm) キースイッチをOFFにします。 4.水銀ランプ電源をOFFI こします。 5.集中電源をOFFにします。 十J スイイ O~t イえ ブァメ・ J t ;j .Lガ メ 《〉 つz _1 -今 OF f . 恥 」 1 7 ~-A − − − ’ − − −. . 1 7 \ \ . \ 1 8 1 8 , 画像取得 一応用編一 1 9 1 9 \ XYT薗像取得(シングルスキャナで光刺激) 同 開 宣 璽 開 閉 胃 帽 胃 胃 咽 ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 呈l 1 . 画像撮影の調整を行います。 2 .‘ UseScanner’ でMainを選択し、 ‘ Mode’にて光刺激したい領域を 囲います。 「Use~c::r 玉己主 | 註 c r t rOI '- ~ :D 一一 一 2 3 .‘ L a s e r’にて刺激するパワーを決めます。 一 一 一 一 ー ー ー ー 一 1−園時 ≪f , 1 s t 10.0us: P i x e l Slow≫ 』 一 一 − : − } 一 一 ー プ ゴ 4 .‘ S t i m u l a t e S t a r t S e t t i n g’にて設定します。 P : 1 0 . 創時 L : 0 . 0 1伽 ,I S F : O.OOOs S:O.OOOs L . 1se 1 「 1 5 3 「 p 1 8 8 515 「 「 633 r 3 . . 一主J o . o~. 主J0.0そ ‘. 圃 圃 . 圃 園「主J9仏0. 三 目 三1 三I 怠J 0.0•• ~到 ω .. 5 1 3 [ 翁 i ’ ’ 1 rMa’ ’ . i i N誠 4 1 .A c t i v a t i o ni nS e r i e sのラジオ 「 'luto 岬 「マ五r 同~ t r .ActivilfioninSe1ies ” 。 』 P『e A c t i v . 1 1 光刺激とImagingをリンクさせる場合: 。 ” 4 PostA c t l v i l f i ボタンをクリックします。 4 2 .P r e A c t i v a t i o nとA c t i v a t i o nTimeを 入力します。 ” l 1 1 1 . 1 9 e S c . 1 A c t i v . 1 1 1 0 1 1 ( Man ual 操作については次ページをご参考くださしり P 1eAc t i v . i t ぬH 「一τF 『 制es A c t i v . i t i o nT i n 時 「---"1同Eヨ 巳Eコ ι 5 5 .時間間隔・ TimeNo.を入力します。 3匂~ T i 1 陪S c 剖E M骨川 何 百両) s 悦 20 陶” 20 , , ,, ニム 」 8.画像の保存 : 7 ~開d 設定した時間に自動的に光刺激されます。 . . ( Savea sType「o i b jまたは「 o i f Jが 、 FVJO-ASWソフトウェア専用のファイル形式です。 ) すす町制 す で’ ます き 、定駅 社版制 ま力剛酎 峠州ん以劫て 川 す ωC 治 訓ま 6 ・同 開 川 即 MMB 1234 ペ 一 ま r h u 加川畑一間訊問 iL X 佳作をむ摘し 泊操 U レメゆ ’ y −の坊をリ h r 同一 寸め Mt 砂 川 ロ 15h ン川和 之 のラ万タヲ 比 ジの 問 。昨 附 検 一4一 uζ 監前 弘﹄ 9 ﹄’ v 川 口 0 州川 酬い 園 圃 M sm ・F 帥 ⋮ ⋮ 一 ﹁ ! 川州仙 吋向山 un U ﹁﹁ 羽 ・ 臼腿旬 じ﹁ − ⋮ . 1111 圃一 @ ?⋮ ⋮ 4全 qu 企 、‘,,,、‘,,, ・ 一 ︵ .− 胸 ,rv − ︵, 1111 A7 問1 . 圃幽 盟 凋叩 M﹁ il 申 − − − − 咽園 川 雌刷品川削 ・島園 明 日 ︶ 件 hF a 4ぷ 圃 ・ r Ee − ‘ h −z E 団 州肱 顔 色 で つ 方 、 調 。 一 町 色 ・ 一 可 肝− . ‘ 〆 、 −幽 聞 日 一 町 園 二 ﹁山 問 Er 一 ﹃ ー 一 一 一 . 。 ⋮ ⋮ d 3a ⋮ こ⋮ i l eISa veAs を選択し メニューJミーより F 保存します。 ”制 2 1 21 す。 一 一 一 l h c qui~ itionControI 「 2DVie w-Livelmage( x )J と表示されま 」1 @ 、 取得し終わった画像の Windowバーに 《諸制.. ω ・ ” .3 (シングルスキャナで光刺激) XYT画 像 取 得 6.Timeを選択し、 XYTボタンを押して、 画像取得します。 をリンクさせる場合: 光刺激とImaging ・ きr 7 .S e r i e s D o n e をクリックすると、 \、 \ \ \ l s I M仕様のみ|| XYT画像散得 (SIMスキャナで光刺激) 1.SIML i g h t P as sをクリックします。 2 . 画像撮影の調整を行います。 3.' UseScanner’ でSIMを選択し、 ‘ Mode’にて光刺激したい領域を [ 聞Stim 山 白 竺図1 Setting : UseScmme 『 None r 3 i 4 .‘ Las e r’にて刺激するパワーを決めます。 rMain 医 囲います。 Mode ≪ Fast 5 .‘ St i m u l a t e St a r t S e t t i n g’にて設定します。 1 0 . 0 u s i P i x e l ヱl - ) Slow≫ ~ |」竺竺三L:o.o1or r i sF:O.OOOs S:O.OOOs Lase 『一一一一一一ーー 52.0% ~ s t』 mulatestartse 鮒 na r… r ’ 4 円高o~ rActill域 防n->lmageScan Bleachボタンをクリック時の有効時間を設定できます) 5 光刺激とImagingをリンクさせる場合: WaitTime 5 1 . MainScannerSyncと ImageScan A c t 悶t ion ImageScan→A c t iva t i o nのラジオ ボタンをクリックします。 5 2 .A c t iva t i o nとWaitTimeを入力しま WaitTime 「~ + 「一~ + 「寸五百 L i n e s msec 」巴 22 ます。 (Au t o S t op lこチェックをして秒数を入力すると、 r .MainScanne『勾nc r .lmageScan->Act間 制on Frames 光刺激をマニュアルで行う場合: 5 1 .Manualのラジオボタンをクリックし J す 。 22 . , , , XYT画像取得 (SIM スキャナで光刺激) 6 6 .時間間隔・ TimeNo. を入力します。 7.Ti meを選択し、 XYTボタンを押して、 画像取得します。 光刺激をマニュアルで行う場合 : 光刺激をしたい時に、 Bleachボタンを クリックしてください。 m a e : i n e :をリンクさせる場合: 光刺激とI 宅 F....剛剣. . ペ FL ,, . r' " 凶 "・ 色” 。 2 A持制 印 刷 , , . o . 崎, 岡, ニLl 亡~コ 設定した時間に自動的に光刺激されます。 a制喝,. 斗 8 .S e r i es Do ne をクリックすると、 取得し終わった画像の Windowバーに 園 − 81 「2DVi 時 L ivelmage( x )J と表示されま す 。 9 . 画像の保存: i l eISa veAs を選択し メニューバーより F 保存します。 ( S a v ea sType「oi bJ または「 o i fJ が 、 FVIO-ASWソフトウェア専用のファイル形式です。 ) 2 3 2 3 、 、 、 X Y画像の取得(VirtualChannelで4重染色) V i r t u a lChannelScan使用で4重染色画像取得 例 :PhaseI. DAP I・ A l c : > . . a 4 8 8 / P h a s c 2 :R o < l a m i r 】R ed・Cy5 − 4E, 一律 、 納 ’ ”lbeto t 凶品stUS刊 2 ra . {") 1 .DyeListの~ " " '' '刷 C h . l l 州 S c 捕 にチェックを いれまると Vertual Channel C o n t r o l l e r が 自動支立ぢ壬がります o ¥ 2 .Numberofphaseused! こ てphase数 、、 2¥ を選択します。 •~•1r::i1・百一一一一一一一一一一一一一..Jn 3 ( 自制 ’ ’ V l r t u . a l Sc 副 愉副宙制帽 pf凶g・ u~“ r: > r. ~ j~ 2 ・ 3.Dyeリストから Dyeをドラッグして各Phas e にドロップします。 s . 軸 (1 < ll>yH 同 時事 ・1 • o酬 4 . 1、 Apply\\をクリックして蛍光色素と Phase数を登録します。 . 帥削除剛将州問 m ・1 2 陶 叫 町 制X • C ' ; S 5. ¥ ¥ P ha s el \、を選択するとDAPT・Alexa488 がl m a 2 e A a u i s i t i o n C o n t r ol に表示されます。 ドラッグ | & ドロップ ※ スリットの幅、フィルター、 O Mの般定が、、DAPI" lna488\\に切り替わります。 、 明 画像を調整します。 6. "Phase2、、を選択し、同様に画像を 調整します。 旬瑚’g 7 .Vi r t ual Channel Contole r して画像を取得します。 ~t をクリック 8.画像を保存します。 ;で ・ | 守・ ;τ | 航行 ヨ s.o•. " ! I 前ヨ 同 制 嗣刷H ~ K摘出、" 24 令凶陣「山 | 可 :本 機 能 でLUT設 定 は反映さ れ ませ ん。 J信号当 1.0 •• . : t i 総 子 . 1 . 0•• : {「手 ;画像取得後 l こI − − − − − − − − 、 S e t ti n豆 薗| で変更以ださし、 . . ~ :士 叩 ?.” 24 , . . , 〆 HDRi画像の取得 1 .画像の調整後、ハードテ、イスクレコーデ、イ 孟| ングの保存先を設定します。 TR L a o’ " G J 2 .I mageA c q u i s i t i o nC o n t r o lの同o r u -を ONにして、 HDRIS c a nS e t t i n gウインドウ を表示します。 剛. ・. _J 「h ・~ c州側副 l棚田 3 .HDRiの条件を設定します。 0回 ) ・S c a nc o u n t:スキャン回数(2∼ 1 ・L a s e rS t e p:レーザ出力の増減率 ・PMTS t e p :HV値の増減率 *レーザ出力は A c q u i s i t i o nS e t t i n gの股定値、 HY 値は ImageA c q u i s i t i o nC o n t r o lの霞定値が HDRiの基準になります。 4 .Darkt oB r i g h tまたは B r i g h tt oDarkを 選択し、 HDRi画像の基準にする撮影順 のアイコンをクリックします。選択された アイコンはC u r r e n tと表示されます。 同叩由 ~~ r-ナーで ~ J , 1 U醐 拘 ヱ ギ主 「マ ” . o ,臨調阿 − 《 ' " " " ' _ . . . F 抽併司'"踊 g 畑 町 " '.. 刷物噌...・,. 柵9 町・ <U F 主l x円百 ‘・ w ' *A l lor l 叫 ” 胸 舵”・ 』 胸ω ・"刷 ・ ”“ "D •RAWo.t• J‘ 胤 " " ' W骨 輔 2 D A f t ・附刷隠叫・H + . 令 園 今 国 + 図 +図今 回 4. 仁豆口 HDRJScanS e t t i n gウインドウ 設定の例: 〈基準値〉 A c q u i s i t i o nS e t t i n gのレーザ出力 :1 0 . 0(%) ImageA c q u i s i t i o nC o n t r o lのHY値 : 500( V ) く田町の条件設定〉 Scancount=5、L a s e rS t e p=x l . 2、 P九1TS t e p=x l . 2 Darkt oB r i g h t、Currentアイコン= 3番目 く設定の結果〉 レーザ出力(%) :6 . 9弓 8 . 3~10.0 弓 12.0 =叶 4 . 4 HY 値 ( V): 347~417 =令 5 0 0~600 =令 720 5 .P r o c e s s i n gO p t i o nで画像取得後の処理 の設定をします。 ・ OnlyS c a n n i n g: スキャンのみを実施 ・ D i s p l a yImageP r o c e s sA f t e rs c a n n i n g : スキャン完了後、 HDRiI m a g eP r o c e s s o r ウインドウが表示されます。 ・ AutoImageP r o c e s sS e t t i n ga f t e rs c a n n i n g : スキャン完了後 l こHDRi 画像処理が自 動的に実行されます。 (前回の HDRiI mageP r oc e s s o r 使用時の パラメータが適応) 25 2 5 \ 、、、 ‘ HDRi 園像の取得 且 且且 且 』 且 轟 且L且 拍 ・!llllll!且 皿 ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ IMl!l : & . ; I 温iZ Fi ~ D e v回 i$ I i i 目叩 旬 I D 11 • L 附 • FRET1GZi3m1ヨ・ 作冶""~ 「;;;;s;.;.,._ r ,田h WMow He~ 1困 F ' t" n .回 同 比 百 劃 百 円 m 阪 明eCa l a 血t 町L C o < 開c t " CP ~e l G弓克一 G α . . . . , z G 碍認 ‘ "F 唱。伽』s •Plx剖 遇制 SI ヱ1~r-一一一十て りt<> / C刷削土 町 O . O o嶋 凶 . o ,印刷帥叫 " Spec..1』 柑 附M帆 : : C .1 a 1 o 1r .,:旬 r! 刷 E x 問" " " " し --~ ? ?介? ? ? で 」・白出l − ー ー 耐 帆 向 ・a 6.XYボタンを押して、画像をスキャンしま す。スキャンした画像はハードディスクレ コーデ、イングの保存先に保存されます。 ( ***HDR.oifというFilenameが付きます) rs .で「AutoImageProcessSettingafterscanningJ選択のI1 い場合、 HD則合成後の画像(・・・_. o i f , と い うF i l ename ) が | l自動で保存されます。 J 固 主主l斗 ROl.•t. 堕堕掴一一一 ;rr.:m~~r ( l j . ,.i11ー P , w出 I - 、 、,一 一 ・ ・ ・ ⋮ ⋮ HDRiImageP r o c e s s o rウインドウ ﹁ JV 叫︼叫 d ” ” 。 ” 曲目 脚 ” ・ ・ ・ " 愉 吻 ・ JV ド場合は、自動でウインドウが表示されます。 ” ・喝 ” ・w・ ・ ・ − 前 園 日υ a 白 山 町僧 m 7 .メニューから[ P r o c e s s i n g ] = >[ H i g hDynamic RangeImage]を選択して、 HDRiImage P r o c e s s o rウインドウを表示します。 ド 5 .でD i s p l ayImageP r o c e s sA f t e rs c a n n i n g を選択している| | ・ 3 8 .O f f s e tL e v e l、C o n t r a s tL e v e l、Gamma、 N o i s eR e d u c t i o nを設定し、[ Openi n2D Viewa f t e rc o n v e r t i o n]にチェックを入れま す 。 Pr o c essSeti n g s oπse tLe v e l Co n tr a s tLe ve l 回 Gamma ~ j咽 一 41 ? ; 9 .[ C o n v e r t]ボタンを押して、 HDRiを作成 します。 回 Usesamese世ingsf o ra l lc hann e ls Cha nn e l 回 NoiseReduction ~ J ・ O f f s e tL e v e l:オフセット値以下の輝度をゼ口として扱う。 画像上の低輝度ノイズをカットできる。 C o n t r a s tLe ve l:画像の全体的な濃淡を調整。 Gamma:ガンマ補正。 Us esames e t t i n g sf o ra l lc h a n n e l s:チェックを入れると、 すべてのチャンネルに対して同一の設定条件でHDR iを 実行する。 N o i s eR e d u c t i o n:サンプルの特徴を失うことなく、 ノイズを軽減できる。 26 26 〆 , , 27 27 \ \ \ −補足説明− 28 28 , ,, " / 30画像の解析 30画像構築・断面観察 |画像を任意の角度から観察します | 1 . 2DView−(ファイル名)画像の をクリックします。 2 . 3DViewが構築されます。 3 .画像上で、マウスをドラッグしながら 動かし、任意の角度から観察します。 4 |画像の任意の断面を観察します | 4 . 電 車 ,l をクリ、yクし を選択します。 5 .画像上で、マウスをドラッグしながら 左右に動かして、任意の縦断面を 観察します。 [ a n 構築した画像を保存します 6 もi をクリックすると 2D画像が作成 されます。右クリックでSAVEします。 f i tWndowt oD e l a ! 点S i z e ~it p; , . ,. t o r h ~n R e 旬以剛E 由 ・ E 加 D隠 p l . . , . S官 制 OutL i 帽 r n S酬 C例 制 官t •S I ' 田wS c a l e -~酬 Com11ent (または、 3D画像の上で右クリック→ SAVEDISPLAYで現在表示されている ROIを含めた画面をBMP形式で保存で きます。) l SP r o j e c t町 、 YP r o j e c t i o n . ZP r o j e c t剛 29 S l ' > o w30I r r 明 eS e t t同 S l ' > o w30Pro問•ty Sett 時 29 \ \ 3D画像の解析 、 3D画像構築詳細設定 CutViewボタン スライス描画モードがONの際にスライス 表面に断面像を投影します。 画像を拡大/縮小して表示 ChangeViewRegionポタン スライスによって分割された3D像表示領域/ 非表示領域を切り換えます。 30画像の回転 OrthogonalViewボタン スライス断面の正面に、視点を固定して 観察できます。 冨 I3DImageS 30P r o p e r t yS e t t i n g( スケールJt 一、コメントなど画像上の描画の設定) 一 一 一 一 R e r n l 剖 1 i 1 gM 削除 r .A刷 l< l闘 f f l d OFF 描画の ON/ Pro 持ctim 型j 到 sncel > oxpo 咽師” コメント表示 lma~ec制圃『叫 「 1:1 H e l U I同 団i o ’ f i l f L ごよジアウトライン表示 戸ーヨ 「ー ヨ O i S I >< l ! l i l l e 防防 E X J H l 1Settin~ 斗 E糊 川 Mode ! 1 1 1 te n s i l y スケール表示 A『 附i i 誠i 仰 " ' ° " " 'j . i o l 川 SN (e 唖 両党| 穐~1 y 知 1 1 f1ーヨ 白川 ~ 抑制| F 1 ゴ 1 1 l n t e r h l l 」竺 斗 :: ロ 30 五 センターマーク 表示 30 r F F〆 〆 3D画像の解析ファイル作成方法 回転ファイルを動画像として保存 する場合は、以下の方法で3D構 築を行います。 グ﹄ 8 1 も ﹂ 例として、画像を 180。回転させてみましょう。 一 一 円 い ﹀ 1 1定 ボタンをクリックします。 2 .AngleR o t a t i o nタブをクリックします。 制 到 司 p s o ヨ 3 . 回転軸を選択します。 31 S t a r t 戸ーヨ End 4 . 回転角度を入力します。 S t a r t=何度から /End=何度まで、 Frame / s=回転速度 II n t e r v a l=何度ず、つ 5 匝 哩 圃 ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・富 国 l ヨ 知山 [ d Image 色 白 園・ 回 剛r a抑 制 由 1 t a 凶e l m 司e _ ( 3 ),削 雌 a d同伽司p, b 叩 t コ m如、k . t l f f . f r < ) ι加咽 . f r a m e se ' li < D u n u r ap o l U v e l m a g e _ ( I O ‘ ; )L l v e l m a Q e _ ( l l ) . t 肝. f r a m e s 。Uvelm•Qe_(l I )川. d a t a 口r r k . t 肝. f r 酬 円hn ame : I S a v e•• t y p e :[ A V iF~es 「吋 3 1 5 .AVIF i l eを選択して[ C r e a t e]をクリック します。 e s 6 .ファイル名を入力して[ S a v e]をクリック します。 仁豆コ ヨ 一三竺主」 3 1 \ \ \ 20Viewウインドウについて 終了/ 開始Sect i o nの固定 表示する軸の選択して スライダで画像をフレー 1: 1表示 ROI 各種 l ~ I ボタンを押して、画像上 で左クリックしたままヲ|つ張り、 適当なところで離します。 ( Shi f t +左クリックで真直ぐな ラインが引けます) Z o o m . A u t o ( 74%) l n t 1 4 4 162 田監30 アニメーションの作成 圃7狛を丞綻した回章 二メ−シヨン ) 通Yアニメ I 蛇基準とした田知 D アニメ サヨンを 帆 ま れ ( 定型 ーション ) X 7 : 3 {宵LI 回車7:3Dアニメ』ションの 作~処理設定を力スタマイズでき ヨ呈』る陪DA n 1 m a t 1 o n l匂 ィツド つを表示します。 設定を入力してf 地 wl m a g e Jで "3D アニメ』ションが作成されます。 … Proiectionの切換え 埜l(Proj カーソル左右に 動かすもしくは MinとMaxi こ数 値を入力して、 ・ J コントラストを自 同定するこ| … − 上 とができます。 C F ~l(Z Jn 白川 帥削 . . Git園 川 制刷 輔 S-A• ’ . 凹 一豆 El f,11f 。 . 伺 百: : L i lS即 } I m " ' 両 陣《3 7 ’|I 一 nt en s it yPr o j e ct i o n)ボタン : TI n t e n si t yP r oj e ct i on を表示します。 一~( T 丑! ( 山川町 t i o n) ボタン: 油 川i 山 間t i o n 翫し訊 。 ?1(ZTopographicProj民ti州~· タン: Z Tope仰同iicPr附 ・ ”・ ! h哩 o . 冊 Lo . 叫 YM 0耐 RH倒 L 』 L t i 表矛し 、ます。 J 1 金(入To凹 E 割( l 32 O f f )ホ TS e r i Av e r抑 〉ボタン: Tシ バ の平均画像 断し討 3 '2 ノ 取得画像の Expo比 Bitmap(*.bmp ・ )JPEG( 吋p g ,*jpeg ・ )T I F F ( * . t i f , 州i 仔 ) ・ PNG本 (. p n g)で画像を保存 1 . 保存する画像の[ L i v eView]ウインドウまたは[ 2DView]ウインドウを表示し、画像の上で右クリックをして [ E x p o r t]を選択します。 2 .E x p o r t するファイルフォーマットを選択します。 3.スケールバーなどの画像上の ROIを保存する際は、[ A l lROis]もしくは[ S e l e c tROI Shape]を選択します。 4 画像の出力方法を選び、[ChannelS e l e c t i o n] で出力するチャンネルを選択します。 ・重ね合わせ画像 ・ CH毎の LUT画 像 − 生 デ ー タ( 白 黒) 画 像 5.Saveで画像を保存します。 帽 、 ,J F間百 F i l en o P n 刈 踊 叫i•••••••• 四 ’ . , ; :: I s t i 陥加.. . . ; !. _ _ _ _ §竺ー」 ニJ ~ ~竺!..._J 岬 袖 叩} ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ − t o m t・ 4 E潟期 仁田 Se是•nos I r 首o r m a t i o o 世 D epth r τ[馳 / P i x e l ] 空H 、 詰ve 出e 凪•oe 他国 d e a c h f r o ne嗣け市ef o l o 情 可 憎wf o l 由r . ち剖咽e _ x πT同 白 h帽 f .. . .2 lrlf:m.-•:o_ ,!~ 0 Kv• vv~ 問 − ・ ・ ・ ・ ・円 ・「 ・白 , − .. . .• _!:! •~・「...、....主主F・ 2 • I NoO• erlo' 「 AIROJ s ~ r .5融 制 問 Shope(S臨 tone宙 例y加l O Q eF o l 晶T ’ ー − 、 . I5 酷c t e dR O I町 田 enthef 曲 川l ¥ l ) ー- J::.~凶回以斗記以l.iゴ霞斗亘l~.J : ・ : 町一; … ゴ ー 「 f2斗斗」」」」 :4 開 ・ 7 ・・・・・・・・・・ a ・・一 ~ - . . . .-'t~品a明義畏a、._...且且且且且且’._._.__.血血且ー ヱI . ~For·世 作lerQ• G四 百{ υ 坊 羽 田 却、 回L UJ ι ・ 4 J 」」_) . . . ! ' . J . . : . : Jニ J ょJ :, - :1 7両 日 五 両 両 議 戸ナ::.-:.·.·. o:. :噂!年l笠~~J ノ以切シヨン :l 「t:B介一一一「?ヨ「了ヲ ~ z 汁当 「ー-) Pョげ当 五円当行一一 jけ 当「 千 当 1/2 ~ 読み込む軸 ( νZIT)の始めと終わりを指定します 3/3 5/5 ••• 動画形式( A V I・ MOV)で画像を保存 ( AVI、MOV形式は、 XYZ・ XYT・ XYλ・ XZT・ XλT・ xλZ画 像で可能です) 1.保存する画像の[ L i v eVi ew]ウインドウまたは[ 2DView]ウインドウを表示し、画像の上で、右クリックをして [Expo同]を選択します。 2.保存する動画形式を選択し、 FrameRateを入力します。 3.[Save]でファイルを保存します。 FrameRate 動画のフレームレートや圧縮の有無を設定できます。 (AVl:AVI形式ファイル圧縮の有無を設定します。 ) : , ' ' ; ; > J . ! 日 H 叫 ・、 . 州﹁ 開 国 叩 r ・ 鵬 時・ 開叩 . 帥加 川 ﹁ 時日 H 羽川 u 柚一 um 「オトー ・ 91 Y 3 3 「 了 ? 司 3 3 一\ 、、 、 の み | | 取得波長範囲の調整(VBF) V a r i a b l eB a r r i e rF i l t e rで 、 ChlとCh2の取込む波長の範囲を調整する方法です。 且| F 1. ボタンをク M し 、 S p e c t r a lS e t t i n gウインドウを表示します。 」 取り込む波長を調整します。 二1 S p e c t r a l S e t t i n gウインドウ r~~-e 山-' ~t [ I ! 1 Iか園田で、位置動かし、 2 . __ ti n i ; c : J 剛 ’” 530 n Chlの スリット調整 Ch2の スリット調整 CHS2 ゴ 5551川 い 0011111] 斗 ここで スリット位置 スリット幅 を可変します。 を可変します。 _ j . . . : J 655nm CH3BF I BA655-755 ここで l None ゴ 」竺~ 」竺~ スリット位置 スリット幅 を1nmずつ を1nmず、 つ 可変します。 可変します。 Ch3の蛍光フィルターの選択 34 34 , ,. / , HardD i s kレコーディング −あらかじめ指定した保存先に取得画像を自動で保存する機能です。 こV iewerウインドウから直前まで、 の画像を −シリーズ画像撮影中に、画像取得中 l 確認することが出来ます。 【ハードディスクレコーディング条件】 画像取得上限数 保存先 その他条件 32, 766回 ( シ リーズ画像回数) Dドライブ) ローカルドライブのみ保証 ( 画像サイズが128X128未満のXYT,インターバjレ1秒以上必要。 往復スキャンモード時は、無効。 見返り機能はインターバル中のみ使用可能。 4 0% 一 九 一 ” I 4 3.[ 円l eName]テキストボげス横の ゴ的ン~~~ をクリックし、保存場所・ファイル名を設定 ー し て [Open]をクリックします。 町 oV 川 2.[Ha r dDis kRe c o r d i ngOFF]ボタンを クリックします。 [ HardDis kRe c o r d i ngOn] ボタンになり[Viewe r ]画面が起動されます。 。一 川 一 一 日 ∼ 固刑応 1 .画像の調整・条件設定をします。 −川市 − 一 一 |画像取得方法| ・” a『d脱skRecordlQSe i n g F i l e N訓 e H制 DiskRe c 州 gON I D : 州0 A S W . υ矧 州 川 例 制 附 i 4.司砂 ボタンを押して、画像取得します。 L |画像取得中に画像を閲覧する方法| 1.画像の取込みを開始したら、[Viewer ] 画面を前面 l こ表示します o 2.[ E x pl o r e r ] ウインドウの[サムネイル表示]領域で、取込み中の画像ファイルをダブ、 ル クリツクします o (…の画像フアイルカ〈[サ 右クリツクして [ Re 合e s h]を選択します。 35 | 3 5 \ ‘ 、 、 A :ZP r o j e c t i o nの20View 作成 B:設定条件のリロード I IA.Z同 e c t i o nの20画像の作成|| 1 .オリジナル画像を聞き、 2Dviewの P r o j e c t i o nボタンからZを選択して、 ZP r o j e c t i o n画像を表示します。 《 , + ) 頃 笠| 劃! l J 古宿 舎問泊噌 Z I t A 一一一一一 H寸, 什一一一一「ー, 什一一一一「−, ト一一一「−, 2 . 2Dコントロールパネル(庶で表示) 上の [NewTile]ボタンをクリックして、 Zプロジェクションの 2D画像を作成し れ ます。 2 3 .画像を保存します。 旦I A••• F i l e D開 ce 印刷 ay L 同 r $凪 白 g :8 8固 F R E T P r 医 師s i l ' I Q 削 も i ! 28 t ま 骨 ,b a i y s isI U ! ! l ! l lWi n d 帥L # >~ T o o 旧日 目 ー町,.,,_, I ⑨ ・ ⑥頃 固 8 ・ ~ I恥 ・ -i , )民 間 IMAGE ‘J C‘""'~噂鼠,唱 師匠 同R u l e s. S e tIm勾 eNam nonZDC PA-GFP Cb’・9醤•-<> G,衿雪醤.., . 一 C u t (T) %働d組〈的 1 .T o o l→E x p l o r e r を選択します。 Op t i o n s. 曲 + ・Shfc-+3 C 時哨0 過去の画像データから画像取得条件を醗み出し 再現します。 U s e rA c .c 凪 nt s. ‘ : > lO 白 , ,B .股定条件のリロード|| ・ α .x Cb 特〈 " 2 . リロードしたいサムネイル画像で、 c q u i s i t i o n 右クリックし、 LoadA P a r a m e t e rを選択します。 。前.. C O J ! ' t 9 1 . t o o r e 3 .条件がリロードされます。 条件を続み込む画像を開いた状態で! LoadS c a nD a t a ] ボタンを押してリロードすることもできます。 36 36 \、 \ 0 町 MPUS R オリシJ Y ス株式会社 支店・ 営業所所在地 東 京 干1 6 30914東 京 都 新 宿 区 西 新 宿 2-3ー 1 新宿モノリス 札 幌 干0 6 0 0 0 3 4札幌市中央区北四条東 1-2-3 札幌フコク生命ビル 仙 台 干9 8 1 3 1 3 3 仙 台 市 泉 区 泉 中 央 1-13-4 泉エクセルピル 機 浜 干2 2 2 0 0 3 3 横浜市港北区新横浜 2-3ー 1 2 新績浜スクエアビル 静 岡 干4 2 0 0 8 5 1 静 岡 市 葵 区 黒 金 町 11- 7 三井生命静岡駅前ビル 新 潟 〒9 5 0 0 0 8 7新潟市中央区東大通り 2-4-10 日本生命新潟ビル 松 本 〒3 9 0 0 8 1 5 松 本 市 深 志 1-2ー 11 松本昭和ビル 金 沢 干9 2 0 0 0 2 4金 沢 市 西 念 1-1-3 コンフィデンス金沢 名 古 屋 干4 6 0 0 0 0 3 名 古 屋 市 中 区 錦 2-2-2 名古屋丸氾ビル 大 阪 〒5 3 2 0 0 0 3 大 阪 市 淀 川 区 宮 原 1-6-1 新大阪ブリ ツクビル 松 山 干7 9 0 0 0 0 3 松 山 市 三 番 町 7-1-21 ジフ、 ラルタ生命松山ビ‘ ル 広 島 干7 3 0 0 0 1 3広 島 市 中 区 八 丁 堀 1 6ー 1 1 日本生命広島第2ビル 福 岡 〒8 1 0 0 0 0 4福岡市中央区渡辺通り 3-6-11 福岡フコク生命ビル 取扱販売店名 住所 店名 担当者 / ¥ i . . 8 2 67 03 f t0 3( 6 9 0 1) 4040 t tO l1( 2 2 2) 2 5 5 3 t t0 2 2( 2 1 8) 8 4 9 7 f t0 4 5( 474 ) 5014 f t054( 2 5 5) 6 2 4 5 t t0 2 5( 2 4 5) 7 3 3 8 f t0 2 6 3( 3 6) 5 3 3 2 f t0 7 6( 2 2 2) 3 4 3 8 含0 5 2( 2 0 1) 9 6 9 8 f t0 6( 6399) 8004 t t0 8 9( 9 3 1) 2 6 5 0 f t0 8 2( 2 2 8)1 9 2 2 f t0 9 2( 7 1 1)1 8 8 3
© Copyright 2025 Paperzz