トランスフェクション試薬 Cellvader セルベーダー：タンパク質細胞導入試薬 Cellvader は細胞膜透過能とタンパク質との複合体形成能を併せ持つ細胞導入試薬です。本試薬とタンパク質は疎水的に結合して複合体を形成します。この複合体は、細胞表面の Heparan Sulfate Proteoglycan と電気的に結合して細胞内に取り込まれると考えられています。また、複合体形成においてトランスポーターとタンパク質が共有結合しないため、導入されたタンパク質は細胞内での機能を損なうことはありません。マイクロインジェクション法やエレクトロポレーション法のように細胞膜に損傷を与えることなく、目的物質を細胞内へ導入することが可能です。 ●低い毒性本キットマニュアルでの使用濃度における、細胞毒性は低く抑えられています。 ●所要時間 Cellvader との複合体形成は 1 時間、細胞への導入は添加後 3 時間で完了します。 ●対象細胞付着細胞、浮遊細胞を問いません。導入実績がある細胞株も豊富です。導入例生細胞でのβ-galactosidase（ 465 kDa ）の導入 β-galactosidase（ 465 kDa ）の HeLa-S3 細胞への導入 × 100 × 400 × 100（明視野） × 400（蛍光） FITC 標識β -galactosidase を細胞内導入した生細胞を蛍光観察した結果、良好な細胞内導入が確認されました。 Cellvader によるタンパク質の細胞内導入は細胞固定によるアーティファクトではないことがわかりました。細胞内で高いβ -galactosidase 活性を示すとともに、導入効率は 100％でした。凝集物は全く認められませんでした。細胞導入試薬（ Cellvader ）とは TAT（ HIV ） VP22（ HSV-1 ）核 10～20 個のアミノ酸配列（ PTD: Protein Transduction Domain ） Cell 疎水性領域タンパク質と結合 PTD 核核タンパク質、抗体ペプチドトランスポータータンパク質および抗体トランスポーター複合体取扱店 Cell 細胞表面への結合 Cell 細胞内への導入実験の流れタンパク質溶液 Cellvader とタンパク質の複合体形成複合体を細胞に添加観察、測定、検出混合 37℃、5%CO2 下で 3 時間インキュベート 1 時間静置 Cellvader 溶液導入実績のある細胞およびタンパク質浮遊細胞 K562 細胞 Jurkat 細胞 HL60 細胞 P388 細胞 P3U1 細胞由来ヒト子宮がん 120 ヒト大腸がんヒト肝臓がんヒト乳がん relative cell numbers HeLa-S3 細胞 WiDr 細胞 HepG2 細胞 MCF-7 細胞 Balb3T3 細胞 B16 細胞 SVT2 細胞 A10 細胞マウス繊維芽マウスメラノーマ SV40 トランスフォームマウス 3T3 ラット血管平滑筋ヒト骨髄性白血病（ % of untreated control ）接着細胞細胞毒性 100 80 60 40 20 ヒト T 細胞性白血病ヒト前骨髄性白血病 0 マウスリンパ性白血病 0 マウスミエローマ 2.5 5 12.5 Cellvader（ µg/600 µl ） 25 タンパク質 β-galactosidase Cellvader 添加 3 時間後の細胞数を細胞のテトラゾリウム塩の取り込みにより測定しました。Cellvader 未添加時の細胞数を 100％として評価を行った結果、Cellvader の推奨使用濃度である 0.5 ∼ 5 µg / 600 µl では、ほとんど毒性がないことが示されました。（細胞： P3U1） GFP IgG ■ご注文情報製品名包装 Cellvader 一式コード番号価格（円） 16-0900-00 81,900 ※ キット内容物（ control protein ）：0.1 mg（4 反応＊）× 1 1）Cellvader 凍結乾燥品：0.05 mg（6 反応＊）× 4 2）β -galactosidase【 465 kDa 】＊反応数は 6 ウェル細胞培養プレートもしくは 35mm ディッシュを用いたβ -galactosidase の導入プロトコル例を基準にしています。＜使用上の注意＞・疎水性度の低いタンパク質は本試薬と複合体を形成しにくいため、導入効率が低くなります。・細胞とタンパク質の組合せによっては、タンパク質が細胞内で機能しない場合があります。＜特許＞本技術は、アクティブモティーフ社からのライセンスを受けています。 www.gelifesciences.co.jp e-mail で最新情報をお届けしています。お申込みは上記 Web サイト左下の「メールマガジン購読」から 8 掲載されている価格は 2014 年 6 月現在の希望小売価格です（消費税は含まれておりません）。希望小売価格は単なる参考価格であり、弊社販売代理店が自主的に設定する販売価格を何ら拘束するものではありません。掲載されている製品は試験研究用以外には使用しないでください。掲載されている内容は予告なく変更される場合がありますのであらかじめご了承ください。掲載されている社名や製品名は、各社の商標または登録商標です。お問合せに際してお客さまよりいただいた情報は、お客さまへの回答、弊社サービスの向上、弊社からのご連絡のために利用させていただく場合があります。 71-2887-22