ABO血液型の
基礎と問題解決
2016年9月15日
株式会社イムコア
技術サポート部
ABO抗原
A型
B型
AB型
A抗原
O型
B抗原
2
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ABO抗原
H抗原
凡例
N-アセチルガラクトサミン
フコース
N-アセチルグルコサミン
ガラクトース
赤血球
「ABO blood group diagram」 By InvictaHOG (Own work) [Public domain], via Wikimedia Commons
3
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ABO自然抗体
ヒトは環境中の細菌やウイルスなどのA型抗原および
B型抗原様因子に反応して抗Aまたは／および抗Bを自然に
産生する。
4
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ABO血液型システム
Karl Landsteiner
ランドシュタイナーの法則：
赤血球にはA抗原または／およびB抗原が存在し、血清（血漿）
中には赤血球に存在しない抗原に対する自然抗体が存在する。
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ABO血液型
ランドシュタイナーの法則
血液型
抗原
(赤血球表面)
抗体
(血漿)
A
A
抗B
B
B
抗A
AB
A, B
-
O
-
抗A, 抗B
抗A,B
6
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日本人のABO血液型頻度
AB型
約10％
B型
約20％
A型
約40％
O型
約30％
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溶血性輸血副作用
急性溶血性輸血副作用（AHTR）
大部分はABO不適合輸血が原因であるが、稀に補体結合性の不規則
抗体で認められる(おもに血管内溶血)
遅発性輸血副作用（DHTR）
多くは二次免疫応答により増加した不規則抗体が原因であり、一次免疫
応答によるものは極めて稀である(おもに血管外溶血)
「輸血・移植検査 技術教本」より, 一部改変
8
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B型の患者にA型の血液製剤を輸血したら
A抗原
A型血液
輸血
溶血
B抗原
抗体抗原反応
抗A
（イメージ図）
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副作用
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血型検査/ガイドライン
規則抗体の抗A, 抗B, 抗A,Bは、いかなる場合でも、
臨床的意義のある抗体である
(赤血球型検査(赤血球系検査)ガイドライン, 日本輸血・細胞治療学会)
ABO同型血液の輸血が原則
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抗原抗体反応の検出
• 輸血検査では一般的に抗原抗体反応の
有無を赤血球凝集の有無で判断する
A抗原
A
A
A
A
A
A
A
A
A
A
A
遠心
A
A
A
A
A
A
A
A
A
A
A
A
A
A
A
A
A
A
A
A
A
抗A
A
A
A
赤血球に結合した抗体を介した
赤血球間の橋渡し
↓
肉眼で確認できる集合体（凝集）
赤血球表面の抗原に抗体が結合
↓
そのままでは肉眼で判定できない
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ABO血液型検査用製品
ABO血液型検査は血球凝集法を用いて室温で行われる
抗体試薬
赤血球試薬
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赤血球型検査－オモテ検査
抗Aおよび抗B試薬
赤血球
赤血球検体の検査は、AおよびB抗原を直接検査する。
これを「オモテ検査」とよぶ。
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血漿検査－ウラ検査
血漿
A1およびB赤血球試薬
血漿検体の検査は、血漿中の抗Aおよび抗B抗体を検査する。
これを「ウラ検査」とよぶ。
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ABO血液型検査手順（試験管法）
抗A試薬、抗B試薬
1滴
患者血清または血漿
2滴
3～5％患者赤血球浮遊液 1滴
A1赤血球、B赤血球
抗Ａ
A1血球
抗Ｂ
オモテ検査
1滴
B血球
ウラ検査
混
和
遠 心
900～1,000G（3,400rpm）15秒
または100～125G（1,000rpm）1分
判
凝集や溶血の有無を観察
判定結果を記録
定
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ABO血液型判定
オモテ検査
ウラ検査
総合判定
抗A
抗B
判定
A1血球
B血球
判定
＋
0
A型
0
+
A型
A型
0
+
B型
+
0
B型
B型
+
+
AB型
0
0
AB型
AB型
0
0
O型
+
+
O型
O型
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ABO血液型検査の判定
オモテ検査
抗A
抗B
+
-
ウラ検査
A1赤血球 B赤血球
-
オモテ検査
抗A
抗B
-
+
抗B
-
-
+
ウラ検査
+
ウラ検査
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B
結果
A1赤血球 B赤血球
+
A
結果
A1赤血球 B赤血球
オモテ検査
抗A
結果
+
O
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ABO血液型検査の判定
オモテ検査
抗A
抗B
+
+
ウラ検査
A1赤血球 B赤血球
-
オモテ検査
抗A
抗B
+
-
結果
-
AB
ウラ検査
結果
A1赤血球 B赤血球
判定
保留
+
18
+
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ABO血液型の判定
○ ABO血液型はオモテ検査とウラ検査の結果が
一致してはじめて決定される
○ オモテ検査とウラ検査の結果が不一致の場合は
判定保留とし、原因を追及する
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オモテ検査・ウラ検査不一致・異常反応の原因
オモテ検査側の要因
異常反応
反応がない
弱い
部分凝集
異常な凝集
考えられる要因または病態
亜型
疾患による一時的な抗原量の低下
型物質の異常増加による試薬の抗体中和
亜型
キメラ、モザイク
異型輸血後
異型造血幹細胞移植後
胎児母体間輸血症候群(FMT)
汎凝集反応
後天性B (acquired B)
寒冷凝集素による感作
「輸血・移植検査 技術教本」より抜粋
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オモテ検査・ウラ検査不一致・異常反応の原因
ウラ検査側の要因
異常反応
考えられる要因または病態
反応がない
弱い
新生児, 高齢者
低・無ガンマグロブリン血症
異型輸血後
異型造血幹細胞移植後
異常な凝集
亜型
冷式不規則抗体
寒冷凝集素症
連銭形成
高分子製剤輸注後
試薬に含まれる添加物に反応する抗体
(IAT)
新生児の母親由来IgG型抗A,または抗B
免疫グロブリン製剤由来IgG型抗Aまたは抗B
異型造血移植後のPLS
「輸血・移植検査 技術教本」より抜粋
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オモテ・ウラ不一致のときの対応
1. 手技, 試薬の確認
2. 再検査
3. 患者情報の収集
• 年齢, 性別, 疾患名, 輸血歴, 妊娠歴, 異型
輸血, 異型造血幹細胞移植の有無, 臨床検
査データ, 家族歴 など
4. 異常反応の原因を推測し、精査
「輸血・移植検査 技術教本」より抜粋
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ウラ検査の偽陽性が疑われるケース
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ウラ血球の反応性について (偽陽性)
オモテ検査
ウラ検査
抗A
抗B
A1血球
B血球
4+
0
2+
4+
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ウラ血球の反応性について(偽陽性)
オモテ検査
ウラ検査
抗A
抗B
A1血球
B血球
4+
0
2+
4+
考えられる原因
冷式不規則抗体の保有
寒冷凝集素価(寒冷自己抗体）高値
連銭形成
亜型
等
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ウラ血球の反応性について(偽陽性)
患者情報の確認
連銭形成の可能性
生理食塩液法による不規則抗体スクリーニング
抗Lea, 抗P1, 抗M 等
自己対照の陽性の場合、寒冷自己抗体が疑われる
抗Hレクチン、抗A1レクチン、A2血球との反応性
亜型
試薬成分による非特異反応
試薬とは陽性、自己対照陰性
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連銭形成が疑われる場合
顕微鏡で観察することで、連銭形成が確認できる
生理食塩液の滴下で凝集が消失することがある
生理食塩液置換法で確認可能
1. ウラ検査用の試験管を遠心
2. 患者血漿または血清を除去する
3. 生理食塩液を2滴滴下する
4. セルボタンを再浮遊させ、凝集の有無を確認
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ウラ血球の反応性について(偽陽性)
生理食塩液法による不規則抗体スクリーニングの実施
抗Lea, 抗P1, 抗M 等が検出
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P1抗原について
個人差があるため、同定では注意が必要
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ウラ血球の反応性について(偽陽性)
生理食塩液法による不規則抗体スクリーニングの実施
抗Lea, 抗P1, 抗M 等が検出
予備加温によるウラ検査の実施
型物質による吸収
Lewis型物質, P1型物質
酵素試薬によるM抗原の破壊
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ガンマ P1型物質
• 鳥類由来の可溶性P1血液型物質
• 抗P1の確認が可能
• P1－血球を選択せずに抗P1と共存する
他の抗体の検査が可能
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使用方法
・
・
・
ガンマ P1型物質
・
・
・
P1
生食
・
・
・
・
・
・
P1
生食
P1
生食
P1
型物質
1. 1検体につき2本の試験管を用意し、被検血清を
必要量（例えば、10滴、1mL など）添加する。
2. 一方の試験管には血清量の1/10容（例えば、1滴、0.1mL
など）のガンマ P1型物質を、もう一方の試験管には
血清量の1/10容の生理食塩水を添加する。
注意：型物質は管壁に沿って添加せず、直接血清中に滴
下する。
3. 充分に混和して、室温（23±3℃）で少なくとも5分間
放置する。
4. 再度混和し、それぞれの試験管の内容物について
検査を行う。
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注意点
ガンマ P1型物質
• 強い抗P1は血清：型物質の比が10：1では
部分的にしか中和されない場合がある
• 非常に弱い抗体は10：1の割合で型物質を
添加した場合に希釈されて反応が
検出できなくなることがある
• 抗P1以外に抗Pkも中和する
Tj(a-)の人が保有する抗P+P1+Pk（抗Tja）の
うち、抗P1と抗Pkは中和されるが、
抗Pは中和されない
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ガンマ Lewis型物質
• ヒト由来の可溶性LeaおよびLeb血液型
物質
• Lewis抗体の確認が可能
• 血球のLewis表現型を選択せずに
Lewis抗体と共存する他の抗体の
検査が可能
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使用方法
・
・
・
・
・
・
Lewis
生食
・
・
・
・
・
・
Lewis
生食
Lewis
生食
Lewis
型物質
ガンマ Lewis型物質
1. 1検体につき2本の試験管を用意し、被検血清を
必要量（例えば、10滴、1mL など）添加する。
2. 一方の試験管には血清量の1/10容（例えば、1滴、
0.1mL など）のガンマ Lewis型物質を、もう一方の
試験管には血清量の1/10容の生理食塩水を添加する。
注意：型物質は管壁に沿って添加せず、直接血清中に
滴下する。
3. 充分に混和して、室温（23±3℃）で少なくとも5分間
放置する。
4. 再度混和し、それぞれの試験管の内容物について
検査を行う。
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注意点
ガンマ Lewis型物質
• 強いLewis抗体は血清：型物質の比が
10：1では部分的にしか中和されない
場合がある
• 非常に弱い抗体は10：1の割合で
型物質を添加した場合に希釈されて
反応が検出できなくなることがある
• Lewis抗体以外に抗Hも中和する
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ウラ血球の反応性について(偽陽性)
生理食塩液法の不規則抗体スクリーニング
抗Lea, 抗P1, 抗M 等が検出
予備加温によるウラ検査の実施
型物質による吸収
Lewis型物質, P1型物質
酵素試薬によるM抗原の破壊
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寒冷自己抗体が強い場合
自己吸収が有効な場合がある
ZZAP試薬を用いる場合
ZZAP処理前に37℃生理食塩液での赤血球洗浄は有用
IgM, IgG, 補体が除去される
酵素処理で吸収効率が上昇する
1. 自己血球 1ml + ZZAP試薬 2mlを混合
2. 自己血球をZZAP試薬で処理 (37℃ 30分)
3. 3回洗浄、遠心、上清を除去
4. ZZAP処理した自己血球 + 自己血清 (4℃ 30分)
5. 遠心、血清を別に試験管に移す
ウラ検査の実施
AABB Technical manual 18thより抜粋, 一部改変
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ウラ血球の反応性について(偽陽性)
患者情報の確認
連銭形成の可能性
生理食塩液法による不規則抗体スクリーニング
抗Lea, 抗P1, 抗M 等
自己対照の陽性の場合、寒冷自己抗体が疑われる
抗Hレクチン、抗A1レクチン、A2血球との反応性
亜型
試薬成分による非特異反応
試薬とは陽性、自己対照陰性
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抗A1レクチン, 抗Hレクチンの反応性
抗A1レクチン
A1血球と反応し、A2血球とは反応しない
オモテ検査
ウラ検査
抗A
抗B
A1血球
B血球
抗A1レクチン
4+
0
2+
4+
0
40
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抗A1レクチン, 抗Hレクチンの反応性
抗A1レクチン
A1血球と反応し、A2血球とは反応しない
オモテ検査
ウラ検査
抗A
抗B
A1血球
B血球
抗A1レクチン
4+
0
2+
4+
0
A亜型, 抗A1の疑い
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抗A1レクチン, 抗Hレクチンの反応性
抗Hレクチン
O>A2>B>A1>A1Bの順で反応する
ガンマ抗Hレクチンの反応性
O血球
A2血球
A2B血球
B血球
A1血球
A1B血球
4+
3+
2+~1+
2+~1+
W+~0
0
(社内データ)
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抗A1レクチン, 抗Hレクチンの反応性
抗Hレクチン
O>A2>B>A1>A1Bの順で反応する
オモテ検査
ウラ検査
抗A
抗B
A1血球
B血球
抗A1
レクチン
抗H
レクチン
4+
0
2+
4+
0
3+
A亜型, 抗A1の疑い
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ウラ血球の反応性について(偽陽性)
患者情報の確認
連銭形成の可能性
生理食塩液法による不規則抗体スクリーニング
抗Lea, 抗P1, 抗M 等
自己対照の陽性の場合、寒冷自己抗体が疑われる
抗Hレクチン、抗A1レクチン、A2赤血球との反応性
亜型
試薬成分による非特異反応
試薬とは陽性、自己対照陰性
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試薬成分による非特異
ウラ血球を洗浄が有効
オモテ検査
ウラ検査
抗A
抗B
A1血球
B血球
4+
0
2+
4+
洗浄後
オモテ検査
ウラ検査
抗A
抗B
A1血球
B血球
4+
0
0
4+
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ウラ検査の偽陰性が疑われるケース
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ウラ血球の反応性について (偽陰性)
オモテ検査
ウラ検査
抗A
抗B
A1血球
B血球
4+
0
0
0
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ウラ血球の反応性について (偽陰性)
オモテ検査
ウラ検査
抗A
抗B
A1血球
B血球
4+
0
0
0
考えられる原因
低・無ガンマグロブリン血症
新生児/高齢者
異型輸血後
造血幹細胞移植後
(亜型)
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日本人の抗体価の減少
Mazda T. et al: Immunohematology 23(1):38-41,2007
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ウラ血球の反応性について(偽陰性)
患者情報の確認
年齢
病歴
グロブリン値
輸血歴
移植歴
使用薬剤
等
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ウラ血球の反応性について(偽陰性)
血漿量の増量
→ 3～4滴下
インキュベーション時間の増加
→ 室温で10分
低温インキュベーション
→4℃で5分
•
寒冷凝集素の影響を検出するためにO型赤血球を対照に立てる
「輸血・移植検査 技術教本」より, 一部改変
オモテ検査
ウラ検査
抗A
抗B
A1血球
B血球
O血球
4+
0
0
2+
0
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移植例
AB型患者にA型ドナー移植例
オモテ
患者
AB
ウラ検査
ドナー
A
抗A
抗B
A1血球
B血球
+
0
0
0
「Medical Technology, 2011年, Vol.39, No.13
今日から役立つ輸血検査業務ハンドブック」
より 抜粋, 一部改変
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ABm例
オモテ検査
ウラ検査
抗A
抗B
A1血球
B血球
4+
0
0
0
日本で最も検出される亜型はBmと言われている
332,002人中, Bm:39例 (1/8,500人), ABm15例(1/22,000人)
(東北地域)*
抗Bによる吸着解離試験でB抗原が検出されることでAB亜型と判明
*(ABO血液型, D抗原判定上の問題点,菊地正輝,
第34回日本血液事業学会総会, 2011, ワークショップ, )より
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