/. Embryol. exp. Morph. Vol. 38, pp. 139-149, 1977
Printed in Great Britain
139
Le materiel extracellulaire au cours du
developpement du chondrocrane
des amphibiens: Mise en place et constitution
Par JACQUELINE CORSIN1
Groupe de recherches de Biologie du Developpement,
U.E.R. de Biologie Genetique, Universite Paris VII
SUMMARY
Changes in the extracellular matrix of the cranial cartilages of
amphibians
During the differentiation of cranial cartilages the composition of perichordal and perineural extracellular matrix changes: at first only collagen and hyaluronic acid can be detected,
later chondroiitin-sulphates 4 and 6 appear and their concentrations progressively increase
while the concentration of hyaluronic acid is decreasing.
The possible effects of these substances not only on the chondrogenetic cells but also
between themselves are discussed.
INTRODUCTION
Au stade neurula les cretes neurales constituent des cordons cellulaires ectodermiques situes au contact de l'ectoderme de revetement dorso-lateral et du
neurectoderme de la plaque medullaire. On sait depuis fort longtemps que les
cellules qui les constituent, emigrent tres precocement (His, 1868) et participent
ensuite a l'edification d'organes extremement varies tant dans leurs localisations
que dans leurs fonctions. En particulier, une part tres importante du mesenchyme de la tete est issue des cretes neurales cephaliques et porte pour cette
raison le nom d'ectomesenchyme.
II a ete largement demontre depuis les travaux realises par Raven de 1932 a
1937 que la majeure partie du squelette cephalique des Amphibiens trouve son
origine dans l'ectomesenchyme issu des cretes neurales cephaliques (Horstadius
& Sellman, 1946; Wagner, 1949; Okada, 1955; Chibon, 1966, 1974). En outre,
de nombreux auteurs, utilisant des techniques de culture de tissus (Wilde, 1955;
Petriconi, 1964; Drews, Kocher-Becker & Drews, 1972; Corsin, 1975; Epperlein
& Lehmann, 1975) sont parvenus a la conclusion suivant laquelle la differenciation des cellules issues des cretes neurales cephaliques se fait sous le controle
1
Adresse de Vauteur: Laboratoire d'Anatomie Comparee, Universite Paris VII, 2 Place
Jussieu - 75221 Paris Cedex 05, France.
140
J. CORSIN
de formations embryonnaires voisines, le mesoderme dorsal et l'endoderme
pharyngien, structures qui interviennent dans les mecanismes complexes
d'induction.
Recemment, Strudel (1971) a montre que, chez les Oiseaux, au niveau
vertebral, du materiel extracellulaire perichordal et perineural preexiste a la
migration des cellules sclerotomiennes depuis les somites jusqu'a proximite
immediate de la corde dorsale et du tube medullaire; ayant atteint leur localisation definitive, les cellules sclerotomiennes se differencient alors en chondroblastes. Du materiel similaire a ete mis en evidence chez les Amphibiens (Corsin,
1974) non seulement au niveau vertebral mais egalement autour des vesicules
cerebrales et de la region anterieure de la corde.
Certains auteurs emettent actuellement l'hypothese selon laquelle ce materiel
extracellulaire pourrait etre la substance par l'intermediaire de laquelle s'exercerait l'induction (Carlson, Upson & Evans, 1974; Hay & Meier, 1974; Pratt,
Larsen & Johnston, 1975). II apparait done tres important de savoir a quel
moment precis du developpement et a quel niveau exact apparait ce materiel
extracellulaire. Celui-ci est essentiellement constitue par du collagene, des
proteoglycanes et des glycoproteines de structure. Les proportions relatives de
ces differentes substances ainsi que, du moins en ce qui concerne les proteoglycanes, leur nature varient au cours de la differentiation du mesenchyme
chondrogene. Ce travail a done ete consacre a l'etude de ce materiel extracellulaire au cours du developpement du chondrocrane chez les Amphibiens.
MATERIEL ET TECHNIQUES
Au cours de ce travail, des embryons de Pleurodeles waltlii Michah aux stades
26 a 34 de la table de Gallien & Durocher (1957) ont ete utilises. Apres avoir ete
degangues, ils ont ete fixes (en fonction de la coloration utilisee) par l'un des
fixateurs suivants: Carnoy, Rossmann, Baker et Newcomer.
Les techniques histochimiques employees avaient pour but de mettre en
evidence d'une part le collagene, d'autre part les divers glycosaminoglycanes
presents dans la substance extracellulaire.
Le collagene a ete mis en evidence apres fixation au Carnoy suivant la technique de Van Gieson.
Pour ce qui concerne les glycosaminoglycanes, trois techniques differentes
ont ete utilisees: la coloration par le bleu alcian a pH2 ou le bleu de toluidine a
pH4, la destruction enzymatique par la hyaluronidase testiculaire, la coloration
par l'acridine orange suivant la methode de Saunders. La coloration par le bleu
alcian au pH utilise permet la mise en evidence des composes non sulfates contenant des acides uroniques, done dans le materiel utilise, l'acide hyaluronique
et la chondroitine.
L'action de la hyaluronidase testiculaire detruit a la fois l'acide hyaluronique,
la chondroitine et les chondroitines-sulfates A et B. Elle permet done par com-
Le materiel extracellulaire du chondrocrane
141
paraison des lames traitees avec les coupes temoins de localiser ces differentes
substances. L'etude au microscope a fluorescence des coupes colorees a l'acridine
orange est de beaucoup la methode la plus precise puisque de legeres variations
techniques dans la coloration permettent de distinguer l'acide hyaluronique,
l'acide chondroitine-sulfurique et l'heparine les uns des autres.
RESULTATS
Collagene
Lorsqu'on observe des coupes de la region cephalique d'embryon de Pleurodele a des stades jeunes, on constate que leur structure est tres dense: il existe
peu d'espace libre entre les vesicules cephaliques et l'ectoderme de revetement
(Fig. 1). Mais, a partir du stade 28, on voit apparaitre puis se developper une
region d'apparence tres lache separant les formations nerveuses de l'epiblaste
(Fig. 2). C'est au travers de cette zone que vont emigrer les cellules mesenchymateuses issues des cretes neurales. Des le moment ou s'individualise cet
espace on peut y observer, outre les cellules mesenchymateuses avec leurs longs
filipodes les unissant les unes aux autres (Fig. 3), des filaments assez epais,
d'aspect plus ou moins strie, il s'agit de fibres de collagene qui sont colorees en
rouge sombre par la picrofuschine (Fig. 4). Au stade 28, l'espace separant
l'encephale de la paroi externe de la tete est encore tres reduit et si les cellules
mesenchymateuses y sont deja assez nombreuses, la quantite de fibres collagenes
reste encore faible. Au cours des stades posterieurs, on observe une augmentation rapide du nombre des cellules comme de la densite en fibres collagenes; ceci
est particulierement net dans les zones ou vont se differencier les premiers
cartilages du chondrocrane.
Des le Stade 32 en effet, on voit se former de veritables ebauches mesenchymateuses des cartilages; a leur niveau on constate une accumulation a la
fois de cellules mesenchymateuses et de fibres collagenes (Figs. 5 et 6).
Les premieres de ces ebauches apparaissent au niveau du plancher cranien,
prefigurant les trabecules a l'avant et les paracordaux dans la region la plus
posterieure de la tete, au niveau de la corde dorsale. Autour de celle-ci, des
fibres collagenes peuvent etre mises en evidence des le stade 28, constituant par
leur accumulation une veritable gaine perichordale.
Acide hyaluronique
Quelle que soit la technique utilisee, aucune trace d'acide hyaluronique ne
peut etre detectee avant le stade 28. A ce moment, il est present uniquement
autour de la corde dorsale, aussi bien dans la region troncale que dans la region
cephalique. Ce n'est qu'a partir du stade 30 que Ton trouve de l'acide hyaluronique en d'autres regions, regions qui sont d'ailleurs les memes que celles ou peut
etre mis en evidence du collagene, a savoir la base cranienne, les machoires, la
region entourant les ebauches nasales. L'acide hyaluronique se presente sous
10
EMB 38
Abbreviations
c, collagene; ch, chondroitine; cm, cellule mesenchymateuse; co, chorde; e, encephale;
ect, ectoderme; ee, espace extracellulaire; em, ebauche mesenchymateuse; eo,
ebauche optique;/,filipode;g, glycosaminoglycane; m, mesenchyme; p, paracordal;
pn, placode nasale; s, substance extracellulaire.
Le materiel extracellulaire du chondrocrdne
143
la forme de tres fines fibrilles, beaucoup plus minces que les fibres de collagene.
Comme ces dernieres, les fibrilles d'acide hyaluronique se repartissent dans
l'espace separant l'epiblaste des formations nerveuses et au travers duquel
emigrent les cellules mesenchymateuses (Fig. 7).
La methode de la fluorescence apres coloration a l'acridine orange permet
d'avoir une idee de la quantite de glycoproteines presente; en effet, l'intensite
de la fluorescence est plus ou moins grande suivant l'abondance dans la preparation de la substance coloree. Ce fait permet de constater qu'apres une
augmentation progressive jusqu'au stade 33, le taux d'acide hyaluronique
diminue brusquement entre les stades 33 et 36, a ce moment l'acide hyaluronique
disparait completement. Ce stade est celui ou se differencient les cartilages du
chondrocrane, nous verrons au cours de la discussion quelle interpretation on
peut donner a ces phenomenes.
Chondroitines-sulfates 4 et 6
Les chondroitines-sulfates peuvent etre mises en evidence soitpar les techniques
de fluorescence soit par une coloration de toluidine a pH4. Dans le premier cas
on met egalement en evidence l'heparine, quant au bleu de toluidine il ne permet
pas de distinguer les chondroltines de l'acide hyaluronique. II faut done comparer les resultats obtenus grace a ces deux techniques pour en faire une interpretation correcte.
C'est au stade 32b qu'apparaissent les premieres traces de chondroltinesulfate au niveau de la base cranienne, la ou vont se differencier par la suite les
trabecules et les paracordaux. Les chondroitines-sulfates deviennent ensuite de
plus en plus abondantes jusqu'au stade 36 ou un taux maximum est atteint. II
ressort done de ces observations que le taux de chondroitines-sulfates augmente
parallelement a la diminution de la concentration en acide hyaluronique (Fig.
8).
L'ensemble des resultats obtenus est resume dans le Tableau 1.
FIGURES
1-4
Fig. 1. Stade 26, coupe transversale de la region cephalique: l'espace separant
l'ectoderme des formations neurosensorielles est tres reduit.
Fig. 2. Stade 28, une zone de structure tres lache separe l'ectoderme des formations
neurosensorielles; cette region est progressivement envahie par des cellules mesenchymateuses et par les divers constituants de la substance extracellulaire.
Fig. 3. Stade 30, fort grossissement de la region separant l'ectoderme de l'encephale,
les cellules mesenchymateuses presentent de longsfilipodesles unissant les unes aux
autres.
Fig. 4. Stade 33, les cellules mesenchymateuses perdent progressivement leur aspect
etoile et s'arrondissent tandis que s'accumule entre elles la substance extracellulaire.
144
J. CORSIN
FIGURES
5-8
Fig. 5. Au stade 32 on voit se former de veritables ebauches mesenchymateuses des
cartilages, il s'agit ici des trabecules.
Fig. 6. Vue au fort grossissement la meme coupe, coloree suivant la technique de
Van Gieson, montre que les fibres collagenes sont tres nombreuses.
Fig. 7. La coloration par le bleu alcian a mis ici en evidence les glycosaminoglycanes
non sulfates: a ce stade (st. 32) il s'agit surtout d'acide hyaluronique.
Fig. 8. Au stade 34 la technique de Saunders permet de mettre en evidence les
chondroitines-sulfates, ici au niveau des paracordaux.
Le materiel extracellulaire du chondrocrane
145
Tableau 1
Stades
Collagene
Acide
Hyaluronique
Chondroitine
4 et 6 sulfate
Heparine
28
30
32
33
34
36
+
4-+
+4-+
44+
44-44-44-
+
+4+4-44-4440
0
0
444
4 4 4
44-4
0
0
0
0
0
44
DISCUSSION
Au cours de la differentiation du chondrocrane on constate done que, du
point de vue de la constitution de la matrice extracellulaire, deux periodes se
succedent: au cours de la premiere seuls sont presents le collagene et l'acide
hyaluronique et ce n'est qu'ensuite qu'apparaissent les chondroitines-sulfates
puis 1'heparine en meme temps que disparait l'acide hyaluronique.
En ce qui concerne le comportement des cellules chondrogenes, on peut faire
une observation identique (Toole & Gross, 1971; Toole, 1972; Toole, Jackson &
Gross, 1972; Corsin, 1974). Pendant une premiere phase que Ton peut appeler
morphogenetique les cellules mesenchymateuses se multiplient et emigrent.
Dans un second temps ces cellules se rassemblent en des points precis de
l'embryon, points ou elles vont se differencier en chondroblastes, e'est la
phase de cytodifferenciation: les cellules perdent leur aspect etoile de cellules
mesenchymateuses et acquierent l'aspect arrondi caracteristique des cellules
cartilagineuses.
Or, si Ton rapproche revolution du materiel extracellulaire des transformations subies par les cellules, on constate qu'il y a un parallelisme etroit dans leur
deroulement. La multiplication et la migration des cellules mesenchymateuses
coincident avec la presence dans la matrice d'acide hyaluronique. Quant a la
cytodifferenciation elle ne debute qu'au moment ou disparait l'acide hyaluronique qui est alors remplace dans la matrice extracellulaire par les chondroitinessulfates.
De nombreux auteurs (Gross, 1964; Slavkin, 1972; Nevo & Dorfman, 1972;
Kosher, Lash & Minor, 1973; Solursh & Meier, 1973; Toole, 1973; Meier &
Hay, 1974) pensent a l'heure actuelle que le collagene et les divers glycosaminoglycanes ont un role de mediateur au cours des nombreuses interactions tissulaires qui se deroulent pendant la periode embryonnaire en particulier lors de
la chondrogenese. On sait en effet que la corde et les formations neurosensorielles sont les inducteurs aussi bien du squelette axial (Holtzer & Detwiler,
1953; Grobstein & Parker, 1954; Strudel, 1953, 1955) que du crane (Corsin,
1972; Schowing, 1961, 1974). D'autre part il a ete mis en evidence que les differentes substances constituant la matrice extracellulaire sont secretees par la
146
J. CORSIN
corde ou par les formations nerveuses (Franco-Browder, de Rydt & Dorfman,
1963; Marzullo & Lash, 1967; Lash, \96Sa,b,c; Kvist & Finnegan, 1970;
Strudel, 1971; Kosher & Lash, 1975).
II faut maintenant preciser quel est le role propre de chaque substance au
cours du processus. Sous l'influence des categories cellulaires qui les entourent,
les cellules mesenchymateuses issues de la crete neurale quittent leur lieu
d'origine et se dirigent vers le point ou elles se differencieront en chondroblastes; pour ce faire, elles suivent des voies qui leur sont inxposees par leur
entourage (Corsin, 1975; Le Douarin & Teillet, 1973a, b, 1974; Weston, 1970,
1972, 1974). Or nous constatons qu'a partir du stade 28, lorsque debute la
migration cellulaire on voit apparaitre, puis se developper, une zone de structure
tres lache dans laquelle peuvent etre mis en evidence des fibres de collagene et
de l'acide hyaluronique. La presence de hyaluronate dans un tissu est tres
souvent associee a un degre d'hydratation eleve de ce tissu (Laurent, 1970), on
peut done penser que l'apparition d'acide hyaluronique chez l'embryon peut
etre responsable de la formation et du developpement de cet espace lacunaire
separant les formations nerveuses de l'ectoderme de revetement (Pratt et al.
1975), espace au travers duquel vont emigrer les cellules mesenchymateuses.
Par ailleurs on a vu que l'augmentation de la concentration en chondroitinessulfates coincide avec la disparition progressive de l'acide hyaluronique, ce qui
est en accord avec la suggestion faite en particulier par Solursh, Vaerewyck &
Reiter (1974), selon laquelle l'acide hyaluronique inhibe la synthese des chondroitines-sulfates. Or les chondroitines-sulfates paraissent jouer un role essentiel
dans la stabilisation des chondroblastes au debut de la chondrogenese. Par
ailleurs on a montre recemment (Laurent & Obrink, 1972; Preston, Obrink &
Laurent, 1973; Robert, 1975) qu'en presence d'acide hyaluronique la diffusion de molecules tres asymetriques, comme le collagene, est acceleree et
orientee. Or la presence des fibres du collagene est indispensable a la migration
des cellules mesenchymateuses.
On connait done de facon precise la distribution dans l'espace et dans le temps
du collagene et des proteoglycanes au cours de la formation des cartilages
craniens. Par contre il y a encore une large part d'hypothese dans l'interpretation que Ton peut donner du role devolu a chacune d'entre elles au cours de la
chondrogenese.
L'auteur remercie Claire Joly de sa collaboration technique.
TRAVAUX CITES
E. C, UPSON, R. H. & EVANS, D. K. (1974). The production of extracellular connective tissue fibrils by chick notochordal epithelium in vitro. Anat. Rec. 179, 361-374.
CHIBON, P. (1966). Analyse experimental de la regionalisation et des capacites morphogenetiques de la crete neurale chez l'Amphibien Urodele, Pleurodeles waltlii Michah.
Mem. Soc. zool. Fr. 36, 1-107.
CHIBON, P. (1974). Un systeme morphogenetique remarquable: la crete neurale des Vertebres.
Annee Biol. 13, 459-480.
CARLSON,
Le materiel extracellulaire du chondrocrdne
147
J. (1967). Influence de placodes olfactives et des ebauches optiques sur la morphogenese du squelette cranien chez Pleurodeles waltlii Michah. Annls Embryol. Morph. 1,
41-48.
CORSIN, J. (1972). Role des ebauches sensorielles au cours de la morphogenese du chondrocrane chez Pleurodeles waltlii Michah. Archs Anat. microsc. Morph. exp. 61, 47-60.
CORSIN, J. (1974). Materiel extracellulaire et chondrogenese chez les Amphibiens. Archs
Anat. microsc. Morph. exp. 63, 231-238.
CORSIN, J. (1975). Differentiation in vitro de cartilage a partir des cretes neurales cephaliques
chez Pleurodeles waltlii Michah. /. Embryol. exp. Morph. 33, 335-342.
DREWS, U., KOCHER-BECKER, U. & DREWS, U. (1972). Die Induktion von Kiemenknorpel aus
Kopfneuralleisten-material durch prasumptiven Kiemendarm in der Gewebekultur und
das Bewegungsverhalten der Zellen wahrend ihrer Entwicklung zu Knorpel. Wilhelm Roux
Arch. EntwMech. Org. Ill, 17-37.
EPPERLEIN, H. H. & LEHMANN, R. (1975). Ectomesenchymal-endodermal interaction system
(EEIS) of Triturus alpestris in tissue culture. 11. Observations on differentiation of visceral
cartilage. Differentiation 4, 159-174.
FRANCO-BROWDER, S., DE RYDT, J. & DORFMAN, A. (1963). The identification of a sulfated
mucopolysaccharide in chick embryo stages 11-23; Proc. natn. Acad. Sci. U.S.A. 49, 643647.
GALLIEN, L. & DUROCHER, M. (1957). Table chronologique du developpement chez Pleurodeles waltlii Michah. Bull, bio I. Fr. Belg. 91, 97-114.
GROBSTEIN, C. & PARKER, G. (1954). In vitro induction of cartilage in mouse somite mesoderm
by embryonic spinal cord. Proc. Soc. exp. Biol. Med. 85, 477-481.
GROSS, J. (1964). Studies on the biology of connective tissues: remodelling of collagen in
metamorphosis. Medecine 43, 291-303.
HAY, E. D. & MEIER, S. (1974). Glycosaminoglycan synthesis by embryonic inductors:
neural tube, notochord and lens. /. Cell Biol. 62, 889-898.
His, W. (1868). Untersuchungen uber die erste Anlage der Wirbeltiereliebes. Die erste Entwicklung des Hiinschens irm Ei. Leipzig.
HOLTZER, H. & DETWILER, S. R. (1953). An experimental analysis of the development of the
spinal column. I IF. Induction of skeletogenous cells. /. exp. Morph. 123, 335-369.
HORSTADIUS, S. & SELLMAN, S. (1946). Experimentell Untersuchungen Liber die Determination des knorpeligen Kopfskelettes bei Urodelen. Nova Acta R. Soc. Scient. Upsal., ser. IV,
13, 1-170.
KOSHER, R. A. & LASH, J. W. (1975). Notochordal stimulation of in vitro somite chondrogenesis before and after enzymatic removal of perinotochordal materials. Devi Biol. 42,
362-378.
KOSHER, R. A., LASH, J. W. & MINOR, R. P. (1973). Environmental enhancement of in vitro
chondrogenesis. IV. Stimulation of somite chondrogenesis by exogenous chondromucoprotein. Devi Biol. 35, 210-220.
KVIST, T. N. & FINNEGAN, C. N. (1970). The distribution of glycosaminoglycans in the axial
region of the developing chick embryo. I. Histochemical analysis. IT. Biochemical analysis.
/. exp. Zool. 175, 221-240 and 241-258.
LASH, J. W. (1968a). Chondrogenesis: genotypic and phenotypic expression. /. cell. Physiol.
72, suppl. 1, 35-46.
LASH, J. W. (19686). Phenotypic expression and differentiation: in vitro chondrogenesis. In
The Stability of Differentiated State (ed. H. Ursprung), pp. 17-24. Berlin: Springer- Verlag.
LASH, J. W. (1968 c). Somitic mesenchyme and its response to cartilage induction. In Epithelial-Mesenchymal Interaction (ed. R. F. Fleischmajer & R. E. Billingham), pp. 165-172.
Baltimore: Williams & Wilkins Co.
LAURENT, T. C. (1970). Structure of hyaluronic acid. In Chemistry and Molecular Biology of the
Intercellular Matrix, Vol. 2 (ed. C. E. A. Balazs), pp. 703-732. New York: Academic Press.
LAURENT, T. C. & OBRINK, B. (1972). Studies on elephant aortic elastic tissue. II. Amino-acid
analysis, structural glycoproteins and antigeneticy. Exp. mol. Path. 18, 202-212.
LE DOUARIN, N. & TEILLET, M. A. (1973 a). The migration of neural crest cells to the wall of
digestive tract in avian embryo. /. Embryol. exp. Morph. 30, 31-48.
CORSIN,
148
J. CORSIN
N. & TEILLET, M. A. (19736). Recherches sur le determinisme de la migration
des cellules issues de la crete neurale. C. r. hebd. seanc. Acad. Sci., Paris D 277, 1929-1932.
LE DOUARIN, N. & TEILLET, M. A. (1974). Experimental analysis of the migration and
differentiation of neuroblasts of the autonomic nervous system and of neurectodermal
mesenchymal derivatives using a biological cell marking technique. DevlBiol. 41, 162-184.
MARZULLO, G. & LASH, J. W. (1970). Control of phenotypic expression in cultured chondrocytes: investigations on the mechanism. Devi Biol. 22, 638-653.
MEIER, S. & HAY, E. D. (1974). Control of corneal differentiation by extracellular materials.
Collagen as a promotor and stabilizer of epithelial stroma production. Devi Biol. 38,
249-270.
NEVO, Z. & DORFMAN, A. (1972). Stimulation of chondromucoprotein synthesis in chondrocytes by extracellular chondromucoprotein. Proc. natn. Acad. Sci., U.S.A. 69, 2069-2072.
OKADA, E. W. (1955). Isolationsversuche zur Analyse der Knorpelbildung aus Neuralleistenzellen bei Urodelekeim. Mem. Coll. Sci. Kyoto, Univ. B 22, 23-28.
PETRICONI, V. (1964). Entwicklungsphysiologische Untersuchungen iiber die Induzierbarkeit
von Skelettelementen des Anuren-Schadels durch flussigen Organextrakt. Wilhelm Roux
Arch. EntwMech. Org. 155, 358-390.
PRATT, R. M., LARSEN, M. A. & JOHNSTON, M. C. (1975). Migration of cranial neural crest
cells in a cell free hyaluronate rich matrix. Devi Biol. 44, 298-305.
PRESTON, B. N., OBRINK, B. & LAURENT, T. C. (1973). The rotational diffusion of albumin in
solutions of connective tissue polysaccharides. Eur. J. Biochem. 33, 401-406.
RAVEN, CH. P. (1933). Zur Entwicklung der Ganglienleiste. II. Uber das Differenzierungsvermogen des Kopfganglienleistenmaterials von Urodelen. Wilhelm Roux EntwMech. Org.
129, 179-198.
RAVEN, CH. P. (1935). Zur Entwicklung der Ganglienleiste. IV. Untersuchungen iiber
Zeitpunkt und Verlauf der 'Materiellen Determination' des prasumptiven Kopfganglienleistenmaterials der Urodelen. Wilhelm Roux Arch. EntwMech. Org. 132, 503-575.
ROBERT, L. (1975). Les glycoproteines dans l'organisation de la matrice extracellulaire.
Aspects ontogenetiques phylogenetiques et pathologiques. Biologie med. 4, 1-29.
SCHLITZ, J. R., MAYNE, R. & HOLTZER, H. (1973). The synthesis of collagen and glycosaminoglycans by dedifferentiated chondroblasts in culture. Differentiation 1, 97-108.
SCHOWING, J. (1961). Influence indutrice de l'encephale et de la corde sur la morphogenese du
squelette cranien chez l'embryon de Poulet. /. Embryol. exp. Morph. 9, 326-334.
SCHOWING, J. (1974). Role morphogene de l'encephale embryonnaire dans l'organogenese du
crane chez l'Oiseau. Annie Biol. 13, 69-76.
SLAVKIN, H. (1972). The Comparative Molecular Biology of Extracellular Matrices. New
York: Academic Press.
SOLURSH, M. & MEIER, S. (1973). The selective inhibition of mucopolysaccharide synthesis
by vitamin A treatment of cultured chick embryo chondrocytes. Calcified Tissue Res. 13,
131-142.
SOLURSH, M., VAEREWYCK, S. A. & REITER, R. S. (1974). Depression by hyaluronic acid of
glucosaminoglycan synthesis by cultured chick embryo chondrocytes. DevlBiol. 41,233-244.
SPOONER, B. S. & CONRAD, G. W. (1975). The role of extracellular materials in cell movement.
I. Inhibition of mucopolysaccharide synthesis does not stop bon membrane activity or
cell movement. /. Cell Biol. 65, 286-297.
STRUDEL, G. (1953). Consequences de l'excision de troncons de tube nerveux sur la morphogenese de l'embryon de Poulet et sur la differentiation de ses organes. Contribution a la
genese de l'orthosympathique. Annls Sci. nat. (Zool.) 15, 251-329.
STRUDEL, G. (1955). Mecanisme de la genese des vertebres chez l'embryon de Poulet. C. r.
hebd. seanc. Acad. Sci., Paris D 240, 1725-1726.
STRUDEL, G. (1971). Materiel extracellulaire et chondrogenese vertebrale. C. r. hebd. seanc.
Acad. Sci., Paris D 272, 473-476.
STRUDEL, G. (1973). Materiel extracellulaire periaxial et chondrogenese vertebrale. Annie
Biol 12, 401-416.
TOOLE, B. P. & GROSS, J. (1971). The extracellular matrix of regenerating newt limb: synthesis
and removal of hyaluronate prior to differentiation. Devi Biol. 25, 57-77.
LE DOUARIN,
Le materiel extracellulaire du chondrocrane
149
B. P. & TRELSTAD, R. L. (1971). Hyaluronate production and removal during cornea
development in the chick. Devi Biol. 26, 28-35.
TOOLE, B. P. (1972). Hyaluronate turnover during chondrogenesis in developing chick limb
and axial skeleton. Devi Biol. 29, 321-329.
TOOLE, B. P., JACKSON, G. & GROSS, J. (1972). Hyaluronate in morphogenesis. Inhibition of
chondrogenesis in vitro. Proc. natn. Acad. Sci., U.S.A. 69, 1384-1386.
TOOLE, B. P. (1973). Hyaluronate and hyaluronidase in morphogenesis and differentiation.
Amer. Zool. 13, 1061-1065.
TRELSTAD, R. L. (1973). The developmental biology of vertebrate collagens. /. histochem.
Cytochem. 21, 521-528.
TRELSTAD, R. L., HAYASHI, K. & TOOLE, B. P. (1974). Epithelial collagens and glycosaminoglycans in the embryonic cornea. /. Cell Biol. 62, 815-830.
VAEREWYCK, S. & SOLURSH, M. (1973). Hyaluronic acid inhibits the expression of chondrocyte differentiation. /. Cell. Biol. 59, 351.
WAGNER, G. (1949). Die Bedeutung der Neuralleiste fur die Kopfgestaltung der Amphibienlarven. Untersuchungen an Chimaeren von Triton. Revue suisse Zool. 56, 519-620.
WESTON, J. A. (1970). The migration and differentiation of neural crest cells. Adv. Morphogen.
8,41-114.
WESTON, J. A. (1972). Cells interactions in neural crest cells development. 3rd Hepetit Coll.
North Holland, pp. 286-292.
WESTON, J. A. (1974). Conference on neural crest in normal and abnormal embryogenesis.
Devi Biol. 36, 1-5.
WILDE, C. E. (1955). The Urodele neuroepithelium. I. The differentiation in vitro of cranial
neural crest. /. exp. Zool. 130, 573-591.
TOOLE,
{Regu le 23 Juin 1976, revise le 27 Septembre 1976)