/. Embryol. exp. Morph. Vol. 25, 3, pp. 377-384, 1971
Printed in Great Britain
Influence de la thiouree sur la charge en glycogene
du foie de Fembryon de poulet
Par NICOLE DAUGERAS1
Laboratoire de Biologie-Vertebres, Universite d'Orsay
SUMMARY
Influence of thiourea on the glycogen content of the liver of the chick embryo
In the developing chick embryo, liver glycogen appears on the sixth day of incubation. The
glycogen content increases from the sixth day, but decreases on the twelfth day before
increasing again.
This decrease on day 12 might be related to the onset of thyroid activity, which would be
responsible for an increased rate of utilization of the substrates.
An antithyroid drug, thiourea, has been injected on day 60. The liver glycogen concentration of the thiourea-treated chick embryos was determined from the tenth to the fifteenth
days and compared with that of the control embryos.
(i) On days 11 and 12 the liver glycogen concentration of the injected embryos is higher
than that of the controls.
(ii) On day 13 the liver glycogen level of treated embryos decreases; this decrease might be
correlated with possible functional activity of the thyroid glands if their biosynthesis is no
longer inhibited by the thiourea injection or with thyroid hormones possibly coming from the
yolk.
(iii) On days 14 and 15 no difference is observed between the liver glycogen content of the
thiourea-treated embryos and that of the controls.
INTRODUCTION
Des nombreuses etudes sur l'apparition et revolution du glycogene hepatique
au cours du developpement de Fembryon de Poulet, il apparait que la charge
en glycogene hepatique croit progressivement a partir du 6eme jour de l'incubation, diminue au 12eme jour avant de croitre a nouveau pendant la deuxieme
moitie de l'incubation (voir bibliographic dans Daugeras, 1968). L'hypophysectomie par decapitation a la 36eme h d'incubation empeche la diminution du
taux du glycogene hepatique au 12eme jour (Konigsberg, 1954); elle est alors
observee au 14eme jour d'incubation (Daugeras, 1969).
Pour Konigsberg (1954), la diminution de la charge en glycogene du foie
chez les embryons au 12eme jour serait due a une utilisation accrue des glucides;
Romijn & Lokhorst (1951) notent, en effet, entre le lOeme et le 13eme jour, un
accroissement du metabolisme et ils Fattribuent a une entree en activite de la
thyroide; ainsi, Konigsberg (1954) impute l'absence au 12eme jour de cette
1
Adresse de Vauteur: Laboratoire de Biologie-Vertebres, Facultedes Sciences, Orsay 91,
France.
378
N. DAUGERAS
diminution de la charge en glycogene, chez les embryons decapites, a une
perturbation de la fonction thyroidienne consecutive a l'hypophysectomie.
De nombreuses observations sont en faveur d'une entree en activite de la
thyroide des le debut de la 2eme moitie de l'incubation:
(i) l'accroissement brutal de raccumulation de 131I par la thyroide entre le
lOeme et le 13eme jour (Stoll & Blanquet, 1952; Trunnell & Brayer, 1953);
(ii) la presence de 131I lie organiquement a partir du 9eme jour (Wollman &
Zwilling, 1953), de thyroxine marquee a l'etat de traces dans la thyroide des
9 jours f et en plus grande quantite a 10 jours (Trunnell & Wade, 1955) ou a
12 jours (Blanquet, Stoll, Maraud & Capot, 1953), d'hormones thyroidiennes
marquees dans l'organisme embryonnaire de 10 jours (Meyniel et al. 1955);
(iii) l'apparition dans la glande, a 11-12 jours, de modifications histologiques,
habituellement liees chez l'adulte a une secretion hormonale (Kraicziczek, 1956);
(iv) la possibilite pour une thyroide d'embryon de Poulet de 10 jours d'induire
la metamorphose d'un tetard (Hopkins, 1935).
Notons egalement que revolution morphologique de la glande est telle qu'a
cette meme periode se mettent en place des structures caracteristiques de la
glande, structure vesiculaire, reseau de capillaires (Stoll et al. 1958; Thommes,
1958). Ainsi Stoll et ses collaborateurs observent deux phases dans le developpement embryonnaire de la glande avec une nette discontinuite vers 12 jours
(Stoll et al 1958).
En outre, l'existence d'un axe hypophyso-thyroidien fonctionnel vers le
lOeme jour de la vie embryonnaire (Tixier-Vidal, 1958) laisse supposer que
l'hypophysectomie precoce modifie la fonction thyroidienne. En effet:
(i) elle entraine un retard dans l'apparition de la colloide, qui, au lieu d'apparaitre a 10 jours, n'apparait qu'au 14eme jour et en tres petite quantite (Fugo,
1940);
(ii) elle provoque des modifications de l'ultrastructure de la glande a partir
de lleme jour (Hajos, Straznicky & Mess, 1964) ou du 12eme jour (Stoll et al.
1958);
(iii) elle empeche la mise en place du reseau de capillaires qui se forme a
partir du lleme jour chez les temoins (Thommes, 1958);
(iv) enfin, elle diminue a partir du 13eme jour la concentration du radioiode
dans la thyroide (Maraud, Stoll & Blanquet, 1957).
Mais l'apparente concordance entre l'entree en activite de la thyroide au
debut de la 2eme moitie de l'incubation et la diminution de la quantite du
glycogene hepatique n'implique pas necessairement de relation entre ces deux
phenomenes. De meme, le retard de cette diminution chez les decapites n'est
peut-etre pas la consequence des perturbations de la fonction thyroidienne
consecutives a l'hypophysectomie. On sait que des injections, a des dates
variables, de thyroxine a des embryons de Poulet, ou bien ne modifient pas la
teneur du foie en glycogene (Guelin-Schedrina, 1934; Dalton & Hanzal, 1940),
ou bien entrainent une diminution de la charge en glycogene (Dalton & Hanzal,
Thiouree et glycogene dufoie
379
1940; Mitschevich, 1957). Dalton & Hanzal (1940) remarquent qu'une dose
meme importante de thyroxine (1/160 mg) est sans effet au bout de 24 h alors
qu'une dose plus faible (1 /tg) provoque une disparition du glycogene au bout
de 72 h.
Ann d'etudier le role eventuel joue par la thyroide dans la brutale disparition
du glycogene hepatique au debut de la deuxieme moitie de l'incubation, j'ai
injecte un antithyroidien, la thiouree, afin de bloquer toute secretion hormonale,
et j'ai compare la teneuren glycogene du foie des embryons injectes a celle du foie
d'embryons temoins du lOeme au 15eme jour.
Thommes & Truchan (1963) signalent sans precisions que la charge en glycogene hepatique d'embryons de Poulet traites a la thiouree est superieure a celle
des temoins a 10 et 11 jours, puis qu'elle diminue de 11 a 13 jours, mais ils ne
mentionnent pas la charge des temoins au-dela du lleme jour.
MATERIEL ET METHODES
Les ceufs de Poule Leghorn blanche sont mis a incuber a 37,5 ±0,5 °C.
Au 6eme jour de l'incubation, la thiouree en solution saline est injectee dans
le sac vitellin: 2,5 mg de thiouree sous un volume de 0,5 cm3 pour chaque ceuf
(Vidal, 1952). Le fait que, des le 7eme jour, la thyroide embryonnaire puisse
concentrer le radioiode (Stoll & Blanquet, 1952; Wollman & Zwilling, 1953) a
determine le choix de la date d'injection de la thiouree; la decouverte par Trunnell & Wade (1955) du pouvoir de concentration de la thyroide des le 5eme jour
n'a pas modifie le choix de cette date d'injection car ces auteurs montrent
qu'au moins jusqu'a 7 jours \ d'incubation l'iode de la glande n'existe qu'a
l'etat d'iodure.
Les foies des embryons traites sont preleves du lOeme au 15eme jour. Parallelement, sont preleves les foies des embryons temoins qui ont recu en meme
temps (au 6eme jour) une meme quantite (0,5 cm3) de solution saline. Les
prelevements se font a heure fixe. Comme dans les precedents travaux (Daugeras,
1968, 1969), j'ai associe, pour chaque embryon, l'observation histologique
d'echantillons du foie au resultat du dosage du glycogene. Les techniques
histologiques et de dosage du glycogene ont ete precedemment decrites (Daugeras, 1968).
RESULTATS
Le Tableau 1 groupe les valeurs moyennes (en mg de glycogene pour 100 mg
de foie) des charges en glycogene hepatique d'embryons temoins et d'embryons
traites de 10 a 15 jours d'incubation. Les resultats sont traduits par la Fig. 1.
10 jours
La teneur moyenne en glycogene hepatique des embryons traites est inferieure
a celle des embryons temoins, mais la difference n'est pas significative.
380
N. DAUGERAS
Tableau 1. Teneurs moyehnes en glycogene du foie d'embryons de Poulet,
temoins et traites, du lOeme au 15eme jour de Vincubation, et intervalles de
confiance de la moyenne pour le coefficient de confiance de 95 %
Temoins
Traites
A
<
Teneur moyenne
Teneur moyenne
(mg de glycogene/100 mg
(mg de glycogene/100 mg
Nombre
de foie+intervalle
de foie + intervalle
Nombre
de cas
de confiance)
de confiance)
de cas
Age des
embryons
(jours)
10
11
12
13
14
15
8
23
9
12
8
6
8
11
11
12
7
8
0,414 ±0,281
0,285 ±0,142
0,057 ±0,046
0,263 ±0,110
1,018 ±0,450
1,340 ±0,520
0,304 ±0,203
0,661 ±0,312
0,735 ±0,346
0,202 ±0,174
1,004 ±0,245
1,409 ±0,531
— TraitP";
Temoins
1,4
1.2
? 0,8
c 0,6
/«
DO
8
O 0,4
0,2
10
11
12
13
14
15
Jours d'incubation
Fig. 1. Teneur en glycogene du foie d'embryon de Poulet temoin ou traite.
11 jours
Embryons temoins. A ce stade les variations individuelles sont tres importantes. Le foie de certains embryons temoins se vide presque completement de son
glycogene (valeur minimale: 0,015 pour 100); celui d'autres embryons est, au
contraire, tres riche, jusqu'a 1,470 pour 100.
Thiouree et glycogene dufoie
381
La teneur moyenne du foie des embryons de 11 jours est inferieure a celle
obtenue dans un precedent travail ou de grandes variations individuelles etaient
deja mentionnees (Daugeras, 1968); les teneurs extremes en glycogene hepatique
sont cependant sensiblement les memes, seule la proportion d'embryons ou la
disparition du glycogene hepatique existe deja est beaucoup plus importante.
Ceci ne change en rien les conclusions tirees des resultats des deux series
experimentales.
Embryons traites. Leur teneur moyenne en glycogene hepatique (0,661 pour
100) est plus elevee que celle des embryons temoins (0,285 pour 100), mais la
difference entre ces deux series n'est pas significative.
Les variations individuelles sont aussi tres importantes chez les embryons
traites et malgre l'injection de thiouree trois embryons sur onze ont une charge
en glycogene hepatique tres faible (inferieure a 0,200 pour 100).
12 jours
Embryons temoins. Le glycogene hepatique disparait. II est trouve seulement
dans le foie de deux embryons, mais en tres faible quantite (respectivement
0,229 et 0,100 pour 100).
Embryons traites. Au contraire, sept embryons sur onze ont un foie tres riche
en glycogene (jusqu'a 1,570 pour 100). La teneur moyenne du foie en glycogene (0,735 pour 100) est beaucoup plus elevee que celle des temoins (0,057 pour
100) et la difference est significative. Cependant, la disparition du glycogene est
observee dans le foie de quatre embryons sur onze (teneur inferieure a 0,100
pour 100).
13 jours
Embryons temoins. Le foie se charge a nouveau en glycogene (0,263 pour 100).
Le foie de trois embryons en est cependant encore presque totalement depourvu.
Embryons traites. Une baisse importante de la teneur moyenne du foie en
glycogene est observee par rapport a celle des embryons traites de 12 jours.
Teneur moyenne a 12 jours = 0,735 pour 100; teneur moyenne a 13 jours =
0,202 pour 100. La difference est significative.
14 jours - 15 jours
Embryons temoins. Le foie de la majorite des embryons est tres riche en
glycogene. Un seul embryon a, a 14 jours, une teneur tres faible en glycogene
hepatique.
Embryons traites. Leur foie se charge a nouveau en glycogene: teneur moyenne
a 14 jours = 1,004 pour 100; teneur moyenne a 15 jours = 1,409 pour 100. La
teneur moyenne des embryons traites est comparable a celle des embryons
temoins.
382
N. DAUGERAS
DISCUSSION ET CONCLUSION
La diminution de la charge en glycogene hepatique, normalement observee
au debut de la 2ememoitie de l'incubation, n'est pas supprimee chez lesembryons
qui ont regu au 6eme jour une injection de thiouree. Elle est retardee au 13eme
jour. Cette consequence de l'injection de thiouree sur la charge en glycogene
hepatique doit etre rapprochee de celle de l'hypophysectomie precoce; chez ces
embryons decapites, cette diminution est retardee au 14emejour (Daugeras, 1969).
Une injection de thiouree entraine chez l'embryon de Poulet un etat d'hypothyroiidisme (Adams & Bull, 1949); les effets consecutifs a une injection de
thiouree sont en effet comparables a ceux observes chez les Oiseaux adultes et les
Mammiferes:
(i) poids des traites inferieurs a ceux des temoins (Adams & Bull, 1949;
Adams & Buss, 1952; Vidal, 1952; Romanoff & Laufer, 1956);
(ii) hypertrophie (Kingsbury, Emery & Adams, 1955), hyperplasie, hyperemie
de la thyroide avec vacuolisation et disparition de la colloide (Adams & Bull,
1949; Adams & Buss, 1952; Bennett & Adams, 1952; Kingsbury et ai 1955;
Tixier-Vidal, 1958).
De plus, Grossowicz (1946) a montre que certains effets d'une injection de
thiouree a 17 jours, chez l'embryon de Poulet, peuvent etre supprimes en
adjoignant une dose de thyroxine.
Ce retard signifie-t-il alors qu'une injection de thiouree a 6 jours n'inhibe
que momentanement la biosynthese et par suite la secretion des hormones
thyroi'diennes ? En faveur de cette hypothese, notons que Tixier-Vidal (1958)
observe, au 15eme jour, dans les thyroides d'embryons de Poulet traites par la
thiouree au 8eme jour, une colloiide abondante au sein de follicules geants, ce
que j'ai egalement constate au cours d'observations preliminaires, mais a
13 et 14 jours d'incubation. Or, ceciest habituellement observe apres arret du
traitement antithyroiidien.
Afin de preciser le temps d'action de la thiouree sur la thyroide et sa relation
eventuelle avec les variations de la charge en glycogene hepatique du foie des
embryons traites, observees a 13 jours, ou pour certains deja a 11 et 12 jours, les
thyroides des embryons traites ont ete systematiquement prelevees du lOeme
au 15eme jour pour y doser Fiode organique.
Du sang est egalement preleve dans une artere vitelline de chaque embryon,
traite ou temoin, pour determiner l'iode organique lie aux proteines plasmatiques
et plus particulierement la fraction hormonale (extractible par le rc-butanol
BEI). En effet, le fait que la triiodothyronine administree a des poules soit
retrouvee a Petat de traces dans le vitellus des oeufs pondus (Roche, Michel &
Volpert, 1956) rend indispensable la mesure de l'iode hormonal circulant,
celui-ci pouvant alors provenir non seulement de la thyroide, mais eventuellement du vitellus; il peut etre present meme chez des embryons traites, a thyroide
depourvue d'iode organique.
Thiouree et glycogene dufoie
383
Ainsi, seule la connaissance, d'une part de l'activite de la biosynthese hormonale thyroidienne, d'autre part du niveau d'iode hormonal sanguin, permettra de preciser le role joue par la thyroide dans la disparition du glycogene
hepatique au debut de la 2eme moitie de l'incubation.
Si cette disparition etait due a une autre cause, le fait qu'elle n'ait lieu qu'au
13eme jour chez les embryons traites a la thiouree, et au 14eme jour chez les
embryons hypophysectomises (Daugeras, 1969) pourrait n'etre que la manifestation d'un retard general du developpement, consecutif a une injection
d'antithyroidien (Vidal, 1952) et a l'hypophysectomie (Fugo, 1940).
RESUME
Le glycogene hepatique apparait chez l'embryon de Poulet le 6eme jour de 1'incubation.
Puis la charge en glycogene hepatique qui croit a partir du 6eme jour, diminue au debut de la
deuxieme moitie de l'incubation avant de croitre a nouveau.
L'entree en activite de la thyroide pressentie au debut de la deuxieme moitie de l'incubation
provoquerait une consommation plus importante des glucides et pourrait ainsi etre la cause de
cette diminution du taux du glycogene hepatique observee a 11-12 jours.
Un antithyroidien, la thiouree, est injecte a 6 jours; la teneur en glycogene hepatique des
embryons temoins est determined et comparee a celle des embryons temoins, du lOeme au
15eme jour d'incubation.
(i) Aux 11 erne et 12eme jours, la charge en glycogene hepatique des embryons traites est
superieure a celle des embryons temoins.
(ii) Au 13eme jour, la teneur en glycogene du foie des embryons traites a la thiouree
diminue. Cette diminution pourrait etre due a la presence d'hormones thyroi'diennes d'origine
embryonnaire si la biosynthese hormonale n'a ete bloquee que momentanement ou eventuellement a l'existence d'hormones thyroidiennes d'origine vitelline.
(iii) Aux 14eme et 15eme jours, les teneurs en glycogene hepatique des embryons temoins
et traites ne different pas.
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