/ . Embryol. exp. Morph. Vol. 18, 3, pp. 401-26, December 1967
With 4 olates
Printed in Great Britain
Developpement d'individus
haploides adultes eleves en parabiose chez le
triton Pleurodeles waltlii Michah.: Syndrome
de Fhaplo'idie et differenciation sexuelle
Par L. GALLIEN 1
Laboratoire d'Embryologie, Faculte des Sciences de Paris
INTRODUCTION
Chez les Vertebres, seuls les Amphibiens permettent d'obtenir experimentalement des individus haploides. Cependant la survie de ceux-ci est courte. Pour
les Urodeles, quelques rares cas ont ete signales comme ayant atteint la metamorphose: un Triturus taeniatus (Baltzer, 1922), un T. alpestris (Fischberg,
1948), quatre T. pyrrhogaster (Sanada, 1951), deux T. granulosus (Costello &
Goldwin-Holmquist, 1957); ces derniers, ages de 139 et 146 jours, furent fixes
a l'etat larvaire. Les individus haploides meurent generalement peu apres
reclosion en manifestant le syndrome de l'haploiidie (Fankhauser, 1945;
Gallien, 1953; Beetschen, 1960). Celui-ci est caracterise, a des degres variables,
par de Toedeme, de la microphtalmie, de la microcephalie, une croissance
ralentie. II reste que, faute d'une duree de vie suffisante, l'etude de ce syndrome
reste limitee, de meme que l'analyse de la differenciation sexuelle. La fertilite
des haploides n'a pu etre etudiee.
Si un germe dont le genome est haploiide, se revele incapable de poursuivre
son developpement apres l'eclosion, on peut se demander quel degre de succes
evolutif presenterait un embryon haploiide, uni en parabiose a un partenaire
diploide, ce dernier, par la circulation croisee, assurant la nutrition de l'haploiide.
Cette methode correspond a une mise en culture, sur un individu normal, d'un
organisme entier, incapable de subsister par lui-meme du fait de sa structure
genetique. On peut ainsi analyser les consequences d'une structure genetique
haploide sur les processus de l'ontogenese.
Dans le cadre d'une analyse des relations entre Pheteroploidie et la sexualite,
il est apparu apres une premiere exploration pratiquee chez le triton Pleurodeles
waltlii (Gallien, 1957), que l'elevage des haploides etait erTectivement possible
en parabiose (2 n/n). Les couples depassent facilement la metamorphose
1
Adresse de Vauteur: Laboratoire d'Embryologie, Faculte des Sciences de Paris, 9 quai
Saint-Bernard, Paris 5e, France.
402
L. GALLIEN
(Beetschen, 1960). Dans la serie etudiee ici, il s'agit d'animaux ayant vecu de
deux a trois ans, chez lesquels les aspects du syndrome de l'haploidie, nanisme,
hypomorphoses et dystrophies diverses, ont pu pleinement se manifester.
Par ailleurs le succes de l'elevage a permis d'analyser les caracteres de la
differentiation sexuelle et de la gametogenese. La technique utilisee produisant
des androhaploides, la combinaison la plus simple pour etudier la differentiation
du sexe des haploides est celle d'une paire ($ 2n/^ n) homospecifique, homosexuee, mais de ploidie differente. Les interactions endocrines sexualisantes ne
sont pas en cause, seul demeure l'effet genetique lie a ThaploTdie.
Lorsqu'on realise une association (? 2njS n), celle-ci est non seulement
homospecifique, mais heterosexuee, en meme temps que les deux genomes dont
l'effet est confronte, sont l'un diploide, l'autre haplo'ide. C'est une combinaison
qui n'a pas ete jusqu'alors pratiquee dans les parabioses. Elle permet de faire
intervenir, en meme temps que le facteur genetique lie au degre de ploidie, les
interactions endocrines sexualisantes de la differenciation sexuelle (Gallien &
Beetschen, 1960; Gallien, 1963).
II ne faut pas se dissimuler que la methode introduit certains elements contingents de complexite. Nous aurons a les apprecier: (a) La technique operatoire
et la soudure par voie laterale des embryons peuvent entrainer certaines lesions
territoriales interessant en particulier le blasteme nephretique et la poussee des
canaux pronephretiques, dont on connait l'effet inducteur sur la gonade
(Houillon, 1956). De plus un seul parabionte, le diploide, capte et absorbe la
nourriture offerte. (b) Les hypomorphoses des haploides peuvent affecter, a des
degres divers, des elements du systeme endocrinien, l'hypophyse notamment
dans les cas d'hypomorphoses cephaliques. L'appreciation de cette situation
est difficile, elle est d'ordre individuel et liee a la nature et au degre des
hypomorphoses. (c) Dans les parabioses qui vivent plusieurs annees et chez
lesquelles la croissance des deux partenaires est toujours notablement affectee,
on peut se demander comment interviennent les reactions immunitaires et les
phenomenes de tolerance. Le probleme etudie par Owen (1945), Billingham,
Lampkin, Medawar & Williams (1952) pour le free-martin des Bovides, vient
d'etre aborde, dans les parabioses, chez les Amphibiens par Volpe & Gebhardt
(1966). (d) II resulte d'observations relatives au free-martin de la vache (Ohno
et ah 1962; Makino, Muramoto & Ishikawa, 1965) et des singes Hapalides
(Benirschke, Anderson & Brownhill, 1962; Benirschke & Brownhill, 1962;
Benirschke & Brownhill, 1963) que, dans ces parabioses naturelles des melanges
de populations cellulaires realisent des chimeres. Ces faits n'ont pas ete actuellement considered dans les parabioses d'Amphibiens. Beetschen (1960) a cependant montre que dans une parabiose (2n/n), on pouvait identifier dans le sang
de chacun des parabiontes un melange d'hematies diploides et haploides. Nous
avons verifie le fait. Volpe & Gebhardt (1966) ont montre, chez Rana pipiens,
que les deux partenaires d'une parabiose 2n/3n presentent, apres separation a la
metamorphose, pour les leucocytes, qui ont colonise les tissus hematopoietiques,
un etat de chimere.
Parabiose chez Pleurodeles waltlii
403
MATERIEL ET TECHNIQUES
Pleurodeles waltlii est un triton qui, par son elevage commode, et sa reproduction aisee en captivite, se prete bien aux experiences prevues (Gallien, 1952).
Nous avons utilise le stock entretenu au Laboratoire depuis 1945. La greffe en
parabiose est efFectuee au debut du stade du bourgeon caudal (stade 22 de la
table de Gallien & Durocher, 1957). Du fait des hypomorphoses qui affectent,
a des degres divers, la tete des haploides (Planche 1, figs. A a D), c'est toujours
le partenaire diploide qui capture les proies et assure la subsistance du parabionte haploide.
Les couples parabiontiques sont eleves individuellement a +18°/ +19°, d'abord
dans des coupelles operatoires, puis dans des cuvettes contenant sensiblement
un litre d'eau. La nourriture est constitute initialement de daphnies, ulterieurement de larves de chironomes.
Dans la serie experimental presentee, nous avons utilise la methode des chocs
thermiques pour obtenir des germes haploides. Les oeufs dans les 10 min suivant
la ponte, sont places dans de l'eau a + l ° / + 2°, pendant 10 a 20 h. Dans ces
conditions, en plus d'une majorite d'individus triploides, il apparait des
haploides (Gallien, 1959; Beetschen, 1960) et des chimeres aneuploides. On
pratique systematiquement la mise en parabiose, au stade du bourgeon caudal,
des embryons ainsi obtenus. Un peu apres l'eclosion, au stade 38, la detection
des haploides est faite par l'examen des cellules ectodermiques des pointes de la
nageoire caudale. Diverses methodes (Gallien, 1959) dont les resultats se recoupent, furent utilisees: dimension des noyaux, comptage du nombre de noyaux
pour une unite de surface donnee, mesure des surfaces cellulaires apres impregnation argentique, dans les meilleurs cas, comptage et observation directe des
chromosomes sur les plaques metaphasiques. Une appreciation sure de
l'haploide exige en erTet Texamen non seulement des figures mitotiques observables, mais aussi celui de la nappe des cellules ectodermiques caudales. Nous
avons considere ici les seules paires presentant au cours de l'examen des
extremites caudales, des nappes ectodermiques homogenes, eliminant les cas
ou des ilots de ploidie aberrante, meme reduits, etaient detectes. La technique
de Timpregnation argentique est a cet egard tres utile (Gallien, 1959). On pent
ainsi exclure les germes mosaiques qui peuvent d'ailleurs eux aussi se developper
par leur mise en parabiose.
Les couples parabiontiques ont ete observes regulierement, et periodiquement
photographies. Au moment de l'autopsie des prelevements des divers organes
ont ete pratiques pour l'etude histologique: fixation au Bouin-Hollande,
coloration au glychemalun-eosine, coupes a 5 ii et 7 /*.
/i^
210
200
200
200
200
210
190
160
435
450
450
450
57-1-2
57-1-3
57-1-6
58-DK.-7
59-DK3-17-40
59-14-11
60-16-11
60-37-21
60-37-24
60-37-25
60-38-1
(jours)
JaL VdllC
1 0 t"\/5l 1 T*tf*
reference
57-1-1
xnuicdiii tic
Tfinifotif
Duree de
la vie
—
—
—
—
60
60
60
60
65
60
25
25
25
25
29
42
30
29
25
21
36
36
(0,25)
(0,30)
(0,36)
25
30
40
115
120
50
(0,41)
100
100
110
125
75
(0,60)
145
35
(0,24)
110
60
(0,54)
80
40
(0,50)
3
95
50
(0,52)
110
60
(0,54)
Juvenile
Maturite
Maturite
Maturite
Maturite
Maturite
9
9
3
3
3
9
3
Maturite
3
?
?
Deux cordons steriles
9
9
3
3
3
9
3
9
Vestigiales
Maturite
<J (g.)
3 (d.)
Maturite
Reduit
9
(0,61)
65
105
Diploide
3
Vestigial
3
a (g.)
Cordon sterile:
sexe non
identifiable
3
a (g.)
Juvenile
Juveniles
a (d.)
3
Submaturite:
spermatogenese
abortive
0
a (g.)
3
3
Submaturite:
spermatogenese abortive
9 (d.)
? (g.)
Intersexue
Pas de trace
identifiable
a
Submature Vestigial
?
?
Cordons steriles:
sexe non identifiable
3 (d.)
?
?
Deux cordons steriles:
sexe non identifiable
3
3 (d.)
Juveniles
Juvenile
3
3
Haploide
Submaturite, spermatogenese
abortive
A
Sexe et caracteres des gonades
75
3
3
a
Maturite
Vestigial
(0,60)
* Le chiffre entre parentheses exprime le rapport des longeurs des individus n/2 n.
40
25
15
15
25
15
45
—
65
A
Taille a
Age a
l'autopsie* (mm)
l'autopsie
Haploide
(mois) Diploide Haploide
—
Diploide
A
Taille a la
metamorphose
(mm)
Haploide peu hypomorphe
.—
—
—
—
L'haploide est tres hypomorphe. Feminisation des
CM. de l'haploide
Feminisation des CM.
chez l'haploide
L'haploide provient d'une
neo-femelle, done surement 3 gendtique
L'haploide provient d'une
neo-femelle
L'haploide est tres
fortement hypomorphe
__
—
—
—
—
Observations
Tableau 1. Caracteres du developpement et de la differenciation sexuelle des parabioses haplo'idej diploide
r
O
Parabiose chez Pleurodeles waltlii
405
CARACTERES DU DEVELOPPEMENT DES PARABIOSES
HAPLOIDE-DIPLOIDE. SYNDROME DE L'HAPLOIDIE
Nous avons retenu de l'ensemble des experiences une serie de douze paires
haplo-diploides. Le Tableau 1 traduit l'ensemble des observations. L'examen de
celui-ci met en evidence les caracteres generaux du developpement des parabioses.
Prolongement de la duree de la vie larvaire
Dans les conditions normales d'elevage a +187 + 19°, la duree de la vie
larvaire chez le Pleurodele est de l'ordre de 90 a 100 jours pour des temoins non
mis en parabiose que nous qualifierons de simples. Cette duree passe de 160 a
200 jours et peut atteindre 450 jours pour les parabioses haploiide-diploide.
Cette extension de la duree de la vie larvaire n'est pas specialement liee a la
combinaison du degre de ploidie. En fait, dans des combinaisons (3n/2n) et
(2n/2n), on observe un prolongement de meme ordre de la vie larvaire. Dans les
deux premiers mois de celle-ci, la croissance est active. Elle apparait ensuite
comme tres ralentie et dans les derniers mois, les paires semblent presque
stabilisees. La phase de metamorphose s'etire dans le temps. II reste que le
partenaire diploide, au moment de la metamorphose, a tres sensiblement la
taille de temoins simples.
Developpement de Ve'tat adulte
Chez le Pleurodele, la spermatogenese, chez des individus temoins simples
males, debute vers 8 mois, les callosites commencent a apparaitre a 9 mois, la
maturite sexuelle est atteinte vers 10 a 12 mois et en fait des males de un an
peuvent deja s'accoupler et feconder des femelles. Chez la femelle, la maturite
sexuelle est un peu plus tardive, elle se manifeste vers le 14eme mois. On peut
escompter normalement la ponte a 16 mois. La longueur du corps moyenne,
pour les deux sexes, est sensiblement de: 65 mm a 3 mois (metamorphose);
120 mm a 9 mois; 160 mm a 12 mois; 180/200 mm a 24 mois.
Les parabioses haploide-diploide peuvent vivre plusieurs annees, de 25 mois
a 42 mois. En fait, dans nos experiences, les paires obtenues ont atteint 1'a.ge de
2 a 3 ans. Elles ont alors ete deliberement sacrifices; rien n'indiquait chez elles,
une duree limite particuliere de la vie. Ainsi une parabiose haploide-diploide
est parfaitement viable et sa duree n'est pas apparemment plus limitee que celle
d'individus intacts. Mentionnons incidemment que certaines parabioses (2n/2n),
continuent de vivre apres 6 ans (Planche 1, fig. E).
Dans une parabiose (2n/n), l'etat adulte des partenaires est atteint. Ceci est
evident pour l'individu diploide. Chez le male diploiide, les testicules elaborent
du sperme, le cloaque s'hypertrophie, les callosites sont presentes (Planche 1,
figs. F, G, H). Chez la femelle diploide, les ovaires, lorsqu'ils ne sont pas affectes
par le partenaire male (Planche 1, fig. I), ont la taille et l'aspect correspondant
a la maturite. Les oviductes, dans les conditions qui seront precisees plus loin,
406
L. GALLIEN
montrent le developpement, Petat secretaire et les circonvolutions propres aux
temoins adultes (Planche 1, fig. I).
L'etat adulte est apparemment plus malaise a definir pour les haploides. II
faut retenir en effet que la spermatogenese est toujours abortive et que les
testicules montrent souvent un etat mediocre de developpement. Mais ce sont
la, nous le verrons, des effets secondaires. En effet, dans les meilleurs cas, la
spermatogenese s'installe; les caracteres sexuels somatiques, cloaque, callosites,
canaux de Wolff ou canaux de Miiller, reagissent aux hormones circulant dans
le sang (Planche 1, figs. F a I). Par ailleurs, pour les autres organes ou tissus,
a ceci pres qu'ils sont haploides, on n'observe pas de difference de nature par
rapport au partenaire diploide. II est certain que dans l'ordre du vieillissement
general, les haploides realisent l'etat physiologique des adultes. En bref une
constitution haploide n'est pas incompatible avec un developpement qui,
qualitativement, atteint le stade de l'adulte, des lors que l'organisme haploide
est irrigue par du sang d'un diploide.
PLANCHE 1
Vues in toto et dissections de parabioses (2n/n)
Figs. A a D. Parabioses haploide-diploide, agees de 2 a 3 ans, atteignant l'etat adulte.
Syndrome de Phaploidie. Les individus haploides sont a la gauche du partenaire diploide.
[Fig. A (60/16-11), fig. B (60/37-21), fig. C (60/38-1), fig. D (60/37-25).] Noter la microcephalie prononcee des haploides (figs. A, B), la dystrophie de la bouche (fig. A), les torsions
du corps (figs. A, B, D), la brachyurie (figs, A, B), la brachymelie (figs. A, B), l'ascite (fig. B).
L'individu (fig. C) est morphologiquement, et sauf la taille, peu affecte.
Fig. E. Parabiose ($ 2n/<S 2n) temoin agee de 6 ans. II s'agit de deux diploiides adultes (cloaque,
callosites) montrant que les deux partenaires de meme taille, ont une croissance comparable;
ils sont morphologiquement harmonieux. Dans cette combinaison heterosexuee, le male
(gauche) inhibe totalement le developpement des gonades, reduites a un cordon sterile, de la
femelle (droite).
Fig. F. Parabiose (60/38-1). Combinaison (<J 2n/cJ n). Les testicules de l'haploide sont reduits
a un cordon et un nodule posterieur vestigial. Noter la reaction cloacale de l'haploide. Voir
Planche 1,fig.C, et Planche 4,fig.E).
Fig. G. Parabiose (59/DK3-17-40). Combinaison (<J 2n/cJ n). Noter les callosites et Phypertrophie cloacale des partenaires. Chez l'haploide, un testicule juvenile a droite, le testicule
gauche est tres vestigial. Voir Planche 2,fig.B.
Fig. H. Parabiose (60/37-25). Combinaison (J 2n/cJ n). Le testicule gauche de l'haploide de
type submature est sensiblement aussi developpe que ceux du diploide. Le testicule droit est
vestigial. Voir Planche 1,fig.D; Planche 2,fig.A; Planche 3,fig.C a G.
Fig. I. Parabiose (60/16-11). Combinaison ($ 2n/c? n). Developpement sensiblement equilibre.
Femelle diploi'de avec ovaires et oviductes murs; le male haploide possede deux testicules de
type submature. L'effet feminisant a provoque le developpement des ebauches mulleriennes
du male haploide. Voir Planche 1,fig.A; Planche 2,fig.C.
Fig. J. Parabiose (60/37-21). Combinaison ($ 2n/<? n). Effets reciproques. La femelle diploide
possede des ovaires de type juvenile, la gonade droite du male est intersexuee (fleche). Voir
Planche 1,fig.B; Planche 2,figs.H a L; Planche 4, figs. D, F, G.
/. Embryol. exp. Morph., Vol. 18, Part 3
PLANCHE 1
,r
facing p. 406
/. Embryo!, exp. Morph., Vol. 18, Part 3
M
L. GALLIEN
PLANCHE 2
Parabiose chez Pleurodeles waltlii
407
L'haploide n'exerce pas d'effet qualitatif sur le developpement general du
diploide, le cas des gonades devant cependant etre reserve.
Les observations precedentes valent sur le plan qualitatif. II reste que la
croissance des paires est fortement affectee par l'etat meme de parabiose. Ceci
est tres remarquable pour les partenaires diploides. Alors qu'apres 2 ans, la
taille de 180 mm est atteinte chez des temoins normaux simples, dans les paires
(2n/2n), la taille a 2 ans et au-dela ne depasse guere 120/130 mm. Elle demeure
a peu pres bloquee par la suite. Dans la paire temoin (Planche 1, fig. E), agee
de 6 ans, la taille etait de 120 mm. La taille varie de 95 a 125 mm pour des
diploides en parabiose avec des haploides depuis 2 a 3 ans, elle atteint cependant 145 mm pour le diploide de la paire elevee jusqu'a 42 mois. Les diploides
des paires sont toujours beaucoup plus greles que les temoins simples.
Ainsi le taux de la croissance generate est affecte. Cette situation resulte du
PLANCHE 2
Coupes dans les gonades des parabiontes
Le grossissement desfigs.A a G est indique sur lafig.A; celui desfigs.H a P sur lafigureH;
Ax, jeune auxocyte; Ca, corps adipeux; CM., canal de Miiller; C.W., canal de Wolff; Mn.,
mesonephros; O.a., ovocytes atretiques; T., testicule; T.g., tissu glandulaire.
Fig. A. Parabiose (60/37-25). Combinaison (<? 2n/c? n). Coupe longitudinale dans le testicule
haploide gauche de type submature. C'est l'etat le plus avance du developpement d'un
testicule haploide.
Fig. B. Parabiose (57/DK3-17-40). Combinaison ((? 2n/(J n). Coupe longitudinale du testicule
droit haploide. Type submature mais dont le developpement est peu avance.
Fig. C. Parabiose (60/16-11). Combinaison ($2n/c?n). Coupe longitudinale d'un testicule
haploide. Etat voisin du precedent.
Fig. D. Parabiose (57/1-3). Combinaison (<? 2n/<? n). Coupe transversale du testicule haploide. Type juvenile. Voir Planche 4,fig.1.
Fig. E. Parabiose (60/38-1). Combinaison ($ 2n/<? n). Coupe transversale. Testicules haploides de type vestigial (fleches). La coupe passe dans les nodules posterieurs des gonades
tres involutes. Voir Planche 4,fig.E.
Fig. F. Parabiose (57/1-6). Combinaison ($ 2n/c? n). Coupe transversale. Testicule haploide
de type vestigial. La coupe interesse un des canaux de Miiller, developpes sous l'influence des
ovaires du partenaire diploide.
Fig. G. Parabiose (60/37-24). Combinaison ($ 2n/<? n; v. texte). Coupe longitudinale. Testicule haploide gauche de type juvenile. Voir Planche 4,fig.B.
Fig. H a l Parabiose (60/73-21). Combinaison (? 2nj3 n). Coupes transversales anteroposterieures, a cinq niveaux, de la gonade haploide droite intersexuee representee Planche 4,
fig. D. Par suite de Porientation de la gonade, la coupe de lafig.H est oblique par rapport
a l'axe antero-posterieur. (Voir texte.)
Fig. M a P . Parabiose (57/1-1). Combinaison (? 2n/<? n). Coupes transversales a divers niveaux
antero-posterieurs des gonades du partenaire diploide femelle. Effets involutifs exerces par
les testicules haploides de type submature du partenaire male haploiide. Voir Planche 4,
fig. A. Explications dans le texte.
408
L. GALLIEN
fait de la parabiose elle-meme et non de la presence d'un parabionte haploide.
En effet dans les combinaisons (2n/2n), on observe un etat comparable des
partenaires a celui du diploiide d'une paire (2n/n).
SYNDROME D'HAPLOIDIE DES HAPLOIDES ADULTES
Les caracteres signales anterieurement pour les larves par les auteurs (Fankhauser, 1945) se developpent pleinement (Planche 1).
Les haploides sont toujours de taille reduite. Pour ceux qui ont entre 2 et 3
ans et sont le moins affectes par des hypomorphoses, on note par exemple que
les haploides (59/DK3-17-40; 60/37-25; 60/38-1) mesurent respectivement 75,
50, 75 mm, soit un rapport des tailles haploide/diploide de 0,60, 0,41, 0,60.
Lorsque les hypomorphoses sont severes, la taille, dont la mesure rigoureuse est
d'ailleurs difficile, est de l'ordre de 35 a 40 mm. En bref, la taille des haploides
va du tiers a la moitie de celle des parabiontes diploides. Le deficit de la croissance s'observe des la vie larvaire et la metamorphose.
Les hypomorphoses et dystrophies (Planche 1) se traduisent par des flexures
du corps (60/16-11; 60/37-21; 60/37-25), de la brachymelie (59/14-11), de la
brachyurie (60/37-21; 60/37-24), de la microcephalie, faible (60/38-1; DK3-1740), moyenne, avec tendance synophtalme et raccourcissement de la machoire
inferieure (60/61-11), forte, associee a de la microphtalmie (60/37-24; 60/37-21).
De l'ascite persiste parfois au stade adulte (60/37-21). II est certain que ce tableau
PLANCHE 3
Coupes dans les testicules haploides de type submature
montrant l'avortement de la spermatogenese
Fig. A. Testicule temoin d'un Pleurodele diploiide age de 11 mois, en spermatogenese. Cystes
a spermatogonies.
Fig. B. Meme individu. Spermatocytes I; divers etats de la prophase de la premiere cinese de
maturation: appariement des chromosomes; diplotenie; debut de la metaphase de la
premiere cinese. Comparer les tailles cellulaires avec celles des figures suivantes relatives a
un testicule haploide de type submature.
Fig. C a G. Testicule haploide (60/37-25). Voir Planche 2, fig. A.
Fig. C. Cystes a spermatogonies.
Fig. D. Spermatocytes I et debut de la prophase de la premiere cinese.
Fig. E. Avortement de la premiere cinese. Cyste avec ilots de spermatocytes en cours
d'involution et nombreuses pycnoses.
Fig. F. Pycnose avancee dans un cyste. A gauche quelques metaphases et anaphases aberrantes
de la premiere cinese.
Fig. G. Cystes vides des elements gametogenes pycnotiques. Developpement de quelques
cellules glandulaires dans le cyste.
Fig. H. Testicule haploide (60/16-11). Voir Planche 2, fig. C. Jeunes spermatocytes I et debut
de pycnose.
J. Embryol. exp. Morph., Vol. 18, Part 3
L. GALLIEN
PLANCHE 3
facing p. 408
/. Embryol. exp. Morph., Vol. 18, Part 3
PLANCHE 4
Parabiose chez Pleurodeles waltlii
409
doit etre mis pour Fessentiel au compte de l'haploidie car pratiquement tous les
haploides presentent des hypomorphoses. S'il peut arriver que dans des parabioses temoins (2n/2n), l'un des partenaires, affecte par le traumatisme operatoire, presente quelques desordres du developpement, ces cas sont l'exception
et leur degre est rarement intense.
Les dystrophies des haploides constituent une gamme variee d'intensite. Ce
point doit etre retenu, car il rend compte de la diversite des reactions du
developpement des gonades dans les paires parabiontiques. Alors que les
partenaires diploides sont relativement homogenes, la taille et la capacite de
developpement des haploides apparait comme beaucoup plus irregulier.
L'examen des tissus des haploides permet de constater la taille reduite des
cellules dans les organes consideres. Le fait a ete verifie, en particulier, pour les
cellules germinales, le mesonephros, les canaux de Wolff et de Miiller, la peau,
Tepithelium digestif, la thyroide, le cartilage, les hematies.
PLANCHE 4
Caracteres des gonades des paires parabiontiques
Le grossissement desfigs.A a D est indique sur lafig.D; celui desfigs.E a I sur lafig.H;
C.a., corps adipeux; Ov., ovaire.
Fig. A. Parabiose (57/1-1). Photographie des gonades tres involutes du partenaire diploide
femelle. A droite on observe un jeune auxocyte, vu en coupe dans lafig.M de la Planche 2.
A gauche deux ovocytes ayant d'abord atteint leur maturite et qui sont en atresie (Planche 2,
fig. N).
Fig. B. Parabiose (60/37-24). Photographie des testicules du partenaire haploide. Morphologie aberrante. Type vestigial. Le testicule gauche est vu en coupe longitudinale (Planche 2,
fig. G).
Fig. C. Parabiose (60/37-24). Photographie, vue laterale, de la gonade droite reduite a un
cordon sterile (fleches) du partenaire diploide. Explications dans le texte.
Fig. D. Parabiose (60/37-21). Photographie de la region interessant la gonade intersexue"e
haploide et l'ovaire diploide (fleches), dont les coupes sont representees Planche 2,figs.H a
L.
Fig. E. Parabiose (60/38-1). Coupe transversale dans le nodule testiculaire posterieur du
testicule haploide de type vestigial.
Fig. F. Parabiose (60/37-21). Portion grossie de la region corticale du partenaire haploide
intersexue, au niveau de la Planche 2,fig.I. Differenciation ovarienne: portion d'un auxocyte,
jeunes ovocytes en premeiose, gonies residuelles et mitoses multiplicatives d'ovogonies (en
haut a droite).
Fig. G. Parabiose (60/37-21). Un des auxocytes de lafig.H, Planche 2, montrant les chromosomes plumeux (lampbrush).
Fig. H. Parabiose (57/1-6). Coupe transversale dans le testicule. haploide de type vestigial
de lafig.F, Planche 2, a un niveau ou on trouve encore un certain nombre de gonies. Envahissement par le stroma conjonctif.
Fig. T. Parabiose (57/1-3). Portion du testicule haploide de type juvenile, presente Planche 2,
fig. D.
410
L. GALLIEN
DIFFERENCIATION SEXUELLE ET GONADES MALES DES HAPLOIDES
Differentiation et developpement des testicules des temoins diploides
Chez P. waltlii, les individus diploides temoins eleves dans les conditions
standard, c'est-a-dire bien nourris, reunis dans des bacs par petits lots de
l'ordre de quatre a cinq et a raison d'un litre d'eau par animal, ont une differentiation sexuelle dont la chronologie generate est la suivante:
La differentiation sexuelle des gonades dans le sens male ou femelle, debute a
la fin de la vie larvaire, dans le courant du troisieme mois de vie, la metamorphose se situant autour des jours 90/100. L'identification du sexe peut etre faite
sans ambiguite, a la fin du mois qui suit la metamorphose, par l'examen morphologique direct, que confirme Fobservation histologique. Pour le testicule qui
va nous retenir plus particulierement, on observe que la bandelette initiale
representant la gonade indifferenciee s'amenuise considerablement sur la plus
grande partie de sa longueur, dans le sens antero-posterieur, cependant qu'une
masse renflee se differencie dans la partie arriere.
Assez rapidement la partie anterieure eflilee regresse et vers le cinquieme mois
l'aspect definitif du testicule est atteint: forme globuleuse, parfois plus ou moins
acuminee a son extremite. A ce stade que Ton peut qualifier de juvenile, on
observe en coupe des cystes au debut de leur evolution. Le centre du cyste est
occupe par une a deux gonies a noyau clair lobule.
Ce sont ces gonies qui vont se multiplier pour constituer des paquets de six
a huit elements. Les cystes croissent en volume, et la multiplication goniale
continuant, on passe a des cystes creuses d'une lumiere dont la paroi est constituee par une a plusieurs epaisseurs de spermatogonies a noyau arrondi, a chromatine granuleuse, entourees de leurs cellules nourricieres (Planche 3, fig. A). A
cote des cystes conservant l'aspect decrit ci-dessus et qui s'observent plus specialement a la peripherie de l'organe, on voit alors, dans une serie de cystes, une
forte proliferation spermatogoniale se manifester. Au terme de la multiplication,
la lumiere a disparu, le cyste est plein de spermatogonies. Ces cystes sont
toujours nombreux et le demeureront. Cet etat est atteint entre 7 et 8 mois, ce
qui correspond au debut de la gametogenese. Dans les meilleurs cas, l'apparition
des callosites s'observe au 9eme mois. A l'age de 10 a 12 mois, les coupes revelent
une glande en pleine spermatogenese et spermiogenese (Planche 3, fig. B), en
meme temps que se developpe le tissu glandulaire, a partir des cystes vides de
leurs spermatozoides. Au total, on peut dire que le testicule differencie s'observe
sous sa forme juvenile a l'age de 4 mois et que la puberte traduisant la maturite
sexuelle se situe a partir de 8 a 9 mois. Apres l'age de 2 ans, la dimension des
testicules atteint 15x5 mm, il existe des variations individuelles.
Le rappel de ces donnees permet de comprendre ce qui se passe chez les
haploides mis en parabiose avec des diploides et d'analyser la structure des
testicules chez ces animaux sacrifies comme l'indique le Tableau 1 entre 21 et 42
mois, et pour la plupart entre 2 et 3 ans. Meme en considerant le retard general
Parabiose chez Pleurodeles waltlii
411
du developpement larvaire et ulterieurement de la croissance que presentent les
paires de parabiontes, il reste qu'a l'&ge considere, l'etat physiologique de
Fadulte est largement atteint. La reaction des callosites et des oviductes confirme
cette situation.
Chez la femelle du Pleurodele revolution sexuelle est plus lente que chez le
male. La ponte est obtenue difficilement avant le 14eme mois, jamais avant 1 an.
L'etat juvenile de l'ovaire se caracteiise par l'absence de pigmentation et la
taille des ovocytes.
A propos des haploides, nous n'avons parle que de males. En effet dans la
serie etudiee ici et obtenue par choc thermique, le sexe des individus haploides
lorsqu'il a pu — la generalite des cas — etre etabli sans ambiguite, etait male.
II s'agit done d'androhaploides. Dans quelques cas (58/3DK2-7 et 59/14-11),
precises ulterieurement, l'etat d'involution de la gonade des haploides est tel
qu'il n'existe aucun critere objectif permettant de definir le sexe de la gonade.
Des considerations indirectes permettent cependant de considerer qu'il s'agit de
males genetiques.
Caracteres des testicules haploides
C'est en considerant les paires homosexuees que Ton peut au mieux etablir
les caracteres des testicules haploides, puisque dans ce cas, les effets reciproques
lies aux hormones des gonades heterologues n'interviennent pas.
L'experience montre que dans ce cas, la gamme des structures est variee. II
apparait que l'etat haploide n'empeche pas le tractus genital et les gonades
males de se differencier et meme de parvenir a un etat avance dans leur evolution.
Les testicules peuvent atteindre un volume, qui, relativement a la taille
generate toujours reduite d'un haploide, approche celle du, partenaire diploide
(Planche 1, fig. H), au moment oil s'installe la spermatogenese. Cependant
celle-ci avorte. II n'y a ni spermatozoides, ni spermiogenese. Au mieux, la
spermatogenese se developpe jusqu' a la phase qui correspond a la premiere
cinese de maturation, e'est-a-dire a 1'evolution de l'equivalent des spermatocytes
de premier ordie. Une telle situation a ete rencontree meme dans la combinaison
(57/1-1) heterosexuee (? 2n/^n). Pour la commodite et bien qu'il soit difficile
de trouver un terme reellement adequat, nous parlerons de testicules de type
submature.
Le plus souvent, si la differenciation testiculaire est clairement identifiable,
le developpement general est mediocre. Les gonades sont petites, leur structure
rappelle l'etat juvenile que presentent des temoins peu apres la differenciation
testiculaire. Conventionnellement nous designerons par type juvenile cet etat des
testicules haploides.
Par type vestigial, nous designerons des gonades de structure male, mais tres
peu differenciees, ou en cours d'involution poussee. Ceci se traduit en particulier
par la disparition plus ou moins marquee des gonies. A la limite, il n'existe plus
de critere histologique permettant d'identifier le sexe de la gonade. Celle-ci est
representee par un cordon fibreux tres mince, sterile.
26
JEEM l8
412
L. GALLIEN
Etude de cas concrets
Les divers types definis seront illustres par l'etude de cas concrets empruntes
a des paires homo- et heterosexuees en considerant seulement les caracteres des
gonades haploiides.
Type submature
Celui-ci correspond au degre le plus avance du developpement des testicules
haploiides; il est represente par deux animaux (57/1-1, 60/37-25).
Parabiose {60j37-25). L'autopsie (Planche 1, figs. D, H) a ete pratiquee a Page
de 25 mois (Tableau 1). Le partenaire diploiide est un male dont les testicules
sont relativement petits, le gauche notamment. Us presentent une spermatogenese normale allant des spermatogonies aux spermatozoides. Notons que
certains partenaires diploides des paires {<$ 2njS n) ont des testicules dont la
taille est voisine de celle de temoins simples (Planche 1, figs. F, G).
Le partenaire haploide possede un testicule gauche mesurant 4 x 2 mm, sensi-
blement aussi developpe en volume que ceux du partenaire diploide. Le testicule
droit est represente par une toute petite gonade. Nous considerons ici le seul
testicule gauche (Planche 2, fig. A; Planche 3, figs. C a G).
La gonade est ovoide, legerement aplatie au bord hilaire ou est localise le
tissu glandulaire. En coupe longitudinale, on observe au bord externe une zone
peripherique epaisse constituee par des cystes pleins de spermatogonies. Dans
ces cystes apparaissent ca et la des paquets de spermatogonies en cours de
mutliplication (Planche 3, fig. C). Continuant cette premiere zone, on trouve, en
situation centrale, une autre serie de cystes dans lesquels le volume nucleaire des
cellules spermatogohiales s'est accru. Dans le noyau, les chromosomes tres fins,
disperses se laissent reconnaitre. Cet aspect correspond au debut de la phase
evolutive des spermatocytes I (Planche 3, fig. D). Une troisieme region qui longe
toute la region hilaire de l'organe comporte des cystes dans lesquels s'observent
les images de l'avortement de la spermatogenese (Planche 3, fig. E). Un premier
groupe d'images correspond au stade relayant le precedent. Les chromosomes
epaissis forment des anses entremelees. Un second groupe d'elements comporte
des metaphases et anaphases de la premiere cinese meiotique. Les chromosomes
sont epais, tres raccourcis, la distribution anaphasique parait anarchique
(Planche 3, fig. F). II n'y a pas d'appariements. On n'observe pas de figures de
diacinese. Dans ces deux groupes de cystes, on trouve des masses de cellules en
pycnose plus ou moins avancee, les unes plus grosses qui peuvent provenir
directement des spermatocytes I, les autres plus petites resultant vraisemblablement de l'involution des noyaux apres l'anaphase (Planche 3, figs. E, F). II
n'existe pas de spermatocytes de second ordre et par voie de consequence ni
spermatides, ni spermatozoides. Au total, la spermatogenese s'amorce a partir
des spermatogonies, mais avorte au cours de revolution des spermatocytes 1.
Dans la region interne de la gonade, celle du hile, on assiste a la fin d'evolution
Parabiose chez Pleurodeles waltlii
413
du processus et a la constitution du tissu glandulaire. Les debris cellulaires des
cystes a cellules pycnotiques, sont resorbes (Planche 3, fig. G); le cyste apparait
a peu pres vide. Au long du bord hilaire, les cystes vides se compliment et pour
certains leurs parois s'ecrasent plus ou moins. Dans la region hilaire centrale,
on observe un certain nombre de cystes dont les parois ont developpe le tissu
glandulaire a grandes cellules claires decrit par Aron (1924). Mais celui-ci est
mediocrement developpe.
Parabiose {57j 1-1). L'autopsie est pratiquee a l'age de 3 ans (Tableau 1).
Le partenaire haploide possedait deux testicules morphologiquement bien
developpes, ovoi'des, mesurant 4,2 x 2,2 mm. Les images de la spermatogenese
et de son avortement sont les memes que dans le cas precedent. La encore la
spermatogenese avorte et il n'existe, ni spermatides, ni spermatozoides. Finalement les debris cellulaires sont resorbes et il reste des cystes a peu pres vides,
contenant quelques cellules nourricieres. Notons que cet haploiide se trouvait
associe a une femelle diploide dont il a inhibe la differentiation ovarienne comme
nous le verrons.
Parabiose {57jDK3-17-40). Cette parabiose est interessante parce que le
parabionte diploide, long de 125 mm, est un male pourvu de deux gros testicules,
a 30 mois lors de l'autopsie, cependant que l'haploide etait un des mieux
developpes de la serie des haploides (Planche 1, fig. G). II etait cependant
microcephale. Issu d'une neo-femelle eprouvee, pondant des ceufs genetiquement males, il possedait un petit testicule droit qui sera decrit ici et un testicule
gauche de type vestigial. La presence de deux gros testicules chez le diploide
indique vraisemblablement que celui-ci a du utiliser au cours du developpement
l'essentiel des gonadotrophines presentes dans le metabolisme du couple. Le
fait que chez le meme individu haploide coexistent un testicule vestigial et un
testicule evolue souligne qu'il s'agit d'une competition d'ordre quantitatif, de
meme nature que l'hypertrophie compensatrice qui affecte, chez un animal
castre unilateralement, le testicule demeure en place. C'est du moins une interpretation raisonnable, soulignant l'un des effets secondaires de la parabiose dans
le developpement quantitatif des testicules haploides. Des callosites sont
presentes et les. cloaques des deux elements du couple parabiontique presentent
la reaction hypertrophique des males.
Le testicule droit est du type submature. II est cependant moins avance dans
son developpement que dans les deux cas precedents (Planche 2, fig. B). D'aspect
piriforme, acumine posterieurement, il mesure 2 x 0,75 mm dans ses plus grandes
dimensions. La partie anterieure est constitute par des cystes pleins de spermatogonies, au sein desquels on observe ca et la des nids de mitoses spermatogoniales.
Dans la region moyenne, les spermatogonies entrent en croissance comme pour
aboutir a l'equivalent de spermatocytes I et les chromosomes s'individualisent
dans certains ilots. Mais le processus s'arrete a ce stade et la pycnose s'installe.
Les cystes situes dans toute la queue de l'organe sont vides. Ainsi se realise
l'equivalent du tissu glandulaire, cependant les elements endocriniens sont
26-2
414
L. GALLIEN
extremement reduits dans ces cystes. Ceux-ci se tassent de plus en plus dans la
partie la plus posterieure. Au total si un testicule s'est constitue, il n'existe ni
spermatozoiides, ni spermiogenese et le degre devolution, est moins avance que
celui des cas decrits ci-dessus.
Parabiose (60/16-11). L'autopsie est faite a l'age de 29 mois. L'haploide tres
hypomorphe (Planche 1, figs. A, I) presente une organisation voisine (Planche 2,
fig. C; Planche 3, fig. H) de celle de l'animal precedent.
Cette premiere serie d'haploides correspond, avec les degres signales, au
developpement le plus pousse des testicules haploides que nous reunissons dans
le type submature.
Type juvenile
Parabiose (60)37-24) (Planche 4, figs. B, C). L'autopsie est pratiquee a l'age de
25 mois. II s'agit d'un couple ($ 2n x $ n), dans lequel en depit de son mediocre
developpement l'haploide a inhibe cependant totalement la differenciation des
gonades du partenaire diploide. L'haploide possede deux testicules petits dont la
morphologie est aberrante. A droite, on observe un petit nodule testiculaire
spherique de 0,3 mm de diametre. A gauche, le testicule est constitue par une
masse aplatie et lobulee mesurant 2 x 1 mm. La structure des deux gonades
correspond a l'etat juvenile (Planche 2, fig. G). II existe une serie de cystes
contenant des gonies a gros noyau clair et lobule et quelques spermatogonies.
Mais 1'evolution n'a pas depasse ce stade.
Parabiose (5711-3). II s'agit d'une combinaison (<$ 2n x <? n) sacrifice a l'age
de 21 mois. L'individu diploide possedait un testicule normalement developpe
a droite. La gonade de gauche est petite. L'haploide possede un petit testicule a
droite. A gauche, la gonade est reduite a un mince cordon.
Le testicule haploide droit est une masse pleine de 800 x 450 JLO (Planche 2,
fig. D). On y observe des cystes nombreux dont chacun contient 1 a 2 gonies a
noyau clair, lobule. Cette structure est celle que Ton observe dans un testicule
juvenile peu apres la differenciation (Planche 4, fig. I).
Parabiose (57-1-2). II s'agit d'une combinaison (<$ 2n x <$ n). Les deux testicules de l'haploide ont une structure comparable a celle de l'animal precedent.
Type vestigial
Parabiose (57-1-6). L'autopsie a ete pratiquee a Fage de 25 mois. Le couple est
une combinaison $ 2n x $ n. La femelle diploide possedait deux ovaires de type
adulte, bien developpes a gros ovocytes pigmentes, ce qui traduit un developpement ovarien qualitativement normal. En consequence, l'haploide presente deux
canaux de Miiller circonvolutes et hypertrophies. C'est un effet de feminisation
des ebauches miilleriennes du male haploide. Ce dernier est petit et tres hypomorphe. Les testicules mesurent 250x150/^ (Planche 2, fig. F; Planche 4,
fig. H). II s'agit done de toutes petites gonades tres involutes dans leur plus
grande partie. Dans la region moyenne presentant a ce niveau le maximum de
Parabiose chez Pleurodeles waltlii
415
developpement (Planche 4, fig. H), on observe dans un stroma conjonctif dense
quelques ilots de gonies a noyau clair lobule, plus ou moins dispersees, vestiges
des cystes tres involues. Dans les coupes anterieures et posterieures, l'etat
involutif est accentue, les gonies sont rares et le stroma conjonctif represente la
plus grande part de la gonade.
Parabiose (60-38-1). Dans cette association dont l'autopsie fut faite a l'age de
25 mois, il s'agit d'une combinaison (<J 2n x n <$). Le diploiide mesure 115 mm
et possede deux gros testicules (Planche 1, figs. C, F). L'haploide, de taille
reduite, represente cependant, avec sa taille de 75 mm, le plus developpe et le
plus harmonieux de la serie des haploides. On note cependant une legere microcephalie. Les gonades sont extremement reduites et vestigiales. Elles sont
representees par deux tres minces cordons allonges de part et d'autre du
mesentere dorsal. Chaque cordon se renfle en un petit nodule dans la partie
posterieure. La morphologie externe rappelle, par son aspect, celle qui s'observe
chez un temoin simple vers 4 mois lorsque la diflferenciation testiculaire vient
de se produire. Tout se passe comme si, apres la differentiation des deux
membres de la parabiose, le diploiide avait bloque 1'evolution du jeune testicule
haploide. Celui-ci est d'ailleurs sterile. Le petit nodule posterieur est constitue
par un stroma conjonctif limitant quelques cystes a peu pres vides de gonies.
On trouve seulement de rares gonies residuelles (Planche 4, fig. E).
Parabiose (58-DK2-7) et (60-14-11). Dans ces deux cas, les gonades de
l'haploide sont objectivement impossibles a caracteriser. II s'agit de minces
cordons constitues par un stroma completement sterile. C'est le degre le plus
pousse de revolution. On peut inferer qu'il s'agit a coup sur, pour 58-DKa-7
d'un male. En efifet, cet animal provient d'une neofemelle qui pondait uniquement des oeufs genetiquement males. Le partenaire diploiide est un male. C'est
en somme l'etat qui annonce celui presente par l'animal (60-38-1), mais dans
lequel l'etat vestigial est pousse a son degre extreme. Quant a l'haploide (60-1411), etant donne que tous les autres animaux etudies ici, obtenus par choc
thermique sont des androhaploides, il est hautement probable que l'haploide en
cause represente un male a gonade totalement involuee. II reste cependant que
dans les cordons steriles representant les gonades, on ne detecte aucun indice
permettant objectivement d'identifier le sexe des gonades.
Conclusions
L'etude des testicules haploides d'animaux eleves en parabiose au-dela de
2 ans, montre que dans les meilleurs cas la gonade peut se differencier normalement et poursuivre son organogenese et son developpement jusqu'a l'etat de
l'adulte; la taille des testicules est alors comparable a celle des partenaires
diploides. Mais la spermatogenese avorte au cours de la premiere cinese de
maturation. II n'existe ni spermatocytes II, ni spermiogenese, ni spermatozoides. Le nombre de cas de ce type est reduit. Le plus souvent le developpe-
416
L. GALLIEN
ment testiculaire, apres la differenciation en testicule, demeure mediocre et les
gonades restent a l'etat juvenile ou vestigial. Ce sont evidemment les combinaisons (S 2n x $ n) qui sont le plus favorables a l'analyse. II semble bien
cependant que dans la parabiose le partenaire diploide male peut prendre dans
la competition physiologique quantitative d'ordre trophique ou endocrinien, une
prevalence considerable qui bloque a des degres divers le developpement
testiculaire du parabionte haploide.
EFFETS RECIPROQUES DANS LA GONADOGENESE DES
ASSOCIATIONS HAPLOIDE-DIPLOIDE
Dans les parabioses haploide-diploide, nous avons a considerer les effets
endocriniens lies aux hormones sexuelles des gonades des partenaires et on
peut penser que celles-ci interviennent lorsqu'il s'agit de combinaisons homospecifiques, heterosexuees. Dans cette competition, un autre facteur, le degre de
ploidie, qui est d'ordre genetique, peut-il interferer avec les effets endocriniens
mis en oeuvre dans les paires heterosexuees ?
C'est Burns (1925) qui aborda le premier, chez les Amphibiens {Ambystoma
punctatum), par la parabiose, l'etude de l'effet free-martin experimental, analysant les interactions des composants male et femelle dans une parabiose heterosexuee. Ces experiences furent developpees par la suite (rev. in Witschi, 1932,
1939). Lorsqu'il s'agit de paires homospecifiques, heterosexuees, on observe
d'une maniere generate que le male exerce un effet prevalent. II inhibe d'abord
la differenciation ovarienne, puis la dominance male entraine une tendance a
la differenciation testiculaire des femelles genetiques. Celles-ci developpent des
ovotestis d'amplitude variable. Un aspect particulierement interessant de ces
combinaisons estpresentepar des combinaisons, heterospecifiques, heterosexuees
et homoploides (diploides). De telles parabioses ont ete realisees par
Burns (1935) associant Ambystoma tigrinum espece de grande taille a croissance
rapide et A. punctatum {A. maculatum Shaw) espece plus petite. Dans de telles
paires au moment de la differenciation sexuelle, le petit partenaire {punctatum)
vit passivement, soude au parabionte tigrinum, tel un parasite, prenant rarement
ou pas du tout de nourriture. Dans ces conditions, apres un effet d'inhibition
reciproque, la prevalence du parabionte tigrinum s'exerce constamment sur le
parabionte punctatum, au point que la femelle tigrinum peut entrainer une
inversion sexuelle du male punctatum (Burns, 1935) se traduisant par l'intersexualite de celui-ci (#-» $-»• ?). Des faits du meme ordre ont ete obtenus
par Witschi (1936, 1937) en combinant A. tigrinum, A. maculatum, A.jeffersonianum (rev. in Witschi, 1939). C'est une situation physiologique qui rappelle
celle que nous realisons dans nos parabioses.
Au total l'ensemble de ces experiences concerne des combinaisons diploides
(homoploides), heterospecifiques, heterosexuees. Nos experiences realisent un
troisieme mode de combinaison, mettant en cause le degre de ploidie. Les paires
Parabiose chez Pleurodeles waltlii
417
sont homospecifiques, elles sont homo- ou heterosexuees, elles sont de type
haploide-diploiide.
La methode des chocs thermiques utilisee pour obtenir des germes haploides
donnant des androhaploides, les combinaisons qui peuvent etre realisees sont
les suivantes: (3 2n x <$ n) et ($ 2n x $ n).
Etude des parabioses homosexuees (<$ 2n x $ n)
Les parabioses (57/1-2), (57/1-3), (58-3DK2-7), (59-DK3-17-40), (59/14-11),
(60/37-25), (60/38-1) representent ce mode de combinaison (Tableau 1 dont les
caracteres sont resumes dans le Tableau 2).
Tableau 2. Caracteres des gonades dans les parabioses homosexuees
Testicules du diploide
N' d'ordre
Droit
Gauche
57/1-2
57/1-3
58-3DK..-7
59-DK3-17-40
59/14-11
Normal*
Normal
Normal
Normal
Normal
Normal
Petit
Normal
Normal
Normal
60-37-25
60-31-1
Normal
Normal
Normal
Normal
Testicules de l'haploide
Droit
Juvenile
Juvenile
Cordon vestigial
Submature
Cordon
vestigialf
Juvenile
Vestigial
\
Gauche
Juvenile
Cordon vestigial
Cordon vestigial
Vestigial
Cordon
vestigialf
Type submature
Vestigial
* Normal signifie de type et structure d'un adulte fonctionnel.
fVoir texte.
La structure des testicules haploides a ete decrite. On note que le type le plus
avance du developpement (type subspermatique) est present avec l'individu
(60-37-25). Dans trois cas des testicules du type juvenile sont observes. Dans un
cas (Planche 1, fig. F), la structure testiculaire encore identifiable est vestigiale.
Dans deux cas, il s'agit de cordons completement involues, dont le sexe ne peut
etre objectivement determine. Mais pour (58-3DK2-7), il s'agit surement d'un
male genetique et pour (59/14-11), le fait, comme nous l'avons dit, que tous les
haploides a sexe identifiable etaient des males androhaploides rend fort vraisemblable Tassimilation a un male genetique. La dissymetrie du developpement des
gonades dans la paire (60-37-25) est a mettre au compte probable du traumatisme operatoire.
Tl est notable que dans ces paires homosexuees, ou ne s'exerce pas d'efFet
endocrinien antagoniste (£ *t S), les testicules haploides se developpent
mediocrement, sauf pour (60-37-25) (Planche 1, fig. H). Ceci resulte d'une
competition physiologique d'ordre quantitatif favorisant le diploide. L'existence avec Tindividu (60-37-25) d'un cas ou le testicule haploiide atteint, avec le
type submature, l'etat adulte a spermatogenese abortive, montre bien que
l'haploidie est compatible avec un degre avance de differenciation testiculaire.
418
L. GALLIEN
Etudes des paires heterosexuees ($ 2nx $ n)
Les paires (57/1-1), (57/1-6), (60/16-11), (60/37-21), (60/37-24) represented
ce mode de combinaison dans lequel deux facteurs interferent d'une part les
effets endocriniens qui sont mis en oeuvre au cours de la differentiation sexuelle,
d'autre part les facteurs genetiques lies a la difference du degre de ploidie. Le
syndrome de Fhaploidie correspond phenotypiquement a un developpement
mediocre, normalement lethal, mais qui presente des degres et des variations,
selon les individus. II est done interessant de savoir comment cette situation se
traduit pour la differenciation sexuelle lorsque Fembryon androhaploide est
confronte avec un parabionte diploide. Les types reactionnels sutvant peuvent
etre definis.
Effets inhibiteurs du testicule haplo'ide sur la differenciation
ovarienne du parabionte diploide
Parabiose {57j 1-1). C'est le plus demonstratif en ce sens que le type ovarien
reste parfaitement identifiable a l'age de trois ans. Le partenaire haplo'ide a ete
decrit ci-dessus avec les cas concrets. Les testicules appartiennent au type submature, e'est-a-dire celui ou revolution testiculaire est la plus avancee. II
apparait que les testicules de l'haploide ont domine finalement l'ensemble de la
differenciation sexuelle du partenaire diploide femelle (Planche 2, figs. M a P;
Planche 4, fig. A). Chez celui-ci les deux mesonephros et les canaux de Wolff sont
normaux. Les canaux de Miiller sont vestigiaux. Dans les coupes transversales,
on les observe noyes dans la gaine conjunctive entourant le canal de Wolff.
Leur developpement a done ete inhibe par Factivite endocrinienne du partenaire
male.
Les gonades sont representees par deux cordons constitues par un stroma
mesenchymateux, accoles a des petites masses reduites de corps adipeux
(Planche 4, fig. A). Ces gonades sont particulierement interessantes. A gauche,
on retrouve deux ovocytes mesurant sensiblement 450 ju, de diametre et pigmentes en brun-noir. A Fobservation histologique, ils apparaissent en atresie
tres avancee (Planche 2, fig. N). Le pigment superficiel est desintegre et dans le
cytoplasme dissocie, infiltre de leucocytes, on note ca et la quelques elements
residuels de plaquettes vitellines. L'etat de la pigmentation indique que ces
ovocytes atretiques ont d'abord atteint la taille adulte ou sub-adulte qui correspond a un diametre de 1500/*, la vitellogenese s'est produite, le pigment s'est
forme, puis Fatresie s'est installee pour reduire finalement ces ovocytes au
diametre de 450 /*. Dans le cordon de mesenchyme, il apparait de place en place
quelques gonies residuelles a noyau lobule. A la suite des deux ovocytes
atretiques et en direction posterieure, quelques traces d'ovocytes tres involues
reduits a un corps atretique peuvent etre identifies (Planche 2, figs. N, O).
A droite, dans le vestige cordonal, un seul ovocyte jeune d'aspect subnormal
est identifiable (Planche 2, fig. M). A sa suite s'observent de petites vesicules
Parabiose chez Pleurodeles waltlii
419
cystoides correspondant a des vestiges, des corps ovocytaires profondement
involues (Planche 2, fig. P).
Ces images donnent a penser que, dans un premier temps, l'individu diploide
a developpe d'abord des ovaires qui, localement au moins, ont atteint un degre
devolution avance, et que des ovocytes ont pu atteindre l'etat de maturite
(pigment, vitellogenese). Puis dans un second temps, le developpement testiculaire de Fhaploide fut tel que devenant physiologiquement prevalent, son effet
entraine Tinvolution tres profonde des ovaires du diploide.
Parabiose (60J37-24). L'autopsie a ete pratiquee a l'age de 25 mois. L'analyse
des observations est plus delicate que dans le cas precedent parce que ce qui
correspond aux gonades chez le partenaire diploide est represents par un tres
mince cordon fibreux (Planche 4, fig. C) qui n'offre pas d'elements objectifs
permettant d'identifier le sexe. Cependant tout permet de penser qu'il s'agit
d'une femelle dont les ovaires ont ete completement inhibes. En effet dans une
combinaison heterosexuee diploide ($ 2n x $ 2n), chez le Pleurodele, le partenaire male domine toujours et totalement la differenciation femelle (Planche 1,
fig. E). D' autre part, il n'est pas rationnel de penser qu'ici le male diploide ait
inhibe, chez le partenaire diploide male, la differenciation testiculaire.
Le cas precedent (57/1-1) montre que 1'effet inhibiteur d'un male haploide
est incontestablement possible. II reste que, pour le partenaire haploide (60/3724) nous avons vu, avec l'etude des cas concrets que les testicules appartenaient
au type juvenile, c'est-a-dire que leur developpement est faible (Planche 4,fig.B).
Ainsi meme sous cette forme de mediocre developpement, les testicules haploides
peuvent exercer un effet inhibiteur sur la differenciation sexuelle ovarienne.
Combinaisons balancees
Par ce terme, nous caracterisons les combinaisons dans lesquelles une femelle
diploide confronted par la parabiose avec un male diploide, developpe des
ovaires normaux entrainant par leur hormone ovarienne le developpement des
canaux de Muller dans les deux composants de la paire, en meme temps que les
testicules de l'haploide atteignent eux-memes un degre avance de differenciation.
Parabiose (60-16-11). (Planche 1, figs. A, I.) L'individu diploide possede deux
ovaires de type adulte. II existe a droite un canal de Muller circonvolute de structure fonctionnelle, cependant qu'a gauche le canal de Muller moins developpe
se presente sous son etat juvenile. Comme cette structure se retrouve pour le
canal de Muller droit du partenaire haploide, qui possede a gauche un canal de
Muller developpe et active, on est conduit a considerer cette situation comme
la consequence operatoire de la fusion par le flanc anterieur des partenaires.
Le developpement des canaux de Muller, particulierement le gauche du partenaire haploide, est notable. Ceci traduit l'effet feminisant du diploide, sans que
celui-ci ait affecte la nature de la differenciation sexuelle des gonades males.
Les deux testicules de l'individu haploide ont ete decrits avec l'etude des cas
420
L. GALLIEN
concrets. II s'agit d'un developpement relativement avance menant au type
submature.
Parabiose (57/1-6). (Planche 2, fig. F). Le cas est comparable au precedent. La
femelle diploide presente des ovaires de type adulte, et induit l'etat fonctionnel
de ses propres canaux de Miiller dont les glandes sont bien developpees, en meme
temps qu'elle entraine le developpement des canaux de Muller du partenaire
haploide male $ (Planche 3,fig.H). Celui-ciestfortementhypomorphe. Ilpossede
des testicules de type vestigial. La encore on note la dissociation entre la reaction
des canaux de Muller et celle des gonades.
Effets inhibiteurs reciproques et prevalence de Veffet feminisant — inter'sexualite
femelle dominante
Parabiose (60/37-21) (Planche 1, figs. B, J; Planche 2, figs. H a L; Planche 4,
figs. D, F, G). L'autopsie a ete pratiquee a Page de 25 mois. Le partenaire
diploide mesurait 10 cm, il presentait de l'ascite. La taille est inferieure a celle
presentee par la plupart des autres parabioses. Le partenaire haploide etait tres
hypomorphe. Le corps tordu, la tete reduite, la queue et les pattes tres courtes
sont les manifestations morphologiques spectaculaires du syndrome de
l'haploidie.
Le partenaire diploide possedait deux ovaires blancs allonges, mais peu
developpes. Les ovocytes sont encore petits, non pigmentes. Us sont dans la
phase juvenile d'un ovaire qui est loin de sa maturite sexuelle (Planche 1, fig. J).
II existe un seul canal de Muller, a droite mediocrement developpe, loin de son
etat d'activite fonctionnelle, s'etirant sans circonvolutions. Chez l'individu
haploide, la dissection revele a droite une petite gonade allongee et un corps
adipeux tres remonte anterieurement. Le mesovarium est en continuity avec
celui de l'ovaire gauche du diploide. Les gonades des deux partenaires haploide
et diploide sont tres proches. A gauche, on observe seulement une trainee de
corps adipeux, sans gonade identifiable (Planche 4, fig. D).
La gonade droite de l'haploide est particulierement interessante. Les coupes
revelent d'avant en arriere les regions suivantes (Planche 2, figs. H a L). Le tiers
anterieur a une structure ovarienne typique avec nombreux auxocytes (Planche
2, fig. H; Planche 4, fig. G) dans lesquels s'observent les chromosomes en
ecouvillon (lampbrush). Les auxocytes sont plus disperses que dans un ovaire
temoin correspondant. Le stade de developpement est celui que Ton observe
normalement peu apres la metamorphose. C'est un type juvenile. Cette zone
devient moins large. Vers le milieu de la longueur debute une longue region ou
une structure ovarienne peut etre identifiee. Le cortex contient des gonies a
noyau clair lobule, des ovogonies, dont certaines sont en mitose multiplicative
(Planche 4, fig. F) et des ovocytes I en premeiose. Qk et la, au nombre de deux
a trois par coupe, de jeunes auxocytes sont presents.
A cette region de type ovarien degrade, fait suite une zone de meme structure,
mais dans laquelle les auxocytes ont disparu (Planche 2, fig. J). On passe alors
Parabiose chez Pleurodeles waltlii
421
a une partie de type testiculaire juvenile dont les petits cystes contiennent des
gonies a noyau clair lobule (Planche 2, fig. K). Cette partie testiculaire est peu
importante et represente seulement le vingtieme de la longueur totale de la
gonade. Au dela des structures testiculaires, s'etend une derniere zone a structure
ovarienne degradee avec de rares auxocytes (Planche 2, fig. L).
Au total, cette gonade est intersexuee, mais en meme temps inhibee. Dans
Fensemble, on peut noter un effet gradue de sensibilite antero-posterieur a
Faction feminisante. Les structures qualitativement tres faciles a identifier se
presentent sous une forme peu avancee.
Cette parabiose est comme un schema illustrant la competition entre deux
systemes de gonades antagonistes dans une combinaison parabiontique. Le
diploide a pu differencier ses ovaires, mais ceux-ci ont eu leur developpement
freine par la presence voisine d'une gonade male haploide. Celle-ci au depart
s'est differenciee selon son sexe genetique en testicule, mais reste, dans ce qu'il
en subsiste, de structure juvenile. Cet aspect manifeste dans la region moyenne
de la gonade correspond, au degre de developpement pres, a Fetat observe dans
les combinaisons balancees. Dans le cas de la parabiose (60/37-21), un autre
phenomene d'ordre qualitatif est intervenu. L'ovaire diploide qui, topographiquement, du fait de la greffe s'est trouve situe tres pres du testicule haploide, a
exerce un effet inducteur feminisant sur la gonade male. Cet effet est le plus
marque dans la region anterieure de la gonade.
Ces observations sont a rapprocher de celles mises en evidence par
Burns (1935) dans des parabioses heterosexuees, heterospecifiques, diploides, ou
le partenaire femelle appartenant a la grande espece a developpement rapide,
arrive a feminiser les gonades du partenaire male appartenant a la petite espece
a developpement lent. Dans le cas presente, la difference est que c'est le partenaire male, mais haploide qui subit Faction feminisante dominante. Ce phenomene ne se recontre jamais dans une parabiose de Pleurodeles homospecifique,
heterosexuee, diploide.
DISCUSSION ET CONCLUSIONS
Dans les conditions experimentales realisees ou le partenaire est un androhaploide, les combinaisons sont de deux types: ($ 2n/$ n) ($ 2n/c? n). Pour les
combinaisons homospecifiques ($ 2n/c? n), c'est la seule difference du degre de
ploidie qui est en cause. L'effet antagoniste des hormones sexuelles gonadales
des partenaires n'intervient pas puisque ces derniers sont de meme sexe. Dans
les combinaisons heterosexuees ($ 2n/^ n) l'effet antagoniste des hormones
sexuelles gonadales est mis en ceuvre, au cours de la differenciation sexuelle des
gonades et des caracteres sexuels somatiques (tractus genital, callosites, cloaque).
Pour les deux types de combinaisons, des effets traumatisants et trophiques de
meme ordre, resultant de la parabiose, sont a considerer.
Dans les deux types de combinaisons, le testicule haploide peut se differencier
422
L. GALLIEN
jusqu'a l'etat submature qui se caracterise par le debut, puis l'avortement de la
spermatogenese. Ainsi Fhaplo'idie n'empeche pas, dans les meilleurs cas observes, le developpement testiculaire d'atteindre son terme. Au cours de la
spermatogenese, il n'existe pas de mecanisme regulateur permettant de surmonter les conditions aberrantes du processus meiotique. La spermatogenese avorte
aux stades correspondant aux spermatocytes de premier ordre et la premiere
cinese s'acheve par la pycnose generalisee des cellules gametogenes.
Generalement le degre de developpement des testicules haploides est mediocre
y compris dans les combinaisons (<J 2n/cJ n). L'etat ne depasse pas celui correspondant aux structures juveniles du testicule. Parfois, les gonades sont vestigiales
et steriles. Cette situation est vraisemblablement la consequence des hypomorphoses caracterisant le syndrome de l'haploidie.
Dans les combinaisons (?2n/^n), trois types reactionnels peuvent etre
definis. (a) Effets inhibiteurs du testicule haploide sur la differentiation ovarienne du parabionte diploide. (b) Differentiation simultanee d'un testicule
haploide et d'un ovaire diploide; ce dernier provoque le developpement des
canaux de Miiller du partenaire haploiide. (c) Effets inhibiteurs reciproques avec
prevalence de Faction feminisante du partenaire diploide sur la differentiation
sexuelle male de l'individu haploide. Le testicule de ce dernier feminise est
intersexue.
Chez un individu haploiide, les memes gonocytes peuvent evoluer jusqu'au
debut de la spermatogenese (spermatogonies, premiere cinese), ou en ovogonies
et ovocytes atteignant l'etat d'auxocytes a chromosomes plumeux {lampbrush).
Etant donne les modalites differentes de la meiose selon la lignee male et
femelle, il serait evidemment interessant de savoir quel pourrait etre le devenir
d'haploides femelles parvenant a l'etat adulte.
Le developpement d'un haploide jusqu'a l'etat adulte montre que si cette
constitution genetique est lethale lorsque les individus sont eleves sans parabiose, cet effet peut etre corrige par la realisation d'une circulation croisee avec
un partenaire diploide. II est difficile de decider si ce dernier exerce un seul role
trophique, nourricier, done d'ordre general, compensant les insuffisances des
structures et correlations organiques liees au syndrome d'haploide. En fait, la
parabiose permet de faire vivre un germe diploide fortement hypomorphe, qui
se comporte au total comme une greffe toleree (Gallien, 1957). On peut en effet
se demander si Finformation genetique transmise a dose simple dans le cas de
l'haploidie n'etant pas, par elle-meme, capable d'assurer le developpement du
germe haploide au-dela d'un certain stade larvaire, e'est l'effet genetique
transmis par voie sanguine d'un complement diploide qui permettrait la survie
et Involution jusqu'a l'adulte des germes haploides deficients. II s'agirait alors
d'un effet specifique d'ordre genetique. On comprendrait que l'effet de genes
lethaux ou sublethaux non balances dans le cas de l'haploidie et dont le role a
ete suggere se trouverait surmonte dans les conditions de la parabiose haploidediploide.
Parabiose chez Pleurodeles waltlii
423
RESUME
Des individus haploides de l'Amphibien Urodele, Pleurodeles waltlii, mis en
parabiose au stade du bourgeon caudal avec un embryon diploide, ont pu etre
eleves jusqu'a l'etat adulte. C'est le seul cas connu pour les Vertebres. Les
individus haploides ont vecu jusqu'a l'age de 2 a 3 ans, et au-dela. Au moment
du sacrifice, rien n'indiquait une limitation particuliere a la duree de la
vie.
Les secretions hormonales des glandes genitales sont actives, les territoires
reactionnels competents, ainsi que l'indiquent les reactions des canaux de
Miiller, du cloaque, des callosites.
La lethalite liee a la constitution haploide est surmontee grace a la circulation
croisee qui assure a l'haploide l'apport du sang du diplolde. Celui-ci dans sa
structure generale, n'est pas affecte par la presence du sang de l'haploide.
La circulation croisee est demontree par l'observation d'hematies n/2n sur
frottis de sang.
Les manifestations du syndrome de l'haploidie sont decrites au stade de
Tadulte.
La croissance des deux elements des paires est fortement ralentie, la duree
de la vie larvaire prolongee. Ces faits ne sont pas specifiques de la dualite des
constitutions genetiques, mais resultent de la situation physiologique realisee par
la parabiose. En depit de la limitation de croissance generale qui affecte les
partenaires diploides, les gonades de ceux-ci peuvent developper une maturite
sexuelle complete: spermatozoides, ovocytes murs.
Les individus haploides etudies obtenus par choc thermique de l'oeuf etaient
des androhaploides.
Dans les meilleurs cas, ils peuvent differencier des testicules dont la structure
generale est celle d'une gonade adulte. Dans ces conditions, la spermatogenese s'installe, mais le processus avorte aux stades des spermatocytes de
premier ordre, pendant les phases de la premiere cinese. Des bivalents ne peuvent se constituer. L'evolution du cycle meiotique peut aller jusqu'a l'anaphase
de la premiere cinese. Au-dela, la pycnose est generalisee dans tous les cystes
testiculaires. Un tissu glandulaire pauvrement developpe se constitue dans les
cystes vides des elements germinaux.
D'une maniere generale cependant, le developpement testiculaire des haploides est limite. Les gonades sont petites et ne depassent pas l'etat juvenile,
que Ton observe normalement chez les jeunes animaux apres la metamorphose.
II arrive meme que les testicules apparaissent vestigiaux et, a la limite, steriles.
Ces divers etats sont analyses au mieux dans les paires ($ 2n/c? n) chez lesquelles
des effets antagonistes hormonaux d'origine gonadale, intervenant au cours de la
differenciation, ne sont pas en cause.
11 est probable que l'hypodeveloppement des gonades haploides est du, en
partie au moins, aux conditions physiologiques de la parabiose et a certaines
424
L. GALLIEN
insuffisances endocriniennes resultant des hypomorphoses liees au syndrome
de l'haploidie.
Dans les parabioses heterosexuees ($ 2n/^ n), un nouveau facteur interfere
avec les precedents. C'est celui des secretions hormonales antagonistes des
gonades elles-memes, au cours de la differenciation sexuelle et apres celle-ci.
Divers modes reactionnels presented par les parabioses ($ 2n/c? n) sont
decrits. (a) Action inhibitrice dominante des testicules haploides sur les ovaires
diploides. L'effet correspond au cas general observe dans les paires ($ 2n/<? 2n).
(b) Developpement simultane des deux lots de gonades. Les ovaires atteignent
l'etat adulte et entrainent l'activation des organes femelles du tractus genital
(canaux de Miiller). Les testicules peuvent atteindre l'etat submature oii s'amorce
la spermatogenese. Dans de telles combinaisons, les ebauches miilleriennes du
partenaire male reagissent positivement a l'effet feminisant des ovaires. (c)
Effet de dominance gynogene des ovaires sur la differenciation sexuelle de la
gonade male. Celle-ci est feminisee et se presente comme un ovotestis. Dans ce
cas, des ovocytes haploides a chromosomes plumeux (lampbrush) se differencient. Les ovaires du partenaire diploide sont eux-memes affectes par l'effet
androgene du testicule, et restent immatures, bien que la nature et la structure
ovariennes ne soient pas en elles-memes modifiees. Cette reaction correspond a
celle decrite anterieurement dans des combinaisons heterosexuees, heterospecifiques, homoploiides ($ 2n/c? 2n) realisees entre especes chez Triturus et Ambystoma.
SUMMARY
The development of adult haploid individuals of the urodele Pleurodele waltlii
joined in parabiosis: the haploid syndrome and sexual differentiation
Haploid individuals of the Urodele amphibian Pleurodeles waltlii, joined in
parabiosis with diploid embryos of the same species at the tail-bud stage, were
raised to adults. This is the first such case among vertebrates. The haploid
individuals lived for 2 or 3 years and more. When they were sacrificed, nothing
indicated a limit to their life-span.
The hormonal secretions of the gonads are active and the target territories
competent, as shown by the reactions of the Mullerian ducts, cloaca and
callosities.
The lethal haploid condition is overcome through cross-circulation by which
the haploid benefits from the diploid's blood. The diploid parabiont is not
affected in its general structure by the presence of the haploid's blood. Crosscirculation is demonstrated by the presence of both haploid and diploid erythrocytes in blood smears.
The manifestations of the haploid syndrome obvious at the adult stage are
described. The growth of both animals in the pair is greatly retarded; larval
life is lengthened. This is not specific to the dual genetic constitutions, but results
from the physiological conditions set up through parabiosis. Despite the
Parabiose chez Pleurodeles waltlii
425
restricted growth of the diploid partners, their gonads can undergo sexual
maturation, i.e. produce spermatozoa and mature ovocytes.
The haploid individuals, obtained by heat shock of the egg, were androgenetic. In the best cases, they differentiate testes having the general structure
of an adult gonad. In such cases spermatogenesis begins, but the process fails
at the stage of primary spermatocytes, during the first division. Bivalents do not
form. The meiotic cycle can proceed up to anaphase of the first division.
Afterwards, pycnosis is general in all testicular cysts. A poorly developed glandular tissue is built up in the cysts emptied of germinal elements.
Usually, however, testicular development in the haploids is limited. The
gonads are small and remain juvenile, a condition normally observed in young
animals after metamorphosis. Sometimes the testes are even vestigial and sterile.
These different conditions are best analysed in the pairs (<? 2n/c? n) in which
antagonistic hormonal effects do not occur.
It seems likely that the hypodevelopment of the haploid gonads is due, at
least partly, to the physiological conditions of parabiosis and to endocrine
deficiencies associated with the haploid syndrome. In heterosexual parabiosis
a new factor intervenes, i.e. the antagonistic hormonal secretions of the gonads
themselves, during and after sexual differentiation.
Different reaction patterns displayed in parabiosis ($ 2n/cJ n) are described:
{a) Dominant inhibitory action of the haploid testes on the diploid ovaries. The
effect is in accordance with the general case observed in pairs (? 2n/^ 2n). (b)
Simultaneous development of the two types of gonads. The ovaries reach the
adult stage and activate the Mullerian ducts. The testes can reach a submature
state where spermatogenesis begins. In such combinations, the Mullerian anlage
of the male partner react to the feminizing effects of the ovaries, (c) Gynogenic
dominant effect of the ovaries on the sexual differentiation of the male gonad.
The latter is feminized into an ovotestis. In this case, haploid ovocytes with
lampbrush chromosomes differentiate. The diploid partner's ovaries remain
immature through the androgenic effect of the testis, though their ovarian
nature is not modified. This reaction corresponds to the one already described
in heterosexual heterospecific, homoploid (? 2n/<£ 2n) combinations obtained
between species in Triturus and Ambystoma.
Je suis heureux d'exprimer aux techniciens du Laboratoire d'Embryologie, Mile Hardy,
Mme Lehmann, M. Desrosiers, mes remerciements pour l'aide qu'ils m'ont apportee dans la
conduite des elevages et la preparation du manuscrit.
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