/. Embryo/, exp. Morph. Vol. 42, pp. 135-148, 1977
Printed in Great Britain © Company of Biologists Limited 1977
135
Etude experimentale sur les
premiers stades du developpement du membre
anterieur chez Fembryon du Chelonien
Emys orbicularis L.: determination
en mosaiqne et regulation
By J. VASSE1
Institut d"1 Embryologie du C.N.R.S. et du College de France
SUMMARY
Experimental study on the early stages of development of the front limbs of the
embryo of the chelonian Emys orbicularis L.: mosaic determination and regulation
Ablation of postotic somites 6-13 on one side in embryos of Emys orbicularis L. or injury
to the adjacent somatopleure at the developmental stage when 15-21 somite pairs were
present, led to arrest of forelimb-bud development in this part of the somatopleure on the
operated side. Limb development in the remaining part of prospective somatopleure on the
operated side was investigated 5-11 days after the operation.
When this part of somatopleure was adjacent to cranial somites 6-9 or 6-10, the development stopped at the start of the apical crest as in Anguis or Scelotes forelimb-buds. A part of
somatopleure adjacent to caudal somites 8-12, 9-12 or 10-12 developed into a normal limb
with three segments; a part of somatopleure adjacent to 1-2 somites only, developed into a
reduced limb, scarcely swelling.
Each somitic level developed in relation to its initial regional determination dependent on
position in the cephalocaudal axis; to its environment (cranial or caudal bud) and to the
quantity of somatopleural material in the bud.
INTRODUCTION
En vue de preciser le role des somites dans l'initiation de l'ebauche du membre
anterieur chez l'embryon d'Emys orbicularis L., des experiences d'ablation de
somites ont ete effectuees en 1973 (Vasse, 1974«) et poursuivies en 1974. Les
resultats obtenus confronted a ceux de l'etude autoradiographique (Vasse, 1973)
nous ont conduit aux conclusions suivantes: les somites S6 a S]2 (Sn designant le
w-eme somite postotique), plus precisement leur prolongement ventral, induisent
Finitiation du membre anterieur en declenchant la proliferation initiale de la
1
Adresse de Vauteur: Institut d'Embryologie du C.N.R.S. et du College de France.
49bis, Avenue de la Belle Gabrielle, 94 130 Nogent sur Marne, France.
136
J. VASSE
somatopleure. En effet, apres l'ablation d'un de ces somites (a un stade precedant
la formation del'ebauchedu membre), le territoire de la somatopleure adjacent ne
sedeveloppepas; au contraire, la somatopleure en face des somites laisses en place
se souleve normalement avec une organisation semblable a celle du cote temoin
de l'embryon et en relation avec le niveau somitique. Si la somatopleure est
lesee, cela n'empeche pas le soulevement de la partie de somatopleure saine.
Ainsi, quand le territoire somatopleural presomptif de membre ne se souleve
pas en un point (a cause de l'ablation du somite adjacent ou d'une lesion de la
somatopleure en ce point), cela ne semble pas perturber le developpement de la
somatopleure situee a un autre niveau. L'organisation de l'ebauche aux premiers
stades du developpement est done de nature segmentaire: pour chaque niveau
somitique, la structure de la somatopleure depend du somite adjacent et chaque
somite (ou le territoire somatopleural adjacent) a une individualite propre.
Si la partie qui ne se developpe pas est situee au milieu du territoire presomptif
du membre, une ebauche craniale et une ebauche caudale se forment de part
et d'autre. L'evolution de ces ebauches, observee 1 a 4 jours apres l'operation,
est apparue totalement differente: dans l'ebauche caudale, on a observe un
mesoblaste basophile et correlativement une crete apicale bien developpee;
dans l'ebauche craniale ou le mesoblaste reste peu dense, il ne se forme pas de
veritable crete.
II nous a paru interessant de suivre revolution de ces ebauches au moins
jusqu'au stade de la formation de trois segments dans les membres temoins
pour pouvoir les comparer avec les ebauches des reptiles a membres rudimentaires et pour savoir si une regulation pouvait dans certaines conditions s'y
produire les conduisant a un membre complet. Ces experiences ont done ete
reprises en allongeant le temps de survie des embryons.
MATERIELS ET METHODES
Les conditions d'obtention des embryons de Cistude (Emys orbicularis L.)
sur lesquels ont ete effectuees nos experiences ont ete precisees dans des publications precedentes (Vasse, 1973, 1974«). Rappelons que les femelles adultes
sont capturees au moment de la ponte dans les etangs de la Brenne (Indre).
Dans le present travail, les oeufs places sur des plateaux ou dans des boites en
carton entre deux couches de coton, ont ete incubes a 25 °C. La sedation des
stades a ete faite d'apres le nombre de paires de somites formes par l'embryon,
pour les premiers stades embryonnaires; pour les stades plus avances, d'apres
le nombre de jours d'incubation.
Les operations de microchirurgie, realisees en salle sterile, relevent de deux
types d'intervention: (1) ablation de somites de la serie S6 a S ]3 ; (2) lesion du
territoire somatopleural presomptif de membre (avec ou sans ablation de
somites). Dans l'un ou l'autre cas, le but est le merae: obtenir le developpement
d'une partie du territoire presomptif de membre (en dehors de la region operee
Developpement du membre anterieur chez Vembryon du Chelonien 137
ou la somatopleure ne se developpe pas). Les operations ont done ete effectuees
a des stades precedant la formation de 1'ebauche du membre anterieur (embryons
de 15 a 21 paires de somites).
Cent huit embryons ont ete operes: 9 ont ete fixes immediatement apres
Foperation en vue de preciser les limites de la technique operatoire (Fig. 1-2). Sur
les 99 autres, 22 survivants ont ete etudies histologiquement (fixation dans le
liquide de Bouin; coupes en serie transversale a 7,5 (im\ coloration a Phemaluneosine).
RESULTATS
Chez deux embryons le membre anterieur s'est parfaitement developpe
du cote opere mais l'etude histologique a montre que 1'operation avait ete
effectuee au niveau de S5 et de S14. Les resultats reportes ici concernent done 20
embryons repartis en quatre groupes d'apres les stades atteints au moment de
la fixation (Tableau 1).
(1) Groupe d'embryons aux stades 3-5 (5 a 6,5 jours apres Voperation)
Les membres anterieurs temoins sont constitues d'un seul segment et aucune
differentiation ne s'observe encore dans le mesoblaste basophile, homogene.
Dans l'epiblaste, une crete apicale haute a structure radiaire s'est formee au
niveau des somites 8 a 12 la ou le mesoblaste est le plus dense.
Les trois embryons operes ont montre trois possibilites de developpement
selon la position de l'intervention: une ebauche craniale; une ebauche caudale
(Fig. 3); deux ebauches l'une craniale, l'autre caudale. Le mesoblaste de ces
ebauches est assez semblable a celui du niveau somitique temoin. La crete
apicale n'est representee dans les ebauches craniales que par un epaississement
de l'epiblaste. Dans les ebauches caudales, la crete de [S u -S 12 ] de l'embryon 3
n'a pas d'organisation bien radiaire alors que celle de [S8-S12] de l'embryon 1
parait semblable a celle du niveau temoin.
(2) Groupe d'embryons au stade 6 (5 a 7 jours apres Voperation)
Les membres anterieurs temoins ne sont encore constitues que d'un seul
segment. Le mesoblaste est organise en une region peripherique dense, plus
basophile et une region centrale, lache ou s'enfoncent vaisseaux sanguins et
nerfs. Dans l'epiblaste, la crete apicale a ete remplacee par un pli apical (Vasse,
19746).
L'evolution des ebauches experimentales craniales comportant peu de
mesoblaste basophile et a crete absente ou mal formee et pycnotique n'a pas
depasse le stade atteint precedemment, meme quand elles se sont formees en
face de quatre ou cinq somites.
Les ebauches caudales sont semblables aux ebauches temoins quand elles
sont issues d'un territoire somatopleural presomptif correspondant a cinq,
quatre ou trois somites caudaux. Une ebauche formee en face du seul somite
138
J. VASSE
Tableau 1. Liste des ebauches de membre experimentales
Stade de
1'embryon
au moment
Stade de Nombre de de l'oper1'embryon
jours
ation (en
au moment d'incubanombre de
Numero de
de la
tion apres
paires de
1'embryon
fixation
l'operation
somites)
1
5
15
(30 paires
de
somites)
5
(32 paires
de
somites)
6
6,5
16
5,5
17
5
21
6
5,5
6,5
21
19
(29 paires
de
Nature
de l'operation
et cote opere de
1'embryon*
Developpement
de l'ebauche de
membre du
cote operef
[S8-S12]N
somites)
4
2
3
4
5
6
6
AS U _ 1 2 D
LSmD
Ls u . 12 D
6,5
6,5
6,5
21
21
19
Ls9_12D
8
9
6
6
6
10
11
6
6
7
7
19
20
AS6_7D
AS^n & L s ^ n D
AS6_9, Ls6_8D
12
7,5
21
AS8(l/ 2 ; .9(1/2)D
13
7,5
20
AS^i^D
8
10
20
20
[S6-S12(1/2)]N
[S6-S8]R
[S9-S12]N
[S6-S7]R
Ls 8 G
14
15
[S6-S9]R
[S U -S 12 ]R
[S10-S12]R
AS 12 (i/2>,i3G
7
[S 6 -S 10 ]R
ASUQ/^OD
Somatopleure
deplacee au
niveau S6_9D
Ls 7 -9(/ 12 )G
[S8-S12]N
[SJR
[S12]R
[S6-S7]R
[S 9 -S ]2 ]N
[S0-S8]R
[S10-S12]R
[S8d/2)]R
[S9-S12]N
[S6-Si0]R
[S6-S9fl/2.]R
[S9(1/2rS12]N
[S6-S7]R
[S(i 9/2 )-S 12 ]N
16
10
21
Developpement du membre anterieur chez Vembryon du Chelonien 139
Tableau 1 (cont)
17
8
10
21
AS7,Ls6_8D
Ls6_8G
18
8
10,5
21
19
20
8
8
10,5
11
21
21
AS13D
[S9-S12]N
[Se-S8d/2)]R
[S6-S12]N
[S6-S7]R
[S 10 -S n ]R
[S 9 -S ia ]N
AS 8 . 9 , Lsg.9, Ls 12 D
Partie distale de
S7 et S8 lesee. D J
* ASm_n signifie 'ablation des somites m a n (m et n inclus)'. ASnd/2) signifie 'ablation de la
moitie du somite n'. D ou G signifie 'cote opere droit ou gauche de l'embryon'. Lsp-<i signifie
'lesion de la somatopleure a hauteur des somites p a q (p et q inclus)'.
t [Si—Sj] signifie 'ebauche se developpant depuis le niveau du somite i jusqu'au niveau du
somite j ' . N signifie 'developpement normal'. R signifie 'developpement reduit par rapport
a la normale'.
% L'etude histologique a revele que la lesion, tres legere, n'a pas empeche le soulevement
de la somatopleure.
S12 n'a pas de crete apicale. Les ebauches [S n (1/2)—S12] bien qu'ayant une
crete bien developpee, ont encore un retard de developpement par rapport au
niveau temoin ou on observe un pli apical.
(3) Groupe des embryons au stade 7 (7,5 a 8 jours apres Voperation)
Les membres temoins sont allonges et formes de 2 parties: une partie basale
representant un stylozeugopode s'isole d'une autre terminale, plus aplatie
(autopode) avec le pli apical. L'etude histologique montre qu'il n'y a pas encore
de condensation precartilagineuse axiale (ni de differentiation premusculaire);
cependant a la base du stylozeugopode, on observe une condensation de
cellules qui represente la premiere ebauche de l'element presquelettique stylopodial. Dans la partie distale, le mesoblaste est plus dense a la peripherie
(mesoblaste basophile a nombreuses mitoses) qu'au centre et plus epais ventralement que dorsalement.
Chez l'embryon 14, le membre droit est tres different du membre gauche
temoin: c'est une ebauche legerement soulevee en face de S6 a S10 et tres faiblement en face de la partie craniale de S n . Le mesoblaste y est peu dense et sa
partie basophile en petite quantite sous l'epiblaste; l'epiblaste basophile n'a pas
forme de crete: a sa place, les cellules ont leur noyau oriente perpendiculairement a la basale (Fig. 8). Dans la partie craniale de S n conservee, la portion
ventrale du somite a ete probablement touchee et arrachee (au moins en partie)
au moment de 1'operation par un fragment detache du tube nerveux et entraine
en profondeur. En face de S u (partie caudale) et de S12 qui ont ete enleves, la
somatopleure ne s'est pas developpee. D'autre part, les somites 11 et 12 n'ont
pas ete remplaces par regulation (Fig. 9-10): a leur emplacement, on n'observe
que du mesenchyme lache.
140
J. VASSE
Developpement du membre anterieur chez Vembryon du Chelonien 141
Si on compare cette ebauche craniale avec l'ebauche caudale [S9-S12] de
l'embryon 13 (Fig. 4), on retrouve les memes resultats que precedemment:
(1) L'ebauche caudale est bien plus developpee que l'ebauche craniale
(comparer les Figs. 6 et 8). Les autres ebauches craniales [S8] de l'embryon 13,
[S6-S9] de l'embryon 12 (Tableau 1), n'ont pas pu evoluer: le mesoblaste
basophile ne forme qu'une petite couche sous l'epiblaste et correlativement
l'epiblaste n'a pas forme de crete apicale.
(2) L'ebauche caudale atteint le merae stade que l'ebauche temoin (Figs. 6 et
7) si elle se forme en face de quatre somites caudaux et meme pour un territoire
presomptif plus reduit d'une longueur de trois somites: par exemple [S10-S12] de
l'embryon 12. Aux niveaux S9-S10, un pli apical s'est forme et non un simple
epaississement de l'epiblaste comme dans le cas d'une ebauche craniale.
(4) Groupe des embryons au stade 8 (10 a 11 jours apres Voperation).
Chez les embryons 15, 17, 19, des ebauches craniales et caudales se sont
formees du cote opere. Dans les ebauches craniales, le mesoblaste est peu
FIGURES
1-5
Fig. 1. Embryon d'Emys orbicularis de 20 paires de somites fixe immediatement
apres ablation (du cote droit de l'embryon) des somites 11 et 12: l'embryon est en
partie sous l'aire de vascularisation (a.v.) qui a ete laissee en place. Laflecheindique
la region de l'intervention; l'amnios a ete prealablement dechire pour permettre
l'operation.
Fig. 2. Coupe histologique transversale de l'embryon de la Fig. 1: a droite (cote
temoin), la somatopleure is) n'est pas encore soulevee, a ce stade; les cellules
sclerotomales (scl) ont quitte le somite; la vascularisation n'est pas etablie dans le
territoire presomptif du membre. A gauche (cote opere), quelques cellules du
somite 11 (c.som.) ont ete conservees (ceci peut se produire aux niveaux cranial et
caudal du territoire opere mais nous n'avons jamais constate une influence de ces
cellules somitiques sur le developpement de la somatopleure); le tube nerveux (j.n.)
est touche dorsalement par l'operation; la somatopleure (s) est intacte.
Figs. 3-5. Trois exemples d'ebauches experimentales caudales a differents stades:
stades 3 (Fig. 3), 7 (Fig. 4), 8 (Fig. 5).
Fig. 3. Embryon 1: ablation des somites 6 et 7 et lesion de la somatopleure au meme
niveau, du cote droit de l'embryon, au stade 15 paires de somites; fixation 5 jours
apres, au stade de 29 paires de somites. L'ebauche caudale qui s'est formee a
hauteur des somites 8 a 12 est semblable a l'ebauche temoin.
Fig. 4. Embryon 13: ablation des somites 6 et 7 et de la partie craniale du somite 8,
du cote droit de l'embryon, au stade 20 paires de somites; fixation 7 jours et demi
apres, au stade 7. L'ebauche caudale qui s'est formee a hauteur des somites 9 a 12 est
semblable a l'ebauche temoin.
Fig. 5. Embryon 15: deux operations ont ete effectuees: du cote droit un deplacement
de la somatopleure au niveau des somites 6 a 9; du cote gauche une lesion de la
somatopleure au niveau des somites 7 a 9. Les 2 ebauches de membre a hauteur
des somites 9 a 12 montrent le meme developpement que celui d'un membre au
stade 8, stade atteint par l'embryon. L'etude histologique a montre des differentiations premusculaires normales.
10
EMB 42
142
J. VASSE
Figs. 6-7. Coupes histologiques transversales de l'embryon 13 de la Fig. 4.
Fig. 6. Du cote opere; niveau somitique 11. Un pli apical (pi) s'est forme dans
l'epiblaste. Le mesoblaste (m) est plus dense a la peripheiie qu'au centre et plus
basophile. Comparez a l'ebauche craniale de la Fig. 8 dans laquelle l'epiblaste ne
presente qu'un simple epaississement.
Fig. 7. Du cote temoin; niveau somitique 12. Memes differenciations dans l'epiblaste
et le mesoblaste que du cote opere.
dense; les ebauches [S6-S8] et [S6-S9 (1/2)] ont forme une petite crete apicale
sans organisation radiaire. Les ebauches caudales sont bien developpees a
un stade de developpement correspondant a l'age de l'embryon (Fig. 5): on y
observe un pli apical au niveau de S9 alors que dans l'ebauche craniale [S6-S9
(1/2)] une crete a commence a peine a se former au meme niveau. Le territoire
presomptif du membre a pu ainsi, bien que reduit de moitie (sur une longueur
de trois somites et demi au lieu de sept dans le developpement normal et de
quatre somites et demi pour l'ebauche craniale), se developper en un membre
apparemment complet: il comporte trois segments dont l'autopode est deja une
palette en formation comme pour les membres temoins a ce stade; on y observe
les memes differenciations que dans les membres temoins: un axe presquelettique
a l'etat precartilagineux et de part et d'autre dans le mesoblaste dense et basophile situe immediatement sous l'epiblaste, des faisceaux premusculaires.
Chez les embryons 16, 18, la reduction caudale du territoire presomptif du
Developpement du membre anterieur chez Vembryon du Chelonien 143
membre d'une longueur correspondant a une (S13) ou deux somites (S12 et S13)
n'a pas eu d'influence sur le developpement de l'ebauche en tous points semblable a l'ebauche temoin.
"Nous n'avons pas observe de regulation de la deficience somitique: en aucun
cas, les somites enleves n'ont ete reconstitues; a leur emplacement se trouvent
des cellules mesenchymateuses, indifferenciees, parfois des cellules somitiques
mais ce sont des cellules sclerotomales ou quelques cellules ou fragments de
somites conserves apres l'operation.
DISCUSSION
Nous venons de voir que le developpement des ebauches est fonction de la
position qu'elles occupent dans le territoire presomptif du membre sur 1'axe
cephalocaudal; il est aussi fonction de la quantite de materiel presomptif a
leur disposition. D'autre part un meme niveau somitique peut se developper
differemment selon le type d'ebauche auquel il appartient c'est a dire en fonction
de son environneraent. Mais avant de developper ces differents points, il nous
faut soulever la question de savoir si l'arret de developpement de la somatopleure adjacente au somite enleve n'est provoque que par l'ablation du somite
et non par un effet indirect comme par exemple une lesion de la vascularisation.
Nous avons etudie les etapes de la mise en place de la vascularisation dans
Tebauche au cours du developpement normal: aux stades des interventions
(15-21 somites), la vascularisation n'est pas encore etablie dans le territoire
presomptif du membre (Fig. 2). La liaison des vaisseaux formes dans ce territoire
et de l'aorte ne se fait qu'aux stades 30-32 somites. Nous avons verifie egalement
qu'ulterieurement la vascularisation s'etait bien mise en place dans le territoire
opere et dans la somatopleure qui ne se souleve pas (Fig. 9).
Developpement des ebauches en fonction de leur position dans le territoire presomptif du membre
Dans un travail precedent (Vasse, 1973), nous avions vu que 1 a 4 jours
apres l'ablation de somites, l'ebauche se souleve en face des somites laisses
en place avec une organisation semblable a celle du cote temoin et en relation
avec le niveau somitique. Une crete apicale commence a se former au niveau de
S9, S]0, S n (si ces somites sont conserves) et en particulier dans les ebauches
craniales qui se distinguent deja d'ailleurs des ebauches caudales par leur
mesoblaste basophile moins dense. Dans le present travail, avec un temps de
survie plus long des embryons, la difference de developpement entre les deux
types d'ebauche s'est accentuee. Les ebauches craniales n'ont pas depasse le
stade d'apparition de la crete apicale comme un epaississement localise de
l'epiblaste au niveau S9-S10, meme 10 jours apres l'operation, alors que du cote
temoin le membre a forme trois segments et qu'au meme niveau S9-S]0 un pli
apical s'est forme. Les ebauches caudales se sont developpees en un membre
144
J. VASSE
Developpement du membre anterieur chez Vembryon du Chelonien 145
normal a trois segments avec pli apical (a condition toutefois que le territoire
presomptif comprenne au moins trois a quatre somites caudaux).
On peut rapprocher les ebauches de membre anterieur rudimentaires connues
chez les embryons de divers reptiles des ebauches experimentales que nous avons
definies comme 'craniales' (alors qu'on ne connait pas jusqu'a present d'ebauche
naturelle du type 'caudal'). Le developpement y debute en face des somites
craniaux ayant envoye un prolongement ventral dans le territoire somatopleural
presomptif; ce sont les somites 6 a 9 pour le membre anterieur de l'embryon
d'orvet (Raynaud & Vasse, 1968, 1969); S6 a S9-S10 chez Ophisaurus apodus
(Rahmani, 1974); S6 a S]0 chez Scelotes brevipes (Vasse, Gasc & Renous, 1974;
Raynaud et al. 1974). La crete apicale de ces membres rudimentaires est
toujours peu differenciee comme dans les ebauches 'craniales' de tortue. II
en est de meme chez l'embryon de poulet 'aptere' (Zwilling, 1949). L'anomalie
de la crete a ete supposee par Zwilling a l'origine de l'arret de developpement de
l'aile. Se referant a cette explication, Raynaud (1962) a interprets l'arret de
croissance et la regression des ebauches des membres de l'orvet comme 'des
arrets de developpement consecutifs a la disparition precoce de la crete apicale'.
Mais la deficience initiale peut se situer non au niveau de l'action inductrice de
la crete apicale (d'ailleurs niee par d'autres auteurs: Amprino, 1964) mais dans
le mesoblaste, se manifestant avant la formation de la crete. Nous avons
effectivement observe cette deficience dans les ebauches experimentales et
naturelles: la crete n'est pas ou mal formee a cause d'une densite cellulaire
insuffisante du mesoblaste basophile sous-jacent aux niveaux somitiques
S6 a S9. La reduction du nombre de somites formant un prolongement ventral
en reduisant le territoire presomptif du membre a sa partie craniale, a faible
proliferation, pourrait seule expliquer la rudimentation des membres anterieurs
de l'orvet et du Scelotes; l'hypothese emise par Raynaud (1972) d'une deficience
fonctionnelle des somites 6 a 9 chez l'orvet n'est pas indispensable, puisque
FIGURES
8-10
Coupes histologiques de l'embryon 14. L'ablation des somites 11 et 12 a ete effectuee
du cote droit de 1'embryon; une ebauche de membre s'est formee a hauteur des
somites 6 a 10.
Fig. 8. Au niveau de l'ebauche experimentale (a hauteur du somite 10): le mesoblaste (m) peu dense, n'est pas basophile; comparez a la Fig. 6. Dans l'epiblaste
(ep), la crete apicale ne s'est pas formee. tn, tube nerveux.
Fig. 9. Au niveau de l'operation (a hauteur du somite 12): la somatopleure (s)
ne s'est pas developpee; le somite 12 n'a pas ete remplace par regulation: a son
emplacement, on n'observe que du mesenchyme lache; la vascularisation s'est
etablie: on peut suivre un vaisseau (fleches) allant de l'aorte jusque dans la somatopleure. tn, tube nerveux; ch, chorde; Ao, aorte.
Fig. 10. Du cote temoin (a hauteur du somite 12): le developpement de l'ebauche
est celui du stade 8.
146
J. VASSE
l'ebauche experimentale [S6-S9] de tortue n'est pas plus developpee que l'ebauche
d'orvet.
Developpement des ebauches enfonction de la quantite de materiel somatopleural
presomptif de membre
Comparons maintenant les differents types d'ebauche craniale: dans [S6-Sa0]
et [S6-S9], le debut de l'apparition de la crete est lie a la presence d'une petite
quantite de mesoblaste basophile sous l'epiblaste; [S6-S8], [S6-S7], [S6] un peu
moins developpees que [S6-S10] et [S6-S9], ont a peu pres la meme structure
mais sans crete. Pour ces differents types d'ebauches peu developpees, les
effets d'une reduction de materiel somatopleural presomptif ne sont pas tres
visibles.
Au contraire pour les differents types d'ebauche caudale, les differences de
developpement, en relation avec la reduction de materiel somatopleural, sont
tres sensibles: si [S9-S12] et [S]0-S12] ont conduit a des ebauches de membre
apparemment normales a trois segments, [S10-Sn] et [S u -S 12 ] sont formees
d'une partie a peine soulevee avec crete anormale, un peu enfoncee dans le
mesoblaste; [S12] n'a meme pas forme de crete. Ainsi les effets de la reduction
de materiel ne se font sentir qu'a partir d'une reduction du territoire presomptif
du membre a une longueur correspondant a deux somites; pour trois somites
caudaux et plus, on peut parler de regulation puisque malgre une reduction
de materiel presomptif de moitie par rapport a la normale, l'ebauche de
membre obtenue est normale.
Determination en mosa'ique du materiel presomptif du membre et regulation
Nous venons de voir que les possibility's de developpement d'un niveau
somitique donne varient avec la taille de l'ebauche a laquelle il appartient: par
exemple pour le niveau S12 dans [S12], [S u -S 12 ] ou [S10-S12]. Son developpement
depend aussi de la nature (craniale ou caudale) de l'ebauche. Aux niveaux
S9 et S10, une crete commence a apparaitre dans une ebauche craniale (Fig. 8)
alors que dans une ebauche caudale par exemple [S9-S12], la structure du
mesoblaste est identique a celle d'un membre normal et un pli apical s'est
forme dans l'epiblaste (Fig. 6). Ainsi l'influence de l'environnement s'est fait
sentir sur le developpement final. La destinee des differents niveaux somitiques
n'etait done pas ineluctablement fixee, determinee, dans une regionalisation
stricte du territoire presomptif de membre comme pouvaient le suggerer les
resultats d'experiences precedentes (Vasse, 1974a) ou le developpement a paru
se faire 'en mosaique'. Effectivement, au cours de cette premiere etape (1 a 4
jours apres l'operation), le developpement de l'ebauche du membre se faisait
par un soulevement de chaque segment de somatopleure situe en face de chaque
somite, et ceci independamment des segments voisins. Les resultats du present
travail montrent qu'ulterieurement (chez des embryons fixes de 5 a 11 jours
Developpement du membre anterieur chez Vembryon du Chelonien 147
apres 1'operation) des phenomenes de regulation apparaissent, l'ebauche du
membre ne se developpant plus comme une juxtaposition de divers segments
mais comme un tout compose de parties interagissant au niveau du mesoblaste,
la dependance de l'ebauche vis-a-vis des somites ayant cesse entretemps.
Cette regulation ne s'est pas faite par remplacement du territoire lese (que se
soit la somatopleure ou le somite) mais par formation d'une ebauche uniquement a partir du territoire reste sain. Nous n'avons jamais constate de regulation
de la deficience somitique par exemple. L'etude histologique n'a montre aucune
reconstitution de somite meme en partie, ni de groupement de cellules basophiles. A l'emplacement du somite enleve, nous n'avons observe, meme aux
stades les plus ages, que du mesenchyme lache banal (Fig. 9).
RESUME
L'ablation de somites postotiques 6 a 13 d'un cote chez des embryons d'Emys orbicular is L.
ou la lesion de la somatopleure adjacente (au stade de 15 a 21 paires de somites), a conduit a
I'arret de developpement du membre dans cette portion de somatopleure du cote opere.
Le developpement du membre dans le reste de la somatopleure prospective du cote opere, a
ete suivi 5 a 1.1 jours apres l'operation.
Si cette portion de somatopleure est adjacente aux somites craniaux 6 a 9 ou 6 a 10, le
niveau de developpement ne depasse pas le stade d'apparition de la crete apicale comme pour
les ebauches d'orvet et de scelotes, reptiles a membres rudimentaires. Une portion de somatopleure adjacente aux somites caudaux 8 a 12 ou 9 a 12 ou 10 a 12 s'est developpee en un
membre normal a 3 segments avec pli apical; une portion de somatopleure adjacente a
1-2 somites seulement n'a forme qu'un membre tres reduit, a peine souleve.
Chaque niveau somitique s'est developpe en fonction (1) de sa determination regionale
initiate dependant de sa position sur l'axe cephalocaudal; (2) de son environnement (selon
qu'il se trouvait dans une ebauche craniale ou caudale); (3) de la quantite de materiel somatopleural de l'ebauche.
L'auteur remercie Monsieur Raynaud, Directeur du Service d'Embryologie de 1'Institut
Pasteur ou ce travail a ete entrepris.
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