ETH Diss. AN INVESTIGATION OF ENDOPHYTIC INFLUENCE FUNGI OF A dissertation SWISS FEDERAL Doctor of the IN submitted OF to SPECIES the TECHNOLOGY ZURICH degree of Natural presented J.A. PRUNUS CYANOGENESIS INSTITUTE for 8284 No Sciences by Magnuson M.Sc. citizen of accepted Prof. P.D. the on United the States of America recommendation Dr.E.Muller, Dr.H.Schuepp, 1987 examiner co-examiner of AND THE ii SUMMARY Asymptomatic endophytic fungal and stem tissue Prunus total (Rosaceae) of found. 175 investigated were from different four infections cantons species of These four in in of leaf species of Switzerland. endophytic fungi A were species were divided among the categories of Hyphomycetes (67), Coeloraycetes (77), Ascomycetes (26), Basidiomycetes (2), and Sterile Mycelia (3). Both general and species-specific endophytes were found. Some isolates were found to occur only once in a leaf, while others occurred in different areas in the leaf and could be considered systemic. same An overall pattern of increasing seasonal progression appeared. Although the majority of isolates occurred at low frequencies, a group of frequently occurring endophytes was discovered. Members of this group included Xylazia sp., Nodulisporium state of Hypoxylon fzagiforme, and some species of Aureobasidium. A strong veinal predomin¬ ance was found for endophytic occurrence in the leaf blade. The most numerous endophytic infections were concentrated along the midrib in 96% of the samples. A marked correla¬ tion between leaf and stem endophytes was found: of 40 different species of stem endophytes, only six species (15%) were isolated never Leaves of HCN of from leaves. Prunus result a as the of species tissue absence the of fungi. Leaves of highest concentrations of HCN, Three of the four tions of HCN in Tiazosporella absence of endophytes species the parca, fungi. (e.g., released were and the leaves to release treatment. of their HCN was measured treated were always lower than usually lower than A possible suppression of fungi. endophytes is suggested. Tolerance regardless Phomopsis diachenii) Tlazospozellat for highest concentra¬ presence of a non-Prunus endophyte, while the fourth was highest in the When concentrations tested were damage in the presence and P. padus consistently released HCN for released those for in the release 47 with Prunus HCN absence by fungal of Prunus species including endophytes of both Prunus and non-Prunus plants, well as non-endophytic and as Tolerance saprobic fungi. was measured vegetative Prunus in terms of either growth rates. While endophytes was highest concentrations spore germination tolerance to or HCN by the generally moderately high, at the their tolerance than that of unrelated fungi. Czyptospoziopsis malicozticisf One often was Prunus lower endophyte, demonstrated a complete iii intolerance is a known It colonize was to cyanide concentrations tested, yet it of cyanophoric plants. concluded that the ability to successfully pathogen these determined the Prunus species endophytically was not only by high tolerance to cyanide. A moderate tolerance to HCN appeared to be advantageous, but even a marked sensitivity was not prohibitive. Other factors, such as ability to suppress the release of HCN, must be involved to explain the failure of some seemingly qualified fungi to colonize Pzanus tissue endophytically. iv ZUSAMMENFASSUNG Vier Arten von Prunus (Rosaceae) aus der Schweiz symptomlos lebende endophytische Pilze in Total liessen sich Blattern und Zweigstucken untersucht. 175 Pilzarten, Hyphomyceten (67), Coelomyceten (77), Ascomyceten (26), Basidiomyceten (2), und sterile Myzelien wurden (3) auf nachweisen. gefundenen pilzlichen Endophyten gibt es neben Ubiquisten auch artspezifische Taxa und neben nur punktformige lnfektionen verursachende auch die ganzen Blatter erfassende (systemische) Parasiten. In der Regel nahmen die lnfektionen im Laufe einer Vegetationsperiode zu. Die meisten Pilzarten konnten allerdings nur in geringen Zahlen festgestellt werden, doch gabe es einige hauflger auftretende Arten (z.B. aus den Gattungen Xylaria, Nodulisporium und Aureobasidium). Blattendophyten bevorzugten die Besiedelung von Blattnerven insbesondere Unter den den Mittelnerv. Bei 96% der Proben war Mehrheit die der lnfektionen entlang oder im Mittelnerv zu finden. Zweigendophyten treten in der Regel auch in den Blattern (85% der Prunus-Blatter als oder Folge ohne von wurden auf der Pilze vier dent Einfluss die Gewebeschadigung untersucht. untersuchten von hochsten - bei HCN von Anwesenheit Pilzen die war Blattern Prunus-Arten (Blausaure) von HCN-Abgabe Prunus padus. von gaben - unter Tiarosporella festgestellten Pilz, dazu Abgabe unter Am ungeachtet der Behandlungsart Drei auf Arten). die parca, einem nie auf Prunus hochsten Blausauremengen ab. die unter dem Einfluss von gewissen Gegensatz artspezifischen Prunus-Endophyten (z.B. Phomopsis diachenii) abgegebenen Blausauremengen niedriger als bei Abwesenheit von Pilzen; es kann daher eine Unterdruckung Im der sind Blausaureabgabe fur Wachstumstoleranz verschiedene diese fur Falle Blausaure postuliert wurde fur werden. 47 Pilzarten, darunter, Endophyten von Prunus und andere Pflanzenarten, sowie nicht-endophytische und saprobische Pilze getestet (Sporenkeimung, Thalluswachstum). Wahrend die Toleranzgrenze von Prunus-Endophyten zum Teil recht tief lag, war sie fur Fremdpilze oft hoher. Eine Pilzart, Czyptospoziopsis malicorticis, zeigt sogar praktisch keine Toleranz gegenuber Blausaure, obschon es sich um einen wichtigen Pathogenen von Prunus handelt. Die Vermutung liegt daher nahe, dass die Fahigkeit fur einen Pilz zur Besiedelung von Prunus-Gewebe nicht in erster Linie von der Toleranz gegenuber Blausaure abhangt sondern von anderen Faktoren, z.B. von der erwahnten Unterdruckung der Blausaureabgabe der Pflanze.
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