Predictive And Prognostic Factors İn Locally Advanced Breast

Predictive and prognostic factors in
locally advanced breast cancer: effect
of intratumoral FOXP3+ Tregs
Lütfiye Demir, Seyran Yiğit, Hülya Ellidokuz, Çiğdem Erten, Işıl Somalı, Yüksel
Küçükzeybek, Ahmet Alacacıoğlu, Suna Çokmert, Alper Can, Murat Akyol, Ahmet
Dirican, Vedat Bayoğlu, Aysegül Akder Sarı, Mustafa Oktay Tarhan
Clin Exp Metastasis 2013;30(8):1047-62.
5. TIBBİ ONKOLOJİ KONGRESİ
ANTALYA, 20.03.2014
Amaç
• Lokal ileri meme kanseri (LİMK) hastalarında
neoadjuvan kemoterapiye yanıt ve sağkalım
üzerinde FOXP3+ T lenfosit (Treg)
infiltrasyonunun etkisi
• Treg infiltrasyonunun klinikopatolojik
faktörlerle ilişkisini saptamak
Hastalar
• İzmir Atatürk Eğitim Araştırma Hastanesi Tıbbi
Onkoloji Kliniği,
• 2005-2012 yılları
• LİMK tanısı
• 101 kadın hasta
• Neoadjuvan kemoterapi (antrasiklin-taksan)
• Etik Kurul onayı (Ege Üniversitesi;Karar no:121.1/56)
Değişken
TANI YAŞI
≤ 50 yaş
> 50 yaş
MENOPOZAL DURUM
Premenopozal
Postmenopozal
EVRE
Evre IIIA
Evre IIIB
Evre IIIC
İNFLAMATUAR MEME
Evet
Hayır
KLİNİK AKSİLLER
TUTULUM
N0
N1
N2
N3
MULTİSENTRİK PRİMER
Var
Yok
N
%
60
41
59.4
40.6
49
52
48.5
51.5
19
76
6
18.8
75.2
5.9
23
78
22.8
77.2
17
29
49
6
16.8
28.7
48.5
6
44
57
43.6
56.4
KLİNİK ÖZELLİKLER
Değişken
HİSTOLOJİK TİP
İnvaziv duktal karsinom
İnvaziv lobüler karsinom
İnvaziv duktal+lobüler karsinom
İnvaziv papiller karsinom
İnvaziv duktal+müsinöz karsinom
Medüller karsinom
İnvaziv mikropapiller karsinom
N
%
85
6
4
1
1
2
1
84.2
5.9
4
1
1
2
1
Apokrin karsinom
1
1
HİSTOLOJİK DERECE
n
%
HG I
HG II
7
66
6.9
65.3
HG III
28
27.7
Kİ67 İNDEKSİ
Kİ67 < %1
Kİ67 %1-14
Kİ64 %14-30
Kİ67 ≥30
1
21
8
43
1
20.8
7.9
42.6
P53
p53 (-)
p53 < %50
p53 > %50
29
21
21
28.7
20.8
20.8
PATOLOJİK
ÖZELLİKLER
ESTROGEN RESEPTÖRÜ
n
%
ER (-)
43
42.6
ER <%10
10
9.9
ER %10-50
8
7.9
ER≥ %50 < %100
33
32.7
ER %100
PROGESTERON RESEPTÖRÜ
6
5.9
PR (-)
45
44.6
PR <%10
8
7.9
PR %10-50
15
14.9
PR ≥ 50 < %100
26
PR %100
TÜMÖR SUBTİPİ
HR(-) HER2(-)
n
19
%
18.8
HR(-) HER2(+)
14
13.9
25.7
HR(+) HER2(-)
50
49.5
5
5
HR(+) HER2(+)
18
17.8
CERBB2 (-)
47
46.5
CERBB2 (1+)
11
10.9
CERBB2 (2+) FİSH (-)
11
10.9
CERBB2 (2+) FİSH (+)
2
1.9
CERBB2 (3+)
30
29.7
CERBB2 (HER2/NEU)
RESEPTÖR
EKSPRESYONU VE
TÜMÖR SUBTİPİ
Kemoterapi şekli
NEOADJUVANT KT
PROTOKOLÜ
N
%
CR
PR
SD
FEC
26 25.7
1
16
7
TEC
ET
4 FEC  4 DOCETAXEL
TC
4 AC  4 P
3 TEC  3 TC+H
4 AC  4 TH
67
2
1
1
1
2
1
15
0
0
0
0
0
0
43
2
1
1
0
2
1
8
0
0
0
1
0
0
TOPLAM
YANIT ORANLARI
101 100
66.3
2
1
1
1
2
1
PD
2
1
0
0
0
0
0
0
16
66
16
3
15.8% 65.3% 15.8% 3.1%
Yöntem
• Tru-cut biopsi ve kemoterapi sonrası operasyon dokuları
• Parafine gömülü dokulardan poli-L-lizinli lamlara 4-5 mikron
kalınlığında yeni kesitler alındı.
• Deparafinize olmaları için 60̊ C’de bir gece etüvde bekletildi.
• Boyama işlemi DAKO Autostainer cihazında Flex-envision sistemi ile
gerçekleştirildi.
• Primer antikor olarak “FOXP3 Ab-Mouse monoclonal antibody”
1:100 oranında dilüe edilerek 45 dakika inkübe edildi.
• Daha sonra yükselen derecelerde (%80, %96, % 99) alkollerden
geçirildi.
• En az 5 intratümöral saha (x400 BBA). Her sahadaki FOXP3+ Treg ler
sayıldı, 5 sahanın ortalaması o dokunun Treg infiltr. olarak kabul
edildi.
İstatistik
•
•
•
•
•
•
•
•
•
SPSS (version17) programı
Treg infiltrasyonu için cut-off değer olarak medyan değer kullanıldı.
İki değişken arasındaki ilişki x² (Chi-square) testi ile yapıldı.
Sağkalım analizi Kaplan Meier analizi kullanılarak yapıldı. Alt ve üst sınırlar
%95 güven aralığı (CI) içine belirtildi.
Değişkenlere göre sağkalımlar arasındaki karşılaştırma Log-rank testi ile
yapıldı.
Relapssız sağkalım (RFS) ve genel sağkalım (OS) üzerine etkili bağımsız
değişkenler ayrı ayrı çok değişkenli Cox regresyon analizi ile yapıldı.
Yaşa ve evreye göre ortalama Treg sayısı karşılaştırması nonparametrik test
olan Mann-Whitney U testi ile tümör subtiplerine göre ortalama
kıyaslanması için Kruskal Wallis testi kullanıldı.
Treg değişiminin değerlendirmek için Wilcoxon signed -rank test kullanıldı.
Tüm analizler için anlamlılık sınırı p < 0.05 değeri kullanıldı.
BULGULAR
• Medyan takip süresi 27.7 ay (5.7-90.9)
• Medyan yaş:49 (25-75)
Prekemoterapi FOXP3+ Treg
• 60 hasta
• Medyan Treg: 11.5/BBA (1-89)
• ≥11.5/BBA-yüksek Treg infiltr
• <11.5/BBA- düşük Treg infiltr
Kemoterapi sonrası FOXP3+ Treg
• 71 hastada
• Medyan değer : 3.4/BBA (0-53.8)
• <3.4/BBA- düşük Treg
• ≥ 3.4/BBA- yüksek Treg
Kemoterapi öncesi ve sonrası Treg bakılabilen
olgular
• 42 hasta
• 73.8% hastada Treg de azalma, 26.2% da artış ya
da değişiklik yok
MEME KANSERİ
ALTTİPİ
HR(-)HER2(-)
HR(-)HER2(+)
KT ÖNCESİ
MEDYAN FOXP3
15,6
11
KT SONRASI
MEDYAN FOXP3
2,4
1,2
DEĞİŞİM YÜZDESİ
84,60%
89%
HR(+)HER2(-)
HR(+)HER2(+)
7,3
15
3,7
3
49,30%
80%
Pre-KT
medyan
FOXP3+ Treg
Meme kanseri
fenotipi
N
Triple negatif
7
16.7%
15.6
2-38
12.8
2.4
0–14.2
13.2
0.128
HER2(+)
14 33.3%
16.3
3-75
26.5
2.5
0–44.8
13.65
0.016
HR(+)
21
50 %
5
1-36.4
16.9
3.6
0–23
8.4
0.040
Tüm grup
42
100%
13.8
1-75.6
18.65
2.6
0–44.8
10.10
%
range
Interquartile
range
Post-KT
medyan
FOXP3+ Treg
Range
Interquartile
range
P*
<0.0001
Treg infiltrasyonu ve klinik-patolojik özellikler
arasındaki ilişki
EVRE
IIIA
Pre-KT
düşük Treg
N
%
5
38.5
Pre-KT
yüksek Treg P
N
%
8
61.5
Post-KT
düşük Treg
N
%
7
41.2
IIIB
24
55.8
19
44.2
27
IIIC
İNFLAMATUAR
MEME KANSERİ
Evet
Hayır
HİSTOLOJİ
İnvaziv duktal
karsinom
İnvaziv duktal ca dışı
HİSTOLOJİK DERECE
G I-II
G III
1
25
3
75
0.32 2
10
26
Post-KT
Yüksek Treg P
N
%
10
58.8
55.1 22
44.9
50
2
50
58.8
49.1
7
27
41.2
50.9 0.48
0.61
5
25
50
50
5
25
50
50
1
24
6
47.1
66.7
27
3
52.9
33.3
32
0.47 4
50.8 31
57.1 3
49.2
42.9 1
24
6
55.8
3 5.3
19
11
44.2
64.7
28
0.15 8
53.8 24
44.4 10
46.2
55.6 0.49
Pre-KT
düşük Treg
Pre-KT
yüksek Treg
N
9
%
37.5
n
15
%
62.5
(+)
PROGESTERON
RESEPTÖRÜ
(–)
21
58.3
15
41.7
11
44
14
(+)
HER2/NEU
HER2(–)
HER2(+)
MEME KANSERİ
ALT TİPİ
HR(–)HER2(–)
HR(–)HER2(+)
HR(+)HER2(–)
19
54.3
22
8
53.7
42.1
3
4
19
HR(+)HER2(+)
P53
(+)
ÖSTROJEN
RESEPTÖRÜ
(–)
Post-KT
P düşük Treg
Post-KT
yüksek Treg
P
n
16
%
50
n
16
%
50
20
52.6
18
47.4
56
16
50
16
50
16
45.7 0.43
20
52.6
18
47.4
19
11
46.3
57.9 0.40
22
14
48.9 23
56
11
51.1
44
0.56
33.3 6
50
4
59.4 13
66.7
50
40.6
5
7
17
41.7
63.6
51.5
7
4
16
58.3
36.4
48.5
4
36.4 7
63.6 0.40
7
50
7
50
12
46.2 14
53.8
19
57.6
14
42.4
56.2 7
43.8
7
46.7
8
53.3
6
33.3
12
66.7
21
61.8
13
38.2
(–)
9
Kİ-67 PROLİFER. İNDEKSİ
<14%
4
30.8
9
69.2
≥ 14%
16
50
16
50
0.11
0.52
0.23
0.82
0.82
0.77
0.48
0.05
Yanıt oranları
•
•
•
•
Objektif yanıt: parsiyel +komplet yanıt .
Klinik ve patolojik ORR olarak tanımlandı
Klinik ORR : %81.1 (n=82)
Klinik yanıtlı hastaların %56’ sında patolojik
yanıt saptandı, klinik yanıtsızların %20’sinde
ise aslında patolojik yanıt olduğu gözlendi.
•
•
•
•
PKY meme : 13 hasta (%12.9)
PKY aksilla: 15 hasta (%14.8)
PKY hem meme hem aksilla: 5 (%4.9)
PKY aksilla: ER(-)> ER(+) PR(-) >PR(+) HER2(+)>HER2(-)
(anlamlı)
• PKY aksilla oranları HR(-)HER2(+) alt tipte en fazla
(p=0.04)
• KT öncesi Treg yüksek olanlarda PKY oranları daha
yüksek (AD)
• KT sonrası düşük Treg olanlarda PKY meme anlamlı
olarak fazla (p=0.014)
Pre-KT FOXP3+
düşük
yüksek
Post-KT FOXP3+
düşük
yüksek
FOXP3+ Treg
düşüşü
var
yok
Klinik
objektif
yanıt
P
79.20%
83.30%
39.30%
0.74 61.50%
0.1
88.90%
85.30%
60%
0.65 53.10%
25%
0.57 2.90%
83.90%
90.90%
60%
0.56 27.30%
26.70%
0.06 0%
Patolojik
obj. yanıt P
PKY
meme
14.30%
19.20%
P
PKY
aksilla
P
0.72
18.50%
28%
7.10%
0.41 11.50%
0.66
0.014
25.2
24.70%
13.9
0.88 0.00%
0.05
0.08
31%
10%
0.4
PKY
meme+aksilla P
16.70%
0%
0.3
Sağkalım analizleri
RFS
-Medyan RFS: 60.8 ay (32.9-88.6; %95 CI)
-35 hastada (%38.6) nüks, %64.1’i (n=25) uzak metastaz
Beyin (n=15) >Akciğer (n=13)> Kemik (n=12)>Karaciğer
(n=8) > Plevral met (n=8)
- İnflamatuar meme (p<0.0001), Grade III (p=0.0047),
klinik yanıtsızlık (p=0.015), multisentrik rezidü tm
(p=0.002) , vasküler invazyon (p=0.03)-- RFS anlamlı
olarak kısa
- KT öncesi yüksek Treg olanlarda RFS daha kısa (AD)
- HR(-)HER2(+) alt tipde RFS kısa (anlamlı)
- PKY görülenlerde RFS uzun (AD)
OS
• Medyan OS: 66.2 ay (34.9-97.5 ay; %95 CI)
• 25 ölüm (%28.7)
• Evre IIIC (p<0.001), grade III (p=0.048),
kemoterapi öncesi yüksek Treg infiltr(p=0.009) OS kısa
• Triple negatif alt tipte OS en kısa ancak fark
anlamlı değil
• Kemoterapi sonrası yüksek Treg kısa OS (AD)
• Klinik yanıtlı hastalarda ve PKY olan hastalarda OS
daha uzun ancak anlamlı değil..
Çok değişkenli regresyon analizi
HR
95% CI
P
2.39
1
1.12–5.09
0.023
İnflamatuar meme ca
Evet
Hayır
HR(–)HER2(+) alt tip
Evet
Hayır
Postop multisentrisite
Evet
Hayır
Vasküler invazyon
Evet
Hayır
Histolojik derece
GI-II
GIII
Objektif klinik yanıt
Hayır
Evet
RFS (relaps)
3.58
1
1.03–12.4
0.045
3.27
1
1.55–6.92
0.002
1.86
1
0.83–4.1
0.12
1.63
1
0.75–3.56
0.21
1.43
1
0.66–3.11
0.36
İnflamatuar meme ca
Evet
Hayır
Meme kanseri alt tipi
HR(–)HER2(–)
HR(–)HER2(+)
Postop multisentrisite
Evet
Hayır
Histolojik derece
GIII
GI-II
Pre-KT Treg
Yüksek
Düşük
HR
95% CI
3.1
1
0.79–12.08 0.1
1.17
1.14
0.13–10.4
0.1–16.4
0.88
0.92
1.12
1
0.23–5.31
0.88
2.29
1
0.54–9.66
0.25
5.93
1
1.25–28.1
0.025
OS (ölüm)
p
Tartışma
• Yüksek Treg infiltrasyonunun KT’e daha iyi yanıt
verdiği,
• KT ile Treg infiltrasyonunda azalma olduğu
• KT sonrası FOXP3+ lenfosit infiltrasyonunun düşük
olması--PKY ile ilişkili
Prediktif etki
• Yüksek Treg=Kısa sağkalım, alt tiplere göre ayrı
ayrı bakıldığında da Treg düzeyi düşük olan daha
uzun sağkalımla ilişkili!
Prognostik etki
Ancak,
• Treg infiltrasyonun hangi tümörlerde daha fazla
olduğu net değil.HR(-) ve HER2(+) tümörlerde
Treg daha yüksek olsa da bu bütünü için
söylenemez!
• Bazı meme kanseri alt tiplerinde, KT ile patolojik
komplet yanıt oranı fazla olsa dahi RFS ve OS
süreleri daha kısa.
• Bu nedenle biyolojik alt tip ve bazal Treg anlamlı
prognostik parametreler olarak değerlendirildi.
Sonuç olarak,
• FOXP3+ Treg inhibisyonunun meme kanseri
tedavisi açısından umut vadeden
gelişmelerden olacağı düşünülebilir.
TEŞEKKÜRLER!

Download Report