PH–027 Kekik (Thymus) Ekstraktının Normal Meme Epiteli (MCF-10A) ve Meme Kanseri (MDA-MB-231) Hücre Kültürlerinde Sitotoksik, Apoptotik Ve Epigenetik Etkilerinin Araştırılması Emir Bozkurta, Harika Atmacaa, Aslı Kısma, Selim Uzunoğlua, Rüçhan Uslub, Burçak Karacab a Celal Bayar Üniversitesi, Fen Edebiyat Fakültesi, Biyoloji Bölümü, Muradiye/Manisa, [email protected] b Ege Üniversitesi Tıp Fakültesi, Tülay Aktaş Onkoloji Hastanesi, İç Hastalıkları AD, Medikal Onkoloji BD, Bornova/İzmir Amaç: Aromatik bitkiler, potansiyel anti-kanser özelliğe sahip birçok ilacın önemli kaynaklarından biridir. Aromatik bitkilerden kekik Thymus (T.), ılıman bölgelerde geniş olarak yayılış gösterir ve yaklaşık 350 türü bulunur. Bu çalışmada normal meme epiteli (MCF-10A) ve meme kanseri hücre hatlarının (MDA-MB-231) in vitro çoğaltımında, yabani kekik (T. serpyllum) ekstraktının, olası sitotoksik, apoptotik ve epigenetik etkilerinin araştırılması hedeflendi. Gereç ve Yöntem: T. serpyllum bitkisi Naturin Ltd. (İzmir, Türkiye) firmasından temin edildi. Bitkinin ekstraktı, 439x103 μg/ml konsantrasyonda metanol ile çözülerek hazırlandı. Sitotoksik etkilerinin belirlenmesinde, XTT canlılık testi (Roche) kullanıldı. Apoptozis, Cell Death Detection Elisa Plus Kit (Roche) kullanılarak gösterildi ve kaspaz 3/7 enzim aktivitesi ölçülerek doğrulandı. DNA metiltransferaz (DNMT) ve histon deasetilaz (HDAC) aktivitesi, EpiQuik DNA Methyltransferase Activity/Inhibition Assay ve EpiQuik HDAC Activity/Inhibition Assay kitleri kullanılarak ölçüldü. DNMT1 ve HDAC1 genlerinin mRNA düzeyleri, Real Time Quantitative PCR (qRT-PCR) Assay kullanılarak belirlendi. Bulgular: T. serpyllum ekstraktının çalışılan dozları (1 μg/ml, 10 μg/ml, 50 μg/ml, 100 μg/ml, 250 μg/ml, 500 μg/ml, 1000 μg/ml) normal meme epitel hücresi kültürlerine uygulandığında, anlamlı bir sitotoksik etki gözlenmedi. Ekstraktın aynı dozları, meme kanseri (MDA-MB-231) hücre kültürlerine uygulandığında, doza ve zamana bağlı sitotoksik etki gözlendi. Ekstraktın MDAMB-231 hücrelerinde 72. saatteki IC50 değeri 276 μg/ml olarak hesaplandı. Gözlenen sitotoksik etkinin apoptozise bağlı olduğu belirlendi. Ekstraktın DNMT ile HDAC enzimlerinin aktivitelerinde ve DNMT1 ile HDAC1 genlerinin ekspresyonlarında inhibisyona yol açtığı belirlendi. Sonuç ve Tartışma: Bu in vitro bulgular, T. serpyllum ‘un meme kanserine karşı tedavide kullanılabilecek potansiyel bir bitki olduğunu göstermektedir. Elde edilen bu ön veriler, kekik ekstraktında meme kanserinin tedavisinde kullanılabilecek potansiyel etken maddelerin varlığına işaret etmektedir. Bundan sonraki aşamada, bu ekstraktın içindeki etken maddelerin saflaştırılarak, tekli ve kombine çalışmalarının yapılmasına ihtiyaç vardır. Anahtar Kelimeler: Thymus serpyllum, Normal meme epiteli (MCF-10A) ve meme kanseri hücre hattı (MDA-MB-231), Sitotoksisite, Apoptozis, Epigenetik 21. Ulusal Biyoloji Kongresi, 03–07 Eylül 2012, Ege Üniversitesi, İzmir, Türkiye http://www.ubk2012.ege.edu.tr 1341
© Copyright 2024 Paperzz
