UZIMANJE UZORAKA ZA MIKROBIOLOŠKE PRETRAGE PREPORUKE PRIREDILA : Sonja Hejtmanek, dr med. specijalist medicinske mikrobiologije s parazitologijom OBRISAK ŽDRIJELA - upotrijebiti bris s drvenim štapićem (veća pamučna glavica) nije potrebno prethodno vlaženje vate štapića sterilnom fiziološkom otopinom bolesniku obrisati tonzile, nepčane lukove i stražnji zid ždrijela ne dodirujući bukalnu sluznicu i jezik. Jezik mora cijelo vrijeme biti u ustima pritisnut spatulom. Pacijent za vrijeme uzimanja obriska izgovara slovo“A“ POHRANA: < od 2 sata - sobna temperatura > od 2 sata – temp. hladnjaka (+4 C ) NAJČEŠĆA GREŠKA: - vatom brisa dotaknuti jezik ili bukalnu sluznicu OBRISAK NAZOFARINKSA - upotrijebiti bris sa žicom (manja pamučna glavica) navlažiti vatu štapića sterilnom fiziološkom otopinom neposredno prije uzimanja uzorka drugim brisom (koji će biti odbačen) očistiti vestibulum nosa obrisak uzeti u onoj strani nosa (L / D) koja nije začepljena, tj. ići onim putem koji je prohodan i nije edematozan bolesniku naredimo disanje na usta, a ne na nos jednom rukom fiksiramo glavu bolesnika tako da palcem podižemo i držimo vrh nosa, a ostalim prstima i dlanom držimo čelo i frontalni dio tjemena drugom rukom ulazimo sa štapićem u prohodnu nosnicu i rotirajući štapić po uzdužnoj osovini, prolazimo donjim nosnim hodnikom uz septum sve do nazofarinksa. Tamo se zadržimo oko 5 sekundi tako da glavica brisa upije sekret. Prilikom opisane manipulacije ne smijemo dodirnuti sluznicu vestibuluma nosa. U protivnom treba ponoviti postupak novim neupotrebljenim štapićem. POHRANA: < od 2 sata - sobna temperatura > od 2 sata - temp. hladnjaka ( +4º C ) ( N. meningitidis i H. influenzae neće preživjeti temperaturu hladnjaka, pa se preporuča, ukoliko ne postoji mogućnost dostave uzorka unutar 2 sata, bris UBOSTI u transportni medij - gel i pohraniti na SOBNOJ temperaturi. ) Transportni medij osigurava preživljavanje potencijalnih patogena približno 48 do 72 sata, na sobnoj temperaturi ili temperaturi hladnjaka, ovisno o tome što zahtjeva uzorak. NAJČEŠĆE GREŠKE: - uzeti obrisak vestibuluma nosa uzeti obrisak suhom pamučnom glavicom brisa (to je teže subjektivno za bolesnika, a i teže prežive mikroorganizmi do dolaska u laboratorij) pohraniti uzorak u hladnjak, a očekuje se N. meningitidis ili H. influenzae OBRISAK VESTIBULUMA NOSA - upotrijebiti štapić sa žicom (manja pamučna glavica) navlažiti vatu brisa sterilnom fiziološkom otopinom neposredno prije uzimanja uzorka kružnim pokretima obrisati cijeli vestibulum (krila nosnica i septum) indiciran je samo kod detekcije stafilokoknog nosnog kliconoštva (osobito MRSA – meticilin rezistentni Staphylococcus aureus) apsolutno je neprihvatljiv kod obrade respiratornog infekta! POHRANA: < od 2 sata - sobna temperatura > od 2 sata – temp. hladnjaka ( +4º C ) NAJČEŠĆA GREŠKA: - površno, nedovoljno temeljito, obrisana sluznica - uzeti obrisak nazofarinksa, a ne obrisak vestibuluma nosa OBRISAK KONJUNKTIVE - - - uvijek treba uzeti obrisak zdravog i bolesnog oka (konjunktive) – radi komparacije nalaza upotrijebiti štapić sa žicom (manja pamučna glavica) ako želimo učiniti pretragu na Chlamyidia-u trachomatis - upotrijebiti SUHI DAKRONSKI ŠTAPIĆ. Energično obrisati konjunktivalni prostor da dobijemo STANICE. Tako uzeti uzorak odmah nanijeti (razmazati, natapkati) na prikladni „ set “ - pretmetno stakalce namijenjeno samo za tu pretragu (metoda: direktna imunofluorescencija) osušiti i preliti fiksatorom (metanol) koji se nalazi u popratnoj plastičnoj ampuli. nakon što preliveni fiksator ishlapi – uzorak pohraniti u hladnjak (+4º C) - ako želimo učiniti pretragu PCR – metodom – obrisak uzeti tankim nenavlaženim brisom i uroniti ga u odgovarajući transportni medij te transportirati u laboratorij - ako želimo učiniti pretragu na ostale potencijalne bakterijske uzročnike – upotrijebit ćemo štapić s NAVLAŽENOM pamučnom glavicom (navlažiti sterilnom fiziološkom otopinom) jednom rukom, uz pomoć dva prsta, rastvoriti vjeđu, a drugom rukom obrisati konjunktivalni prostor tako dobiveni uzorak uroniti u transportni medij i pohraniti na SOBNOJ temperaturi odmah dostaviti u laboratorij - Ukoliko radimo obje vrste obrisaka – tada PRVO uzimamo obrisak za „ klamidiju “ (SUHI DAKRONSKI BRIS), a ZATIM obrisak ostalih potencijalne bakterijske patogene - (VLAŽNI BRIS) NAJČEŠĆE GREŠKE: - uzeti brisom sekret nakupljen u medijalnom uglu oka, jer je to obično sekret koji sadrži samo kolonizante, a ne potencijalne patogene, ili je to samo stanični detritus, pa će rezultat analize biti lažno sterilan - zanemariti redoslijed uzimanja obrisaka „za klamidiju“ i za „bakteriološku“ analizu STRUGOTINA ROŽNICE - - - lokalno anestezirati površinu oka kapljicama anestetika sterilnim instrumentom ili suhim brisom sastrugati leziju (rožnice) kad tražimo Chlamydia-u trachomatis, sadržaj strugotine nanosimo na predmetno stakalce iz seta „za klamidiju“ (imunofluorescentna matoda) i nakon sušenja prelijemo fiksatorom iz popratne plastične ampule. Osušeni uzorak pohraniti u hladnjak (+4º C) . ukoliko se izabere PCR – metoda kao dijagnostička metoda – sadržaj strugotine uroniti u odgovarajući transportni medij. Do dostave uzorak pohraniti u hladnjak. uzorak uzet brisom s pamučnom glavom odmah se uroni u transportni medij i pohrani na sobnoj temperaturi – ukoliko se traže drugi potencijalni bakterijski uzročnici. OBRISAK VANJSKOG ZVUKOVODA - - namočiti sterilnom fiziološkom otopinim 2-3 brisa s drvenim štapićem (veća pamučna glava) i jedan bris sa žicom (manja pamučna glava). bris s manjom glavom bit će upotrijebljen za definitivan obrisak (uzorak) nakon 2-3 brisanja zvukovoda, debljim brisevima, navlaženim sterilnom fiziološkom otopinom (improvizirana toaleta zvukovoda) - tanjim brisom uzeti uzorak s bolesnog mjesta; energično i efikasno da se blagim brisanjem ne „previdi“ uzročnik streptokoknog celulitisa (ßHS „A“) da bi se izbjegla kontaminacija uzorka s bakterijama s okolne kože – može se upotrijebiti i ušni ORL-spekulum POHRANA : < od 2 sata – sobna temperatura > od 2 sata – temp. hladnjaka (+4º C) NAJČEŠĆE GREŠKE : - uzeti prvi ili drugi obrisak kao definitivni uzorak (rezultat analize će biti fiziološka flora kože zvukovoda, a potencijalni patogen će se tako previdjeti) - upotrijebiti ovu vrstu uzorka kao uzorak izbora kod sumnje na „otitis media“u (zbog postojanja bubnjića kao fiziološke barijere, nećemo dobiti analizom potencijalnog uzročnika upale srednjeg uha) SADRŽAJ DOBIVEN TIMPANOCENTEZOM - - - prije zahvata obvezno je učiniti toaletu zvukovoda vodom i sapunom ili odgovarajućim dezinficijensom za pranje, te potom isprati zvukovod sterilnom fiziološkom otopinom, radi ispiranja dezinficijensa (ovaj zahvat podrazumijeva intaktan bubnjić) sadržaj dobiven punkcijom zadržati u ŠTRCALJKI (čuvajući na sobnoj temperaturi) ILI inokulirati u odgovarajuću „FAN-BOČICU“ („žuti čep“)*, te je pohraniti na sobnu temperaturu ili u u termostat (37ºC) prije inokulacije sadržaja u „fan-bočicu“ potrebno je: 1. skinuti originalni plastični poklopac 2. dezinficirati 70%-tnim alkoholom gumu na vrhu bočice i PRIČEKATI da alkohol ISHLAPI. Tek je tada izvršena dezinfekcija. 3. sterilnom iglom (neupotrebljenom) inokulirati sadržaj u „fan-bočicu“ 4. ponovo dezinficirati gumu alkoholom 5. pohraniti „fan-bočicu“ u termostat (37ºC) ili na sobnu temperaturu do transporta u mikrobiološki laboratorij *FAN – bočica je tvornički naziv za tekuću podlogu. Različita svojstva tekućih podloga označena su različitim bojama (npr. zeleni, narančasti, žuti čep). Različiti su optimalni volumeni tekućeg uzorka : „žuti fan“ < 0,5 ml; „narančasti fan“ i „zeleni fan“ < 5 ml. SPUTUM (ISKAŠLJAJ) - - uzorak uzeti ujutro, neposredno nakon buđenja usnu šupljinu isprati SAMO OBIČNOM vodom, bez pranja kalodontom i bez ispiranja dezinficijensom ili drugim sredstvom zatražiti od bolesnika da DUBOKO UDAHNE, te da potom ISKAŠLJE IZ DUBINE uzorak pohraniti u sterilni plastičnu bočicu sa širokim grlom, čuvajući ga na sobnoj temperaturi (do 2 sata) ili u hladnjaku (dulje od 2 sata) – (meningokok! i hemofilus! – sobna temperatura ) RETRONAZALNI SEKRET i ISPLJUVAK – nije dobar uzorak, pa se preporuča dati uzorak pod nadzorom liječnika ili medicinske sestre NAJČEŠĆA GREŠKA: - uzeti ispljuvak umjesto iskašljaj uzeti retronazalni sekret kao uzorak prati zube ili dezinficirati tj. osvježavati usnu šupljinu nekim antiseptičkim sredstvom prije uzimanja uzorka ASPIRAT TRAHEJE BRONHOALVEOLARNI LAVAT (BAL) RESPIRATORNI UZORAK „ČETKICOM“ - uzorak pohraniti u sterilnu posudu i čuvati na SOBNOJ temperaturi (ako je vrijeme čekanja do transporta uzorka veće od 2 sata, uzorak se može pohraniti i u HLADNJAK, ALI samo UKOLIKO NE OČEKUJEMO H. influenzae ili N. meningitidis ili anaeroba) - ANAEROBNI MIKROORGANIZAM iz ovih uzoraka ne treba očekivati, ako je uzorak uzet bez dvoluminalnog katetera („zaštićeni uzorak“), jer anaerob neće preživjeti kontakt s kisikom iz zraka - tako zaštićeni uzorak dostaviti u anaerobnom transportnom sistemu ili u štrcaljki, pohranjujući ga pritom isključivo na sobnoj temperaturi PUNKTATI - 70 %-tnim alkoholom dezinficirati kožu pričekati da alkohol ishlapi punktirati punktat se ne preporuča pohranjivati u hladnjak, zbog očuvanja vitalnosti termolabilnih mikroorganizama NAJČEŠĆE GREŠKE : - transkutanu punkciju izvoditi bez prethodne dezinfekcije kože - nakon dezinfekcije kože nesterilno palpirati mjesto punkcije - započeti punkciju prije nego što je alkohol ishlapio - očekivati uspješnu analizu, a u „fan“ – bočicu je inokulirana premalena količina uzorka 1. PUNKTAT APSCESA - sadržaj dostaviti u štrcaljki (kraće od 2 sata – na sobnoj temperaturi) ili aseptički inokulirati u odgovarajući „fan“ (dulje od 2 sata do dostave u mikrobiološki laboratorij) 2. PUNKTAT RANE - - UKOLIKO POSTOJI EKSUDAT – odstraniti ga u cijelosti mehanički (sterilnim tupferom) i učiniti toaletu rane antiseptikom, koji potom OBVEZNO treba isprati sterilnom fiziološkom otopinom UKOLIKO NE POSTOJI EKSUDAT – učiniti toaletu rane, te obilno isprati sterilnom fiziološkom otopinom aspirirati špricom i iglom (uz pomoć sterilne fiziološke otopine ili bez nje) sekret iz tkiva pohraniti na sobnoj temperaturi, u štrcaljki (kraće od 2 sata) pohraniti na sobnoj temperaturi ili u termostatu, u odgovarajućem „fanu“ (dulje od 2 sata) Ne preporuča se uzimati OBRISAK RANE!!! - ovaj uzorak detektira kolonizacijsku floru (slučajni „stanovnici“), a ne pravog uzročnika upale! Iz istog se razloga NE preporuča uzimati uzorak BEZ PRETHODNE TOALETE. Takav uzorak osim što detektira kolonizante, nije prihvatljiv, jer se iz staničnog detritusa neće moći izolirati (kultivirati) mikroorganizam, pa će rezultat analize glasiti „sterilno“, što ne znači da je to zaista točno mikrobiološko stanje na mjestu upale. Ukoliko se ipak uzme obrisak, tada treba uzeti dva ( 2 ) obriska, jer će jedan biti upotrijebljen za izradu mikroskopskog preparata koji će dati informaciju o prisustvu leukocita - polimorfonukleara; ukoliko leukociti nisu prisutni, tada je svaki mikrobiološki izolat zapravo samo kolonizacijska flora. Obrisak treba uzeti na mjestu koje se nakon toalete rane antiseptikom još ispere i fiziološkom otopinom, da bi se isprao antiseptik i tako eliminirala mogućnost dobivanja lažno sterilnog rezultata. 3. PUNKTAT STERILNIH TJELESNIH ŠUPLJINA (pleuralna, perikardijalna, peritonealna, zglobna, amnionska i sl.) - sadržaj dobivan punkcijom aseptički inokulirati u odgovarajući „fan“ - ovisno o volumenu sadržaja „fan“ pohraniti na sobnoj temperaturi punkcijom dobiveni sadržaj može se ostaviti i u štrcaljki na sobnoj temperaturi u slučaju brze dostave (manje od 2 sata) KRV - «set hemokultura» je uzorak krvi dobiven s jednog mjesta venepunkcije, bez obzira da li tu krv inokuliramo u jednu ili više bočica (naziv za bočicu, u daljem tekstu je FAN) PREPORUKA : Maksimalno uzeti 3 seta u 24 sata. U slučaju febriliteta : 2-3 seta / 24 sata. U slučaju sumnje na endokarditis . 3 seta / 24 sata. Preporučeni razmak venepunkcija > 1 sat. - - dezinficirati mjesto venepunkcije 70%-tnim alkoholom, te PRIČEKATI DA ALKOHOL ISHLAPI ( NE PALPIRATI KOŽU NAD VENOM NAKON IZVRŠENE DEZINFEKCIJE) skinuti originalni plastični poklopac s «fanova» - dezinficirati gumeni vrh (čep) na «fanovima», te PRIČEKATI DA ALKOHOL ISHLAPI u svaki «fan» inokulirati uzorak krvi NEUPOTREBLJENOM, STERILNOM IGLOM PREPORUKA : Optimalni volumen krvi je drukčiji za različite vrste «fanova», ( ZELENI (aerobna inkubacija) ili NARANČASTI (anaerobna inkubacija) 5-10 ml / bočici; ŽUTI : < 5 ml / bočici (fan za malu količinu uzorka) ) POHRANA : NEINOKULIRANI, neupotrebljeni FAN - sobna temperatura INOKULIRANI FAN ( s uzorkom ) : < 2 sata - sobna temperatura > 2 sata - termostat NAJČEŠĆE GREŠKE : - nije se pričekalo da ALKOHOL ISHLAPI, prilikom dezinfekcije gumenog čepa «fan-a» ili prilikom dezinfekcije mjesta venepunkcije - palpirala se vena nakon dezinfekcije,a prije venepunkcije INTRAVASKULARNI KATETER - dezinficirati kožu oko katetera 70%-tnim alkoholom pričekati da alkohol ISHLAPI aseptički izvući kateter sterilnim škarama odrezati distalni kraj katetera (max. duljina 5 cm) odložiti ga u sterilnu posudu (npr. kontejner za urin ili sterilna epruveta sa čepom) KATETER SE NE SMIJE UBADATI U TRANSPORTNI MEDIJ !!! Tako bi se dobio neodgovarajući rezultat. POHRANA : < 15 min – sobna temperatura >15 min < 24 sata – temp. hladnjaka ( +4°C ) NAJČEŠĆA GREŠKA : - kateter je uboden u transportni medij i tako dostavljen u laboratori TKIVO ( bioptat ) - - komadić tkiva uzetog iz primarno sterilnog medija odložiti u sterilnu posudu, u koju je prethodno aseptički naliven odgovarajući volumen sterilne fiziološke otopine ( da bi se spriječila dehidracija ) ukoliko se očekuju ANAEROBI, tkivo treba uroniti u transportni medij POHRANA : < 2 sata : sobna temperatura (što hitnija dostava!) > 2 sata : temp. hladnjaka (+4°C) – IZBJEGAVATI 1. bioptat opekline - učiniti toaletu («debridman»), čime se mora odstraniti nekrotično tkivo i kontaminirani ili kolonizirani sekret isprati sterilnom fiziološkom otopinom odložiti u sterilnu posudu s dodanom sterilnom fiziološkom otopinom 2. bioptat dekubitusa - antiseptikom učiniti toaletu obilno isprati sterilnom fiziološkom otopinom, da se otplavi antiseptik aseptički učiniti bioptat odložiti u sterilnu posudu s dodanom sterilnom fiziološkom otopinom 3. stomatološki bioptat (gingivalni, interdentalni, periodontalni, periapikalni) - antiseptikom učiniti toaletu obilno isprati sterilnom fiziološkom otopinom, da se otplavi antiseptik sterilnim instrumentom (npr. kireta) sastrugati komadić tkiva i ODMAH ga inokulirati u transportni medij (potencijalni patogeni su anaerobi) OBAVEZNO pohraniti na sobnoj temperaturi NAJČEŠĆE GREŠKE : - tkivo nije čuvano inokulirano u transportni medij na sobnoj temperaturi, a očekuju se anaerobi - tkivo je odloženo u sterilnu posudu bez dodatka sterilne fiziološke otopine, te je dehidrirano dostavljeno u laboratorij LIKVOR - dezinficirati kožu mjesta punkcije dobiveni likvor inokulirati u STERILNU EPRUVETU (zatvoriti je originalnim čepom) i na HRANJIVE PODLOGE : kruta i tekuća (u / na svaku vrstu podloge inokulirati 20-ak kapi likvora) POHRANA : - IZBJEGAVATI ODLOŽENU DOSTAVU! DOSTAVITI U RUCI DOSTAVLJAČA, jer se ne smije dozvoliti da se likvor ohladi!!! Do trenutka dostave, ev. pohraniti uzorak u termostat. NAJČEŠĆE GREŠKE : - likvor nije inokuliran u sterilnu epruvetu – bez dodataka za biokemijske pretrage!!! - likvor je dostavljen ohlađen ispod temperature tijela - likvor nije čuvan do dostave u termostatu ŽELUČANI SADRŽAJ («aspirat želuca») - to je sadržaj dobiven oro- ili naso-gastričnom sondom (i / ili uz instilaciju sterilne fiziološke otopine – lavat) uzorak se uzima rano ujutro prije prvog obroka bolesnika i prije njegovog ustajanja POHRANA : < 2 sata – sobna temperatura > 2 sata - temp. hlanjaka ( +4°C ) STOLICA - uzeti stolicu veličine dva graška i odložiti u sterilnu posudu (posuda s navojem i žličicom) - bitno je uzeti PRAVILNU KOLIČINU stolice, jer je samo za - virološku obradu neophodan 1 gram! treba naročito izabrati i eventualno krvavavo-sluzave dijelove stolice preporuča se uzeti 2-3 uzorka stolice sakupljana tijekom 2-3 dana – za bakteriološku obradu te 3-4 uzorka tijekom 10-ak dana – za parazitološku obradu POHRANA: < 2 sata : sobna temperatura > 2 sata : temperatura hladnjaka (+4°C) NAJČEŠĆE GREŠKE: - dostavljena je premalena količina stolice, a očekuje se bakteriološka, parazitološka i virološka analiza - naziv „koprokultura“ je naziv za posebnu parazitološku analizu, a ne za bakteriološku analizu - dostavljen je 1 (jedan) uzorak stolice, a očekuje se parazitološka analiza - dostavljena su 3 (tri) uzorka stolice za parazitološku analizu, ali uzorci nisu sakupljani tijekom minimalno 10-ak dana, nego dan za danom ili je stolica dobivena jednom defekacijom podijeljena u 3 (tri) posudice za stolicu - kod kontrole bakterijskog kliconoštva nisu se pravili razmaci od minimalno tjedan dana, između davanja pojedinog uzorka stolice, nego su dostavljeni uzorci uzimani dan za danom ili je stolica dobivana jednom defekacijom podijeljena u tri različite posudice! - očekivati uspješnu analizu „na Enterobius vermicularis“ iz uzorka stolice OBRISAK REKTUMA - ovaj uzorak uzeti samo iznimno, ukoliko se ne može dobiti uzorak - stolice bris uvesti kroz analni otvor, analnim kanalom „ići“ prema rektumu (3-5 cm duboko). Tamo bris zadržati i rotirati da se upije sekret u vatu glave brisa na pravilno uzetom uzorku, moraju se vidjeti čestice stolice na glavi brisa uzeti obrisak inokulirati u transportni medij POHRANA: < 2 sata : sobna temperatura > 2 sata : temperatura hladnjaka ( +4°C ) NAJČEŠĆE GREŠKE: - dostavljen je „suhi bris“ - bez inokulacije u transportni medij - od ovog se uzorka „puno očekuje“, u smislu dobivenih rezultata mikrobiološke pretrage PERIANALNI OTISAK - ujutro, prije higijene i defekacije – ljepljivu traku s predmetnog - stakalca nalijepiti na analni otvor uz pritisak jagodice prsta u nabore anusa potom, ljepljivu traku nalijepiti natrag na predmetno stakalce ovim postupkom zalijepimo jajašca Enterobius vermicularis-a s anusa, ukoliko su odložena u toku noći te prisutna u perianalnom području preporuča se ponavljati ovaj postupak 3-5 jutara (3-5 uzoraka) tijekom 10-ak dana, jer se paraziti ne izlučuju kontinuirano, nego sporadično. Stolica nije dobar uzorak, ukoliko se traži prisustvo Enterobius vermicularis-a. POHRANA: sobna temperatura ili temperatura hladnjaka NAJČEŠĆE GREŠKE: - uzorak nije uziman prije izvođenja higijene i/ili defekacije - večer prije uzimanja uzorka – analni je otvor tretiran nekom njegujućom kremom - nije uzimano nekoliko analnih otisaka tijekom 10-ak dana, nego se dobar rezultat očekuje od jednog uzorka - dostavi se stolica, a očekuje se Enterobius vermicularis !!! URIN a) “srednji mlaz„ - spolovilo, kao i cijelu anogenitalnu regiju, oprati nekoliko puta sapunom - i vodom. Ova higijena mora biti „hiperhigijena“ u odnosu na uobičajenu higijenu. apstinirati od mokrenja min. 4 sata, ukoliko je moguće; najbolje je uzeti prvi jutarnji urin, jer je najkoncentriraniji razmaknuti labije / povući prepucij prema tijelu prvi mlaz intenzivno ispustiti (izmokriti) – time se „ispere“ distalna uretra, čime se odstranjuju bakterije koje su sastavni dio fiziološke flore ne prekidajući mokrenje – uhvatiti „srednji“ mlaz u sterilnu posudu. Pri tome paziti da se ne mokri po prstima, kao ni po sluznici ili koži spolovila mokriti slobodno do kraja, ne „hvatajući“ urin u posudu ZAGAĐENI (KONTAMINIRANI) URIN : je urin „prvog“ mlaza, kao i urin dobiven bez prethodne „hiperhigijene“. Ovakav urin sadrži bakterije koje normalno obitavaju u području anogenitalne regije, a sastavni su dio fiziološke flore kože, sluznice, distalne uretre i debelog crijeva. Iz kontaminiranog uzorka nije moguće izvršiti mikrobiološku analizu. NAJČEŠĆE GREŠKE : - uzorak je uziman bez prethodne temeljite „hiperhigijene“ spolovila - prilikom mokrenja nisu bile razmaknute velike usne (labije), tj. povučena koža spolovila (prepucij) - pa je urin tekao po koži i sluznici spolovila - prilikom mokrenja urin je tekao po prstima kojima držimo spolovilo - uzimanje urina u bočicu – je započeto prerano – nije dovoljno dugo „pušten prvi mlaz“ - pa nije isprana distalna uretra - bočica za urin je hotimično ili nehotično otvarana satima / danima prije akta uzimanja uzorka - poklopac bočice ili unutrašnja strana bočice je - dirana prstima - do dostave je urin bio pohranjen izvan temperature hladnjaka, a prošlo je više od 2 ( dva ) sata od uzimanja - do dostave u laboratorij – urin je „čuvan“ na toplom mjestu (u džepu, „na suncu“ i sl.) b) kateter – urin - podrazumijeva urin dobiven kateterom 1. RAVNI, PRIVREMENI, KATETER - oprati uretralno ušće vodom i sapunom i /ili prikladnim antiseptikom isprati sterilnom fiziološkom otopinom obrisati ušće sterilnim tupferom aseptički uvesti kateter u mokraćni mjehur pustiti prvi volumen mokraće ( oko 15 cm³ ) - slobodno da „ispere“ eventualne komenzale, Tek tada uzeti urin kao uzorak, u sterilnu posudu (KOMENZALI su bakterije koje koloniziraju (naseljavaju) neko područje, ali ne izazivaju infekciju) 2. TRAJNI KATETER - izbjegavati za uzimanje uzorka urina, jer je trajni kateter obično - - - koloniziran bakterijama i egzo- i endoluminalno dezinficirati kateter 70%-tnim alkoholom - na sredini između tijela bolesnika i prvog spoja s drugim dijelom sistema (spojevi različitih sistema su mjesta koja su češće od ostalih dijelova tog istog sistema – kolonizirani tj. naseljeni bakterijama) nakon što alkohol ISHLAPI, štrcaljkom i iglom uzeti 5-10 ml urina, te ga aseptički aplicirati u sterilnu posudu (ili ga dostaviti u istoj štrcaljki) NAJČEŠĆE GREŠKE: uzorak urina je uziman iz vrećice sistema trajnog katetera nije provedena dezinfekcija mjesta punkcije katetera uzorak iz sistema trajnog katetera izabran je kao dobar uzorak otkrivanja potencijalnog izročnika infekcije c) urin dobiven suprapubičnom punkcijom - nakon dezinfekcije kože učiniti punkciju - urin dobiven punkcijom aseptički aplicirati u sterilnu posudu (ili ga dostaviti u istoj štrcaljki) b) urin sakupljan u „vrećicu“ - ova vrsta uzorka prilično je zastupljena metoda dobivanja uzorka urina - u pedijatrijskoj populaciji. Međutim, ovom metodom ne možemo dobiti, u većini slučajeva, nezagađeni uzorak; nemoguće je izbjeći fiziološku floru distalne uretre, a često je ovaj uzorak zagađen i bakterijama doplavljenim iz anogenitalnog područja. Zato se preporuča : oprati spolovilo i cijelo anogenitalno područje vodom i sapunom – nekoliko puta („hiperhigijena“) oprano područje osušiti sterilnom gazom (ili dobro izglačanim ručnikom ili izglačanom tekstilnom pelenom) na tako pripremljenu, suhu kožu spolovila – zalijepiti vrećicu – ne dodirujući je s unutarnje strane; također – ne dodirivati kožu nakon pranja, a prije ljepljenja vrećice ZAGAĐENI (KONTAMINIRANI) UZORAK NIJE PRIHVATLJIV ZA MIKROBIOLOŠKU ANALIZU, pa će se postupak uzimanja morati ponavljati – dok se ne dobije odgovarajući uzorak! POHRANA: URIN - dobiven bilo kojim načinom - pohraniti: < 2 sata: sobna temperatura > 2 sata: temperatura hladnjaka (+4°C) NAJČEŠĆE GREŠKE : - oprana koža je dodirivana prstima prije ljepljenja vrećice - vrećica se pokušava zalijepiti na još vlažnu (neosušenu) kožu - nakon pranja, koža je obrisana neizglačanim ili već upotrebljenim ručnikom OBRISAK URETRE a) muškarac - upozoriti bolesnika da ne smije mokriti prije pretrage minimalno 4 sata, - te da izvrši higijenu spolovila vodom i sapunom neposredno prije uzimanja obriska, povući prepucij prema tijelu, te ušće uretre očistiti tupferom namočenim sterilnom fiziološkom otopinom - ukoliko postoji ISCJEDAK – uzeti ga brisom ili direktno kapnuti na - - - predmetno stakalce (sušenje, konzultacija liječnika mikrobiologa). Ovakav obrisak je potrebno ODMAH dostaviti u mikrobiološki laboratorij u ruci, da se spriječi hlađenje ispod tjelesne temperature i da se spriječi sušenje uzorka. Uputnije je da se ova vrsta uzorka uzima u mikrobiološkom laboratoriju!!! namočiti briseve (s tankom pamučnom glavom) sterilnom fiziološkom otopinom (PRVI BRIS – za analizu na mikoplazme (Ureaplasma urealythicum i Mycoplasma hominis), DRUGI BRIS - za analizu na Chlayidia-u trachomatis, TREĆI BRIS – za analizu prisustva HPV -a) ne dodirujući kožu glansa – uvesti bris u uretru 2-4 cm duboko i rotirati bris oko 2-3 sekunde. Efikasno izbrisati stijenku uretre, da bismo u uzorku dobili STANICE, jer će se iz ovog uzorka analizirati intra- i epicelularni mikroorganizmi! ZA DOBRU DIJAGNOSTIKU HPV – a, OBAVEZNO DOBRO OBRISATI VANJSKO SPOLOVILO, naročito mjesta ispod prepucija i sve nabore, kao i kožu oko spolovila. SAMO OBRISAK URETRE NIJE DOVOLJNO DOBAR UZORAK! - za dokazivanje prisutnosti Trichomonas vaginalis – a u uretri muškarca – najbolji je uzorak URIN ( PRVI MLAZ!). Preporuča se uzimanje ovog uzorka u mikrobiološkom laboratoriju, radi očuvanja vitalnosti mikroorganizma (urin se ne smije ohladiti ispod temperature tijela). b) žena - uzorak uzeti prilikom ginekološkog pregleda upozoriti bolesnicu da ne smije mokriti minimalno 4 sata pripremiti briseve s tankom glavom namočiti ih sterilnom fiziološkom otopinom, kao i jedan sterilni tupfer obrisati ušće uretre sterilnim tupferom i I (prvim) brisom, koji se mora odbaciti! II (drugi bris), pa potom, III (treći) uvesti u uretru i rotirajući ih efikasno izbrisati stijenku da bismo dobili STANICE (analiza intra- i epi-celularnih mikroorganizama) POHRANA UZORAKA URETRE: - uzorci se pohranjuju na temperaturu hladnjaka (+4°C) - uzorak za - - MIKOPLAZME (uključuje Ureaplasma-u urealythicum i Mycoplasma-u hominis ) mora se razmutiti u transportnom mediju, koji se potom sprema do dostave u hladnjak uzorak za analizuKLAMIDIJE ( imunofluorescentna metoda ) mora se nanijeti (natapkati) na jažicu stakalca „seta za klamidije“ te se nakon sušenja mora preliti tekućinom iz plastične ampule iz seta. Kada s e i to osuši, cijeli se set sprema u hladnjak do trenutka dostave. uzorak za analizu KLAMIDIJEi /ili HPV – a (PCR metoda) uroniti u odgovarajući transportni medij i pohraniti u hladnjak do dostave NAJČEŠĆE GREŠKE: - obrisak je uzet, a nije prošlo minimalno četiri sata od posljednjeg mokrenja (mlaz mokraće otplavi i potencijalne patogene!) - obrisak je uzet prenježno (nisu obrisane stanice, a očekuju se epi- i intra- celularni mikroorganizmi) - bris ja uveden preplitko u uretru (neodgovarajući materijal za analizu) - prvi obrisak nije odbačen, nego je poslan kao uzorak za analizu (takav obrisak sadrži površinske epitelne stanice i / ili sluz, te je i u jednom i u drugom slučaju onemogućena odgovarajuća analiza) EJAKULAT - - - preporučljivo je seksualno apstinirati nekoliko dana prije davanja uzorka obvezno naglasiti bolesniku da, prije akta uzimanja ejakulata, mokri i izvrši temeljitu higijenu spolovila vodom i sapunom, da se izbjegne zagađenje uzorka bakterijama koje su sastavni dio fiziološke flore distalne uretre i kože spolovila ejakulirati u sterilnu bočicu sa širokim otvorom, ne dodirujući prstima unutrašnju stijenku bočice POHRANA : < 2 sata: sobna temperatura > 2 sata: temperatura hladnjaka (+4°C) NAJČEŠĆE GREŠKE: - nije učinjena prethodna odgovarajuća toaleta - nije mokrio prije toalete i uzimanja uzorka OBRISAK CERVIKSA - uzorak uzeti prilikom ginekološkog pregleda - upotrijebiti briseve s debljom pamučnom glavom - prikazati porciju pomoću spekula - sterilnim tupferom odstraniti sluz i floru rodnice - I (prvi) obrisak odbaciti (to je sluz i flora rodnice). Tek potom, sljedećim brisevima, efikasno obrisati endocerviks - II (drugi) obrisak uzeti kao uzorak za eventualnu „bakteriološku analizu“ - III (treći) obrisak uzeti kao uzorak za analizu „na mikoplazme“ - IV (četvrti) obrisak uzeti kao uzorak za analizu KLAMIDIJE i /ili za analizu HPV - a POHRANA: - uzorci se pohranjuju na temperaturu hladnjaka (+4°C) - uzorak za AEROBE uroniti u transportni medij i pohraniti na sobnoj - - temperaturi, zbog očuvanja vitalnosti mikroorganizama uzorak za MIKOPLAZME (uključuje ureplazmu i mikoplazmu) mora se razmutiti u transportnom mediju, koji se potom sprema do dostave u hladnjak uzorak za KLAMIDIJU (imunofluorescentna metoda) mora se nanijeti (natapkati) na jažicu (prozirni dio stakalca) „seta za klamidije“ te se nakon sušenja mora preliti fiksatorom iz plastične ampule iz seta. Kada se to osuši, cijeli se set sprema u hladnjak ( +4°C ) do trenutka dostave. uzorak za KLAMIDIJU (PCR metoda) i / ili uzorak za HPV – analizu razmutiti u odgovarajući transportni medij i pohraniti u hladnjak. NAJČEŠĆE GREŠKE : - nije odstranjena sluz, sterilnim tupferom i odbačenim prvim obriskom, s mjesta odakle će se uzeti materijal za analizu - nije uzorak uzet dovoljno energično, pa nema dovoljno ili nema uopće materijala koji je potreban za uspješnu analizu (lažno negativan nalaz!) - obrisani materijal nije „natapkan“ na jažicu stakalca seta za klamidije, nego je nehotično raznesen, tj. razmazan na neprozirni dio stakalca Kod asimptomatskih bolesnika sa sumnjom na klamidijsku infekciju ili kod sumnje na kontaktno kliconoštvo, trebalo bi se uzorak obraditi molekularnom metodom detekcije (PCR), jer je metoda daleko osjetljivija, nego dijagnostika direktnom imunofluorescencijom. SADRŽAJ MATERIŠTA ili PRODUKT KONCEPCIJE - uzorak tkiva uzeti „zaštićeno“ (dvoluminalnim kateterom) - aseptički inokulirati u anaerobni transportni sistem (materijal uroniti u - transportnu podlogu) ukoliko je sadržaj tekuć ili rijedak – inokulirati aseptički u anaerobnu „fan – bočicu“ ( narančasti čep, 5 – 10 cm³ ); ili volumen manji od 5 cm³ inokulirati u „fan – bočicu“ sa žutim čepom – na identičan način kao što se inokulira krv za hemokulturu ( alkoholom dezinficirati gumeni čep „fana“, pričekati da alkohol ishlapi, potom inokulirati sadržaj ) Pohraniti do dostave na sobnoj temperaturi (ili u odgovarajući „fan“, u termostatu) – zbog očuvanja vitalnosti anaeroba!!! OBRISAK RODNICE - dijagnostika se svodi na kultivaciju kao i na mikroskopsko - - pretraživanje tzv. direktnog preparata uzorka na „licu mjesta“ - uz bolesnicu – čime se može evidentirati prisutnost Candida sp., Trichomonas vaginalis – a; prikaz tzv. „clue-stanica“ koje govore u prilog prisustva Gardnerella-e vaginalis ; nalaženje inficiranih leukocita (PMN - polimorfonukleara) Gram - negativnim diplokokima (Neisseria gonorrhoeae). za dokaz N. gonorrhoeae kultivacijom potrebno je materijal inokulirati u poseban transportni sistem (ev. s proizvodnjom CO2) zbog očuvanja vitalnosti gore navedenog mikroorganizma i odmah dostaviti u laboratorij. Uzorak ne pothlađivati ispod temperature tijela . kultivacija uzorka za dokaz Trichomonas vaginalis je moguća, ali također prilično zahtjevna. Uzorak se odmah uz bolesnicu mora inokulirati u odgovarajući tekući medij, koji je prethodno zagrijan na - temperaturu tijela, te ga tako toplog što prije dostaviti u mikrobiološki laboratorij (u ruci ili grijaču na 37º C) za dokaz prisustva Gardnerella – e vaginalis , ßHS“B“ i Candida – e species uzorak uroniti u „gel – transportni medij“ i pohraniti u hladnjak ( +4C
© Copyright 2024 Paperzz
