遺伝子機能解析フナコシニュース 2014 年 12 月 15 日号（No.579） funakoshi news NEW 遺伝子機能解析遺伝子改変ベクターゲノム編集に有用な HR ドナーベクター PrecisionX HR Targeting Vector ［製品ページ番号：7942］ 20 ※TALE Nuclease 関連製品については，フナコシホームページ（製品ページ番号：7362）をご覧下さい。 ※CRISPR 関連製品については，フナコシホームページ（製品ページ番号： 7686）をご覧下さい。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 ● 相同組換えにより，目的遺伝子に GFP を組み込むためのターゲティングベクターです。 ● 細胞内での目的遺伝子産物の局在や動態の解析に最適です。 ● 選択マーカー（Puro または Hygro 耐性および RFP）により，相同組換えを起こした細胞株を選択できます。フレームシフトを起こさずに，GFP-PolyA を目的遺伝子の 3' 末端に連結させるベクターです。 GFP-PolyA AmpR MCS MCS Multiple Cloning Sites LoxP Sites Replication Insulator Sequences T2A-GFP-PolyA を目的遺伝子の 3' 末端に連結させるベクターです。ホストゲノムに導入したカセットは，Cre リコンビナーゼを一過性 GFP の発現は，バイシストロニック発現用配列 T2A を使用するため，発現させることにより除去することができます。目的遺伝子の機能に影響を及ぼす可能性がある際に有用です。インスレーター配列により，ホストゲノムのクロマチン環境に依存 EcoRI BamHI, Sphl MCS1 RFP-T2A-Puro-PolyA MCS2 MCS #HR110PA-1 5,767 bp AmpR Multiple Cloning Sites LoxP Sites Insulator Sequences Replication 本紙に掲載されている製品はすべて研究用ですお問い合わせ先試薬ＴＥＬ０３５ - ６８４１ - ６２０ＦＡＸ０３５ - ６８４１ - ７７５ Spel, BsrGI, Bsal 品名 AmpR MCS2 Gene Knock-Out HR Targeting Vector with TK selection [MCS1LoxP-EF1 α -GFP-T2A-Puro-P2A-hsvTK-pA-LoxP-MCS2] SBI HR210PA-1 10 µg / 168,000 Gene Knock-Out HR Targeting Vector [MCS1-EF1a-GFP-T2A-PuropA-MCS2] NEW SBI HR410PA-1 10 µg / 150,000 Gene Knock-Out HR Targeting Vector [MCS1-EF1a-RFP-T2A-HygropA-MCS2] NEW SBI HR510PA-1 10 µg / 150,000 ノックインターゲティングベクター発現カセットを任意にカスタマイズ可能です。 EcoRI, Sacl, KpnI, Nrul, Nsil, Bglll BamHI, Sphl, Sphl, Hindiii Xbal, Notl BstBi, Sacll MCS MCS PolyA #HR100PA-1 3,856 bp AmpR Replication フレームシフトを起こさずに，GFP-T2A-Luciferase を目的遺伝子の 3' 末端に連結させるベクターです。 BamHI, Sphl EcoRI GFP-T2A-Luci-PolyA Replication 品名メーカー商品コード包装 / 価格（￥） Basic HR Targeting Vector [MCS1-LoxP-MCS2-MCS3-pA-LoxPMCS4] for Gene Knock-In/Out MCS SBI HR100PA-1 10 µg / 136,000 Multiple Cloning Sites LoxP Sites Insulator Sequences EF1 RFP-T2A-Puro-PolyA MCS #HR150PA-1 8,556 bp 包装 / 価格（￥） MCS Multiple Cloning Sites Gene Knock-Out HR Targeting Vector [MCS1-EF1α-RFP-T2A-Puro#HR210PA-1 LoxP Sites pA-MCS2] 5,903 bp R SBI HR110PA-1 10 µg /Sequences 150,000 Amp Replication Insulator GFP-T2A-Puro-P2A-TK-PolyA MCS #HR130PA-1 7,735 bp BbsI, Mult, NotI, Sali, Agel メーカー商品コード EF1 MCS1 RFP-T2A-Puro-PolyA ■ GFP-T2A-Luciferase-PolyA ベクター（#HR150PA-1） BamHI, Sphl EF1 EF1 T2A-GFP-PolyA 選択マーカー（Puro または Hygro 耐性および蛍光（RFP または EcoRI, Sacl, KpnI, Nrul, Nsil, Bglll Xbal, Notl ： RFP-T2A-Puro-PolyA EcoRI GFP AAAACGACGGCCAGT GAA TTC atg gag agc gac gag agc ggc ctg ccc---Glu-Phe -Met Glu-ser-Asp-Glu-Ser-Gly-Leu-Pro--- GFP））により，相同組換えを起こした細胞株を選択できます。 ● EF1 #HR120PA-1 7,672 bp せずに，選択マーカーカセット領域が安定的に発現します。 ● BamHI, Sphl EcoRI ■ T2A-GFP-PolyA ベクター（#HR130PA-1）ノックアウトターゲティングベクター ● ● ■ GFP-PolyA ベクター（#HR120PA-1，#220PA-1）タンパク質コード領域およびタンパク質非コード領域（miRNA や LncRNA）を標的としたゲノム編集に最適なベクターです。 TALE Nuclease や CRISPR-Cas9，ZFN と組み合わせて使用することも可能です。新たに GFP タグ融合用ターゲティングベクターが追加されました。 NEW GFP タグ導入用ターゲティングベクター AmpR Replication ■ IRES-GFP-PolyA（#HR180PA-1） IRES-GFP-PolyA を目的遺伝子の 3' 末端に連結させるベクターです。目的遺伝子中にストップコドンが存在していたり，目的遺伝子がインフレームに存在していても，GFP の発現は IRES により制御されるため，その発現に影響を及ぼしません。miRNA，lincRNA といったタンパク質非コード遺伝子の発現のモニタリングに最適です。 EcoRI, Sacl, Nrul, Nsil BamHI, Sphl Xbal EF1 RFP-T2A-Puro-PolyA IRES-GFP-PolyA MCS #HR180PA-1 7,565 bp AmpR Replication GFP-Fusion HR Targeting Vector [GFP-pA-LoxP-EF1α-RFP-T2APuro-pA-LoxP-MCS] NEW SBI HR120PA-1 10 µg / 150,000 GFP-Fusion HR Targeting Vector [GFP-pA-LoxP-EF1a-RFP-T2AHygro-pA-LoxP-MCS] NEW SBI HR220PA-1 10 µg / 150,000 T2A-GFP Co-Expression HR Targeting Vector [T2A-GFP-pA-loxP-EF1 α -RFP-T2A-Puro-pA-LoxP-MCS] NEW SBI HR130PA-1 10 µg / 150,000 GFP-T2A-Luciferase Co-Expression HR Targeting Vector [GFP-T2ALuc-pA-loxP-EF1 α -RFP-T2A-Puro-pA-LoxP-MCS] NEW SBI HR150PA-1 10 µg / 150,000 IRES-GFP Co-Expression HR Targeting Vector [IRES-GFP-pA-loxPMCS1-EF1 α -RFP-T2A-Puro-pA-LoxP-MCS2] NEW SBI HR180PA-1 10 µg / 150,000