抗体アレイ及び抗体固定化用基板のご紹介住友ベークライト株式会社Ｓ－バイオ事業部 -1- SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. 抗体アレイ及び抗体固定化用基板の特長  当社独自の低吸着表面処理技術により低いバックグランドを提供します。 ⇒ 高Ｓ／Ｎ比。  ﾌﾞﾛｯｷﾝｸﾞ剤（BSA,ｽｷﾑﾐﾙｸなど）の選定の手間が不要です。抗体固定化用基板  ﾊﾞﾗﾂｷのない安定したバックグランドを提供します。（スライドガラス形状）  基板は表面処理方法が異なる３種の中よりお選び頂けます。 →簡便に、かつ高感度にタンパク質の発現解析が可能 -2- 抗原抗体反応の蛍光検出例 SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. 低吸着表面処理技術とは？ 1. 非特異的吸着が抑制される 2. DNA, タンパク質等の生体関連分子の固定化が可能 3. 固定化された生体関連分子の活性が維持される表面の断面構造（模式図） AFM 画像 1 : Control 2 : TGF-b 3 : Erythropoietin 4 : Histone H1 固定化用官能基 1 1 2 2 5μm 低吸着ポリマー層 3 3 プラスチック基板 4 4 通常の低吸着表面処理されたポリプロピレンポリプロピレン -3- SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. 特長１：低いバックグラウンド ● 抗原抗体反応によるシグナル／バックグラウンド値の比較（社内評価例）当社抗体固定化用基板(BS-X1344) Ag+ Ag- 他社製抗体固定化用基板（ガラス） Ag+ Ag- 他社製抗体固定化用基板【評価条件】・固定化抗体 : 抗マウス IgG2a 抗体（濃度 : 3.3mmol/L）・タンパク質 : Cy3標識マウス IgG2a + Cy3標識FBS（ダミータンパク）（IgG2a濃度 : 19nmol/L, FBS濃度 : 市販品の35倍希釈程度）バックグランドが低い為、高Ｓ／Ｎを得る事が可能です。 SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. -4- 特長２：感度が高く、スポット形状が安定他社製品（メンブレン） Antigen conc. 当社製品(BS-X1344) (ng/ml) 100 1 0 PMT=60, Laser=90 PMT=35, Laser=90 PMT=60, Laser=90 項目当社製品他社製品感度 1ng / mL >1ng /mL スポット形状丸丸でない -5- （社内評価例） SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. 特長３：ヒト血清中の複数成分を同時に検出 IL-1b IL-6 ﾋﾄｱﾙﾌﾞﾐﾝ【評価条件】・固定化抗体：抗ヒト IL-1b 抗体（濃度：3.3mmol/L）抗ヒト IL-6 抗体（濃度：3.3mmol/L ）抗ヒトアルブミン抗体（濃度：3.3mmol/L ）・タンパク質：ヒト血清（含有タンパク濃度：0.16g/dL）血清中成分の非特異吸着を抑制する為、特異的にタンパク質を検出 -6- SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. 応用例１：ヒトサイトカインチップスポット概要 CCD カメラによるスポット後の画像蛍光スキャナによる測定画像 9mm 9mm 計13種類の抗体をスポット（各抗体 5 スポット） 14000 検量線から計算した各サンプル中のサイトカイン濃度 ※ 測定機器 : CRBIO IIe （日立ソフトウェア社製）測定条件 : PMT : 70, Laser : 90 Concentration (pg/mL) 12000 10000 8000 6000 4000 2000  スライドアレイだけでなく、少量検体向きウェルアレイもラインナップ。  血清および血漿中のサイトカイン１３種類のプロファイリング解析を実施。サイトカイン動態解析の可能性を示唆。 -7- 1. I L1β 2. I L3. I 2 L4 4. I L5 5. I L6 6. I L8 7. I L10 8. I L1 3 9. I L1 0. 18 GCS 1 1. F MIP -1β 1 2. TN F-α 1 3. IFN -γ 0 Plasma 25x Plasma 100x Serum 25x Serum 100x SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. 応用例２：アレルゲンの定量 100000 Signal intensity （PMT : 60, Laser : 90） Antibody concentration : 0.975 mg/mL Antibody concentration : 0.244 mg/mL Antibody concentration : 0.061 mg/mL 10000 1000 100 0.1 1 10 100 1000 10000 Allergen protein concentration (ng/mL) 【評価条件】抗アレルゲンタンパク抗体を濃度を変えてスポットし、濃度の異なる Cy3標識した検体（アレルゲンタンパク）と反応。抗原濃度依存性を確認 SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. -8- 抗体固定化用基板特徴一覧表基板品番結合様式固定化の特徴非特異吸着抑制能の特徴 BS-X1343 化学結合・共有結合により強固に抗体を固定化できる・固定化された抗体が配向性を持つことがある特に細胞溶解液では非特異吸着量が少ない傾向がある。 BS-X1344 化学結合・共有結合により強固に抗体を固定化できる・固定化された抗体が配向性を持つことがあるヒト血清でも非特異吸着量が少ない。 BS-X1345 物理吸着・物理吸着によりランダムに抗体が固定化される為抗体が配向性を持たないヒト血清でも非特異吸着量が少ない。  抗体種や反応系に応じた様々な表面処理を施した基板をご用意しております。  抗体アレイ作製を検討されている方、まずはご一報下さい。 -9- SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. 抗体固定化用基板製品表キット内容 •スライド基板 •スポッティング液４ｍＬ •ブロッキング液Ａ２５０ｍＬ •ブロッキング液Ｂ２．５ｍＬ •洗浄液２５０ｍＬ •プロトコル品番品名結合様式非特異吸着抑制枚/ｹｰｽ希望小売価格（税別） BS-X1343 抗体アレイ用基板化学結合細胞内タンパク質等 25 100,000円 BS-X1344 抗体アレイ用基板化学結合血清内タンパク質等 25 100,000円 BS-X1345 抗体アレイ用基板物理吸着血清内タンパク質等 25 100,000円 - 10 - SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. お問い合わせ先住友ベークライト株式会社Ｓ－バイオ事業部マーケティング・営業部担当：五十嵐 E-mail : [email protected] TEL - 11 - : 03-5462-4831 SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD.