O - 住友ベークライト株式会社

®
BRINGING GLYCOMICS TO LIFE ®
O型糖鎖サンプル調製キットBlotGlyco®のご紹介
住友ベークライト株式会社
S-バイオ事業部
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SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD.
®
O型糖鎖サンプル調製キットBlotGlyco®
簡単にO型糖鎖のサンプル調製ができます。
O型糖鎖遊離試薬
プロトコル
クリーンアップカラム
（過剰標識試薬除去用カラム）
BlotGlyco®ビーズ
（糖鎖回収用ビーズ）
反応用チューブ
（BlotGlyco®反応用）
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2 mLサンプルチューブ
（廃液回収用）
SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD.
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本キットによるサンプル調製法
Step1. アンモニウム塩を使用して穏和な条件で
O型糖鎖をタンパク質から遊離させる
O型糖鎖
従来法ではO型糖鎖の
ピーリングが起こり易い
N型糖鎖
O型糖鎖
セリン・
スレオニン
アスパラギン
O型糖鎖
遊離試薬
糖タンパク質
分解
(ピーリング)
遊離後の糖鎖の分解を低減できる
N型糖鎖は遊離されない
従来法と比較して安全かつ簡単な操作
セリン・
スレオニン
アスパラギン
Step2. BlotGlycoビーズを用いてO型糖鎖を精製、
2-ABで標識化する
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SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD.
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従来法(ヒドラジン分解法)との比較
糖タンパク質の一種であるフェツイン（ウシ由来）を試料とし、本キット
を用いてO型糖鎖サンプルを調製、HPLCで分析した。
※ 1mg/mLのウシフェツインを 20μL使用
O型糖鎖
サンプル
調製キット
LCクロマトグラム
-2AB
-2AB
-2AB
-2AB
ヒドラジン分解法
・ヒドラジン分解法と同様にO型糖鎖を回収できる。
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SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD.
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従来法(ヒドラジン分解法)との比較
■ O型糖鎖サンプル調製キットBlotGlyco®
□ ヒドラジン分解法
・ヒドラジン分解法よりもマイルド条件かつ反応時間、温度等を
最適化しているため、分解が抑制できる。
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SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD.
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ピークパターン再現性
※ n=12
50.0
面積%
40.0
30.0
20.0
10.0
0.0
(Hex1)(NeuAc1)
分解物
(Hex1)(HexNAc1)(NeuAc1)
(Hex1)(HexNAc1)(NeuAc2)
(Hex2)(HexNAc2)(NeuAc2)
・繰り返し再現よくO型糖鎖の分析が可能 (C.V. 20%以下)
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SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD.
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ウシムチン由来O型糖鎖の2AB標識糖鎖のLC分析例
※ 1mg/mLのウシムチン(BSM)を 20μL使用
6.0
mV(x100)
(HexNAc)(NeuAc)
ヒドラジン分解
5.0
(HexNAc)(NeuGc)
4.0
3.0
*
2.0
(HexNAc)2(NeuAc)
(HexNAc)2(NeuGc)
1.0
0.0
0.0
2.5
5.0
7.5
10.0
12.5
15.0
17.5
20.0
22.5
25.0
27.5
30.0
32.5
35.0
(x10)
2.50mV
40.0
42.5
45.0
47.5
min
Ｏ型糖鎖サンプル調製キット
(HexNAc)(NeuAc)
2.25
37.5
2.00
1.75
(HexNAc)(NeuGc)
1.50
1.25
1.00
0.75
(HexNAc)2(NeuAc)
*
0.50
(HexNAc)2(NeuGc)
0.25
0.00
0.0
2.5
5.0
7.5
10.0
12.5
15.0
17.5
20.0
22.5
25.0
27.5
30.0
32.5
35.0
37.5
40.0
42.5
45.0
47.5
min
※ 糖鎖組成はMSスペクトルにて確認
*ピーリング産物
・ヒドラジン分解と同様にＯ型糖鎖が回収できる
・他にもブタのムチン（PSM）でも同様に糖鎖のシグナルを検出できている。
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SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD.
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ご注文情報
品名： O型糖鎖サンプル調製キットBlotGlyco®
品番： BS-45450
容量： 10 tests
価格： 85,000円（予価、税別）
☆ ５月下旬発売予定 ☆
お問い合わせ、ご要望等
S-バイオ事業部マーケティング・営業部
Tel: 03-5462-4831
Fax: 03-5462-4835
E-mail: [email protected]
URL: http://www.sumibe.co.jp/product/s-bio
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