トヨパール（ミックスモードクロマトグラフィー）トヨパール TOYOPEARL / TSKgel PW ミックスモードクロマトグラフィー用充填剤（DMF 登録準備中） New TOYOPEARL MX-Trp-650（ミックスモード）ミックスモードゲル TOYOPEARL MXTrp-650Mは親水性ビニルポリマーを基材としたサイズ排除クロマトグラフィー用充填剤TOYOPEARL HW-65（タンパク質排除限界分子量5×10 6）にトリプトファンを導入したFFLC用充填剤で、高吸着量・高分離能で工業用分取に適しています。 ▼ ▼ 特長構造 ●TOYOPEARL HWタイプの特長は全て有しています。 TOYOPEARL HW-65 トリプトファン ●塩濃度の変化で体積変化がありません。 ●pHの変化で体積変化がありません。 ●耐圧性に優れています。 ●TOYOPEARL MX-Trp-650は陽イオン交換型のミックスモードタイプの充填剤です。高い吸着量を示します。 ▼ 主な対象物質 ●タンパク質、ペプチド ●酵素トヨパール（ミックスモードクロマトグラフィー） 160 ミックスモードゲル品名 TOYOPEARL MX-Trp-650M TOYOPEARL MX-Trp-650M 粒子径（膨潤時） M（Medium ；50 〜 100μm）吸着量（g/L） ≧ 75＊1） ≧ 75＊1）容量 25 mL 100 mL M 品番 0022817 0022818 吸着量＊1 ）ヒトガンマグロブリンにて測定価格（円） 30,000 72,000 出荷形態 20 % エタノール水溶液に膨潤した状態で懸濁液として出荷されます。トヨパール（ミックスモードクロマトグラフィー）トヨパール TOYOPEARL / TSKgel PW 抗体の吸着量の比較粒子径イオン交換容量（eq/L）（ミクロン）吸着バッファー（pH 4.7）中の Nacl 濃度 0.10 mol/L（12 mS/cm）動的吸着量（IgG） 0.15 mol/L（17 mS/cm）回収率動的吸着量（IgG）回収率 TOYOPEARL MX-Trp-650M 50 ー 100 0.12 95 g/L 97 % 48 g/L 96 % 市販ミックスモードゲル平均 75 0.07 14 g/L 86 % 11 g/L 85 % 吸着バッファー：0.05 mol/L 酢酸バッファー（pH 4.7）＋ 0.1 mol/L Nacl 流速：212 cm/h DBC：10 % ブレークスルーカーブ ▼ ミックスモードゲルおよび陽イオン交換体におけるIgG の動的吸着量の比較（0.15 mol/L NaCl 存在下、各種 pH） ▼ 細胞培養液からのモノクローナル抗体の精製 mAb DBC ＝ 93 g/L Yield 96 ％ 120 TOYOPEARL MX-Trp-650M TOYOPEARL GigaCap CM-650M TOYOPEARL GigaCap S-650M 市販ミックスモードゲル IgG DBC (g/L) 100 80 60 40 0 20 40 60 80 100 120 140 min 20 カラム；TOYOPEARL MX-Trp-650M（6 mm I.D. × 4 cm） 4 4.3 4.7 吸着溶離液；50 mmol/L 酢酸緩衝液（pH 4.7）＋ 0.1 mol/L NaCl pH 溶出溶離液；0.1 mol/L トリス塩酸緩衝液（pH 8.5）＋ 0.3 mol/L NaCl 流速（吸着）；1.0 mL/min（212 cm/h）流速（溶出）；2.0 mL/min、124 分検　出；UV（280 nm）試　料；CHO 細胞培養液（モノクローナル抗体）試料は、抗体濃度が 1 g/L となるように、吸着溶離液で希釈 60 40 20 0 3.5 8 0.00 mol/L 0.10 mol/L 0.15 mol/L 0.20 mol/L NaCl NaCl NaCl NaCl 4 6 45 40 80 40 30 60 40 20 10 20 0 0 4 5 5.5 6 35 30 25 20 15 0 4.5 %B 10 50 100 F （ab’） 2 80 UV［mAU］ 12 pH Human IgG DBC (g/L) 100 120 50 60 CIP 14 mAb 120 conductivity［mS/cm］ ▼ TOYOPEARL MX-Trp-650Mによる抗体フラグメントの分離 Fc ▼ 動的吸着量における吸着バッファーのpHおよび塩濃度の影響トヨパール（ミックスモードクロマトグラフィー） 0 50 100 150 6.5 200 250 min time Loading buffer pH カラム；6.6 mm I.D. × 2 cm カラム；6 mm I.D. × 4 cm 吸着溶離液；0.1 mol/L 酢酸緩衝液＋ 0.2 mol/L NaCl（pH 4.3）吸着溶離液；0.05 mol/L 酢酸緩衝液（pH 4.0 ー 6.0）＋ 0 ー 0.2 mol/L NaCl 溶出溶離液；0.1 mol/L 酢酸緩衝液＋ 0.4 mol/L NaCl（pH 5.6）溶出溶離液；0.1 mol/L Tris-HCl 緩衝液（pH 8.5）＋ 0.3 mol/L NaCl リニアグラジエント（80 分）流　速；1.0 mL/min（212 cm/h）流　速；0.86 mL/min（150 cm/h）検　出；UV（280 nm）検　出；UV（280 nm）試　料；ヒトポリクローナル IgG（1 g/L）試　料；モノクローナル抗体（凝集体含む）, 1 g/L ●動的吸着量は、ブレークスルーカーブ（10 ％高さ）より算出した。 161