「遺伝子発現・タンパク質機能解析システム」 20%OFF 期間： ProteoTuner™ Tet-One™ No.43 2015年1月7日（水）～3月31日（火）ご注文分まで iDimerize™ Matchmaker™ 遺伝子発現・タンパク質機能解析システムの選択ガイド DNA 転写制御 → 翻訳後制御 タンパク質 RNA DNA タンパク質相互作用 （スクリーニング） mRNA + 何を制御？ 転写mRNA量を制御して、遺伝子発現量を コントロール （12～24 hr） タンパク質の分解／ 安定化をコントロール （～2 hr） タンパク質・タンパク質 間相互作用を抑制 （20～30 sec） 哺乳類細胞におけるテトラサイクリン発現誘 導システム 細胞内目的タンパク質 “量”の迅速・可逆的な コントロールシステム タンパク質間相互作用 （会合／解離）のコント ロールシステム 酵母を用いたタンパク質 間相互作用のスクリー ニングシステム トライアル キャンペーン 対象製品 Tet-One™ Inducible Expression System ProteoTuner™ Shield System iDimerize™ System Matchmaker™ Gold Yeast Two-Hybrid System 特 長 遺伝子発現をドキシサイクリンの用量依存 的に調節。10,000倍を超える遺伝子発現誘 導が可能。 低バックグラウンドであり、毒性遺伝子の発 現にも有効 低 分 子 リガン ド の添 加 ／除去により、標的タン パク質の迅速な安定化 ／分解が可能 低分子リガンドの添加で 目的タンパク質間の相 互作用（会合／解離）を 任意のタイミングでコン トロール。in vivoでの使 用実績あり 偽陽性の出現を大幅に 改良。 in vivoでのスクリーニン グ、未知の新規遺伝子 の取得も可能 （ ）内はコント ロールに要する 標準的な時間 です。 Tet-One™ Inducible Expression System シリーズ NEW 厳密な遺伝子発現制御を簡便に！ 最新のテトラサイクリン遺伝子発現誘導システムです。Tet-On® 3Gタンパク質配列（調節ベクター）とテトラサイクリン応答因子 配列（応答発現ベクター）をワンベクターにしました。 形質転換は1回のみで、発現系の構築が簡単です。 バックグラウンドが低く、ドキシサイクリンに対する感受性も高いため、厳密な遺伝子発現制御が可能です。 No Dox 【 上図： ドキシサイクリン非存在下 】 ヒトPGKプロモーターにより、Tet-On 3Gタンパク質は構成的に 発現しますが、ドキシサイクリン非存在下ではTRE 3Gプロモー ター（PTRE3G）に結合できず、目的遺伝子は転写されません。 Tet-On 3G protein ＋Doxycycline Dox 【 下図： ドキシサイクリン存在下 】 培養液中にドキシサイクリンを添加すると、Tet-On 3Gタンパク 質が構造変化してPTRE3Gに結合し、PTRE3G下流にクローニング した目的遺伝子の転写を活性化します。 Your protein 製 品 名 容 量 製品コード Tet-One™ Inducible Expression System 1 Kit 634301 ¥200,000 ¥160,000 Retro-X™ Tet-One™ Inducible Expression System 1 Kit 634304 ¥280,000 ¥224,000 Retro-X™ Tet-One™ Inducible Expression System (Puro) 1 Kit 634307 ¥280,000 ¥224,000 ラ ご購入に際してライセンス確認書が必要となります。 通常価格 キャンペーン価格 ラ 営 営 営利施設の場合、ご購入前にライセンス（有償）を取得する必要があります。 表示価格はすべて税別です。 ウェブサイト http://www.takara-bio.co.jp 遺伝子発現 ・ タンパク質機能解析システム 20%OFFキャンペーン ProteoTuner™ Shield System シリーズ 2015年1月7日～3月31日ご注文分まで タンパク質の分解・安定化を制御 標的とするタンパク質の安定化と不安定化をコントロールし、細胞内の標的タンパク質量を制御します。 不安定化ドメイン（DD）（約12 kDa）を標的タンパク質に融合発現させるためのpPTuner Vectorと、DDに結合してDD-標的タン パク質をプロテアソームによる分解から保護する低分子化合物 Shield1（750 Da）の、2つのコンポーネントで構成されるシンプ ルなシステムです。 Shield1の添加・非添加により、in vivo レベルで直接標的タンパク質に作用して分解を制御するため、数十分から数時間で極め て迅速かつ可逆的に標的タンパク質量を調節でき、効果的なタンパク質機能解析が可能です。 Shield1の添加による 標的タンパク質の 安定化と蓄積 （通常15～30分） Shield1の非添加 または除去による 標的タンパク質の分解 （通常60～120分） 製 品 名 容 量 製品コード 通常価格 キャンペーン価格 ProteoTuner™ Shield System C 1 Kit 631072 ¥128,000 ¥102,400 ProteoTuner™ Shield System N 1 Kit 632172 ¥128,000 ¥102,400 ■主なアプリケーション ・遺伝子発現調節 ・ゲノム編集 ・クロマチン修飾 ・テロメア ・アポトーシス ・細胞周期 ・エキソサイトーシス ・細胞シグナリング ・イオンチャネル ・メタボリズム ・神経変性疾患 ・癌遺伝子 ・免疫学 ・宿主‐寄生虫相互作用 ・毒物学 ・タウタンパク質 ・in vivo ・iPS細胞 ■参考文献 ・iPS細胞の研究 ： Nakamura, S., et al. (2014) Expandable megakaryocyte cell lines enable clinically applicable generation of platelets from human induced pluripotent stem cells. Cell Stem Cell 14(4): 535-548. ・ALS関連変異タンパク質の研究 ： Watanabe, S., et al. (2013) Accelerated disease onset with stabilized familial amyotrophic lateral sclerosis (ALS)-linked mutant TDP-43 proteins. J. Biol. Chem. 288:3641-3654. ・イオンチャンネルの成り立ちと機能をモニタリング : Schoeber, J. P., et al. (2009) Am. J. Physiol. Renal Physiol. 296, F204-211. ・Znフィンガー型ヌクレアーゼによる遺伝子修復を制御 ： Pruett-Miller, S. M., et al. (2009) PLoS Genetics 5(2):e1000376. 他にも多数の参考文献があります（下記は一例）。 詳細はClontechのUSウェブサイトでご覧になれます。 Protein(s) Regulated with DD Tag + Shield1 細胞／組織／生体 GFP Doc2.1, CDPK4 Luciferase UL96 UL117 HNF4alpha YFP, GSK-3 beta, Securin, p21, CDK1, CD8 alpha, RhoA HeLa、EL4細胞 熱帯熱マラリア原虫 マウス プライマリーヒト包皮線維芽細胞 プライマリーヒト包皮線維芽細胞 Luciferase Rtel1 ZFN PTPN2 ExoY H-Ras IMC8, Centrin2 CaM, Siah-1A TDP-43 15Ink4b 研究分野 PMID 抗原、免疫学 エキソサイトーシス 生体内でのタンパク質安定化調節 ウイルスアセンブリ INS-1細胞 ウイルス複製、DNA合成 タンパク質の制御、遺伝子発現の調節、アポトーシス 22509014 22246776 20147108 21593167 20333247 19835622 NIH3T3、HEK293T、HeLa、COS-1細胞 タンパク質の制御、遺伝子発現制御 16959577 マウス、HCT116細胞 マウス胚性幹細胞 HEK293T、HeLa、NIH3T3細胞 HEK293T細胞 肺微小血管内皮細胞 U251神経膠芽腫細胞 トキソプラスマ原虫 タンパク質制御、遺伝子治療、 in vivo テロメア、DNA複製および修復 遺伝子発現調節、ゲノム編集 癌生物学、癌抑制タンパク質 毒物学、緑膿菌、タウタンパク質 細胞死、細胞シグナリング 細胞質分裂 神経生物学、タンパク質輸送 神経変性疾患 分化、適応免疫応答 18836461 22593209 19214211 21791476 22637478 20713492 20808817 23152621 23235148 22461492 HeLa細胞 Neuro2a細胞 RAW264.7、造血前駆細胞 -2- 表示価格はすべて税別です。 遺伝子発現 ・ タンパク質機能解析システム 20%OFFキャンペーン iDimerize™ System シリーズ 2015年1月7日～3月31日ご注文分まで タンパク質間相互作用を制御 任意のタイミングで目的タンパク質の会合、解離を起こすことができるシステムです。目的タンパク質にiDimerizeドメイン （Dmr）を融合発現させ、膜透過性の低分子リガンドを添加することでタンパク質の相互作用を制御し、タンパク質間相互作用 が細胞機能に与える影響を解析することができます。 A/C Heterodimerizer B/B Homodimerizer （1,017 Da） （1,428 Da） DmrB Domain （約12.5 kDa） DmrA Domain （約12 kDa） DmrC Domain （約10.5 kDa） Activation of Signal Transduction Pathway Activation of Signal Transduction Pathway Heterodimer System 2種類の異なる目的タンパク質をDmrAおよびDmrCとの融合タン パク質として発現。DmrAドメインおよびDmrCドメインへの結合 部位があるリガンドA/C Heterodimerizerの添加により、2種類の 目的タンパク質は会合（ヘテロダイマー化）を起こします。 Homodimer System 目的タンパク質をDmrBとの融合タンパク質として発現。DmrBド メイン結合部位が2か所あるリガンドB/B Homodimerizerの添 加により、目的タンパク質は会合（ホモダイマー化）を起こします。 DmrD reverse dimerization domain D/D Solubilizer （約12 kDa×2） Reverse Dimerization System 目的タンパク質をDmrDドメインとの融合タンパク質として発現。 細胞内ではDmrDドメイン同志がダイマーを形成するため、目的 タ ン パ ク 質 は 自 己 凝 集 状 態 に な り ま す が 、 リ ガ ン ド D/D Solubilizerを添加することで解離します。本システムは細胞内輸 送やタンパク質の分泌制御に利用できます。 （914 Da） Inactive or aggregated protein Active or monomeric protein 製 品 名 容 量 製品コード 通常価格 キャンペーン価格 iDimerize™ Inducible Homodimer System 1 Set 635068 ¥183,000 ¥146,400 iDimerize™ Inducible Heterodimer System 1 Set 635067 ¥183,000 ¥146,400 iDimerize™ Reverse Dimerization System 1 Set 635066 ¥183,000 ¥146,400 ■主なアプリケーション ・シグナル伝達 ・アポトーシス ・転写誘導 ・イオンチャネル ・タンパク質再局在化 ・膜脂質コンテンツ ・膜ダイナミクス ・酵素活性 ・RNAスプライシング ・DNAループ ・タンパク質分泌 ■参考文献 ・DNA損傷応答タンパク質53BP1のDNA損傷部位への誘導に関する研究： Fradet-Turcotte, A., et al. (2013) 53BP1 is a reader of the DNAdamage-induced H2A Lys 15 ubiquitin mark. Nature 499(7456): 50-54. ・角膜炎症における常在性骨髄系細胞の役割： Chinnery, H.R., et al. (2009) Bone marrow chimeras and c-fms conditional ablation (MaFIA) mice reveal an essential role for resident myeloid cells in lipopolysaccharide/TLR4-induced corneal inflammation. J. Immunol 182:2738-2744. 他にも400件以上の参考文献があります（下記は一例）。 詳細はClontechのUSウェブサイトでご覧になれます。 細胞／組織／生体 Protein(s) dimerized Neuroligin Prion protein FGFR2 Caspase 8 Caspase 9 Caspase 9 Fas Cargo receptor p62 FGFR1 APP Mpl 研究分野 神経細胞 神経細胞 PMID 神経科学、シグナル伝達 アルツハイマー病、プリオン病、タンパク質構造 発生生物学、シグナル伝達 アポトーシス、癌、シグナル伝達 遺伝子治療 癌、遺伝子治療 幹細胞、シグナル伝達 オートファジー、細胞死 癌、シグナル伝達 アルツハイマー病、神経生物学、シグナル伝達 幹細胞、シグナル伝達 マウス胚盤胞、マウス胚性幹細胞 LN443細胞 幹細胞 T細胞 MaFIAマウス MEF細胞 トランスジェニックマウス N2a細胞 幹細胞、NOD/SCIDマウス -3- 23129658 22993441 22787153 22585859 22110042 21415041 21282381 21220506 20501844 19596858 18174381 表示価格はすべて税別です。 遺伝子発現 ・ タンパク質機能解析システム 20%OFFキャンペーン Matchmaker™ Gold Y2Hシステム 2015年1月7日～3月31日ご注文分まで タンパク質間相互作用解析 出芽酵母の転写活性化因子GAL4を利用したタンパク質相互作用解析システムです。多検体アッセイが可能で、タンパク質 精製を必要とせず、真核生物である酵母の中でアッセイが可能です。また、高価な実験器具を必要としない利点があります。 偽陽性を低減した酵母ツーハイブリッドシステム GAL4応答性プロモーターの下流にレポーター遺伝子をもつ酵母宿 主株に、GAL4 DNA-BD（DNA結合ドメイン）を融合したbait （おと り）の発現プラスミドと、GAL4 AD（転写活性化ドメイン）を融合した prey（獲物）の発現プラスミド（ライブラリー）を導入します。 酵母中で融合発現したbaitとpreyが相互作用すると、GAL4転写活 性が再構成され、レポーター遺伝子が発現します。レポーター遺伝 子の発現を選択培地での生育やレポーター活性により検出し、タン パク質-タンパク質間相互作用を解析します。 Matchmaker Goldシステムでは、Aureobasidin A（AbA）耐性遺伝 子（AUR1-C）をレポーターに採用し、偽陽性クローンの出現を大幅 に低減しました。薬剤耐性、栄養要求性、青白判定により、簡便か つ厳密なスクリーニングが可能です。 【Matchmaker™ Gold酵母ツーハイブリッドシステムの操作手順】 共培養して接合 DD/-Leu/-Trp + AbA + X-α-Gal QD/-Leu/-Trp/-His/-Ade + AbA + X-α-Gal 酵母Y187株に形質転換済みのpreyライブラリー（例： Mate & Plate Library）とbaitタンパク質を発現するY2HGold株を共培養して接合後、まず2つの レポーターで１次スクリーニングを行います［AUR1-C遺伝子発現によるAbA添加培地での生育とMEL1遺伝子発現によるX-α-Galの分解（青色呈色）］。 得られた陽性クローン候補をさらに4種類のレポーターを利用してスクリーニングすることで、より確実に陽性クローンが得られます。1次スクリーニング の段階で、AUR1-C 遺伝子の発現が見られないクローンは死滅するため、偽陽性クローンの出現は効果的に低減できます。 Quick & Easy Yeast Transformation Mix （製品コード 631851） NEW 簡単、迅速に出芽酵母 S.cerevisiaeを形質転換できます。ライブラリー作製以外の小スケールの形質転換に最適です。コンピテントセルの調 製は不要で、操作は1.5時間以内に終了。液体培養した菌体だけでなく、1ヵ月以内に調製した寒天プレートであれば、コロニーをピックアップし て直接形質転換に用いることができます。 【注】 ライブラリー作製にはYeastmaker Yeast Transformation System 2（製品コード 630439）をご使用ください。 製 品 名 容 量 製品コード 通常価格 キャンペーン価格 1 Set 630489 ¥140,000 ¥112,000 5回 630490 ¥217,000 ¥173,600 Easy Yeast Plasmid Isolation Kit 50回 630467 ¥32,000 ¥25,600 Yeastmaker™ Yeast Transformation System 2 1 Set 630439 ¥73,000 ¥58,400 1 ml × 5 630440 ¥68,000 ¥54,400 1 mg 630466 ¥22,000 ¥17,600 X-α-Gal 25 mg 630407 ¥31,000 ¥24,800 Yeast Media Set 2 Plus 1 Set 630495 ¥85,000 ¥68,000 Quick & Easy Yeast Transformation Mix 20回 631851 ¥34,000 ¥27,200 Matchmaker™ Gold Yeast Two-Hybrid System Make Your Own "Mate & Plate™" Library System Yeastmaker™ Carrier DNA Aureobasidin A ・本パンフレットで紹介した製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意 ください。また、食品、化粧品、 家庭用品等として使用しないでください。 ・タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。 ・本パンフレットに記載された社名および製品名は、特に記載がなくても各社の商標または登録商標です。 ・ライセンス情報については弊社ウェブサイトにてご確認ください。 ・本パンフレット記載の価格は2015年1月7日現在の希望小売価格です。価格に消費税は含まれておりません。 2014年12月作成G 取扱店 東京支店 TEL 03-3271-8553 FAX 03-3271-7282 関西支店 TEL 077-565-6969 FAX 077-565-6995 TaKaRaテクニカルサポートライン TEL 077-543-6116 FAX 077-543-1977 Website http://www.takara-bio.co.jp Facebook http://www.facebook.com/takarabio.jp
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