15－4
成人難治性白血病の分子生物学的特徴に基づく治療法に関す
る研究
主任研究者 名古屋大学大学院医学系研究科
直 江
知
樹
研究成果の要旨
本研究においては、白血病の発症・進展・耐性化に関わる分子・細胞学的な病態を明らかにし、
新たな治療標的分子と標的方法の基礎研究ならびに、治療階層化・予後予測に役立つ診断や新たな
治療法の臨床開発を行うことを目的とした。今年度は白血病関連転写因子 Evi-1、PML 複合体、細胞
周期関連転写因子 FoxM1、AML の予後との関連が指摘されている POX の生物学的意義を明らかにする
とともに、FLT3 キナーゼ阻害剤、キナーゼ阻害剤 VE-465 の基礎的検討を行った。一方、臨床研究と
して日本成人白血病研究グループ（JALSG）との共同で進めたフィラデルフィア（Ph）染色体陽性急
性リンパ性白血病に対するイマチニブ併用化学療法の予後因子に関する研究を行った。
研究者名および所属施設
研究者名
直江知樹
所属施設および職名
名古屋大学大学院医学系研究科 教授
分担研究課題
白血病シグナル伝達を標的とした治療法の開発と研究の
総括
吉田 均
国立がんｾﾝﾀｰ研究所 室長
PML 複合体を標的とした難治性 APL に対する分化誘導療
法の開発のための基礎的研究
黒川峰夫
東京大学医学部附属病院 教授
白血病の分子機構の解明と診断・治療への応用
宮崎泰司
長崎大学医学部・歯学部付属病院
急性骨髄性白血病におけるミエロペルオキシダーゼ発現
講師
の意義
大西一功
浜松医科大学医学部附属病院 教授
細胞周期からみた白血病細胞の分化・増殖に関する蛋白
大屋敷一馬
東京医科大学 教授
質相互作用の解明
ABL/SRC キナーゼ及び BCL-2family 蛋白を標的とした難
治性白血病の分子標的療法の開発
－1－
15－4 成人難治性白血病の分子生物学的特徴に基づく治療法に関する研究
３） 黒川らは、マウス生体内における Evi-1 の機能を
研究報告
解明研究し、Evi-1 は胎生期および成体における造
血幹細胞の維持・増殖に必須であり、同時に白血病
１ 研究目的
化学療法や造血幹細胞移植の進歩によって、60 歳未満
細胞の増殖にも重要な役割を果たしている事を明
の成人急性白血病における 5 年生存率は 30％を達成した
らかにした。Evi は将来的に、抗白血病療法開発の
が、わが国あるいは欧米での大規模臨床研究によればこ
ための標的分子となるかもしれない。
の 10 年以上、その成績は改善していない。また、増加し
４） 宮崎らは、急性骨髄性白血病において白血病芽球
つつある高齢者白血病の成績は未だに不良である。
一方、
のミエロペルオキシダーゼ陽性率がその予後と強
この 20 年間に白血病の分子病態と多様性が明らかにな
く相関している為、MPO 陰性の骨髄性白血病細胞株
ってきた。この一年間に限っても、急性骨髄性白血病
(K562)を用いて発現プラスミドによって MPO 蛋白質
（AML）
における NPM1 変異、
骨髄増殖性疾患における JAK2
を発現する細胞株(K562-MPO)を樹立した。活性型
変異が新たに見出され、白血病の分子パラダイムの広が
MPO を発現させた細胞株でのみ AraC 処理時に細胞増
りが続いている。一方、これまでに成功した分子標的治
殖抑制、ROS 産生の上昇とともにアポトーシス亢進
療（オールトランスレチノイン酸、Abl キナーゼ阻害剤
が観察された。このように、内在性の MPO は酸化ス
イマチニブ）は、いずれも白血病の原因分子を標的とし
トレスの増大を通じて、化学療法への感受性をあげ
た治療法であり、臨床成績を飛躍的に向上させることも
ているのかもしれない。
わかってきた。これらのことは、白血病の分子病態に基
５） 大西らは、白血病細胞株と健常人から得られた末
づく新しい薬剤開発が、白血病治療のブレイクスルーを
梢血単核球の細胞を用いて細胞周期解析を行った
生むであろうことを示唆する。本研究においては、白血
結果、白血病細胞株では正常単核球と比較して
病の発症・進展・耐性化における分子・細胞学的なおよ
FoxM1 遺伝子の発現の亢進が認められた。FoxM1 も
び標的方法の探索・開発に関する基礎研究を行うことを
新規標的分子となりうるかもしれない。
第一の目的とした。また日本成人白血病研究グループ
６） 大屋敷らは、
VE-465 は p185 BCR-ABL、T315I BCR-ABL
（JALSG）との共同で、臨床的意義の高い診断法ならびに
共にキナーゼ活性を IC50 値：2-5μM にて抑制し、
白血病の成績向上に繋がりうる新しい治療法に関する臨
imatinib 併用により K562 細胞においてアポトーシ
床研究（とりわけ第 II 相試験）を推進することを第二の
ス誘導の増加、caspase-3、PARP の活性化及び Akt、
目的とした。
ｃ－Myc の活性低下を観察した。VE-465 は in vivo
においても T315I BCR-ABL キナーゼ活性を阻害し、
２ 研究方法と成果
BaF3BCR-ABL 移植マウス生存期間を延長させた。
１） 直江らは、新規構造を有する FLT3 キナーゼ阻害剤
T315I 変異はこれまで開発された Abl 阻害剤によっ
を見出し、マイクロモル以下の濃度で、FLT3 を選択
て阻害されない変異であったが、今回新たな阻害剤
に抑制する阻害剤 FI-700 ならびに、FLT3 と KIT、KIT
が見出されたことで、克服可能と考えられた。
をより選択的に抑制する阻害剤を見出した。前者は
７） フィラデルフィア染色体（Ph）陽性急性リンパ性
FLT3 ならびに下流シグナルのリン酸化を抑制し、細
白血病（ALL）に対するイマチニブ併用化学療法第
胞株に G1 停止とアポトーシスを誘導した。動物モデ
二相試験 ALL202 試験において、
2002 年 9 月から 2005
ルでの腫瘍選択性と生存延長効果を確認した。
年 1 月までに 80 人名の Ph+ALL が登録され、完全寛
２） 吉田らは、PML はアイソフォーム特異的に骨髄系分
解（CR）率 96.2％が得られた。観察中央期間 26．7
化マスター転写因子 PU.1 と in vivo で複合体を形成
ヶ月の時点で寛解が得られた 77 例の内 28 例が再発
し、PMLIV は PU.1 による好中球分化に協調的に作用
した。この再発に関わる因子を分析したところ、
する事を明らかにした。また、PML-RARA は PU.1 転写
+der(22)t(9;22) や abn(9p), といった二次的な染
因子複合体を解離させ、その転写活性をドミナント
色体異常が予後不良因子であった(p=0.003)。しか
ンネガテイブ様式で抑制する事を確認した。すなわ
し、 BCR-ABL の mRNA コピー数や、アイソフォーム
ち、PML-RARA は RARA のみならず、PU.1 を介した好
は予後不良因子とはならなかった。これらのことは、
中球分化にも影響を与えていることが明らかになっ
今後の Ph 陽性 ALL への新たな治療戦略を考える上
た。
で、重要な所見である。
－2－
15－4 成人難治性白血病の分子生物学的特徴に基づく治療法に関する研究
7:331-7,2006.
３ 倫理面への配慮
8. Yanada,
M.,
chemotherapy
臨床試験計画は、すべて倫理的、科学的および医学的
Naoe,
for
T.,
Imatinib
Philadelphia
combinedhromosomec-
妥当性の観点から、参加施設それぞれの IRB によって審
positive acute lymphoblastic leukemia: major
査され、その承認を得ることを条件とした。臨床検体を
challenges in current practice. Leuk Lymphoma.
用いた研究については、インフォームドコンセントを得
47:1747-53､2006.
たうえで連結可能匿名化を行い、特に遺伝子解析研究に
9. Yanada, M., Naoe, T., et al., Clinical features
ついては「ヒトゲノム・遺伝子解析研究に関する倫理指
and outcome of T-lineage acute lymphoblastic
針」
を遵守し、
各施設の倫理委員会の承認を得て行った。
leukemia in adults: A low initial white blood cell
count, as well as a high count predict decreased
survival rates. Leuk Res. 25;2006.
10. Naoe, T., et al., Nucleophosmin: a versatile
研究成果の刊行発表
外国語論文
molecule
associated
with
hematological
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with
or
without
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component
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a
myeloid
Biotechnol.
－3－
Biochem
M.,
Naoe,
Biophys
T.,
et
Res
al.,
Commun.
Allogeneic
hematopoietic stem cell transplantation as part
of postremission therapy improves survival for
adult
patients
with
high-risk
acute
15－4 成人難治性白血病の分子生物学的特徴に基づく治療法に関する研究
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15－4 成人難治性白血病の分子生物学的特徴に基づく治療法に関する研究
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translocation der(1;7)(q10;p10) defines a unique
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Cells Mol Dis. 36:308-14,2006.
－5－
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