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脳卒中関連遺伝子に関する研究

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Sato, M. et al. Phycol. Res. 62, 214–221 (2014)
Hackenberg, D. et al. Plant Physiol. 163, 1510–1517
(2013)
Hoepflinger, M. et al. J. Exp. Bot. 64, 5553–5568 (2013)
Yang, Y. et al. BMC Res. Notes 4, 330 (2011)
Kato, S. et al. J. Phycol. 47, 999–1008 (2011)
- 355 -
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ࡀ᫂ࡽ࠿࡟࡞ࡿ࡜⪃࠼࡚࠸ࡿࠋ
Ishida, T.,et al., (2014) EMBO rep. In Press.
㸺ᨭ᥼ᡂᯝබ⾲ࣜࢫࢺ㸼
Tabata, R. and Sawa, S. (2014) Frontiers in
Yasuka, Y. et al. (2016) J. Exp. Bot. In press.
Plant Science 04 July; doi:
10.3389/fpls.2014.00311.
Motomitsu, A. st al., (2015) Essays in Biochem.
Miyawaki, et al., (2013) Curr. Opin. Plant Biol.
In press.
16.598- 606.
Shimizu, N., et al., (2015) New Phytologists
Yamada, M., and Sawa, S. (2013). Curr. Opin.
208.1104-1113
Plant Biol. 16. 1-6.
Kinoshita, A., et al., (2015) Plant Signaling &
Tabata, R., et al., (2013) Plant Signaling &
Behavior. 10:6, e1028707
Behavior. 8. e22534
Kinoshita, A, et al., (2015) Development 142.,
444-453.
- 365 -
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Sawabe, T. et al., Front. Microbiol. 4, 414 (2013)
Matsumura, Y. et al., Int. J. Hydrogen Energy 40,
9137-9146 (2015).
- 367 -
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㸺ᨭ᥼ᡂᯝබ⾲ㄽᩥࣜࢫࢺ㸼
Shiina T. et al., Immunogenetics 63, 485-499
(2011)
Arikata M. et al., PLoS One 7, e37220 (2012)
Blancher A. et al., Immunogenetics 64, 605-614
(2012)
de Groot NG. et al., Immunogenetics 64, 615-631
(2012)
Shiina T. et al., Tissue Antigens 80, 305-316 (2012)
Morizane A. et al., Stem Cell Reports 1, 1-10
(2013)
Blancher A. et al., Immunogenetics 66, 219-230
(2014)
Kisu I. et al., J Obst Gynaecol Res. 40, 907-918
(2014)
Kono A. et al., J Immunol. 192, 3239-3246 (2014)
Kisu I. et al., Int J Pharmacol. 40, 907-918 (2014)
Shiina T. et al., Immunogenetics 67, 563-578
(2015)
Morita D. et al., Nature Communications In press.
Kawamura T. et al., Stem Cell Reports In press.
- 368 -
බເᨭ᥼ㄢ㢟㸸2012 ~ 2013 ᖺᗘ ࢝࢖ࢥࡢ⬇ఇ╀ㄏᑟ࡟࠾ࡅࡿ⎔ቃ ᗘ᝟ሗࡢಖᏑ࣭グ᠈ࡢศᏊゎᯒ
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- 372 -
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T., A novel sucrose hydrolase from the bombycoid
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Samia cynthia ricini with a substrate specificity for
sucrose. Insect Biochemistry and Molecular Biology
61:46-52
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1. Shoguchi, E. et al., Curr. Biol. 23, 1399-1408 (2013)
2. Mungpakdee, S. et al., Genome Biol. Evol. 6,
1408-1422 (2014)
3. Shoguchi, E. et al., Genome Biol. Evol. 7, 2237-2244
(2015)
4. Beedessee, G. et al., BMC Genomics 16, 941 (2015)
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Okada, S. et al., Methods in Enzymology, 560,
331-353(2015)
Suzuki, T. et al., Nature Protocols, 10, 715-732
(2015)
Sakurai, M. et al., Genome Research, 24, 522-5
34(2014)
- 392 -
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- 393 -
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Yuuri Yasuoka, Yutaka Suzuki, Shuji Takahashi,
Haruka Someya, Norihiro Sudou, Yoshikazu
Haramoto, Ken Cho, Makoto Asashima, Sumio
Sugano, Masanori Taira (2014). Occupancy of
Tissue-Specific cis-Regulatory Modules by Otx2
and
TLE/Groucho
for
Embryonic
Head
Specification. Nat. Commun. 5, 4322 (article
number).
Ꮫ఍Ⓨ⾲
Yuuri Yasuoka, Yutaka Suzuki, Shuji Takahashi,
Haruka Someya, Norihiro Sudou, Yoshikazu
Haramoto, Ken Cho, Makoto Asashima, Sumio
Sugano, Masanori Taira "Genomics Study of the
Spemann-Mangold Organizer: Occupancy of
Tissue-Specific cis-Regulatory Modules by Otx2
and
TLE/Groucho
for
Embryonic
Head
Specification." 㸦Ᏻᒸࠊཱྀ㢌Ⓨ⾲㸹PD ཱྀ㢌Ⓨ⾲㈹ࢆ
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Saya Imai, Yutaka Suzuki, Shuji Takahashi,
Makoto Asashima, Sumio Sugano, Masanori Taira
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Yuuri Yasuoka, Yutaka Suzuki, Shuji Takahashi,
Norihiro Sudou, Yoshikazu Haramoto, Yukiko
Tando, Kaoru Kubokawa, Ken W. Cho, Makoto
Asashima, Sumio Sugano and Masanori Taira
"Otx2 and TLE/Groucho occupancy marks
tissue-specific cis-regulatory modules for head
specification" ➨ 35 ᅇศᏊ⏕≀Ꮫ఍ᖺ఍ࠊ
⚟ᒸ㸦2012
ᖺ 12 ᭶ 11 ᪥㹼14 ᪥㸧
Yuuri Yasuoka, Yutaka Suzuki, Shuji Takahashi,
Norihiro Sudou, Yoshikazu Haramoto, Yukiko
Tando, Kaoru Kubokawa, Ken W. Cho, Makoto
Asashima, Sumio Sugano and Masanori Taira
"Massively parallel regulation of head and
non-head genes by Otx2, Lim1 and Gsc is based on
evolution of the head organizer in the chordate" ᪥
ᮏⓎ⏕⏕≀Ꮫ఍➨ 45 ᅇ኱఍ࠊ⚄ᡞ㸦2012 ᖺ 5 ᭶ 28
᪥㹼31 ᪥㸧
- 401 -
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ࡿࡀ㸦Hirano et al. JBC, 1996; Morrison et al.
PNAS, 1996㸧ࠊࡇࢀࡣ Apobec1 ࡢ ApoB ࢆ㐺ṇ࡞ࢧ
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Genome Res. 2008; Takada & Shiroishi, Exp.
Anim. 2012㸧ࠋᮏ⏦ㄳㄢ㢟ࡀᑐ㇟࡜ࡍࡿ࢚ࢿࣝࢠ࣮௦
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ࢤࣀ࣒ከᆺ᝟ሗࢆබ㛤ࡋ࡚࠸ࡿࡀ㸦Takada et al.
Genome Res. 2013; Takada et al. Mammal.
Genome 2015㸧ࠊB6-MSM 㛫࡟ࡣࠊᮏ⏦ㄳㄢ㢟ࡀᑐ
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Shibata M., Tomomori-Sato C., Sato S., Ranjan A.,
Seidel CW., Tsukiyama T., Mizushima W., Hayashi
M., Ohkawa Y., Conaway JW., Conaway RC.,
Hatakeyama S.: MED26 regulates the transcription
of snRNA genes through the recruitment of little
elongation complex. Nature Commun., 6, 5941,
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- 409 -
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Ando, M., et al., Am. J. Physiol. 307:R653-R663
(2014)
- 412 -
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Horiuchi, S. et al., J Immunol 186, 6378-6389
(2011)
Hosokawa, H. et al., PNAS 110, 4691-4696 (2013)
Hosokawa, H. et al., PNAS 110, 18626-18631
(2013)
- 421 -
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Tani A., et al., Genome Announc 3(2) e00266-15
(2015)
- 424 -
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- 425 -
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Conference on Bioinformatics Models, Methods
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978-989-758-012-3, 215-220 (2014).
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Islam, M.R. et al., Sci. Rep. 4, 6043 (2014)
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Inami, W. et al., Zool. Sci. (2016) in press
Sousounis, K. et al., eLife
2015;10.7554/eLife.09594. (2015)
Kudo, Y. et al., Toxicon 101, 101-105 (2015)
Endo, Y. et al., IPSJ Transactions on
Bioinformatics 8, 2-8 (2015)
Casco-Robles, M.M. et al., Transgenic Res. 24,
463-473 (2015)
- 431 -
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Nakamura, R. et al., Development, 141, 2568-1580 (2014)
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Collaboration (Mitsui J et al.,) N Engl J Med.
2013; 369: 233-44.
࣭Mitsui J, Tsuji S. Biochem Biophys Res Commun.
2014; 452: 221-5.
࣭Mitsui J et al., Ann Clin Transl Neurol. 2015; 2:
417-426
- 435 -
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ຍ⸨ࡽ, J. Environ. Biotechnol. 10: 63-71 (2010)
ỌᒣࡽJ. Environ. Biotechnol. 13: 51-56 (2013)
Mori, H. et al., DNA Res. 21: 217-227 (2014)
Nagayama, H. et al., Appl. Microbiol. Biotechnol. 99:
4453-4470 (2015)
Kato, H. et al., Genome Announc. 3: e00782-15 (2015)
ຍ⸨ࡽ. ᪥ᮏᚤ⏕≀⏕ែᏛ఍ㄅ 30: 57-64 (2015)
Kato, H. et al., DNA Res. 22: 413-424 (2015)
- 436 -
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Onoda, A.et al., Nucleic Acids Res. 42, 9005-9020 (2014)
Miyaji, M. et al., J. Cell. Biochem. 116, 677-685 (2015)
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1.
Teshima T. Protection of the tissue stem cell
and niche system as a novel approach to
2nd
Australia-Japan
control
GVHD,
Haematology Consortium, Sep 11-12 2015,
Brisbane, Australia.
2.
Hayase E, et al. R-Spondin1 promotes
Paneth cell growth, maintains intestinal
microbial
ecology,
and
ameliorates
graft-versus-host disease, 57th ASH Annual
Meeting, Dec 6th 2015, Orlando, FL, USA.
3.
Teshima T. Emerging concepts on tissue
injury in GVHD. BMT Tandem Meeting 2016,
Feb 18th 2016, Honolulu, HI, USA. (Ⓨ⾲ண
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Ohtsubo Y et al. 2014. Complete genome sequence of
Pseudomonas aeruginosa MTB-1, isolated from a
microbial community enriched by the technical
formulation of hexachlorocyclohexane. Genome
Announcements 2:e01130-13.
Ohtsubo Y et al.. 2014. Complete genome sequence
of Pseudomonas sp. strain TKP, isolated from a
J-hexachlorocyclohexane-degrading mixed culture.
Genome Announcements 2:e01241-13.
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Pseudomonas sp. TKP ᰴ (JCM 19688)
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- 450 -
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Nakanaga, K. et al., J.Dermatol. 40,151-159(2013)
Nakanaga, K. et al., JJID 66,83-88(2013)
Ohtsuka,M.et al.,JAMA Dermatol.150,64-67(2014)
Yotsu, RR. et al.,J. Dermatol. 42,1-9(2015)
Sugawara, M.et al., J. Dermatol. 42,588-595(2015)
- 451 -
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Brawand, D. et al., Nature 513, 375-381 (2014)
Nikaido, M. et al., Genome Biol. Evol. 6, 1135-1144
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Kagoshima and Osaka, Japan, revealed
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- 464 -
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- 466 -
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- 469 -
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