低濃度でノックダウン - 次世代siRNA Silencer® Select siRNA Silencer® Select siRNA は、デザインアルゴリズム、オフターゲット効果予測アルゴリズム、化学修飾LNAなど、さまざまな最新技術を 取り入れて開発された次世代のsiRNAです。 有効性、特異性、安定性において優れた発現抑制効果を提供します。 目的遺伝子のみを正確にノックダウン 推奨濃度はわずか5nM ： siRNAの使用量が多いほど起こるオフターゲット効果と細胞毒性を低減 他のsiRNAに比べると1/10∼1/100のsiRNA量で抑制できる （図1） デザインアルゴリズムを大幅に改良 ： 抑制効果の高いsiRNAの予測精度が従来よりも25％以上向上（図2） 高度なバイオインフォマティクス処理 ： オフターゲット効果のリスクの高い配列を削除 修飾型siRNA ： LNA修飾によりセンス鎖が原因となる疑陽性反応を排除 Silencer® Select は、他社 siRNA と 比較して 1/10 ～ 1/100 の低濃度で 抑制できる Silencer no. 図1. Silencer® Select および他社siRNA の抑制効果の比較 10 個の異なる遺伝子に対するsiRNA をそれぞれ用意し、0.03 ∼ 30nM のsiRNA を使用し て、HeLa 細胞に導入した。各siRNA 濃度についてtriplicate で実験を行ない、48 時間後のmRNA レベルを測定した。結果は各siRNA ごとの残存mRNA レベルの平均値 （%） を示す。 図2. 改良されたSilencer® Select の高度なデザインアルゴリズム 40個のターゲット遺伝子に対して155個のsiRNAをデザインするために、Silencer® Select siRNA デザインアルゴリズムを使用。これらのsiRNAを以前のアルゴリズムでデザインしたsiRNAと 並列でテストを行ない、5nMのsiRNAを用いてHela細胞に導入。 トランスフェクションから48 時間後のmRNAレベルをTaqMan® Gene Expression Assaysを用いて測定して、抑制効果 を検証。解析結果は、Silencer® Negative Control#1 siRNAを導入した細胞と比較した時の 残存mRNAレベル（%） で表示。図中の左上のデータは70%または80%以上の抑制がみられた siRNA数に割合を示。 安心して使える高い保証基準 Silencer® Select Pre-designed siRNA（濃度5nM以上） ・Silencer® Select Pre-designed siRNAを同一ターゲットに対して2種類ご購入の場合、両方が70% 以上 のｍRNA 抑制を示すことを保証します。 ・ Silencer® Select Pre-designed siRNAを同一ターゲットに対して3種類ご購入の場合、3種類中2種類が 80%以上のｍRNA抑制を示すことを保証します。 Silencer® Select Validated siRNA（濃度5nM以上） ・ Silencer® Select Validated siRNAをご購入の場合、 それぞれが80%以上のmRNA抑制を示すことを 保証します。 レギュラー製品（チューブタイプ） 製品名 1nmol サイズは4本からの注文になります。 注）made-to-order の製品は1nmol サイズの提供がありません。 サイズ 製品番号 価格 Pre-designed siRNA Silencer® Select Pre-designed siRNA, inventoried, std purity 1 nmol 4427037 ¥ 13,700 5 nmol 4392420 ¥ 45,200 20 nmol 4392421 ¥ 69,300 40 nmol 4392422 ¥ 87,200 Validated siRNA Silencer® Select Validated siRNA, standard purity 1 nmol 4427038 ¥ 15,800 5 nmol 4390824 ¥ 57,800 20 nmol 4390825 ¥ 81,900 40 nmol 4390826 ¥ 99,800 Custom Designed siRNA Silencer® Select Custom Designed siRNA, standard purity Silencer Select Custom Designed siRNA, HPLC purified ® 5 nmol 4399665 ¥ 47,300 20 nmol 4399666 ¥ 71,400 40 nmol 4399667 ¥ 89,300 20 nmol 4399668 ¥ 102,900 40 nmol 4399669 ¥ 120,800 ¥ 71,400 Custom Select siRNA Custom Select siRNA, standard purity Custom Select siRNA, HPLC purified 20 nmol 4390828 40 nmol 4390829 ¥ 89,300 20 nmol 4390830 ¥ 102,900 40 nmol 4390831 ¥ 120,800 250 nmol 4404013 ¥ 262,500 5 nmol 4390849 ¥ 31,500 Positive Control Silencer® Select GAPDH siRNA（Hs, Mm, Rn） 40 nmol 4390850 ¥ 94,500 250 nmol 4404024 ¥ 294,000 5 nmol 4390843 ¥ 31,500 40 nmol 4390844 ¥ 94,500 250 nmol 4404020 ¥ 294,000 5 nmol 4390846 ¥ 31,500 40 nmol 4390847 ¥ 94,500 Negative Control Silencer® Select Negative Control #1 siRNA Silencer® Select Negative Control #2 siRNA 表1. Silencer® Select siRNA シリーズ 製品 概要 Pre-designed siRNA Silencer® Select Pre-designed siRNA は、ターゲットに対して抑制効果を持つ ことを保証しています。ヒト、マウス、ラットの全遺伝子のうち 98％以上がデザ イン済で、精製済のすぐにご使用できるフォーマットとなっています。シーケン ス情報はすべての製品に添付されています。 Validated siRNA Silencer® Select Validated siRNA は、ターゲット遺伝子の発現をメッセンジャー RNA レベルで 80％以上減少させることを実験で検証済みです。製品に添付され るデータシートには、実験で観察されたメッセンジャー RNA 抑制のレベルと、 シーケンス情報が含まれています。 Custom Designed siRNA ご希望のターゲット配列に対してカスタムデザインした Silencer® Select siRNA をご提供できます。特にスプライスバリアントやヒト、マウス、ラット以外の哺 乳動物をターゲットとした siRNA をご希望の際に最適なサービスです。 Custom Select siRNA 合成 Custom Select siRNA 合成サービスでは、お好きな 21 塩基の配列の siRNA に、 弊社の Silencer® Select siRNA と同じ化学修飾を加えて合成することができます。 （Custom Order） GAPDH Positive Control siRNA Silencer® Select GAPDH Positive Control siRNA は、ヒト、マウス、ラットの GAPDH に対して複数の細胞株で機能することが確認されています。GAPDH の 抑制をモニターすることにより siRNA の導入効率を測定するのに最適です。 Negative Control #1 siRNA Silencer® Select Negative Control siRNA はマウス、ラット、ヒトの遺伝子配 列との間に相同性がなく、どの遺伝子の転写産物もターゲットにしない配列の siRNA のことです。この 2 種類のネガティブコントロールはマイクロアレイを使 Negative Control #2 siRNA 用した解析により、遺伝子発現にごくわずかな影響しかもたらさないことが確認 されています。さらに細胞を使ったマルチパラメータアッセイにより、細胞の増 殖、生存率、形態に有意な影響が無いことが確認されています。 図4. ネガティブ/ ポジティブコントロールの設定 RNAi実験ではネガティブとポジティブのコントロール を毎回設定することをおすすめします。 ライブラリー製品（プレートタイプ） 機能別ライブラリー 遺伝子およびsiRNAを検索済みの機能別ライブラリーセットです。各遺伝子につき3種類のsiRNAで構成されています。 大規模なスクリーニング解析に有効です。 製品名 サイズ*1 siRNA 本数*2 遺伝子数 製品番号 Silencer Select Human Kinase siRNA Library V4 - 96-well 0.25 nmol 2,130 710 4397918 Silencer® Select Human Phosphatase siRNA Library V4 - 96-well 0.25 nmol 894 298 4397919 Silencer Select Human GPCR siRNA Library V4 - 96-well 0.25 nmol 1,140 380 4397916 Silencer® Select Human Nuclear Hormone Receptor siRNA Library V4 - 96-well 0.25 nmol 141 47 4397914 Silencer Select Human Ion Channel siRNA Library V4 - 96-well 0.25 nmol 1,014 338 4397915 Silencer® Select Human Protease siRNA Library V4 - 96-well 0.25 nmol 1,482 494 4397917 Silencer® Select Human Druggable Genome siRNA Library V4 - 96-well 0.25 nmol 27,096 9,032 4397920 Silencer® Select Human Druggable Genome V4 siRNA Ext Set - 96-well 0.25 nmol 4,149 1,383 4397921 Silencer® Select Human Extended Druggable Genome siRNA Library V4 - 96-well 0.25 nmol 31,245 10,415 4397927 Silencer Select Human Druggable Genome siRNA Library V4 - 384-well 0.25 nmol 27,096 9,032 4397922 Silencer® Select Human Druggable Genome V4 siRNA Ext Set - 384-well 0.25 nmol 4,149 1,383 4397924 Silencer Select Human Genome siRNA V4 Extension Set - 384-well 0.25 nmol 33,510 11,170 4397923 Silencer Select Human Genome siRNA Library V4 - 384-well 0.25 nmol 64,755 21,585 4397926 ® ® ® ® ® ® 価格*3 お 問 合 せ *1 0.5nmolサイズやプールタイプ（各遺伝子の3つのsiRNAを混合）など、サイズやフォーマットの異なるライブラリのご要望もお受けしています。 *2 各遺伝子につき3種のsiRNAを分注してあります。 *3 ライブラリ製品の価格については、弊社営業担当者または契約代理店様までお問い合せください。 カスタムライブラリー 36本以上のsiRNAを同時にご注文される場合は、任意のsiRNAで構成されたカスタムライブラリー（プレートタイプで納品）としてのご注文が可能です。 siRNA本数 ： 36本以上 サイズ ： 0.1nmol, 0.25 nmol, 1 nmol, 2 nmol フォーマット ： 96ウェルプレート、384ウェルプレート 1本あたりのsiRNA価格 ： 価格は、サイズ、ご注文本数、siRNAのタイプ（Inventoried siRNAまたはmade-to-order siRNA）によって異なります。 お問い合せおよびご注文は、弊社営業担当者または代理店様までご連絡ください。 siRNA反応回数の目安 1nmol siRNA の場合 プレートタイプ 6 well（2.5ml） 12 well（1ml） 24 well（0.5ml） 96 well（0.1ml） 5nmol siRNA の場合 siRNA 最終濃度10nM 40 100 200 1000 siRNA 最終濃度5nM 80 200 400 2000 プレートタイプ 6 well（2.5ml） 12 well（1ml） 24 well（0.5ml） 96 well（0.1ml） siRNA 最終濃度10nM 200 500 1000 5000 siRNA 最終濃度5nM 400 1000 2000 10000 siRNA導入用トランスフェクション試薬&機器 Silencer® Select siRNAと最良の組合わせ 導入困難な細胞でお困りの方に Lipofectamine® RNAiMAX Neon® Transfection System 細胞へのsiRNA導入用に開発されたトランスフェクション試薬です。 Neonシステムは、エレクトロポレーションによる遺伝子導入システムです。 多くのRNAi研究者の方にご利用いただいています。Silencer® Select siRNAの導入 リポフェクション試薬では導入困難な細胞へのトランスフェクションに適しています。 に最適なトランスフェクション試薬です。 特長 特長 • 初代細胞、 幹細胞などのトランスフェクションが難しい細胞に最適なツール • 少ないsiRNA量でも高効率にノックダウン • 幅広い試薬レンジにおいて • 様々な細胞株で使用可能 • ピペットチップ型電極（特許） により、高効率かつ低毒性な エレクトロポレーシ 製品名 ョンが実現 • 細胞の種類によって試薬を使い分ける必要なし サイズ 製品番号 Lipofectamine® RNAiMAX 0.1 mL 13778-100 価格 ¥ 9,400 Lipofectamine® RNAiMAX 0.3 mL 13778-030 ¥ 27,300 Lipofectamine® RNAiMAX 0.75 mL 13778-075 ¥ 66,200 Lipofectamine® RNAiMAX 1.5 mL 13778-150 ¥ 94,000 Lipofectamine® RNAiMAX 15 mL 13778-500 ¥ 771,800 製品名 Neon® Transfection System*1 Neon® Transfection System Starter Pack*2 サイズ 製品番号 1 ユニット MPK5000 1 セット MPK5000S 価格 ¥ 945,000 ¥ 1,100,000 ＊1 Neon® Transfection System （MPK5000） は、Neon® システム本体、 Neon® Pipette（MPP100）、Neon® Pipette Station（MPS100）で構成されています。 ＊2 Starter Pack （MPK5000S） には、Neon® Transfection System （MPK5000） に、 Transfection Kit（MPK10096、MPK1096（各1 キット））が添付されています。 従来のsiRNA（非修飾タイプ） との比較 効率（>70% knockdown） Silencer® siRNA（非修飾タイプ） 100 nM 3個中2個のsiRNAが保証されます Silencer® Select siRNA 5 nM 2個中2個のsiRNAが保証されます ターゲット特異性 ★★ ★★★ 化学修飾 無し あり （LNA） Molecular format 21塩基, 2本鎖, overhang Coding RNA 21塩基, 2本鎖, overhang Coding RNA, non-cording RNA 推奨siRNA濃度 カバレッジ 生物種 ヒト、マウス、 ラット （他の生物種はカスタムデザイン可能） ヒト、マウス、 ラット （他の生物種はカスタムデザイン可能） ¥ 30,500 （5 nmol） ∼ 価格 ¥ 45,200∼ （5 nmol） ∼ オンラインオーダーシステムのご案内 siRNA製品は、オンラインオーダーシステムを採用しています。このオーダーシステムのご利用には、事前登録が必要となります。一度ご登録いただければ、次回 以降、 ユーザーIDとパスワードを用いて簡単にご注文いただけます。オンラインオーダーシステムには、 インターネットオーダーとEメールオーダーがあります。 ご登録方法 新規ユーザーアカウントのご登録は、弊社のウェブサイトを ご参照ください。 ウェブ登録画面に必要事項を記入する www.lifetechnologies.com/taqman-order Applied Biosystems® 製品取扱代理店に登録用紙を渡す ご登録に関してご不明な点がありましたら弊社ヘルプ 代理店が必要事項を記入し弊社宛に郵送 デスクまでお問い合わせください。 ユーザー ID とパスワードをご登録者に Eメールでお知らせ Eメール： [email protected] 電 話： 03-6832-6980 （音声ガイダンス①、次にアプライドバイオシステムズ オリゴ・ ログインしてオンラインオーダー可能 ウェブ受注品④を選択してください。 in vivoRNAi実験を始める方へ ライフテクノロジーズでは、in vivo RNAi解析用の試薬をご提供しています。 製品の詳細については、右記の資料をご参考ください。 Silencer Selectと同様の特長を有するin vivo専用のsiRNA Ambion® In vivo siRNA 肝臓をターゲットとした全身投与による in vivo用トランスフェクション試薬 in vivo RNAi 実験のための最新ソリューション Invivofectamine 2.0 （AMB122-C1408IH） ® 公式 Facebook ページ & Twitter もチェック！ facebook.com/LifeTechnologiesJapan @LifetechJPN 最新の価格および在庫数は、弊社ホームページ右上の“製品価格と在庫の検索”でご確認いただけます。 記載価格は2014 年 10月現在のメーカー希望小売価格です。消費税は含まれておりません。 ＊本文中のオーダリングインフォメーションで マークがついている製品はアプライドバイオシステムズブランド、 マークはインビトロジェンブランドでお取り扱いしています。 研究用にのみ使用できます。診断目的及びその手続上での使用は出来ません。記載の社名および製品名は弊社または 各社の商標または登録商標です。 標準販売条件はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/TC Not for use in diagnostic procedures. © 2014 Thermo Fisher Scientific Inc. 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