T790M 血漿検査用検体調製手順 監修・撮影協力：西尾和人 先生 近畿大学医学部ゲノム生物学教室 教授／坂井和子 先生 同 講師 本手順書は、血中循環無細胞DNA （cfDNA） を用いた T790M遺伝子検査を適正に実施するための、血漿検査用検体調製手順を説明するものです。 正しい検査結果を得るために、次の点に十分注意して、採血・調製を完了させてください。 （１） すべての工程を採血後4時間以内に完了させてください。 （２） 患者ゲノムDNAが混入すると偽陰性の要因となるため、血漿にバフィーコートを混入させないよう十分に留意して操作を行ってください。 （３） 検査結果に影響を与えるため、その他のコンタミネーションにも十分に注意して操作を行ってください。 STEP1 採血 採血後は速やかに検体を 検査室に運搬してください ■ 採血に必要なもの： STEP 2 STEP3 血漿の調製（詳細は裏面参照） 検査会社に提出 ■血漿の調製に必要なもの： 1 採血管を遠心分離機にかけ、 血漿を分離します。 2 細心の注意を払って血漿を 滅菌スピッツに分取し、 凍結保存します。 ● 全血の入った採血管 ● EDTA-2K採血管 ● 滅菌スピッツ ※検査結果に影響を与えるため、 ヘパリン入りの採血管は使用しないでください。 ● 滅菌スポイト 採血後、 採血管を穏やかに 転倒混和します。 すべての工程を4時間以内に完了させる必要があります 各検査会社の指定の 手順に従って速やかに 提出します。 T790M血漿検査用検体調製手順 STEP2 血漿の調製 ー詳細ー 本手順書は、血中循環無細胞DNA （cfDNA） を用いた T790M遺伝子検査を適正に実施するための、血漿検査用検体調製手順を説明するものです。 正しい検査結果を得るために、次の点に十分注意して、採血・調製を完了させてください。 （１） すべての工程を採血後4時間以内に完了させてください。 （２） 患者ゲノムDNAが混入すると偽陰性の要因となるため、血漿にバフィーコートを混入させないよう十分に留意して操作を行ってください。 （３） 検査結果に影響を与えるため、その他のコンタミネーションにも十分に注意して操作を行ってください。 1 遠心分 離 1 EDTA-2K採血管であることを 確認します。 2 遠心分離機にセットし、使用する採血管で 許容されている遠心条件 （目安：1,300∼2,000×g) で10分間、遠心します。 3 分離した界面を振動させないように十分注意しながら、 採血管を遠心分離機から取り出します。 ※遠心条件の単位はrpm （回転数） ではありません。 血漿 バフィーコート 赤血球 2 分取と凍結 4 必ず滅菌スポイトを用いて上清の血漿を採取し、滅菌スピッツに分取します。 ※白血球由来のゲノムDNAの 混入を避けるため、 （１）中間にあるバフィーコート を 吸 い 取ら な い ように 細心の注意を払って分取 してください。 5 滅菌スピッツ一本あたり 2mL余（2.2mL程度）の 血漿を集めます。 6 −20℃以下の冷凍庫 にて凍結し、検体提出 まで保存します。 ※一回の血漿検査に必要な血漿は2mL です。各検査会社で検体を融解後に 遠心する際に、多少の余分量が必要 になるため、2mLより少し多い量が最 低必要量になります。 バフィーコートの 界面にはスポイト の先端を近づけ 過ぎないよう十分 注意してください。 （２） デカンテーションは絶対 に行わないでください。 大阪市北区大深町3番1号 0120-259-258 （タグリッソ医療従事者お問い合わせ窓口） TAG059 B812 2016年12月作成
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