DU シリーズ nanoVette 取扱説明書 PN A46376 AA [ENG] 2007 年 6 月 Beckman Coulter, Inc. 4300 N. Harbor Blvd. Fullerton, CA 92835 nanoVette 取扱説明書 PN A46376 AA [ENG] (2007 年 6 月 ) Copyright © 2007 Beckman Coulter, Inc. All rights reserved. 本書のいかなる部分もベックマン・ コールター社から事前に書面による許諾を得ることな く、電子的または機械的、複写、録音、その他のいか なる形式または方法によっても無断で複製または転送 することを禁じます。 Web サイト : www.beckmancoulter.com Beckman Coulter Ireland Inc. Mervue Business Park, Mervue, Galway, Ireland (353 91 774068) Beckman Coulter do Brasil Com e Imp de Prod de Lab Ltda Estr dos Romeiros, 220 - Galpao G3 - Km 38.5 zip code 06501-001 - Sao Paulo - SP - Brasil CNPJ: 42.160.812/0001-44 製造販売元 : ベックマン • コールター株式会社 東京都江東区有明二丁目 5 番 7 号 生产商： 贝克曼库尔特有限公司，美国加利福尼亚州富勒顿市， 邮编：92835，电话：(001）714-871-4848 nanoVette Microliter Cell はじめに nanoVette Microliter Cell は DU シリーズ分光光度計に使用するものです。DNA/RNA およびタン パク質試料の測定用に設計されており、超微量の試料を希釈なしで優れた再現性を維持しなが ら精密分析できます。 nanoVette はベックマン • コールター製分光光度計に収まりやすいよう、標準キュベットと同サ イズになっています。詳細は、5 ページの nanoVette の使用方法を参照してください。 1 mm または 0.2 mm のキャップを使用して、それぞれ 1 mm または 0.2 mm の明確な可視光路が 作成できます。これにより、10 mm キュベットでの測定と比較して、1：10 または 1：50 の仮想 希釈係数が生成されます。この機能を利用すれば、時間も節約でき、希釈エラーも回避できま す。必要に応じて、測定後に試料を回収し、追加処理を行うことも可能です。1 mm キャップに は 3 μL から 5 μL、0.2 mm キャップには 0.7 μL から 4 μL の試料が必要です。詳細な性能仕様につ いては、www.beckmancoulter.com/nanovette のアプリケーション ノートを参照してください。 ビーム偏向の統合と光ファイバー ケーブルにより、光学ウィンドウの表面で直接試料を測定す ることが可能です。キャップとミラーの組み合わせにより可視光路が非常に明確で、試料の乾燥 を防ぎます。溶媒の乾燥により試料の濃度が上昇することがないため、測定が再現可能です。 充填中および洗浄中は、セルは光度計内に放置されます。これにより常に光線のアパーチャーの 位置を同一に維持し、基準測定との比較におけるばらつきを防ぎます。 1 nanoVette Microliter Cell 用途 用途 測定セルは次の用途に使用できます。 r 核酸分析 r 蛍光色素ラベル取り込み周波数 (FOI) の測定 r タンパク質解析 (A280、BCA ブラッドフォード、ローリーなど ) r 190 nm から 1100 nm の波長帯を使用したすべての UV/Vis 分析 機能 次の図は nanoVette の各部位および機能を図示したものです。 図 1.1 nanoVette の機能 表 1 nanoVette の構成部分とその機能 2 1. キャップ 9. ウィンドウ 2. ミラー 10. 光線 3. ピペット 11. 検出器 4. 試料液 12. セル 5. ウィンドウ 13. Z-10 台 (DU 730 のみ ) 6. キャップ 14. 光源 7. ミラー 15. セル 8. 光路 16. Z-10 台 (DU 730 のみ ) nanoVette Microliter Cell 機能 別途必要な器具 • 材料 r 10 μL ピペット r リントフリー綿棒またはキムワイプ r 圧縮空気 ( 推奨 ) 安全上の注意 生体成分分析に nanoVette を使用する場合は、生体試料の取り扱いに関する一般的なガイドライ ンに従い、適切な保護服を着用してください。 320 nm 補正の設定 重要 nanoVette を使用して測定を行うには、320 ナノメートル補正を分光光度計のソフト ウェアであらかじめ有効にしておく必要があります。 DU 730 1. 核酸分析モードのいずれかで、[Options ( オプション )] を押します。 2. オプション画面が開いたら、[λ] を押します。 3. [BKG Corr ( バックグラウンド補正 )] を押して、320 nm オプションを有効にします。 4. [Return ( 戻る )] を押して、測定画面に戻ります。 DU 800 1. 核酸分析モードのいずれか (260/280 比を除く ) で、[Edit Method ( 編集方法 )] を押します。 2. [Background Correction ( バックグラウンド補正 )] のオプションを選択します。 3. 320 nm に設定されたことを確認します。 4. [OK ] を押してこれらの設定を承認し、測定画面に戻ります。 3 nanoVette Microliter Cell 機能 アパーチャーの高さの設定 測定セルを使用する前に、使用する分光光度計に合わせてアパーチャーの高さを調節しておく 必要があります。 DU 730 DU 730 の光源の高さは 10 mm です。DU 730 分光光度計に nanoVette を使用するには、マイナス ドライバーで nanoVette の底に Z-10 台を装着します。 DU 800 測定セルのアパーチャーの高さは 8.5 mm で、DU 800 の光源の高さと一致しているため、調節の 必要はありません。 路長の調整 DU 730 および DU 800 には、nanoVette の使用に便利なソフトウェアの機能があります。いずれ のモデルでも測定セルの仮想希釈を補正するために路長を調整することができます。 路長の調整は、次の手順で行います。 DU 730 この調整はどの核酸分析モードからでも行えます。 1. 核酸分析モードで、[Options ( オプション )] を押します。すると、パラメータ設定のオプショ ンが表示されます。 2. [More ( 詳細 )] を押して、オプション画面に移動します。 3. [Pathlength ( 路長 )] を押して、必要に応じ路長を変更します。 4. [Return ( 戻る )] を押して、測定画面に戻ります。 DU 800 この調整は核酸分析 II モードから行う必要があります。 1. [Edit Method ( 編集方法 )] をクリックします。核酸分析法のダイアログが表示されます。 2. フィールドに路長設定を入力します。 3. [OK ] をクリックして設定を承認し、メインの測定画面に戻ります。 4 nanoVette Microliter Cell nanoVette の使用方法 nanoVette の使用方法 次の写真および指示は測定セルの使用方法を説明したものです。 1. キャップを取り外した状態で、nanoVette を分光光度計のセル ホル ダーに挿入します。 2. ピペットを使用して試料を測定ウィンドウの中央に置きます。 3. 測定用キャップを装着し、分光光度計で測定を開始します。 4. 測定が完了したら、キャップを取り外し、リントフリー綿棒または リントフリー ワイプで測定ウィンドウをきれいにします。 5. リントフリー綿棒またはリントフリー ワイプを使用します。 重要 試料残渣をキャップから入念に拭き取ります。利用 可能であれば、圧縮空気を使用します。 6. 測定ウィンドウに別の試料をピペットで置き、分光光度計で測定し ます。 5 nanoVette Microliter Cell 使用例 使用例 核酸定量 溶液内の核酸濃度の測定には、260 nm (A260) の波長での吸光度が使用されます。 ランベルト • ベールの法則から導かれた次の関数を適用します。 濃度 [ng/μL] = 吸光度 (260 nm) x 係数 ( 係数 = 試料固有係数 x 仮想希釈係数 ) 試料固有係数は各資料に固有の吸光度を表すもので、たとえば、標準キュベット内で 10 mm の 可視光路を使用して測定した場合、50 ng/μL の dsDNA の試料では 1 Abs (A260) となります。 0.2 mm または 1 mm の測定セルの可視光路のため、さらに 50:1 または 10:1 の仮想希釈係数を考 慮する必要があります。 その他の種類の核酸溶液では、濃度結果 (ng/μL) に関連する吸光度の平均ダイナミックレンジ は、( 光路によって異なり ) 次のようになります。 表 2 nanoVette 測定範囲 試料 固有係数 1 mm キャップ ( 仮想希釈係数 10) [ng/μL] 0.2 mm キャップ ( 仮想希釈係数 50) [ng/μL] 総検出範囲 dsDNA 50 10 - 1,000 200 - 5,000 10 - 5,000 ssDNA 37 7 - 740 150 - 3,700 7 - 3,700 ssRNA 40 8 - 800 160 - 4,000 8 - 4,000 Oligo 30 6 - 600 120 - 3,000 6 - 3,000 [ng/μL] 重要 分光光度計で少量の試料を使用する場合、正確なデータを得るためには溶液の濃度 が均等であることが非常に重要になるので、ゲノム DNA などの大型テンプレートを 使用する際には、試料を 15 分以上 60 ℃ に予熱し、十分に撹拌して nanoVette で取 得するデータの正確性を確保します。 6 nanoVette Microliter Cell テクニカル サポート テクニカル サポート 北米 Beckman Coulter Technical Support までお問い合わせください。 1.800.742.2345 [email protected] 北米以外 お近くのベックマン コールター テクニカルサポート担当までお問い合わせください。 7 nanoVette Microliter Cell テクニカル サポート 8 nanoVette 取扱説明書 PN A46376 AA [ENG] (2007 年 6 月 ) Copyright © 2007 Beckman Coulter, Inc. All rights reserved. 本書のいかなる部分もベックマン・コールター社から事前に書面によ る許諾を得ることなく、電子的または機械的、複写、録音、その他のいかなる形式または 方法によっても無断で複製または転送することを禁じます。 Web サイト : www.beckmancoulter.com Beckman Coulter Ireland Inc. Mervue Business Park, Mervue, Galway, Ireland (353 91 774068) Beckman Coulter do Brasil Com e Imp de Prod de Lab Ltda Estr dos Romeiros, 220 - Galpao G3 - Km 38.5 zip code 06501-001 - Sao Paulo - SP - Brasil CNPJ: 42.160.812/0001-44 製造販売元 : ベックマン • コールター株式会社 東京都江東区有明二丁目 5 番 7 号 生产商： 贝克曼库尔特有限公司，美国加利福尼亚州富勒顿市， 邮编：92835，电话：(001）714-871-4848 www.beckmancoulter.com
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