close

Enter

Log in using OpenID

chapman - mannitol salt agar

embedDownload
CHAPMAN - MANNITOL SALT AGAR
53647 - 53648 - 63844 - 64134
ISOLATION AND DIFFERENTIATION MEDIUM FOR STAPHYLOCOCCI
1- INTENDED USE
Chapman - Mannitol Salt Agar is a selective medium for the isolation and enumeration of Staphylococci. It is also used to
differentiate mannitol fermenting and mannitol non-fermenting species.
2- PRINCIPLE
The selectivity of this medium is based on the presence of sodium chloride which inhibits the growth of most Gram (+) and
Gram (-) bacteria.
Differentiation of Staphylococci is based on their capacity to ferment mannitol. Fermentation of mannitol induces acidification,
which turns the medium yellow in the presence of phenol red (pH indicator).
3•
•
•
HOW SUPPLIED
Ready to use medium:
box of 20 Petri dishes (90 mm) (MSA)
25 x 10 ml slant tubes
Ready to use medium (to be dispensed)
6 x 200 ml bottles (MSA)
Dehydrated medium
bottle of 500 g
code 63844
code 53648
code 53647
code 64134
4- THEORETICAL COMPOSITION (g/l of distilled water)
Chapman - Mannitol Salt Agar medium is prepared according to the formula described by Chapman (1).
Peptone
10
Beef extract
1
Sodium chloride
75
Mannitol
10
Phenol red
0.025
Agar
15
Preparation of the medium:
Homogenize the powder contained in the bottle.
Add 111 grams of dehydrated medium to one litre of sterile distilled water. Mix until a homogeneous suspension is
obtained. Heat gently, shaking frequently, then heat to boiling until complete dissolution. If necessary, adjust the pH to
7.4. Sterilize in the autoclave at 121°C for 15 minutes. Dispense into Petri dishes or bottles.
5- STORAGE
•
Ready to use medium (Petri dishes): at +2-20°C.
•
Ready to use medium (tubes and bottle): at +2-8°C.
•
Dehydrated medium: tightly closed bottle in a dry place at +15-25°C.
The expiry date and batch number are indicated on the packaging.
6- INSTRUCTIONS
Material:
•
Material provided: Chapman - Mannitol Salt Agar medium
Inoculation:
Inoculate by streaking directly from the specimen to be examined. Refer to current recommendations for storage of biological
specimens (2).
Incubation:
Incubate for 24 to 48 hours at 37°C.
Reading:
•
Mannitol (+): yellow colour of the medium.
•
Mannitol (-): no colour.
Strains of Staphylococcus aureus produce their own pigment. Colonies become surrounded by a yellow halo, in 24 to 48 hours,
due to fermentation of mannitol. Strains of Staphylococcus epidermidis and other Micrococcaceae form small colonies, which, in
the majority of cases, grow without modifying the colour of the medium. However, a considerable minority of S. epidermidis
strains are able to ferment mannitol.
7•
•
•
PERFORMANCE/QUALITY CONTROL OF THE TEST
Appearance of the ready to use medium: clear red agar.
Appearance of the dehydrated medium: pink powder.
The growth performances of Chapman - Mannitol Salt Agar medium are verified with the following strains:
STRAINS
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Staphylococcus saprophyticus ATCC 15305
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
Proteus mirabilis ATCC 25933
Escherichia coli ATCC 25922
CULTURE RESULT AFTER 24 to 48 hours at 37°C
Yellow colonies
Yellow colonies
Pink colonies
No growth
No growth
8- QUALITY CONTROL OF THE MANUFACTURER
All manufactured reagents are prepared according to our Quality System, starting from reception of raw material to the final
commercialization of the product. Each lot is submitted to quality control assessments and is only released to the market, after
conforming to pre-defined acceptance criteria. The records relating to production and control of each single lot are kept within
Bio-Rad.
9•
•
LIMITS OF USE
Complementary tests must be performed to identify the species of the strain isolated.
Enterococci and Group D Streptococci can grow on this medium and present slight fermentation of mannitol. However,
these colonies are small and can be easily distinguished from Staphylococci by Gram stain or by the catalase test.
10- REFERENCES
1. CHAPMAN, G.H., The significance of sodium chloride in studies of staphylococci, J. Bact. 1945. 50 : 201-203.
2. Basic Laboratory Procedures in Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva.1991. 1st edition.
CHAPMAN - MANNITOL SALT AGAR
53647 - 53648 - 63844 - 64134
MILIEU D'ISOLEMENT ET DE DIFFÉRENCIATION DES STAPHYLOCOQUES
IVD
1- APPLICATION
La gélose Chapman - Mannitol Salt Agar est un milieu sélectif pour l'isolement et la numération des staphylocoques. Il permet
également de différencier les espèces fermentant le mannitol de celles qui ne le fermentent pas.
2- PRINCIPE
La sélectivité de ce milieu est basée sur la présence de chlorure de sodium qui inhibe la plupart des bactéries à Gram (+) et à Gram (-).
La différenciation des Staphylocoques est basée sur leur capacité à fermenter ou non le mannitol. S'il y a fermentation, cela induit
une acidification qui entraîne une coloration jaune du milieu en présence de rouge de phénol (indicateur de pH).
3- PRÉSENTATION
• Milieu prêt à l’emploi
- coffret de 20 boîtes de Petri (90 mm) (MSA)
code 63844
- 25 tubes inclinés de 10 ml
code 53648
• Milieu prêt à l’emploi (à répartir)
- 6 flacons de 200 ml (MSA)
code 53647
• Milieu déshydraté
- flacon de 500 g
code 64134
4- COMPOSITION THÉORIQUE (en g/l d’eau distillée)
Le milieu Chapman - Mannitol Salt Agar est preparé selon la formule décrite par Chapman (1).
Peptone
10
Extrait de viande de bœuf
1
Chlorure de sodium
75
Mannitol
10
Rouge de phénol
0,025
Agar
15
Préparation du milieu :
Homogénéiser la poudre contenue dans le flacon.
Mettre 111 grammes de milieu déshydraté dans un litre d’eau distillée stérile. Mélanger jusqu’à obtention d’une suspension
homogène. Chauffer lentement en agitant fréquemment, puis porter à ébullition jusqu’à dissolution complète. Si nécéssaire, ajuster
le pH à 7,4. Stériliser à l’autoclave à 121° C pendant 15 minutes. Répartir en boîtes de Petri ou en flacons.
5- CONSERVATION
• Milieu prêt à l’emploi (Petri) : à + 2 - 20°C.
• Milieu prêt à l’emploi (tubes et flacon) : à + 2 - 8°C.
• Milieu déshydraté : flacon soigneusement fermé dans un endroit sec à +15-25°C.
La date de péremption et le numéro de lot sont indiqués sur le conditionnement.
6- UTILISATION
Matériel :
• Matériel fourni : milieu Chapman – Mannitol Salt Agar
1
Ensemencement :
Ensemencer directement en stries à partir de l'échantillon à étudier. Pour la conservation des échantillons biologiques, se référer aux
recommandations en vigueur (2).
Incubation :
Incuber pendant 24 à 48 heures à 37°C.
Lecture :
• Mannitol (+) : coloration jaune du milieu.
• Mannitol (-) : absence de coloration.
Les souches de Staphylococcus aureus élaborent leur propre pigment. Les colonies s’entourent en 24 à 48 heures d’une auréole
jaune due à la fermentation du mannitol. Les souches de Staphylococcus epidermidis et autres Micrococcaceae donnent naissance
à de petites colonies, qui, dans la majorité des cas, se développent sans modifier la teinte du milieu. Cependant, une minorité non
négligeable de souches de S. epidermidis est capable de fermenter le mannitol.
7- PERFORMANCES / CONTRÔLE QUALITÉ DU TEST
• Aspect du milieu prêt à l’emploi :gélose limpide rouge.
• Aspect du milieu déshydraté : poudre rosée.
• Les performances culturales du milieu de Chapman - Mannitol Salt Agar sont contrôlées à l’aide des souches suivantes :
SOUCHES
RÉSULTAT DE LA CULTURE EN 24-48 H à 37°C
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Colonies jaunes
Staphylococcus saprophyticus ATCC 15305
Colonies jaunes
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
Colonies rosées
Proteus mirabilis ATCC 25933
Inhibition
Escherichia coli ATCC 25922
Inhibition
8- CONTRÔLE QUALITÉ DU FABRICANT
Tous les produits fabriqués et commercialisés par la société Bio-Rad sont placés sous un système d'assurance qualité de la réception
des matières premières jusqu'à la commercialisation des produits finis. Chaque lot de produit fini fait l'objet d'un contrôle de qualité
et n'est commercialisé que s'il est conforme aux critères d'acceptation. La documentation relative à la production et au contrôle de
chaque lot est conservée par le fabricant.
9- LIMITES D’UTILISATION
• Il est nécessaire de faire des tests complémentaires pour une identification d'espèce de la souche isolée.
• Les entérocoques et les streptocoques du groupe D peuvent se développer sur ce milieu et présenter une légère fermentation du
mannitol. Cependant les colonies sont petites et peuvent facilement être différenciées des staphylocoques par coloration de Gram
ou par le test de la catalase.
10-RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES
1.CHAPMAN, G.H., The significance of sodium chloride in studies of staphylococci, J. Bact. 1945. 50 : 201-203.
2.Basic Laboratory Procedures in Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva.1991. 1st edition.
Bio-Rad
3, boulevard Raymond Poincaré
92430 Marnes-la-Coquette France
Tel. : +33 (0) 1 47 95 60 00
Fax : +33 (0) 1 47 41 91 33
07/2003
code: 18010 - A4
2
CHAPMAN - MANNITOL SALT AGAR
53647 - 53648 - 63844 - 64134
MEDIO DE AISLAMIENTO Y DIFERENCIACIÓN PARA ESTAFILOCOCOS
1- USO PREVISTO
El agar de sal Chapman-Manitol es un medio selectivo para el aislamiento y la enumeración de estafilococos. Se usa también
para diferenciar las especies que fermentan manitol de las que no lo fermentan.
2- PRINCIPIO
La selectividad de este medio se basa en la presencia de cloruro sódico que inhibe el crecimiento de la mayoría de las
bacterias Gram (+) y Gram (-).
La diferenciación de los estafilococos se basa en su capacidad para fermentar el manitol. La fermentación del manitol induce
acidificación, que vuelve amarillo el medio en presencia de rojo fenol (indicador de pH).
3•
•
•
CÓMO SE SUMINISTRA
Medio listo para usar:
caja de 20 placas de Petri (90 mm) (MSA)
25 tubos inclinados de 10 ml
Medio listo para usar (para dispensar)
6 frascos de 200 ml (MSA)
Medio deshidratado
frasco de 500 g
código 63844
código 53648
código 53647
código 64134
4- COMPOSICIÓN TEÓRICA (g/l de agua destilada)
El medio de Chapman - Manitol – sal se elabora de acuerdo con la fórmula descrita por Chapman (1).
Peptona
10
Extracto de carne
1
Cloruro sódico
75
Manitol
10
Rojo fenol
0,025
Agar
15
Preparación del medio:
Homogeneice el polvo contenido en el frasco.
Añada 111 gramos de medio deshidratado en un litro de agua destilada estéril. Mezcle hasta que se obtenga una
suspensión homogénea. Caliente suavemente, agitando con frecuencia y luego caliente hasta hervir y que se consiga la
disolución completa. Si es necesario, ajuste el pH a 7.4. Esterilice en el autoclave a 121°C durante 15 minutos.
Dispense en placas de Petri o frascos.
5- CONSERVACIÓN
•
Medio listo para usar (placas de Petri): a +2-20°C
•
Medio listo para usar (tubos y frasco): a +2-8°C
•
Medio deshidratado: frasco cerrado herméticamente en un lugar seco a +15-25°C.
La fecha de caducidad y el número de lote están indicados en el envasado.
6- INSTRUCCIONES
Material:
•
Material suministrado: Medio de agar sal Chapman-Manitol
Inoculación:
Inocule tomando directamente de la muestra a examinar. Consúltense las recomendaciones actuales para la conservación de
muestras biológicas (2).
Incubación:
Incube durante 24 a 48 horas a 37°C.
Lectura:
•
Manitol (+): color amarillo del medio.
•
Manitol (-): sin color.
Las cepas de Staphylococcus aureus producen su propio pigmento. Las colonias se rodean de un halo amarillo, en 24 a 48
horas, debido a la fermentación del manitol. Las cepas de Staphylococcus epidermidis y otros Micrococcaceae forman colonias
pequeñas, que en la mayoría de los casos, crecen sin modificar el color del medio. Sin embargo, una minoría considerable de
las cepas de S. epidermidis son capaces de fermentar el manitol.
7•
•
•
RENDIMIENTO / CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA
Aspecto del medio listo para usar: agar transparente rojo.
Aspecto del medio deshidratado: polvo rosa.
Los rendimientos de crecimiento del medio agar sal Chapman – Manitol se verifican con las siguientes cepas:
CEPAS
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Staphylococcus saprophyticus ATCC 15305
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
Proteus mirabilis ATCC 25933
Escherichia coli ATCC 25922
RESULTADO DEL CULTIVO DESPUÉS DE 24 a 48
horas a 37 °C
Colonias amarillas
Colonias amarillas
Colonias rosas
Sin crecimiento
Sin crecimiento
8- CONTROL DE CALIDAD DEL FABRICANTE
Todos los reactivos fabricados se elaboran según nuestro sistema de calidad, que va desde la recepción de las materias
primas hasta la comercialización final del producto. Cada lote se somete a valoraciones de control de calidad y sale al mercado
sólo cuando está de acuerdo con los criterios de aceptación predefinidos. Los registros relativos a la producción y al control de
cada lote se conservan en Bio-Rad.
9•
•
LÍMITES DE USO
Deben realizarse pruebas complementarias para identificar la especie de la cepa aislada.
Los enterococos y los estreptococos del grupo D pueden crecer en este medio y presentan una leve fermentación del
manitol. Sin embargo, estas colonias son pequeñas y pueden distinguirse fácilmente de los estafilococos mediante tinción
de Gram o por la prueba de la catalasa.
10- BIBLIOGRAFÍA
1. CHAPMAN, G.H., The significance of sodium chloride in studies of staphylococci, J. Bact. 1945. 50 : 201-203.
2. Basic Laboratory Procedures in Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva.1991. 1st edition.
CHAPMAN - MANNITOL SALT AGAR
53647 - 53648 - 63844 - 64134
ISOLIERUNG- UND DIFFERENZIERUNGSMEDIUM FÜR STAPHYLOKOKKEN
1- VERWENDUNGSZWECK
Chapman – Mannitol-Salzagar ist ein selektives Medium für die Isolierung und Zählung von Staphylokokken. Es wird auch für
die Differenzierung von Mannitol-fermentierenden und Mannitol-nicht-fermentierenden Spezies verwendet.
2- PRINZIP
Die Selektivität dieses Mediums basiert auf dem Vorliegen von Natriumchlorid, welches das Wachstum der meisten Gram (+)und Gram (-)-Bakterien hemmt.
Die Differenzierung von Staphylokokken basiert auf der Fähigkeit, Mannitol zu fermentieren. Die Fermentierung von Mannitol
führt zur Säuerung, die das Medium in Anwesenheit von Phenolrot (pH-Indikator) gelb verfärbt.
3•
•
•
DARREICHUNGSFORM
Gebrauchsfertiges Medium:
Packung mit 20 Petri-Schalen (90 mm) (MSA)
25 x 10 ml Schrägröhrchen
Gebrauchsfertiges Medium (pipettierfertig):
6 x 200 ml-Fläschchen (MSA)
Dehydriertes Medium
Fläschchen für 500 g
Art.-Nr. 63844
Art.-Nr. 53648
Art.-Nr. 53647
Art.-Nr. 64134
4- THEORETISCHE ZUSAMMENSETZUNG (g/l destilliertes Wasser)
Chapman – Mannitol-Salzagarmedium wird anhand der von Chapman beschriebenen Formel vorbereitet (1).
Pepton
10
Rindfleischextrakt
1
Natriumchlorid
75
Mannitol
10
Phenolrot
0,025
Agar
15
Vorbereitung des Mediums:
Das in der Flasche enthaltene Pulver homogenisieren.
111 g des dehydrierten Mediums in 1 l steriles destilliertes Wasser geben. Mischen, bis eine homogene Suspension
hergestellt ist. Vorsichtig unter häufigem Schwenken erhitzen, anschließend bis zur vollständigen Auflösung zum Kochen
bringen. Falls nötig, den pH-Wert auf 7.4 einstellen. In einem Autoklaven 15 Minuten bei 121°C sterilisieren. In PetriSchalen oder Gefäße pipettieren.
LAGERUNG
Gebrauchsfertiges Medium (Petri-Schalen): bei +2 - 20°C.
Gebrauchsfertiges Medium (Röhrchen und Gefäße): bei +2 - 8°C.
Dehydriertes Medium: in dicht verschlossenen Gefäßen an einem trockenen Ort bei +15 - 25°C.
Das Verfallsdatum und die Chargennummer sind auf der Verpackung angegeben.
5-
•
•
•
6- GEBRAUCHSANWEISUNG
Material:
•
Geliefertes Material: Chapman – Mannitol-Salzagarmedium
Beimpfung:
Beimpfen durch Abstreichen direkt von der Testprobe. Die Lagerbedingungen für biologische Proben entnehmen Sie bitte den
aktuellen Empfehlungen (2).
Inkubation:
Bei 37°C 24 bis 48 Stunden inkubieren.
Ablesen der Ergebnisse:
•
•
Mannitol (+): gelbe Färbung des Mediums:
Mannitol (-): keine Färbung.
Staphylococcus aureus-Stämme produzieren ihre eigenen Pigmente. Kolonien werden aufgrund der Fermentierung von
Mannitol innerhalb von 24 bis 48 Stunden von einem gelben Hof umgeben. Staphylococcus epidermidis- und andere
Micrococcaceae-Stämme bilden kleine Kolonien, die in den meisten Fällen ohne Farbänderung des Mediums wachsen.
Dennoch ist eine Minderheit der S. epidermidis-Stämme in der Lage, Mannitol zu fermentieren.
7-
LEISTUNG/QUALITÄTSKONTROLLE DES TESTS
•
•
•
Erscheinung des gebrauchsfertigen Mediums: hell-roter Agar.
Erscheinung des dehydrierten Mediums: violettes Pulver.
Die Leistungsmerkmale des Wachstums des Chapman – Mannitol-Salzagarmediums werden mit folgenden
Stämmen überprüft:
STÄMME
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Staphylococcus saprophyticus ATCC 15305
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
Proteus mirabilis ATCC 25933
Escherichia coli ATCC 25922
KULTURERGEBNIS NACH 24 bis 48 Stunden bei
37°C
Gelbe Kolonien
Gelbe Kolonien
Violette Kolonien
Kein Wachstum
Kein Wachstum
8- QUALITÄTSKONTROLLE DES HERSTELLERS
Alle von der Firma Bio-Rad hergestellten Reagenzien unterliegen einem Qualitätssicherungssystem vom Rohstoffeingang bis
zur Vermarktung der Fertigprodukte. Jede Fertigproduktcharge wird einer Qualitätskontrolle unterzogen und nur dann verkauft,
wenn sie den Freigabekriterien entspricht. Die Unterlagen bezüglich Herstellung und Kontrolle der einzelnen Chargen werden
bei Bio-Rad aufbewahrt.
9-
GRENZEN DES TESTS
•
•
Zur Identifizierung der Spezies des isolierten Stammes müssen zusätzliche Tests durchgeführt werden.
Enterokokken und Streptokokken der Gruppe D können auf diesem Medium wachsen und weisen eine leichte
Fermentierung von Mannitol auf. Diese Kolonien sind jedoch klein und können leicht durch die Gramfärbung oder
den Katalase-Test von Staphylokokken unterschieden werden.
10- LITERATUR
1. CHAPMAN, G.H., The significance of sodium chloride in studies of staphylococci, J. Bact. 1945. 50 : 201-203.
2. Basic Laboratory Procedures in Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva.1991. 1st edition.
CHAPMAN - MANNITOL SALT AGAR
53647 - 53648 - 63844 - 64134
MEZZO DI ISOLAMENTO E DIFFERENZIAZIONE PER STAPHYLOCOCCI
1- USO PREVISTO
L'agar di mannitolo e sale - Chapman è un mezzo selettivo per l'isolamento e la numerazione degli Staphylococci. È inoltre
utilizzato per differenziare le specie che fermentano il mannitolo da quelle non in grado di fermentarlo.
2- PRINCIPIO
La selettività di questo mezzo si basa sulla presenza di cloruro di sodio che inibisce la crescita della maggior parte dei batteri
Gram (+) e Gram (-).
La differenziazione tra gli Staphylococci si basa sulla loro capacità di fermentare il mannitolo. La fermentazione del mannitolo
produce acidificazione, che rende il mezzo di colore giallo in presenza di rosso fenolo (indicatore del pH).
3•
•
•
PRESENTAZIONE
Mezzo pronto all’uso:
- confezione da 20 piastre Petri (90 mm) (MSA)
- tubi di coltura in agar a becco di clarino da 25 x 10 ml
Mezzo pronto all'uso (pronto per l'erogazione)
- flaconi da 6 x 200 ml (MSA)
Mezzo disidratato
- flacone da 500 g
codice 63844
codice 53648
codice 53647
codice 64134
4- COMPOSIZIONE TEORICA (in g/l di acqua distillata)
L'agar di mannitolo e sale - Chapman è preparato secondo la formula descritta da Chapman (1).
Peptone
10
Estratto di carne
1
Cloruro di sodio
75
Mannitolo
10
Rosso fenolo
0,025
Agar
15
Preparazione del mezzo:
Omogeneizzare la polvere contenuta nel flacone.
Aggiungere 111 grammi di mezzo disidratato per un litro di acqua distillata sterile. Mescolare fino ad ottenere una
sospensione omogenea. Riscaldare leggermente, agitando spesso e portare ad ebollizione fino al completo
scioglimento. Se necessario, regolare il pH a 7.4. Sterilizzare in autoclave a 121°C per 15 minuti. Erogare su piastre Petri
o in flaconi.
CONSERVAZIONE
Mezzo pronto all’uso (piastre Petri): a +2-20°C
Mezzo pronto all'uso (tubi e flacone): a +2-8°C
Mezzo disidratato: flacone sigillato ermeticamente in un luogo asciutto a +15-25°C.
La data di scadenza e il numero di lotto sono indicati sulla confezione.
5-
•
•
•
6- ISTRUZIONI
Materiale:
•
Materiale fornito: agar di mannitolo e sale - Chapman
Inoculazione:
Inoculare eseguendo una strisciatura direttamente dal campione da esaminare. Per la conservazione di campioni biologici, fare
riferimento alle raccomandazioni vigenti (2).
Incubazione:
Incubare per 24 - 48 ore a 37°C.
Lettura:
•
Mannitolo (+): colore giallo del mezzo.
•
Mannitolo (-): nessun colore.
I ceppi di Staphylococcus aureus producono un pigmento proprio. Le colonie vengono circondate da un alone giallo, in
24 - 48 ore, a causa della fermentazione del mannitolo. I ceppi di Staphylococcus epidermidis e altre Micrococcaceae formano
colonie di dimensioni ridotte, le quali, nella maggior parte dei casi, crescono senza modificare il colore del mezzo. Tuttavia, una
discreta minoranza di ceppi di S. epidermidis sono in grado di fermentare il mannitolo.
7-
•
•
•
CONTROLLO DI QUALITÀ/PRESTAZIONE DEL TEST
Aspetto del mezzo pronto all’uso: agar trasparente di colore rosso.
Aspetto del mezzo disidratato: polvere di colore rosa.
Le prestazioni di crescita del mezzo agar di mannitolo e sale - Chapman sono verificate usando i seguenti ceppi :
CEPPI
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Staphylococcus saprophyticus ATCC 15305
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
Proteus mirabilis ATCC 25933
Escherichia coli ATCC 25922
RISULTATO DELLA COLTURA DOPO 24 - 48 ORE A 37°C
Colonie di colore giallo
Colonie di colore giallo
Colonie di colore rosa
Nessuna crescita
Nessuna crescita
8- CONTROLLO DI QUALITÀ DEL PRODUTTORE
Tutti i reagenti realizzati sono preparati in base al nostro Sistema di Assicurazione di Qualità dal ricevimento delle materie
prime, alla commercializzazione finale del prodotto. Ciascun lotto di prodotto finito è sottoposto a un controllo di qualità e viene
messo in commercio soltanto se risulta conforme ai criteri di approvazione predefiniti. La documentazione relativa alla
produzione e al controllo di ciascun singolo lotto è conservata presso Bio-Rad.
9- LIMITI DI UTILIZZO
Allo scopo di identificare le specie di ceppo identificate, dovranno essere eseguiti dei test complementari.
Gli Enterococci e gli Streptococci del gruppo D sono in grado di sviluppare una crescita su questo mezzo e presentano una
lieve fermentazione di mannitolo. Tuttavia, queste colonie sono di dimensioni ridotte e possono essere facilmente distinte dagli
Staphylococci attraverso la colorazione Gram o il test della catalasi.
10- BIBLIOGRAFIA
1. CHAPMAN, G.H., The significance of sodium chloride in studies of staphylococci, J. Bact. 1945. 50 : 201-203.
2. Basic Laboratory Procedures in Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva.1991. 1st edition.
CHAPMAN - MANNITOL SALT AGAR
53647 - 53648 - 63844 - 64134
MEIO DE ISOLAMENTO E DIFERENCIAÇÃO PARA ESTAFILOCOCOS
1- UTILIZAÇÃO PRETENDIDA
O meio gelosado de Chapman - Manitol com Cloreto de Sódio é um meio selectivo para o isolamento e a contagem de
Estafilococos. É também utilizado para a diferenciação entre as espécies fermentadoras de manitol e as espécies não
fermentadoras de manitol.
2- PRINCÍPIO
A selectividade deste meio baseia-se na presença de cloreto de sódio, o qual inibe o crescimento da maioria das bactérias
Gram (+) e Gram (-).
A diferenciação dos Estafilococos baseia-se na sua capacidade de fermentação do manitol. A fermentação do manitol induz
uma acidificação, a qual torna o meio amarelo na presença de vermelho de fenol (indicador de pH).
3•
•
•
APRESENTAÇÃO
Meio pronto a usar:
caixa contendo 20 placas de Petri (90 mm) (MSA)
25 tubos inclinados x 10 ml
Meio pronto a usar (a ser fornecido)
6 frascos x 200 ml (MSA)
Meio desidratado
Frasco de 500 g
código 63844
código 53648
código 53647
código 64134
4- COMPOSIÇÃO TEÓRICA (g/l de água destilada)
O meio gelosado de Chapman - Manitol com Cloreto de Sódio é preparado de acordo com a fórmula descrita por Chapman (1).
Peptona
10
Extracto de carne
1
Cloreto de sódio
75
Manitol
10
Vermelho de fenol
0,025
Gelose
15
Preparação do meio:
Homogenize o pó contido no frasco.
Adicione 111 gramas de meio desidratado a um litro de água destilada estéril. Misture até obter uma suspensão
homogénea. Aqueça suavemente, com agitação frequente e, em seguida, deixe ferver até completa dissolução. Caso
seja necessário, ajuste o pH a 7.4. Esterilize na autoclave a 121°C durante 15 minutos. Coloque em placas de Petri ou
em frascos.
5- CONSERVAÇÃO
•
Meio pronto a usar (placas de Petri): a +2-20°C.
•
Meio pronto a usar (tubos e frasco): a +2-8°C.
•
Meio desidratado: frasco bem fechado em local seco a +15-25°C.
O prazo de validade e o número do lote estão indicados na embalagem.
6- INSTRUÇÕES
Material:
•
Material fornecido: Meio gelosado de Chapman - Manitol com Cloreto de Sódio
Inoculação:
Inocule directamente da amostra em estudo pelo método de estrias. Consulte as actuais recomendações para conservação de
amostras biológicas (2).
Incubação:
Incube durante 24 a 48 horas a 37°C.
Leitura:
•
Manitol (+): a cor do meio torna-se amarela.
•
Manitol (-): sem coloração.
As estirpes de Estafilococos aureus produzem o seu próprio pigmento. As colónias apresentam em seu redor um halo
amarelo, no espaço de 24 a 48 horas, devido à fermentação do manitol. As estirpes de Staphylococcus epidermidis e outros
Micrococcus formam pequenas colónias, as quais, na maioria dos casos, crescem sem modificação da coloração do meio.
Contudo, uma considerável minoria de estirpes de S. epidermidis são capazes de fermentar o manitol.
7•
•
•
DESEMPENHO/CONTROLO DE QUALIDADE DO ENSAIO
Aspecto do meio pronto a usar: agar vermelho transparente.
Aspecto do meio desidratado: pó cor de rosa.
As taxas de crescimento do meio gelosado de Chapman - Manitol com Cloreto de Sódio são verificadas com as seguintes
estirpes:
ESTIRPES
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Staphylococcus saprophyticus ATCC 15305
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
Proteus mirabilis ATCC 25933
Escherichia coli ATCC 25922
RESULTADO DA CULTURA APÓS 24 a 48 horas a 37°C
Colónias amarelas
Colónias amarelas
Colónias cor de rosa
Inexistência de crescimento
Inexistência de crescimento
8- CONTROLO DE QUALIDADE DO FABRICANTE
Todos os reagentes fabricados são preparados de acordo com o nosso Sistema de Qualidade, desde a recepção das matérias
primas até à comercialização final do produto. Cada lote é submetido a avaliações de controlo de qualidade, sendo apenas
colocado no mercado se estiver em conformidade com os critérios de aceitação pré-definidas. Os registos relativos à produção
e controlo de cada lote são conservados pela Bio-Rad.
9•
•
LIMITES PARA A SUA UTILIZAÇÃO
Devem ser efectuados ensaios complementares para identificar a espécie da estirpe isolada.
Os Enterococos e os Estreptococos do Grupo D podem crescer neste meio e apresentar uma ligeira fermentação do
manitol. Contudo, estas colónias são pequenas e podem facilmente distinguir-se das produzidas pelos Estafilococos por
meio de uma coloração Gram ou através do ensaio da catalase.
10- REFERÊNCIAS
1. CHAPMAN, G.H., The significance of sodium chloride in studies of staphylococci, J. Bact. 1945. 50 : 201-203.
2. Basic Laboratory Procedures in Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva.1991. 1st edition.
CHAPMAN - MANNITOL SALT AGAR
53647 - 53648 - 63844 - 64134
ISOLERINGS- OCH DIFFERENTIERINGSMEDIUM FÖR STAFYLOKOCKER
1- ANVÄNDNINGSOMRÅDE
Chapman – mannitol-salt-agar är ett selektivt medium för isolering och räkning av stafylokocker. Mediet används även för
differentiering av arter som jäser och inte jäser mannitol.
2- PRINCIP
Selektiviteten hos det här mediet baseras på förekomsten av natriumklorid, som hämmar tillväxt av de flesta grampositiva och
gramnegativa bakterier.
Differentieringen av stafylokocker baseras på deras förmåga att jäsa mannitol. Jäsning av mannitol framkallar försurning, vilket
gör mediet gult i närvaro av fenolrött (pH-indikator).
3•
•
•
INNEHÅLL
Medium färdigt att använda:
ask med 20 Petri-skålar (90 mm) (MSA)
kod 63844
25 x 10 ml lutande rör
kod 53648
Medium färdigt att använda (att fördelas)
6 x 200 ml flaskor (MSA)
kod 53647
Dehydrerat medium
flaska à 500 g
kod 64134
4- TEORETISK SAMMANSÄTTNING (i g/l destillerat vatten)
Mediet Chapman – mannitol-salt-agar bereds enligt den formel som beskrivs av Chapman (1).
Pepton
10
Oxköttsextrakt
1
Natriumklorid
75
Mannitol
10
Fenolrött
0,025
Agar
15
Beredning av mediet:
Homogenisera pulvret som finns i flaskan.
Tillsätt 111 gram dehydrerat medium till en liter sterilt destillerat vatten. Blanda tills en homogen suspension erhålls.
Värm försiktigt och skaka ofta. Värm därefter till kokpunkten tills mediet är fullständigt upplöst. Justera pH-värdet till 7.4
om nödvändigt. Sterilisera i autoklav i 121 °C i 15 minuter. Fördela i Petri-skålar eller flaskor.
FÖRVARING
Medium färdigt att använda (Petri-skålar): i +2–20 °C.
Medium färdigt att använda (rör och flaska): i +2–8 °C.
Dehydrerat medium: tätt försluten flaska på torr plats i +15–25 °C.
Utgångsdatum och partinummer står på förpackningen.
5-
•
•
•
6- INSTRUKTIONER
Material:
•
Material som medföljer: Chapman – mannitol-salt-agar medium
Inokulering:
Inokulera genom utstryk direkt från det prov som ska undersökas. Följ aktuella rekommendationer vid förvaring av biologiska
prover (2).
Inkubering:
Inkubera i 24 till 48 timmar i 37 °C.
Avläsning:
Mannitol (+): gul färg på mediet.
Mannitol (-): ingen färg.
Stammar av Staphylococcus aureus framställer eget pigment. Kolonier omges av en gul halo efter 24 till 28 timmar till följd av
mannitoljäsning. Stammar av Staphylococcus epidermidis och andra Micrococcaceae bildar små kolonier som i de flesta fall
växer utan att modifiera mediets färg. En betydande minoritet S. epidermidis-stammar kan dock jäsa mannitol.
7•
•
•
TESTRESULTAT/KVALITETSKONTROLL AV TESTET
Mediets utseende (färdigt att använda): klar röd agar.
Det dehydrerade mediets utseende: rosa pulver.
Tillväxtresultatet för mediet Chapman – mannitol-salt-agar verifieras med följande stammar:
STAMMAR
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Staphylococcus saprophyticus ATCC 15305
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
Proteus mirabilis ATCC 25933
Escherichia coli ATCC 25922
ODLINGSRESULTAT EFTER 24 till 48 timmar i
37 °C
Gula kolonier
Gula kolonier
Rosa kolonier
Ingen tillväxt
Ingen tillväxt
8- TILLVERKARENS KVALITETSKONTROLL
Alla reagenser tillverkas och bereds i enlighet med vårt kvalitetssystem, från mottagandet av råmaterial till den slutliga
marknadsföringen av produkten. Varje parti genomgår en kvalitetskontroll och släpps endast ut på marknaden om det
överensstämmer med fördefinierade acceptanskriterier. Handlingar som beskriver produktion och kontroll av varje enskilt parti
sparas hos Bio-Rad.
9•
•
ANVÄNDNINGENS BEGRÄNSNINGAR
Kompletterande tester måste utföras för att identifiera arterna i den isolerade stammen.
Enterokocker och streptokocker grupp D kan växa på det här mediet och visa lätt jäsning av mannitol. Dessa kolonier är
emellertid små och kan lätt skiljas från stafylokocker med hjälp av gramfärgning eller med katalastest.
10- REFERENSER
1. CHAPMAN, G.H., The significance of sodium chloride in studies of staphylococci, J. Bact. 1945. 50 : 201-203.
2. Basic Laboratory Procedures in Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva.1991. 1st edition.
CHAPMAN - MANNITOL SALT AGAR
53647 - 53648 - 63844 - 64134
ISOLATIONS- OG DIFFERENTIERINGSMEDIUM TIL STAFYLOKOKKER
1- FORMÅL
Chapman-mannitsaltagar er et selektivt medium til isolation og optælling af stafylokokker. Det bruges også til at differentiere
gærende og ikke-gærende mannitarter.
2- PRINCIP
Selektiviteten af dette medium er baseret på forekomsten af natriumklorid, der hæmmer væksten af de fleste Gram(+)- og
Gram(-)-bakterier.
Differentiering af stafylokokker er baseret på deres evne til at lade mannit gære. Gæring af mannit medfører syredannelse, der
gør mediet gult ved forekomst af fænolrød (pH-indikator).
3•
•
•
PRODUKTETS INDHOLD
Brugsklart medium:
Kasse med 20 Petri-skåle (90 mm) (MSA)
25 skrå rør á 10 ml
Brugsklart medium (til fordeling)
6 flasker á 200 ml (MSA)
Dehydreret medium
flaske á 500 g
kode 63844
kode 53648
kode 53647
kode 64134
4- TEORETISK SAMMENSÆTNING (G/L DESTILLERET VAND)
Chapman-mannitsaltagarmedium forberedes i overensstemmelse med den formel, der er beskrevet af Chapman (1).
Peptone
10
Oksekødsekstrakt
1
Natriumklorid
75
Mannit
10
Fænolrød
0,025
Agar
15
Forberedelse af mediet:
Homogeniser det pulver, som flasken indeholder.
Tilsæt 111 gram dehydreret medium i én liter sterilt, destilleret vand. Blandes, indtil opløsningen er homogen. Opvarm
forsigtigt, mens flasken omrystes, og opvarm derefter til kogepunktet, indtil pulveret er helt opløst. Juster pH til 7.4, hvis
det er nødvendigt. Steriliser i autoklaven ved 121°C i 15 minutter. Fordel opløsningen i Petri-skåle eller flasker.
OPBEVARING
Brugsklart medium (Petri-skåle): ved +2 – 20°C.
Brugsklart medium (rør og flasker): ved +2 – 8°C.
Dehydreret medium: forseglet flaske på et tørt sted ved +15 – 25°C.
Udløbsdatoen og partinummeret er angivet på emballagen.
5-
•
•
•
6- BRUGSVEJLEDNING
Materialer:
•
Materialer, der medfølger: Chapman-mannitsaltagarmedium
Inokulation:
Inokuler ved at stryge direkte fra den prøve, der skal undersøges. Se de gældende anbefalinger for opbevaring af biologiske
prøver (2).
Inkubation:
Inkuber i 24 – 48 timer ved 37°C.
Aflæsning:
Mannit (+): gult farvet medium.
Mannit (-): ingen farve.
Stammer fra Staphylococcus aureus giver deres egen pigment. Kolonier er omgivet af en gul ring efter 24 – 48 timer på grund
af mannitets gæring. Stammer af Staphylococcus epidermidis og andre Micrococcaceae danner små kolonier, der i de fleste
tilfælde vokser, uden at mediets farve ændres. Et stor mængde S. epidermidis-stammer kan dog få mannit til at gære.
7•
•
•
YDEEVNE OG KVALITETSKONTROL AF TESTEN
Det brugsklare mediums udseende: klar rød agar.
Det dehydrerede mediums udseende: lyserødt pulver.
Vækstraterne for Chapman-mannitsaltagarmediet kontrolleres med følgende stammer:
STAMMER
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Staphylococcus saprophyticus ATCC 15305
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
Proteus mirabilis ATCC 25933
Escherichia coli ATCC 25922
KULTURRESULTAT EFTER 24 – 48 TIMER VED
37°C
Gule kolonier
Gule kolonier
Lyserøde kolonier
Ingen vækst
Ingen vækst
8- PRODUCENTENS KVALITETSKONTROL
Alle producerede reagenser forberedes i overensstemmelse med vores kvalitetssikringssystem, lige fra modtagelsen af
råmaterialerne til markedsføringen af produktet. Hvert parti af slutproduktet gennemgår kvalitetskontrol og markedsføres kun,
hvis det opfylder de foruddefinerede kvalitetskriterier. Dokumentation vedrørende produktion og kontrol af hvert parti opbevares
inden for virksomheden.
9-
BEGRÆNSNINGER FOR BRUG
•
•
Der skal udføres supplerende test for at identificere arterne af den isolerede stamme.
Enterokokker og gruppe D-streptokokker kan vokse på dette medium og fremvise en svag gæring af mannit. Disse
kolonier er dog små og kan nemt holdes adskilt fra stafylokokker ved Gram-farvning eller katalasetest.
10- REFERENCER
1. CHAPMAN, G.H., The significance of sodium chloride in studies of staphylococci, J. Bact. 1945. 50 : 201-203.
2. Basic Laboratory Procedures in Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva.1991. 1st edition.
ΑΛΑΤΟΥΧΟ ΑΓΑΡ ΜΑΝΝΙΤΟΛΗΣ ΤΟΥ CHAPMAN
53647 - 53648 - 63844 - 64134
ΥΛΙΚΟ ΑΠΟΜΟΝΩΣΗΣ ΚΑΙ ∆ΙΑΦΟΡΟΠΟΙΗΣΗΣ ΣΤΑΦΥΛΟΚΟΚΚΩΝ
1- ΠΡΟΒΛΕΠΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ
Το αλατούχο άγαρ µαννιτόλης του Chapman είναι ένα υλικό επιλεκτικής αποµόνωσης και απαρίθµησης σταφυλόκοκκων.
Χρησιµοποιείται επίσης στη διαφοροποίηση των ειδών ζύµωσης της µαννιτόλης και των αζυµωτικών ειδών της µαννιτόλης.
2- ΒΑΣΙΚΗ ΑΡΧΗ
Η επιλεκτικότητα του υλικού αυτού βασίζεται στην παρουσία χλωριούχου νατρίου το οποίο αναστέλλει την ανάπτυξη της
πλειονότητας των βακτηρίων Gram (+) και των βακτηρίων Gram (-).
Η διαφοροποίηση των σταφυλόκοκκων βασίζεται στην ικανότητά τους να προκαλούν ζύµωση της µαννιτόλης. Κατά τη ζύµωση
της µαννιτόλης το µέσο γίνεται όξινο και παρουσία ερυθρού φαινόλης (δείκτης pH) αποκτά κίτρινο χρώµα.
3•
•
•
ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΟ ΥΛΙΚΟ
Υλικό έτοιµο προς χρήση:
συσκευασία στην οποία περιέχονται 20 τρυβλία Petri (90 mm) (αλατούχο άγαρ µαννιτόλης-MSA)
25 σωληνάρια κεκλιµένης καλλιέργειας (slant) των 10 ml
κωδικός 53648
Υλικό έτοιµο προς χρήση (προς κατανοµή)
6 φιάλες των 200 ml (αλατούχο άγαρ µαννιτόλης-MSA)
κωδικός 53647
Αφυδατωµένο υλικό
φιάλη των 500 g
κωδικός 64134
κωδικός 63844
4- ΘΕΩΡΗΤΙΚΗ ΣΥΝΘΕΣΗ (σε g/l απεσταγµένου νερού)
Το αλατούχο άγαρ µαννιτόλης του Chapman παρασκευάζεται σύµφωνα µε τη σύνθεση του Chapman (1).
Πεπτόνη
10
Εκχύλισµα βοείου κρέατος
1
Χλωριούχο νάτριο
75
Μαννιτόλη
10
Ερυθρούν φαινόλης
0.025
Άγαρ
15
Προετοιµασία του υλικού:
Οµογενοποιήστε τη σκόνη που περιέχεται στη φιάλη.
Προσθέστε 111 γραµµάρια αφυδατωµένου υλικού σε ένα λίτρο αποστειρωµένου αποσταγµένου νερού. Αναµείξτε έως ότου
δηµιουργηθεί οµοιογενές εναιώρηµα. Θερµάνετε ελαφρώς το εναιώρηµα, αναδεύοντας σε τακτά χρονικά διαστήµατα έως ότου
το υλικό διαλυθεί πλήρως. Ρυθµίστε το pH στην τιµή 7,4 εφόσον κριθεί αναγκαίο. Αποστειρώστε σε αυτόκαυστο στους 121°C
για 15 λεπτά. ∆ιανείµετε σε τρυβλία Petri ή σε φιάλες.
5- ΦΥΛΑΞΗ
•
Υλικό έτοιµο προς χρήση (τρυβλία Petri): φυλάσσεται στους 2 έως 20°C.
•
Υλικό έτοιµο προς χρήση (σωληνάρια και φιάλη): φυλάσσεται στους 2 έως 8°C.
•
Αφυδατωµένο υλικό: φυλάσσεται σε ερµητικά κλειστή φιάλη, σε ξηρό µέρος και σε θερµοκρασία από 15 έως 25°C.
Η ηµεροµηνία λήξεως καθώς και ο αριθµός παρτίδας αναγράφονται στη συσκευασία.
6- Ο∆ΗΓΙΕΣ
Υλικό:
•
Παρεχόµενο υλικό: Αλατούχο άγαρ µαννιτόλης του Chapman
Ενοφθαλµισµός:
Ενοφθαλµίστε απευθείας µε γραµµωτή επίστρωση του δείγµατος που θα εξεταστεί. Όσον αφορά τη φύλαξη βιολογικών
δειγµάτων, ανατρέξτε στις συστάσεις φύλαξης (2).
Επώαση:
Επωάστε επί 24 έως 48 ώρες στους 37°C.
Ανάγνωση:
Θετικό στη µαννιτόλη: το υλικό είναι κίτρινο.
Αρνητικό στη µαννιτόλη: απουσία χρώµατος.
Τα στελέχη του Staphylococcus aureus παράγουν τους δικούς τους χρωµατισµούς. Εντός 24 έως 48 ωρών οι αποικίες
περιβάλλονται από έναν κίτρινο δακτύλιο εξαιτίας της ζύµωσης της µαννιτόλης. Σχηµατίζονται µικρές αποικίες στελεχών του
Staphylococcus epidermidis και άλλων Micrococcaceae, τα οποία, στην πλειονότητα των περιπτώσεων, αναπτύσσονται δίχως
να προκαλούν αλλαγή του χρώµατος του υλικού. Ωστόσο, ελάχιστα είναι τα στελέχη του S. epidermidis που µπορούν να
προκαλέσουν ζύµωση της µαννιτόλης.
7- ΕΠΙ∆ΟΣΕΙΣ / ΠΟΙΟΤΙΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ ΤΗΣ ∆ΟΚΙΜΗΣ
Όψη του έτοιµου προς χρήση υλικού: διαυγές άγαρ κόκκινου χρώµατος.
Όψη αφυδατωµένου υλικού: σκόνη ροζ χρώµατος.
Οι επιδόσεις του αλατούχου άγαρ µαννιτόλης του Chapman ως προς την ανάπτυξη ελέγχονται µε βάση τα ακόλουθα στελέχη:
ΣΤΕΛΕΧΗ
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Staphylococcus saprophyticus ATCC 15305
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
Proteus mirabilis ATCC 25933
Escherichia coli ATCC 25922
ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑΣ ΜΕΤΑ ΑΠΟ 24 έως 48
ώρες στους 37°C
Αποικίες κίτρινου χρώµατος
Αποικίες κίτρινου χρώµατος
Αποικίες ροζ χρώµατος
Απουσία ανάπτυξης
Απουσία ανάπτυξης
8- ΕΛΕΓΧΟΣ ΠΟΙΟΤΗΤΑΣ ΕΚ ΜΕΡΟΥΣ ΤΟΥ ΚΑΤΑΣΚΕΥΑΣΤΗ
Όλα τα προϊόντα που κατασκευάζονται και διατίθενται στο εµπόριο από την εταιρία µας υποβάλλονται σε όλες τις διεργασίες του
συστήµατος διασφάλισης ποιότητας, από την παραλαβή των πρώτων υλών έως την εµπορευµατοποίηση των τελικών
προϊόντων. Κάθε παρτίδα τελικού προϊόντος υποβάλλεται σε έλεγχο ποιότητας και διατίθεται στο εµπόριο µόνον όταν
συµµορφώνεται προς τα κριτήρια αποδοχής. Η τεκµηρίωση σχετικά µε την παραγωγή και τον έλεγχο κάθε παρτίδας τηρείται
εντός της εταιρίας Bio-Rad.
9•
•
ΟΡΙΑ ΧΡΗΣΗΣ
Για την ανίχνευση των ειδών των αποµονωµένων στελεχών πρέπει να διενεργούνται συµπληρωµατικές δοκιµές.
Στο υλικό αυτό µπορούν να αναπτυχθούν εντερόκοκκοι και στρεπτόκοκκοι της οµάδας D, προκαλώντας µέτριου βαθµού
ζύµωση της µαννιτόλης. Ωστόσο, οι αποικίες αυτές είναι µικρές και µπορούν εύκολα να διακριθούν από τους
σταφυλόκοκκους µέσω της χρώσης κατά Gram ή της δοκιµής καταλάσης.
10- ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΑ
1. CHAPMAN, G.H., The significance of sodium chloride in studies of staphylococci, J. Bact. 1945. 50 : 201-203.
2. Basic Laboratory Procedures in Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva.1991. 1st edition.
CHAPMAN - MANNITOL SÓS AGAR
53647 - 53648 - 63844 - 64134
IZOLÁLÓ ÉS DIFFERENCIÁLÓ TÁPTALAJ STAPHYLOCOCCUSOKHOZ
1- FELHASZNÁLÁS
A Chapman-mannitol sós agar szelektív táptalaj staphylococcusok izolálásához és kimutatásához. Alkalmas arra is, hogy
megkülönböztethessük egymástól a mannitolt fermentáló és nem fermentáló specieseket.
2- ALAPELV
A táptalaj szelektivitása a nátrium-klorid jelenlétének köszönhető, amely gátolja a legtöbb Gram pozitív és Gram negatív
baktérium növekedését.
A staphylococcusok differenciálása a mannitol fermentáló képességükön alapul. A mannitol lebontása savanyodást idéz elő, s
ettől a táptalaj fenolvörös indikátor jelenlétében megsárgul.
3•
•
•
KISZERELÉS
Azonnali felhasználásra kész táptalaj:
20 Petri-csészét (90 mm) tartalmazó doboz (MSA)
25 db 10 ml-es ferde agaros cső
Felhasználásra (öntésre) kész táptalaj:
6 db 200 ml-es üveg (MSA)
Portáptalaj:
500 g
kódszám 63844
kódszám 53648
kódszám 53647
kódszám 64134
4- ELVI ÖSSZETÉTEL (g/l desztillált víz)
A Chapman-mannitol sós agart a Chapman által leírt recept szerint készítjük (1).
Pepton
Marhahús kivonat
Nátrium-klorid
Mannitol
Fenolvörös
Agar
Végső pH-érték: 7,4 ± 0,2
10
1
75
10
0.025
15
A táptalaj elkészítése:
Keverjük össze az üvegben található port.
Adjunk 111 gram portáptalajt egy liter steril desztillált vízhez. Addig keverjük, amíg homogén szuszpenziót nem kapunk. Ezután
lassan melegítsük, gyakori rázogatás mellett, majd forraljuk fel, amíg teljesen fel nem oldódik. Sterilizáljuk autoklávban 121°Con 15 percig.
Öntsük ki Petri-csészékbe, vagy palackokba.
5- TÁROLÁS
•
Az azonnali felhasználásra kész táptalajt (Petri-csésze) +2-20°C között tároljuk.
•
Az azonnali felhasználásra kész táptalajt (csövek és üveg) +2-8°C között tároljuk..
•
A portáptalajt szorosan lezárt üvegben, száraz helyen, +15-25°C között tároljuk.
A szavatossági idő és a gyártási sorozat száma a csomagoláson olvasható.
6- HASZNÁLATI ÚTMUTATÓ
Anyag:
•
A forgalmazó által szállított Chapman-mannitol sós agar
Leoltás:
Közvetlenül a vizsgálandó mintából szélesztéssel oltsunk le. L. biológiai minták tárolására vonatkozó aktuális ajánlások (2).
Inkubálás:
Inkubáljuk 24 – 48 órán át, 37°C-on.
Leolvasás:
Mannitol (+): a táptalaj sárga színű.
Mannitol (-): színtelen táptalaj.
A Staphylococcus aureus törzsei színanyagot termelnek. A mannitol fermentatív feldolgozásának köszönhetően a telepek körül
24 – 48 órán belül sárga udvar jelenik meg. A Staphylococcus epidermidis és más Micrococcaceae törzsei kis telepeket
•
•
képeznek, amelyek az esetek többségében növekedésük közben nem változtatják meg a táptalaj színét. Viszont a S.
epidermidis törzsek számottevő hányada is képes fermentálni a mannitolt.
7•
•
•
MINŐSÉG / A TÁPTALAJ MINŐSÉGÉNEK ELLENŐRZÉSE
A felhasználásra kész táptalaj megjelenése: víztiszta piros agar.
A száraz alapanyag megjelenése: rózsaszín por.
A Chapman-mannitol sós agart az alábbi törzsekkel ellenőrizzük:
TÖRZSEK
EREDMÉNYEK 24 – 48-órás, 37°C-os tenyésztés
után
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Staphylococcus saprophyticus ATCC 15305
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
Proteus mirabilis ATCC 25933
Escherichia coli ATCC 25922
8-
Sárga telepek
Sárga telepek
Rózsaszín telepek
Nincs növekedés
Nincs növekedés
A GYÁRTÓNÁL FOLYÓ MINŐSÉGELLENŐRZÉS
Az összes termékünk a saját minőségellenőrző rendszerünk szerint készült, a nyersanyag átvételétől kezdve a termék
forgalmazásáig. Minden egyes gyártási sorozat minőségét ellenőrizzük, és csak akkor hozzuk forgalomba, ha az
megfelel az előre felállított kritériumoknak. Minden sorozat gyártási és minőségellenőrzési jegyzőkönyve megtalálható a
Bio-Radnál.
9•
•
AZ ALKALMAZÁS KORLÁTAI
Kiegészítő vizsgálatokat is kell végezni az izolált törzs egyes specieseinek identifikálásához.
Az enterococcusok és a D csoportba tartozó streptococcusok szaporodnak ezen a táptalajon, és kismértékben bontják a
mannitolt. Viszont ezeknek a telepei kicsik, és könnyen megkülönböztethetők a staphylococcusoktól Gram-festéssel, vagy
a kataláz teszttel.
10- HIVATKOZÁSOK
1. CHAPMAN, G.H., The significance of sodium chloride in studies of staphylococci, J. Bact. 1945. 50 : 201-203.
2. Basic Laboratory Procedures in Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva.1991. 1st edition.
Author
Document
Category
Uncategorized
Views
24
File Size
682 KB
Tags
1/--pages
Report inappropriate content