Bulaşıcı Hastalıkların Laboratuvar Tanısı için Saha Rehberi HHV-6 ve HHV-7 ENFEKSİYONLARI Roseola Infantum; Ekzantema Subitum; Altıncı Hastalık EPİDEMİYOLOJİSİ ICD-10 B08.2 Human Herpes Virüsü (HHV) -6 ve -7, betaherpesvirüs alt ailesinde yer alır ve benzer klinik tablolara neden olurlar. HHV-6’nın A ve B olmak üzere iki varyantı vardır. HHV-6B ve HHV-7, küçük çocuklarda yüksek ateş ve makülopapüler döküntülerle karakterize ılımlı bir hastalık olan “Roseola infantum” ve ateşli konvülsiyonlara neden olur. Tüm dünyada yaygın görülen virüslerdir. İlk karşılaşmadan sonra vücutta kemik iliği ve periferik kan mononükleer hücrelerinde latent kalan virüs zaman zaman reaktive olarak tükürük ile yayılır. HHV-6B ile karşılaşma genellikle 2 yaşın altında olur ve erişkinlerde seroprevalansı %90100’e ulaşır. Bulaşma tükürük aracılığı ile olur. KLİNİK ÖZELLİKLERİ Primer enfeksiyon - genellikle 6 ay-2 yaş arası çocuklar etkilenir. Roseola infantumda 3-5 günlük 39-40C ateşli dönemi izleyen ve 1-3 gün süren, ense ve gövdede, pembe renkte makulopapüler döküntüler görülür. Kendini sınırlayan ılımlı bir hastalıktır. Bazen döküntüsüz yüksek ateş, febril konvülsiyon ve ensefalopatiye neden olur. Olguların %5’i asemptomatiktir. Erişkinlerde primer enfeksiyon nadirdir; lenfadenopati, mononükleoz benzeri sendrom ve menenjit/ensefalit tabloları görülebilir. Reaktivasyonlar - sağlıklı kişide klinik belirti olmaksızın replikasyon olması ve tükürük ile virüs yaymaya başlaması şeklindedir. İmmün baskılı kişilerde reaktive olan virüs posttransplantasyon doku reddine, ateş, döküntü, hepatit, kemik iliği supresyonu ve ensefalite neden olabilir. Tanı; serolojik yöntemlerle özgül antikorların ve nükleik asit amplifikasyon testi (NAAT) ile viral DNA’nın gösterilmesine dayanır. HHV-6 ve HHV-7 ENFEKSİYONLARI TANISI İÇİN LABORATUVAR İNCELEMESİ Laboratuvara ne tür klinik örnekler gönderebilirim? Serolojik tanı için – serum Virüs izolasyonu için – tam kan (heparinli) Nükleik asit amplifikasyon testleri (NAAT) için – serum, plazma, tükürük Örnek almak için en uygun zaman nedir? Serolojik tanı için, akut ve konvalesan faz olmak üzere en az iki hafta ara ile alınan çift serum örneği gönderilmelidir! NAAT için; viral replikasyondan şüphelenildiğinde örnek gönderilmelidir. Örnekle birlikte göndermem gereken özel bir form var mı? Ek-4’de verilen veya benzeri bir “Laboratuvar Bilgi Formu” mutlaka ve eksiksiz olarak doldurulmalı ve örneklerle birlikte laboratuvara gönderilmelidir. Formda ön tanı mutlaka not edilmelidir. [HHV-6 ve HHV-7 ENFEKSİYONLARI] Sayfa 1 Bulaşıcı Hastalıkların Laboratuvar Tanısı için Saha Rehberi Örnek almak için gerekli malzemeler nelerdir? Nasıl temin edebilirim?* Klinik örnekleri hastadan nasıl almalıyım? Gerekiyorsa, hangi işlemleri uygulamalıyım? Şehir içi Şehirlerarası (kısa mesafe) (uzun mesafe) taşıma süre-sıcaklık taşıma süre-sıcaklık Antikoagülansız, jelli vakumlu, serum tüpü Serum: Hastadan önerilen tüpe 5 ml kan alınır; 5-6 kez yavaşça alt üst edilerek karıştırılır. Çalkalama işleminden kesinlikle kaçınılmalıdır. 15-20 dk bekledikten sonra santrifüj edilir ve laboratuvara gönderilir. ≤1 s; OS ≤48 s; +4C >1 s; +4C NAAT için >48 s; kuru buz içinde (-70C) ≤1 s; OS ≤48 s; +4C >1 s; +4C NAAT için >48 s; kuru buz içinde (-70C) ≤1 s; OS <18 s; +4C DİKKAT: ağzı pamuk tıkaçlı veya flasterli bir tüp, asla kullanılmaz! EDTA veya ACD içeren vakumlu kan alma tüpü, DİKKAT! Heparinli tüp kullanılmaz! NAAT (PCR v.b.) için plazmayı ayırmada kullanılacak nükleaziçermeyen vida kapaklı özel tüp Laboratuvara ulaşma süresi >48 saat ise (ya da jel içermeyen kan tüpü kullanılmış ise) serum kısmı santrifüj sonrası hemen steril bir tüpe ayrılmalıdır. Bu serum en fazla 5 güne kadar buzdolabında saklanabilir; örneğin gönderilmesi daha uzun sürecek ise örnek -20C’ye veya -70C’ye kaldırılmalı; çözülmeden kuru buzda laboratuvara ulaştırılmalıdır. Tam kan (plazma için): Hastanın kanı EDTA ya da ACD içeren bir tüpe alınır. En az 2 ml kan alınmalıdır. Pıhtı oluşmaması için kan alınır alınmaz tüp 5-6 kez yavaşça alt üst edilerek karıştırılır ve mümkünse hemen laboratuvara gönderilir. Çalkalama işleminden kesinlikle kaçınılmalıdır. Örnek, kan alındıktan sonraki 1 saat §içinde testin yapılacağı laboratuvara ulaşamayacaksa NAAT için plazma kısmı nükleaz-içermeyen vida kapaklı özel tüpe alınmalıdır. İşlem moleküler testler için uygun malzeme ve şartlar sağlanarak (eldiven, steril filtreli-pipet ucu) yapılmalıdır. Örnek 48 saat içinde laboratuvara ulaşamayacaksa -70C’ye kaldırılmalı ve kuru buzda taşınmalıdır. § Heparinli vakumlu kan alma tüpü Tam kan (viral kültür için): En az 5 ml hasta kanı heparinli bir tüpe alınır. Pıhtı oluşmaması için kan alınır alınmaz tüp 56 kez nazikçe alt üst edilerek karıştırılır ve laboratuvara gönderilir. Kültür için 24 saat içinde laboratuvarda Ficollgradient işlemine tabii tutulması gerektiğinden taşıma süresi buna göre ayarlanmalıdır! Steril silgiç, dacron veya rayon uçlu, Tükürük örneği: HHV-6 veya -7’nin PCR ile saptanması için ağız sürüntüsü veya boğaz sürüntüsü steril silgiç ile alınıp steril SF içeren tüpe konur. Steril, vida kapaklı (sızdırmaz) tüp veya kap § Alternatif olarak hastanın tükürük vermesi istenir ve steril geniş ağızlı bir kaba konur. >1 s; +4C ≤1 s; OS ≤48 s; +4C >1 s; +4C >48 s; kuru buz içinde (-70C) Kısaltmalar - s: saat; dk: dakika; OS: oda sıcaklığı; EDTA: etilen diamin tetra asetik asit; ACD: asit sitrat dekstroz; NAAT: nükleik asit amplifikasyon testleri; PCR: polimerase chain reaction * Tabloda önerilen örnekleme malzemesini -ayrıca belirtilmedikçe- hastanenizin laboratuvarından temin edebilirsiniz. § Testin çalışılacağı laboratuvara örneğin alınması ve gönderilmesi ile ilgili özel bir uyarılarının olup olmadığını sormanız önerilir. Güvenlik önlemleri nelerdir? Kendimi nasıl koruyabilirim? En ciddi risk kan alma işlemi esnasında personele kan-kaynaklı patojenlerin (özellikle HIV ve hepatit etkenleri) bulaşma riskidir. Kan alma, serum ayırma gibi işlemler yapılırken kesinlikle eldiven giyilmeli, standart güvenlik önlemleri uygulanmalıdır. Ayrıca her türlü klinik örnek “enfeksiyöz” kabul edilmeli ve örnekleri alırken, dokunurken, çalışırken standart güvenlik önlemleri alınmalı, uygun kişisel koruyucu ekipman giyilmelidir. Örnekleri hangi laboratuvara gönderebilirim? HHV-6 ve -7 enfeksiyonlarının tanısı için incelemeler rutin laboratuvarlarda yapılmaz. Bu nedenle örnekleri Viroloji Birimi bulunan ve/veya bu testleri yaptığı bilinen size en yakın Üniversite Hastanesi veya Eğitim Araştırma Hastanesi laboratuvarına gönderiniz. Hangi durumlarda örnekler laboratuvara kabul edilmez? Şu örnekler laboratuvara kabul edilmez: Sayfa 2 hemolizli veya lipemik serum örnekleri (hatalı sonuç verebilir); NAAT için uygun tüplere konmamış örnekler (viral DNA gösterilemeyebilir); ağzı pamuk veya flaster ile kapatılmış tüp içinde gönderilmiş örnekler; taşıma kabı hasar gördüğü için kabın dışına sızmış örnekler; önerilen süre içerisinde ve uygun sıcaklıkta gönderilmemiş örnekler; örneği içeren tüp/kap üzerinde hasta bilgileri yazılı olmayan örnekler; hastaya ait uygun bir istek formu düzenlenmemiş örnekler. [HHV-6 ve HHV-7 ENFEKSİYONLARI] Bulaşıcı Hastalıkların Laboratuvar Tanısı için Saha Rehberi Hangi laboratuvar incelemelerini isteyebilirim? Sonuçları ne kadar zamanda alabilirim? Sonuçları nasıl yorumlamalıyım? Seroloji – ELISA veya IFA (IgM) 1 gün* Serolojik incelemede HHV-6’nın A ve B varyantları ile HHV-7 ve kısmen CMV arasında çapraz reaksiyon görülebileceği hatırlanmalıdır. IgM pozitifliği güçlü bir şekilde akut enfeksiyonu düşündürür. Yalnızca IgM’in pozitif bulunması tek başına yeterli değildir. HHV-6 IgM’in primer enfeksiyon sırasında 5-7. günde pozitifleştiği, 2-3 haftada pik yaptığı ve iki ayda kaybolduğu hatırlanmalıdır. Seroloji – ELISA veya IFA (IgG) 1 gün* IgG pozitifliği tek serum örneğinde saptanmış ise virüs ile daha önce karşılaşıldığını gösterir. Primer enfeksiyon veya reaktivasyonun güvenilir tanısı için akut ve konvalesan dönemde alınan iki serum örneğinde serokonversiyonun veya IgG titresinde ≥4 kat artışın gösterilmesi gerekir. IgG pozitifliği 7-10. günden sonra saptanır. NAAT 1-2 hafta* İmmün baskılı vakalarda tanı için kan ve doku örneklerinde, ensefalit varsa BOS örneklerinde viral DNA’nın gösterilmesi gerekir. NAAT ile pozitif bulgu aktif viral replikasyon göstergesidir. HHV-6 DNA’sı, primer enfeksiyondan sonra bir ay kadar kanda saptanabilir. * Laboratuvar örnek birikimine göre çalışıyor olabilir. Sonucun çıkış süresi için laboratuvar ile bağlantı kurunuz! Daha fazla bilgi için önerilen kaynaklar: 1. Pellett PE, Tipples G. İnsan Herpesvirusler 6, 7 ve 8. (In: Manual of Clinical Microbiology. Murray PR, Baron EJ, Jorgensen JH, Landry ML, Pfaller MA eds) Klinik Mikrobiyoloji, 9. Baskı. Çeviri editörü: Başustaoğlu A, Atlas Kitapçılık, Ankara, ISBN 978-975-7175-84-1. 2009; s. 1574-1588 2. Ward KN, Clark DA. Roseoloviruses: Human Herpesviruses 6A, 6B and 7. In: Principles and Practice of Clinical Virology. Zuckerman AJ, Banatvala JE, Schoub BD, Griffiths PD, Mortimer P, eds. 6th Ed., John Wiley & Sons, Ltd., Sussex, UK, 2009; s. 223-244. [HHV-6 ve HHV-7 ENFEKSİYONLARI] Sayfa 3
© Copyright 2024 Paperzz