Circolare n. 29

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Stradello Aggazzotti,104 – Modena -  +39 059 8637161  +39 059 8637162
Il genere Legionella è rappresentato attualmente da 48 specie che
comprendono 70 sierogruppi. Legionella pneumophila, è
costituita da 15 sierogruppi e, con il SG 1, è quella predominante
in patologia umana. Gli aminoacidi, in particolare la cisteina, ne
costituiscono la fonte energetica principale così come i composti
del ferro ne stimolano la crescita, insieme ad altri elementi in
tracce ( Cu, Mg, Mn ).
La ISO 11731:1998 al punto 3.1 definisce Legionella come
microrganismo Gram negativo normalmente capace di crescere in
non meno di due giorni su agar tamponato contenente carbone,
estratto di lievito, L-cisteina e ferro, formando colonie in genere
bianche o grigie, ma anche con colorazioni molto variabili che
vanno dal viola al blu, al verde cedro.
Queste condizioni, unitamente all’assenza di crescita in terreno di
coltura privo di L-cisteina, sono sufficienti per l’identificazione
presuntiva di Legionella.
Isolamento 8 gg
su terreno selettivo
(GVPC)
Generon grazie alla collaborazione con Bio-Rad propone una
soluzione completa per la ricerca di Legionella che contempla:
•
terreni di coltura e isolamento
•
Kit di ricerca e quantificazione di Legionella spp. E
pneumophila con tecnica Real-Time PCR certificati AFNOR
•
Latex di conferma
•
Test di sierotipizzazione di Legionella pneumophila
tecnica Real-Time PCR
•
Campionatore di aerosol
Conferma Legionella spp.
48 hr su terreno selettivo
(BCYE)
con
Conferma e sierotipizzazione
di L.pneumophila
su Latex
Filtrazione
del campione
Estrazione
del DNA
con Kit Bio-Rad
Aquadien™
PATHfinder
Legionella pneumophila
Dual ID Assay
Sierotipizzazione Via qPCR
Le colonie presunte sono testate con reagenti che consentono di
rilevare le specie più frequenti e di interesse clinico (Legionella
pneumophila SG 1, SG 2-15). La tipizzazione deve essere eseguita
almeno su una decina di colonie aventi le stesse caratteristiche.
Ricerca del DNA
di Legionella spp. o L. pneumophila
e loro eventuale quantificazione
con kit Real-Time PCR Bio-Rad iQ-Check
Generon propone nella sua linea PATHfinder due
diversi test per la sierotipizzazione di Legionella
pneumophila basati su tecnica Real-Time PCR che
consentono: l’analisi di DNA estratti con il kit Bio-Rad
Aquadien™ precedentemente trovati positivi per la
presenza di L. pneumophila con il kit Bio-Rad iQ-Check;
l’identificazione di colonie isolate su BCYE come
Legionella pneumophila nei sierogruppi 1 o 2-15. In
Conferma e sierotipizzazione
di L. pneumophila SG1 – SG2-15
con Colony Real-Time PCR
Generon PATHfinder
questo secondo caso, utilizzando l’approccio colony
PCR, non serve nemmeno eseguire l’estrazione del DNA
con un notevole risparmio di tempo e denaro.
I test PATHfinder sono stati sviluppati dal gruppo R&D
di Generon utilizzando sequenze pubblicate nella
letteratura scientifica internazionale e validati sugli
strumenti PCR Real-Time Bio-Rad.
Catalogo Prodotti
Mastermixes
•
•
ENG001-ID
ENG002-ID
GENERase Mastermix Colony ID – 50 tests
GENERase PLUS Mastermix Colony ID – 50 tests

Contiene controllo interno positivo di amplificazione
Assays
•
PMB15D-SG1
PATHfinder Legionella pneumophila Serogroup 1 ID Assay - 100 tests

•
PMB15D-SG
Rileva il DNA di Legionella del sierogruppo 1 (FAM+)
PATHfinder Legionella pneumophila Dual ID Assay – 100 tests

Rileva il DNA di Legionella del sierogruppo 1 (FAM+) e quello del sierogruppo 2-15 (FAM+HEX+)
Responsabili commerciali di zona
Piemonte, Liguria e VDA
Stefano Callea
Lombardia
Daniela Superchi
Triveneto
Alessandro Ruffato
Simone Ruffato
Emilia Romagna, Marche
Caterina Novi
Puglia e Basilicata
Vito Lorusso
Altre regioni
Nicola Bortoletto
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