有胞子性乳酸菌入りオカラ粉末の継続摂取による便通・便性改善作用に関する臨床試験について ○南田公子*1、西村三恵*2,3、三輪一典*1、西平順*2 （*1 アテリオ・バイオ（株）、*2 北海道情報大学、*3(一社) 北海道食産業総合振興機構）キーワード：有胞子性乳酸菌、オカラ、便通・便性改善 1 背景・目的近年、生活習慣病への関心が高まると共に、その予防作用をもつ機能性食品にも関心が高まっている。大豆は生活習慣病の予防作用が注目されている食品素材であり、タンパク質、食物繊維、ビタミン E、カルシウム等の栄養素のほか、大豆タンパク質、大豆イソフラボン、サポニン、レシチン等の機能性成分を含んでいる。また、有胞子性乳酸菌は、芽胞を形成するために耐熱性があり、通常の乳酸菌では不可能な菓子やパンなどの焼成や乾燥させた食品にも生菌で適用可能である。さらに、芽胞は、胃酸・胆汁酸に耐え、ほぼ 100%腸管に達し、乳酸を生成し、腸や免疫系に有益な影響を与えるので、プロバイオティクスとして利用されている。今回使用した lilac-01 株は、アテリオ・バイオ (株) 独自のライラックの花弁から単離した株である (特許第 5006986 号)。2011 年に行ったオカラと lilac-01 株を添加したパンを被験食としたヒト介入試験では、摂取前と比較して 4 週間摂取後の LDL コレステロール値が有意に低下していた (p<0.05)。今回は、lilac-01 株を添加したオカラ粉末（ライラック乳酸菌®）の便通・便性改善効果を 297 人の被験者で評価を行ったので報告する。 2 方法被験食は、プラセボとしてオカラ粉末（キッコーマンソイフーズ（株））、試験食としてライラック乳酸菌® （アテリオ・バイオ（株））を 1 日あたり１包（2 g）供した。試験食が含有する乳酸菌数は 1 日あたり 1×108 cfu と、ヨーグルト用乳酸菌等の試験の 1/100―1/1000 cfu に設定した。北海道情報大学生命倫理委員会の承認後、便秘傾向を自覚する 20 歳以上 80 歳未満の男女を対象とし、試験責任医師が適格であると認めた 297 名を被験者とした。試験形式は、プラセボ対照ニ重盲検並行群間比較で行った。試験スケジュールを図１に示した。年齢、男女比と、国際的機能性便秘診断基準である ROMEIII アンケートのスコア値が均等になるように 2 群に割り付けた結果、プラセボ摂取群 149 名、有胞子性乳酸菌入りオカラ粉末（ライラック乳酸菌®）摂取群 148 名で試験を実施した。被験者には、毎日被験食 1 包 (2 g) を 2 週間継続摂取していただき、食事制限を行わず通常の食事をとっていただいたが、新たに医薬品やサプリメント等を摂ることは禁止した。スクリーン時には、生活習慣アンケートと、 ROMEIII 診断に基づいたアンケートに答えていただいた。摂取開始１週間前から摂取終了後までは、毎日、排便回数、排便量 (直径 2 cm×長さ 5 cm の円柱何本分か)、便の色と形（しおりの一番近い数字、形は Bristol stool scale を使用、図 2）、便臭、便の出かた、すっきり感を点数で記入していただいた。便の形以外は、状態の悪いほうの点数が小さくなるように設定した。日誌に、毎日の体調、食生活状況、被験食摂取状況も記載していただいた。統計解析は匿名化した後、7 日間の平均値と合計値を算出し、SPSS を用いて、群間比較を変化量の Mann-Whitney U 検定、群内比較を Gemes-Howell 法を用いて行い、有意水準を 5%未満とした。また機能性便秘の被験者と機能性便秘ではない被験者とのサブクラス解析も同様に行った。図 1 試験スケジュール 3 図 2 便の色と形のしおり結果・考察摂取率 8 割未満と日誌記載不足等で 29 名の脱落者がいたため、解析は 268 名で行った。 ROMEIII 診断に基づいたアンケートから、そのうち 137 名（被験者全体の 51%）を機能性便秘の被験者とした。便通・便性の変化を表に示した。開始時と摂取 2 週間後の変化量をプラセボ群と比較すると、被験者全体では、便の形のみが変化する傾向がみられた（p=0.06）。一方、機能性便秘被験者では、便量、すっきり感、便回数が有意に改善し (p<0.05) 、形は有意に変化していた (p<0.05)。便の色、臭いは改善傾向がみられた（p=0.07）。機能性便秘でない被験者では、便量のみに改善傾向がみられた（p=0.07）。機能性便秘被験者の便の臭いに関しては、開始時と摂取 1 週間後に、有意に改善されていた (p<0.05)。開始時と摂取 2 週間後の群内比較では、被験者全体では、プラセボ群の便量 (p<0.05)、乳酸菌群の便量 (p<0.05)、臭い（p<0.01）、すっきり感（p<0.01）が有意に改善した。機能性便秘では、便量、色、臭い、出かた、すっきり感、便回数が有意に改善した（p<0.01）。機能性便秘でない被験者では、変化がみられなかった。以上のことから、297 人の被験者で行ったヒト介入試験の結果、機能性便秘の被験者では、有胞子性オカラ粉末（ライラック乳酸菌®）を一日 2 g （1×108 cfu）摂取することにより、プラセボと比較して、便通・便性（便量、形、すっきり感、回数）が有意に改善することが示された。 Biosci. Biotechnol. Biochem., 79, 300-306 (2015). 図 3 機能性便秘被験者 (137 人) の摂取前 1 週間 (Week 0) と摂取後第 2 週(Week 2) の平均変化値. (a) 便量, (b) スッキリ感, (c) 排便回数（箱ひげ図の箱は, データの 25%-75%を示し、箱の中の線は中央値を示す. 上下にのびる「ひげ」の長さは、箱の長さの 1.5 倍以内にある最大値と最小値までの距離で, 1.5 倍を超えるデータは○で示す. 摂取前 1 週間 (Week 0) と摂取後第 2 週 (Week 2) の 1 日当たりの平均値をそれぞれ計算した.この 1 日当たりの平均値の変化値を使用して, プラセボ群と試験食群との有意差検定を Mann-Whitney’s U-法を用いて行った. *P<0.05：プラセボ群と比較して 5%未満を有意水準とした. ）