DIG ラベリングおよび検出実験のための設備 10. DIGラベリングおよび検出実験のための設備 D I G の 基 礎 以下の表は, DIGラベリングおよび検出実験のために必要とされる設備, 器具など常備品, および ロシュ社の試薬を一覧にしたものです. DIG実験で必要とされる主な実験設備 設 備 マグネティック・スターラープレート 1 ヴォルテックス(Vortexer) 1 マイクロ遠心分離機(Microcentrifuge) 1 UVクロスリンカー(Stratalinkerなど) 1 水平式のゲル電気泳動装置 1〜2 パワーサプライ 1〜2 マイクロウェーブ 1 バランス 1 UVトランスイルミネーター 1 沸騰用ウォーターバス 1 温度調節(37℃〜68℃)ができるシェーカー付きウォーターバス PCRサーマルサイクラー 1 ハイブリダイゼーション用バッグを閉じるためのヒートシーラー フィルム現像装置 1 必要な数 2,3 X-線フィルム用カセット 1〜2 1 1 1 3 水平式平面(プラットフォーム)シェーカー 冷凍冷蔵庫 2〜3 1〜2 1 1 PCRラベリングのみに必要. 2 DIGの実験操作エリアの近くに設置すること. 3 イメージャーが設置されている場合, X-線フィルムや器具は不要. 33 DIG ラベリングおよび検出実験のための設備 一般的な実験器具 D D I I G G の の 基 基 礎 礎 器 具 スパーテル 三角(アーレンマイヤー)フラスコ(200 ml, 500 ml) 滅菌済みメスシリンダー(50 ml, 100 ml, 500 ml, 1000 ml) ガラスびん(1リットル, 500 ml) マグネティック・スターラーバー(滅菌済み, RNaseフリー) 1 温度計 ピペッター(1 ml, 200/100μl, 10μl) ピペッター用滅菌済みチップ 滅菌済みピペット(10 ml) ピペッティング用バルブ 滅菌済みマイクロ遠心チューブ(1.5 ml) マイクロ遠心チューブ立て パラフィルム はさみ 先の平らなピンセット 解剖用メス(スカルペル) (オプション) Whatman 3 MM ろ紙 手袋, いろいろなサイズ(パウダーフリー) 油性マーカー 50 ml 滅菌ディスポーザブルの目盛り付き円錐チューブ 15 ml 滅菌ディスポーザブルの目盛り付き円錐チューブ ディスポーザブルの実験用タオル 発砲スチロール製で浮力のあるマイクロ遠心チューブ立て ふた付きプラスチック製トレー(プレハイブリダイゼーション, ハイブリダイゼーション, 検出の際のインキュベーション用) 150 mm ペトリ皿(ラベリング効率を直接検出する際のインキュベーション用) ディスポーザブルの実験用ティッシュ 氷を入れる容器と氷 実験台用紙 アルミホイル 鉛の輪などの重り(ハイブリダイゼーション用メンブレンをインキュベーション中に 水平に保つため) アセテートセルロースフィルター, 0.45μm(オプション, ラベルされたプローブの精製のため) 34 DIG ラベリングおよび検出実験のための設備 器 具 滅菌済みシリンジ(5 ml) (オプション, フィルター滅菌用) D I G の 基 礎 タイマー Thin-walled PCR用チューブ(200μl) フィルター滅菌済み再蒸留水 フィルター滅菌, DMDCまたはDEPC処理済み再蒸留水 RNase-ZAPまたは同様の製品 1 エチルアルコール ロシュ・ダイアグノスティックス社から発売されている試薬およびキット 試薬およびキットの名称 カタログ番号 High Pure Nucleic Acid Purification Kits ノート 1 を参照 DNAまたはRNA Labeling Kit(s) この章の41ページ, セクション 2 を参照 Agarose, MP 1 444 964 SDS, 粉末 1 028 693 DNAまたはRNA Molecular Weight Marker, unlabeled ノート 2 を参照 DNAまたはRNA Molecular Weight Marker, DIG-Labeled ノート 2 を参照 Hybridization Bags 1 666 649 DIG Easy Hyb buffer, ready-to-use, RNase- and DNase-free 1 603 558 20 × SSC 1 666 681 Anti-DIG-alkaline phosphatase(酵素標識抗体) 1 093 274 DIG Wash and Block Buffer Set 1 585 762 Nylon Membrane, Positively Charged 1 417 240 Chemiluminescent substrate - 選択が可能 CDP-Star, ready-to-use CSPD, ready-to-use 2 041 677 1 755 633 検出記録用設備 Lumi-Film Chemiluminescent Detection Film 1 666 657 1 High Pure核酸精製用キットは, 精製度の高いテンプレートを必要とするDIGラベリングに対して, 最も簡 便な方法をもたらす製品ラインです. 現在発売されているHigh Pureの全製品については, ウェブサイトを 参照ください(http://www.roche-applied-science.com). 2 現在発売されている分子量マーカーについては, ウェブサイトを参照ください. (http://www.roche-applied-science.com) 35
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