研究概要１） 1-1) オリーブ葉由来ポリフェノールの機能解析はじめに「食べる」ことは、生物が生きるために必要不可欠なことである。従って、「食べる」ことは、「生きる」ことであるといっても過言ではない。それに対して、「食生活」は、人間のみに可能な活動である。人間は、生物学的存在だけではなく社会的存在である。従って、「食生活」は、単なる「栄養素」の摂取にとどまらず、食料、環境、エネルギー、そして健康が直接的に影響し合い、かつ人間が築き上げた文明に起因する要因（社会、文化、宗教、経済など）をも包含する活動、それが「食生活」だといえる（Fig. 1）。この図式は、まさに「農学」が取り組むべき課題とも合致している。例えば、近年、我が国は飽食の時代と呼ばれ、食生活が非常に多様化してきた。その中で、先進国を中心に摂取カロリーの偏重および増加と、運動量の低下により、肥満者が増加し、肥満に起因する糖尿病、高血圧症、高脂血症、いわゆるメタボリック・シンドロームが深刻な問題となってきている。それ故に、健康志向、特に生体調節機能のある食品への注目が高まっている。一方で、環境問題、特に廃棄物の問題が深刻化している。その解決策は、廃棄物そのものを減らしていくか、もしくは廃棄物を有効利用し、資源化していくことにある。その資源化の中には、廃棄物や未利用資源の食品へ応用も重要な位置を占めている。これらを合わせて考えてみると、未利用資源のなかで生体を調節する有効成分を見出し、それを積極的に食品へ応用することが望ましいのではないだろうか。それを可能ならしめるためには、さまざまな科学的実験による知見を蓄積する必要がある。そこで重要になってくるのは、「どの素材・成分」の「どのような効果」を「どういう方法」で明らかにするかということになる。しかも、食品や栄養素の場合、体内での動態を追跡することも重要なこととなってくる。そこで、素材や成分面というアプローチから、オリーブ葉ポリフェノールの機能性について研究を行っている。 2-2) 未利用資源としてのオリーブ葉未利用資源の食品への応用を考える上で、ポリフェノールに着目して考えることは、食品の生体調節機能（３次機能）の観点からも重要である。多くの未利用資源は、果実部分を食品に利用した後に残る果皮や葉部である。その中には、ポリフェノール類が多く含有していることを考えると、未利用資源中のポリフェノール類の探索は重要になってくる。しかし、未利用資源中のポリフェノールは、未だ栄養生理学的機能が判然としないものも多いが故に、市場で認知されないものも多い。オリーブ（Olea europea）は、古来より地中海世界の食生活の中心的な食品素材として利用されてきた。しかし、利用されるのはもっぱら実の部分であり、葉部はほとんど利用されることがなかった。近年、このオリーブ葉が、食品素材として注目を集めている。それは、オリーブ葉の抽出エキスに、血糖降下作用 1）、抗高血圧作用 2）、抗酸化作用 3）など生体における機能性が報告され始めてきたからである。また、オリーブ葉よりポリフェノールであるオレウロペイン（Fig. 2）が発見され 4）、それが機能性の本体であると考えられている。従って、オリーブ葉は、未利用資源の有効利用の観点から有望な素材であると考えられる。 2-3) オリーブ葉の栄養機能性オリーブ葉の栄養機能性についての検討を行うことを目的に、オリーブ葉給餌およびオリーブ葉抽出粉末給餌で動物実験を行った。その結果、糞中の胆汁酸、総脂質の顕著な低下が観察された。また、オリーブ葉抽出粉末給餌で肝臓中性脂肪の有意な減少が観察された。これらの結果より、オリーブ葉粉末には、腸管において脂肪の吸収および胆汁酸再吸収を促進する作用があることが示唆された。また、この作用がオリーブ葉中のオレウロペインによるものであることが推察された 4）。このような腸管におけるオレウロペインの脂肪吸収作用は、腸管上皮細胞管腔膜における脂質の吸収が亢進している可能性が考えられるが、ポリフェノールによるそのような効果はこれまで報告例が無く、新規の機能性である可能性がある。また、胆汁酸は、回腸下部の胆汁酸トランスポーターである ileal bile acid transporter（IBAT）や apical sodium dependent bile acid transporter（ASBT）により再吸収される 5）。従って、オリーブ葉がこれらのトランスポーターに影響を及ぼしている可能性が考えられるが、更なる検討が必要である。胆汁酸は、食事とリンクする重要なシグナル伝達分子であるという認識が高まりつつある 6）。回腸下部より吸収された胆汁酸は、門脈を通って肝臓に送られる。肝臓に送られた胆汁酸は、胆汁酸核内受容体である falnesoid X receptor（FXR）を介し、small heterodimer partner（SHP)の発現が亢進し、sterol regulatory element binding protein 1c（SREBP-1c）の発現が抑制された結果、脂肪酸合成遺伝子発現が低下し、肝臓内での中性脂肪が低下することが知られている 7）。従って、オレウロペインによる肝臓中性脂肪の減少作用は、このような機序をたどるのかもしれない。また胆汁酸は、褐色脂肪細胞において胆汁酸受容体として機能している G-protein-coupled receptor（TGR5）を介して、uncoupling protein 1（UCP-1）の発現を誘導し、熱産生を亢進することが知られている。最近、オレウロペインと別のオリーブ葉に含有するトリテルペンである oleandic acid が TGR5 アゴニストであるという報告 8）やオレウロペインが褐色脂肪組織における UCP-1 発現を誘導するという報告 9）がある。以上より、オレウロペインを含むオリーブ葉抽出成分が、胆汁酸による中性脂肪合成及びエネルギー代謝調節に吸収レベルから代謝レベルに至るまで関係していることが示唆された。オリーブ葉の爆砕技術に関しては、東京農業大学生物環境工学科牧恒雄教授、夏川大博士との共同研究であり、オリーブ葉抽出粉末はエーザイフードケミカル株式会社に提供していただいております。現在、オリーブ葉ポリフェノールの機能性について脂質代謝を中心に研究を行っている。参考文献 1) Al-Azzawie, HF., Alhamdani, MS., Hypoglycemic and antioxidant effect of oleuropein in alloxan-diabetic rabbits. Life Sci., 78: 1371-1377 (2006) 2) Zarzuelo, A., Duarte, J., Jiménez, J., González, M., Utrilla, MP., : Vasodilator effect of olive leaf., Planta Med. 57: 417-419 (1991) 3) Somova, LI., Shode, FO., Ramnanan, P., Nadar, A., : Antihypertensive, antiatherosclerotic and antioxidant activity of triterpenoids isolated from Olea europaea, subspecies africana leaves. J Ethnopharmacol., 84: 299-305 (2003) 4) 小林謙一、夏川大、尾形明日美、高田恭輔、室田友紀子、綿谷鮎子、寺本明子、牧恒雄、山本祐司、田所忠弘: 爆砕処理オリーブ葉粉末による脂肪吸収および胆汁酸再吸収の促進効果, 日本食生活学会誌, 20, 121-126 (2009) http://www.jstage.jst.go.jp/article/jisdh/20/2/20_121/_article/-char/ja/ 5) Chen, F., Ma, L., Dawson, PA., Sinal, CJ., Sehayek, E., Gonzalez, FJ., Breslow, J., Ananthanarayanan, M., and Shneider, BL..: Liver receptor homologue-1 mediates species- and cell line-specific bile acid-dependent negative feedback regulation of the apical sodium-dependent bile acid transporter, J. Biol. Chem., 278, 19909-19916 (2003) 6) Watanabe, M., Houten, SM., Mataki, C., Christoffolete, MA., Kim, BW., Sato, H., Messaddeq, N., Harney, JW., Ezaki, O., Kodama, T., Schoonjans, K., Bianco, AC., and Auwerx, J.,: Bile acids induce energy expenditure by promoting intracellular thyroid hormone activation, Nature, 439, 484-489 (2006) 7) Forman, BM., Goode, E., Chen, J., Oro, AE., Bradley, DJ., Perlmann, T., Noonan, DJ., Burka, LT., McMorris, T., Lamph, WW., Evans, RM., and Weinberger, C.,: Identification of a nuclear receptor that is activated by farnesol metabolites. Cell, 81, 687-693 (1995) 8) Sato, H., Genet, C., Strehle, A., Thomas, C., Lobstein, A., Wagner, A., Mioskowski, C., Auwerx, J., and Saladin, R..: Anti-hyperglycemic activity of a TGR5 agonist isolated from Olea europaea, Biochem Biophys Res Commun. 362, 793-798 (2007) 9) Oi-Kano, Y., Kawada, T., Watanabe, T., Koyama, F., Watanabe, K., Senbongi, R., and Iwai, K.,: Oleuropein, a Phenolic Compound in Extra Virgin Olive Oil, Increases Uncoupling Protein 1 Content in Brown Adipose Tissue and Enhances Noradrenaline and Adrenaline Secretions in Rats, J. Nutr. Sci. Vitaminol., 54, 363-370 (2008)