資料 - 福岡大学

食塩依存性高血圧で降圧を示す
紅タデスプラウト
ヒトキマーゼ抑制作用を介した新規作用機序
福岡大学筑紫病院
循環器内科
浦田秀則
組織レニン・アンジオテンシン系
心血管系組織自体がレニン-アンジオテンシン系の因子全てを有し、
局所でアンジオテンシンIIを産生し、これが心血管障害の原因となる
循環（古典的）R-A系
組織R-A系
アンジオテンシノーゲン
アンジオテンシノーゲン
レニン(?)
レニン
アンジオテンシンI
アンジオテンシンI
ACE
キマーゼ
アンジオテンシン変換酵素(ACE)
アンジオテンシンII
高血圧
ｶﾃﾌﾟｼﾝG
アンジオテンシンII
？
福岡大学
臓器障害
1
ヒト心臓(左室)ホモジネート中AngⅡ産生
各種酵素阻害薬効果
コントロール
カプトプリル
EDTA
衝撃的事実として
ヒト心臓のAngII産生のうち、
約80%はACE非依存性であった
(キマーゼ依存性)
NEM
SBTI
PMSF
2
Urata H et al. Circ Res1990
キマーゼ阻害薬の初期対象疾患
１．心筋梗塞後心筋リモデリングや心不全抑制
Ihara 2000, Hoshino 2003, Wei 2010
２．線維化抑制が期待される病態
動脈硬化 Ihara 1999, Uehara 2000, 2002
腎硬化症 Toth 1999
不整脈 Nakashima 2000
３．糖尿病 Maeda 2010
４．高脂肪酸由来内皮機能障害 Azekoshi 2010
3
食塩付加マウス高血圧モデル開発
＆
キマーゼ阻害薬の効果
（TPC-806)
福岡大学
4
キマーゼ阻害剤の用量依存性降圧効果
収縮期血圧 (mmHg)
高食塩負荷(2%NaCl飲水)マウスモデル
165
高食塩水（2％NaCl飲水）
HS-control
高食塩水＋キマーゼ阻害剤25mg
HS-CI
25mg
高食塩水＋キマーゼ阻害剤50mg
HS-CI
50mg
高食塩水＋キマーゼ阻害剤75mg
HS-CI
75mg
高食塩水＋キマーゼ阻害剤100mg
HS-CI
100mg
145
125
105
週 0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
125
Devarajan S & Urata H Am J Physiol 2015
各種降圧薬のSBPへの効果
高食塩負荷(2%NaCl飲水)マウスモデル
165
SBP (mmHg)
高食塩水（2％NaCl飲水）
（利尿剤）
HS-control
高食塩水＋利尿薬
（ACE阻害剤）
HS-HCTZ
高食塩水＋ACE阻害薬
（AⅡ拮抗剤）
HS-captopril
（脂質低下剤）
高食塩水＋AⅡ拮抗薬
HS-losartan
（Ca拮抗剤）
高食塩水＋アルドステロン受容体拮抗薬
HS-EPL
高食塩水＋Ca拮抗薬
HS-amlodipine
NW-control
正常水のみ
145
**
125
105
週0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10 11 12
6
Devarajan S & Urata H Am J Physiol 2015
食塩負荷前後の各臓器AngⅡ産生能
(×102pg
（2%,NaCl飲水3ヶ月)
AⅡ/分/mg)
*
*
*, p<0.05
7
Devarajan S & Urata H Am J Physiol 2015
背景のまとめ
1. ヒト組織でAII産生の主体はヒトキマーゼ
2. 食塩依存性高血圧マウスモデルの確立
腸管キマーゼ活性化が昇圧に関与
3. 同モデルでキマーゼ阻害薬降圧効果証明
他の降圧薬の効能は著明ではなかった
福岡大学 Devarajan S & Urata H Am J Physiol82015
キマーゼ簡易測定法の確立
Nma／Dnp 型蛍光発色基質修飾アンジオテンシンI
NO2
Nma
Dnp
O
NO2
Asp-Arg-Val-Tyr-Tle-His-Pro-Phe -His-Lys-NH2
NH
切断
CH3
ヒトキマーゼ
Emittion 355 nm
Exitation 460 nm
Department of Cardiovascular Diseases, Fukuoka University Chikushi Hospital
9
Ferry G & Urata H Eur J Biochem 2001
食品抽出物のヒトキマーゼ阻害活性スクリーニング
福岡県工業技術センター生物食品研究所(久留米)
が県産品・未利用資源を中心に約1000食材収集
食品などを水・熱水・EtOH抽出法を規格化、
→食材ライブラリ－化
2010年からヒトキマーゼ阻害
活性食品探索に生物食品研
究食材ライブラリーを活用
キマーゼ阻害活性を有する機能性食品として
福大筑紫病院でキマーゼ阻害食材のin vitro探索
10
キマーゼ阻害活性の一次スクリーニング（in vitro）
基質
ヒトキマーゼ
+
食品抽出物
阻害効果の確認
（水・熱水・EtOH）
段階希釈
（2、4、… 32倍希釈）
水、熱水抽出物原液：抽出物10mg/ml in dH2O
エタノール抽出物原液：1g素材/30ml in EtOH
50%以上の
阻害活性を持つもの
抽出物
水
熱水
エタノール
スクリーニング数
782
782
928
4倍希釈
117（15.0%）
148（18.9％）
148（15.9％）
32倍希釈
27（3.5％）
16（2.0％）
7（0.8％）
（）内は、各抽出物スクリーニングサンプル中に占める割合
11
キマーゼ阻害活性の一次スクリーニング（in vitro）
抽出物の阻害効果（抜粋）
100
EtOH
Water
60
40
20
※ 32倍希釈したサンプルの阻害効果
水、熱水抽出物原液：抽出物10mg/ml dH2O
エタノール抽出物原液：1g素材/30ml EtOH
サンプル
福岡大学
J
I
H
G
E
D
C
紅タデ
A
0
ﾌﾞﾙｰ
K
ﾍﾞﾘ…
阻害率（％）
80
12
紅タデスプラウト
福岡県の特産品の（全国
の約３／４は福岡県朝倉
産）「紅たで」は香辛料とし
て薬味や刺身のつまとして
食され、「たで酢」としても
川魚の塩焼きなどに使用
されている。
食経験があり、基本的な安全性は確認されている。
13
“タデスプラウト”含有フラボノイド
ヒペロシド
37.8%
イソケルシトリン
3.3%
イデイン
7.4%
ルチン
1.1%
ケルシトリン
7.3%
ケルセチン
12.2%
14
タデ含有キマーゼ阻害フラボノイド
ルチン
ルチン
O-Glc-Rha
O-Gal
イデイン
ケルセチン
ヒペロシド
O-Gal
イソケルシトリン
O-Glc
イソケルシトリン
ケルシトリン
O-Rha
ケルシトリン
Gal : ガラクトース
Glc : グルコース
15
Rha : ラムノース
各種食品のヒペロシド含有量
植物名
対タデスプラウト
ヒペロシド含量
ヒペロシド比
タデスプラウト
15.09 mg/g
成長タデ（葉）
2.22 mg/g
－
6.7倍
オトギリソウ
1.73 mg/g
8.7倍
ラフマ
1.47 mg/g
サンザシ
0.03 mg/g
10.2倍
503.0倍
16
食塩依存性高血圧マウスの収縮期血圧
経口タデ乾燥粉末投与
用量効果検定
・500,250mg/kg群2週目以降有意
・125mg/kg群では3週目以降有意
・62.5mg/kg群では有意差なし
経口ヒペロシド投与
用量効果検定
・20,10mg/kg群では1週目以降有意差
・5mg/kg群では2週目以降有意
・2.5mg/kg群では1～8週目で有意差なし
Devarajan S & Urata H 2015
17
家庭早朝血圧収縮期
140
mmH g
130
（ｎ=11，M:F=8:3）
131
129
130
127
P=0.04
126
P=0.02
120
110
プラセボ
タデスプラウト
200mg
タデスプラウト
400mg
タデスプラウト
800mg
血圧値はデータ自動送信機能付き血圧計にて測定
（オムロン自動血圧計 HEM-7251G）
タデスプラウト
2000mg
18
浦田 2015
1日推定食塩摂取量(2番スポット尿法）
全体 12.4±3.6g/日
18.1g以上
(4.7%)
6g未満
(1.2%)
6.1g～8g
(5.8％)
18.1g以上
(6.8%)
6g未満
(0%) 6.1g～8g
16.1g～18g
(13.6%)
14.1g～16g
(11.4%)
16.1g～18g
(14%)
8.1g～10g
(18.6%)
(2.3％)
男性（目標10ｇ以下）
13.0±3.2g/日
8.1g～10g
(18.2%)
10.1g～12g
(20.5%)
12.1g～14g
(27.3%)
14.1g～16g
(14%)
12.1g～14g
(22.1%)
10.1g～12g
(25.6%)
女性（目標8ｇ以下）
11.9±3.9g/日
福岡大学
18.1g以上
(2.4%)
16.1g～18g
(7.1%)
14.1g～16g
(16.7%)
12.1g～14g
(14.3%)
6g未満
(2.4%)
6.1g～8g
(9.5％)
8.1g～10g
(19.0%)
10.1g～12g
(28.6%)
19
（A群）プラセボ群
（B群）ポリゴナム400mg
（C群）ポリゴナム800mg
前観察期
（2週間）
-2W
受診①
0W
受診⑤
食品開始
4W
8W
受診③
受診④
後観察期
（2週間）
12W
受診⑤
食品終了
14W
受診⑤
家庭血圧測定(毎日)
＊家庭血圧は本試験用の血圧計を用いて
①起床後1時間以内(排尿後、朝食前)に１～２分間の安静後2回測定する。
②就寝前に１～２分安静後2回測定する。
＊受診日は絶食で来院して下さい(水・白湯はOK)
＊お薬手帳をお持ちの方は、受診時に持ってきて下さい。
＊降圧薬、降圧作用がある健康食品は期間中禁止です。
＊試験前より使用している医薬品、健康食品は期間中変更しない限り継続可能です。
A群、B群、C群、
●ﾎﾟﾘｺﾞﾅﾑ400mg ●ﾎﾟﾘｺﾞﾅﾑ800mg
●ﾌﾟﾗｾﾎﾞ(偽薬)800mg のいずれかです。
試験終了時まで、参加者・医師ともに誰がどの
群を服用しているか分かりません。
ﾌﾟﾗｾﾎﾞ(偽薬)を服用された方には試験終了時に
ﾎﾟﾘｺﾞﾅﾑｻﾌﾟﾘﾒﾝﾄ3ヶ月分を差し上げます。
20
前向き2重盲検対照比較試験(家庭収縮期)
早朝家庭収縮期血圧
 朝の家庭収縮期血圧は、タデ
400mg摂取後の6、7、11で統計
的有意差あり。
 その他の週も、タデ400mg摂取
の方が低値を示した。
142→136, -6 mmHg
前
間 2
週
12週間の血圧観察
後
間 2
週
就寝前家庭収縮期血圧
136→125, -11 mmHg
 夜の家庭収縮期血圧は、タデ
400mg摂取後の1-3,6,7,9-13週
目で統計的有意差あり。
 その他の週も、タデ400mg摂取
の方が低値を示した。
前
間 2
週
12週間の血圧観察
後
間 2
週
21
前向き2重盲検対照比較試験(家庭拡張期)
早朝家庭拡張期血圧
 朝の家庭拡張期血圧は、タデ
400mg摂取後に統計的有意差が
確認されなかった。
 しかし平均値は、タデ400mg摂
取の方が低値を示した。
89→86, -3 mmHg
前
間 2
週
12週間の血圧観察
後
間 2
週
就寝前家庭拡張期血圧
80→77, -3 mmHg
 夜の家庭拡張期血圧は、タデ
400mg摂取後の全ての週で統計
的有意差が確認された。
前
間 2
週
12週間の血圧観察
後
間 2
週
22
前向き2重盲検対照比較試験（家庭心拍数）
早朝家庭心拍数
前
間 2
週
12週間の心拍観察
 夜の家庭心拍数は、タデ400mg
摂取後の全ての週で統計的有
意差が確認されなかった。
 しかし平均値は、タデ400mg摂
取の方が低値を示した。
 朝の家庭心拍数は、タデ400mg
摂取後の全ての週で統計的有
意差が確認されなかった。
 しかし平均値は、タデ400mg摂
取の方が低値を示した。
後
間 2
週
就寝前家庭心拍数
前
間 2
週
12週間の心拍観察
後
間 2
週
23
食塩・キマーゼ仮説
食塩過剰摂取
腸管キマーゼ活性化
ソルト・ｷﾏｰｾﾞ系の提唱
骨格筋キマーゼ活性化
高血圧
皮膚キマーゼ活性化
AⅡ関与？
ｱﾙﾄﾞｽﾃﾛﾝ関与？
24
交感神経関与？
福岡大学
25
まとめ
１．ヒトキマーゼ阻害作用を介す紅タデスプラウトの健康補助
降圧食品の新規開発
２．既存の健康降圧食品と異なる新規機序
３．食塩過多摂取血圧軽度上昇症例（推定約4000万人）で
有効性を示す
４．紅タデスプラウト含有フラボノイドは創薬シーズになり得る
福岡大学
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お問い合わせ先
福岡大学研究推進部
担当コーディネーター
産学官連携センタ―
芳賀慶一郎
ＴＥＬ 092－871－6631（内線 2809）
ＦＡＸ 092－866－2308
e-mail [email protected]
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