IV-2-1 Convulsive Seizures induced by Pentylentetrazole (PTZ)

IV-2-1
Convulsive Seizures induced by Pentylentetrazole (PTZ)
single injection (Generalized seizure model)
Materials
・Glove (for handling the animals)
・Plastic chamber (30 × 30 × 40 cm)
・1 mL syringe and 26 gauge needle (for administration)
・Pentylentetrazole (Sigma-Aldrich) (dissolved in saline at the concentration 4 mg/mL)
・Stopwatch
Methods
1. The experiments were performed between 9:00 a.m. and 11:00 a.m. The animals (mice
and rats) were placed in a plastic chamber (30 × 30 × 40 cm).
2. After the acclimation, they were injected intraperitoneally (i.p.or s.c.) with the doses of 60 or
80 mg/kg PTZ.
3. The behaviors were observed for 30 min after the administration, classified and scored
(Table, Figure).
Table
Criteria in scoring of the behaviors
Score
Behaviors
0
no abnormality
1
exploring, sniffing, and grooming ceased, becoming motionless
2
head nodding, facial and forelimb clonus (short myoclonic jerk)
3
“continuous myoclonic jerk (clonic convulsion),” myoclonic jerks of the head and
neck, with brief twitching movement, or repetitive movements with head bobbing
or “wet-dog shakes,” tail rigidity
4
forelimb or forelimb and hindlimb clonus, reciprocal forepaw padding, hindlimb
abduction, continuous rearing and falling, Straub tail response (specially for
mouse), kangaroo posture
5
tonic convulsion
Scores (Stages)
0: no abnormality (normal)
1: exploring, sniffing, and grooming ceased, becoming
motionless
2: head nodding, facial and forelimb clonus (short
myoclonic jerk)
3: “continuous myoclonic jerk (clonic convulsion),”
myoclonic jerks of the head and neck, with brief
twitching movement, or repetitive movements with
head bobbing or “wet-dog shakes,” tail rigidity
4: forelimb or forelimb and hindlimb clonus, reciprocal
forepaw padding, hindlimb abduction, continuous
rearing and falling, Straub tail response (specially for
mouse), kangaroo posture
5: tonic convulsion
Figure Seizures were recorded by video camcorder and
scored as described at the stages.
IV-2-1(日本語版)
ペンチレンテトラゾール単回投与による全般発作
誘発モデル
準備するもの
・手袋
・プラスチック製のケージ (30 × 30 × 40 cm)
・1 mL シリンジおよび 26 ゲージの注射針
・ペンチレンテトラゾール(シグマアルドリッチ社)(4 mg/mL の濃度になるよう
に生理食塩水に溶解)
・ストップウォッチ
方法
1. 実験は、午前 9 時から 11 時の間に行う。動物(マウスもしくはラット)をプ
ラスチック製のケージ(30 × 30 × 40 cm)に一匹ずつ入れ、ケージ内の環境に馴
化させる。
2. 馴化後、60 もしくは 80 mg/kg のペンチレンテトラゾールを腹腔内投与する。
3. 投与後 30 分間の行動を観察し、各種の行動にスコアをつける(別表および図)。
別表
動物の各種行動のスコア基準
スコア
行動
0
異常なし
1
探索行動、嗅ぎ行動、毛づくろい行動の後、無動
2
頷き行動、顔面や前肢までにとどまる短時間のミオクローヌス
3
長時間のミオクローヌス、反復性の頭部の運動あるいは身震い行動、尾
部の硬直
4
前肢のみ、もしくは前後肢にわたる間代性痙攣、前肢を回転させるよう
な発作、後肢の外転、持続的な立ち上がり行動、転倒、ストラウブ挙尾
反応(マウスのみ)、カンガルー様姿勢
5
強直痙攣
スコア
0: 異常なし
1: 探索行動、嗅ぎ行動、毛づくろい行動の後、無動
2: 頷き行動、顔面や前肢までにとどまる短時間のミオクロ
ーヌス
3: 長時間のミオクローヌス、反復性の頭部の運動あるいは
身震い行動、尾部の硬直
4: 前肢のみ、もしくは前後肢にわたる間代性痙攣、前肢を
回転させるような発作、後肢の外転、持続的な立ち上がり
行動、転倒、ストラウブ挙尾反応(マウスのみ)、カンガ
ルー様姿勢
5: 強直痙攣
図
各スコア段階におけるマウスの行動の一例(ビデオで撮影したもの)