IV-2-1 Convulsive Seizures induced by Pentylentetrazole (PTZ) single injection (Generalized seizure model) Materials ・Glove (for handling the animals) ・Plastic chamber (30 × 30 × 40 cm) ・1 mL syringe and 26 gauge needle (for administration) ・Pentylentetrazole (Sigma-Aldrich) (dissolved in saline at the concentration 4 mg/mL) ・Stopwatch Methods 1. The experiments were performed between 9:00 a.m. and 11:00 a.m. The animals (mice and rats) were placed in a plastic chamber (30 × 30 × 40 cm). 2. After the acclimation, they were injected intraperitoneally (i.p.or s.c.) with the doses of 60 or 80 mg/kg PTZ. 3. The behaviors were observed for 30 min after the administration, classified and scored (Table, Figure). Table Criteria in scoring of the behaviors Score Behaviors 0 no abnormality 1 exploring, sniffing, and grooming ceased, becoming motionless 2 head nodding, facial and forelimb clonus (short myoclonic jerk) 3 “continuous myoclonic jerk (clonic convulsion),” myoclonic jerks of the head and neck, with brief twitching movement, or repetitive movements with head bobbing or “wet-dog shakes,” tail rigidity 4 forelimb or forelimb and hindlimb clonus, reciprocal forepaw padding, hindlimb abduction, continuous rearing and falling, Straub tail response (specially for mouse), kangaroo posture 5 tonic convulsion Scores (Stages) 0: no abnormality (normal) 1: exploring, sniffing, and grooming ceased, becoming motionless 2: head nodding, facial and forelimb clonus (short myoclonic jerk) 3: “continuous myoclonic jerk (clonic convulsion),” myoclonic jerks of the head and neck, with brief twitching movement, or repetitive movements with head bobbing or “wet-dog shakes,” tail rigidity 4: forelimb or forelimb and hindlimb clonus, reciprocal forepaw padding, hindlimb abduction, continuous rearing and falling, Straub tail response (specially for mouse), kangaroo posture 5: tonic convulsion Figure Seizures were recorded by video camcorder and scored as described at the stages. IV-2-1(日本語版) ペンチレンテトラゾール単回投与による全般発作 誘発モデル 準備するもの ・手袋 ・プラスチック製のケージ (30 × 30 × 40 cm) ・1 mL シリンジおよび 26 ゲージの注射針 ・ペンチレンテトラゾール(シグマアルドリッチ社)(4 mg/mL の濃度になるよう に生理食塩水に溶解) ・ストップウォッチ 方法 1. 実験は、午前 9 時から 11 時の間に行う。動物(マウスもしくはラット)をプ ラスチック製のケージ(30 × 30 × 40 cm)に一匹ずつ入れ、ケージ内の環境に馴 化させる。 2. 馴化後、60 もしくは 80 mg/kg のペンチレンテトラゾールを腹腔内投与する。 3. 投与後 30 分間の行動を観察し、各種の行動にスコアをつける(別表および図)。 別表 動物の各種行動のスコア基準 スコア 行動 0 異常なし 1 探索行動、嗅ぎ行動、毛づくろい行動の後、無動 2 頷き行動、顔面や前肢までにとどまる短時間のミオクローヌス 3 長時間のミオクローヌス、反復性の頭部の運動あるいは身震い行動、尾 部の硬直 4 前肢のみ、もしくは前後肢にわたる間代性痙攣、前肢を回転させるよう な発作、後肢の外転、持続的な立ち上がり行動、転倒、ストラウブ挙尾 反応(マウスのみ)、カンガルー様姿勢 5 強直痙攣 スコア 0: 異常なし 1: 探索行動、嗅ぎ行動、毛づくろい行動の後、無動 2: 頷き行動、顔面や前肢までにとどまる短時間のミオクロ ーヌス 3: 長時間のミオクローヌス、反復性の頭部の運動あるいは 身震い行動、尾部の硬直 4: 前肢のみ、もしくは前後肢にわたる間代性痙攣、前肢を 回転させるような発作、後肢の外転、持続的な立ち上がり 行動、転倒、ストラウブ挙尾反応(マウスのみ)、カンガ ルー様姿勢 5: 強直痙攣 図 各スコア段階におけるマウスの行動の一例(ビデオで撮影したもの)
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