多色ルシフェラーゼ発光測定用試薬 Single & 96well plate兼用 マルチカラールック® Ultr a-HTS発光試薬 甲虫由来の3色のルシフェラーゼ発光を利用した転写活性測定システムの「マルチカラールック®」に、新 しくHTS仕様のマルチカラールック® Ultr a-HTS発光試薬が加わりました。ＨＴＳ測定（特許出願済）に最適 な長時間発光＆細胞溶解成分を含む1液タイプです。細胞溶解成分が別包装の2液タイプの従来製品に比 べて、最大5倍の高発光に性能アップしていますのでsingle測定にもお奨め致します。発光スペクトルが安 定な赤、オレンジ、緑の3色のルシフェラーゼ遺伝子と組み合わせて御使用ください。 同一検体での同時測定により、因子相関性の実証が可能に ● 2種のレポーターアッセイを測定 ● 2種の誘導因子の組み合わせ差異や、単一時との比較検証 ● 3色発光により2因子＋コントロール補正で正確性アップ マルチカラールック®の発光機構 N S S 3 Luciferases CO O H + ATP + O2 HO Mg2+ HO D-Luciferin N N S S O + AMP + PPi + CO2 Oxyluciferin Red light (λmax= 630 nm) Or ange light (λmax= 580 nm) Gr een light (λmax= 550 nm) マルチカラールック®ベクターで発現させたルシフェラーゼは、ｐHで 発光スペクトルが変動しない特性があります。また、3色の発光基質 は共通です。これらを応用し、１種類の発光試薬を添加するだけで3 色発光が得られます。 緑色、 オレ ン ジ色、 赤色ルシフェラーゼ の発光スペクトル 1 .2 1 Normalized intensity N 0 .8 0 .6 0 .4 0 .2 0 400 5 00 600 70 0 Wave len gth (n m) マルチカラールック® Ultra-HTSによる測定結果 ◆Fig.．1 NFκB誘導とCRE誘導の同時測定 ® マルチカラールック Ultra-HTSの測定例 ●TNF-α添加によるcis作用性DNA応答配列（NFκB）誘導 ●フォルスコリン添加によるcAMP応答配列(CRE)誘導 14.0 相対発光量(RLU) 12.0 NFkB CRE NFκB＋ＴＫ＋Green Luc. ＣＲＥ＋ＴＫ＋Orange Luc. 10.0 （‐） F (+) T (+) F (+) T (+) 8.0 6.0 4.0 2.0 0.0 (-) F(+) T(+) 誘導物質 F(+)T(+) ＳＶ40＋Red Luc. ： 誘導刺激なし ： フォルスコリン添加 ： TNF-α添加 ： フォルスコリンとTNF-αを同時に添加 マルチカラールック®の赤色ルシフェラーゼをインターナルコント ロールに使用し、緑色ルシフェラーゼとオレンジ色ルシフェラー ゼをNFκBとCRE のレポーター測定に使用した。 2つの誘導を同時に行い、2種のレポーターアッセイが、同一検体 にて1回で測定できる事を実証した。 東洋ビーネット株式会社 東洋インキグループ マルチカラールック® Ultra-HTSの特長 簡 便 迅 速 高感度 高精度 ： ： ： ： 細胞溶解と発光操作が１step の１液タイプ 試薬添加後10分から測定可能 最高の発光強度（当社従来製品と比べ、最大5 （当社従来製品と比べ、最大5倍強度） 3色の発光バランスが良く、長時間安定（半減期2 （半減期2時間） マルチカラールック® Ultra-HTSの基本性能 ◆Fig.．2 従来品（2液タイプ）との発光量比較 ◆Fig.．3 発光各色の長時間安定性（カイネティクス） マルチカラールック ® Ultra-HTSの発光カイネティクス 6 120% 5 100% 発光量相対値（ＲＬＵ） 最大発光量相対値（ＲＬＵ） 各色の最大発光量の比較 4 3 2 1 0 ２液タイプ Ｕｌｔｒａ-ＨＴＳ ２液タイプ Red Luc. Ｕｌｔｒａ-ＨＴＳ ２液タイプ Orange Luc. Ｕｌｔｒａ-ＨＴＳ 80% 60% Red Luc. 40% Orange Luc. 20% Green Luc. 0% 0 10 20 30 40 Green Luc. 50 60 70 80 90 100 110 120 （min） Ｆｉｇ.２： 弊社従来製品の2液タイプと比べ、3色とも2倍以上に高発光。特に発光量が低かった赤色発光が5倍強の高発光に改善された。 Ｆｉｇ.３： 弊社推奨の赤色発光をコントロールに用いた時のオレンジと緑の発光量相対値を示したもの。2時間経過しても発光量比は変動せず、ＨＴＳ 測定に最適な長時間発光である事を示している。 〈 製品リスト 〉 コード メーカーコード 302-31541 MCL-H10 308-31543 MCL-H50 306-31544 MCL-H100 302-31546 MCL-H1000 製 品 名 マルチカラールック® Ultra-HTS 発光試薬 構成内容 細胞溶解成分入り発光試薬（凍結乾燥品） Ｂｕｆｆｅｒ 10ｍｌ 各1本 細胞溶解成分入り発光試薬（凍結乾燥品） Ｂｕｆｆｅｒ 50ｍｌ 各1本 細胞溶解成分入り発光試薬（凍結乾燥品） Ｂｕｆｆｅｒ 50ｍｌ 各2本 細胞溶解成分入り発光試薬（凍結乾燥品） Ｂｕｆｆｅｒ 50ｍｌ 各20本 保 存 希望納入価格(円) −20℃、遮光 24,500 −20℃、遮光 99,000 −20℃、遮光 185,000 −20℃、遮光 照会 従来製品の細胞溶解剤と発光試薬が別包装の2液タイプは、受注生産となりました。ご希望の方は弊社までご連絡ください。 （ご注意） ◆弊社は、多色ルシフェラーゼ発光に関わる細胞溶解組成と発光試薬およびHTS測定の手法を特許出願しております。発光試薬をご購入の際 は、お客様のご登録が必要です。登録時に HTS測定（Micro plateを使用した測定）のご利用の有無を確認させていただきます。 ◆多色ルシフェラーゼを用いたシステムは、産業技術総合研究所より特許出願されており、弊社は産総研より実施許諾を受けています。ベク ターをご購入の際は、お客様のご登録が必要です。 ◆このシステムは、最大3色の混合発光となります。分光および単色光量の測定算出は、弊社までお問い合わせください。 ◆「マルチカラールック® 」シリーズは研究専用試薬です。研究用途以外のご使用は避けてください。 製造元 東洋ビーネット株式会社 バイオプロダクツ部 東京都中央区京橋二丁目3番13号 Tel ：03-3272-1954 E-mail: [email protected] URL: http://www.toyo-b-net.co.jp 販売元 和光純薬工業株式会社 大阪市中央区道修町三丁目1番2号 Tel ：06-6203-3741（代表） 東京都中央区日本橋本町四丁目5番13号 Tel ：03-3270-8571（代表） E-mail: [email protected] URL: http://www.wako-chem.co.jp 販売店
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