病理検査

岐臨技精度管理事業部平成 25 年度総括集
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病理検査
日高
はじめに
病理検査部門における精度管理調査では、日常業
務のレベル向上や知識習得を目的として行っている。
岐臨技精度管理調査では特殊染色のレベルアップ
を目的とし昨年度に引き続き本年度も特殊染色を行
うこととした。
平成 25 年度は主に粘液染色を目的とするＤ－Ｐ
ＡＳ反応を選択した。
方法
（材料）
20％ホルマリンで固定した大腸組織、肝臓組織
（実施手順）
1 申し込み施設にパラフィンブロック１個、スラ
イドガラス２枚、染色条件調査票を送付
2 薄切・染色を各施設で行い、染色標本１枚とパ
ラフィンブロックおよび調査票を返送
3 評価項目を設け、病理研究斑 4 名にて評価を行
った
4 減点内容をコメントに記した
（染色評価の項目）
1 ガラスの汚れ
良（２点）
、可（１点）
、不良（０点）
2 染色ムラ
良（２点）
、可（１点）
、不良（０点）
3 共染の有無
良（２点）
、可（１点）
、不良（０点）
4 切片の剥離
良（２点）
、可（１点）
、不良（０点）
5 糖質の消化状態
良（２点）
、可（１点）
、不良（０点）
6 粘液の染色状態
良（２点）
、可（１点）
、不良（０点）
7 核の染色状態
良（２点）
、可（１点）
、不良（０点）
以上７項目に対しての判定点を加算し、14 点満点
で評価した。
（判定・評価区分）
『判定Ａ』評価合計点 14～12 点
目的を十分に達している
『判定Ｂ』評価合計点 11～7 点
祐二
目的に達しているが改善の余地がある
『判定Ｃ』評価合計点 6～3 点
病理診断に支障をきたす可能性がある
『判定Ｄ』評価合計点 2～0 点
病理診断に支障をきたす可能性がある
以上、判定をＡ～Ｄの 4 段階に設定した。
結果
参加施設数：17
判定
施設数
Ａ
15
Ｂ
2
Ｃ
0
Ｄ
0
（評価減点の内訳）
今回のサーベイで評価点の減点対象となった標本
状態の不具合内容を以下に示す
＊ガラスの汚れ
・・・2 施設
＊染色むら
・・・1 施設
＊共染の有無
・・・5 施設
＊切片の剥離
・・・5 施設
＊核の染色状態
・・・1 施設
今回のサーベイで評価の高かった施設の染色（写
真）と染色手順を以下に示す。
岐臨技精度管理事業部平成 25 年度総括集
-22. 消化試験使用液
消化液
1%ジアスター
ゼリン酸緩衝液
1％α-アミラー
ゼリン酸緩衝液
9 施設
4 施設
総合判定評価
Ａ判定 8 施設
Ｂ判定 1 施設
Ａ判定
4 施設
Ａ判定 3 施設
Ｂ判定 1 施設
消化液には 1％ジアスターゼリン酸緩衝液を
使用している施設が多かったが、消化液の種類
による消化試験の差はみられなかった。
唾液を使用している施設で拭き残りが目立つ
施設があったが、普段は当染色を行っていない
とのコメントがあり染色性には問題ないが唾液
を拭きとる手順を徹底するよう心掛けてほしい。
消化液の調整は全施設、用時に調整を行って
いる。
唾液
粘液を染める Schiff 試薬の赤色と核を染めるヘマ
トキシリンの青紫色のコントラストがクッキリして
おり良好な染め上がりである。肝組織では糖質は消
化されており、色素成分や血球成分、肝細胞が染め
分けされており観察が容易な染色性である。
施設数
4 施設
3. 酸化剤
1. 脱パラ、脱キシ
2. 流水水洗
3. 1％ジアスターゼ水溶液 1～3 時間程度 40℃
4. 流水水洗
5. 0.5％過ヨウ素酸水溶液 15 分
6. 流水水洗
7. Schiff 試薬（武藤化学）
15 分
8. 水洗、微温湯にて色だし
15 分
9. ヘマトキシリン（ﾃｨｯｼｭﾃｯｸ：ﾏｲﾔｰ） 2 分
10. 水洗、微温湯にて色だし 10 分
11. 脱水、透徹、封入
（アンケート及び染色条件調査票より）
参加施設に D-PAS 反応に対する各条件の回答を得
たので結果を以下に示す。
1. 作製した切片の厚さ
切片の厚さ
施設数
2μｍ
2 施設
総合判定結果
Ａ判定 1 施設
Ｂ判定 1 施設
2.5μｍ
1 施設
Ａ判定 1 施設
3μｍ
12 施設
回答なし
2 施設
Ａ判定 11 施設
Ｂ判定 1 施設
Ａ判定 2 施設
３μｍの切片厚の施設が多く、染色状態も良
好であった。
１施設では申告より厚く過染傾向にありミク
ロトームの目盛りとの乖離が顕著であった。
酸化剤
施設数
総合評価
0.5％過ヨウ
Ａ判定１２施設
13 施設
素酸
Ｂ判定１施設
1％過ヨウ素
Ａ判定３施設
４施設
酸
Ｂ判定１施設
酸化剤は 0.5％過ヨウ素酸を使用している施
設が多く、1％過ヨウ素酸を使用している施設は
４施設のみであった。１％過ヨウ素酸を推奨し
ている清書等も多いが、今回の精度管理調査に
おいては酸化剤に 0.5％過ヨウ素酸を使用した
染色標本の染色性に問題はなかった。
交換時期は 1 月程度の施設が多かった。
4. Schiff 試薬
14 施設では調整済み試薬を 3 施設では自家性
試薬を使用していた。自家性試薬のうち 2 施設
はコールドシッフ(Schiff)ではなかったが、染色
性に問題はなかった。
5. 定着液
15 施設では亜硫酸水を数分、2～3 回行って
いるが 1 施設では定着操作はなく、1 施設では
微温湯での色だしを行っていた。いずれの方法
でも今回の調査での染色性に問題はなかった。
6. 核染色
ヘマトキシリンの種類についての記載が少な
く統計は困難であったが、ＨＥ染色で使用して
いるヘマトキシリンを使用しているとの返答が
多かった。色だしは 10 分前後の施設が多かった。
岐臨技精度管理事業部平成 25 年度総括集
7. 月間染色枚数
月間枚数
総合判定結果
Ａ判定 9 施設
0枚
Ｂ判定 2 施設
1～3 枚
Ａ判定 3 施設
６～１０枚
Ａ判定 1 施設
10 枚以上
Ａ判定 2 施設
PAS 反応は多数の施設で多く行われているが
D-PAS はあまり行われていない。2 施設におい
ては肺、肝等の消化管材料で頻繁に行われてい
る。
考察
今回の調査で染色性に問題がある施設は少なく
PAS 反応を多く行っているためマニュアル化がし
っかりと行われていると考えた。
まとめ
今回配布した材料はグリコーゲンが少量しか残存
しておらず、精度管理調査に使用する材料としては
適していなかった。
Ａ判定１5 施設、Ｂ判定 2 施設と概ね良好であっ
た。また、Ｂ判定となった 2 施設も染色性に問題は
なく、標本作製時にかかわる問題や唾液の拭き残り
が原因であった。
２次サーベイが必要な施設はなかった。
文献
1）山田正人，他．最新染色法の全て．医歯薬出版
2011：14-15
2）標本道場（病理関連技術情報）
http：//www.sakura-finetek.com/doujyou.html
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