New Products Adeno-XTM AcGFP1 Marker Virus Ready-to-useな高タイターのアデノウイルスコントロール株 ・感染効率を視覚的に測定 ・感染条件を最適化 ・コントロールウイルスとして使用可能 ClontechのAdeno-XTM AcGFP1 Marker Virus はオワンクラゲ （Aequorea coerulescens ）由来の単量体緑色蛍光タンパク 質AcGFP1を発現します。このウイルス 株 はClontechのAdeno-XTM Expression System 2を用いて、AcGFP1カセットの 強力な構成的発現にサイトメガロウイル スのIEプロモーターを利用して開発さ れました。このウイルスは遺伝的均一性 を確実にするためプラーク精製を行い、 増 幅 し、 そ の 後Adeno-XTM Virus Purification Kitによるフィルター精製を 行っています。Adeno-XTM AcGFP1（∼ 109 IFU/ml）は１チューブ（100 µl）で 数回の予備実験および最初の増幅に十分 に使用できます。ClontechのAdeno-XTM AcGFP1 Marker Virusは使用する細胞 型がアデノウイルスに感染しやすいかど うかを決定し、特定の細胞において遺伝 製品名 包装量 Cat. No. Adeno-XTM AcGFP1 Marker Virus 営 ラ 100 µl 632504 価格 ￥155,000 ￥455,000 NEW! a b ａ 非営利施設対象価格です。 ｂ 営利施設対象価格です。 営 営利施設の場合、ご購入前にライセンスを取得してい ただく必要があります。 ラ マークのある製品はご購入に際してライセンス確認書 が必要になります。 Notice to Purchaser 図1. Adeno-XTM AcGFP1 Marker Virusを 感 染 The Living ColorsTM legal statement させたHeLa細胞。 （27ページ参照） HeLa細胞を感染多重度（MOI）＝10で感染させ、 48時間インキュベーション後、フィルターセッ ト（FITC/EGFP特 異 的 ） を 装 着 し たZeiss社 Axioskopを用いた蛍光顕微鏡検査により視覚化 しました。 子導入媒体として機能するウイルスの能 力を測定するための最適なツールです。 AcGFP1タンパク質は生細胞中において も視覚化できるため（図1） 、感染効率の 測定を可能とし、感染プロトコールの最 適化を容易にし、また実験が開始された 後はコントロールとしても使用できます。 その他の利用可能な高タイターの Adeno-X TM Marker Virusには Lac Z、 DsRed2、およびNull Marker Virusがあ ります。 Adeno-XTM Expression System 2 CreatorTM技術によるアデノウイルスの迅速なクローニング ・簡単に複数のアデノウイルスベクター を生成 ・操作時間が最小限 ・CMVやU6など任意のプロモーターを 導入可能 Clontech の Adeno-X TM Expression System 2は、CreatorTMシ ス テ ム の ス ピ ー ド と 精 度 を、 強 力 で 用 途 の 広 い Adeno-XTM Expression Systemsに 適 用 したものです。遺伝子の導入は良く知ら れているCre-loxP 組換え反応に基づいて 行われ、正確で方向性を持たせたクロー ニングが可能です（図1） 。完成した組換 えアデノベクターを調製・増幅し、霊長 類およびげっ歯類を含む広範囲の動物種 への効率的な導入に使用することができ ます。発現法を選択することが可能で、 cDNAの構成的発現やプロモーター特異 的発現、shRNAの構成的発現から選択 できます（1） 。 kb M + V 1.3 1.0 0.8 0.6 製品名 包装量 Cat. No. 価格 Adeno-XTM Expression System 2 ラ 5回 631524 ￥175,000 Adeno-XTM Promoterless Expression System 2 ラ 5回 631525 ￥198,000 ラ マークのある製品はご購入に際してライセンス確認書 が必要になります。 図1. CreatorTM Cloning Systemによる組換えア デノウイルスコンストラクトを高頻度で生成。 発 現カセットをCre リコンビナーゼを用いて Adeno-X TM LP Promoterless Expression Vector内に導入しました。組換えアデノウイル スDNAをE. coli EZ10（Cat. No.636756）内で増 幅しました。選択培地上の、10コロニーをラン ダムに選択し、ベクター特異的プライマーおよ び S p r i n t TM A d v a n t a g e 9 6 P l a t e （ C a t . No.639550）を用いてPCRにより分析しました。 その結果、10コロニーともDNA挿入が確認さ れました。異なる13種の遺伝子と3種の発現系 のいずれか1つを用いた合計36回の実験から、 87.7％のクローニング効率が得られました（デー タは示していません） 。+：陽性コントロール。V： ベクターのみ。M：φX174/Hae III分子量マー カー。 参考文献 1. Adeno-X™ Expression System 2 (January 2003) Clontechniques XVIII(1):16‒17. 関連製品 ・Adeno-XTM Rapid Titer Kit （Cat. No.631028） ・Adeno-XTM Virus Purification Kit （Cat. No.631533） ・Adeno-XTM Expression System 1 （Cat. No.631513） ・Knockout Clone & Confirm Adeno RNAi System 1（Cat. No.631536） ・Knockout Clone & Confirm Adeno RNAi System 2（Cat. No.632458） Notice to Purchaser The CreatorTM, Living ColorsTM products legal statements（27ページ参照） 4 クロンテクニーク 2006年 夏号
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