Özet

KLON SIĞIRLARDA PLASENTANIN ĐNCELENMESĐ
Arzu Çaputçu Taş 1,Sezen Arat 1, Tolga Akkoç1, Gaye Çetinkaya1, Özlem Celasin1,
1
.TÜBĐTAK MAM, Gen Mühendisliği ve Biyoteknoloji Enstitüsü, Gebze, Kocaeli,
Nükleer transfer (NT) teknolojisi çeşitli başarılara öncülük etmiş olmakla birlikte henüz sorunları olan
ve geliştirilmesi gereken bir teknolojidir. Bu sorunlardan bir tanesi de hamilelik döneminde gözlenen
plasental anomalilerdir. Çalışmamızda Boz ve Güney Anadolu Kırmızısı (GAK) sığırları klonlanmıştır.
Klon ve normal plasentaların morfolojik ve immunohistokimyasal özellikleri araştırılmıştır. Klonlama
sonucunda; Boz ırkına ait kıkırdak hücresinden bir, fibroblast hücresinden bir ve granüloza
hücresinden üç adet sağlıklı klon elde edilmiştir. Kıkırdak hücresinden elde edilen bir gebelik 254.
gününde kaybedilmiştir. GAK ırkına ait dişi kıkırdak hücresinden elde edilen bir gebelik ise 267.
gününde kaybedilmiştir. Normal ve klon plasentalar %4 PFA ile fikse edilmiş ve alkol serilerinin
ardından paraffin bloklar şeklinde gömülmüştür. Bloklardan 5 µm kalınlığında kesitler alınarak
Hematoksilen-Eosin (H-E) ve immunohistokimyasal boyamaları yapılmıştır. Leptin (1/50), VEGF
(1/50) ve IGF-1 (1/50) antikorları ile boyamalar yapılmıştır. H-E boyamalarında genel morfoloji
bakımından gruplar arasında fark görülememiştir. Dev nükleuslu trofoblast hücre sayılarının klon
plasentalarda normal plasentaya oranla daha az sayıda olduğu tespit edilmiştir. IGF-1 ve VEGF
boyamalarında her grupta epitellerde boyanma tespit edilmiş klon ve normal plasentalarda fark
görülmemiştir. Leptin antikorunda ise hiçbir grupta boyanma tespit edilememiştir. IGF-1, VEGF ve
Leptin ile yapılan boyama sonuçları klon plasentalarda anormal bir bulguyu işaret etmemiş ve literatür
çalışmaları ile uyumlu bulunmuş olmakla birlikte dev nükleuslu trofoblast sayılarının klon plasentalarda
normale oranla düşük olması kısmi bir yapısal anomaliyi düşündürebilir. Bu çalışma TOVAG 104O360
ve KAMAG 106G005 no’lu proje tarafından desteklenmiştir.
Elektronik Đletişim Adresi:[email protected]
INVESTIGATION OF THE CLON BULL’S PLACENTAS
Arzu Çaputçu Taş 1,Sezen Arat 1, Tolga Akkoç1, Gaye Çetinkaya1, Özlem Celasin1
1
.TUBITAK MRC, Research Institute for Genetic Engineering, Gebze, Kocaeli, Turkey,
The nuclear transfer(NT) was initiator of many successes however it is a technology which has some
problems and these problems need to be developed.. One of the problem is placental abnormalies
during pregnancy period. In our study, native Anatolian Grey and South Anatolian Red Cattles were
cloned. Clon and normal placentas were investigated to morphological and immunohistochemical
features. As a result of the cloning, one male calf from fibroblast, one female calf from cartilage and
three female calves from granulosa cells which they obtained from Anatolian Grey cows were born
healthy. One of the male Anatolian Grey calf from cartilage died at 254thdays of pregnancy. One of
the female South Anatolian Red calf from cartilage died at 267th days of pregnancy.Normal and clon
placentas were fixed with %4 PFA and after alcohol series they were embedded in parafin wax.
Parafin sections were cut in 5 µm thickness and hemtoxylen-eosin(H-E) and immunohistochemical
stainings were done with leptin VEGF and IGF1 (all 1/50) antibodies. There were no morphologic
differences between normal and clon placentas. The numbers of the giant trophoblastic(GT)cells in
clon placentas were lower than the normal placentas. IGF1 and VEGF antibodies were observed in all
groups’ epithelium however there were no differences between normal and clon plasentas. Leptin was
not determinate in all groups. The results of the immunohistochemical stainings did not show the
anormal diagnosis and were similar with the literature but low numbers of the giant trophoblastic in
the clon placentas compared to normal placenta might show partial abnormal plasental formation.
This study was supported by grants from TUBITAK Turkey (TOVAG-104O360 and KAMAG-106G005).
Contact E-mail: [email protected]
.

Download Report