1 遺伝子改変動物 ノックアウト・ノックインマウス作製受託サービス [ ユニーテック(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 3 [ トランスジェニック ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 4 ジーンターゲティングマウス作製受託サービス (株) ジーンターゲティングによる遺伝子改変マウス作製受託サービス [ ジーンコントロール(株)]・・・・・・・・・・・・ 4 [ フェニックスバイオ 宇都宮営業所 ]・ ・・・・・・・・・・ 5 セミ・ノックインマウス,ラット作製受託サービス (株) [ トランスジェニック ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 6 スピードコンジェニックマウス作製受託サービス (株) [ トランスジェニック ]・ ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 6 各種遺伝子改変マウス (株) トランスジェニックマウス作製受託サービス [ ユニーテック(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 7 トランスジェニックマウス作製受託サービス [ ジーンコントロール(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 8 [ トランスジェニック ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 9 遺伝子改変マウス表現型解析受託サービス (株) 2 プロテオミクス・タンパク質発現 プロテオーム解析受託サービス [ 東和環境科学(株)プロフェニックス事業部 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ Pull-down 法を用いたタンパク質間相互作用解析受託サービス [ 東和環境科学(株)プロフェニックス事業部 ]・・・・・ DNA 結合タンパク質の網羅的解析受託サービス [ 東和環境科学(株)プロフェニックス事業部 ]・・・・・・・・・・・ 微量タンパク質の精製・同定受託サービス [ プロテノバ(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ [ プロトセラ ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ バイオマーカー探索受託サービス (株) 抗体アレイ作製受託サービス [ Hypromatrix 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 抗サイトカイン抗体アレイ作製受託サービス [ RayBiotech 社 ]・ ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ ウエスタンブロッティング受託サービス [ ジェノスタッフ(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ [ ハイぺップ研究所 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ アミノ酸組成分析・キラル分析受託サービス (株) [ ニッピ ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ ペプチドシークエンスサービス (株) [ ハイぺップ研究所 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ アミノ酸配列分析受託サービス (株) [ メイズ ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 哺乳類のアミノ酸配列データベース Mammalian-PERFECT (株) [ ホクドー ]・・・・・・・・・・・・・・ 発現ベクター構築受託サービス/組換え体タンパク質作製受託サービス (株) タンパク質発現受託サービス [ ユニーテック(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ [ AMBiS ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ タンパク質産生受託サービス (株) バキュロウイルスによる遺伝子発現受託サービス [ 日本農産工業(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 昆虫細胞産生タンパク質作製受託サービス Bac Xpress EZ [ 日本農産工業(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ [ ネオシルク ]・・・・・・・・ トランスジェニックカイコを用いたタンパク質生産 TG カイコ・ネオ受託サービス (株) 哺乳動物細胞によるタンパク質産生受託サービス [ GenScript 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ タンパク質産生受託サービス [ BPS Bioscience 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ [ ジャパン・ラム ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 新規ポリペプチドタグを用いたタンパク質産生受託サービス (有) 10 13 13 14 15 16 17 18 19 20 20 21 21 22 23 23 24 25 26 26 27 3 遺伝子発現抑制・オリゴ DNA・RNA Ambion Ⓡ siRNA 合成受託サービス [ Ambion Ⓡ(アプライドバイオシステムズジャパン(株))]・ ・・・・・・・・・・・・・ [ RNAi ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ siRNA・キメラ型 RNAi 化学合成受託サービス (株) [ ジーンデザイン ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ siRNA 合成受託サービス (株) [ ジーンデザイン ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ siRNA 配列デザイン受託サービス (株) siRNA 発現ベクター構築受託サービス [ GenScript 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ Morpholino アンチセンス合成受託サービス [ GeneTools 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ Vivo-Morpholino 合成受託サービス [ GeneTools 社 ]・ ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ miRNA 標的 Morpholino オリゴ合成受託サービス [ GeneTools 社 ]・ ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ miRNA 発現プロファイリング受託サービス [ 日立ソフトウェアエンジニアリング(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ [ ジーンデザイン ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ BNA (LNA) 修飾オリゴヌクレオチド合成受託サービス (株) オリゴ DNA 合成受託サービス [ フナコシ(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ プライマー/オリゴ DNA 合成受託サービス [ Invitrogen 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ [ ジーンデザイン ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 部位特異的メチル化検出プローブ ICON プローブ (株) [ J-Bio21 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ QProbe / QPrimer 合成受託サービス (株) [ ジーンデザイン ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ RNA 合成受託サービス (株) 28 32 33 34 34 37 41 42 42 43 44 44 45 46 47 4 ゲノミクス [ インプランタイノベーションズ ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 植物遺伝子解析受託サービス (株) [ インプランタイノベーションズ ]・ ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 植物形質転換受託サービス (株) 微生物同定試験受託サービス [ 三井農林(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ GeneFishing 受託サービス [ Seegene 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 遺伝子発現解析受託サービス [ ユニーテック(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ CustomArray 作製受託サービス [ コンビメートリックス(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ [ 日本パーカーライジング広島工場 ]・・・・・・・・・・・ ジーンシリコンⓇ マイクロアレイ作製・解析受託サービス (株) [ GSP 研究所 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ GSP-Array 解析受託サービス (株) 微量 DNA マイクロアレイ解析受託サービス [ ファルマフロンティア(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 機能別 DNA マイクロアレイ解析受託サービス [ ファルマフロンティア(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 人工遺伝子合成受託サービス [ GenScript 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ ORF クローニング受託サービス [ GenScript 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ シークエンシング受託サービス [ フナコシ(株)]・ ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ [ フェニックスバイオ 宇都宮営業所 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ ゲノム DNA 抽出/精製受託サービス (株) [ フェニックスバイオ 宇都宮営業所 ]・・・・・・・ サザンブロット/ハイブリダイゼーション受託サービス (株) [ AMBiS ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 遺伝子工学実験受託サービス (株) 遺伝子工学実験受託サービス [ BPS Bioscience 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ [ クロモソームサイエンスラボ ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ FISH 法による染色体解析受託サービス (有) [ GSP 研究所 ]・ ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ FISH プローブ作製・FISH 解析受託サービス (株) [ J-Bio21 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ QProbe による SNP 解析受託サービス (株) [ 青葉ジェネティクス ]・ ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ マイクロサテライト DNA 多型解析受託サービス (株) 48 49 50 52 54 55 56 56 57 58 59 60 61 61 61 62 62 63 64 64 65 5 組織標本・細胞解折・細胞培養 動物臓器 [ フナコシ(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ [ バイオ病理研究所 ]・・・ 動物病理組織標本作製・免疫染色標本作製および病理組織学的検査受託サービス (株) [ つくば遺伝子研究所 ]・・・・・ 組織アレイ作製・組織染色および in situ ハイブリダイゼーション受託サービス (株) in situ ハイブリダイゼーション受託サービス [ ジェノスタッフ(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 特注培地の製造受託サービス (株) [ 細胞科学研究所 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 66 66 67 70 71 6 ペプチド・ペプチドアレイ ペプチド合成受託サービス [ フナコシ(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 長鎖ペプチド合成受託サービス [ GenScript 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ [ ハイぺップ研究所 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 環状ペプチド合成受託サービス (株) ペプチドアレイ・ペプチドセット作製受託サービス [ JPT Peptide Technologies 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 変異体タンパク質発現クローンライブラリー作製受託サービス [ GenScript 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ [ 蛋白科学研究所 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 標的タンパク質の活性阻害ペプチド設計受託サービス (株) 73 74 74 75 79 80 7 抗体 [ ジャパン・ラム/ GenScript 社/ Abnova 社 ]・・・・・・・・ ポリ・モノクローナル抗体作製受託サービス (有) DNA 免疫による抗膜貫通タンパク質抗体/機能性抗体の作製受託サービス [ GENOVAC 社 ]・・・・・・・・・・・・ マウス腹水採取受託サービス [ フナコシ(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ エピトープ解析ツール作製受託サービス [ JPT Peptide Technologies 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 81 82 82 83 8 糖鎖 [ グライコジーン ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 糖鎖合成受託サービス (株) [ セラジックス ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 糖鎖関連化合物合成受託サービス (有) 糖鎖関連化合物合成受託サービス [ Dextra Laboratories 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ [ グライコジーン ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 糖鎖導入・修飾受託サービス (株) GlycoCut 各種生体試料からの糖鎖切り出し受託サービス [ 増田化学工業(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ [ グライコジーン ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 糖鎖分析受託サービス (株) [ スディックスバイオテック ]・ ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ シュガーチップを用いた SPR 解析受託サービス (株) 84 84 85 85 86 87 88 9 有機化合物・天然物 [ 藤本分子化学/(有)セラジックス/ ChiroBlock 社/ Enzo Life Sciences 社 ]・・ 有機合成受託サービス (株) 脂質合成受託サービス [ Avanti Polar Lipids 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ ポルフィリン合成受託サービス [ Frontier Scientific 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 天然物の精製受託サービス [ 長良サイエンス(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 89 90 90 90 10 アッセイ系構築 [ ホクドー ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 91 ELISA Kit 構築受託サービス (株) アレルゲン特異的 Ig 測定キット作製受託サービス [ ALerCHEK 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 92 11 免疫学研究 Pro5 MHC Class Ⅰ Pentamer [ ProImmune 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 93 MHC Class Ⅱ Ultimer [ ProImmune 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 95 REVEAL & ProVE Ⓡ Rapid Epitope Discovery System and Cellular Analysis System [ ProImmune 社 ]・・・・・・・・ 96 自然免疫活性化能試験/糖脂質関連解析受託サービス [ 自然免疫応用技研(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 98 ミクロスフェア作製受託サービス [ Bangs Laboratories 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 98 アレルゲン解析受託サービス [ 日立ソフトウェアエンジニアリング(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 99 [ バイオメッドコア ]・・・・・・・・ 100 オリゴマンノース被覆リポソーム(OML)への各種試薬包埋受託サービス (株) 12 生体試料分析 [ ホクドー ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 101 ELISA 測定受託サービス (株) 酸化ストレス評価受託サービス [ 日研ザイル(株)日本老化制御研究所 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 101 生体試料分析受託サービス [ 協和メデックス(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 102 生体試料分析受託サービス [ アルフレッサファーマ(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 103 [ スカイライトバイオテック ]・ ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 104 リポタンパク質解析受託サービス LipoSEARCH (株) [ スカイライトバイオテック ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 105 肝臓脂質の測定受託サービス (株) [ スカイライトバイオテック ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 106 肝臓胆汁酸の測定受託サービス (株) サイトカイン測定受託サービス [ 日立ソフトウェアエンジニアリング(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 107 13 創薬・物質評価・薬物動態 [ エンバイオテック ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 108 核内レセプタースクリーニング受託サービス (株) Epigenetic Drug Discovery Service [ Epigentek Group 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 110 阻害物質の評価受託サービス [ BPS Bioscience 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 111 アプタマー探索受託サービス [ AptaRes 社 ]・ ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 111 [ エーシーバイオテクノロジーズ ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 112 バイオアッセイ受託サービス (株) [ メルシャンクリンテック ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 113 機能性食品の有効性評価試験受託サービス (株) 微量表面張力計による ADME 予測受託サービス [ フナコシ(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 114 薬物動態試験受託サービス [ SPI-BIO 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 114 ADME 解析受託サービス [ Sovicell 社 ]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 114 トランスポーター試験受託サービスおよび安定発現細胞 [ スギ生物科学研究所(株)]・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 115 遺伝子改変動物 1 プロテオミクス・タンパク質発現 2 遺伝子発現抑制・オリゴ DNA・RNA 3 ゲノミクス 4 組織標本・細胞解析・細胞培養 5 ペプチド・ペプチドアレイ 6 抗体 7 糖鎖 8 有機化合物・天然物 9 アッセイ系構築 10 免疫学研究 11 生体試料分析 12 創薬・物質評価・薬物動態 13 受託サービスはコチラからもご覧いただけます http://www.funakoshi.co.jp/ 各種検索サイトからもラクラクアクセス! TOP ページ 受託サービス・特注品をクリック 本カタログでは紹介しきれなかった詳細 なサービス内容が掲載されています。 インターネットで専用注文書をダウンロードできます http://www.funakoshi.co.jp/download/ TOP ページ ダウンロード→受託サービス依頼書をクリック 各種専用注文書は, フナコシホームページの下記ページから ダウンロードして下さい。 お問い合わせはコチラから TEL.03-5684-1645 FAX 03-5684-6539 e-mail : [email protected] ●ご不明な点は,当社受託・特注品業務担当(上記参照)までお問い合わせ下さい。 ●各種受託サービスの価格・納期に関しては,ご依頼の内容に応じて個別にお見積りいたします。 ●本カタログに掲載されている事項以外にも,各種受託サービスをお引き受けできる場合があります。お気軽にお問い合わせ下さい。 ※ 本カタログに記載されている価格は,2009 年 2 月末現在のものです。 ※ 表示価格に,消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますのであらかじめご了承下さい。 ※ 本カタログに掲載されている受託サービスおよび関連製品は,すべて研究用にのみお引き受けします。医薬品 , 診断用医薬品,食品等の用途の場合はお引き受けできません。 ※ 掲載されているサービス内容は,2009 年 2 月現在の情報に基づいています。サービス内容は , 改良等の事情で予告なしに変更されることがありますのであらかじめご了承下さい。 ノックアウト・ノックインマウス作製受託サービス C57BL/6 マウスを用いてノックアウト(KO)またはノックイン(KI)マウスを作製いたします。C57BL/6 マウスは遺伝子配列情 報が完成しており正確な塩基配列が使用できるため,ターゲティングベクター構築の際に重要な部位のシークエンス確認が可能,表現型解 析の際に遺伝子発現解析が使用可能,行動解析の文献データが豊富,戻し交配が不要で時間が短縮できるという特長があります。 特 長 りの設計を専門家が行います。 ◆ 正確な技術でノックアウト・ノックインを確認します。 ◆ 2007 年 4 月から始めた京都大学との共同研究により成功率が 更に向上しました。総合力でもトップレベルと評価をいただい ています。 ◆ 作製したマウスの知的財産権は,すべてお客様に帰属します。 Targeting vector 主な種類 2 3 サービス概要 ◆ 遺伝子情報( 遺伝子名や Accession No. )のみで,ご希望通 遺伝子改変動物 1 Neo カセットを飛ばす方法 Neo カセットは飛ばしません ノックアウト null KO マウス conditional KO 特殊マウスと交配 Kl(レポーター Gene )などで Neo カセットは飛ばしません Neo を飛ばさない系 ノックイン マウス Kl( mutation ),Kl( cDNA ) 特殊マウスと交配 などで Neo を飛ばす系 特殊設計 上記以外で行いたい場合 4 5 ◆ 秘密保持契約を結び,お客様の知的財産権を厳守します。 6 価格/納期 null ノックアウト・ノックインマウス conditional ノックアウトマウス Ⅰ . Neo カセットを飛ばさない系 Ⅱ . Neo カセットを飛ばす系 No. No. 1 1 作業内容 価 格 納 期 ベクター設計・制限酵素 150,000 円 2 週間 マッピング等 クローニング・ターゲティング 2 1,050,000 円 6 週間 ベクター構築 〈オプション〉 450,000 円 ① Kl ベクター構築(シークエンス含む) 各 4 週間 ②特殊構築 35 万円 × ステップ数 1,980,000 円 相同組換え ES 細胞作製 ES selection ES colony pick up 11 週間 3 ES genotyping( PCR ) 1)サザンブロッティング 320,000 キメラマウス作製 4 750,000 (相同組換え ES 細胞をインジェクション) F1 ヘテロマウス作製 5 (キメラマウスの交配後,F1 ヘテロ 470,000 マウスを取得,genotyping 含む) 小 計 4,720,000 円 円 8 週間 円 10 週間 円〜 37 週間 作業内容 ベクター設計・制限酵素 マッピング等 クローニング・conditional 2 ターゲティングベクター構築 〈オプション〉 ① 特殊構築 ② Kl( mutation ) ③ Kl( cDNA ) 相同組換え ES 細胞作製 ES selection ES colony pick up ES genotyping( PCR ) 3 (Loxp 等駆動試験含む) 価 7 格 納 期 180,000 円 2 週間 1,250,000 円 6 週間 35 万円 × ステップ数 各 4 週間 45 万円+(18 万円 × mutation 数) 450,000 円 2,300,000 円 8 9 12 週間 1)サザンブロッティング 320,000 キメラマウス作製 4 750,000 (相同組換え ES 細胞をインジェクション) F1 ヘテロマウス作製 5 (キメラマウスの交配後,F1 ヘテロ 470,000 マウスを取得,genotyping 含む) Neo を飛ばす特殊マウス等との 6 350,000 交配 小 計 5,620,000 10 円 円 8 週間 円 10 週間 円 4 週間 円〜 11 42 週間 12 オプション ※ノックアウトする遺伝子が 致死の場合,conditional 構築にする必要があります。 No. 作業内容 価 格 納 ES karyotyping( positive ES の核型検査) 250,000 円 3 週間 2 ホモマウス作製(ヘテロマウスの交配よりホモマウス作製,genotyping 実施) 860,000 円 16 週間 3 凍結胚作製 150,000 円 — http://www.funakoshi.co.jp/ 13 期 1 フナコシ受託わーるど 2009-2010 3 1 遺伝子改変動物 ジーンターゲティングマウス作製受託サービス 2 3 ジーンターゲティングによって,お客様が目的とするノックアウトマウスを作製いたします。 特 長 ◆ ノックアウトマウス作製の最重要特許のライセンス許諾 ◆ マウス作製後は精子・胚を凍結保存(オプション) ノックアウトマウス作製受託業務にかかる技術,方法に関して,パ 樹立された貴重なマウスの精子および胚を凍結保存いたしま スツール研究所が保有する下記特許を,フランス Cellectis 社からラ 4 す。 ◆ コンディショナルノックアウト作製 イセンス許諾を受けていますので,安心してご依頼いただけます。 特許 3059481 号,特許 3298842 号,特許 3298864 号 RENKA ES 細胞(C57BL/6)を用いたコンディショナルノッ ◆ 知的財産権はお客様に帰属 5 クアウトマウスも作製します。 ◆ マウス作製後の解析までサポート 作製されたマウスの権利はすべてお客様に帰属します。 ◆ ES 細胞は C57BL/6(RENKA ES 細胞) ヘテロ欠損マウス作製後,ホモ欠損マウス作製や表現型解析,他 129/Sv,BALB/c,TT2 も対応可能です。詳細はご相談下さい。 系統との交配によるダブルノックアウトマウス作製も行います。 作業内容 6 No. 7 1 2 3 4 8 5 6 7 8 9 9 内 容 詳 細 ご提供いただいた情報(cDNA 配列,GenBank No. など)を用いて, ゲノムデータベースを検索し,目的とする遺伝子のゲノム上の位置を 特定する。 ベクターのデザイン ベクターのデザインを決める。 ベクターの構築 ゲノム配列情報をもとに,ベクターを構築する。 エレクトロポレーションと エレクトロポレーションによって,ES 細胞にベクターを導入し, 薬剤耐性セレクション G418 による選択培養を行う。 得られた ES クローンを解析し,相同組換えの起こったクローンを選 ES クローンの解析 び出す。 マイクロインジェクション法/アグリゲーション法によりキメラマウ キメラマウス作製 スを作製する。 ジャームライントランスミッション確認 ジャームライントランスミッションを確認する。 ヘテロ欠損マウス作製 ヘテロ欠損マウスを作製し,お客様へ送付する。 精子・胚の凍結保存 ヘテロ欠損マウスの精子,胚を凍結する。 標準的な* 作業期間 納品物 4 か月 ・構築図 ・DNA シークエンスデータ ・制限酵素消化写真 ゲノムデータベースにおける検索 4 か月 2 か月 3 か月 - ・コロニー数 ・PCR /サザン解析画像 ・匹数,毛色などのキメラ 産子データ ・サザン解析画像 ・ヘテロ欠損マウス ・凍結精子・胚 *上記作業期間は標準的なものです。試験スケジュールによって前後することがあります。 10 ※ 価格等の詳細は,お問い合わせ下さい。 ジーンターゲティングによる遺伝子改変マウス 作製受託サービス 11 12 お客様より提供されたターゲティングベクターを胚性幹(ES)細胞にエレクトロポレーションし,G418 耐性コロニーを選択します。 耐性コロニーを 24 ウェルプレートにピックアップし,PCR またはサザンブロッティングにより相同組換え体の同定を行います。同定さ れた相同組換え体から ES 細胞ストックを作製し,凍結保存します。 目的の相同組換え ES 細胞クローンを 8 細胞期胚または胚盤胞期胚に注入し,受容雌マウスの子宮内に移植します。受容雌マウスの帝 13 王切開により SPF 化したキメラマウスを作製します。キメラマウスは野生型マウスと交配することにより,生殖系列キメラを確認します。 また,F1 産仔は PCR またはサザンブロッティングによりヘテロマウスの確認を行います。 ※ キメラマウスを作製する際の受容胚には,変異導入 ES 細胞が 129Sv 系マウス由来の場合には C57BL/6 × DBA2(BD)F1 マウスま たは C57BL/6 マウスを,C57BL/6 マウス系細胞由来の場合には ICR マウスを使用します。いずれも日本チャールスリバーまたは 日本クレアのいずれかの SPF マウスを使用します。 ※ 遺伝子改変マウスの微生物モニタリングは,遺伝子解析を実施したものについては同腹仔を,遺伝子解析を実施しなかったものについ ては里親を,財団法人実験動物中央研究所 ICLAS モニタリングセンターにて行い,納品時にマウス感染検査成績を添付いたします。 4 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 ● 変異導入 ES 細胞の作製 … …………………………………………… ¥3,600,000 ● キメラマウスの作製 1 格 … …………………………………………… ¥ 800,000 ※ 左記の価格はあくまでも目安です。委託の内容によりその都度 お見積りいたします。 ※ サービスの詳細,ご用意いただくものの詳細については,フナ コシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)をご覧いた だくか,お問い合わせ下さい。 遺伝子改変動物 価 2 3 セミ・ノックインマウス,ラット作製受託サービス 4 Red/ET Recombination System *を用いて BAC ゲノムクローンからターゲティングベクターを構築し,プロモーターおよび組織 特異的エンハンサーを含む 200 kb におよぶゲノム DNA 配列を直接導入したトランスジェニックマウス『セミ・ノックインマウス』ま たはトランスジェニックラット『セミ・ノックインラット』を作製いたします。発現ユニットをまるごと導入するため,短期間でノックイ 5 ンマウス・ラットに相当するモデル動物の作製が可能です。 * Red/ET Recombination System の詳細については,フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)から,キーワード「Red/ ET」で検索して下さい。 特 長 ◆ 遺伝子構築計画からの支援 →専門担当者が遺伝子構築からご質問/ご相談等に対応いたし セミ・ノックインマウスの作製 1. Red/ET Recombination System による BAC ゲノムクローン 6 7 を用いたターゲティングベクター構築 ます。 8 →カルタヘナ法に関するご相談も承ります。 ◆ 対応動物種 →トランスジェニックマウス・ラットの他に,トランスジェニッ クウサギの作製も承ります。 9 ◆ トランスジェニック動物系統化における技術サポートも別途対 応可能 →サザンスクリーニングによる継代で,より正確に繁殖・継代 を行います。 →マウスではマイクロインジェクションにより低受精率を克服 しています。 2. パルスフィールド電気泳動による高分子 DNA フラグメントの 精製 3. マイクロインジェクション/サザンスクリーニング M1 マウスゲノム 10 コントロール [1 3 10 30] (kb) 受託例 3.0 − 2.0 − ※ C57BL マウスの受精卵でトランスジェニックマウスを作製し M1 ます。 1. 遺伝子情報をご提供いただき,遺伝子構築の企画書を提出いた します。 11 3.0 − 2.0 − マウスゲノム [0 1 10] コントロール 価格/納期 12 2. 400 個の受精卵に DNA を注入し,レシピエントに移植します。 ● 価格:約 450 万円~ 3. サザン法によりトランスジェニックマウスを選別いたします。 ● 納期:約 6 か月 ※ 株式会社フェニックスバイオの組換え委員会審査のため,遺伝 ※ ご注文方法等の詳細はお問い合わせ下さい。 13 子に関する基本情報を定型書式でご提供いただく必要がありま す。 ※ 基準系統ではバリアシステムの動物施設で動物を作製します。 ※ 動物の輸送手配をご依頼いただく場合は,別途実費を申し受け ます。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 5 遺伝子改変動物 1 スピードコンジェニックマウス作製受託サービス 2 3 ターゲティングマウスの作製に多く用いられている ES 細胞は,129 系統由来であり,各種解析を実施する前に,その他の近交系にバッ ククロスするケースが多く見られます。標準法のバッククロスでは,3 年~ 5 年の期間が必要となり,時間的ロスが大変大きいといえます。 本受託サービスではマイクロサテライトマーカーを用いて網羅的に遺伝子置換をモニタリングすることによって,短期間でコンジェニック 系統を樹立いたします。 サービス内容 4 作業内容 ◆ 129 系統→ C57BL/6 系統へのコンジェニック系統の作製 ◆ 交配回数:5 回 ◆ 1 世代ごとにゲノムマーカー解析結果を報告 5 6 (世代数) (解析マーカー数) 1 80 2 28 3 10 4 4 5 1 親へテロ雄×ワイルド雌(20 匹) 1 世代の基本交配数 →子ヘテロ雄 16 匹程度を解析へ ※ 体外受精にて交配を実施します。 約 3.5 か月(5 世代で約 18 か月) 1 世代の解析期間 ※ 試験スケジュールによって前後することがあります。 5 回の交配を実施 交配回数 ※ ご希望により変更可能です。 依頼される雄マウス(凍結胚でも可能) ご用意いただくもの ドナー系統の試料(ES 細胞・キメラマウス尾部) ※ 価格等の詳細は,お問い合わせ下さい。 6 129 7 B6 遺伝的バックグラウンドのイメージ マウスゲノム DNA 上の約 80 の多型マーカーを解析し,最も B6 系統への置換 が進んでいる個体を次世代の交配に使用する。 8 各種遺伝子改変マウス 9 株式会社トランスジェニックでは,可変型遺伝子トラップ法を用いて,大規模かつ網羅的に遺伝子破壊マウスを作製しています。これ 10 11 らのマウスはすでに系統として樹立されており,ご注文から数か月でお客様に供給することが可能です。 特 長 ◆ 次々に新しい遺伝子改変マウスが作製され製品ラインナップに登場する予定です。 ◆ 株式会社トランスジェニックで作製したマウス以外にも,大学や研究機関等で樹立された各種遺伝子改変マウスを,ライセンスを受け て販売しています。 ◆ 現在供給可能な製品リストは,株式会社トランスジェニックホームページ(http://www.transgenic.co.jp/jp/products/mice/list.html) 12 で閲覧することができます。 ※ 詳細はお問い合わせ下さい。 13 6 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 1 遺伝子改変動物 トランスジェニックマウス作製受託サービス 2 様々なトランスジェニック(Tg)マウスの豊富な実績を有するユニーテック株式会社が提供する受託サービスです。 特 長 3 ◆ Tg 用ベクター設計から仕上げの尻尾 DNA 解析まで,トップ 早い! レベルの技術力です。 安い! ・インジェクションされた DNA の特異的な配列がゲノムに 組み込まれているかを正確に確認 4 正確! ・コピー数の算定(サザンブロッティング) ・リアルタイム PCR での確かな発現解析 ・鮮明な免疫染色 ・設計から組み込んだ目的タンパク質の検出 ◆ Tg マウスの成功実績は 98 % 以上です。 5 受託例 ● Ubiquitous(全身)発現 Tg マウス ● 組織特異的発現 Tg マウス 作製工程 6 ● Conditional 発現 Tg マウス 1. クローニング ※ 使用マウス:C57BL / 6 マウス ①目的遺伝子の Accession No. をお知らせ下さい。 ②価格は遺伝子の塩基配列数によって変わります。 2. ベクター構築 No. 以下のご要望等にお応えします。 ① a)全身発現* b)組織特異的発現 ② a)マーカー付加 3 c)conditional 発現 b)タグ付加 *全身発現の場合は CAG ベクターを使用します。企業・営利団 体にご所属のお客様が,全身発現 Tg マウスの作製を希望され る場合,財団法人化学及血清療法研究所の特許実施権を取得す る必要があります。詳細はお問い合わせ下さい。 4 5 6 7 8 3. プラスミド DNA 切り出し精製 4. インジェクション ※1 〜 4 のどの段階からでも承ります。 ※発現確認 ・RT - PCR ・ウエスタンブロッティング 7 価格/納期 9 作業内容 プラスミド DNA 切り出し精 製 200 個受精卵インジェクショ ン F0 マウス tail cut ゲノム抽 出〜 PCR まで F1 マウス作製 F1 マウス tail cut ゲノム抽 出〜 PCR まで マウス微生物学的検査(貴施 設のご指定通りに行います) 格 納 期 80,000 円 1 週間 430,000 円 7 週間 150,000 円 1 週間 240,000 円 10 週間 90,000 円 1 週間 29,000 円〜 3 週間 マウス専用冷蔵車輸送代 別途お見積り ① F2 ホモマウス作製 860,000 円 16 週間 ② サザンブロッティング 240,000 円 1 週間 * オプション 価 8 9 10 *オ プションの F2 ホモマウス作製をご希望される場合は,F0 からサザンブロッティングが必要になります。 ※1. クローニング,2. ベクター構築についての価格・納期につ 11 いては,お問い合わせ下さい。 ・免疫染色 12 13 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 7 遺伝子改変動物 1 トランスジェニックマウス作製受託サービス 2 3 お客様より提供された DNA 溶液をマウス受精卵の前核にマイクロインジェクションし,受容雌マウスの卵管内に移植します。受容雌 マウスの帝王切開により SPF 化します。離乳後( 生後約 4 週齢 ),遺伝子解析をご依頼されない場合は,すべての離乳したマウスをお 客様にお送りします。遺伝子解析( PCR またはサザンブロッティング )をご依頼される場合は,遺伝子解析後,遺伝子導入が確認され たマウスのみをお送りします。 ※トランスジェニックマウス作製には,C57BL / 6 × DBA2( BD )F1 または C57BL / 6 マウスを使用し,日本チャールスリバーまた は日本クレアのいずれかの SPF マウスを使用します。 4 5 ※トランスジェニックマウスの微生物モニタリングは,遺伝子解析を実施したものについては同腹仔を,遺伝子解析を実施しなかったも のについては里親を,財団法人実験動物中央研究所 ICLAS モニタリングセンターにて行い,納品時にマウス感染症検査成績を添付いた します。 ご用意いただくもの マイクロインジェクション用 DNA 溶液 お送りする DNA レポートに必要事項( 開示可能な範囲でマッ 6 プ,サイズなど )をご記入の上,マイクロインジェクション用 DNA 溶液,濃度調整後のマイクロインジェクション用 DNA 溶液 の電気泳動写真とともにご返送下さい。 遺伝子名は記号のみで表記するのではなく,その内容を分かり 7 やすく記入して下さい。マイクロインジェクション用 DNA は TE に溶解し,50 μ g / ml の濃度で 100 μ l をお送り下さい。 プラスミド DNA からの精製については別途ご相談に応じます。 8 プライマー PCR による産仔のスクリーニングをご依頼される場合は,プ ライマーセットを,PCR 条件( 温度,反応時間,サイクル数 ), 9 自体に何らかの毒性があり,発育途上で死亡するためと考えられ 件を添えてマイクロインジェクション用 DNA 溶液とともにお送 ます。したがって,異なる構造の遺伝子で作製を行う際には,新 り下さい。また,これらの条件で PCR を行った際の電気泳動写 たなご依頼として別途費用を申し受けます。 提供された試料およびお客様にお送りしなかった動物等につい ては,業務終了後処分いたします。 プローブ用 DNA サザンブロッティングによる産仔のスクリーニングをご依頼に なる場合は,プローブ用 DNA を,注入 DNA の鎖長,使用する 11 制限酵素,導入遺伝子の予測されるバンドのサイズ等,解析に必 要な条件を添えてマイクロインジェクション用 DNA 溶液ととも にお送り下さい。また,これらの条件でサザンブロッティングを 行った際の写真も同封して下さい。 ご注文方法 お見積り依頼を受け次第,依頼内容調査書および開示に必要な 機密保持契約書をお送りします。ご記入いただいた依頼内容調査 書の内容を基に正式な見積書および試験計画書を作成します。 12 価 ご依頼に際しては,あらかじめお客様の施設内の組換え DNA 格 安全委員会等により P1 施設内で実施可能との承認を受けている ● 遺伝子解析なし 13 トランスジェニックマウスが得られなかった場合,遺伝子産物 導入遺伝子で予測される PCR 産物のサイズ等,解析に必要な条 真も同封して下さい。 10 ご注意 ことを証明する書類を提出していただきます。 �������������������������������������� ¥ 650,000 ● 遺伝子解析( PCR )込み なお,受託契約の際には実験内容の機密保持に関する契約も併 せて締結いたします。 �������������������������������������� ¥ 800,000 ※詳細はお問い合わせ下さい。 ● 遺伝子解析( サザンブロッティング )込み �������������������������������������� ¥ 950,000 ※上記の価格はあくまでも目安です。委託の内容によりその都度 お見積りいたしますので右記のご注文方法をご覧下さい。 8 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 近年,個体レベルでの遺伝子機能解析のツールとして,遺伝子導入または破壊マウスが広く用いられています。これらのマウスの詳細 な表現型解析の重要性がますます高まっております。 株式会社トランスジェニックでは,ジーントラップ法により様々な種類の遺伝子破壊マウスを作製し機能解析をする事業を大規模に展 開しており,お客様所有のマウスの表現型解析のご要望に対しても,低コストで詳細な解析情報を提供いたします。実施できる基本検査は 以下のとおりです。 解析項目リスト 一般状態観察 検査対象出生児について,毎日 1 回観察する。 (※一定期間の飼育が発生する場合は,標準実施項目となります) 体重測定 5週齢以降週 1 回の頻度で測定し,剖検日には最終体重を測定 血圧・心拍数 無加温型非観血式血圧計を用いて測定 尿検査(定性) pH 尿検査(定量) 尿中ナトリウム排泄量 剖検 剖検を行い,所見を記録する 器官重量測定 脳 胸腺 肺(気管支を含む) 心臓 肝臓(胆嚢含む) *左右別々に測定 腎臓* 脾臓 副腎* 下垂体 精巣*または卵巣* 白血球数 血液学的検査 血小板数 3 5 潜血 尿量 2 4 ブドウ糖 タンパク質 遺伝子改変動物 1 遺伝子改変マウス表現型解析受託サービス 赤血球数 ヘモグロビン量 平均赤血球容積 網状赤血球率 平均赤血球血色素量 6 ヘマトクリット値 7 白血球形態検査 平均赤血球血色素濃度 血液学的検査で使用した残余血液を遠心分離して得られる血漿を用いて検査 総タンパク質 血液生化学的検査 アルブミン 直接ビリルビン 総ビリルビン 乳酸脱水素酵素 アミラーゼ 総コレステロール アンモニア HDL コレステロール 中性脂肪 トリグリセライド コリンエステラーゼ リン脂質 グルコース 無機リン 尿素窒素 クレアチニン マグネシウム カルシウム ― クレアチニンホスフォキナーゼ ロイシンアミノペプチダーゼ A / G 比(アルブミン / グロブリン 比) グルタミン酸オキザロ酢酸トランスアミナーゼ(GOT) 電解質(ナトリウム・カリウム・クロール) 脳 病理組織学的検査 9 アルカリホスファターゼ グルタミン酸ピルビン酸トランスアミナーゼ(GPT) γ- グルタミルトランスペプチダーゼ(γ-GTP) 脊髄(胸部) 眼球 下垂体 ハーダー腺 視神経 上皮小体 心臓 甲状腺 気管 舌 肝臓(胆嚢を含む) 胸腺 脾臓 腎臓 膵臓 食道 胃 副腎 空腸 回腸 十二指腸 結腸 直腸 盲腸 膀胱 腸間膜リンパ節 精嚢 精巣 精巣上体 前立腺 子宮 膣 卵巣 大腿二頭筋 大動脈(胸部) 乳腺 坐骨神経 皮膚(下腹部) 大腿骨(骨髄を含む) 10 下顎部リンパ節 肺(気管支を含む) 胸骨(骨髄を含む) 8 11 12 唾液腺(舌下腺,顎下腺,耳下腺) ※ ご希望の検査のみのご依頼も承ります。また,上記の検査項目以外の実施も承りますので,お問い合わせ下さい。 ※ご注文方法の詳細は,フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)をご覧いただくか,お問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 13 9 プロテオミクス・タンパク質発現 2 プロテオーム解析受託サービス 東和環境科学株式会社 プロフェニックス事業部では,電気泳動と質量分析を用いたタンパク質解析を始めとした様々なバイオ関連の 解析を用いて,お客様の研究開発をお手伝いします。また,プロテオーム解析を活用したマーカー探索を始めとする提案型受託解析につい てもお問い合わせ下さい。更には,タンパク質以外の分析についても,グループ企業の分析装置や実績と経験を活かして実施できますので, お問い合わせ下さい。 リン酸化タンパク質のプロファイリング,リン酸化部位の同定 タンパク質のリン酸化は,細胞の増殖の調節や酵素の活性,細胞内シグナル伝達などに関わる重要な役割を果たしますが,遺伝子解析 では推定することができず,タンパク質を直接解析する必要があります。本サービスでは,プロテオーム解析技術を用いたリン酸化タンパ ク質のプロファイリングに加えて,リン酸化部位の同定作業も実施します。 特 必要試料量/価格/納期 長 ◆ リン酸化タンパク質を数種類のタンパク質分解酵素で切断する ことにより検出ペプチドのカバー率を高め,高感度質量分析計 を用いたリン酸化部位同定を行います。 解析の条件により異なりますので,詳細はお問い合わせ下さい。 ※ お客様の試料に最適な解析プロセスをご提案・ご提供するため に,解析対象となるタンパク質に関する配列などの情報をご提 ◆ リン酸化部位同定の成否は,リン酸化ペプチドを精製・回収で きるかに依存していますが,独自のノウハウにより成功率を高 供していただきます。また,必要に応じて秘密保持契約を締結 します。 めることができます。 リン酸化 タンパク質溶液 酵素消化 リン酸カルシウム 沈殿 疎水性チップ 精製 金属キレートチップ 精製 高感度質量分析計による リン酸化部位決定 二次元電気泳動解析 等電点ストリップを使用してタンパク質を電荷性質で分離する等電点電気泳動を一次元目に,タンパク質を分子量によって分画する SDS-PAGE を二次元目に実施し,タンパク質のマップを作成します。試料間の泳動像の解析も可能です。また,SDS-PAGE のみの解析 も承ります。 仕 様 下記からそれぞれお選びいただきます。 ● 等電点レンジ : 4 ~ 7,3 ~ 10 など ● ゲルサイズ : 7, 18, 24 cm ● 染色方法 : CBB,銀染色,SYPRO Ruby 蛍光染色 プロフェニックス 事業部 解析例 10 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 必要試料量/価格/納期 二次元電気泳動 18 cm サイズゲル,蛍光染色の場合 ご注文方法 フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ (http://www.funakoshi.co.jp/ download/) に掲載の専用依頼書に必要事項をご記入の上,当社受 ●価格:1枚当たり 17 万円〜 託・特注品業務担当まで Fax でお送り下さい。 ●標準納期:3 週間 ※ 価格,納期はその都度お見積りします。 質量分析計による同定解析 MALDI 型質量分析計である ultraflex TOF/TOF(BRUKER DALTONICS 社製)を使用した,MS/MS Ion search による高い確度 のタンパク質同定結果を納品します。 特 長 必要試料量 ◆ DNA/タンパク質データベースが整備されていない生物由来の 試料については,直接スペクトルを精査する de novo 解析によ CBB で明確に染色される程度のバンドまたはスポットが必要で す。 de novo 解析の場合には更に多くの試料が必要です。 りアミノ酸配列決定を行います。 ◆ 5 ~ 8 個以上のアミノ酸配列が決定できれば,プライマーを作 製することにより,cDNA クローニングが行えます。 価格/納期 データベース完備の生物種の場合 ● 価格:1 試料当たり 25 万円〜 ● 標準納期:2 週間 ※同定できなかった場合は,基本料金を申し受けます。 de novo 解析の場合 詳細はお問い合わせ下さい。 ご注文方法 フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ (http://www.funakoshi.co.jp/ download/) に掲載の専用依頼書に必要事項をご記入の上,当社受 託・特注品業務担当まで Fax でお送り下さい。 ※価格,納期はその都度お見積りします。 ウエスタンブロット解析 お客様に代わりミニゲルによる電気泳動から検出までの作業を実施します。 基本となるゲルサイズはミニゲルですが,二次元電気泳動にも対応可能です。検出は発色で行います。 ※試料・一次抗体に関しては,お客様でご準備いただきます。 500 1.ミニゲル SDS-PAGE 2.タンク式転写装置を用いて エレクトロブロッティング 必要試料量 タンパク質定量をお客様に行っていただき,SDS サンプルバッ ファーに溶解した状態でお送り下さい。1 レーン当たり最大 20 100 50 25 10 (ng) 3.お客様ご準備の一次抗体,当社準備の二次抗体と結 合させ,化学発色で検出 (例:actin を 1-Step NBT/BCIP で検出) 価格/納期 ゲル 1 枚 ( 最大 12 レーン ),抗体 1 種類当たり,20 万円~ ※納期は解析の条件により異なりますので,お問い合わせ下さい。 μg のタンパク質の電気泳動が可能です。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 11 2 プロテオミクス・タンパク質発現 ●必要試料量:1 枚当たり 100 μg 〜 バイオマーカー探索,タンパク質相互作用解析 プロテオミクス・タンパク質発現 2 プロテオーム解析によるバイオマーカー探索,既知のタンパク質や DNA と相互作用するタンパク質の解析を行います。また,Tandem Affinity Purification(TAP)法の実績もありますので,詳細についてはお問い合わせ下さい。 必要試料量/価格/納期 分析内容・項目によって異なりますので,詳細はお問い合わせ 下さい。 DNA 関連分析 候補タンパク質解析後の PCR プライマー設計,PCR 解析,DNA シークエンスなどタンパク質解析からスタートした研究・開発を DNA レベルまでサポートします。 価格/納期 分析内容・項目によって異なりますので,詳細はお問い合わせ 下さい。 環境・食品分析 ※一般化学分析,特殊分析および内分泌撹乱被疑物質の分析まで, ● エンドトキシン分析(リムルス試験) ● 薬物および代謝物の定量解析(HPLC, LC-QQQ-MS 試験) ● 食品中の生物種解析(PCR) ● 食品中の食肉部位解析(MALDI-TOF/TOF) ● 農薬など残留物解析(GC, GC-MS) グループ企業における豊富な実施経験があります。詳細はお問 い合わせ下さい。 ※価格,納期はその都度お見積りしますので,詳細はお問い合わ せ下さい。 ● 生物試料中の金属元素分析 (ICP-MS) ● その他 12 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 Pull-down 法を用いたタンパク質間相互作用 解析受託サービス Pull-down 法は,特定のタンパク質と相互作用するタンパク質を探索する技術として有効な解析手法のひとつです。タグペプチドを付 加させたターゲットタンパク質と相互作用によって結合したタンパク質の複合体を免疫沈降により分離し,得られたタンパク質を質量分析 を用いて同定します。 ※ 詳細は,フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)をご覧いただくか,お問い合わせ下さい。 DNA 結合タンパク質の網羅的 解析受託サービス 多くの DNA 結合タンパク質は遺伝子の発現調節やクロマチンの高次構造形成に関与しており,細胞の機能や生理現象を研究する上で非 常に重要な分子だと考えられています。本受託サービスでは細胞から核タンパク質を非変性条件で抽出し,更にこの中から DNA に親和性 のあるタンパク質を DNA 結合ビーズを用いて分離します。そして分離されたタンパク質を質量分析により同定します。この一連の作業に よって DNA 結合タンパク質を網羅的に解析することができます。 ※ 詳細は,フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)をご覧いただくか,お問い合わせ下さい。 解析の流れ http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 13 プロテオミクス・タンパク質発現 2 プロテオミクス・タンパク質発現 2 微量タンパク質の精製・同定受託サービス プロテノバ株式会社では,血清を始めとする様々な生体試料から目的タンパク質を精製・同定する受託サービスを行っています。微量 タンパク質精製と解析技術の豊富な経験とノウハウを活かして,信頼性の高い結果をお届けします。 特 長 ◆ 陰・陽イオン交換カラム,ゲルろ過,逆相クロマトグラフィー ◆ 豊富な技術ノウハウを活かして,微量の目的タンパク質を精製 などの各種 HPLC および SDS-PAGE を組み合わせることに します。 ◆ TOF-MS *で目的タンパク質を検出することにより,微量タン より,高純度の精製タンパク質を調製します。 パク質精製のスピードアップと効率化を達成しました。 ◆ TOF-MS による Peptide Mass Fingerprinting 解析,および ◆ 超高速分析カラムを微量タンパク質の精製に応用することで, MS/MS 解析により,信頼性の高いタンパク質同定を行いま ng レベルの血中タンパク質を 2 週間から 1 か月で精製するこ す。 とが可能です。 * プロテノバ株式会社は,バイオ・ラッド ラボラトリーズ株式 会社と TOF-MS を用いたバイオマーカー探索受託サービス に関するライセンス契約を締結しています。 添加血清からの Lysozyme の精製例 試料 Lysozyme 添加血清 (100ng /ml) イオン交換カラムを用いた粗分画 (CM-sepharose:pH 7) 超高速分取用イオン交換カラム NPR を用いた分画 (SP-NPR:pH 6) SDS-PAGE を用いた最終精製 1mm 径 2 μm ODS カラムを用いた最終精製 (ODS-140HTP 2.3 μm) 同定へ 仕 様 ● 実績試料:血清,唾液,尿,細胞培養上清,細胞ホモジネートなど ● 粗分画法の一例:陰イオン交換カラム(Q-sepharose)と陽イオン交換カラム(CM-sepharose) ● HPLC カラムの一例:陰・陽イオン交換カラム(非多孔性充填剤),2 μm ODS カラム(1 × 50 mm)など ● 最終ステップ:2 μm ODS カラム(1 × 50 mm),SDS-PAGE(Tris-Gly 系または Tris-Tricine 系) ご注文方法/価格 ※ ご依頼の内容に応じて個別にお見積りいたします。詳細は,お問い合わせ下さい。 14 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 バイオマーカー探索受託サービス 株式会社プロトセラが新たに開発した『ブロットチップ 』解析技術と高性能 MALDI 型質量分析装置を用いて,試料のプロファイリン グや多試料間のディファレンシャル解析により,疾患特異的なバイオマーカー等の同定を迅速に行う受託サービスです。 ※ 本サービスは研究用です。臨床用途には利用できません。 特 長 ◆『ブロットチップ 』はプロテオーム解析の際にプロファイリン ® グから同定までを同一デバイス上で効率的に行える画期的な新 技術です。 ◆ アルブミンの除去や蛍光・ラジオアイソトープ標識などの試料 の前処理が必要ありません。 ◆『ブロットチップ ®』を利用して血液を無処理のまま解析し,併 せてアルブミン除去後 20 倍濃縮して行うデュアル解析を行う ことにより,網羅的なペプチド探索が可能です。 ◆ 所要時間が大幅に短縮され,分子量 3,500 以下のペプチド試 料は即日同定が可能です。 ◆ ディファレンシャル解析も短期間で結果が得られます。 ◆ タンパク質の等電点による制約を受けません。 ◆ 0.6 ~ 200 kDa の幅広い分子量域に対応可能です。 『ブロットチップ ®』解析技術 『ブロットチップ ®』は,タンパク質の分離・精製,正常 組織と病理組織で変化するタンパク質の探索と同定など多 数の工程からなる現行のプロテオーム解析法を大幅に短縮 する新規デバイスです。従来はこれらの主要な工程に加え て,さらにタンパク質の消化・抽出など多くの中間工程を 必要としましたが,『ブロットチップ ®』解析技術ではそれ らが一切不要となりました。その結果タンパク質の検出範 囲が拡大し,分析精度とスピードが格段に向上し,網羅的 な高速プロテオーム解析が可能となりました。今後,同技 術を駆使して疾患に関わるタンパク質を高速・大量に検討 し,疾患の原因・予防に重要な役割を果たすタンパク質の 発見に期待がかかっています。 バイオマーカー探索の例 ◆ 検出ピーク数,ピーク強度が高い再現性を示します。 ●癌・糖尿病を始め,重要疾患の早期発見に有効なバイオ デュアル解析フロー マーカーの高速・高精度探索 ●モデル動物で効力や毒性の指標となるペプチド性マー カーの探索 血液 1.5μl ●食品の健康への影響に関連する血中のマーカーの探索 アルブミン除去 30μl 無処理 アルブミン除去 解析手順 ブロットチップ 解析 ® アルブミン等に 吸着しないペプチド 全ペプチド 試料の SDS ポリアクリルアミドゲ ル電気泳動 電気転写 1疾患当り 50 〜 100 個のバイオマーカー発見 ピーク強度 ̶ 無処理 ̶ アルブミン除去 * * * ** * 質量分析(MS & MS/MS) データ解析 m/z 網羅的ペプチド探索 *印のペプチドは先行技術では発見不能だった。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 15 プロテオミクス・タンパク質発現 2 ® プロテオミクス・タンパク質発現 2 抗体アレイ作製受託サービス Hypromatrix 社が提供する 400 種類の抗体リストから,ご希望の抗体のみをアレイメンブレンにスポットします。タンパク質間の相 互作用,リン酸化などのタンパク質の翻訳後修飾,細胞内情報伝達等の解析をハイスループットで行えます。 ※ 細胞内情報伝達に関連したタンパク質に対する抗体を 400 種類,更にその中からアポトーシス,細胞周期に関連したタンパク質に対す る抗体を各 150,60 種類スポットした 3 種類のプリメイド AntibodyArray もあります。詳細はフナコシホームページ( http://www. funakoshi.co.jp/ )から,キーワード「AntibodyArray」で検索して下さい。 特 長 操作法概略 ◆ 酵母による Two - Hybrid System に比べ,短時間( 5 〜 6 時 間 )で結果が得られます。 1. ◆ プロテオーム解析に応用できます。 ◆ 新規にクローニングした遺伝子の機能解析や,異なる組織また は発生段階の細胞におけるタンパク質間相互作用の比較研究な どに特に有用です。 ◆ 高価な機器は不要です。 ◆ 結果の信頼性は高く,偽陽性反応の出現を低く押えることがで きます。 ◆ 解析に必要な抗体のみをスポットし,低価格でご利用いただく ことができます。 2. 3. ※ スポットする抗体はヒトタンパク質を抗原に作製してあります が,多くの抗体はマウス,ラットのタンパク質とも交差します。 交差性については,Hypromatrix 社ホームページ ( http://www.hypromatrix.com/support/ )で確認できます。 スポット抗体一覧 4. Signal Transduction ( 400 種類) Cell Cycle (60 種類) 1. 目 的 タ ン パ ク 質 を 含 む 試 料( 細 胞 ラ イ セ ー ト な ど ) と Apoptosis (150 種類) AntibodyArray をインキュベートする。AntibodyArray のメンブ レンにスポットされた各抗体に対するタンパク質が捕捉され る。 AntibodyArray にスポットする抗体の種類 2. メンブレンに捕捉されたタンパク質と相互作用のあるタンパク 質が複合体を形成する( 相互作用解析の場合 )。 ※ 各アレイメンブレンにスポットする抗体の種類については,フ 3. 目的タンパク質と複合体を形成しているタンパク質に対する抗 ナコシホームページ( http://www.funakoshi.co.jp/ )をご覧 体( あらかじめ標識しておく )を用いて,発色または化学発 下さい。 光により検出する。AntibodyArray に捕捉されたタンパク質の ※ 検出用抗体は別途ご用意いただき,あらかじめ標識する必要が あります。 チロシンリン酸化の有無を検出する場合には,あらかじめ標識 した抗ホスフォチロシン抗体( #HM2040 )を用いる。 4. スポットの位置より,目的タンパク質と相互作用のあるタンパ 価 ク質の種類を同定する。または,リン酸化されているタンパク 格 質を検出する。 ● 基本料金����������������������������������� ¥ 4,000 / 枚 ● 抗体 1 種類当たり������������������������������� ¥ 1,000 例 抗体を 80 種類選択した場合 ¥ 4,000 +¥ 1,000 × 80 種類 = ¥ 84,000 ご注文方法 フナコシホームページ ( http://www.funakoshi.co.jp/download/ ) に掲載の専用注文書に必要事項をご記入の上,販売店担当者へお 渡し下さい。 16 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 抗サイトカイン抗体アレイ作製受託サービス 種々のヒト・マウスのサイトカインに対する抗体から,ご希望の抗体のみをアレイメンブレンにスポットする Cytokine Antibody Array の作製を承ります。 特 長 ご注文方法 ◆ ヒト約 232 種類,マウス約 108 種類のサイトカインに対する 抗 体 か ら, 動 物 種 ご と に ご 希 望 の 抗 体 を お 選 び い た だ き, 1. フナコシホームページ( http://www.funakoshi.co.jp/ )に掲 載されている RayBiotech 社 カスタム Antibody Array 抗体リ ストにてご希望の抗体をご確認下さい。 Antibody Array を作製します。 ◆ 試料中の各サイトカインをメンブレン上の抗体で捕捉し,更に 2. フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ( http://www.funakoshi.co.jp/ ビオチン標識サイトカイン抗体混合液,HRP 標識ストレプト download/ )に掲載の専用注文書に必要事項をご記入の上,販 アビジンを用いて,化学発光で検出します。 ◆ 多数のサイトカインを同時に測定できます。 売店担当者へお渡し下さい。 ※ ヒトとマウスを組み合わせてのご注文はお受けできません。 ◆ 4 〜 6 時間の操作で検出できます。 ◆ ELISA に比べ幅広い検出範囲を有します。 格 スポットする抗体の数とメンブレンの枚数に応じて下記の価格 キット内容 で承ります。 ● Custom cytokine array membrane ● Wash buffer ● Biotin - conjugated anti - cytokine ● Detection buffer ● HRP - conjugated streptavidin ● 8 well plate ● Blocking buffer ● Cell lysis buffer スポットする抗体の例 ■ Human 6Ckine B2M CD14 Dkk - 4 ErbB3 IL - 2 R α IL - 11 Insulin MIP - 1 γ MMP - 9 P-selectin SAA TIMP-3 価 ACE-2 Activin A BCAM BMP-5 CD27 CRP E - Cadherin Endoglin (CD105) Fas / TNFRSF6 Fcr R Ⅱ IL - 2 R γ IL - 9 IL - 12 IL - 17B I-TAC / CXCL11 Leptin R MMP - 1 MMP - 2 MMP - 10 PAI - 1 RAGE RANK SDF - 1b Siglec - 5 TPO TREM-1 Adipsin ANGPTL4 Cardiotrophin - 1 Cathepsin S DAN Dkk - 1 Endostatin EPO R Growth Hormone HCC - 1 IL - 9 R IL - 10 R α IL - 18 IL - 28A MICA MICB MMP - 3 MMP - 8 PDGF - AA PF4 RANKL (TRANCE) Resistin TIMP - 1 TIMP - 2 VEGI XEDAR ■ Human( #AAH-CUST ) スポットする抗体の種類 10 種類以下 11 〜 20 種類 21 〜 30 種類 10 Array Membranes ¥ 181,000 ¥ 252,000 ¥ 337,000 20 Array Membranes ¥ 262,000 ¥ 374,000 ¥ 508,000 30 Array Membranes ¥ 351,000 ¥ 508,000 ¥ 696,000 40 Array Membranes ¥ 445,000 ¥ 649,000 ¥ 893,000 ■ Mouse( #AAM-CUST ) スポットする抗体の種類 10 種類以下 11 〜 20 種類 21 〜 30 種類 10 Array Membranes ¥ 195,000 ¥ 273,000 ¥ 366,000 20 Array Membranes ¥ 284,000 ¥ 405,000 ¥ 557,000 30 Array Membranes ¥ 382,000 ¥ 555,000 ¥ 763,000 40 Array Membranes ¥ 485,000 ¥ 710,000 ¥ 978,000 ※ 大容量( 40 Array Membrane 以上,30 種以上の抗体数 )に ついても取り扱っています。詳細はお問い合わせ下さい。 ※ ラット用 Cytokine Antibody Array の作製も承ります。詳細は お問い合わせ下さい。 ■ Mouse bFGF CD40 DPP Ⅳ E - Selectin Fas Fc γ R Ⅱ B Flt - 3 Ligand GITR HGFR ICAM - 1 IGF - Ⅰ IGFBP - 2 IL - 7 IL - 11 IL - 12 p40 IL - 15 IL - 17BR IL - 21 L - Selectin MDC Resistin MMP - 2 MMP - 3 Osteopontin Pro - MMP - 9 Thymus CK - 1 TPO TSLP SDF - 1 α Shh - N VEGF - D VEGFR 1 VEGFR 2 VEGFR 3 ※ 上記以外にも多種類の因子に対する抗体からお選びいただけま す。 http://www.funakoshi.co.jp/ ガラススライド抗体アレイおよび Quantibody Array も作製承ります メンブレンタイプよりも少量の試料で解析できるガラススラ イ ド タ イ プ の 抗 体 ア レ イ お よ び, 定 量 的 な 解 析 が で き る Quantibody Array についても作製を承ります。 ※ いずれのアレイも検出には蛍光スキャナーが必要です。 ※ 詳細はお問い合わせ下さい。 フナコシ受託わーるど 2009-2010 17 プロテオミクス・タンパク質発現 2 プロテオミクス・タンパク質発現 2 ウエスタンブロッティング受託サービス 組織試料の調製から,電気泳動,検出までのウエスタンブロッティングの一連の作業を行う受託サービスです。 用 途 解析例 ● 目的タンパク質の臓器別での発現の確認 1 ● 目的タンパク質の発現量変化の確認(半定量) ● 抗体のウエスタンブロッティングでの適用確認 仕 :90W × 83H mm ● 電気泳動法 :SDS-PAGE 出 法 :化学発光 → X 線フイルムに感光 ●転 写 法 :セミドライブロッティング 4 5 6 7 8 9 10 正常マウス( C57BL/6 ),8 週齢の各組織由来全タンパク質 50 μg を用いてウエ スタンブロッティングを行った。 Lane 1:脳,Lane 2:心臓,Lane 3:胃,Lane 4:肝臓,Lane 5:脾臓, Lane 6:肺,Lane 7:腎臓,Lane 8:膵臓,Lane 9:小腸,Lane 10:大腸 ● 試料ロード数:~ 13(試料数によりお見積りします) ●検 3 29kDa 様 ● ゲルサイズ 2 納 品 ● 画像ファイル ※ 試料(凍結組織または調製済み試料)および一次抗体に関して ● X 線フイルム は,ご用意下さい。 ※ ジェノスタッフ株式会社技術担当者がご依頼先まで伺い,解剖 をする出張サービスも承ります。 ※ 正常マウス組織の試料調製からご依頼の場合,ジェノスタッフ 株式会社でマウスをご用意いたします。 ※ 検出を行う目的タンパク質の分子量は 150 kDa 以下となりま ご注文方法/価格 ※ 秘密保持契約も可能です。詳細はお問い合わせ下さい。 ※ 納期,価格はその都度お見積りいたします。 す。 ※ 目的タンパク質および一次抗体に関する情報をお知らせ下さ い。 18 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 アミノ酸組成分析・キラル分析 受託サービス エナンチオマーラベリング法(ELAB)で,含有アミノ酸の絶 対量の定量を行います。 アミノ酸単独またはアミノ酸誘導体単独の光学 純度の検定 キラル固定相上でのキャピラリーガスクロマトグラフィーに よって,すべてのタンパク質に由来するアミノ酸のエナンチオ 分析は 2 回行い,2 回目は標準アミノ酸と一緒に分析します。 マーを分離します。さらにこの方法を用いてすべての非タンパク ご提供するデータは加水分解後の DL 分析値です。ただし,加水 質構成アミノ酸やほとんどの N - メチルアミノ酸に関して分離解 分解中に起きる微量のラセミ化に関してはその数値も含まれてい 析が可能です。イソロイシン,スレオニン,またはシステインの ます。 ように一つ以上のキラル中心をもつアミノ酸はすべての光学鏡像 ◆ 必要な試料量:2 mg 体に分離できます。必要な脱保護も行いますが,Acm, Boc, Bzl, ◆ 提供する結果:光 学純度(DL 含量),アミノ酸含有量(mg/g, Acetyl 化アミノ酸では脱保護は不要です。GC-MS の利用によっ μmol/g),含まれるアミノ酸の残基数,ペプチ て精度は増大します。 ド含有量 ◆ 必要な試料量:1 mg ◆ 提供する結果:0.1%までの光学異性体の測定値 , LOQ(定量 限界) レジン結合アミノ酸の分析 合成のためのレジンのキャパシティを定量します。 ◆ 必要な試料量: 4 mg ◆ 提供する結果:レジン に 保 持 さ れ て い る ア ミ ノ 酸 量( m g / g , 追加定性分析(準定量分析) トレース量の予測外または合成時に使用していないはずのアミ ノ酸コンタミネーションの解析(準定量分析)を行います。 μ mol/g) Ala, Val, Gly, Thr, Ile, Pro, Leu, Ser, Asp, Met, Phe, Glu, Tyr, GC-MS を用いたペプチド光学純度の精密検定 重水素塩酸(6N D2O/DCl)による加水分解でラセミ化体の正 Lys, Arg, Trp のアミノ酸の検出限界は 0.3%です。また,Cys の 検出限界は 2%です。 ◆ 提供する結果:アミノ酸コンタミネーションの解析結果 確な定量を行います。アミノ酸は重水素塩酸により誘導体化され, 重水素交換中にラセミ化が起こります。MS スペクトルを用いる ことにより,ペプチド中に最初から存在する D- アミノ酸の割合が 計算値で表されます。この方法の定量限界は光学異性体の 0.1%, 追加定量分析 トレース量の予測外または合成時に使用していないはずのアミ 標準偏差は 0.1%です。 ノ酸コンタミネーションの定量分析を,試料中の疑わしいアミノ ◆ 必要な試料量:2 mg 酸をエナンチオマーラベリング法(ELAB)により測定します。 ◆ 提供する結果:ペプチド構成アミノ酸の正確な光学純度(加水 この分析の標準偏差は± 10%です。 分解中のラセミ化を除く) ◆ 必要な試料量:1 mg(光学純度測定とは別に) ◆ 提供する結果:アミノ酸含有量(mg/g, μmol/g) 価 格 [ メーカー:HPL] 商品コード サービス名 価格(¥) HCDL-01 アミノ酸組成分析,定量分析と DL 分析(GLP 準拠) 基本料金/ 5 アミノ酸まで 93,000 加算料金/ 6 アミノ酸目から(1 アミノ酸当たり) 5,000 HCDL-02 レジン結合アミノ酸の分析 DL 分析含む 63,000 DL 分析なし 47,000 HCDL-03 GC-MS を用いたペプチド光学純度の精密検定 基本料金/ 1 アミノ酸のみ 78,000 加算料金/ 2 アミノ酸目から(1 アミノ酸当たり) 19,000 HCDL-04 アミノ酸単独またはアミノ酸誘導体単独の光学純度の検定 アミノ酸 37,000 アミノ酸誘導体 40,000 レジン結合アミノ酸 45,000 GC-MS 分析 78,000 HCDL-05 追加定性分析 10,000 * HCDL-06 追加定量分析 42,000 ※ 納期は 10 ~ 20 日(営業日)です。 *所定のアミノ酸以外にアミノ酸が検出されなかった場合の料金 です。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 19 プロテオミクス・タンパク質発現 アミノ酸組成分析,定量分析と DL 分析 (GLP 準拠) 2 プロテオミクス・タンパク質発現 2 ペプチドシークエンスサービス ご用意いただく試料 価 ● 必要試料量:10 pmol 以上 ● 試料形態:転写済み PVDF メンブレンまたは溶液(脱塩済み) 格 基本料金 1 試料(5 残基まで)・・・・・・・・・・・¥36,000 6 残基以降,1 残基ごとに追加料金・・・・・¥2,500 ※ N 末端ブロックなどで読めない場合も 5 残基までデータをとり ます。また,ご相談の上,酵素分解法などで対応いたします。 オプション料金 脱塩,濃縮(ProSorb による)・・・・・・・¥15,000 ※ システイン残基検出(還元アルキル化),ペプチドマップ(クリー ブランド法,HPLC)も承ります。 ※ 試料の状態,実験の目的によって作業が異なります。 ※ 詳細についてはお問い合わせ下さい。 アミノ酸配列分析受託サービス タンパク質の N 末端からのアミノ酸配列分析を微量エドマン分解によって行います。 ※ 試料の精製,純度の検定は別契約・別料金です。 10 残基以内 25 残基以内 必要試料量* 約 10 pmol ~ 約 20 pmol ~ 基本料金(1 試料当たり) ¥50,000 ¥80,000 通常納期(営業日) ~5 日 ~ 10 日 * より正確な値を得るための理想的な条件です。提出していただく試料は,レジンを除き凍結乾燥または乾燥(乾固)した状態のものを お願いします。それ以外はご相談に応じますので,お問い合わせ下さい。 20 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 哺乳類のアミノ酸配列データベース Mammalian-PERFECT MS などのデータを同定する際に用いる EST データベースと比較して,データベースの検索時間が劇的に短縮できます。 特 長 配列情報 ◆ Mammalian-PERFECT に格納されているコンセンサス配列は, ● Consensus Sequence(assembled EST) EST に比べて配列長が圧倒的に長いため,データベース検索 ● Genome Refined Consensus Sequence の際にタンパク質の同定精度が上がります。 ● VTS(Virtual Transcribed Sequence) ◆ 独自の手法(Genome Refined Consensus)により,コンセン サス配列の信頼性を極限まで向上させています。 ◆ Mammalian-PERFECT に格納されている仮想タンパク質の予 測配列(VTS:Virtual Transcribed Sequence)は,EST では 検索しにくい低発現な遺伝子および未知遺伝子などへの手がか ● 付属サービス:Nr(NCBI non-redundant タンパク質データベー ス)Human, Mouse, Rat, Cow に分類済み。 ● NCBI Nr +コンセンサス配列+仮想アミノ酸配列(既知未知候 補のプール)から最適なアミノ酸配列を同定できます。 ※「Mammalian-PERFECT」のご利用イメージは,タンパク質同 定の検索エンジンをインハウスで導入されていることを想定し りとなります。 ◆ NCBI Nr(既知タンパク質)+コンセンサス配列(発現した ています。 mRNA 断片)+仮想タンパク質配列(低発現・時期特異的)の 配列プールから,最適な候補アミノ酸配列を同定できます。 ◆ メジャーなタンパク質同定検索エンジンに簡単にセットアップ 価 格 してご利用になれます。 ◆ Multi-Fasta file で DVD-ROM に収めご提供します。データ更 新は 4 回/年です。 価格 納品形態 データ更新頻度 対応生物種 摘要 * 企業・営利団体 にご所属の場合 ¥1,500,000 大学・官公庁 にご所属の場合 ¥600,000 DVD-ROM 4 回/年 Human, Mouse, Rat 年間ライセンス *価格は 1 年間のデータ使用料となります。 ※購入(契約)後 1 年経過し,継続して使用する場合には,そ の時点で上記の年間使用料が再度必要となります。 発現ベクター構築受託サービス 組換え体タンパク質作製受託サービス 発現確認 発現ベクター構築 価 格:¥160,000 ゲノム DNA およびベクターを受領後,以下の作業を行います。 価 ◆ プライマー設計・合成 ◆ コロニーのピックアップ ◆ PCR 後,アガロースゲル電気泳動にてサイズ確認 ◆ 4 ml 少量培養(IPTG 発現誘導) ◆ クローニング ◆ 精製/ SDS-PAGE(可溶性・不溶性確認) ・PCR 産物,ベクター DNA を制限酵素で切断 格:¥80,000 ◆ 精製プラスミド DNA を BL21(DE3)に形質転換 ※ オプションとして,至適発現条件の検討も承ります。 ・ライゲーションおよび形質転換(宿主 E. coli :XL1 blue) ・プラスミド DNA 精製後,アガロースゲル電気泳動にてサイ ズを確認 大量培養 価 ◆ シークエンシング ・インサート両端のみワンパス解析 ※ 精製プラスミド DNA とシークエンス解析データを納品いたし ます。 格:¥250,000 ◆ 3L スケールで培養し,Ni-NTA 精製を行います。 ※ オプションとして,イオン交換カラムや,ハイドロキシアパタ イトカラムでの精製も承ります。 ※ 試料によって対応できなかった場合にも,作業内容により料金を申し受ける場合があります。 ※ 作製した組換え体タンパク質を抗原とする抗体作製も承ります。各種オプションについての詳細はお問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 21 プロテオミクス・タンパク質発現 2 Mammalian-PERFECT は,リダンダンシーを可能な限り抑えたヒト,マウスおよびラットのアミノ酸配列データベースです。MS/ プロテオミクス・タンパク質発現 2 タンパク質発現受託サービス cDNA クローニングから組換え体タンパク質発現ベクターの構築,タンパク質発現,精製までトータルサービスをご提供いたします。 特 長 ◆ 発現ベクターのカスタマー(オリジナル)設計・精製も承ります。 ◆ 膜タンパク質の発現や分画も豊富な実績があります。 ◆ 目的タンパク質のご使用用途に合わせて宿主(E. coli , 酵母, ◆ 活性のあるタンパク質や構造解析が可能なタンパク質を納品い 昆虫細胞,動物細胞)を選択します。 たします。 ◆ 新規クローン,または発現実績のない遺伝子については E. coli , 酵母,昆虫細胞,および動物培養細胞と並列でトライ アル培養し,最適な発現系を選択します。 価 格 一過性発現・精製 受託項目 詳 細 価 格 納 期 RNA(ヒト・マウス・ラット他) 1 万円/試料 14 日 cDNA 合成 1.3 万円/回 (Primer 発注を含む) Gene Pick Up 発現スクリーニング(RT-PCR)[Primer 別途必要] お問い合わせ下さい シークエンス 30 円/ bp × 2 Tag(GST, His, MBP, FLAG, Myc, T7 等),シグナル , リンカー , プロテアーゼ切断 部位等,自由自在に構築できます。当社のドライ部門のモチーフ検索・ホモロジー検 15 万円~ 10 日 発現プラスミド構築 索等を参考にした,効率的な発現設計が可能です。 シークエンス 30 円/ bp × 2 トライアル 25 万円~ 1 週間~ E. coli 本培養 8 万円+ 3.5 万円/ L ~ 1 ~ 2 週間 トライアル 25 万円~ 酵母 お問い合わせ下さい 本培養 8 万円+ 7 万円/ L ~ 培 養 トライアル 30 万円~ 1 か月 SF9, SF21 本培養 8 万円+ 8 万円/ L ~ 1 か月 トライアル お問い合わせ下さい 1 か月 COS1, COS7, CHO, HEK293 本培養 お問い合わせ下さい 1 か月 アフィニティークロマトグラフィー 15 万円/ L ~ イオン交換クロマトグラフィー 25 万円/ L ~ 精 製 お問い合わせ下さい ゲルろ過クロマトグラフィー 30 万円/ L ~ 透析 8 万円/ L ~ 濃度測定 1 万円/回 測 定 SDS-PAGE 3 万円/回 上記と並列実施 ウエスタンブロッティング 5 万円/回 ※ ご依頼いただく試験の開始から終了までの項目を自由に選択いただけます。 安定株樹立 安定株樹立 CHO, COS, HEK293 膜タンパク質の安定株作製 価 格 130 万円 ~ 別途お見積り 納 期 2 か月 2 か月 ※ 大量の遺伝子についてご依頼の場合には大幅に値引きをいたします。詳細はお問い合わせ下さい。 ※ 予定の結果が出なかった項目につきましては,必要経費として見積り提示価格の半額を申し受けます。 ※ ご提供いただく情報の詳細は,フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)をご覧いただくか,お問い合わせ下さい。 ※ 昆虫細胞系で発現させた納品タンパク質は,「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律(通称:カル タヘナ法)」使用規制対象となりますので,ご使用に際しては規制に則し,適切にお取り扱い下さい。 22 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 タンパク質産生受託サービス 各種発現系(E.coli ,枯草菌,酵母,昆虫細胞(Sf9,Tn5 など)*,哺乳動物細胞(CHO,HEK293 など))で目的遺伝子の発現を行 う受託サービスです。 * 昆虫細胞系で発現させた納品タンパク質は,「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律(通称:カル タヘナ法)」使用規制対象となりますので,ご使用に際しては規制に則し,適切にお取り扱い下さい。 タンパク質発現ベクターの構築 価 大量培養 格:¥143,000 〜 ご希望の発現ベクターに目的遺伝子を挿入したクローンを作製 します。 価 格:ご照会下さい 発現確認で得られた高発現クローンを,大型培養装置で培養し ます。 発現の確認 タンパク質精製 価 格:¥215,000 〜 発現ベクターで宿主を形質転換後,小スケールで培養し,その 発現を確認します(SDS-PAGE,ウエスタンブロッティング, 価 格:ご照会下さい 試料をアフィニティ精製,ゲルろ過など,各種精製法により精 製します。 ELISA など)。 ※ ご依頼の内容に応じて個別にお見積りいたします。詳細についてはお問い合わせ下さい。 バキュロウイルスによる遺伝子 発現受託サービス バキュロウイルス(核多角体病ウイルス:AcNPV)を用いて,目的の遺伝子を発現させる遺伝子発現受託サービスです。 米国 Protein Sciences 社との業務提携および TAMUS(Texas A&M 大学)とのライセンス契約により,AcNPV の発現用組換え 型ウイルスを作製できるようになりました。 また,発現用の組換え型ウイルスの作製過程が改良され,従来の方法に比べ短時間・低価格で発現用組換え型ウイルスを作製できるよ うになり,納期・価格等が安定した条件で遺伝子発現受託サービスをお引き受けできるようになりました。 遺伝子発現産物の生産に関してもご相談をお受けいたします。詳細はお問い合わせ下さい。 ※ 本サービスの納品物は「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律(通称:カルタヘナ法)」使用規制 対象となりますので,ご使用に際しては規制に則し,適切にお取り扱い下さい。 各発現系の特長 発現系 AcNPV 宿主細胞 トランスファーベクター トランスファーベクターに組み込み可能な制限酵素サイト 発現産物の大量生産 pPSC 8 Sma Ⅰ, Kpn Ⅰ, Pst Ⅰ, Xba Ⅰ, Nru Ⅰ, Bgl Ⅱ ● 500L の培養タンクでの大量培養および精製 SF +細胞 ●G MP レベルでの生産 pPSC 12 (ヨトウガ由来) Sma Ⅰ, Kpn Ⅰ, Bgl Ⅱ (Protein Sciences 社で受託生産) (分泌シグナル配列挿入済み) ※ サービスの詳細は,フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)をご覧いただくか,お問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 23 プロテオミクス・タンパク質発現 2 プロテオミクス・タンパク質発現 2 昆虫細胞産生タンパク質作製受託サービス Bac Xpress EZ バキュロウイルスによる組換え体タンパク質作製受託サービスです。組換えウイルス純化,増幅,タイター測定を省略し,約 2 週間で 組換え体タンパク質を安価に作製できます。複数の候補遺伝子の発現,発現タンパク質の可溶性/活性の確認に有用です。 ※ 本サービスの納品物は「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律(通称:カルタヘナ法)」使用規制 対象となりますので,ご使用に際しては規制に則し,適切にお取り扱い下さい。 特 長 組換え体タンパク質の作製手順 ◆ 組換えウイルスはコトランスフェクションで得られた上清を使 1. 発現ベクターの作製 お客様ご自身でトランスファーベクター(日本農産工業株式会 用します。 ◆ タンパク質を高発現する expres SF+ 細胞(日本農産工業株式 会社製)を使用します。 社より供与)に目的遺伝子をサブクローニングしていただきま す。 2. コトランスフェクション(約 1 週間) ※ 組換えウイルスのスクリーニングを行っておりません。 ※ 組換え体タンパク質発現の最適化を行っておりません。 ご提供いただいた発現ベクターを用いて,簡易的に組換えウイ ※ 本受託サービスは組換え体タンパク質の発現および活性を保証 するものではありません。 ルス作製を行います。 ※ 組換えウイルス純化,増幅,タイター測定は行いません。 3. 生産(約 1 週間) 100 ml の expres SF+ 細胞培養液にコトランスフェクション上 清を添加し,組換え体タンパク質の発現を行います。 4. 試料・報告書の送付 発現物と簡易報告書をお送りいたします。 5. 発現タンパク質の評価 お客様ご自身で発現タンパク質の評価をしていただきます。 価 M P S A 格 95,000 円( 1 遺伝子当たり) 発現した His タグ融合膜タンパク質の ウエスタンブロッティング像 M:分子量マーカー,P:組換えタンパク質発現区, S:ウイルス非感染区,A:野生型ウイルス感染区 EZ - Plus(オプション) 組換えウイルスの純化・増幅,遺伝子の組込み確認を行います。 多量に精製タンパク質を作製する場合に有用です。 価 格 550,000 円 24 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 トランスジェニックカイコを用いたタンパク質生産 TG カイコ・ネオ受託サービス 繭に組換え体タンパク質を生産するトランスジェニックカイコ「TG カイコ」を作出して,組換え体タンパク質を生産する受託サービス です。カイコは,哺乳類やニワトリ,高等植物などに比べ,組換え体の飼育や生産されたタンパク質における様々なリスクが少なく,環境 への影響が極めて低い,遺伝子組換え生物として優れた生き物です。 ※ 株式会社ネオシルクの設立には知的クラスター創成事業・広島バイオクラスター「トランスジェニックカイコを用いた組換え体タンパ ク質生産系の開発」(広島県産業科学技術研究所)ならびに独立行政法人農業生物資源研究所の研究成果が活用されています。 ※ 記事中の写真は知的クラスター創成事業・広島バイオクラスター「トランスジェニックカイコを用いた組換え体タンパク質生産系の開発」 よりご提供いただきました。 トランスジェニックカイコの繭 サービス内容 1. TG カイコ作製用ベクターの構築………(0.5 か月・15 万円〜) 1)お客様より分譲いただいた cDNA にカイコ絹糸腺での発現 に適した配列を付加します。 2)加工した cDNA を TG カイコ作製用ベクターに組み込みま す。 3)塩基配列を確認します。 4)ベクターを大量調製します。 ー 1cm 光っていないのは野生型カイコの繭 ※ 写真は参考研究データです。 特 2. TG カイコの作出…………………………(3か月・85 万円〜) 1)ベクターを卵に顕微注射し,TG カイコの作出を行います。 2)次世代でスクリーニングを行い,TG カイコを選抜します。 長 3)TG カイコを飼育し,繭(数個〜 10 個)を得ます。 ◆ 卵に外来遺伝子を顕微注射することにより,容易にトランス ジェニックカイコを得ることができます。 ◆ 配合飼料による無菌飼育法が確立されています。 ◆ カイコはライフサイクルが短い(約 45 日)という特性があり 4)繭の一部を用いて,組換え体タンパク質の発現をウエスタ ンブロッティングにより調べます。 3. 組換え体タンパク質の抽出,納品………(0.5 か月・20 万円〜) 1)納品形態(抽出液等)はあらかじめ,ご相談させていただ きます。 ます。 ◆ スケールアップが容易です。 2)数種類の抽出バッファーによる検討を行います。 ◆ 他の組換え体タンパク質生産系に比べ,安価な方法です。 3)最適のバッファーで抽出した組換え体タンパク質を納品し ます。 ◆ ヒトの伝染病を媒介しません。 ※ 発現するタンパク質により繭の個数,タンパク質量は変化しま す。 タンパク質の生産原理 ※ 各項目終了時に報告書を作成します。 カイコが繭を作る際に紡ぐ絹糸は,主にフィブロインとセリシ ※ 組換え体タンパク質の生産が確認されなかった場合,TG カイ ンという2種類のタンパク質から構成されています。フィブロイ コ作製用ベクター構築費用(15 万円〜)および TG カイコ作 ンは糸の本体であり,セリシンはフィブロイン糸同士を接着させ 出実費相当額(20 万円〜)を申し受けます。 る働きがあります。絹糸の断面を観察するとフィブロイン層とそ ※ TG カイコ第 1 世代の繭において組換え体タンパク質の生産が れを取り巻くセリシン層の 2 層からなることがわかります。株式 確認されなかった場合,第 2 世代の幼虫絹糸腺における組換え 会社ネオシルクではセリシン層に大量の組換え体タンパク質を生 体タンパク質生産の有無を確認することが可能です。幼虫絹糸 産するようなトランスジェニックカイコを作製する技術により, 腺において組換え体タンパク質の生産が確認された場合は,絹 組換え体タンパク質の生産を行います。繭をバッファーに浸すこ 糸腺抽出液を調製し,納品します。幼虫絹糸腺において組換え とにより,組換え体タンパク質を抽出します。 体タンパク質の生産が確認されなかった場合,TG カイコ作出 セリシン として,申し受ける実費相当額は 30 万円〜となります。 オプション ・TG カイコの継代飼育 ・第 2 世代以降の TG カイコ繭の生産と組換え体タンパク質の 回収 ・組換え体タンパク質精製 ※ その他大量生産等の詳細については,お問い合わせ下さい。 フィブロイン 絹糸断面図 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 25 プロテオミクス・タンパク質発現 2 プロテオミクス・タンパク質発現 2 哺乳動物細胞によるタンパク質 産生受託サービス 哺乳動物細胞を用いて目的タンパク質を産生させる受託サービスです。発現ベクターの構築,一過性/安定的発現,スケールアップ,精 製,解析の各ステップについて,お客様のご希望に応じてお引き受けいたします。 サービス内容 お客様がご希望の項目について,ご希望の条件でお引き受けいたします。 項 目 内 容 納 品 ・目的配列を挿入した発現ベクター ・目的遺伝子の合成および,発現ベクターへの組み込み(分泌シグナル,タグ, (5 μg) 1. 発現ベクターの構築 GFP の付加) ・シークエンス確認データ ・サブクローニングした遺伝子の定量的 PCR およびシークエンシングによる確認 ・作業手順書 ・哺乳動物細胞(HEK 293,CHO K1)へのベクターの導入 ・発現データ ・一過性発現 ・一過性または安定的発現細胞 2. タンパク質発現系の構築 ・発現タンパク質のウエスタンブロッティングによる確認 ・調製済み培地 ・安定的発現細胞株の樹立 ・タンパク質発現の条件検討および発現条件の最適化 3. スモールスケールでの ・細胞バンクの作製 タンパク質発現 ・スモールスケール発現(1 ~ 5L) ・発現データ ・細胞ペレット ・発現細胞の回収 4. ラージスケールでの ・発現タンパク質のウエスタンブロッティングによる確認 タンパク質発現 ・ラージスケール発現(~ 100L) ・発現タンパク質の精製(アフィニティカラム,イオン交換カラム,ゲルろ過,疎 ・精製タンパク質 水性カラム) 5. 発現タンパク質の精製・ ・QC データ ・タグの除去 解析 ・精製タンパク質の解析(ウエスタンブロッティング,SDS-PAGE,Native-PAGE,・作業手順書 濃度測定,吸光度測定,N 末端シークエンシング,質量分析,NMR,活性測定) ご注文方法/価格 目的タンパク質の遺伝子配列または,NCBI Gene / Protein Accession No. をお知らせ下さい。 ご注文方法,お見積りなどの詳細はお問い合わせ下さい。 タンパク質産生受託サービス バキュロウイルスによるタンパク質発現サービス E. coli によるタンパク質発現サービス バキュロウイルスによるタンパク質発現系の構築受託サービス E. coli を用いたタンパク質発現系の構築受託サービスです。目 です。目的遺伝子のクローニングからウイルス感染,タンパク質 的遺伝子のクローニングから発現ベクターの構築,タンパク質発 発現の最適化,発現タンパク質の特性解析,タンパク質生産/精 現の最適化,発現タンパク質の特性解析,タンパク質生産/精製 製まで,すべての工程を承ります。 まで,すべての工程を承ります。 ※ 納品する発現タンパク質は「遺伝子組換え生物等の使用等の規 制による生物の多様性の確保に関する法律(通称:カルタヘナ ※ 価格,ご注文方法などの詳細はお問い合わせ下さい。 法)」使用規制対象となりますので,ご使用に際しては規制に 則し,適切にお取り扱い下さい。 26 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 新規ポリペプチドタグを用いたタンパク質 産生受託サービス 目的遺伝子を新規ポリペプチドタグとの融合タンパク質として,E.coli で発現させる受託サービスです。本発現法を用いると,活性を保 持した目的タンパク質を容易に回収することが可能です。 ※ 本技術は岡山大学工学部遺伝子機能設計学研究室との共同研究によるものです。 新規ポリペプチドタグについて 本発現系の流れ E.coli ●グラム陽性土壌細菌 Bacillus thuringiensis は,胞子形成 クリスタル 期に細胞内に巨大なタンパク質凝集体(クリスタル)を 形成/蓄積します(図 1 参照)。本発現法では,このク リスタル中に含まれる Cry 殺虫タンパク質のクリスタル 形成に関与する領域をタグとして用いています(特願 2008-199166)。 目的タンパク質がクリスタルを ●新規ポリペプチドタグ融合タンパク質は,E.coli の菌体 形成し,細胞内に蓄積される。 内でもクリスタルを形成し,通常よりも効率的に大量発 細胞破砕・遠心分離後, 現/蓄積が可能です(図 2 参照)。 沈殿画分を採取する。 単離したクリスタル 図1 B. thuringiensis subsp. sotto T84Al が産生する芽胞とクリスタル アルカリ性バッファー 中で可溶化する。 生物活性を保持したタンパク質 図2 新規ポリペプチドタグを付加した融合タンパクは, を回収できる。 E.coli を宿主とした場合にもクリスタル形成により 大量に発現/蓄積する Lane M:分子量マーカー Lane 1:発現誘導前 特 Lane 2:His タグを利用した B2M の発現 長 Lane 3:新規タグおよび His タグを利用 ◆ 封入体を形成することなく,安定した状態で不溶性タンパク質 した B2M の発現 Lane 4:3の可溶性タンパク質 (クリスタル)の回収が行えます。 Lane 5:3の不溶性タンパク質 ◆ 細胞破砕後にクリスタルを遠心分離等により単離し,アルカリ Lane 6:ニッケルカラム非吸着画分 性バッファー中でインキュベートすることで融合タンパク質は Lane 7:ニッケルカラム吸着画分 可溶化するので,活性を保持した目的タンパク質を容易に回収 することが可能です。 ◆ 宿主への細胞毒性を有するために発現が困難なタンパク質の産 生に,特に有用です。 ◆ タグと目的タンパク質の間にプロテアーゼ認識配列を組み込む ことにより,プロテアーゼ処理によるタグの除去も可能です。 本発現系の実施例 腎機能マーカーとして用いられるβ 2 ミクログロブリン (B2M) を本発現系で産 生した。 N 末端に新規タグおよび His タグの融合タグを連結した B2M( 赤矢印 ) と His タグのみを連結した B2M の発現 ( 青矢印 ) を比較した。その結果,新規 タグを用いることで発現量が5倍以上に上昇した。発現したタンパク質はクリス タル様凝集体を形成しているため,E.coli 菌体内の不溶性画分に局在していた。 凝集体を可溶化およびニッケルカラム精製した結果,85% 以上の純度を有する B2M が調製できた。 ご注文方法 ※ 詳細についてはお問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 27 プロテオミクス・タンパク質発現 2 Ambion Ⓡ siRNA 合成受託サービス Ambion® の siRNA には Silencer ®siRNA と,より抑制効果の高い Silencer ® Select siRNA があります。 遺伝子発現抑制・オリゴ 3 Silencer ®Select siRNA とは ? Silencer ® siRNA とは? Silencer ® Select siRNA は,Ambion® の次世代 siRNA で Silencer ® Pre-designed siRNA は,Ambion® のパートナー す。最新の siRNA デザインの導入,化学修飾,オフターゲッ である Cenix BioScience 社が開発した,優れたアルゴリズ ト 効 果 予 測 ア ル ゴ リ ズ ム の 組 み 合 わ せ に よ り, こ の ム によってデザインされています。このデザインアルゴリ Silencer ® Select siRNA は比類のない抑制効果の安定性,有 ズムにより効果的な siRNA が高い確率で得られ,さらに低 効性,特異性を獲得しました。そのため,不十分な抑制効 濃度でも効果の高い siRNA 配列が得られることが推測され 果による実験の失敗の削減につながり,より安定した正確 ます。最適なターゲット特異性のために,SNP データベー なフェノタイプのデータを得ることができます。 スを含む公開されている遺伝子配列と siRNA 配列の厳格な 比較を行い,アルゴリズムに取り入れています。 カスタム siRNA 合成 カスタムデザイン siRNA 抑制効果を保証 個 々 の siRNA が 培 養 細 胞 で お客様のご要望に合わせ,高 お客様のターゲット遺伝子に すべてのヒト,マウス,ラッ 機 能 することが 検 証 済 みで, 品 質 の カ ス タ ム siRNA 合 成 対する高品質のカスタムデザ ト遺伝子をターゲットにした ターゲット遺伝子の発現を減 サービスを提供します。 イ ン siRNA サ ー ビ ス を 提 供 siRNA です。 少させることが保証されてい します。 ます。 ・Silencer ® Select ・Silencer ® Select Validated siRNA ・Silencer Pre-designed ・Silencer Validated ® siRNA ・ カスタムデザイン ・ カスタム Select siRNA Pre-designed siRNA Silencer ® Select siRNA 合成 ® ・ カスタムデザイン ・ カスタム siRNA 合成 Silencer ® siRNA siRNA Silencer ® Select Pre-designed and Validated siRNA Silencer ® Pre-designed siRNA ●市場で最も高い製品保証 100%(詳細はお問い合わせ下さい) ●保証された抑制効果 ●デザインアルゴリズムの全面刷新により,抑制効果のある配列 ● siRNA のデザイン,検証時間を短縮 予測の精度が 25% 以上も向上 ●最大の効果と特異性を合わせもつデザイン ● 5nM という低濃度で抑制効果を発揮し,他社の siRNA と有効 濃度で比較すると,最高 100 倍の有効性 ● siRNA デ ー タ ベ ー ス で, ヒ ト, マ ウ ス, ラ ッ ト 遺 伝 子 の RefSeq から簡単に検索可能 ●新規の化学修飾により,オフターゲット効果を最高 90% 削減 ●フェノタイプアッセイの結果も,安定性と信頼性が大幅に改善 ●すべての Silencer ® Pre-designed(デザイン済み)siRNA に配 列情報を添付 ●アニールしていない Pre-designed siRNA も提供可能 100 Average % mRNA Remaining ・ RNA DNA Validated siRNA Pre-designed siRNA 28 90 80 D modified(n=40) Q unmodified(n=30) ® Silencer ® Validated siRNA Select(n=30) 70 60 ●抑制効果が保証された検証済み siRNA 50 ●追加料金無しで配列情報を提供 40 30 80% Knockdown 20 10 0 0.03 nM 0.3 nM 3 nM 30 nM siRNA Concentration フナコシ受託わーるど 2009-2010 抑制効果の比較 他社の siRNA と比較して, ® Select siRNA が最も低濃度で抑制効果を 発揮していることがわかる。 ● standard 品と HPLC 精製品の両方で提供可能 ●最大の効果と特異性を合わせもつデザイン ●数百種類のヒト遺伝子に対して提供可能 ●すべての Validated siRNA に配列情報を添付 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 カスタム Select siRNA 合成 ●お手持ちの siRNA 配列に,Silencer Select 化学修飾が可能 ® ●高品質の合成と精製 ●厳密な品質管理 ●フェノタイプアッセイの結果も,安定性と信頼性が大幅に改善 ご注文方法 フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ(http://www.funakoshi.co.jp/ download/)に掲載の専門注文用紙に siRNA 情報を記入し,当社 受託・特注品業務担当まで Fax でお送りいただくか,電子メール ([email protected])に添付して送信して下さい。 ※ Ambion® の siRNA はご注文前に,ユーザー ID の事前登録が必 及び E-mail オーダーシステムの登録用紙」に必要事項をご記 ●高品質合成と精製 入の上,販売店担当者へお渡し下さい。なお,登録用紙はフナ ●配列情報を提供するだけで,合成・精製は Ambion® で実施 コ シ ホ ー ム ペ ー ジ(http://www.funakoshi.co.jp/download/) ●厳密な品質管理 からも入手可能です。 ●目的に応じて,ご希望の精製方法,収量,フォーマットを選択 可能 ●アニ−ル済みも選べ,すぐに利用可能 Pre-designed と Validated siRNA の場合 1. Ambion® ホームページ(http://www.ambion.com/jp/)にアク セ ス し,「siRNA の 検 索 」 を ク リ ッ ク す る か,http://www. ●個々のスプライスバリアントなどの様々なターゲットに対する カスタム siRNA デザイン GeneAssist.jp にアクセスする(ヒトのパスウェイに関連する siRNA の場合)。 2. 遺 伝 子 名,Accession Number, 機 能 ク ラ ス,siRNA ID か ら siRNA を検索する。 ●抑制効果が優れた Silencer ® Select アルゴリズムでデザイン 3. 購入したい siRNA を選択する。 ●他社の siRNA と有効濃度で比較すると,最高 100 倍の有効性 4. 精製グレードやサイズなどを選ぶ。 ●新規の化学修飾により,オフターゲット効果を最高 90% 削減 5. 手順に従って,Fax や e-mail で注文する。 カスタム デザイン Silencer ® siRNA 1. 合成して欲しい siRNA 配列を記入する。 ●個々のスプライスバリアントなどの様々なターゲットに対する 2. 精製グレードやサイズなどを選ぶ。 カスタム siRNA デザイン カスタム siRNA の場合 3. 手順に従って,Fax や e-mail で注文する。 ● Cenix BioScience 社が開発したデザインアルゴリズムで効果 の高い siRNA をデザイン可能 ●カスタムデザインした siRNA は化学合成 siRNA としても,ま た配列情報だけでも供給可能 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 29 ・ RNA DNA カスタムデザイン Silencer ® Select siRNA 3 遺伝子発現抑制・オリゴ カスタム siRNA 合成 要です。ユーザー ID をお持ちでないお客様は,p.31 の「Internet 個人情報の取り扱いについて 3 遺伝子発現抑制・オリゴ ご記入いただいた個人情報は,当社個人情報保護方針に基づき適切に取り扱いを行い,以下 の収集目的の範囲内でのみ利用させていただきます。 ● お客様から請求のあった資料等をお届けするため ● 新しいサービスや製品などの情報をお知らせするため ● 当社の製品やサービスの改良,向上のため ● その他必要に応じてお客様にご連絡を行うため ・ RNA DNA 収集した個人情報は,お客様の同意なしに,第三者に開示,提供,販売,共有等を行うこと はありません(但し配送等のサービスを委託した会社には,適切な管理を徹底した上で,必要 最小限の範囲で,通知する場合があります) 。 但し,以下の場合は関係法令に反しない範囲で,お客様の同意なく個人情報を開示すること があります。 ● 人の生命,健康,財産等の重大な利益を保護するために必要な場合 ● 法令等に基づき開示・提供を要請された場合 ※ 個人情報をご提供いただけない場合は,本サービスをご利用いただけないことがございます。 ※ 秘密保持契約の締結をご希望の際は,下記までお問い合わせ下さい。 個人情報に関するお問い合わせおよび開示・訂正・削除のお申込み先 フナコシ株式会社 総務部 TEL. 03-5684-1611 個人情報相談窓口 FAX 03-5684-1614 e-mail:[email protected] 30 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 遺伝子発現抑制・オリゴ 3 ・ RNA DNA http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 31 siRNA・キメラ型 RNAi 化学合成受託サービス 創薬・診断研究用 siDirect® 遺伝子発現抑制・オリゴ 3 創薬・診断研究用 siDirect® は東京大学 西郷薫教授,程久美子准教授,森下真一教授等の基礎研究成果 1),2),3)に基づき開発された siRNA の配列設計システムです。遺伝子発現抑制効果が高く,非標的遺伝子に対するオフターゲット作用の防止と共に,標的遺伝子の二 次構造,non-coding RNA に対するオフターゲット作用,siRNA の miRNA 様挙動を考慮しており,創薬 ・ 診断研究に適しています。 特 参考文献 長 基礎研究から創薬・診断マーカー探索研究において多くの研究 者を悩ませてきた以下の多様な問題を解決いたします。 1)Yuki Naito, et al., Nucleic Acids Res. , 32 (Web Server issue),W124 ~ W129(2004). 2)Kumiko Ui-Tei, et al., Nucleic Acids Res. , 32, 936 ~ 48 ●細胞実験に 10nM 以上の高濃度 siRNA を用いている (2004). ・ RNA DNA ●非標的遺伝子へのオフターゲット作用が気になる 3)Tomoyuki Yamada, et al., Bioinformatics , 21, 1316 ~ 1324 ●適切なネガティブコントロール配列を選択できない ●バリデーション済み siRNA のオフターゲット作用が分からない ● non-cording RNA への影響は不明である (2005). 4)Kumiko Ui-Tei, et al., Nucleic Acids Res. , Advanced Access Feb. 11(2008). ● siRNA の miRNA 様挙動は考慮できない ●アレル遺伝子,疾患関連遺伝子と正常遺伝子の配列が類似して いて配列設計できない siRNA 配列検索方法 ● siRNA は動物実験・創薬には不適当だ ●網羅的研究に siRNA は高価すぎる ● BLAST では短鎖配列の特許検索はできない 創薬・診断研究用 siDirect®アカデミック版の場合 ● RNAi 実験の方法が分からない ※ 大学・官公庁にご所属の方は,株式会社 RNAi のホームページ 詳 細 は, 株 式 会 社 RNAi の ホ ー ム ペ ー ジ(http://www.rnai. co.jp)をご覧下さい。 (http://www.rnai.co.jp/)から利用者登録をすることによりア カデミック版を無料でご利用いただけます。 ※ 企業・営利団体にご所属の方は,アカデミック版をご利用いた だけません。企業・営利団体向けの創薬・診断研究用 siDirect® 商用版をご利用になる場合は,ライセンス契約を締結していた キメラ型 RNAi キメラ型 RNAi は東京大学 授等の研究成果 4) だく必要があります。商用版には non-cording RNA,miRNA 西郷薫教授,程久美子准教 であり,siRNA の弱点を克服した二本鎖 RNA/DNA です。キメラ型 RNAi は,血中安定性が siRNA に比べ二桁向上(株式会社 RNAi 実験比),代謝産物が天然 物,医薬品とする際の製造コストが半減,特許が成立済み 等の動物実験,創薬に適した特長を有しています。 様オフターゲット,アレル遺伝子のような類似配列の遺伝子抑 制などの高度な機能を実装しています。詳細はお問い合わせ下 さい。 1. siDirect®ホームページ上に標的遺伝子の Accession Number を入力して下さい。“配列取得”ボタンを押して標的遺伝子の 塩基配列を表示させて下さい。 ※ Accession Number が分からない場合には,NCBI ホームペー tagacact 5’- CGCUGGAUACGAAUAGACACU │││││││││││││││││││ CCGCGACCUAUGCUUAUCUGU - 5’ atctgt ジ(http://www.ncbi.nih.gov/)でお調べ下さい。 ※ GenBank に登録されていない未公開の遺伝子については,塩 基配列を直接入力して下さい。 2. オフターゲット検索を行う生物種を選択の上,“設計”ボタン を押して検索して下さい。 3. オフターゲット効果を考慮して選抜した候補配列(検索結果画 キ メ ラ 型 RNAi と は, 上 記 の よ う に siRNA の 一 部 を DNA に 変 え た も の で す。 大 文 字( 黒 ) の 部 分 が 通 常 の siRNA 配列,小文字部分(赤)を DNA に入れ替えるとキ メラ型 RNAi の配列になります。 面上)と候補配列の位置(検索結果画面下)が色別で表示され ます。特異性の高い候補配列は,より濃い色で表示されます。 4. 各候補配列をクリックすると,選択した配列に部分的に一致し た配列を含む遺伝子の一覧が表示されます。 5. 部分的に一致した配列がより少ない候補配列を選択して下さ ※詳細は,株式会社 RNAi のホームページ▶ い。選択方法の詳細については上記参考文献をご参照下さい。 「RNAi 関連情報」▶「キメラ型 siRNA とは」をご参照下 さい。 32 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 siPerfect® siDirect®で設計した配列を基に化学合成した siRNA およびキメラ型 RNAi を,株式会社 RNAi では siPerfect ®と称しています。 仕 様 納 ご注文方法 状:アニーリング済み,水溶液 *シ グ マ ア ル ド リ ッ チ 社 は siRNA 試 薬 合 成 に 関 す る MIT (Massachusetts Institute of Technology)のライセンスを受け ています。 た注文書の Excel ファイルを電子メールに添付して当社受託・特 注品業務担当までお送り下さい。 なお,キメラ型 RNAi を注文される場合には,専用注文書に siDirect®で設計した塩基配列を入力し,「キメラ型 RNAi」と注釈 状:アニーリング済み,凍結乾燥品 して下さい。 ※アミン,ビオチン,蛍光色素,リン酸基で 5' または 3' 末端を 修飾した siRNA の合成も可能です。 価 ※ 専用注文書の電子ファイルに記入例と注文書のシートがありま す。 ※詳細はお問い合わせ下さい。 格 siPerfect® ライブラリ siRNA /キメラ型 RNAi 共通 siPerfect® ライブラリは,株式会社 RNAi が siDirect® を利 用して設計したヒト遺伝子向け高効率 siRNA のセットです。 精製グレード RPC グレード HPLC グレード in vivo グレード 容 量 価格(¥) 10 nmol 15,000 20 nmol 22,500 250 nmol 83,000 400 nmol 160,000 10 nmol 26,750 20 nmol 36,500 80 nmol 64,500 10 nmol 65,000 20 nmol 87,750 80 nmol 143,000 ご注文単位 4 種以上 1 種より 1 製品( 1 プレート)当たり約 80 種類の遺伝子に対する siRNA が含まれており,現在,約 9,000 種類の遺伝子に対 する siRNA を提供しています。 詳細はお問い合わせ下さい。 ご照会下さい siRNA 合成受託サービス 各種精製グレードの siRNA を受託合成します。 ※ 株式会社ジーンデザインの siRNA は,Alnylam 社(米国)とのライセンス契約に基づき,研究開発での利用を目的として日本国内で製 造されます。 特 長 ◆ アニーリング済みの二本鎖 siRNA での納品のため,すぐに実 験に使用できます。 ◆ 脱塩処理は標準で行います。 ◆ LNA(Locked Nucleic Acid)挿入,2'-O -Me・2'-F 等の修飾と いった特殊合成にも対応します。 ◆ in vivo 実験グレードの siRNA の合成も対応可能です。siRNA を合成し,ろ過滅菌後,無菌環境下で凍結乾燥しています。また, エンドトキシン検定済みです。 価 格 精製グレードごとのパッケージ価格です。 グレード 鎖長 (オーバーハングを含む) 保証量 価格 逆相カートリッジ+脱塩 21 ~ 23 mer 20 nmol ¥20,000 HPLC +脱塩 21 ~ 23 mer 5 nmol ¥35,000 ※ 標準ではオーバーハングは dTdT ですが,その他配列のご要望 も承ります。 ※ 特殊合成,大量合成や in vivo 実験グレードの合成については, お問い合わせ下さい。 ※ siRNA 配列デザインサービスも承ります(次項参照)。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 33 ・ RNA DNA 成:林化成株式会社化学合成法 ● 精製法:HPLC 精製法 ●形 をダウンロードし,記入例のシートを参考にして専用注文書の シートに塩基配列,その他の必要事項を入力して下さい。入力し HPLC / in vivo グレード製品 ●合 フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ(http://www.funakoshi.co.jp/ download/)に掲載の専用注文書の電子ファイル(Excel ファイル) 遺伝子発現抑制・オリゴ 成:シグマアルドリッチ社化学合成法* ● 精製法:カラム精製法 ●形 3 約 2 週間 RPC グレード製品 ●合 期 siRNA 配列デザイン受託サービス 遺伝子発現抑制・オリゴ 3 RNA 干渉法に基づく発現抑制を行う場合,ターゲット遺伝子に対して適切な siRNA 配列を選択する必要があります。高精度アルゴリ ズムを有し,RNA 干渉法実験データをフィードバックした配列デザインソフトウェアを用いて,siRNA 配列を高い的中率でデザインし ます。 特 長 価 ◆ 使用するソフトウェアは以下の指標をスコア化しています。 格 1遺伝子に対する配列デザイン:¥35,000 ・ RNA DNA Profile Score 活性のあった siRNA に共通する配列の特徴を表すプロ ファイルを利用しています。siRNA の配列がこのプロ ファイルと一致するほど,活性が期待できます。 ※ 各種オプションについては別途費用を申し受けます。オプショ Load Score 内部エネルギーの偏りをスコア化し,より効果的な配 列を選択します。 ※ ご注文の際には,必ず配列または Accession Number をご指定 GC Score siRNA の GC 含 有 率 が 30% ~ 50% の 時 に siRNA と しての活性は最も高くなります。この GC 含有率をス コア化しています。 Position Score 遺伝子中の位置と活性の高さとの関係をスコア化して います。 ン内容の詳細についてはお問い合わせ下さい。 下さい。遺伝子名のみでご注文いただいた場合,ご希望の遺伝 子と完全に一致しないことがあります。 対象生物種のゲノム配列中における siRNA 配列の特異 Specificity Score 性をスコア化し,オフターゲット効果を最小限に抑え ます。 ◆ 対象遺伝子に対する siRNA 配列の特異性を出すために BLAST 解析を行っています。実験対象生物をご指定下さい(オプショ ン)。 ◆“遺伝子ファミリー中の特定の遺伝子のみをノックダウンした い”などのご要望にも高速サーチエンジンを用いて対応いたし ます(オプション)。 ◆ 複数遺伝子間,またはある遺伝子の複数生物間の共通配列を選 択することも可能です(オプション)。 siRNA 発現ベクター構築受託サービス プラスミド,およびウイルスベクターを用いて細胞内で siRNA を発現する方法は,合成した siRNA を用いる方法よりも扱いが容易で, 恒常的に siRNA を発現可能な安定化細胞株を樹立できるといった利点が挙げられます。また,化学合成した siRNA は使い切ると再合成 する必要がありますが,ベクターの場合は一度構築すれば無制限に使用できるという利便性もあります。 GenScript 社では,siRNA 発現ベクターの構築を承ります。siRNA の配列も GenScript 社ホームページ(http://www.genscript. com/rnai.html)上の siRNA Design Center を利用して設計できるため,簡単に,最小限の費用で RNAi を活用した研究を行えます。 レポーター遺伝子 cGFP(coral GFP)を含むベクターは,蛍光の観察により導入効率の確認もできます。哺乳動物用薬剤耐性遺伝子 を含むベクターは,薬剤選択により安定した細胞株を樹立できます。 34 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 受託内容 目的の遺伝子に対する siRNA 発現ベクターを構築します。お客 価 格 ● 構築用ベクター 様から提供された挿入 DNA 配列情報をもとにオリゴ DNA を合成 ・ Inducible Vector 以外 し,GenScript 社製のベクターへサブクローニングします。その後, (レポーターなし)……………………各¥23,000 シークエンシングにより配列の確認を行います。なお,シークエ (レポーターあり)……………………各¥41,000 ンス情報はベクター納品時に添付されます。 ・ Inducible Vector…………………………………………各¥41,000 配列設計ツール siRNA Design Center(前ページ参照)にある下記のツールを ・ Lentiviral Vector (Mini Prep:4 μg vecter)… ……………………¥92,000 (Maxi Prep:100 μg vecter)………………… ¥115,000 利用して,発現ベクターに挿入する配列を簡便に決定できます。 ・ Lentiviral Vector 以外 ※ 下記ツールをご利用いただくためには GenScript 社のホーム (Mini Prep : 4 μg vector)… ……………………¥78,000 (Maxi Prep : 100 μg vector)………………… ¥101,000 ページ上でユーザー登録が必要です。 siRNA Target Finder ※ 初回ご依頼時の価格は,¥23,000 or ¥41,000(構築用ベク ター)+¥78,000(4 μg vector 構築料)になります。2 回目 以降のご依頼からは構築料¥78,000 のみで承ります。但し 2 Accession Number, Gene ID, cDNA 配列のいずれかを入力する 回目以降のご依頼でも,以前のご依頼と異なるベクターでの構 ことにより,標的配列の候補を表示できます。 築の場合は構築用ベクターの料金を申し受けます。 siRNA Construct Builder GenScript Plasmidic siRNA Expression Vector 発現ベクターと siRNA の配列を指定することにより,発現ベ 哺乳動物細胞内で siRNA を発現させるベクターです。プロモー クターに適した挿入配列を決定できるツールです。shRNA のルー ターと薬剤耐性遺伝子の種類およびレポーターの有無が異なる各 プ配列はあらかじめ設定されていますが,任意の配列に変更する 種製品があります。U6.3 および H1.3 プロモーターは,U6 また ことも可能です。 は H1 プロモーターの上流に CMV エンハンサーが挿入されてお U6 U6 HindⅢ KpnⅠ Asp 718Ⅰ Bam HⅠ HindⅢ SV 40 er mot pro CM V c T7 pRNAT-U6.1/Neo Neomycin (5.1 kb) 0 SV4 T7 FP pRNA-U6.1/Neo 1. siRNA Design Center(前ページ参照)の siRNA Target Finder cin omy Ne 配列設計法 er mot pro G ロールを設計できます。 KpnⅠ ネガティブコントロールを設計するツールです。siRNA の標的 配列を入力することにより,同じ塩基組成のネガティブコント Asp 718Ⅰ り,より高レベルの siRNA の発現を期待できます。 Bam HⅠ siRNA Sequence Scrambler 6.4 kb を利用し,標的遺伝子に対する siRNA の候補配列を検索します。 m pic illin C pU i or m A 塩基以上の相同性のない配列が候補配列として表示されます。 A GC 含量が 30 ~ 60%で,BLAST 検索により他の遺伝子と 17 pic illin C pU i or 2. siRNA Design Center の siRNA Construct Builder で発現ベク ターと 1. で表示された候補配列を指定し,挿入に適した DNA 配列を決定します。 [メーカー:GSC ] 商品コード #SD1201 #SD1211 #SD1202 #SD1212 #SD1207 #SD1550 #SD1561 #SD1203 #SD1213 #SD1204 #SD1214 #SD1208 #SD1552 #SD1563 #SD1231 #SD1261 #SD1264 #SD1232 #SD1262 #SD1265 #SD1233 #SD1263 #SD1266 http://www.funakoshi.co.jp/ ベクター名 プロモーター 薬剤耐性 pRNA-U6.1/Neo ネオマイシン pRNAT-U6.1/Neo U6 pRNA-U6.1/Hygro ハイグロマイシン pRNAT-U6.1/Hygro pRNA-U6.1/Zeo ゼオマイシン ネオマイシン pRNA-U6.3/Neo U6 pRNAT-U6.3/Hygro (enhanced) ハイグロマイシン pRNA-H1.1/Neo ネオマイシン pRNAT-H1.1/Neo H1 pRNA-H1.1/Hygro ハイグロマイシン pRNAT-H1.1/Hygro pRNA-H1.1/Zeo ゼオマイシン ネオマイシン pRNA-H1.3/Neo H1 pRNAT-H1.3/Hygro (enhanced) ハイグロマイシン pRNA-CMV3.1/Neo pRNAT-CMV3.1/Neo ネオマイシン pRNAT-CMV3.2/Neo pRNA-CMV3.1/Hygro pRNAT-CMV3.1/Hygro ハイグロマイシン CMV3 pRNAT-CMV3.2/Hygro pRNA-CMV3.1/Puro pRNAT-CMV3.1/Puro ピューロマイシン pRNAT-CMV3.2/Puro レポーター - cGFP - cGFP - - cGFP - cGFP - cGFP - - cGFP - cGFP - cGFP - cGFP フナコシ受託わーるど 2009-2010 35 ・ RNA DNA siRNA の 標 的 配 列 を 設 計 す る ツ ー ル で す。 目 的 遺 伝 子 の 3 遺伝子発現抑制・オリゴ ● 構築料 GenScript Inducible siRNA Expression Vector H1.2 および H1.4 プロモーターには,H1 プロモーターとテト AdEasy Adenoviral Vector System( Agilent Technologies 社 ラサイクリンのオペレーター(TetO1)が含まれています。この ( STRATAGENE )製品 )に適合したアデノウイルスシャトルベ ため,テトラサイクリンリプレッサー(TetR)を発現する哺乳動 クターです。アデノウイルスベクターは,分裂細胞,非分裂細胞 物細胞*で,テトラサイクリン,およびテトラサイクリン誘導体 のいずれへも高効率で導入でき,一過性の siRNA 発現に適して のドキシサイクリンによる siRNA の誘導発現を行えます。 います。 * TetR を発現する細胞,または TetR 発現ベクターが必要です。 Invitrogen 社製品のご使用をお勧めします。 RITR ES Kan cGFP CMV Promoter Ori pRNAT-H1.1/Adeno (8.3 kb) H1 Promoter MCS MluⅠ XhoⅠ HindⅢ ・ RNA DNA H1 HindⅢ KpnⅠ Asp 718Ⅰ Bam HⅠ LITR oter rom .2 p Left arm homology region CM V c Prne Ⅰ Right arm homology region G FP [メーカー:GSC ] T7 0 SV4 6.1 kb A m pic illin 商品コード ベクター名 プロモーター 薬剤耐性 レポーター - #SD1209 pRNA-H1.1/Adeno H1 #SD1219 pRNAT-H1.1/Adeno カナマイシン cGFP #SD1229 pRNATin-H1.2/Adeno H1(inducible) Neomycin pRNATin-H1.2/Neo GenScript Lentiviral siRNA Expression Vector i or C pU [メーカー:GSC ] 商品コード #SD1220 #SD1234 #SD1223 #SD1224 #SD1229 #SD1254 #SD1260 ベクター名 プロモーター 薬剤耐性 レポーター pRNAin-H1.2/Neo - pRNAin-H1.2/Shuttle ネオマイシン pRNATin-H1.2/Neo H1 pRNATin-H1.2/Hygro ハイグロマイシン ( inducible ) pRNATin-H1.2/Adeno カナマイシン cGFP pRNATin-H1.4/Retro ハイグロマイシン pRNATin-H1.4/Lenti ネオマイシン ViraPower Lentiviral Expression System( Invitrogen 社製品 ) に適合したレンチウイルス発現ベクターです。分裂細胞,非分裂 細胞,分化した細胞のいずれへも高効率で導入できます。導入し た遺伝子が宿主の染色体に組み込まれるため,長期にわたる siRNA の発現に適しています。 GenScript Adenoviral siRNA Shuttle Vector アデノウイルスシャトルベクターです。Adeno - X Expression System( タカラバイオ株式会社( Clontech )製品 )に適合し ています。アデノウイルスベクターは,分裂細胞,非分裂細胞へ Hin d Ⅲ Kpn Ⅰ Bam H Ⅰ も高効率で導入でき,一過性の siRNA 発現に適しています。 Asp 718 Ⅰ 遺伝子発現抑制・オリゴ 3 GenScript Adenoviral siRNA Expression Vector [メーカー:GSC ] r ote 商品コード ベクター名 #SD1259 pRNAT-U6.2/Lenti #SD1260 pRNATin-H1.4/Lenti PI - Sce Ⅰ( 118 ) SV U6 m Pro 40 T7 pRNA - U6.1 / Shuttle ( 5.1 kb ) Am pi cil lin ベクターのみでもご購入いただけます ! UC i or p [メーカー:GSC ] 商品コード ベクター名 プロモーター 薬剤耐性 レポーター #SD1205 pRNA - U6.1 / Shuttle U6 — #SD1206 pRNA - H1.1 / Shuttle — H1 ネオマイシン cGFP #SD1216 pRNAT - H1.1 / Shuttle H1 — #SD1234 pRNAin - H1.2 / Shuttle ( inducible ) 36 プロモーター 薬剤耐性 レポーター U6 ネオマイシン cGFP H1(inducible) in myc Neo I - Ceu Ⅰ ( 4823 ) フナコシ受託わーるど 2009-2010 GenScript 社 siRNA 発現ベクター構築受託サービスで使用す るベクターのみを単独でご購入いただくことも可能です。また, ホタル(Firefly)由来,またはウミシイタケ(Renilla)由来のル シフェラーゼ遺伝子を抑制できるポジティブコントロール用ベク ターもあります。各ベクターの包装,価格についてはフナコシホー ムページ(http://www.funakoshi.co.jp/)をご確認下さい。なお, ベクター単独およびコントロールベクターをご購入の際も,受託 サービス用の専用注文書を通してご注文下さい。 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 GenScript Retroviral siRNA Expression Vector Retro-X Expression System( タカラバイオ株式会社(Clontech) 製品 )に適合したレトロウイルス発現ベクターです。レトロウイ ご注文方法 フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ(http://www.funakoshi.co.jp/ download/)に掲載の専用注文書に必要事項をご記入の上,販売 ルスベクターは,分裂細胞へ高効率で導入でき,導入した遺伝子 店担当者へお渡し下さい。また,オンラインオーダーも可能です が宿主の染色体に組み込まれるため,長期にわたる siRNA の発 (http://www.funakoshi.co.jp/forms/jutaku_form/order/GSC. 現に適しています。 php)。 CMV/MSV 5' LTR Ampicillin cGFP pRNAT-H1.1/Retro (7.7 kb) IRES Neomycin ColE1 ori MCS SV40 ori & promoter XhoⅠ MluⅠ H1 Promoter 3' LTR [メーカー:GSC ] プロモーター H1 薬剤耐性 ハイグロマイシン H1(inducible) レポーター - ・ RNA DNA 商品コード ベクター名 #SD1241 pRNA-H1.1/Retro #SD1253 pRNAT-H1.4/Retro #SD1254 pRNATin-H1.4/Retro cGFP Morpholino アンチセンス 合成受託サービス モルフォリノアンチセンスオリゴは,従来使用されている S-Oligo などのアンチセンスの問題点(特異性,安定性,配列決定の難しさ など)を克服した,細胞毒性のない,第三世代のアンチセンスです。 モルフォリノアンチセンスオリゴは,従来のアンチセンスの限界を克服し,培養細胞への容易な導入方法が確立されているため,遺伝 学や薬物の標的分子の研究に広く使用されています。更に,最近では,発生にかかわる遺伝子の機能解析の最適なツールとしても用いられ ています。特に,アフリカツメガエル,ゼブラフィッシュ,ウニなどの受精卵にモルフォリノオリゴをマイクロインジェクションで導入す ることにより,標的遺伝子の発現を特異的に阻害でき,その使用例も数多く発表されています*。 * 最新の情報は,GeneTools 社ホームページ(http://www.gene-tools.com/)および Morpholino discussion board(http://morpholinos. yuku.com/)をご参照下さい。 モルフォリノ修飾アンチセンスオリゴ鎖(Morpholino Antisense Oligo) Morpholine 特 Morpholino oligo O 長 ◆ アンチセンスオリゴヌクレオチドを構成しているモルフォリノ O O N H 化合物(図 1 参照)は,ヌクレアーゼ耐性であり,また安定な B T m より少し高い値を示し,安定した結合を形成します(図 2 参照)。 N O Adenine Cytosine Guanine Thymine B N 図 1. Morpholino Oligo の構造 ◆ RNA とのアフィニティが強く,標的 mRNA の二次構造にかか わらず目的の配列に結合するので,容易に有効な配列設計がで きます。 S-DNA 100 ◆ モルフォリノオリゴは高い水溶性のため,調製が容易です。 DNA Morpholino 80 % Denaturation な結合がありません。 P O ◆ モ ル フ ォ リ ノ オ リ ゴ と RNA の T m は, 天 然 DNA と RNA の ◆ モルフォリノアンセンスオリゴはタンパク質に対する非特異的 B N O ためオートクレーブで滅菌することも可能です。 ◆ 高い特異性を有します。 2'-O-Me-RNA 60 40 20 0 50 60 70 80 90 100 Temperature (℃) 図 2. 各ヌクレオチドと RNA のハイブリッドの熱安定性 http://www.funakoshi.co.jp/ 3 遺伝子発現抑制・オリゴ SV40 Promoter フナコシ受託わーるど 2009-2010 37 標的配列設計 1 タンパク質の翻訳を阻害する場合 2 mRNA のスプライシングを阻害する場合 スプライシングを阻害する場合に標的配列となる領域 翻訳を阻害する場合に標的配列となる領域 遺伝子発現抑制・オリゴ 3 Exon-intron targets(splice donor) E1I1 E2I2 標的領域 start Exon 1 5' Cap 5' Cap I1 Exon 2 I2 Exon 1 Exon 3 I1 Exon 2 ほとんどの場合,標的遺伝子に対して 1 つのモルフォリノオリゴ Exon 3 I1E2 I2E3 Intron-exon targets(splice acceptor) mRNA の 5' キャップ部位から開始コドンの約 25 塩基下流まで の領域を標的配列として,翻訳開始複合体を立体的に阻害します。 I2 E2I2 5' Cap Exon 1 I1 Exon 2 I2 Exon 3 I1E2 をデザインするだけで非常に高い確率でタンパク質の翻訳阻害効 果を示します。 Exon 1 Exon 3 不完全な mRNA ・ RNA DNA 最も効果を期待できる標的配列は,エキソン 2- イントロン 2(E2I2)または,イント ロン 1- エキソン 2(I1E2)の領域で,結果としてエキソン 2 の欠失が起こります。 pre-mRNA のエキソンとイントロンの境界領域を標的配列とし て,スプライシングを阻害し mRNA の成熟を不完全にします。タ ンパク質の翻訳を阻害する場合と比較してより高い濃度のモル フォリノオリゴが必要ですが,ノーザンブロッティングや RTPCR といった RNA レベルでの解析により阻害効果を確認できま す。特定のスプライシングバリアントに対する発現阻害も可能で す。 ※ ご注文の際には,スプライシング阻害を標的とする旨をお知ら せ下さい。 コントロール実験用モルフォリノオリゴ鎖(Control Oligo) 1 汎用コントロールオリゴ鎖(Standard Control) コントロール実験用の 25-mer の Standard Control Morpholino Oligo です。 この配列は,ヘモグロビン異常症であるサラセミアにおける赤血球 β- グロビン pre-mRNA 中 705 番目の部位のスプライシング異常に より生じた配列に由来し,正常細胞では,特異的標的部位や生物学的活性を有していません。 2 カスタムデザインオリゴ鎖(Custom Designed Control) Invert of Antisense カスタム配列のコントロールオリゴ鎖が必要な方は,アンチセンスとは逆配列のオリゴ鎖を使用することをお勧めします。このオリゴ鎖 は,アンチセンスオリゴ鎖と同一長,同一塩基組成であるため比較コントロールに適しています。 Antisense Containing 5 mis-pairs 厳密なコントロール実験を行いたい場合には,以下のように 5 か所にミスマッチ部位の入ったオリゴ鎖を用いることをお勧めします。 ミスマッチコントロールを用いることにより,アンチセンスオリゴ鎖が実際に厳密な配列特異性を示すことが実証されます。 38 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 Sense Complement of Antisense 下記のようなセンス配列オリゴ鎖の作製もいたしますが,GeneTools 社ではモルフォリノアンチセンスのコントロール実験用としては, あまりお勧めしていません。 モルフォリノオリゴ鎖の細胞導入用製品 1 Endo - Porter 両親媒性のペプチドから成るトランスフェクション試薬です。エンドサイトーシスにより,モルフォリノオリゴヌクレオチド* 1 を始め, ペプチド,タンパク質,抗体などを,細胞の代謝レベルや形態を変化させずに導入できます。あらかじめ導入物質と Endo - Porter の複合 体を形成させる必要がなく,各々を直接培地に加えるだけで付着細胞,浮遊細胞のいずれにも導入できます。導入操作後,Endo - Porter の除去や培地交換の必要がなく,Endo - Porter が適切な濃度で培地中に存在する限り,目的物質が導入され続けます。 *1低分子量( M.W.:< 8 kDa )かつ負に荷電した物質の場合は,導入効率が低下します。モルフォリノオリゴヌクレオチドを導入する 際は,未標識またはリサミン標識のものをご使用下さい。また,Endo - Porter による細胞への導入には,10 μM のモルフォリノオリゴ ヌクレオチドを使用することをお勧めします。 2 Scrape Delivery Method モルフォリノオリゴを付着細胞へ導入する方法です。専用の Cell Scraper * 2 で培養用フラスコやディッシュに付着した培養細胞を剥が します。その際に生じた細胞膜上の微小な傷からアンチセンスオリゴを導入する物理的方法です。 *2多くの Cell Scraper が市販されていますが,剥離処理で細胞に重大なダメージを与えるものが少なくありません。GeneTools 社では, 細胞への物理的影響の少ない,良質の製品を提供しております。 価 格 配列設計の有無による価格差はありません ● モルフォリノアンチセンスオリゴの配列設計はホスホロチオエートオリゴ(S-Oligo)等の配列設計とは大きく異なります。可能な限り GeneTools 社に配列設計から依頼されることをお勧めいたします(配列は納品時にお知らせいたします)。 ● 一級アミン(1° Amine),ビオチン,フルオレセイン,リサミンで 3' 末端を標識した標識モルフォリノオリゴ鎖の受託合成も承ります。 Morpholino Antisense Oligo, Custom Designed Control 品 名 Morpholino Antisense Oligo, Classic(18 ~ 25 mers) 包 装 300 nmol 1,000 nmol 価格(¥) 68,000 152,000 標識追加料金 (Morpholino Antisense Oligo, Custom Designed Control 共通) 品 名 1° Amine on 3' Biotin on 3' Fluorescein on 3' Lissamine on 3' 包 装 300 nmol 1,000 nmol 300 nmol 1,000 nmol 300 nmol 1,000 nmol 300 nmol 1,000 nmol 価格(¥) 22,000 34,000 22,000 34,000 22,000 34,000 22,000 34,000 ※ Morpholino Antisense Oligo と 3 種 類 の Custom Designed Control(Invert of Antisense Oligo, Antisense with 5 mis-pairs, Sense Complement of Antisense Oligo)の価格は共通です。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 39 ・ RNA DNA ※ 使用する Endo - Porter の量はロットごとに変動します。製品添付のプロトコルをご覧下さい。 遺伝子発現抑制・オリゴ 3 Standard Control(Negative Control) メーカー 商品コード GTL SC100 SC300 SC1000 遺伝子発現抑制・オリゴ 3 GTL GTL 包 装 価格(¥) 100 nmol 300 nmol 1,000 nmol 17,000 51,000 152,000 SCF100 SCF300 SCF1000 100 nmol 300 nmol 1,000 nmol 26,000 76,000 185,000 SCL100 SCL300 100 nmol 300 nmol 26,000 76,000 品 名 Standard Control Oligo, Classic Standard Control Oligo, Classic, FITC Conjugate Standard Control Oligo, Classic, Lissamine Conjugate ※ Standard Control は,単独でのご購入も可能です。上記商品コードでご注文下さい。 Positive Control メーカー 商品コード GTL DrC GTL XlBC 包 装 100 nmol 100 nmol 価格(¥) 26,000 26,000 品 名 Chordin, Danio rerio , Positive Control Oligo, Classic, FITC Conjugate β-Catenin, Xenopus laevis , Positive Control Oligo, Classic, FITC Conjugate ・ RNA DNA ※ Positive Control は,単独でのご購入も可能です。上記商品コードでご注文下さい。 導入用製品 メーカー 商品コード GTL Endo-P 包 装 1 vial 価格(¥) 34,000 34,000 GTL Endo-PA 1 vial GTL CS 20 pieces 9,000 品 名 Endo-Porter 性状:DMSO 溶液,容量:1 ml Endo-Porter Aqueous DMSO を含まない Endo-Porter。DMSO が導入する細胞に毒性を示す,または分化を誘導する 際に有用。導入効率は Endo-Porter(#Endo-P)と比較して約 30%低下する。性状:水溶液(DMSO フリー),容量:1 ml Cell Scraper( for Scrape Delivery ) ※ 導入用製品は,単独でのご購入も可能です。上記商品コードでご注文下さい。 ご注文方法 フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ(http://www.funakoshi.co.jp/ 4. Order Form A:おまかせ設計では以下の項目にご注意下さい。 download/)に掲載の専用注文書(Order Form A:おまかせ設計 ● GenBank または EMBL の Accession number が分かる場 または B:配列指定)に必要事項をご記入の上,販売店担当者に 合は,該当する Number をご記入下さい。その際,ご指定の お渡し下さい。 Accession number の塩基配列情報に mRNA の翻訳開始点 ※ Morpholino アンチセンスの配列設計は,ホスホロチオエートオ 上流の配列情報が含まれていることをご確認下さい。 リゴ(S-Oligo)等の配列設計とは大きく異なります。配列設 計のための Targeting Guideline を必ずご参照下さい。 ● 未 公 開 の 遺 伝 子 配 列 を 標 的 と す る 場 合 に は, 注 文 書 の Targeting Guideline は フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ(http://www. funakoshi.co.jp/download/)から入手可能です。 “Unpublished sequence”の欄にチェックして下さい。この場 合は,塩基配列を半角英数字のみのテキストファイルとして, ※ GeneTools 社では設計した配列に関して,BLAST 等によるホ モロジー検索は行っていませんのでご注意下さい。 電子メール([email protected])または 3.5 インチ・フロッ ピーディスクでお送り下さい。なお,お預かりしたディスクは ※ 専用注文書にご記入の際は,以下の点にご注意下さい。 お返しできませんのでご了承下さい。 ● 開始コドンはカッコ(ATG)で表示して下さい。また,付帯情 1. Name for Oligo(試料名)は,製品のチューブラベルに表示 報(コーディング領域,エキソン/イントロンの境界,プロモー される名称です。 ターサイト等)がある場合は,ファイル中に英語でご記入下さ お客様が識別しやすい名称を英数字 5 ~ 15 文字で必ずご記入 い(塩基配列中には書き込まないで下さい)。 下さい。 記入する文字は誤読のないように,ブロック体で丁寧に記入し て下さい。 ※ 正確な受注のため,標的遺伝子 1 種類につき 1 枚の注文書に ご記入下さい。 ※ 注文書に必要事項をご記入の上,販売店担当者にお渡し下さい。 2.“Gene Name”には,遺伝子名を英語で,“Species”には, ※ フナコシホームページからのオンラインオーダー(http:// www.funakoshi.co.jp/forms/jutaku_form/form_oligo. その遺伝子が由来する種名を英語で必ずお書き下さい。 php)も可能です。詳細は,お問い合わせ下さい。 3. アンチセンスおよびコントロールには標識の種類を必ず指定し て下さい。 Control Oligo は,p.38 〜 39 を参考に選択して下さい。 40 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 Vivo-Morpholino 合成受託サービス Vivo-Morpholino は in vivo で使用できるモルフォリノアンチセンスオリゴです。組織導入試薬とあらかじめ結合しているため,高い 導入効率を示します。遺伝子のノックダウン解析や,エキソンスキッピングに有用です。 長 配列設計方法 ◆ モルフォリノオリゴに組織導入用試薬 Vivo-Porter を結合した もので,毒性が抑えられています。 ● お 知 ら せ い た だ い た GenBank ま た は EMBL の Accession Number, または遺伝子のシークエンスデータ(5' キャップ部位 ◆ 静脈内注射することで高い導入効果が得られます。また,腹腔 内または標的組織への注射にも適用できます。 〜開始コドンの 25 塩基下流または,エキソンーイントロン境 界領域)により配列を決定し,合成いたします。 ◆ 培養組織にも適用でき,予備実験が可能です。 ● 配列をご指定の上ご注文いただくことも可能ですが,その場合 ◆ Ready-to-use で,ろ過滅菌済みです。 は配列設計のための Targeting Guide Line を必ずご参照下さ ◆ 安定で,室温で保存できます。 い。Targeting Guide Line は フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ(http:// ます。 モロジー検索は行っていませんので,ご注意下さい。 ◆ オプションでエンドトキシンの検査も承ります。 価 www.funakoshi.co.jp/download/)から入手可能です。 ※ GeneTools 社では設計した配列に関して,BLAST 等によるホ 格 ご注文方法 品 名 Vivo-Morpholino (18 ~ 25 mer) 包装 300 nmol 1,000 nmol 6,000 nmol フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ(http://www.funakoshi.co.jp/ 価格(¥) 118,000 269,000 756,000 download/)に掲載の専用注文書に必要事項をご記入の上,販売 担当者にお渡し下さい。 エンドトキシン検査(オプション) 1 test /¥24,000 ※ 詳細はお問い合わせ下さい。 本製品または通常のモルフォリノオリゴを 3 日間マウスに静脈注射した後, 各組織中の mRNA を RT-PCR で検出した。 A:エキソンスキッピングが起きていない mRNA B:エキソンスキッピングされた mRNA 肝臓 本製品 小腸 通常の モルフォリノオリゴ 本製品 結腸 通常の 本製品 モルフォリノオリゴ A─ A─ B─ B─ 脾臓 本製品 肺 通常の モルフォリノオリゴ 本製品 本製品 モルフォリノオリゴ A─ B─ B─ 本製品 胃 通常の モルフォリノオリゴ 本製品 本製品 通常の モルフォリノオリゴ 横隔膜 通常の モルフォリノオリゴ 本製品 通常の モルフォリノオリゴ 脳 通常の 本製品 モルフォリノオリゴ A─ A─ B─ B─ http://www.funakoshi.co.jp/ モルフォリノオリゴ 心臓 通常の A─ 皮膚 筋肉 通常の 通常の モルフォリノオリゴ フナコシ受託わーるど 2009-2010 41 ・ RNA DNA ◆ 300 nmol,1,000 nmol,6,000 nmol の 3 容量の製品があり 遺伝子発現抑制・オリゴ 特 3 miRNA 標的 Morpholino オリゴ 合成受託サービス 遺伝子発現抑制・オリゴ 3 microRNA(miRNA)を標的としたモルフォリノオリゴの設計および合成を行う受託サービスです。RISC に取り込まれる Guide 鎖 を始め,pre-miRNA 配列の 6 種類の部位から標的配列を指定していただき,合成します。 Drosha Dicer 切断部位 切断部位 Guide 鎖 Guide Drosha 標識追加料金 Guide Dicer Guide 品 名 ループ Star 鎖 Star Star Drosha pre-miRNA の構造 Star Dicer Morpholino oligo の標的部位 Guide 鎖は RISC に取り込まれる部分。Sanger Institute miRNA データベースの miRBase では赤字で示される配列。Star 鎖はヘアピン構造の中の Guide 鎖に相補的 な配列。 特 包 装 300 nmol 1,000 nmol 300 nmol 1,000 nmol 300 nmol 1,000 nmol 300 nmol 1,000 nmol 1° Amine on 3′ Biotin on 3′ Fluorescein on 3′ Lissamine on 3′ 価 格(¥) 22,000 34,000 22,000 34,000 22,000 34,000 22,000 34,000 ご注文方法 長 ・ RNA DNA ◆ Guide Drosha, Guide, Guide Dicer, Star Drosha, Star, Star フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ(http://www.funakoshi.co.jp/ download/)に掲載の専用注文書に以下の項目と必要事項をご記 Dicer の部位から標的配列を選択できます。 ◆ miRNA の成熟または活性のいずれかを阻害できます。 入の上,販売店担当者にお渡し下さい。また,オンラインオーダー ◆ 鎖長:25 塩基 も 可 能 で す(http://www.funakoshi.co.jp/forms/jutaku_form/ blocking_oligo_form.php)。 価 1. 以下のいずれかの方法で標的 miRNA を指定して下さい。 格 a)Sanger Institute miRNA デ ー タ ベ ー ス の miRBase(http:// 品 名 miRNA Blocking Morpholino Oligo 包 装 300 nmol 1,000 nmol 価 格(¥) 68,000 152,000 microrna.sanger.ac.uk/sequences/) に 登 録 さ れ て い る ID Number b)未公開の miRNA 配列* * Guide 鎖,Star 鎖も明記して下さい。 2. ご希望の標的部位(Guide Drosha, Guide, Guide Dicer, Star Drosha, Star, Star Dicer から 1 種類)を指定して下さい。 miRNA 発現プロファイリング 受託サービス Luminex® シ ス テ ム と Van tage microRNA Detection Panel(Marligen Biosciences 社 ) を 用 い て, 複 数 の ヒ ト miRNA (microRNA)の発現レベルを一度にプロファイリングする受託サービスです。 ※ Van tage microRNA Detection Panel の詳細については,フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)から,キーワード 「Vantage」で検索して下さい。 検出できる miRNA Oncology Detection Panel 1 を用いた場合 hsa-let-7a hsa-miR-17 hsa-miR-29c * hsa-miR-100 hsa-miR-138 hsa-miR-205 hsa-let-7c hsa-miR-20a hsa-let-7g hsa-miR-21 hsa-miR-30d hsa-miR-106a hsa-miR-141 * hsa-miR-210 hsa-miR-34a hsa-miR-125a-5p hsa-miR-181b hsa-let-7i hsa-miR-212 hsa-miR-23b * hsa-miR-34b * hsa-miR-125b hsa-miR-182 * hsa-miR-218 hsa-miR-9 hsa-miR-24-2 * hsa-miR-93 hsa-miR-132 * hsa-miR-185 hsa-miR-221 hsa-miR-10a hsa-miR-27a * hsa-miR-95 hsa-miR-135a hsa-miR-195 hsa-miR-372 hsa-miR-10b hsa-miR-29a * hsa-miR-96 hsa-miR-136 hsa-miR-199a-5p - hsa-miR-16 hsa-miR-29b-2 * hsa-miR-99a hsa-miR-137 hsa-miR-200b * - ※ 名前の末尾に*が付いている miRNA は,1 つの miRNA 前駆体から 2 つの成熟 miRNA が生じる場合の一方の成熟 miRNA を示してい ます。 ※ すべての miRNA はヒトの配列をもとにデザインしています。他の動物種との相同性については,Marligen Biosciences 社ホームペー ジ(http://www.marligen.com/)からダウンロードできる配列情報をご確認下さい。 ※ ご注文方法,お見積りなどの詳細はお問い合わせ下さい。 42 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 BNA(LNA)修飾オリゴヌクレオチド 合成受託サービス 2', 4'-BNA(2', 4'-Bridged Nucleic Acid, LNA)を挿入したオリゴ DNA/RNA を,様々な合成スケール,各種ラベル化など,研究 用途に合わせて合成いたします。合成した 2', 4'-BNA(LNA)をろ過滅菌後,無菌環境下で凍結乾燥することにより,in vivo での実験 ※ 株式会社ジーンデザインの 2', 4'-BNA(LNA)オリゴヌクレオチドは,Exiqon 社(デンマーク)と株式会社ジーンデザイン(日本)と のライセンス契約に基づき,研究開発での利用を目的として日本国内で製造されます。 BNA(LNA)の特長 BNA(LNA)オリゴヌクレオチドの核酸分解酵素耐性 ◆ 2', 4'-BNA(LNA)は 固定化された N 型立体配座になるため 2', 4'-BNA(LNA)オリゴは天然型オリゴヌクレオチドに比べ て核酸分解酵素への耐性が向上することから,体内での安定性が RNA への結合力が大幅に増加します。 いた実験において,少量でアンチセンス,アンチジーン,siRNA ◆ in vivo において,S- オリゴヌクレオチドよりも高い安全性を などの効果の持続を期待できます。 有するという報告があります。 BNA(LNA)の応用例 ● S- オリゴヌクレオチドに代わるアンチセンスオリゴヌクレオチ ド 1) ● siRNA への応用 ● miRNA 機能阻害 2) ● in situ ハイブリダイゼーションプローブなど 3) 参考文献 1) Wahlestedt C., et al ., Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 97, 5633 〜 5638(2000) 2)Corsten M.F., et al ., Cancer Res ., 67, 8994 〜 9000(2007) 3)Obernosterer G., et al ., Nat. Protoc ., 2, 1508 〜 1514(2007) BNA( Bridged Nucleic Acid ) 天然の核酸(DNA, RNA)中のヌクレオシドは,N 型と S 型, 2 種類のコンフォメーションを取り得る(『ゆらぎ』がある)ため, DNA-DNA, RNA-RNA 間で形成された二本鎖は熱力学的に必ず しも安定しているとは言えません。 2', 4'-BNA(LNA:Locked Nucleic Acid と 同 義)は,糖 の 2' 位と 4' 位を -O-CH2- で架橋しコンフォメーションを N 型に 固定した人工核酸で,天然の核酸にみられる『ゆらぎ』を抑え ることができます。RNA, 一本鎖 DNA, 二本鎖 DNA を分子標的 としたゲノムテクノロジー(アンチセンス法,アンチジーン法, RNAi, デコイ法,遺伝子相同組換え,リボザイム,DNA エンザ イムなど)に有用です。現在,核酸医薬品開発や診断システム 等の共通基盤材料として 2', 4'-BNA(LNA)オリゴヌクレオチ ドの研究開発が進められています。 BNA は大阪大学大学院薬学研究科生物有機化学講座の今西武 教 授 に よ り 開 発 さ れ た 人 工 核 酸 の 総 称 で,こ れ ま で に 2', 4'-BNA(LNA)以外にも約 10 種類の BNA が開発されています。 2', 4'-BNA(LNA)の構造 http://www.funakoshi.co.jp/ 残存オリゴヌクレオチド量(%) 改善される可能性が示唆されています。動物細胞,実験動物を用 ◆ ヌクレアーゼ耐性が向上します。 100 80 天然型オリゴヌク レオチド 60 2', 4'-BNA(LNA) 挿入オリゴヌクレオチド 40 S- オリゴヌクレオチド 20 0 0 5 10 15 酸素反応時間(分) 20 動物実験における BNA(LNA)オリゴヌクレオチドの優位性 脳 α 線条体に S- オリゴヌクレオチドを注入されたラットは明 らかな発熱反応を示し,病理組織像において神経細胞の脱落が見 られるのに対し,2', 4'-BNA(LNA)オリゴヌクレオチドを注入 されたラットでは,このような病理所見が観察されませんでした。 このことから 2', 4'-BNA(LNA)オリゴヌクレオチドは従来の S- オリゴヌクレオチドよりも安全な医薬品候補であると考えられ ます。 価 格 合成量 価格 0.2μmole ¥2,800 1μmole ¥5,600 精製方法 簡易カラム精製 HPLC 精製 簡易カラム精製 HPLC 精製 精製料金 無料 ¥5,000 ¥2,000 ¥10,000 最低保証量 5 OD 2 OD 15 OD 5 OD ※ 価格は 2', 4'-BNA(LNA)1 塩基当たりの価格です。 ※ DNA の合成は 1 塩基当たり¥70 です。 ※ 末端各種修飾,ラージスケール合成, in vivo 実験用グレード(エ ンドトキシン検定済み)にも対応いたします。 天然型 RNA の構造 フナコシ受託わーるど 2009-2010 43 ・ RNA DNA ◆ 固定化された構造により DNA への結合力も増加します。 3 遺伝子発現抑制・オリゴ に最適なオリゴとして供給することもできます。 オリゴ DNA 合成受託サービス 遺伝子発現抑制・オリゴ 3 フナコシならではのサービスとは … 1. 高品質・大量の製品を,迅速発送・納得価格でお求めいただけます。 ・例えば20 mer の場合,ゲルろ過品(10 OD)で3,600 円(送料無料) ・翌日発送です(〜 49 mer) 130 ¥ /base 2. チューブのラベルがデータシートになっています。一目で,塩基配列,塩基長,分子量,重量,モル数,製造年月日等が 判別できます。 3. ゲノムプロジェクトやマイクロアレイなど,大量にオリゴDNA を使用するお客様のニーズに合わせて出荷します。 ※ 50 mer 以上の場合は,精製品をご利用下さい。 非標識品 ・ RNA DNA グレード 精製法 対応鎖長 基本料金/ 1 本 保証 OD260 未精製 ゲルろ過 ~ 49 base 1,000 円 5 カートリッジ精製 6 ~ 100 base 2,500 円 5 PCR 6 ~ 100 base 5,000 円 2 HPLC HPLC 精製* 1 35 ~ 100 base 7,000 円 0.1 PAGE PAGE 精製 *2 * 1 HPLC 分析表付き。 ※ ミックスプローブについては追加料金は不要です。 ※ 大量合成(バルク)は,別途見積りいたします。 ※ ビオチン標識,リン酸化,アミノ化等各種修飾を承ります。対 応可能な修飾の種類,納期および追加料金については,お問い 合わせ下さい。 * 2 未修飾オリゴに関する保証収量です。修飾オリゴおよび特殊 な構造の配列の場合は,保証収量を下回ることがありますの でご了承下さい。 ご注文方法 フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/download/)に掲載の専用注文書の電子ファイルをダウンロードし,塩基配列その 他必要事項を入力して下さい。入力した注文書はプリントアウトして当社受託・特注品業務担当まで Fax でお送りいただくか,電子メー ル([email protected])に注文書の電子ファイルを添付してお送り下さい。 ※ ご注文内容についての秘密は厳守いたします。 ※ 製品の送付先は注文書にご記入下さい。特にご指示がない場合には,ご依頼者へ直送いたします。 ※ 納期についてはお問い合わせ下さい。 プライマー/オリゴ DNA 合成受託サービス Invitrogen 社の高品質かつ低価格のプライマー/オリゴ DNA を最短 1 日で出荷いたします。全国どこでも送料無料です。各種標識/ 修飾も承ります。 価 格 ご注文方法 フナコシホームページのオンラインオーダー(http://www. 基本価格 合成スケール* 1 50 nmol 200 nmol 1 μmol funakoshi.co.jp/node/10494)にてお申し込みいただけます。 精製追加料金 1 塩基当たり の価格 脱塩 カートリッジ精製 HPLC 精製* 2 PAGE 精製 60 円 0 円 800 円 - - 120 円 0 円 800 円 7,000 円 10,000 円 500 円 0 円 3,000 円 12,000 円 12,000 円 ※ 納期についてはお問い合わせ下さい。 * 1 合成スケールは合成開始時の容量です。塩基数,配列等によっ て合成物の容量は変化します。保証値についてはお問い合わ せ下さい。 * 2 HPLC 精製は 50 塩基以下のオリゴ DNA のみ承ります。 ※5' ーアミノ化,リン酸化,3' ービオチン化等各種修飾を承りま す。対応可能な修飾の種類,納期および追加料金については, お問い合わせ下さい。 44 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 部位特異的メチル化検出プローブ ICON プローブ ICON プローブは,全く新しい部位特異的 DNA メチル化検出プローブです。従来の手法に比べて,試料にダメージを与えることなく, 短時間かつわずかな試料量でゲノム中の目的となる位置での DNA メチル化の量的解析などが可能となります。 究によって開発された,部位特異的メチル化検出プローブの名称です。 ※ 株式会社ジーンデザインは京都大学とのライセンス契約を結び,国内で唯一の ICON プローブ製造を行っています。 従来法との比較 ICON 法 解析時間 必要試料量 特 ICON プローブを用いることで,標的のシトシンに反応を絞ることが できる。また,メチルシトシンのみに反応する。 亜硫酸水素塩処理の後,PCR,シーケンシング操作によってメチル化 されたシトシン,非メチル化シトシンはチミンとして検出される。 不規則切断によるゲノム試料の損傷がない 大半のゲノム試料で非特異的損傷が生じる 試料調製から定量的 PCR の結果まで約 3 時間 長時間の加熱反応(一般的に 16 時間)が必要 ゲノム DNA 一般的にゲノム DNA 1 μ g 程度 20 ng 程度 長 ◆ 不規則切断が起こらず,試料 DNA へのダメージが少なくて済 みます。 ◆ 試料調製から定量的 PCR 法で結果が得られるまで,約 3 時間 と非常に短時間です。 ◆ 検出に必要なゲノム DNA は微量(20 ng 程度)です。 ◆ 定量性が高く,従来は困難だった部位特異的なメチル化の量的 解析も可能です。 ICON プローブとは ? ・ RNA DNA 試料の損傷 従来法(バイサルファイト法) 価格/納期 ICON プローブセット 用途 セット内容*1 検出系でリアルタイム PCR を使用する場合 ・センス鎖ターゲットプローブ ・アンチセンス鎖ターゲットプローブ (配列長 20 mer,3' 末端リン酸化修飾) 保証量 各 5 nmol 価格 ¥78,000 納期 受注確認後 10 営業日 * 1 目的のメチル化候補に対して,ICON プローブはセンス鎖用, アンチセンス鎖用の各 1 配列が必要です。 ※ 配列長の変更,LNA 挿入や各種修飾にも対応いたします。 カスタム ICON プローブ LNA * 3 挿入や各種修飾を施したご希望の ICON プローブを作 ICON プローブは標的のメチルシトシンに対してオスミウム錯 体形成を引き起こし,標的 DNA との間にクロスリンク体を生 成する。 ICON プローブは DNA 配列部分(メチル化を調べたい DNA と相補する DNA 断片)と修飾ヌクレオチド部分からなります。 標的配列に対して DNA 配列部分により位置取りされた後,修 飾ヌクレオチドはオスミウムを介してメチルシトシンと結合 し,DNA 鎖間クロスリンク体を形成します。メチル化してい ないシトシンとの間では,この反応の進行は 400 倍以上と極 めて遅くなるため,この反応を使って明確にメチル化を区別で きます。 製します。 用途 保証量 新規アプリケーション開発 5 nmol 〜 価格 ¥28,000 * 2 納期 受注確認後に決定 * 2 価格は修飾ヌクレオチド1か所挿入による ICON プローブ化 の価格です。配列長やその他修飾,保証量を加味した上でお 見積りさせていただきます。 * 3 LNA の詳細は p.43 をご覧下さい。 ※ アプリケーション中に PCR を使用する場合はプローブ配列設 計のポイントが異なります。この場合は上記「ICON プローブ セット」の専用注文書にてお申し込み下さい。 ご注文方法 フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ(http://www.funakoshi.co.jp/ download/)に掲載の専用注文書に必要事項をご記入の上,販売 店担当者へお渡し下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 3 遺伝子発現抑制・オリゴ ※ ICON プローブとは,独立行政法人 理化学研究所 フロンティア研究システム 岡本独立主幹研究ユニットの岡本晃充独立主幹研究員の研 45 QProbe/QPrimer 合成受託サービス 遺伝子発現抑制・オリゴ 3 蛍光消光現象(Quenching phenomenon)を利用した核酸プローブ QProbe/QPrimer の合成を承ります。リアルタイム PCR での プローブまたはプライマーとして使用すれば,簡便に高精度な遺伝子の検出・定量が行えます。 特 応用例 長 ◆ 1 つの蛍光色素を標識した 1 種類のプローブで 1 つの標的遺 伝子を検出できるため,低コストです。 ◆ プローブ配列や PCR の増幅産物の長さに制約を受けにくいた QP 法による 3 種の SNP の迅速同時タイピング 方法 め,プローブのデザインが容易で,実験系の確立が迅速です。 1. ヒトのβ 2AR(β -2-adrenergic receptor)遺伝子,β 3AR(β ◆ 解離曲線解析により,非特異的なシグナルの識別が容易です。 -3-adrenergic receptor) 遺 伝 子 お よ び UCP1(uncoupling ◆ プライマーとして使用した場合,末端が蛍光標識された増幅産 protein 1)遺伝子に存在する 3 か所の SNP を同時にタイピン 物が得られ,T-RFLP 等の多型解析に適用できます。 グするためのプライマーおよび QProbe を設計した。 ・ RNA DNA ◆ 励起/蛍光波長の異なる 4 種類の蛍光標識から選択できます。 ※ プライマー用には 5' 標識品,プローブ用には 3' 標識品または 5' 標識/ 3' リン酸化品をご指定下さい。 2. 設計したプライマーおよび QProbe を用いて,目的 SNP をタ イピングするための反応条件至適化を行った。 結果 ※ 標識する末端の塩基は,必ずシトシンになるように配列して下 さい。 1. それぞれの SNP において,各遺伝子型を明瞭に判別できる条 件を確立した。3 種類の蛍光色素のシグナルがお互いに干渉す ※ QProbe/QPrimer は, 用 途 に よ り 使 用 で き る リ ア ル タ イ ム ることなく,3 種の SNP を同時に判別できた。 PCR 装置および DNA ポリメラーゼに制限があります。詳細 はお問い合わせ下さい。 ※ QProbe によるリアルタイム PCR のデータ解析には,専用解 析ソフトが必要です。QProbe の初回お届け時に無償でご提供 いたします。 ※ 株式会社 J-Bio 21 では,QProbe を使用した SNP 解析受託サー ビスも行っています。詳細は p.64 をご覧下さい。 QProbe/QPrimer による遺伝子の検出・定量 2. 確立した条件を用いて,50 試料の SNP タイピングを行った結 果,十分な再現性が得られた。 β2AR 遺伝子型① β3AR UCP1 遺伝子型② ヘテロ ブランク 3. 50 試料のタイピング結果はすべてシークエンス解析結果と一 致した。 価格(39 mer まで) QProbe を使用した リアルタイム PCR QPrimer を使用した リアルタイム PCR QProbe が PCR 増幅産物に結合した ときの蛍光消光率により定量を行う。 PCR 増幅産物が二本鎖の状態で蛍光 が消光したときの蛍光消光率により 定量を行う。 励起/蛍光(nm) 400/450 500/515 仕 様 ● 合成長:39 mer まで ● 合成量:1 OD 保証 ● HPLC 精製品 520/555 550/580 5' 蛍光標識 3' 蛍光標識 QPrimer-B ¥35,000 QPrimer-G ¥35,000 QPrimer-Y ¥35,000 QPrimer-R ¥25,000 QProbe-B ¥35,000 QProbe-G ¥35,000 QProbe-Y ¥35,000 QProbe-R ¥25,000 5' 蛍光標識 3' リン酸化 [メーカー:JBI] QProbe-BP ¥40,000 QProbe-GP ¥40,000 QProbe-YP ¥40,000 QProbe-RP ¥30,000 ※ 大量スケール合成,40 mer 以上については,お問い合わせ下 さい。 ご注文方法 フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ(http://www.funakoshi.co.jp/ download/)に掲載の専用注文書に必要事項をご記入の上,販売 店担当者へお渡し下さい。 46 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 RNA 合成受託サービス 株式会社ジーンデザインでは,受注から納品までの一貫したシステムで,siRNA 用の短鎖 RNA オリゴマーから,アプタマー等への応 用に適した長鎖 RNA オリゴマーまで様々な RNA オリゴマー合成を,RNase 対策等の徹底した製造管理の下,高品質に行う製造体制を 特 MS 長 ◆合成スケール 0.2 μmol, 1 μmol を標準の合成スケールとして設定しています。 ◆合成できる RNA オリゴマーの鎖長 80 60 合成 RNA 59 塩基 40 M:一本鎖 DNA マーカー 30 標準は~ 60 塩基ですが,60 塩基以上の合成も可能です。 ※ 長鎖 RNA オリゴマーの合成の可否は,配列に依存します。配 列によっては合成が困難な場合もあります。 S:合成 RNA 59 塩基 20 ・ RNA DNA ◆精製グレード 長鎖 RNA オリゴマーの合成例 簡易カラム精製,RP-HPLC 精製をご用意しています。 ※ 大量合成での IEX-HPLC 精製も対応可能です。 ◆特殊合成 各種修飾,2'-F-RNA,2'-O Me-RNA,大量合成など豊富に取り そろえています。 ◆ in vivo グレードでの合成も対応可能 動 物実験等で使用可能な in vivo グレードでの製造も行ってい ます。 価格/納期 合成量 価格 11 ~ 30 塩基 ¥1,200 31 ~ 45 塩基 ¥1,500 11 ~ 60 塩基 ¥3,000 0.2μmol 1μmol 精製方法 簡易カラム精製 RP-HPLC 精製 簡易カラム精製 RP-HPLC 精製 簡易カラム精製 RP-HPLC 精製 精製価格 無料 ¥5,000 無料 ¥5,000 ¥2,000 ¥10,000 納期 3 営業日 5 営業日 4 営業日 6 営業日 7 営業日 8 営業日 最低保証量 5 OD 2 OD 3 OD 1.5 OD 15 OD 5 OD ※ 合成価格は 1 塩基当たりの価格です。 ※ 11 塩基以下は一律 11 塩基分の合成価格になります。 ※ 60 塩基以上の RNA オリゴマーの合成をご希望の場合は,お問い合わせ下さい。 ※ 受注の状況により納期が変動することがあります。 ※ 様々な修飾を行うことが可能ですが,納期は上記一覧とは異なります。 ※ 詳細はお問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ 3 遺伝子発現抑制・オリゴ 整えています。また,様々な修飾を行うことも可能です。 フナコシ受託わーるど 2009-2010 47 植物遺伝子解析受託サービス 株式会社インプランタイノベーションズでは,理化学研究所と共同開発した「植物遺伝子のマッピング用プライマー及びマッピング法」 を基に,植物の遺伝子マッピング,新規遺伝子探索および,お客様のニーズに合わせたオーダーメイド解析を行います。 遺伝子マッピング受託サービス ゲノミクス 4 「遺伝子多型を利用した植物遺伝子の高速マッピング法」を用いて,お手持ちのシロイヌナズナまたはイネの変異体の遺伝子マッピング を行います。異なるエコタイプ(生態型)間における染色体の組換えを利用し,遺伝子多型(SNP)を基にした特異的マーカーを用いた 方法により,変異体の原因遺伝子を短期間,かつ高精度にマッピングすることが可能です。 シロイヌナズナ変異遺伝子高速マッピング イネ変異遺伝子高速マッピング 以下の 3 種類のマッピングサービスがあります。 サービス名 Rough Mapping Semi-Fine Mapping Fine Mapping 染色体決定から遺伝子の絞り込みまで,お客様の様々なご要望 に応じて解析を行います。 SNP 特異的マーカー設定状況 平均 7.5 Mb 間隔に設定 平均 2.7 Mb 間隔に設定 平均 0.2 Mb 間隔に設定 対応可能なエコタイプ(生態型)のラインナップ エコタイプ ジャポニカ インディカ 品 種 ニホンバレ,コシヒカリ,オオチカラ カサラス ご用意いただくもの ご用意いただくもの ● ゲノム DNA:2 μg(40 ng/ μl) ● ゲノム DNA:2 μg(40 ng/ μl) コロンビア×ランズバーグ(変異体×野生型,または野生型× ジャポニカ×インディカ(変異体×野生型,または野生型× 変異体のどちらでも可)の F2 個体のうち,解析したい表現型と 変異体のどちらでも可)の F2 個体のうち,解析したい表現型と 同一の表現型を示した F2 個体の最低 20 個体から抽出したゲノ 同一の表現型を示した F2 個体の最低 20 個体から抽出したゲノ ム DNA をご用意下さい。 ム DNA をご用意下さい。 ※ ゲ ノム DNA の抽出には QIAGEN 社の DNeasy Plant Kit,ま ※ ゲノム DNA の抽出には QIAGEN 社の DNeasy Plant Kit,ま たは同等の純度で調製できるキットを使用して下さい。 たは同等の純度で調製できるキットを使用して下さい。 ※ ゲノム DNA 抽出を含めた受託サービスをご希望のお客様は, お問い合わせ下さい。 ※ ゲノム DNA 抽出を含めた受託サービスをご希望のお客様は, お問い合わせ下さい。 FOX Hunting System ゲノム情報が未解明な植物の有用遺伝子探索を行います。FOX Hunting System とは,Full-length cDNA Over-expressor gene Hunting System の略称で,シロイヌナズナに目的植物の完全長 cDNA を強発現させ,変化を生じた形質転換体から遺伝子を単離する という,ゲノムワイドな有用遺伝子探索技術です。 受託内容 1. FOX アグロライブラリーの作製 2. シロイヌナズナの形質転換 3. ゲノムスケールで目的の機能を持つ遺伝子のスクリーニング 48 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 植物形質転換受託サービス シロイヌナズナ形質転換受託サービス お手持ちのバイナリーベクターをシロイヌナズナ(コロンビア) イネ形質転換受託サービス お手持ちのバイナリーベクターをイネ(ニッポンバレ)へ形質 へ形質転換し,種子を収穫いたします。アグロバクテリウムを 1 転換し,再分化体を作製します。 コンストラクト当たり 14 個体の植物に感染させます。 ※ 本受託サービスでの再分化体とは,イネ(ニッポンバレ)にア シン,PalSelect *2)し,生き残ってきた形質転換体をホルモ 納品/納期 ン処理により,シュート形成および発根させたものを示してい ます。 ● 納品:T1 種子 *2PalSelect についての詳細は,フナコシホームページ(http:// ● 納期:約 2.5 か月 ※ T2 種子や,それ以降の T3, T4 種子収穫,野生型コロンビア以 外のエコタイプをご希望の場合は,別途お問い合わせ下さい。 www.funakoshi.co.jp/)から,キーワード「PalSelect」で検 索して下さい。 納品/納期 トマト形質転換受託サービス お手持ちのバイナリーベクターを Micro-Tom へ形質転換し,再 ● 納品:再分化体を最低 10 *3個体(10 ラインに相当) 分化した幼植物体を作製します。 ● 納期:約 3.5 か月 ※ 本受託サービスでの幼植物体とは,トマト(Micro-Tom)にア *3コンストラクトによってこの数値は変動します。 グロバクテリウムを感染・培養後,薬剤選抜(カナマイシン)し, ※ 上記以降の発育段階をご希望の場合は,別途お問い合わせ下さい。 生き残ってきた形質転換体をホルモン処理により,シュート形 成および発根させたものを示しています。 ご 納品/納期 注 意 納品される T1 種子および再分化体は遺伝子組換え生物に該当します。 ● 納品:幼植物体を最低 10 *1個体(10 ラインに相当) ● 納期:約 4 か月 『遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関す る法律(通称:カルタヘナ法)』(平成十五年法律第九十七号)および、 同法に基づく政省令および告知の中の第二種使用等で定められた条件 *1コンストラクトによってこの数値は変動します。 ※ 上記以降の発育段階(鉢上げ,挿し木作製,種子収穫・精製等) をご希望の場合は,別途お問い合わせ下さい。 で使用して下さい。また納品される T1 種子および再分化体を受領する にあたっては、あらかじめ拡散防止処置等の確認を所属する機関より 受けておく必要があります。 全く新しい植物形質転換選抜マーカー 植物形質転換選抜マーカーセット PalSelect 新発想の植物用形質転換選抜マーカーを含んだベクターと選抜用試薬のセットです。 これまで植物への遺伝子導入に用いられるマーカー遺伝子としては,抗生物質耐性遺伝子が広く用いられていますが,こ れらは微生物由来のため,安全性が問題視されています。また,抗生物質(選抜試薬)による選抜効果が安定しないという 短所があります。 植物形質転換選抜マーカーセット PalSelect は,安全性に配慮した植物由来の新規な除草剤抵抗性遺伝子(変異型 ALS 遺伝子)で,非形質転換体に対しては,確実な除草効果を示し,目的とする形質転換体の選抜が容易に行えます。 除草剤抵抗性遺伝子 T P 除草剤抵抗性遺伝子 T P P 有用遺伝子 T T PalSelect pPALS シリーズ 遺伝子導入 バイナリーベクター 選抜マーカー遺伝子に1点変異型 ALS 遺伝子,選抜薬剤に 植物細胞 除草剤を添加した培地 選抜 再分化 た製品。 PalSelect pSTARA シリーズ 形質転換体 有用遺伝子が導入された 形質転換植物 ピリチオバックナトリウム塩またはピリミノバックを使用し 選抜マーカー遺伝子に2点変異型 ALS 遺伝子,選抜薬剤に :形質転換体 ⇒ 正常に生育・増殖 :非形質転換体 ⇒ 枯死 ビスピリバックナトリウム塩を使用した製品。 ※ 製品の詳細については,フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)から,キーワード「PalSelect」で検索していた だくか,お問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 49 4 ゲノミクス グロバクテリウムを感染・培養の後,薬剤選抜(ハイグロマイ 微生物同定試験受託サービス 三井農林株式会社では,これまで培ってきた微生物管理技術を基に開発した独自のデータベースを用いて,細菌,カビ,酵母を対象と する微生物同定試験の受託サービスを承ります。 試験項目内容 ゲノミクス 4 細 菌 ◆ 500 bp 部分シークエンス解読 細菌 カビ・酵母 染色体 DNA 染色体 DNA 16S rRNA 遺伝子の 5' 側 約 500 bp の 塩基配列を決定 28S rRNA 遺伝子 の D2 領域 約 300 bp の 塩基配列を決定 塩基配列の相同性検索 塩基配列の相同性検索 同定 同定 16S rRNA 遺伝子の 5' 末端側,約 500 bp の塩基配列を決定 し,属・種の簡易同定(グルーピング)を行います。 ◆ 16S rRNA 遺伝子シークエンス解読 16S rRNA 遺伝子のほぼ全領域約 1,500 bp の塩基配列を決定 し,属・種の簡易同定(グルーピング)を行います。 ◆ 系統解析 16S rRNA 遺伝子の塩基配列に基づき,Clustal W(マルチプ ルアライメントソフト)を用いて系統樹を作成します。 ◆ 形態観察(写真撮影) 顕微鏡による形態観察を行い,拡大写真(A4 サイズ)を撮影 します。 ◆ リボタイピング解析 細菌の染色体 DNA 上に存在するリボソーム RNA をコードす る領域の多型性を利用し,フィンガープリント解析により,複 数の菌株間での同一性を評価(個体識別)します。 カビ・酵母 ◆ 28S rRNA 遺伝子 D2 領域シークエンス解読 28S rRNA 遺伝子の D2 領域(約 300 bp)の塩基配列を決定し, 属・種の簡易同定(グルーピング)を行います。 ◆ 系統解析 28S rRNA 遺伝子の D2 領域の塩基配列に基づき,Clustal W (マルチプルアライメントソフト)を用いて系統樹を作成しま 顕微鏡 観察風景 す。 Neocarpenteles sp. の 形態写真 ◆ 形態観察(写真撮影) 顕微鏡による形態観察を行い,拡大写真(A4 サイズ)を撮影 します。 ※ 上記以外の試験については,お問い合せ下さい。 Aspergills sp. の 形態写真 Pestalotiopsis sp. の 分生子写真 好気性有芽胞細菌の 形態写真 73 A. acidocaldarius subsp. acidocaldarius A. acidocaldarius subsp. rittmannii Alicyclobacillus genomic species 1 97 A. sendaiensis 94 Alicyclobacillus genomic species 2 78 61 A. acidiphilus 62 Alicyclobacillus sp. 55 A. acidoterrestris 100 A. hesperidum 99 A. pomorum 56 Alicyclobacillus sp. 100 A. cycloheptanicus S. disulfidooxidans 92 A. herbarius B. tusciae S. inulinus 99 G. dipsosauri B. subtilis 57 P. polymyxa B. brevis A. aneurinilyticus 89 U. thermosphaericus 100 G. stearothermophilus S. acidophilus S. thermosulfidooxidans A. globiformis 100 0.01 100 100 系統解析結果例 50 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 ご注意 価格/納期 細 ◆ 病原性を有する,または有する可能性のある微生物,および分 菌 離源が臨床試料や動物由来の微生物等についてはお引き受けし 分析項目 500 bp 解析 1,500 bp 解析 簡易同定 簡易同定 分析日数 長期(2 ~ 3 週間) 普通(5 日) 至急(3 日) 長期(3 ~ 4 週間) 普通(10 日) 至急(5 日) 価格 3 万円 5 万円 10 万円 8 万円 10 万円 20 万円 分析項目 リボタイピング解析 (細菌のみ) ご送付を推奨しています。また,試料輸送中に生じたシャーレ 破損等に伴うコンタミネーションに関しては責任を負いかねま ◆ 一連の遺伝子解析は,ダイレクトシークエンス解読に基づくも 分析日数 長期(3 ~ 4 週間) 普通(10 日) 至急(5 日) 価格 3 万円 5 万円 10 万円 のです。 ◆ 培養条件が明記されていない場合,および培養技術等に問題が ある場合,解析・観察ができないことがあります。ご了承下さい。 ◆ 遺伝子の塩基配列に基づく解析を用いているため,以下の点に ご留意下さい。 オプションサービス 系統解析 形態観察 別途料金を申し受けます。トラブル防止のため,純粋培養株の ①従来の同定手法(形態観察や生理学的特徴など)による同定 分析日数 2~5 日 菌種により異なります。 長期(3 ~ 4 週間) 普通(2 週) 至急(1 週) 価格 2 万円 1 万円~ 12 万円 15 万円 22 万円 ※ 純 化されていない試料の場合,試料より菌の分離・純化作業 を行います(5,000 円~)。 ※ 分 析日数は営業日(土日・祝祭日・年末年始の休みを除く) で換算した目安です。試料の状態により分析日数は変動しま 結果とは異なる場合があります。 ②分類群によっては,同定結果が推定候補の列記にとどまる場 合があります。 ③新属・新種の可能性がある場合は,属および種の特定はでき ません。 ④真菌(カビ,酵母)においては,アナモルフとテレオモルフ の判別はできません。 ◆ 追加試験等が必要な場合は,ご相談させていただきます。ご要 望に合わせて試験計画のご提示およびお見積りをいたします。 すので,ご了承下さい。休業日を含む至急での分析をご希望 の場合は,別途ご相談下さい。 ご注文方法 フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ(http://www.funakoshi.co.jp/ download/)に掲載の専用依頼書に必要事項をご記入の上,当社 受託・特注品業務担当まで Fax でお送り下さい。 ※ シークエンス解読サービスは,〈長期〉〈普通〉〈至急〉の 3 種 類の形式で承ります。 ※ 価格,納期はその都度お見積りいたします。 ※ ご注文内容についての秘密は厳守いたします。必要な場合は, 秘密保持契約をいたします。ご不明な点は,お気軽にご相談下 さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 51 4 ゲノミクス D2 領域簡易同定 ◆ 試料にコンタミネーションがあった場合,分離作業を実施し, す。 カビ・酵母 分析項目 ておりません。 ◆ 試料は,試験終了後に廃棄いたします。 GeneFishing 受託サービス 独自の技術“ACP(Annealing Control Primer)テクノロジー”を応用し,発現量の異なる遺伝子(Differentially Expressed Genes:DEGs)を迅速に探索する受託サービスです。ユニークな遺伝子探索テクノロジーを用いて,お客様の試料から DEG を探索し 高品質なデータを提供します。初めに無料のプレスクリーニングを承り,試料中の DEG 候補遺伝子を偽陽性なく検出し,結果報告ととも ゲノミクス 4 にメインサービスに関するご提案をさせていただきます。最終的に,GeneFishing 受託サービスならではのデータをご提供いたします。 癌マーカー遺伝子の研究,発生ステージに関わる遺伝子の研究,細胞分化に関わる遺伝子の研究に有用です。 特 原 長 ACP(Annealing Control Primer) ◆ 無料の DEG プレスクリーニングにより,試料中の DEG をあ らかじめ確認できます。 理 5' − ◆ 偽陽性なしに真の DEG のみを検出可能です。 ◆ DNA マ イ ク ロ ア レ イ よ り 高 感 度 な た め, 発 現 量 の 少 な い す。 3 Universal Sequence − 3' 1 } ◆ 予算と必要とされる結果に応じてサービス内容を選択できま 2 } mRNA も検出可能です。 } ◆ 新規または未知の転写産物のスクリーニングもできます。 Regulator Core Sequence (poly dT,arbitrary or targeting) ACP の構造 スクリーニングの例 ● 胚・器官形成などの発生段階で発現量が変化する遺伝子 ● 各種疾患のマーカーとなり得る遺伝子 ● 薬剤の投与など様々な刺激により発現量が変化する遺伝子 ● 細胞や組織間で発現量が異なる遺伝子 (bp) 1,500 1,000 800 600 500 400 300 200 100 GeneFishing DEG Premix Kit で 使 用 さ れ て い る ACP(Annealing Control Primer)は,図に示すようなユニークな構造をしています。poly dT や任意の配 列を持つ部分(1:Core Sequence)と,共通な配列を持つ部分(2:Universal Sequence)が 3:Regulator を介して連結されています。 従来は,この Regulator を介さないプライマーが使用されており,PCR による 非特異的な増幅が頻繁に起こるという問題がありました。ACP テクノロジーで は,Regulator としてイノシンで構成される配列をプライマーに組み込んでこの 問 題 を 解 決 し ま し た。こ の Regulator の 存 在 に よ り,Core Sequence か ら Universal Sequence までを介してテンプレート RNA ,または DNA へ非特異的 にアニールするのを防ぐため,偽陽性産物の合成を抑えることに成功しました。 他の手法との比較 新規の遺伝子の検出 偽陽性シグナル 再現性 発現量の少ない RNA に対する感度 総合的な費用 (bp) 1,500 1,000 800 600 500 400 300 200 100 GeneFishing 可能 ほとんどなし 高い Differential Display マイクロアレイ 可能 不可能 高い 中程度 低い 低い 高い 中程度~高い 低い~中程度 安い 中程度~高い 高い ヒト試料以外で DEG 検出が多かった 解析事例 正常組織と癌組織の DEG ヒト胃の正常組織(N)と癌組織(C)で発現量の異なる遺伝子をスクリーニン グしたところ,22 種類の遺伝子(➡,➡)で発現量の差が認められ,12 種類の 遺伝子(➡)では癌組織で発現量が多くなっていた。 試 料 検出できた DEG 数 Alyssum 66 DEG Arabidopsis 21 DEG Bovine(Bos taurus ) 30 DEG Chaetoceros neogracile 14 DEG Copepod(Tigriopus japonicus ) 28 DEG Laternala dlliptica 36 DEG 試 料 検出できた DEG 数 Rice 69 DEG Rice(Oryza sativa ) 13 DEG Rice(Oryza sativa ) 15 DEG Sterechinus neumayeri 58 DEG Vitis labruscana leaf 44 DEG Zebrafish 20 DEG 参考文献 1) Wolfgang, F., et al., Plant J .,51,1004 ~ 1018(2007). 2) Sugimoto, H., JPn. J. Protozool , 40(1),48 ~ 50(2007). 3) Young-Mi, L., et al., Mol. Cell , 23(3),287 ~ 303(2007). ※ Seegene 社 ホ ー ム ペ ー ジ(http://www.seegene.com/) で は GeneFishing テクノロジーを用いた文献が多数紹介されていま す。 52 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 サービスの流れ 1. 試料の提供 3. メインサービス DEG の比較を行いたい 2 種類の全 RNA 試料(各 30 μg 以上) プレスクリーニングの結果をご連絡してから 2 週間以内に結 を 0.5 ~ 1 μg/ μl になるように DEPC または RNase-free 果をご検討いただき,メインサービスに進むかどうかをご連絡 water に溶解し,ドライアイス梱包にて当社受託・特注品業務 下さい。メインサービスは内容が多岐にわたるためサービス内 担当までお送り下さい* 1。その際にプレスクリーニング用専用 容をご確認の上,メインサービス用専用注文用紙にてご注文下 注文用紙と併せて,変性アガロースゲル電気泳動の結果の写真 と OD260 の情報を添付して下さい。 * 1 試料を当社までお送りいただく際の費用はお客様の負担と 2. プレスクリーニング(#S1101,無料* 2) (#S1102) フルスクリーニングでは Seegene 社が現在保有する全 120 種 類の ACP のうち,プレスクリーニングで使用しなかった 100 試料の品質確認後,20 種類の ACP を用いて DEG のスクリー 種類によるスクリーニングを行います。 ニングを行います。終了後,アガロースゲル電気泳動の結果を 追加スクリーニングでは 120 種類の ACP のうち,プレスク 画像データとしてお渡しします。納期は試料が Seegene 社に リーニングで使用しなかった 100 種類の中から更に 20 種類 到着後,約 1 週間です。 の ACP によるスクリーニングを行います。また,3 種類以上 * 2 3 種類以上の試料間での比較は有料になります。 の試料間での比較も行えます。 b)シークエンシング 検出された DEG をシークエンシングし,更に NCBI BLAST による遺伝子の同定・推定を行います。シークエンシングはダ イレクトシークエンシング(#S1301),またはプラスミドベ クターへのクローニング工程を含むシークエンシング (#S1302)が選択できます。納期はいずれも約 1 か月です。 ※ オプションとして DEG を確認するための RT-PCR を行うこと もできます(#S1401)。 価 格 1)プレスクリーニング(無料サービス;2 試料まで) 商品コード:#S1101 2)メインサービス(有料サービス) 商品コード #S1102 #S1000 #S1301 #S1302 #S1401 * メインサービス名 Additional Screening 追加の ACP Primer 20 セットによる DEG Screening(1 試料当たり) Full-Screening 追加の ACP Primer 100 セットによる DEG Screening(1 試料当たり) DEG Identification & Analysis Ⅰ 1 DEG に対する Direct Sequencing と BLAST Search によるアノテーション DEG Identification & Analysis Ⅱ 1 DEG に対する Cloning + Sequencing と BLAST Search によるアノテーション RT-PCR 試料間の 1 DEG に対する RT-PCR による発現差の確認 [メーカー:SEE ] 価格(¥) [メーカー:SEE] 96,000/ 試料 196,000/ 試料 52,000/DEG 70,000/DEG 111,000/DEG *2つの試料間におけるフルスクリーニングは ¥196,000 × 2 = ¥392,000 となります。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 53 4 ゲノミクス なります。 さい。 a)フルスクリーニング(#S1000)または追加スクリーニング 遺伝子発現解析受託サービス 遺伝子発現を正確に,ハイスループットに解析することで,薬剤検索,疾患遺伝子探索,ストレス感受性試験,毒性試験等の効率化を サポートします。 発現頻度解析内容 4 ゲノミクス 適量遺伝子数 試料数 精度 Real Time-PCR 1 ~ 1,000 Gene 数 10 ~数 1,000 ◎ 定量 RT-PCR 1 ~ 1,000 Gene 数試料~数 10 ○ 定性 ATAC-PCR 数 10 ~ 10,000 Gene 3 試料 6 試料 数 10 ◎ 定量 特 徴 ・少数遺伝子,多試料の発現解析に適している。 ・1 遺伝子ごとの条件設定に時間がかかる。 ・再現性が良い。 ・定性試験に適している。 ・発現に安定性がある。 ・感度に限界がある。 ・多数の遺伝子,複数試料の発現解析に適している。 ・再現性が良い。 ※サービスの詳細,ご注文方法については,フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)をご覧いただくか,お問い合わせ下 さい。 遺伝子ネットワークの可視化システム GeneConstellator System 株式会社アーティセル・システムズが提供する,DNA マイクロアレイデータから得られた遺伝子の相関をマップとして可視化 するデータ処理システムです。 従来,カラーパターンや系統樹などの分かりにくい形式で表されていた相関関係をマップという分かりやすい形式で表示します。 一般的な遺伝子発現解析ソフトウェアとの比較 Point ●正/負の相関を同一マップ上に同時表示 ●クラスタの結合が可能 ●相関係数をリアルタイム/無段階調整 ●複数データのクラスタリングを比較可能 従来法 GeneConstellator System ※ 製品の詳細についてはフナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)から,キーワード「GeneConstellator」で検索し ていただくか,当社テクニカルサポート(試薬担当:Tel. 03-5684-1620,Fax 03-5684-1775)までお問い合わせ下さい。 54 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 CustomArray 作製受託サービス 半 導 体 技 術 を 用 い て ア レ イ 基 板 上 で 電 気 化 学 的 に 直 接 オ リ ゴ ヌ ク レ オ チ ド を 合 成 す る, 蛍 光 標 識 タ イ プ DNA ア レ イ CustomArray の作製受託サービスです。 特 長 ゲノミクス 4 ◆ アレイ基板上で直接オリゴヌクレオチドを合成するため,プ ローブ配列の再現性が高くなっています。また,35 ~ 40 mer でも正確性の高いプローブを作製できます。 ◆ アレイの作製は 1 枚からでも,また 100 枚以上でも承ります。 ◆ 合成する配列は自由に変更できます。また,Web 上で供給さ れるインターフェース*1を利用して配列をデザインできます。 ま た, カ ス タ ム ア レ イ の 配 列 デ ザ イ ン も 承 っ て い ま す (¥70,000 /種類)。 原 ◆ コンビメートリックス株式会社でプローブ配列を設計したカタ 理 ログアレイ*2の取り扱いもあります。また,カタログアレイを DMT ベースにプローブを自由に付け加えることもできます。 H+ DMT T H+ H+ H+ H+ H+ H+ ◆ すべてのアレイについて,ランダム 9 mer を用いた QC チェッ クを行っています。 ◆ CustomArray 12K は,1 枚のアレイ上に 12,000 個のプローブ OH H+ H+ H+ T H+ H+ H+ H+ H+ Electrode Electrode がスポットできます。CustomArray 4 × 2K は,1 枚のアレイが 4 つのセクターに分かれ,それぞれに 2,000 個のプローブがス Voltage ポットできます。 ◆ ビオチン標識または蛍光標識した DNA/RNA を試料として使 用できます。 ◆ 検出には,通常のスライド型マイクロアレイ用スキャナーが使 用できます(GenePix 4000B, 4200A, 4200AL(Axon 社)お よび ScanArray 4000, 5000, Lite, Express(PerkinElmer 社) を推奨)。 オリゴヌクレオチドを合成する場合,脱トリチル化反応によりヌ クレオチドの保護基(DMT)を外し,次のヌクレオチドを結合さ せるホスフォアミダイト法が広く用いられています。脱トリチル化 反応には,通常 TCA などの強酸性試薬を使用しますが,本製品で はアレイスライドに通電して電極の周りに水素イオン(H+)を発 生させることにより,保護基を解離させます。 *1ユーザー登録が必要です。 *2詳細はコンビメートリックス株式会社ホームページ(http:// www.combimatrix.co.jp/)をご覧下さい。 メーカー 商品コード CBX 1000051 1000052 CBX 1000071 1000072 包 装 価格(¥) 1piece 1piece 130,000 140,000 品 名 CustomArray, 12K 35 mer or less 40 mer 1piece 1piece 130,000 140,000 CustomArray, 4 × 2K 35 mer or less 40 mer ※ 表記以外の塩基数については,お問い合わせ下さい。 ご注文方法 ご注文方法などの詳細はお問い合わせ下さい。 ULS aRNA Labeling Kit for CombiMatrix Array (Kreatech Biotechnology 社) 電気化学的検出法 DNA アレイ ULS(Universal Linkage System) 試 薬 に よ り,cDNA コンビメートリックス株式会社では,従来の蛍光標識タ アレイやオリゴ DNA アレイに使用する増幅 RNA(aRNA: イプアレイよりも簡単かつ高感度に検出を行える DNA ア amplified RNA)を標識するキットです。コンビメートリッ レイ CustomArray ES,および専用検出装置 ElectraSense クス株式会社製のアレイに最適化されています。詳細はフ を取り扱っています。詳細はお問い合わせ下さい。 ナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)から, キーワード「ULS aRNA」で検索して下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 55 ジーンシリコン ® マイクロアレイ 作製・解析受託サービス 3 mm 角のシリコン基板にダイヤモンドライクカーボン(DLC)をコーティングした多機能チップ“ジーンシリコン ®”上に,必要な 遺伝子のみをスポットしてアレイを作製する受託サービスです。従来のスライドガラスを用いたマイクロアレイと比較して安価で効率的な 発現解析が可能です。また,アレイ作製から解析までを一貫した受託サービスも承ります。 ゲノミクス 4 ※ 製造元:東洋鋼鈑株式会社 特 長 ◆ ジーンシリコン ® は,コンパクトなチップ(〜 64 スポット/枚) のため,必要十分な DNA に焦点を絞ることができ,コストの 削減を図ることができます。 ◆ 従来のスライドガラスを用いたマイクロアレイは高価なため, 安易に使用できませんでした。それに対してジーンシリコン ® は,DNA を絞り込むことに加え,生産効率が非常に高いため, 低価格で作製できます。 ◆ ハイブリダイゼーションに用いる試料が少量(約 3 μ l /枚) ジーンシリコン ® ジーンシリコン ® で済みます。 ◆ 製品にはスライドガラスと同サイズのアダプターが添付されて おり,このアダプターにジーンシリコン ® をセットすることに より,既存のマイクロアレイ用装置を使用して解析することが 可能です。 ※ アレイの作製は 100 枚単位より承ります。100 枚未満でのご 注文については,ご相談下さい。 ジーンシリコン ® ジーンシリコン ® アダプター GSP-Array 解析受託サービス GSP 研究所 KEIO BAC ライブラリークローンをスポットしたヒト BAC マイクロアレイ GSP-Array7700/-Array530 を用いた解析受託サービ スです。株式会社 GSP 研究所で独自に開発したソフトウェア GSP-ArrayAnalyzer により,コピー数変異などの微小な変異部位に含ま れる遺伝子を容易に同定できます。 特 長 ◆ 2 試料から解析を承ります。 ※ ご注文方法,価格などの詳細はお問い合わせ下さい。 GSP-Array7700 56 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 解析画像の例 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 微量 DNA マイクロアレイ解析 受託サービス DNA マイクロアレイの総合受託会社であるファルマフロンティア株式会社の微量 DNA マイクロアレイ解析サービスです。 お預かりした組織または全 RNA 試料から,WT-Ovation TM RNA Amplification System (Nugen Technologies) *1 を用いて cDNA を増幅し,Affymetrix 社の GeneChip *2で発現解析を行う受託サービスです。T7 RNA ポリメラーゼベース とは異なる新しい RNA 増幅技術により短時間で ng または pg オーダーの微量 RNA から,μg オーダーの cDNA を増幅できます。 携しています。 *2GeneChip は Affymetrix 社の登録商標です。ファルマフロンティア株式会社は Affymetrix 社公認プ ロバイダーとしてマイクロアレイ受託解析事業を行っています。 特 長 その他のマイクロアレイ解析サービス ◆ 適用試料:組織切片(病理標本,パラフィン包埋試料), 超微量 RNA 試料(LCM, FACS など), その他分解 RNA 試料など ◆ 従来,Affymetrix GeneChip 解析には高品質の RNA が必要でし ● 一般発現解析(下記各種アレイを使用) ・Affymetrix 社 Genome Array/Gene ST Array ・Agilent 社 Whole Genome Array ● 機能別解析システム:脂質代謝解析,肥満・糖尿病解析 た が, 本 サ ー ビ ス で 使 用 し て い る WT-OvationTM RNA ● miRNA 発現解析 Amplification System では RNA 分解度の指標である RIN(RNA ●ゲノム解析:Genotyping,コピー数解析 Integrity Number)が RIN = 2.0 程度の試料からの cDNA 増幅 ● データ解析サポートサービス も可能です。 ※ サービス内容の詳細は,ファルマフロンティア株式会社ホーム ※ LCM および微量試料からの RNA 抽出サービスはオプションと ページ(http://www.pharmafrontier.co.jp/)をご覧下さい。 なります。 価格/ご注文方法 本サービス内容 ● 組織または全 RNA 試料をお預かりし,Affymetrix GeneChip に て発現解析を行い,発現データテーブルを最新アノテーション ファイルとともにお返しいたします。 ● 全転写産物をカバーした,実績のあるアレイ(Affymetrix 社 LCM 試料,FACS 試料など微量・特殊試料向け発現解析 (Affymetrix 社 Genome Array) Affymetrix 社 2 サイクル法:10 ~ 100 ng 全 RNA に適用 マイクロ(微量・特殊)解析:~ 1 ng or パラフィン切片 由来 RNA などに適用 ¥240,000 ¥270,000 LCM 作業および RNA 抽出工程 ご照会下さい 一般発現解析実験 Affymetrix 社 Genome Array Affymetrix 社 Gene ST Array Agilent 社 Whole Genome Array(4 試料単位) 1 試料当たり ¥190,000 ¥170,000 ¥160,000 オプション作業 RNA 調製(組織から) RNA 調製(細胞ライセートから) 1 試料当たり ¥25,000 ¥20,000 Genome Array)を用いた発現解析です。 ● 解 析 に 必 要 な RNA 試 料 量 は,WT-OvationTM FFPE RNA Amplification System では全 RNA 量で 50 ~ 100 ng です。さ らに微量な 500 pg からの増幅システムもありますのでご相談 下さい。 作業工程概略 RNA 抽出 精製* ▼RNA スタート試料量 上記をご参照下さい。 RNA 品質 チェック ▼試料品質チェック Agilent 2100 Bioanalyzer を用いて全 RNA の QC を実施 します。 GeneChip 試料調製 GeneChip 試料チェック Array への ハイブリ ダイゼーション 染色・洗浄 スキャン 画像データ 取得・解析 ▼Nugen WT-Ovation TM データ解析サポートサービス クラスタリング解析 ご照会下さい 発現変動遺伝子機能の網羅的解析 ご照会下さい 遺伝子機能カテゴリー毎のデータ抽出 ご照会下さい 分子間ネットワークを中心とするデータ解釈を含む カスタム解析 ご照会下さい System を用いた cDNA の合成 ※ ご注文方法,お見積りなどの詳細はお問い合わせ下さい。 ▼GeneChip 試料チェック: Agilent 2100 Bioanalyzer および Real-time PCR による 増幅 cDNA 試料の QC を実施します。 ▼画像データ取得と数値化 GeneChip Array をスキャンして画像データを取得し,標準ソ フトにより数値化した結果ファイルに,最新アノテーション ファイル(遺伝子機能など)をつけてお返しします。 * RNA 抽出・精製の工程はオプションになります。 ※上記以外の実験操作,追加のデータ解析をご要望され る場合は,別途オプションにてご相談とさせていただき ます。 http://www.funakoshi.co.jp/ 4 ゲノミクス *1MediBIC 社より発売されているシステムです。ファルマフロンティア株式会社は MediBIC 社と連 フナコシ受託わーるど 2009-2010 57 機能別 DNA マイクロアレイ解析 受託サービス ゲノミクス 4 機能別 DNA マイクロアレイ解析システム“bioSpace Explorer”は,「各機能に関連する遺伝子だけに的を絞ってパスウェイ 単位で解析をすることにより,簡単にどの遺伝子,またはどのパスウェイに注目するか分かるようにする」というコンセプトの下, ファルマフロンティア株式会社と株式会社ワールドフュージョンが共同開発したシステムです。本サービスは,このシステムを使 用した,総合的発現データ解析受託サービスです。 特 長 サービス内容 ◆ 目的に合わせて扱う遺伝子を選択(脂質代謝:約 7,000 種,肥 ◆ お客様から組織,培養細胞,または全 RNA 試料をお預かりし 満・糖尿病:約 9,000 種)します。情報ノイズを減らすことに て発現データを取得し,“bioSpace Explorer”を使用して発現 より,解析を短時間で達成し,経費を抑えることが可能です。 ◆ 発現実験は終了したがうまく解析結果をまとめられないといっ た問題を解決できます。 データ解析を行います。 ◆ 脂質代謝解析システムと,肥満・糖尿病解析システムの 2 領域 の解析サービスを提供しています。また,脂質代謝,肥満・糖 ◆ 目的に合わせて選択した遺伝子の中から重要な遺伝子だけを 使ってパスウェイを 1 画面に表示した“Entrance Pathway”と, 尿病に関連する遺伝子のみを搭載したフォーカストアレイを用 いたより低価格な解析サービスも提供しています。 基本的なパスウェイ“Fundamental Pathway”の図を納品しま ◆ 解析結果レポートとして,パスウェイごとに発現比を反映させ す。発現実験値を反映させることで,対象で起きている生物現 た図と,便利なマクロ機能を含んだ発現データマクロ表を納品 象の全体像を1画面で捉えることができます。 します。 ◆ 解析対象動物種:ヒト,マウス,ラット サービスの流れ 価 1. RNA 試料調製ステップ ファルマフロンティア(株) 作業 お客様より試料お預かり RNA 抽出・精製 (オプション) 組織 培養細胞 全 RNA 2. データ取得ステップ 発現データ取得 機能別解析 脂質代謝システム または 肥満・糖尿病システム お客様へ 解析結果レポート納品 ・発現データマクロ表 ・パスウェイに発現データを 反映させた図 3. データ解析ステップ 納品データの例 glycogen metabolism 格 脂質代謝 システム 肥満・糖尿病 システム ¥345,000 /試料 ¥398,000 /試料 Affymetrix 社 ・Human Gene 1.0 ST Array ・Mouse Gene 1.0 ST Array ¥325,000 ・Rat Gene 1.0 ST Array のいずれか /試料 ※ 全転写領域カバープローブアレイによる解 析 ¥378,000 /試料 Agilent 社 ・Whole Human Genome オリゴ DNA マイクロ アレイ ・Whole Mouse Genome オリゴ DNA マイクロ ¥315,000 アレイ /試料 ・Whole Rat Genome オリゴ DNA マイクロア レイ ※3’末端プローブアレイによる解析 ¥368,000 /試料 使用アレイ Affymetrix 社 ・Human Genome U133 Plus 2.0 Array ・Mouse Genome 430 2.0 Array ・Rat Genome 230 2.0 Array のいずれか ※3’末端プローブアレイによる解析 Agilent 社 ・フォーカストカスタムアレイ (現在マウスのみ対応,脂質代謝,肥満・糖尿 病関連の 15,000 プローブを搭載しております) RNA 抽出/精製(オプション) 組織から 培養細胞から ※RNA 抽出試薬で細胞を溶解し,凍結して下 さい。 ¥1,807,000 / 8試料単位 ¥25,000/試料 ¥20,000/試料 ※ 2 試料より 1 試料単位で解析を承ります。 ※ ファルマフロンティア株式会社は Affymetrix 社公認プロバイ ダーとしてマイクロアレイ受託解析事業を行っています。 fatty acid beta oxidation ※ 機能別 DNA アレイ(血球バイオマーカー探索システム)の解 析サービスを近日開始予定です。詳細はお問い合わせ下さい。 glucose metabolism cholesterol and bile acid 58 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 人工遺伝子合成受託サービス GenScript 社が独自に開発した DNA 合成技術により,任意の配列の DNA を合成し,ベクターに挿入する受託サービスです。cDNA ライブラリーから目的の DNA 断片を PCR で増幅するよりも,確実かつ低価格で合成できます。 特 長 合に最適です。 ◆ PCR クローニングでは塩基の取り込みエラーによる変異が起 ● 発現宿主に最適化されたコドンに改変した cDNA の合成 ● マイクロアレイ用 cDNA 断片の大量合成 ● ヒト化マウス抗体の作製 こる可能性がありますが,本サービスでは指定された配列を確 ● クローニングが困難な cDNA の合成 実に合成します。 ● DNA ワクチンの研究開発 ◆ 約 10 kb までの DNA を合成できます。また,それ以上の長さ についてもご相談に応じます。 ◆ ご希望の発現宿主(E. coli , 酵母,昆虫,哺乳動物細胞)に最 4 ゲノミクス ◆ 目的配列を含むライブラリーが存在しない場合や入手困難な場 応用例 ● 変異や欠失変異を導入した cDNA の合成 ● スプライシングバリアントや遺伝子多型の cDNA 合成 ● 機能を改良した組換え体酵素やレセプターの作製 適化したコドン改変を行います(無料サービス)。 受託内容 1. 指定された配列情報を元に DNA を合成し,pUC57 ベクター 価 格 ● 353 bp 以下……………………………………¥45,000/1 断片 ● 354 bp 以上…………………………………お問い合わせ下さい に挿入します。 2. 双方向からシークエンシングを行い,正しい配列で DNA が合 成されていることを確認します。 納 品 目的の DNA 断片が挿入された pUC57 ベクター約 4 μ g を凍結 乾燥した状態で納品します。各製品には,確認に使用したシーク エンシングデータが添付されています。 ※ pGS-21a 発現ベクターやその他のベクターでの納品も可能で す(追加料金が発生します)。 ※ 追加料金で大量合成(100 μg)も承ります。詳細はお問い合わ せ下さい。 ご注文方法 フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ(http://www.funakoshi.co.jp/ download/)に掲載の専用注文書に必要事項をご記入の上,販売 店担当者へお渡し下さい。 ※繰り返し配列を含む DNA 断片は,合成できない場合もありま す。詳細はお問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 59 ORF クローニング受託サービス GenScript 社が所有する GenPool ORF クローンデータベースに登録されているご希望の ORF(Open Reading Frame)を PCR 増幅して,ベクターにクローニングする受託サービスです。 ゲノミクス 4 特 長 ◆ GenPool ORF クローンデータベースには 90 種類の生物種の 1,124,477 ORF が登録されており,ラインナップは日々増加 しています。 ◆ ご 希 望 の ORF は GenScript 社 ホ ー ム ペ ー ジ(http://www. genscript.com/) よ り,Refseq Accession ID や, 遺 伝 子 名, 研究分野,タンパク質ファミリー,シグナル経路,機能別グルー プなどにより検索できます。 ◆ 増幅した ORF は,バクテリア,Sf9 細胞,哺乳動物細胞でそ のまま発現することができる pDream 2.1 vector * にクローニ ングします。そのため,サブクローニングの必要がありません。 ◆ ベクターにクローニング後,すべてのクローンにおいて ORF 配列の確認を行っています。 ◆ pDream 2.1 vector は,目的 ORF を N 末端に DYKDDDDK タ グが融合したタンパク質として発現させます。そのため,抗 DYKDDDDK 抗体(# A00013)による発現確認や精製が容易 で す。 ま た,DYKDDDDK タ グ は enterokinase(# Z01003) による除去が可能です。 ご注文方法/価格 ご注文方法,お見積りなどの詳細はお問い合わせ下さい。 * pDream 2.1 vector 以外のベクターへのクローニングをご希望 の場合は,お問い合わせ下さい。 納 品 ● ご希望の ORF をクローニングした pDream 2.1 vector(凍結乾 燥品):10 μg ● クローンの塩基配列データ ● プラスミドマップ(データ) 関連商品 以下の関連製品をご注文の際には,[品名,メーカー(GSC),商品コード,包装,数量]をお知らせ下さい。 メーカー 商品コード GSC A00013 GSC Z01003 包 装 価格(¥) 500 μg 33,000 100 IU 13,000 品 名 Anti-DYKDDDDK-tag, Mouse-Mono(A00013.01) Enterokinase, Light Chain, Porcine, Recombinant <EK> Buffers, Cleavage control protein 添付。産生:P. pastoris GS115 GSC GSC 60 DA0008 500 pmol 5,000 DA0009 500 pmol 5,000 フナコシ受託わーるど 2009-2010 SP6 Primer T7 Primer ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 シークエンシング受託サービス 塩基配列を高品質な技術で迅速に解析します。テンプレート精製および PCR 増幅,プライマーデザイン等のオプションサービスも承り ます。また,中規模,大規模プロジェクトにも対応可能で,ゲノムプロジェクトをトータルにサポートします。 価 格 ゲノミクス 4 実験基本料として ¥2,500/order を別途申し受けます。 サービス Single-read sequencing Investigation sequencing オプション プライマーの設計,合成 アセンブル 価 格 目的と特徴 ¥5,200 PCR 産物,プラスミドを 500 ~ 600 base 解析。 ¥5,200/read Primer Walking により DNA の片鎖,または両鎖全長を解析。 ¥3,400 予想配列の情報をいただけると納期が早まります。 ¥5,000 ※ PCR 産物の精製(ゲル切り出し,キットによる精製など)が必要な場合,試料 DNA 鎖が長い場合,試料数が多い場合は別途お見積り いたします。 ※ 上記以外にも様々なシークエンシングサービスを行っています。詳細はお問い合わせ下さい。 ※ ご注文方法については,フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)をご覧いただくか,お問い合わせ下さい。 ゲノム DNA 抽出/精製受託サービス 離乳後の遺伝子改変動物の組織からゲノム DNA を抽出・精製します。精製した DNA は PCR,サザンブロッティングなどに使用でき, ジェノタイピングに有用です。 価格/納期 ● 価格������������������������������������� ¥ 2,500 /試料 ● 納期������������������������������������������� 約 2 週間 ※ 詳細はお問い合わせ下さい。 サザンブロット/ハイブリダイゼーション 受託サービス 離乳後の遺伝子改変動物の組織からゲノム DNA を抽出・精製し,サザンブロットメンブレンを作製いたします。作製したサザンブロッ トメンブレンを用いてハイブリダイゼーションし,オートラジオグラフィーによるジェノタイピングを行います。 価格/納期 ● 価格������������������������������������� ¥ 3,500 /試料 ● 納期������������������������������������������� 約 4 週間 プローブの調製について プローブを含むプラスミド DNA をご提供いただける場合は無 料でプローブを作製いたします。株式会社フェニックスバイオで クローニングから行う場合は別途お見積りいたします。ターゲ ティングマウス用のプローブ調製については,ご注文時にお問い 合わせ下さい。 サザンブロッティングによるターゲティングマウスのジェノタイピング ※ 詳細はお問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 61 遺伝子工学実験受託サービス 株式会社 AMBiS では遺伝子工学に関連する研究の効率化を支援するために,遺伝子工学実験の各種受託サービスを行っています。 ゲノミクス 4 クローニング cDNA 合成 ¥143,000 ~ ¥11,000 ~ ご希望のベクターに目的遺伝子を挿入したクローンを作製しま 培養細胞,植物,バクテリアの RNA から,cDNA を合成しま す。 す(その他の試料についてはお問い合わせ下さい)。 プラスミド抽出 ノーザンブロッティング ¥1,100 ~ / クローン(μg 単位) ¥43,000 ~(10 レーンまで) ¥55,000 ~ /mg(mg 単位) RNA を抽出し,変性アガロースゲルにて電気泳動で分離した後, μg,mg 単位でのプラスミド抽出に対応します。mg 単位の抽 出には,スタンダードグレードとエンドトキシンフリーグレード メンブレンに転写して目的の RNA を検出します。 ※ RNA 抽出,プローブ標識に別途費用を申し受けます。 があります。 ※ GMP 準拠の設備で高品質なプラスミドを生産する受託サービス も承ります。 サザンブロッティング ¥43,000 ~(10 レーンまで) ゲノム DNA を抽出し,制限酵素で特定のサイズに断片化した ゲノム DNA・RNA 抽出 ものをアガロースゲルにて電気泳動で分離した後,メンブレンに ¥22,000 ~ 培養細胞,植物,バクテリアからゲノム DNA,または RNA を 抽出し,精製します(その他の試料についてはお問い合わせ下さ 転写して目的のゲノム DNA を検出します。 ※ ゲノム DNA 抽出,制限酵素処理,プローブ標識に別途費用を 申し受けます。 い)。 ※ ご依頼の内容に応じて,個別にお見積りいたします。詳細についてはお問い合わせ下さい。 遺伝子工学実験受託サービス 遺伝子クローニングサービス 部位特異的変異導入サービス お好みの DNA 試料から目的の遺伝子断片を増幅するための 遺伝子配列中の特定の部位に変異を導入するサービスです。目 PCR プライマーを設計・作製します。増幅産物を直接 TA クロー 的に応じて PCR 法やオリゴヌクレオチドによる変異導入を行い ニングベクターに組み込んだり,サブクローニング用に制限酵素 ます。 切断部位を挿入することも可能です。 ◆ 変異導入クローンは DNA シークエンシングにより目的塩基の ◆ PCR 産物は DNA シークエンシングにより配列の整合性を確認 します。 変異を確認します。 ◆ 納品形態は変異を導入したプラスミドと培養菌株となり,制限 ◆ 納品形態はクローニングしたプラスミドと培養菌株となり,制 限酵素切断および DNA シークエンシングの結果を記載した文 酵素切断および DNA シークエンシングの結果を記載した文書 を添付します。 書を添付します。 ※ 価格,ご注文方法などの詳細はお問い合わせ下さい。 62 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 FISH 法による染色体解析受託サービス ヒトおよびマウスでの染色体異常解析 マルチカラーまたは染色体特異的プローブを用いた染色体異常 の解析を行います。G バンドによるカリオグラムの作成や染色体 減数分裂時の対合異常解析 マウスおよびラットの精母細胞を用いて免疫染色により減数分 裂時の対合異常解析を行います。 高精度染色体マッピング マウスマルチカラー FISH プローブを用いた核型解析 マルチカラー解析の結果,このマウ ス由来細胞は第 11 染色体がトリソ ミーであると同定された。 遺伝子および DNA クローンの染色体上の位置を同定します。 ヒトを含む様々な動物種(ヒト,マウス,ラット,ハムスター, ニワトリなど)での解析が可能です。 トランスジェニック動物のホモ・ヘテロ解析 組織切片での FISH 解析 トランスジェニック動物における導入遺伝子のホモ型・ヘテロ 型の解析を行います。 パラフィン包埋切片または凍結切片での DNA クローンの検出 や染色体特異的プローブを用いた染色体の検出を行います。 マウス脳パラフィン包埋切片での Y 染色体と X 染色体の検出 赤色の Y 染色体ペインティングプローブの シグナルと黄色の X 染色体ペインティング プローブ(プローブサイズ 130 kb)のシ グナルが青色の核の中に確認できる。対比 染色は DAPI で行った。 ※ 記載以外にも鳥類,は虫類における染色体マッピング,大量試料の解析,また特殊な FISH の条件検討から結果の解析まで様々なカス タム解析が可能です。詳細はお問い合わせ下さい。 価格/納期 ※ 以下の価格・納期は標準的なものです。試料や解析手法等により異なりますので,解析内容,試料の種類,動物種等の情報をご用意の上, お問い合せ下さい。 解析項目 解析内容 簡易核型解析 ギムザ染色による染色体数および染色体形状の確認 染色体異常解析 マルチカラー解析 マルチカラー FISH による染色体異常の確認(ヒト・マウスのみ) パラフィン包埋切片,凍結切片,細胞スメアーでの DNA クローン (100kb ~ ) の検出 ※ 組織切片の解析は組織や固定方法により解析条件が異なりますの FISH 解析 で条件検討が必要となります。条件検討用の試料は本解析に使用 する試料と同組織,同固定条件のものを使用します。 対合異常解析 FISH +免疫染色 ・cDNA,DNA クローン ( 数 kb ~ ) の染色体上での位置の同定 高精度染色体マッピング ・遺伝子導入動物における遺伝子挿入部位同定 ホモ・ヘテロ解析 遺伝子導入動物のホモ・ヘテロ解析 価格 150,000 円~ 400,000 円~ 条件検討:300,000 円~ 本解析:50,000 円~/試料 納期 1 か月 2 か月 お問い合わせ下さい お問い合わせ下さい お問い合わせ下さい 300,000 円~ 1.5 か月 300,000 円~ 1.5 ~ 3 か月 ※ ヒト・マウス・ラット・ニワトリの FISH 用 hoechst G バンド処理済みコントロールスライドも販売しています(各¥25,000/5 枚)。 詳細はお問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 63 ゲノミクス 4 数異常の確認のみの受託もお引き受けします。 FISH プローブ作製・FISH 解析 受託サービス GSP 研究所 GSP-Array(p.56 参照)に使用している BAC クローンから FISH プローブの受託作製を行います。GSP-Array に使用していない 遺伝子または領域についてご希望の場合は,KEIO BAC ライブラリー 20 万クローンの中から探して* FISH プローブを受託作製いたし ま す。 ま た,Centromere FISH プ ロ ー ブ / Pancentromere FISH プ ロ ー ブ / Subtelomere FISH プ ロ ー ブ や, 転 座 解 析 用 の ゲノミクス 4 Translocation FISH プローブ,偽陽性シグナルの少ない Split FISH プローブ,更には3カラー FISH プローブの作製も承ります。同時 に FISH 解析サービスも併せて承ります。プローブ作製から解析まで万全なサポート体制です。 *別途クローン選択料を申し受けます。 特 価 長 ◆ 蛍光色素は SpectrumOrange,SpectrumGreen,FITC,RITC, Texas Red などから選択できます。 格 ● FISH プローブ作製(20 テスト分):98,000 円 ● クローン選択料:60,000 円 ◆ マイクロアレイ CGH 法により得られた増幅,欠失領域の FISH ● FISH 解析サービス:お問い合わせ下さい。 解析が可能です。 KB1520B10(EGFR 遺伝子を含む)クローンを用いた FISH 画像 3 カラー FISH プローブによる解析例 扁平上皮癌由来細胞 青色(Royal Blue):CEN7,赤色(Texas Red):7p Subtel, 緑色(FITC):7q Subtel Royal Blue(励起 426 nm / 蛍光 480 nm)の観察には,CFP-2432A フィルター (Semrock 社)を使用した。核染色に使用した DAPI は,画像処理により白色に 変換している。 QProbe による SNP 解析受託サービス QProbe(p.46 参照)を使用した SNP 解析を行います。QProbe と PCR 増幅産物との結合力の違いから SNP を判定します。 測定原理 サービス内容 SNP 解析条件設定サービス 野性型遺伝子の場合 ● ご希望の SNP 解析のためのプライマー・プローブ設計,反応 条件の検討を行います。 ● プライマー・プローブ合成費用が別途必要です。 ● 設計内容によっては,作業量に応じて別途追加料金を申し受け る場合があります。 変異型遺伝子の場合 ● 遺伝子型既知のコントロール試料をお持ちでない場合は,コン トロール DNA 作製料金を別途申し受けます。 ● 価格・・・¥80,000 ~ /1 SNP SNP 解析サービス ● 構築した反応系を用いて,お手持ちの試料の SNP 解析を行い QProbe が標的遺伝子に結合すると,蛍光が消光する。変異型遺伝子は野生型遺 伝子よりも低温で QProbe が解離するため,解離曲線解析による SNP 判定が可 能。 ます。 ● 各種試料からのゲノム DNA の抽出もオプションで承ります。 ● 価格・・・~¥6,000/1 試料・1 SNP ※ 試料数に応じた割引(同一 SNP 解析を一度にまとめてご依頼 いただける場合)もあります。詳細はお問い合わせ下さい。 64 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 マイクロサテライト DNA 多型解析 受託サービス ヒト家系・疾患モデルマウス等を対象とした疾患感受性遺伝子研究,薬剤感受性遺伝子研究,迅速なコンジェニックマウス/リコンビ ナント近交系マウスの作製,ノックアウトマウスの表現型に影響する背景遺伝子の研究等で必要となるゲノムワイドのマイクロサテライト DNA 多型解析を,迅速なサービスと低価格で提供します。 4 様 1. ゲノム DNA の必要量:35 ng/genotype * 1 *1 TE バッファーまたは蒸留水で 5 μg/ml の濃度に調製して 下さい。 2. 対象生物種:ヒトおよびマウス* 2 *2 その他の生物種は,お問い合わせ下さい。 3. 納期:約 1 か月 価 格 ● 基本料金:¥50,000 ● 解析件数(genotypes):個体数×マーカー数 → 500 genotypes 未満:¥960/genotype → 500 genotypes 以上 5,000 genotypes 未満: ¥640/genotype → 5,000 genotypes 以上:お問い合わせ下さい ※ 研究目的と予算に応じた受託サービスの提案も承ります。詳細 はお問い合わせ下さい。 電気泳動によるマイクロサテライト DNA 多型解析 PCR によって増幅したマイクロサテライト DNA 断片を,キャピラリー DNA シークエンサーを用いてその長さを正確に測定します。繰り返し配列の反復数に ついての多型はマイクロサテライト DNA 断片の長さに反映します。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 65 ゲノミクス 仕 動物臓器 ウシ,ブタ,マウス,ラット,ウサギ,モルモットの新鮮な研究用臓器をお届けいたします。 ※ 本製品は研究用です。医薬品,診断用医薬品,食用等の用途には使用できません。 ※ ウシ,ブタの臓器は,動物の健康診断・ワクチン接種など厚生労働省の指導に基づき家畜衛生保健所が実施し,疾病がなく安全である ことを確認したウシ,ブタから摘出されていますが,取扱いには十分ご注意下さい。 ※ 供給元:DARD 株式会社,有限会社ジャパン・ラム 特 組織標本・細胞解析・細胞培養 5 長 入手可能な主な臓器 ◆ ウシやブタなどの家畜の臓器は,食肉用として主に北海道・帯 広で飼育された,健康な動物から摘出しています。 脳・副睾丸・食道・眼・心臓・視床下部・腸・腎臓・肝臓・肺・ 卵巣・膵臓・下垂体・座骨神経・脊髄・脾臓・胃・下顎・睾丸・ ◆ マウスやラットなどの小動物の臓器は,研究用に飼育された動 副甲状腺・甲状腺・気管・子宮 物から摘出します。 ◆ いずれの臓器も摘出後,急速凍結処理,ドライアイス梱包 (- 80℃保存)での発送が可能です。 ※ 価格などの詳細はお問い合わせ下さい。 動物病理組織標本作製・免疫染色標本作製および 病理組織学的検査受託サービス 株式会社バイオ病理研究所では動物実験における組織標本の作製,組織学的検査のご依頼を承ります。ご依頼の業務は,GLP 基準*に則っ た試験施設にて実施します。 * GLP(Good Laboratory Practice):医薬品・化学物質・農薬の安全性試験実施基準 病理組織標本作製 切片の作製は 1 枚から承ります。 受注実績の例(酵素抗体法の場合) サービス内容 ◆ ヘマトキシリン・エオジン二重染色(HE 染色)標本作製 ● 酸化ストレスマーカーの検出(8-OHdG, 4NHE, HEL など) 非 GLP 対応試験から GLP 適用試験(複数場所試験対応), ● アポトーシス検出(TUNEL 染色,Cleaved Caspase-3 など) 癌原性試験まで承ります。 ● 細胞周期増殖マーカーの検出(Ki-67,PCNA など) ◆ 凍結切片標本作製 ● CD マーカーの検出(CD3,CD4,CD8,CD25,CD45RA, (特殊染色および免疫組織化学染色用) CD90 など) ◆ 非脱灰凍結切片標本作製 ● 癌/癌抑制遺伝子の検出(BAX,Beclin,LC3,Bcl-xL など) ◆ 特殊染色標本作製 ● 組織球・血管・筋肉系マーカーの検出(ED1,F4/80,アンチ (Azan 染色,PAM 染色,PAS 染色,TB 染色,MT 染色,凍 結切片(脂肪染色)など各種染色標本を作製) ◆ 酵素抗体法および蛍光抗体法標本作製 (免疫組織化学染色) トロンビン,α SMA,VEGF など) ● 受容体・細胞情報伝達因子の検出 ● ホルモンの検出(インスリン,グルカゴン,インスリン・グル カゴン重染色,Osteopontin,Osteocalcin) ● 破骨細胞の検出(TRAP 染色) ● 神経・神経内分泌マーカーの検出 ● 熱ショックマーカーの検出 ● 上皮・ケラチン・ムチンマーカーの検出 ● サイトカイン,GF/CSF の検出 試料:ラット膀胱 抗 PGP9.5 抗体 66 フナコシ受託わーるど 2009-2010 試料:マウス子宮 抗 E-Cadherin 抗体 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 試料:マウス下垂体 抗 ACTH 抗体 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 組織学的検査 ◆ GLP 基準に則った病理組織学的検査 ◆ 開発スクリーニングにおける病理組織学的検討 ◆ 作用メカニズム,作用部位等の基礎研究における組織学的検討 ◆ 病態動物における組織学的検討 切り出し 包埋 薄切 染色・封入 ご注文方法 ※ フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ(http://www.funakoshi.co.jp/ download/)に掲載の専用注文用紙に必要事項をご記入の上, 当社受託・特注品業務担当まで Fax でお送り下さい。 合は,秘密保持契約を締結いたします。お気軽にご相談下さい。 5 組織標本・細胞解析・細胞培養 ※ 価格・納期はその都度,お見積りいたします。また,必要な場 ※ 上記以外の試験,およびご不明の点についてはお問い合わせ下 さい。 組織鏡検 組織アレイ作製・組織染色および in situ ハイブリダイゼーション受託サービス in situ ハイブリダイゼーション(ISH)による遺伝子発現解析に関する一連の操作を行う受託サービスです。 ※ 本サービスは研究用です。臨床用途には利用できません。 ※ 本サービスの総代理店は松浪硝子工業株式会社です。 臓器・組織アレイ作製受託サービス 目的遺伝子の発現部位の解析に必要な動物種の臓器・組織アレイを作製いたします。また,お客様よりお送りいただいた組織試料から の組織アレイ作製も承ります。 従来ターゲットとしてきた mRNA に加えて,近年は miRNA,アンチセンス RNA 等の non-coding RNA(機能性 RNA)についても, その発現確認が薬剤の作用,遺伝形質等の解析に必須な実験項目となっています。 作製可能な動物種 ● マウス ●メダカ ●ミニブタ ●モルモット ●ラット ●ゼブラフィッシュ ●ニワトリ ●イヌ 染色例 ヘマトキシリン/エオジン染色 in situ ハイブリダイゼーション プロープ: protamin1 cRNA マウス C57BL/6J 組織アレイを用いた例 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 67 スライド組織標本の特殊染色受託サービス 下記 10 種類の組織染色を承ります。 ● ワンギーソン染色(Van Gieson stain) ● ルクソール・ファスト染色(Luxol fast blue stain) ● ワイゲルト染色(Weigert stain) ● フォイルゲン染色(Feulgen stain) ● エラスチカ・ワンギーソン染色(EVG stain) ● メチルグリーン・ピロニン染色(Methylgreen pyronin stain) ● アルシアン青染色(Alcian blue stain) ● PAS 染色(PAS stain) ● クリューバー・バレラ染色(KB stain) ● ヘマトキシリン・エオジン染色(HE stain) メチルグリーン・ピロニン染色 PAS 染色 クリューバー・バレラ染色 組織標本・細胞解析・細胞培養 5 腎臓の基底膜(赤紫色) 試料:小腸, DNA(青色),RNA(赤色) 試料:大脳, 核(紫色),髄鞘(青色) 試料:小腸, RNase 処理後に染色 スライド標本全体組織画像の作製受託サービス 標本上の個々の区画を撮影した後,MIRAX(Zeiss 社)を用いて全体組織画像のバーチャルスライドを作製します。デジタル化された 標本の画像は,ビューワーソフトにより,モニター上で任意の位置を任意の倍率で観察できます。 隣接する画像の 貼り合わせ 個々の区画 個々の区画を撮影 合成した全体組織画像 バーチャルスライド 遺伝子のアンチセンス RNA 発現検証受託サービス 遺伝子のアンチセンス RNA が組織に存在することが in situ ハイブリダイゼーションで示された場合,それを論文に記述する際に他の 手法でのアンチセンス RNA の存在の確認を求められることがあります。このような要望に対応するため,株式会社つくば遺伝子研究所で 開発したプロトコルによる RT-PCR 法で,アンチセンス RNA の存在を調べます。 作業内容 2. 3. 1 . RNA を調製する。 2 . RNA 画分にゲノム DNA の混入が無いことを確認する(40 cycles)。 3 . 開 発した RT-PCR 法により,アンチセンス RNA の存在を検 討する(38 cycles)。 68 フナコシ受託わーるど 2009-2010 Lane1:サイズマーカー Lane2:試料 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 in situ ハイブリダイゼーション用標識 cRNA プローブ(センス/アンチセンス) 遺伝子発現の確認に用いるプローブは,目的遺伝子からの転写産物のみを特異的に検出するものであることが必要です。最近の報告では, 同一の遺伝子に由来するスプライシングバリアントが存在し,スプライシングバリアントの違いが形質に影響することも明らかにされつつ in situ ハイブリダイゼ-ション用プロ-ブが必要になります。 あります。したがって,これらのスプライシングバリアントも視野にいれた, 下記の生物種について in situ ハイブリダイゼ-ション用プロ-ブとして,スプライシングバリアントを視野に入れた各種標識 cRNA プロ-ブを取りそろえています。 特 長 提供可能な動物種 ◆異なる標識および検出システムを選択することにより,2 種の ●マウス ● ラット ●ウシ ◆ mRNA とタンパク質の同時検出に利用可能です。 ● イヌ ●ニワトリ ◆免疫染色との併用も可能です。 ● メダカ ●ゼブラフィッシュ ◆各遺伝子の共通領域を排除しているため,類似遺伝子の発現を ● アフリカツメガエル 5 識別可能です。 in situ ハイブリダイゼーション(ISH)受託サービス in situ ハイブリダイゼーション(ISH)による遺伝子発現解析操作を行う受託サービスです。ISH による遺伝子発現解析を計画してか ら解析が順調に進み始めるまで,平均して半年,中には1年以上もかかる場合もあるのが現状です。この期間を短縮し,計画から研究成果 を得るまでの作業を円滑に進めるための支援もいたします。 ※ ご要望に合わせたサービス内容の組み合わせも承りますので,まずはお気軽にお問い合わせ下さい。 作業内容 ●動物種の選択 ●オリゴ DNA アレイ解析 ●薬剤投与計画/実施 ●臓器・組織の採取 ● ISH による臓器・組織レベルでの 遺伝子発現解析 ●発現画像の取得 ●解析画面への組織学的コメント ●画像の発送 ●報告書の作成 ご注文方法/価格 ご注文方法,お見積りなどの詳細はお問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 69 組織標本・細胞解析・細胞培養 ● ヒト 遺伝子発現の同時比較が可能です。 in situ ハイブリダイゼーション受託サービス 遺伝子の機能解析方法のひとつとして活用されている in situ ハイブリダイゼーション(ISH)に関する一連の作業を行います。お客様 からのご要望に応じて,動物の解剖から切片およびプローブの作製,ISH 染色の実施,報告書の作成まで一貫してお引き受けいたします。 miRNA は遺伝子の発現制御や安定性に関与する低分子 RNA で,一般的に局在の解析が非常に難しいとされてきました。ジェノスタッ フ株式会社では,独自の in situ ハイブリダイゼーションノウハウに加え,最新の技術により miRNA の検出に成功しています。 組織標本・細胞解析・細胞培養 5 受託内容 a 1 動物の解剖および組織の固定 a ×50 b ×50 b ご希望の組織をお知らせ下さい。正常動物(マウス:C57BL/6 または ICR, ラット:Sprague Dawley または Wistar)は,ジェ ノスタッフ株式会社でご用意することも可能です。 ※ ジェノスタッフ株式会社技術担当者がご依頼先まで伺い,解剖 する出張サービスも承ります。 2 パラフィン包埋組織ブロックの作製 miR-124a プローブを用いたマウス E17.5 の ISH 染色像 独自の手法により高品質の ISH ブロックを作製します。 3 パラフィン包埋組織切片の薄切 薄切方向(冠状断・矢状断),注目部位についてお知らせ下さい。 4 プローブの作製 遺伝子により異なりますが,複数領域(最大 3 領域)でプロー ブを設計・作製します。 コース 1)Gene Accession Number(GenBank,EMBL)または, シークエンスのテキストデータからの設計と作製 コース 2)クローニングされた遺伝子断片(プラスミド)からの 設計と作製 ※ ご希望の標識物質をご指定下さい。標識法によってはお受けで きない場合もあります。あらかじめご了承下さい。 マウス胎仔(14.5 日)を用いた ISH 染色像 ご注文方法 ※ 秘密保持契約も可能です。詳細はお問い合わせ下さい。 ※ プローブの作製のみをご希望の場合は,20 万〜 30 万円で承り ます。 ※ ISH 用ポジティブコントロールプローブのみの販売,および免 疫組織化学染色の受託サービスも承ります。詳細はお問い合わ せ下さい。 5 ISH の条件検討 ※ ISH 用パラフィン切片とパラフィンブロックも取り扱っていま RNA プローブと NBT/BCIP を使用し,各種条件検討を行いま す。組織切片および試薬の品質,染色の有効性確認のため,ジェ す。詳細は,フナコシホームページ(http://www.funakoshi. co.jp/)をご覧下さい。 ノスタッフ株式会社のポジティブコントロールプローブによる染 色も同時に行います。 6 結果報告書の作成 発色部位の画像と発色部位についての報告書を発色スライドと 共に納品します。 70 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 特注培地の製造受託サービス 発生生物学研究,再生医療研究,抗体・生理活性物質生産,その他各種細胞培養に必要な培地を必要な量だけ製造いたします。培地の 組成変更,定期供給等の希望がある場合,お客様のご要望に沿った特注培地を製造し定期的にお届けいたします。 製品はクリーンルーム内で製造し,エンドトキシン検査,浸透圧検査,無菌試験,細胞培養試験を行った後お届けいたします。 製造条件 ● 製造形態はすべて液体培地とさせていただきます。 5 組織標本・細胞解析・細胞培養 ● 製造単位は最小注文量が 500 ml,最大 20Lです。分注包装も 可能です。 ● 受注から製品お届けまでの期間は 2 ~ 4 週間いただきます。 同じ培地の定期的な購入をご希望の場合,納品間隔は 2 週間以 上をご指定下さい。 ● 製造原料は十分高純度の物を使用いたしますが,原料に由来す る微量金属等の除去はできない場合があります。 ● 特注培地はガラス瓶,ペットボトル,メディアバッグ,その他 大容量容器による包装が可能です。また,ご要望に応じて包装 形態を変えることも可能です。 ● 原則的に抗生物質は添加しません。ご要望の場合はゲンタマイ シン,カナマイシン等を添加します。なお,ペニシリン系,ス トレプトマイシン系の抗生物質は添加できませんのでご了承下 さい。 ● 新しい組成の培地をご注文になる場合,文書による組成または 公開された参考文献をお送り下さい。 品質試験 ● エンドトキシン測定 トキシカラーテストによる ● 浸透圧測定 氷点降下法で測定 ● 細胞培養試験 製造培地の例 ● 組成が明らかな特注培地 ご使用目的の細胞に合わせて試験しますが,細胞入手困難な場 合には他の細胞で代替します。また,組成変更等の場合,培養 試験が行えない場合もあります。 ● 通常培地から特定アミノ酸を除去した培地 ご注文方法/価格 詳細はお問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 71 組織培養用ウシ胎児血清( FBS ) フナコシでは各社の高品質な FBS を取り扱っています ! HyClone 5 ブ ラ ン ド ( Part of Thermo Fisher BioWest 社の FBS は,フランス・パスツー Scientific ) の FBS は,独自の Closed-System により ル研究所を始めとして,世界各国の研究者から 採血された原料のみを使用し,製造工程でのロット管理も 高い信頼を得ています。 組織標本・細胞解析・細胞培養 徹底しています。 アメリカ産 FBS フランス産 FBS チリ産 FBS ドミニカ産 FBS メキシコ産 FBS ※ 他の原産地の製品もあります。 ロットチェック用サンプル ご提供いたします !! FBS( 500 ml )を 10 本以上ご購入予定の場合, ロットチェック用のサンプルをご提供いたします。 オンライン・サンプル申し込み Bovogen Biologicals 社は,オーストラリ ア産の高品質な FBS を提供します。 オーストラリア産 FBS フナコシホームページ http://www.funakoshi.co.jp/form_fbi/ FBS サンプル申込フォーム 必要事項を入力して下さい。 72 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 ペプチド合成受託サービス 合 成 法 形 状 標準納期 標準価格 (10 mg * の場合) Fmoc 固相合成法 凍結乾燥品(全品 HPLC およびマススペクトルデータを添付します) 4 ~ 5 週間(配列によって異なる場合があります) ¥3,100 /残基(10 ~ 25 アミノ酸残基の場合) 純度> 80% :¥25,000 精製料 (上記価格 純度> 90% :¥35,000 に加算) 純度> 95% :¥50,000 上記の価格は 10 ~ 25 アミノ酸残基の料金です。それ以上の場合は別途お見積りとなります。 * 10 mg 未満および大量合成も可能です。詳細はお問い合わせ下さい。 ※ 9 アミノ酸残基以下の場合は 10 アミノ酸残基の場合と同一価格です。 ※ ペプチドの合成難・精製難が生じた場合,納期が遅延する場合があります。 6 ペプチド・ペプチドアレイ ※ 価格,納期はご指定の配列,合成量等により変動しますので,その都度お見積りします。 オプションサービス ※ 各オプションサービスの追加料金は,お問い合わせ下さい。 項 目 MAP レジンによる MAP ペプチドの合成(未精製品) キャリアータンパク質(KLH, BSA 等)との複合体生成 アセチル化 N 末端の FITC 標識/ FAM N 末端のビオチン化 メチル化 ミリスチル化 C 末端のアミド化 リン酸化 環状ペプチドの合成 同位体含有ペプチドの合成 D 体アミノ酸含有ペプチドの合成 ご注文方法 フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/download/)に掲載の専用依頼書に必要事項をご記入の上,当社受託・特注品業務 担当まで Fax でお送り下さい。直送をご希望の方は,その旨依頼書に記載して下さい。また,フナコシホームページからのオンラインオー ダーおよびお見積りも可能です(http://www.funakoshi.co.jp/forms/jutaku_form/form_peptide.php)。 ※ ご注文内容についての秘密は厳守いたします。必要な場合は,秘密保持契約をいたします。ご不明な点は,お気軽にご相談下さい。 ※ 配列により合成不可となる場合や,完成品の収量,純度がご指定よりも低くなる場合があります。状況により,ご相談の上キャンセル とさせていただく場合がありますのでご了承下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 73 長鎖ペプチド合成受託サービス 数残基の短いペプチドから数十残基の長いペプチドまで,あらゆる長さのペプチド合成を承ります。 特 長 仕 ◆ 化学合成が困難とされる,長いペプチド(約 50 残基~)はバ 様 ● 合成法……固相・液相合成法,バクテリア発現系 ● 残基数……ご要望にお応えします クテリア発現系で合成します。 ◆ mg オーダーから kg オーダーまで,ご要望に応じて合成しま ● 合成量……mg ~ kg オーダー(ご要望にお応えします) ● 精製純度…未精製~> 98% す。 ● 形状………凍結乾燥品 ペプチド・ペプチドアレイ 6 ● 検定法……HPLC 分析データおよび質量分析データ標準添付 標準価格 オプションの例 ● 最低価格…¥23,000 ※ 下記以外にも,様々な合成ペプチドの修飾を承ります。詳細は *1 お問い合わせ下さい。 ● 1 残基当たりの価格(1 ~ 30 残基の場合) *2 [メーカー:GSC ] 純 度* 3 合成量 1 ~ 4 mg 5 ~ 9 mg 10 ~ 14 mg 15 ~ 19 mg 20 ~ 24 mg 未精製 > 80% > 90% > 95% ¥1,000 ¥2,000 ¥2,000 ¥2,000 ¥2,000 ¥3,000 ¥3,000 ¥4,000 ¥4,000 ¥4,000 ¥3,000 ¥4,000 ¥4,000 ¥5,000 ¥5,000 ¥3,000 ¥4,000 ¥5,000 ¥5,000 ¥6,000 ● リン酸化 ●ジスルフィド化 ● アセチル化(N 末端) ● FITC 標識(N 末端) ● アミド化(C 末端) ●ビオチン標識 ● MAP ペプチドの合成 ● キャリアータンパク質(KLH, BSA 等)との複合体形成 * 1 合計価格が最低価格に満たない場合は,最低価格を申し受け ます。 * 2 31 残基以上の価格については,お問い合わせ下さい。 * 3 脱塩精製や,上記以外の純度(~> 98%)も承ります。 ご注文方法 フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/download/)に掲載の専用依頼書に必要事項をご記入の上,当社受託・特注品業務 担当まで Fax でお送り下さい。またお急ぎの場合は,Express サービスもございます。詳細はお問い合わせ下さい。 環状ペプチド合成受託サービス 独自のノウハウによる HiPep® テクノロジーを駆使し,環状ペプチド等,合成が困難なペプチド,および誘導体関連物質を確実に合成し, 迅速にお届けいたします。また,目的に最適なペプチドのデザインにも応じます。 特 長 ◆ 難易度の高いシークエンス,長鎖ペプチド(小タンパク質),複数のジスルフィド結合,各種修飾基の導入等も承ります。 ◆ 各種誘導体(ビオチン化・リン酸化・硫酸化・免疫のための誘導体化・複合体等)もご相談下さい。 ※ 製品の仕様の詳細は,フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)をご覧いただくか,お問い合わせ下さい。 74 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 ペプチドアレイ・ペプチドセット 作製受託サービス JPT Peptide Technologies 社は,多種類のペプチドを効率的に合成可能な独自の SPOT 技術により,ペプチドアレイおよびペプチ ドライブラリーの作製受託サービスを提供しています。PepSpot, SPOT, PepStar は,SPOT 技術を用いて作製したペプチドアレイま たはペプチドライブラリーです(下記参照)。キナーゼ,ホスファターゼ,プロテアーゼといった酵素と基質との相互作用を解析するツー ルや,抗体のエピトープ解析用ツールなどがあります。 特許を有する SPOT 技術 ① セルロースメンブレン上でペプチドを合成します。“PepSpot”としてセルロースメンブレンのペプチドアレイを提供します。 ② メンブレン上に形成されたスポットをパンチで切り出しマイクロプレートに入れます。メンブレンとペプチド間のリンカーを化学的に 切断し,ペプチドを溶出させます。“SPOT”として多種類のペプチドセットをマイクロタイタープレートで提供します。 合成工程でペプチドの精製も同時に行うことができます。 SPOT 技術とマイクロアレイの作製 メンブレン 1. 活性化 2. スペーサー/ リンカー付加 SPOT-合成 ①PepSpot (メンブレン) メンブレンのパンチ アウトとリンカーの 化学的切断 ガラススライド にスポット ②SPOT (マイクロプレート) ③PepStar (ガラススライド) Ac ペプチド合成で最後に使用するアミノ 酸には,あらかじめ官能基を付加して おく。 化学選択的な固定 Ac Ac HT-精製 Ac ガラススライド リンカー切断 ガラススライド Ac メンブレン ガラススライドへのペプチドの再固定と精製 Ac ガラススライドに付けたリン カーは,完全長まで合成され たペプチド鎖の官能基と特異 的に結合する。 精製して固定されたペプ チド プリメイドの製品も取りそろえています JPT Peptide Technologies 社のプリメイドペプチドアレイ, およびプリメイドペプチドセットも各種取りそろえています。詳 細については,当社テクニカルサポート (試薬担当:Tel. 03-5684-1620,Fax 03-5684-1775)までお 問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 75 6 ペプチド・ペプチドアレイ ③ 溶出したペプチドをガラススライドにスポットします。“PepStar”としてガラススライドのペプチドアレイを提供します。PepStar は ペプチドアレイ/ペプチドセット PepSpot(メンブレンペプチドアレイ) Micro-Scale Peptide Set(SPOT) セルロースメンブレンのペプチドアレイを作製する受託サービ 50 ~ 250 nmol のペプチドを,一度に 1,000,000 種類まで受 スです。目的とする因子とペプチドとの相互作用のスクリーニン 託合成します。合成したペプチドは,未精製の状態で 96 ウェル グをメンブレン上で行うことができます。1 枚のメンブレンに のマイクロプレートで納品します。 5,000 種類までのペプチドをスポット可能です。 ※ すべてのペプチドは,C 末端にグリシンが付加されています。 適用例 ペプチド・ペプチドアレイ 6 適用例 ● 抗体エピトープマッピング ● ゲノム全長におけるペプチドライブラリー ● エピトープの機能解析 ● バイオマーカースクリーニング ● タンパク質間相互作用部位の特定 ● T 細胞エピトープマッピング ● レセプター - リガンド相互作用解析 ● GPCR リガンド探索 ● 酵素 - 基質相互作用解析 ● シグナル伝達経路に関わるタンパク質モジュール解析 ● ヒートショックタンパク質の認識配列解析 PepStar(ガラススライドペプチドアレイ) ガラススライドのペプチドアレイを作製する受託サービスで す。一度に 200 枚までの複製アレイを作製できます。 Macro-Scale Peptide Set 純度 70 〜 95% 以上のペプチドを受託合成します。1 mg 〜数 百 mg のペプチドを,一度に 1,000 種類まで合成可能です。 適用例 適用例 ● 抗原の主要抗原決定基マッピング ● ペプチドスキャンによる T 細胞エピトープマッピング ● オーファン酵素の基質同定 ● T 細胞刺激のためのペプチドプール ● 既知酵素基質の至適条件検討 ● GPCR リガンド探索のカスタムライブラリー ● シグナル伝達経路解明 ● ハイスループット抗体産生のためのペプチド抗原 ● 混入した酵素の活性検出 BioTides(ペプチドセット) 30 種類以上のビオチン標識ペプチドを受託合成します。合成 したビオチン標識ペプチドはストレプトアビジンをコートした ビーズ,メンブレン,ガラススライドやマイクロプレートなどに 固定化して各種スクリーニングアッセイやペプチドアレイなどに 使用できます。 ※ すべてのペプチドは,C 末端にグリシンが付加されています。 適用例 ● ELISA の捕捉用ペプチド ● キナーゼ,ホスファターゼ,HDAC など酵素基質のスクリーニ ング ● タンパク質間相互作用部位のマッピング(ELISA,免疫沈降法) ● ペプチドマイクロアレイの作製 ● アフィニティクロマトグラフィー用カラムの作製 76 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 キナーゼ解析用アレイ/基質ペプチドセット Kinase Peptide Microarray PhosphoSite-Detector ヒトキナーゼで既知のリン酸化部位に基づくペプチド,または チロシン・スレオニン・セリンのいずれかを含みランダムに設計 したペプチドをスポットするガラススライドアレイです。キナー ゼ基質の同定やキナーゼの基質特異性のプロファイリングに有用 です。 タンパク質の 配列 ペプチド 1 ペプチド 2 ペプチド 3 PhosphoSite-Detector アミノ酸配列が少しずつオーバーラップするように合成したペ リン酸化部位 プチドをスポットするガラススライドアレイです。キナーゼが標 6 適用例 ペプチド・ペプチドアレイ 的とするタンパク質のリン酸化部位の解析に有用です。 [γ-32P]-ATPと キナーゼを添加 リン酸が結合 ● キナーゼ基質ペプチドの推定 ● 基質タンパク質の潜在的リン酸化部位の検出 ● 自己リン酸化部位の検出 ● 目的タンパク質の上流キナーゼの推定 ラジオアイソ トープを検出 ● 情報伝達経路の解明 Kinase Substrate Set リン酸化部位の解析 マイクロタイタープレートに入ったビオチン標識キナーゼ基質 のセットです。基質はヒトタンパク質由来の 13 残基のペプチド で,配列の中央にリン酸化部位を含みます。 Single Kinase Substrate Peptide ヒトキナーゼで既知のリン酸化部位に基づく 13 mer のペプチ ド基質です。 ホスファターゼ解析用アレイ/基質ペプチドセット Phosphatase Peptide Microarray ヒトホスファターゼで既知のリン酸化部位に基づくリン酸化ペ Phosphatase Substrate Set マイクロプレートに入ったホスファターゼ基質のセットです。 プチドをスポットするガラススライドアレイです。ホスファター ペプチド配列の中央にあらかじめ化学的にリン酸化された部位が ゼ基質の同定やホスファターゼの基質特異性のプロファイリング 含まれています。 などに有用です。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 77 プロテアーゼ解析用アレイ/基質ペプチドセット ProteaseSPOT Protease Substrate Set マイクロプレートに入った Dabcyl および EDANS で標識して セルロースメンブレン上で合成した蛍光標識ペプチドのスポッ 蛍光を消光させたプロテアーゼ基質(P4 ~ P4' 位を含む)のセッ トを切り出したディスクを,96 ウェルマイクロプレートに入れ トです。 た製品です。 適用例 ペプチド・ペプチドアレイ 6 適用例 ● プロテアーゼ基質,切断部位の同定 ● ペプチドスキャンによる切断部位の検出 ● プロテアーゼ基質特異性プロファイリング ● de novo ライブラリーによる新規基質の同定 ● プロテアーゼ阻害物質の解析 ● 既知基質でのプロテアーゼ活性の測定 Protease Peptide Microarray 蛍光標識プロテアーゼ基質(P4 ~ P4' 位を含む)をスポット するガラススライドアレイです。プロテアーゼ基質の同定やプロ テアーゼの基質特異性のプロファイリングなどに有用です。 エピトープマッピング/ T 細胞解析用アレイ/ペプチドセット RepliTope PepSpot セルロースメンブレン上にペプチドが固定化されたペプチドア レイです。メンブレンは数回再利用が可能で,1 ~ 2 種類の抗体 抗原 エピトープ解析を行えます。 RepliTope ペプチドのデザイン 抗原 抗体のエピトープマッピング用のペプチドアレイです。少しず ペプチド つオーバーラップした抗原ぺプチドをガラススライドにスポット ペプチド します。一度に 200 枚までの複製アレイが作製可能なため,多 ペプチド ペプチド くの抗体クローンのエピトープマッピングに有用です。 ペプチド ... 個々のペプチドをガラススライドに スポットした後,抗体とインキュベート Micro-Scale Peptide Set(SPOT) 50 ~ 250 nmol のペプチドを,一度に 1,000,000 種類まで受 託合成します。合成したペプチドは,未精製の状態で 96 ウェル のマイクロプレートで納品します。 ※ すべてのペプチドは,C 末端にグリシンが付加されています。 シグナルの解析(化学発光または蛍光) PepMix 抗原のアミノ酸配列を少しずつオーバーラップするように合成 するペプチド混合物です。抗原特異的な T 細胞を効果的に活性化 できます。ワクチン開発や診断研究など免疫反応のモニタリング に有用です。 エピトープのマッピング ご注文方法 ※ ご注文時にご提供いただく情報(ペプチドシークエンス,レイアウト等)やご注文方法は,お問い合わせ下さい。 ※ ペプチドマイクロアレイを用いた酵素のプロファイリングサービスも承ります。基質の識別や,ハイスループットスクリーニングアッ セイの開発,情報伝達経路の解明,酵素活性抑制物質の開発などに有用です。詳細はお問い合わせ下さい。 78 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 変異体タンパク質発現クローンライブラリー 作製受託サービス 目的タンパク質の遺伝子に変異を導入した,変異体タンパク質を発現するクローンライブラリーを作製する受託サービスです。 Site-Directed Mutagenesis Library 人工遺伝子合成技術(p.59 参照)と部位特異的変異導入技術の組み合わせにより,タンパク質中の特定部位のアミノ酸を他の 19 種類 のアミノ酸に置換した変異体タンパク質を発現するクローンライブラリーを作製します。タンパク質の機能解析や活性中心の研究に有用で す。 納 品 (pUC57)の混合物(~ 4 μg) ● 各変異体タンパク質発現ベクター(オプション) ● 塩基配列確認データ ● 変異導入部位の塩基分布の統計解析データ 6 Sequential Permutation Scanning Library タンパク質中の連続したアミノ酸について,野生型および野生型以外のアミノ酸に置換した変異型タンパク質を発現するクローンライ ブラリーを作製します。従来のアラニン/システイン置換法よりも系統的かつ効率的にタンパク質の解析が行えます。 納 品 ● 変異体および野生型タンパク質を発現するベクター全種の混合 物(~ 4 μ g) ● 各変異体タンパク質発現ベクター(オプション) ● 塩基配列確認データ ● 変異導入部位の塩基分布の統計解析データ SPVDFJDIFJJIDXFIDFJKJDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJXIDFJKJDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFXDFJKJDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIXFJKJDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDXJKJDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFXKJDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJXJDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJKXDFIALDFOIEIJDASOEUI Randomized and Degenerated Library 先進の縮重オリゴヌクレオチド合成技術により,完全長の人工合成遺伝子にランダム置換または縮重を導入します。 特 長 ◆ 1kb 当たり 1 ~ 20 か所の変異を導入できます。 ◆ 作製した変異導入株は 48, 96 または 192 株を1グループとし て塩基配列を確認します。 ◆ 作製した変異導入株ライブラリーの形状は,下記の 3 種類から 選択いただけます。 納 品(下記のいずれかの形状で) 継代していない形質転換細胞ライブラリーのグリ ● 非継代ライブラリー セロールストック(~ 109 transformants) ● 継代ライブラリー 継代した形質転換細胞ライブラリーのグリセロー ルストックまたは,すぐにクローニングに使用で きる線状 DNA(5 μg) SPVDFKDIFJJIDJFIDFJKJDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFLJIDJFIDFJKJDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJKJDFIALDFMDEIJDASOEUI SPVDFFMIFJJIDJFIDFJKJDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFATJDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFDJIDJFIDFJKJDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJKJDFIALDFOIEITDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIBFJKJDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDTJKJDFIALJFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJKJAFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJKJDFIALDJDIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJKJDFKALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJAJDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJKJFFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJKJDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJFJDFIALDFTIEIJDASOEUI ● クローニング済み ご希望のベクターにサブクローニング後,形質転 ライブラリー 換した細胞のグリセロールストック (継代または非継代) ご注文方法/価格 ご注文方法,お見積りなどの詳細はお問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 79 ペプチド・ペプチドアレイ ● 変異体および野生型タンパク質を発現する 20 種類のベクター SPVDFJDIFJJIDJFIDFJKXDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJKXDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJKXDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJKXDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJKXDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJKXDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJKXDFIALDFOIEIJDASOEUI SPVDFJDIFJJIDJFIDFJKXDFIALDFOIEIJDASOEUI 標的タンパク質の活性阻害ペプチド 設計受託サービス 長いポリペプチド鎖で構成されるタンパク質分子内には,センスペプチド・アンチセンスペプチドとして相互に対応するアミノ酸配列 が散在し,アンチセンスホモロジーボックス(AHB)と呼ばれます。AHB は相互反応を起こし,高次構造の形成と維持に重要な働きをし ていると考えられています 1)。この理論により,タンパク質の構造や活性に関わる部分に対応する相補性ペプチドを設計合成して作用させ るとタンパク質の機能抑制が可能となります。 株式会社蛋白科学研究所では標的ペプチドに対応する相補性ペプチドを設計合成するコンピュータプログラム MIMETIC2)を独自に開発 することに成功しました。 MIMETIC で設計合成したペプチドの約 30%は標的タンパク質の機能を抑制することが期待されます。 ペプチド・ペプチドアレイ 6 受託サービス内容 これまでに設計合成した相補性ペプチドの例 標的タンパク質の機能を制御するペプチド候補を設計します。 (1)タンパク質の標的部位として,以下のような部位が挙げら 1)HIV-1 逆転写酵素阻害ペプチド 3) 2)トロンボモジュリン機能阻害ペプチド 4) れます。 3)アナフィラトキシン C5a を不活性化するペプチド 5) a.リ ガンド,レセプター,基質等との結合部位を構成し 4)カルボキシペプチダーゼ R の活性を抑制する低分子ペプチド 6) ている。 b.ア ミノ酸置換実験等で活性の維持に重要な部位である ことが示されている。 価 格 詳細はお問い合わせ下さい。 c.糖鎖修飾などを受けている部位を含まない。 (2)標 的部位のペプチドは 15 〜 20 アミノ酸の長さが適当と 考えられます。 (3)相補性ペプチド候補の設計には MIMETIC を用います。 (4)タンパク質内の一つの標的ペプチドに対して,相補性ペプ チド候補のアミノ酸配列 10 種類をご提供します。 参考文献 1)Baranyi, L., et al., Nature Med. , 1, 894 ~ 901(1995). 2)Campbell, W., et al., Microbiol. Immunol., 46, 211 ~ 215 (2002) . 3) (特許第 3819226 号) 4) (特公 2004-262910) 5) (特許第 4106691 号) 6) (特許第 4085190 号) 80 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 ポリ・モノクローナル抗体作製受託サービス ポリクローナルまたはモノクローナル抗体を作製する受託サービスです。 フナコシ取り扱いの国内外のメーカーから,お客様のご依頼内容に最適のメーカーをご案内いたします。 サービスの流れ ペプチド・タンパク質からの抗体作製 お客様の抗原ペプチド・ タンパク質のご送付 遺伝子からの抗体作製 抗原のペプチド配列の ご連絡 7 抗体 ペプチド合成 抗原遺伝子の塩基配列また は GenBank Accession No. のご連絡 お客様の抗原遺伝子の cDNA のご送付 人工遺伝子合成・ 発現ベクターへの組み込み 発現ベクターへの組み込み 抗原の発現・精製 キャリアーとの複合体形成 免疫動物への免疫 抗体価の測定 ポリクローナル抗体 モノクローナル抗体 全血採血 細胞融合 抗体精製 スクリーニング ハイブリドーマ樹立 各社サービスの比較 メーカー (有)ジャパン・ラム 抗原の種類 お客様の抗原ペプチド・合成ペプチド 免疫動物 モノクロー ナル抗体 ポリクロー ナル抗体 オプション および特長 マウス ウサギ・ヒツジ・ヤギ・ウマ・ モルモット・ラット・マウス GenScript 社 Abnova 社 お客様の抗原ペプチド・合成ペプ チド お客様の抗原ペプチド・合成ペプチ ド・遺伝子の発現産物 マウス マウス・ラット ウサギ・ヤギ・マウス ウサギ ・コムギ胚芽を利用した無細胞タンパク ・多様な抗体の精製法(アフィニティカラ ・抗原リン酸化ペプチドの合成 質合成系による抗原の作製 ム,Protein A/G カラム,硫安塩析,イ ・抗原混合物をナノ粒子に加工して, ・抗原に完全長タンパク質を使用 オン交換樹脂カラム,ゲルろ過,IgY の 免疫効果を高める 精製など) ・抗体の断片化 ・抗体の標識 ご注文方法 ※価格,納期などについては,ご依頼内容に応じて個別にお見積りいたします。詳細はお問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 81 DNA 免疫による抗膜貫通タンパク質抗体/ 機能性抗体の作製受託サービス DNA 免疫によりポリクロナール抗体/モノクローナル抗体を作製する受託サービスです。 ※ 輸入発売元は日本農産工業株式会社です。 特 長 価格/納期 ◆ 目的タンパク質が GPCR 等の複数回膜貫通タンパク質でも抗 体作製が可能です。 ◆ ネイティブフォームの抗原を認識する抗体作製が可能です。 ◆ ホモロジーの高いターゲットに対する抗体作製が可能です。 ◆ コンサルティングを行いながら作製するため,ご希望に応じた 価格 114 万円~ 310 万円~ ポリクローナル抗体 モノクローナル抗体 納期 3 ~ 4 か月 4 ~ 6 か月 ※ サ ー ビ ス の 詳 細 は, フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ(http://www. funakoshi.co.jp/)をご覧いただくか,お問い合わせ下さい。 スクリーニングを実施する事が可能です。通常はフローサイト メトリーを用います。 抗体 7 マウス腹水採取受託サービス ハイブリドーマ株をお預かりし , 培養 , 移植 , 腹水化をいたします。厳重に飼育管理されたマウスを用いて , ご希望に添った腹水の採取 を行います。腹水の採取は BALB/c マウス,ヌードマウス 2 匹から 10,000 匹まで,ご希望の量に応じます。 ※ マウス腹水採取以外にも,ポリ・モノクローナル抗体作製,抗体・抗原の精製,細胞の大量培養を承ります。詳細は,フナコシホームペー ジ(http://www.funakoshi.co.jp/)をご覧いただくか,お問い合わせ下さい。 基本料金 ご注文方法 ※ 免疫原として使用することができる抗原をご用意いただいた場 合の基本料金です。抗原のハプテン化などが必要な場合には, 追加料金を申し受けます。 ※ ご依頼の内容については秘密保持を厳守していますので,お気 軽にご相談下さい。 ※ 各種受託業務の価格および納期等に関しては,ご依頼の内容に ※ 1 クローン 2 匹以上で承ります。 応じて個別にお見積りいたします。フナコシホームページ ● マウス 1 匹分… …………………………………………… ¥8,000 (http://www.funakoshi.co.jp/download/)に掲載の専用依頼書 ● ヌードマウス 1 匹分… ……………………………………¥12,000 に必要事項をご記入の上,当社受託・特注品業務担当まで Fax でお送り下さい。 抗体・タンパク質の標識承ります ペプチド合成,蛍光色素などの検出試薬,コンビナトリアル・ケミストリーの 3 分野について優れた技術を有する AnaSpec 社 では,抗体を含むタンパク質の蛍光標識を承ります。標識蛍光色素には,FITC,FAM のような一般的に使用されているものや, AnaSpec 社が開発した HiLyte Fluor シリーズ色素があります。 ※ 詳細はお問い合わせ下さい。 82 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 エピトープ解析ツール作製受託サービス JPT Peptide Technologies 社による,エピトープ解析用ペプチドセットの合成受託サービスです。抗原タンパク質のアミノ酸配列を 基に,ご希望のペプチドセットを作製します。Overwrap peptide scan 法により,効率良くエピトープ解析を行えます。 サービス内容 概算価格 ※ 下記の価格はあくまで概算です。予めご了承下さい。 PepSpot セルロースメンブレン上にペプチドが固定化されたペプチドア PepSpot レイです。メンブレンは数回再利用が可能で,1 〜 2 種類の抗体 ・Set-up 価格�������������������������������������¥83,000 のエピトープ解析を行えます。 ・1 残基当たりの合成価格�����������������������������¥210 例)100 種ペプチド(10 残基)のメンブレンアレイを 1 枚 RepliTope 概算価格: ガラススライド上にペプチドが固定化されたアレイです。1 回 ある場合に効率よく解析を行えます。 ※ プリメイドの製品も取りそろえています。詳細については,当 7 ¥83,000 +(¥210 × 10 × 100 種)=¥293,000 ※ アレイ 2 枚の場合は上記価格が 2 倍になります。 抗体 の作製で 200 枚までの複製ができるため,抗体のクローンが多数 RepliTope 社テクニカルサポート(試薬担当:Tel.03-5684-1620,Fax ※ 50 ペプチドから合成を承ります。 03-5684-1775)までお問い合わせ下さい。 ・1 ペプチド当たりの合成価格����������������������� ¥4,200 ・スライドへのプリント価格(1 枚目まで)�����������¥83,000 ・スライドへのプリント価格(2 枚目から)�����������¥28,000 例)100 種ペプチドのガラススライドアレイを 10 枚 抗原 概算価格: (¥4,200 × 100)+¥83,000 +(¥28,000 × 9)=¥755,000 ペプチドライブラリー デザイン 抗原 ペプチド 1 ペプチド 2 All-in-one Service ※ 価格についてはお問い合わせ下さい。 ペプチド 3 ペプチド 4 ペプチド 5 個々のペプチドをガラススライドにス ポットした後,抗体とインキュベート シグナル解析(化学発光または蛍光) エピトープマッピング All-in-one Service エピトープマッピング解析受託サービスです。PepSpot または, RepliTope を用いたエピトープ解析を JPT Peptide Technologies 社にて承ります。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 83 糖鎖合成受託サービス 糖転移酵素を用いた糖鎖合成技術により O -Glycan 誘導体(ペプチド付加),N -Glycan 誘導体を受託合成いたします。 ※ 糖鎖骨格などの詳細はフナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)をご覧下さい。 ※ 合成可能な糖鎖については,お問い合わせ下さい。 O -Glycan 各種 O -Glycan を任意のペプチドに付加して糖ペプチドを合成いたします。 糖鎖骨格例 core1 骨格糖鎖 core2 骨格糖鎖 core3 骨格糖鎖 糖鎖 8 Gal β 1-3GalNAc α 1-peptide GlcNAc β 1-3Gal β 1-3GalNAc α 1-peptide Sia α 2-3Gal β 1-3GalNAc α 1-peptide GlcNAc β 1-6(Gal β 1-3)GalNAc α 1-peptide Gal β 1-3GlcNAc β 1-6(Gal β 1-3)GalNAc α 1-peptide Gal β 1-4GlcNAc β 1-6(Gal β 1-3)GalNAc α 1-peptide GlcNAc β 1-3GalNAc α 1-peptide Gal β 1-4GlcNAc β 1-3GalNAc α 1-peptide GlcNAc β 1-3Gal β 1-4GlcNAc β 1-3GalNAc α 1-peptide ※ core3 骨格は FAM 標識体としても合成可能です。 N -Glycan 各種 N -Glycan をピリジルアミノ(PA)化糖鎖として合成いたします。 糖鎖骨格例 LacdiNAc シアロ糖鎖 フコシル化糖鎖 β4Gal 付加糖鎖 β3GlcNAc 付加糖鎖 GalNAc β 1-4GlcNAc β 1-2Man α 1-6(GlcNAc β 1-2Man α 1-3)Man β 1-4GlcNAc β 1-4GlcNAc-PA Sia α 2-3Gal β 1-4GlcNAc β 1-2Man α 1-6(Gal β 1-4GlcNAc β 1-2Man α 1-3)Man β 1-4GlcNAc β 1-4GlcNAc-PA Gal β 1-4 (Fuc α 1-3) GlcNAc β 1-2Man α 1-6 (GlcNAc β 1-4) {Gal β 1-4 (Fuc α 1-3) GlcNAc β 1-2Man α 1-3}Man β 1-4GlcNAc β 1-4GlcNAc-PA (Gal β 1-4)1-4[GlcNAc β 1-6(GlcNAc β 1-2)Man α 1-6{GlcNAc β 1-4(GlcNAc β 1-2)Man α 1-3} Man β 1-4GlcNAc β 1-4GlcNAc-PA] (GlcNAc β 1-3) 1-4 [Gal β 1-4GlcNAc β 1-6 (Gal β 1-4GlcNAc β 1-2) Man α 1-6{Gal β 1-4GlcNAc β 1-4 (Gal β1-4GlcNAc β 1-2)Man α 1-3}Man β 1-4GlcNAc β 1-4GlcNAc-PA] ※ 詳細についてはお問い合わせ下さい。 ※ 商用目的でご利用される場合は,別途契約が必要です。 糖鎖関連化合物合成受託サービス 糖鎖関連化合物を中心とした高度な有機化学合成技術を用いた合成受託サービスです。 特 長 ◆ グルコース,ガラクトースなどの単純な糖鎖から LeX, Lea など最近話題の糖鎖分子,それを用いた誘導体,その他リポソーム,界面活 性剤,蛍光・UV 標識化合物など複雑な化合物の合成も承ります。 ◆ 合成した化合物へのビオチン・アビジン,特殊抗体,抗原,酵素などの結合も可能です。 ◆ 特許・文献の追試,生産性の向上,スケールアップの検討,新規化合物に関しても,文献調査から合成ルートの開発,マニュアル化ま で承ります。 ※ 詳細についてはお問い合わせ下さい。 84 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 糖鎖関連化合物合成受託サービス 糖鎖関連化合物を始めとする複雑なキラル分子を,最新の革新的な手法により合成する受託サービスです。 特 長 合成対象化合物の例 ●糖タンパク質/固相固定化糖 ●キラル化合物 設計,プロセス開発・最適化,スケールアップ,プロセス評価 ●ラクトン ●イミノ糖 を行います。 ●非天然 ◆ 高度な知識と豊富な経験を有するスタッフにより,合成経路の L- 型糖 ●オリゴ糖 ◆ 目的物質合成のステップ数を減らしたり,効率的な多段階反応 による合成が可能です。 ※ 詳細についてはお問い合わせ下さい。 ◆ mg スケールから kg スケールまでの受託合成に対応します。 糖鎖導入・修飾受託サービス ヒト型糖鎖の合成や,機能性糖鎖をタンパク質上に構築することが可能です。 ※本技術は,糖転移酵素の基質特異性に依存するため,必ずしもすべてのタンパク質やペプチドに適用できるわけではありません。 ていません。また,糖鎖機能解析において,研究対象とな る糖タンパク質は,天然抽出物・各種タンパク質発現系に よるものを含め,均一な糖鎖構造を持つものを入手するこ とは容易ではありませんでした。 株式会社グライコジーンでは,組換え体ヒト糖転移酵素 を用いて,様々なタンパク質やペプチドに糖鎖を導入する Intens. [a.u.] 生体内のタンパク質の多くは糖タンパク質であるといわ れていますが,その修飾糖鎖の機能はまだ十分に解明され 500 400 300 200 100 0 GalNAc転移反応前 GalNAc 転移反応前 糖鎖なし + 1,000 500 1 1 2 3 4 M で発現させた組換え体タンパク質 kDa ◆プロテアーゼ耐性の向上 ◆レセプター認識糖鎖リガ ンド導入による機能付与 3 3か所付加 ヶ所付加 2か所付加 2ヶ所付加 1か所付加 1ヶ所付加 タンパク質試料に対し,GalNAc を転移させた。 (質量分析による解析結果。左:転移前,右:1〜3か所に転移)。 ◆タンパク質の可溶性向上 + GalNAc GalNAc転移反応後 転移反応後 1,500 0 糖鎖導入の効果 糖鎖付加 2,000 タンパク質への GalNAc 導入例 サービスの提供を開始しました。 糖鎖付加 Intens. [a.u.] 糖鎖導入・修飾の例 修飾糖鎖について 38 31 24 糖鎖修飾 タンパク質 17 ... など GalNAc 2 ポリペプチド GalNAc 転移酵素で GalNAc を転移 Gal 3 ガラクトース転移酵素で Gal を転移 Sia 4 シアル酸転移酵素で Sia(Neu5Ac) を転移 サービス内容 本サービスでは,すべてのタンパク質・ペプチドに必ず糖鎖を 導入することができるというわけではないので,以下のように事 前評価を行った後,段階的にサービスを提供させていただきます。 1. 評価用試料への糖鎖導入・修飾 (試料スケール:最大 1.0 nmol) ⅰ)ポリペプチド GalNAc 転移酵素(3 種類)を用いた O - グリカン付加に関する事前評価 ⅱ)O - グリカン付加(三糖まで:core 1,core 3 などシア ル酸も可能) 2. 目的タンパク質・ペプチドへの糖鎖導入・修飾 (試料スケール:最大 10.0 nmol) 3. 目的タンパク質・ペプチドへの糖鎖導入・修飾 (試料スケール:最大 100.0 nmol) http://www.funakoshi.co.jp/ タンパク質への糖鎖導入例 組換え体タンパク質に対し,1〜3種類のヒト糖転移酵素を作用させた。使用した糖転 移酵素に応じた糖鎖が付加した電気泳動像が得られた。 価 格 1. 評価用試料への糖鎖導入・修飾 (試料スケール:最大 1.0 nmol) ⅰ)糖転移酵素(3 種類)を用いた事前評価,契約時: …600,000 円 / 試料 ⅱ)三糖構造の糖鎖導入が完了したタンパク質納入時: …1,200,000 円 / 試料 2.,3. 目的タンパク質・ペプチドへの糖鎖導入・修飾 最大 10.0 nmol スケール,最大 100.0 nmol スケールおよび それ以上のスケールでの糖鎖導入・修飾に関しては,ご要望 に応じてお見積りさせていただきます。 ※ご注文方法,お見積りなどの詳細はお問い合わせ下さい。 フナコシ受託わーるど 2009-2010 85 8 糖鎖 株式会社グライコジーンの組換え体ヒト糖転移酵素を用いて,タンパク質やペプチドなどへの糖鎖導入や修飾を行う受託サービスです。 GlycoCut 各種生体試料からの 糖鎖切り出し受託サービス お客様からご提供いただいた組織,細胞,血清,精製糖タンパク質などの各種生体試料から,無水ヒドラジンによる分解反応により,糖 鎖を切り出す受託サービスです。 ※本技術は,香川大学総合生命科学実験センター糖鎖機能解析研究部門との共同研究によるものです。 特 長 本技術で切り出した糖鎖の HPLC 分析例 ◆ 無水ヒドラジン分解法を用いるため,N - 結合型糖鎖・O - 結合 型糖鎖を問わず強力に糖鎖を遊離でき,高収率で再現性のある 糖鎖回収が可能です。 ◆ 糖鎖切り出しに用いる無水ヒドラジンは爆発性を有する有害な 物質ですが,本サービスは熟練したスタッフが専用の設備を用 いて操作を行うため安心・確実です。 ◆ 切り出した糖鎖の還元末端はピリジルアミノ(PA)標識*され ているため,化学的に安定かつ,HPLC での感度・分離能が高 糖鎖 8 くなっています。 試料:ニワトリの卵白アルブミン ◆ 切り出した糖鎖は,粗画分,粗製分,精製品とご希望の精製度 で提供できます。 *反応性基を有するアミノ体またはヘミアセタール体としても提 供できます。 用 途 ● グライコミクス研究の解析用糖鎖試料の調製 ● ヒト型糖鎖を用いた創薬分子の探索研究 ● ヒト型糖鎖を用いたバイオマテリアルの研究開発 試料:ニワトリの卵黄 ● 抗糖鎖抗体作製用の抗原糖鎖の分離・精製 価格/納期 基本メニュー(1試料は乾燥粉体で最大 300 mg まで) 1. 基本料金(1試料処理分を含む):20 万円/オーダー 2. 追加試料処理価格(2 試料目から):5 万円/試料 ※ 価格および納期についてはご依頼の内容に応じ,その都度お見 積りいたします。詳細はお問い合わせ下さい。 ご注文方法 ご依頼をいただいた後,専用チューブをお送りしますので,糖 鎖含有生体試料(乾燥粉体で 1 ~ 300 mg)をお送り下さい。 ※ 生体試料は,アセトンパウダーまたは凍結乾燥粉末をお送り下 さい。凍結乾燥粉末で脂質成分の含有量が多い試料の場合,糖 鎖の収率に影響が出る可能性があります。 試料:イカの皮 ※ 生体試料にはニトロ化合物,重金属類が含まれていないことを ご確認下さい。 データ提供:大阪大学大学院理学研究科 長束 俊治 准教授1) ※ 感染性を有する生体試料はお引き受けできません。また,増田 化学工業株式会社で生体試料の受入検査を実施いたします。 ※ O - 結合型糖鎖については,還元末端のピーリングが若干発生 する可能性があります。 引用文献 1)Natsuka, S., et al., J. Biochem ., 140, (1), 87 ~ 93(2006). ※ 本サービスは,全工程において反応の進行確認を行いますが, お客様にお返しする糖鎖の量・内容などについて保証するもの ではありません。 86 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 糖鎖分析受託サービス 質量分析を用いて糖タンパク質の糖鎖プロファイリング/組成分析,および糖鎖構造解析を行う株式会社グライコジーンの受託サービ スです。 精製された試料だけではなく,細胞,組織,体液などの試料から糖鎖を切り出し,N - グリカンや O - グリカンの糖鎖分析を行います。 サービス内容 糖鎖プロファイリング/組成分析 N - 結合型/ O - 結合型中性糖鎖,または N - 結合型/ O - 結合 糖鎖分析の流れ 1. 事前評価 ・事前評価用微量試料(通常 10 μg)の送付 (必要に応じて NDA:秘密保持他,必要契約条項締結) 型酸性糖鎖について,MS 解析により糖鎖プロファイリングや組 ・事前評価(分析) 成分析を行います。 ・事前評価の結果連絡 ・お見積りの連絡 ◆ 分析に必要な試料量:100 μg * 1 2. 分析依頼受託 ◆ 試料濃度:100 μg/100 μl 3. 試料送付(Material Transfer Agreement 締結) ◆ 納期:約 2 〜 4 週間 ◆ 価格* 2:300,000 〜 500,000 円/試料 なります。 * 2 分析内容および試料の状態により異なりますので,事前評価 後にお見積りをいたします。事前評価の実費は別途申し受け ます(酸性糖鎖の分析では,中性糖鎖の分析結果が事前評価 を兼ねますので,新たな費用は発生しません)。詳細はお問 8 ・酸性糖鎖分析用:100 μg 糖鎖 * 1 糖タンパク質の糖鎖含有量や糖鎖切り出しの難易度により異 ・中性糖鎖分析用:100 μg 4. 段階的分析 ・中性糖鎖分析 (N - 結合型中性糖鎖分析/ O - 結合型中性糖鎖分析) ・酸性糖鎖分析 (N - 結合型酸性糖鎖分析/ O - 結合型酸性糖鎖分析) ・MSn 分析による糖鎖構造解析 い合わせ下さい。 MS 分析による糖鎖構造解析 n 多段階タンデム質量(MSn)分析結果により糖鎖構造の解析を 行います。 事前情報のご提供について 糖鎖分析のご依頼にあたり,下記の情報についてお知らせ下さい。 ・試料の由来(ヒト,動物,鳥,昆虫,組織,細胞など) ・試料糖タンパク質の分子量(SDS-PAGE レベル) ・試料の純度 ◆ 分析に必要な試料量:300 μg 以上 ・分析レンジ(分子量の範囲) ◆ 試料濃度:100 μg/100 μl 以上 ・その他の糖鎖情報(糖鎖の本数,種類など) ◆ 納期:約 4 〜 5 週間 ◆ 価格:約 600,000 円/試料 ※ 分析内容および試料の状態により異なります。詳細はお問い合 わせ下さい。 ご注文方法/価格 ご注文方法,お見積りなどの詳細はお問い合わせ下さい。 ※ 微量な糖鎖の分析には特殊な化学修飾や高感度化の手法を必要 とする可能性があります。必要な情報を事前にご相談させてい ただく場合もあります。また糖鎖によっては構造を決定できな い場合もあります。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 87 シュガーチップを用いた SPR 解析受託サービス 糖鎖を固定化したチップを用いた SPR(Surface Plasmon Resonance:表面プラズモン共鳴)解析受託サービスです。タンパク質 やウイルスなどの目的物質と糖鎖との相互作用を,標識することなくリアルタイムかつ網羅的に測定できます。 特 長 シュガーチップに固定化された糖鎖の種類 ◆ リンカー分子を介して糖鎖を金薄膜に固定しています。 ◆ 目的物質を標識せずに,糖鎖との相互作用解析を行います。 サービス内容 SPR イメージング 1 回の測定で多種類の糖鎖に対する結合性を測定します。 a)結合がない状態 糖鎖 8 b)Con A の結合挙動 各スポットの輝度を定量化 100 90 80 70 60 D9 D7 D5 D11 C9 D3 C7 D1 C5 C11 C3 C1 B9 B7 B5 B3 B11 B1 A9 A7 A5 A3 A1 10 0 c)RCA120 の結合挙動 A11 50 40 30 20 100 90 80 70 60 C1 C3 C5 C7 C9 C11 D1 D3 D5 B11 C1 C3 C5 C7 C9 C11 D1 D3 D5 D9 B11 B9 D7 B9 B7 D11 B7 B5 D9 B5 B3 D11 B1 B3 B1 A11 A11 A5 A7 A9 A3 A5 A9 A1 A7 A3 10 0 d)Lotus の結合挙動 A1 50 40 30 20 100 90 80 70 60 10 0 D7 50 40 30 20 1 枚のチップ上に 48 種類の糖鎖を固定したアレイ型のシュガーチップを用いて,糖鎖結 合性タンパク質であるレクチン(Con A, RCA120, Lotus)の結合挙動を測定した。 速度解析 1 枚のチップに 1 種類の糖鎖を固定したシュガーチップを用い て結合挙動の測定および速度論的解析を行います。 ※ シュガーチップの種類は右記をご覧下さい。 コード A401 A602 B401 C401 D301 糖鎖構造 Glc α 1-4Glc Glc α 1-6Glc α 1-4Glc Glc β 1-4Glc Gal α 1-4Gal β 1-4Glc Gal β 1-3GalNAc α 1-6Glc コード A601 B301 B601 C601 D302s 糖鎖構造 Glc α 1-6Glc Glc β 1-3Glc β 1-3Glc Glc β 1-6Glc Gal α 1-6Glc Gal β 1-3[Fuc α 1-4] GlcNAc β 1-6Glc Gal β 1-4Glc D401 D303s Gal β 1-3GalNAc β 1-4 [Neu5Ac α 2-3]Gal β 1-4Glc β 1-6Glc D402 Gal β 1-4GlcNAc β 1-6Glc D403s Gal β 1-4[Fuc α 1-3] GlcNAc β 1-3Gal β 1-6Glc E201 Fuc α 1-2Gal β 1-4Glc E601 Fuc α 1-6Glc F601 Fuc β 1-6Glc G201 Man α 1-2Man G601 Man α 1-6Man G301 Man α 1-3Man α 1-6Man H601 Xyl β 1-6Glc I601 GlcNAc α 1-6Glc J401 GlcNAc β 1-4GlcNAc J601 GlcNAc β 1-6Glc K601 GalNAc α 1-6Glc L301 GalNAc β 1-3Gal M101 GlcNS α 1-4GlcA β 1-6Glc M102 GlcNS α 1-4IdoA α 1-6Glc M301 GlcNS6S α 1-4GlcA2S β M302 GlcNS6S α 1-4IdoA2S α 1-6Glc 1-6Glc N301 Neu5Ac α 2-3Gal β N302 Neu5Ac α 2-3Gal β 1-3GlcNAc β 1-6Glc 1-3GalNAc α 1-6Glc N401 Neu5Ac α 2-3Gal β 1-4Glc N402 Neu5Ac α 2-3Gal β 1-4Glc β1-6Glc N404 Neu5Ac α 2-3Gal β O301 Neu5Ac α 2-6Gal β 1-4GlcNAc β 1-6Glc 1-3GlcNAc β 1-6Glc O302 Neu5Ac α 2-6Gal β O401 Neu5Ac α 2-6Gal β 1-4Glc 1-3GalNAc α 1-6Glc O402 Neu5Ac α 2-6Gal β O404 Neu5Ac α 2-6GalNAc α 1-4GlcNAc β 1-6Glc 1-6Glc P401 Neu5Ac α 2-8Neu5Ac α Hep Heparin 2-3Gal β 1-4Glc β 1-6Glc Cho Chondroitin CSA Chondroitin A CSB Chondroitin B CSC Chondroitin C CSD Chondroitin D Hya Hyaluronan ※ 上記ライブラリーは,予告なく変更する事があります。 ※ 還元末端糖は開環しています。 ※ コード番号 M101,M102,M301,M302 の糖鎖構造中の S は, 硫酸基を表しています。 ご注文方法/価格 ご注文方法,価格などの詳細はお問い合わせ下さい。 シュガーチップ作製受託サービス ご提供いただいた糖鎖を用いたオリジナルのシュガーチップ の作製も承ります。詳細はお問い合わせ下さい。 Glcα1-4Glc のシュガーチップに対する Con A の結合挙動 質量分析サービス シュガーチップに結合した糖鎖結合性タンパク質などを,質量 分析装置を用いて測定します。 ※ ご依頼にあたり,詳細な打ち合わせを行います。 88 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 有機合成受託サービス お客様のご希望に応じて有機化合物を合成する受託サービスです。 フナコシ取り扱いの国内外のメーカーから,お客様のご依頼内容に最適のメーカーをご案内いたします。 特 長 ◆ 文献はあるが合成が困難な化合物,構造は分かるが合成方法が 分からない化合物などを合成します。 ◆ 経験豊富なスタッフにより,幅広い化合物の合成に対応いたし ます。 ◆ お客様が必要な化合物の合成経路を確立し,最適な合成条件を 設定します。 株式会社藤本分子化学 では, 糖鎖化合物を中心とした高度な有機化学 合成技術を有する 有限会社セラジックス ても文献調査を行い,より確実性の高い方法をご提案いたします。 による合成受託サービスです。 ◆ 工程数が多い化合物にも対応しています。 ◆グルコース,ガラクトースなどの単純 ◆ 合成の規模は,ラボスケールとして 50 ml ~ 5 L(最大 10 L な糖鎖から LeX,Lea など最近話題の糖鎖分子,それを用いた まで)です。それ以上の規模をご希望の場合は,提携先にて合 誘導体,その他リポソーム,界面活性剤,蛍光・UV 標識化合 成いたします(数十 L ~)。 ◆ 合成方法の検討(研究),新規合成法の提案,分子設計,CCS(コ ンピューターケミストリーシステム)等の高付加価値を提供で きます。 ◆ ご予算に合わせて実施内容を検討してお見積りすることも可能 です。 ◆ 合成可能な化合物:光学活性化合物,医薬品中間体,液晶化合物, 有機 EL 化合物,高分子化合物(ポリマー),モノマー,DNA に配位する化合物,有機電解質,金属配位子,色素化合物,顔料, 非天然アミノ酸,発光化合物,刺激応答化合物,ナノ微粒子 物など複雑な化合物の合成も承ります。 ◆合成した化合物のビオチン・アビジン,特殊抗体,抗原,酵素 などの結合も可能です。 ◆特許・文献の追試,生産性の向上,スケールアップの検討,新 規化合物に関しても,文献調査から合成ルートの開発,マニュ アル化まで承ります。 ◆有機化合物合成 : 特殊ファインケミカル,糖鎖含有化合物,新 規モノマー,新規ポリマー,ペプチド固相合成(g スケール), 脂質関連化合物などの合成 ◆生化学測定 : 酵素活性測定,細胞活性測定,リポソーム・膜を 用いた各種測定(別途お見積り)。 ◆化合物構造決定 : NMR,FT-IR,元素分析などのデータによる 構造決定(別途お見積り)。 キラル化合物の合成を得意とする ChiroBlock 社 に よ る 有 機 合 成 受 託 サービスです。 ◆標準合成量は,10 mg ~ 200 g です (合成方法やご希望される純度によって変動します)。 ◆合成対象化合物の例:β - アミノ酸,単糖/多糖,脂質,ヘテ ロ化合物,天然有機化合物など 生理活性物質のメーカーとしてお な じ み の BIOMOL ブ ラ ン ド (Enzo Life Sciences 社)による 有機合成受託サービスです。 ◆ mg スケールから kg スケールまでの受託合成に対応します。 ◆ 経験豊富なスタッフにより低分子化合物から脂質,ペプチドミ メティクスまで幅広い化合物の合成に対応いたします。 ◆分析方法:NMR,MS,IR,HPLC,GC-MS,CZE など ご注文方法 フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/download/)に掲載の専用注文書に必要事項をご記入の上,当社受託・特注品業務 担当まで Fax でお送り下さい。詳細についてはお気軽にお問い合わせ下さい。 ※ 価格,納期などについては,ご依頼内容に応じて個別にお見積りいたします。 ※ 必要に応じて秘密保持契約を締結いたします。 ※ 骨格構造だけが決定している場合など,不確定な情報でも対応可能な場合もあります。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 89 9 有機化合物・天然物 合成方法の詳細なデータがなく 脂質合成受託サービス 幅広い脂質の製品ラインナップを有する Avanti Polar Lipids 社の脂質合成受託サービスです。バルク(大容量)での合成も承ります。 合成例 -[6-[(7-nitro-2-1, 3-benzoxadiazol-4-yl)amino]hexanoyl]Sphingosine(C17 base) Phytosphingosine- , , -trimethyl( -chloride salt) ※ ご注文方法,価格,納期などはお問い合わせ下さい。 有機化合物・天然物 9 ポルフィリン合成受託サービス カスタムオーダーによるポルフィリンの合成をお引き受けいたします。ご希望の中心金属およびポルフィリンをお知らせ下さい。 また,各種のテトラピロール,胆汁色素,フタロシアニン等の合成もいたしますので,お問い合わせ下さい。 ※ サービスの詳細は,お問い合わせ下さい。 ※ 化合物によってはお受けできない場合もあります。 ポルフィリン関連化合物の構造 天然物の精製受託サービス 長良サイエンス株式会社では研究用試薬(食品,漢方薬等の薬理活性成分約 100 種類)の製造技術を利用して,受託精製を手がけてい ます。受託精製では主として独自の HPLC 充填カラムを用いた精密な分離精製により 1 ~ 100 g 程度の高純度天然物等を受託精製しま す。 また,微量天然物や不安定物質の迅速な精製,1H-NMR 等の機器分析による構造決定も承ります。 ※ 精製手順の詳細は,フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)をご覧いただくか,お問い合わせ下さい。 90 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 ELISA Kit 構築受託サービス お客様のお手持ちの抗体から ELISA Kit(サンドイッチ法/競合法)を構築する受託サービスです。 ※ ELISA Kit 以外にもご希望に応じて種々のイムノアッセイ系(イムノクロマト法,ラテックス法,プロテインチップ,SPR 等)の構築 をサポートいたします。 特 長 ◆ ペプチド合成や組換え体タンパク質による抗原調製,抗体作製 から,アッセイ系の確立に至るまで一貫した受託が可能です。 ◆ 標準的な作業期間は 3 か月*で,短期間でアッセイ系を確立し ます。 ◆ 感度,測定範囲等については事前にご相談の上,目標値を検討 ご用意いただくもの ● 市販品またはお手持ちの抗体:200 μg 〜 2 mg ● 市販品またはお手持ちの測定対象物質(抗原):50 ~ 500 μg ※ 必要に応じてこれらを調査,準備することも可能です。その際 は実費を申し受けます。 ※ 受託終了後の残余分は返却いたします。 します。 ◆ 測定したい物質に市販のキットがない場合や,抗体はあるが アッセイ系がうまく組めない場合などに有用です。 ◆ アッセイ系確立後も継続的にご使用される場合は,ご希望に応 じて製品として供給できます。 * 抗体の反応性により作製期間は異なります。アッセイ系が確立 できない場合は,別途ご相談させていただきます。 標準キット内容 ● 反応用緩衝液 ● 標識抗体,または抗原 ● 標準液 ● 抗体固相マイクロプレート ● 酵素基質溶液 ● 反応停止液 ● 洗浄液 ● マニュアル ※ 試薬の調製に関する技術情報の開示は原則として行いません。 ご希望の依頼内容を確認後,必要に応じて秘密保持契約を締結 いたします。その後,詳細な打合わせを行い,見積り書を作成い たします。詳細はお問い合わせ下さい。 受託サービス概要 測定を希望される対象物質に関して調査を行い,抗体の有無に応じて下記の内容に従って順次検討を行います。 項目 内容 価格 ・測定対象物質の調査・検討 ・市販抗体の有無調査 ・市販またはお手持ちの抗体の反応性評価 30 万円~ 基礎評価・検討 ・アッセイ系構築可能性評価 ※ 抗原,抗体が入手できない場合は,遺伝子情報からペプチド合成,組換え体タンパク質作製および抗体作製を お受けします。 ・HRP 標識抗体(抗原)作製 ・マイクロプレート固相抗体作製 70 万円~ アッセイ条件確立 ・反応条件最適化 ・性能試験 ※ ご希望の酵素,固相担体,酵素基質などを利用できます。 キット作製 ※10 プレート用の必要試薬を作製します。 50 万円~ http://www.funakoshi.co.jp/ 期間 3 週間~ 4 週間~ 3 週間~ フナコシ受託わーるど 2009-2010 91 アッセイ系構築 10 ご注文方法 アレルゲン特異的 Ig 測定キット 作製受託サービス アレルゲン特異的イムノグロブリンをサンドイッチ ELISA で測定するキットを作製する受託サービスです。400 種類以上の吸入抗原・ 食物抗原の中からご希望のアレルゲンをプレートに吸着してご提供します。 ※ 本製品は研究用です。臨床用途には利用できません。 特 長 価 #A10400A #A10400E #A10400G #A10400M クラス IgA IgE IgG IgM 試料 血清,血漿 測定範囲 0.00 ~ 5.6 mg/ml 0.35 ~ 0.70 PRU/ml 0.20 ~ 21.0 mg/ml 0.20 ~ 2.56 mg/ml 測定波長 450 nm 格 キットは 96 ストリップウェルフォーマット(8 well × 12 strip)で,抗原ラインナップからご希望の抗原を吸着してお届け します。 ※ 各ストリップごとに抗原を選択することも可能ですが,組み合 わせによってはお引き受けできないこともあります。 抗原ラインナップの一例 [メーカー:PYR] 吸入抗原 A. alternata Acacia Aspergillus repens Brown Cockroach Candida albicans Cat Hair Cotton Dust mite Dog Hair F. oxysporum House Dust Human Hair Mesquite Mite Oat Grass Orchard Grass P. communis Penicillium chrysogenum Pigsweed Red Mulberry 品名 IgA, Human, ELISA Kit IgE, Human, ELISA Kit IgG, Human, ELISA Kit IgM, Human, ELISA Kit 商品コード #A10400A #A10400E #A10400G #A10400M 1 1 1 1 価格 kit/ ¥36,000 kit/ ¥36,000 kit/ ¥36,000 kit/ ¥36,000 ご注文方法 食物抗原 アッセイ系構築 10 Anti-Allergen Anti-Allergen Anti-Allergen Anti-Allergen Almond Apple Bacon Carrot Casein Cheddar Cheese Chocolate Cocoa Coffee Crab Egg Kiwi Fruit Lactalbumin Lobster Olive Peach Rice Strawberry Sweet Potato Tuna フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ(http://www.funakoshi.co.jp/ download/)に掲載の専用注文書に必要事項をご記入の上,販売 店担当者にお渡し下さい。 ※ 詳細はお問い合わせ下さい。 ※ 上記以外にも 400 種以上のアレルゲンから選択できます。 AlerCHEK 社ホームページ(http://www.alerchek.com/)をご 覧下さい。 キット内容 ● Allergen coated microwell strip(8 well × 12 strip) ● HRP conjugated goat anti-human IgA/IgE/IgG/IgM * ● TMB/peroxide substrate color developer ● IgA/IgE/IgG/IgM specimen diluent * ● Sulfuric acid termination reagent ● Wash buffer * クラスは各キットごとに異なります。 92 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 Pro5 MHC Class Ⅰ Pentamer ProImmune 社では,単一抗原特異的な CD8 陽性キラー T 細胞の検出・定量を可能にする,MHC タンパク質と抗原ペプチド複合体 の 5 量体を開発しました。従来より知られている MHC-Tetramer に比べ,優れた特長を有しています(下表参照)。 同社ではご指定の抗原ペプチド配列および MHC アリルに基づく MHC タンパク質-抗原ペプチド複合体「Pro5 MHC Pentamer」 を受託合成製品または通常製品(Catalogue Item)として供給します。R-PE(Phycoerythrin),APC(Allophycocyanin),または ビオチンであらかじめ標識した製品と未標識の製品があり,染色条件検討用の FITC 標識抗 CD8 抗体と併せてご購入いただくことも可 能です。Catalogue Item のリストについては,ProImmune 社ホームページ(http://www.proimmune.co.uk/)をご覧下さい。 ※ 本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 Pro5 Pentamer と Tetramer の比較 配向性 標識 標識の自由度 安定性 特 Pro5 Pentamer 5 個の MHC-Peptide 複合体が同一方向で重合しており,5 か所で T 細胞に結合する。 標識部位が 5 か所あるため,従来の Tetramer よりも高い検出感度を示す。 蛍光標識体,ビオチン標識体,非標識体の 3 種類から選択できる。 非標識の Pentamer は- 80℃で長期保存可能で,使用時に標識できる。 Tetramer 3 か所で T 細胞に結合する。 複合体の中心に 1 か所の蛍光標識部位がある。 蛍光標識体(不安定)のみ選択可能。 蛍光標識 Tetramer は 4℃で 6 ~ 12 か月保存可能。 長 ◆ 遺伝子組換え技術を用いているため,安価かつ迅速に,高純度 の MHC タンパク質-抗原ペプチド複合体を合成できます。 MHC タンパク質−抗原ペプチド複合体 5 分子が, Coiled-Coil ドメインで結合しています。 ◆ 合成した複合体は,適切な立体構造の形成と,マルチマーの形 成が確認されています。 ◆ 日 本 人 を 含 む 多 く の ア ジ ア 人 に 見 ら れ る,MHC ア リ ル: A*2402 の MHC タンパク質-抗原ペプチドの受託合成サービ 抗原ペプチド ス,および通常製品(Catalogue Item)も取り扱っています。 11 ◆ Pro5 MHC Pentamer の MHC -抗原ペプチド複合体は一方向 MHC タンパク質 免疫学研究 性に重合しています。その結果,5 つの複合体が同時に T 細胞 レ セ プ タ ー(TCR) と 結 合 で き る た め,T 細 胞 に 対 し て Tetramer よりも非常に高い親和性を示します。 ◆ フローサイトメーターを用いて,抗原特異的なキラー T 細胞を 蛍光色素 高感度に検出できます。 ◆ 1 つ 1 つの Pro5 MHC Pentamer は 5 分子の蛍光色素または ビオチンで標識することが可能なため,高い検出感度が得られ ます。 ◆ Pro5 Pentamer を用いた組織染色により,免疫応答の時間的, 部位的相互作用を測定できます。 ◆ ビ オ チ ン 標 識 Pentamer は, ス ト レ プ ト ア ビ ジ ン を 介 し て 抗原ペプチド APC, R-PE 以外の蛍光色素で検出することができます。 ◆ 未標識の製品は- 80℃ での長期保存が可能です。また,必要 に応じて別売りの Fluorotag または Biotag を用いて標識する MHC タンパク質 ことも可能です。 ◆ MHC タンパク質-抗原ペプチド複合体と同じ配列の,MHC タンパク質が複合していない抗原ペプチドを別売りで購入でき Coiled-Coil ドメイン ます(Matched Peptide)*。このペプチドは,in vitro での T 細胞刺激実験に使用できます。 * 通常製品(Catalogue Item)以外の Pro5 MHC Pentamer をご 注文の場合,Matched Peptide は Pro5 MHC Pentamer の納 品後にご注文をお引き受けいたします。 蛍光色素 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 93 価 格 Pro5 MHC Pentamer + Anti-CD8(FITC)Kit 商品コード F80A F80A F80B F80C F84A F84A F84B F84C F81A F81A F81B F81C F82A F82A F82B F82C Pro5 Pro5 Pro5 Pro5 Pro5 Pro5 Pro5 Pro5 Pro5 Pro5 Pro5 Pro5 Pro5 Pro5 Pro5 Pro5 MHC MHC MHC MHC MHC MHC MHC MHC MHC MHC MHC MHC MHC MHC MHC MHC Pentamer, Pentamer, Pentamer, Pentamer, Pentamer, Pentamer, Pentamer, Pentamer, Pentamer, Pentamer, Pentamer, Pentamer, Pentamer, Pentamer, Pentamer, Pentamer, 品 名 Unlabelled(50 tests)+ Anti-CD8, FITC Kit, Catalog Unlabelled(50 tests)+ Anti-CD8, FITC Kit, Custom Unlabelled(150 tests)+ Anti-CD8, FITC Kit * 1 Unlabelled(500 tests)+ Anti-CD8, FITC Kit * 1 APC(50 tests)+ Anti-CD8, FITC Kit, Catalog APC(50 tests)+ Anti-CD8, FITC Kit, Custom APC(150 tests)+ Anti-CD8, FITC Kit * 1 APC(500 tests)+ Anti-CD8, FITC Kit * 1 Biotin(50 tests)+ Anti-CD8, FITC Kit, Catalog Biotin(50 tests)+ Anti-CD8, FITC Kit, Custom Biotin(150 tests)+ Anti-CD8, FITC Kit * 1 Biotin(500 tests)+ Anti-CD8, FITC Kit * 1 R-PE(50 tests)+ Anti-CD8, FITC Kit, Catalog R-PE(50 tests)+ Anti-CD8, FITC Kit, Custom R-PE(150 tests)+ Anti-CD8, FITC Kit * 1 R-PE(500 tests)+ Anti-CD8, FITC Kit * 1 Pro5 MHC Pentamer 免疫学研究 11 商品コード F0A F0A F0B F0C F4A F4A F4B F4C F1A F1A F1B F1C F2A F2A F2B F2C 包 装 1 set 1 set 1 set 1 set 1 set 1 set 1 set 1 set 1 set 1 set 1 set 1 set 1 set 1 set 1 set 1 set 価 格 ¥204,000 ¥216,000 ¥330,000 ¥794,000 ¥240,000 ¥254,000 ¥384,000 ¥939,000 ¥225,000 ¥238,000 ¥366,000 ¥879,000 ¥225,000 ¥238,000 ¥366,000 ¥879,000 Pro5 Fluorotag 品 名 Pro5 MHC Pentamer, Unlabelled, Catalog Pro5 MHC Pentamer, Unlabelled, Custom Pro5 MHC Pentamer, Unlabelled * 1 Pro5 MHC Pentamer, Unlabelled * 1 Pro5 MHC Pentamer, APC Conjugated, Catalog Pro5 MHC Pentamer, APC Conjugated, Custom Pro5 MHC Pentamer, APC Conjugated * 1 Pro5 MHC Pentamer, APC Conjugated * 1 Pro5 MHC Pentamer, Biotin Conjugated, Catalog Pro5 MHC Pentamer, Biotin Conjugated, Custom Pro5 MHC Pentamer, Biotin Conjugated * 1 Pro5 MHC Pentamer, Biotin Conjugated * 1 Pro5 MHC Pentamer, R-PE Conjugated, Catalog Pro5 MHC Pentamer, R-PE Conjugated, Custom Pro5 MHC Pentamer, R-PE Conjugated * 1 Pro5 MHC Pentamer, R-PE Conjugated * 1 包 50 50 150 500 50 50 150 500 50 50 150 500 50 50 150 500 装 tests tests tests tests tests tests tests tests tests tests tests tests tests tests tests tests 価 格 ¥189,000 ¥200,000 ¥314,000 ¥747,000 ¥225,000 ¥238,000 ¥363,000 ¥891,000 ¥211,000 ¥224,000 ¥349,000 ¥831,000 ¥211,000 ¥224,000 ¥349,000 ¥831,000 商品コード K4A K4B K4C K2A K2B K2C 品 名 APC APC APC R-PE R-PE R-PE 包 50 150 500 50 150 500 装 tests tests tests tests tests tests 価 格 ¥58,000 ¥92,000 ¥221,000 ¥43,000 ¥69,000 ¥167,000 品 名 Biotin Biotin Biotin 包 50 150 500 装 tests tests tests 価 格 ¥43,000 ¥69,000 ¥167,000 Pro5 Biotag 商品コード K1A K1B K1C Matched Peptide * 2 商品コード P0A P0B *1 *2 品 名 Matched Peptide Matched Peptide 包 装 1 mg 2 mg 価 格 ¥15,000 ¥23,000 Pro5 MHC Pentamer の 150 tests と 500 tests は,通常製品(Catalogue Item)と受託合成品で同一価格です。 通常製品(Catalogue Item)以外の Pro5 MHC Pentamer をご注文の場合,Matched Peptide は Pro5 MHC Pentamer の納品後に ご注文をお引き受けいたします。 ※ 通常製品にはない配列の抗原ペプチドでのご注文の場合は,Set-up Charge として 1 pentamer につき,¥60,000 を別途申し受けます (合成に失敗した場合も Set-up Charge は必要となります。また,ProImmune 社に抗原ペプチドの在庫がある場合は,Set-up Charge は 不要となります。詳細はお問い合わせ下さい)。 ご注文方法 ● フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/download/)に掲載の専用注文書の電子ファイルをダウンロードし,必要事項をご 記入の上,電子メール([email protected])に注文書の電子ファイルを添付してお送り下さい。 ● 通常製品(Catalogue Item)については,ProImmune 社ホームページ(http://www.proimmune.co.uk/)からご選択下さい。 ● ご希望の製品が通常製品(Catalogue Item)にない場合は,受託合成も承ります。MHC のアリル,標識の種類を,下表よりご選択下さい。 また,表中にないアリルをご希望の場合は,お問い合わせ下さい。 A*0101 A*0201 A*0301 A*1101 A*1103 A*2402 A*2902 A*6801 HLA(Human) B*0702 B*0801 B*1402 B*1501 B*2705 MHC のアリル H-2(Mouse) Mamu(Simian) B*3501 E*0101 Db Kb Ld Mamu-A*01 d d K Mamu-A*02 B*3508 D B*4001 B*5101 B*5401 標識物質 RT(Rat) Chimaeric RT1Al A*0201/kb APC(Allophycocyanin) R-PE(R-Phycoerythrin) Biotin ※ 配列により合成が困難な場合や,不可能となる場合がありますのでご了承下さい。 94 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 MHC Class Ⅱ Ultimer ProImmune 社では,単一抗原に特異的な CD4 陽性ヘルパー T 細胞の検出・定量を可能にする,MHC Class Ⅱタンパク質と抗原ペ プチドの複合体「MHC Class Ⅱ Ultimer」を開発しました。独自の平面立体構造により CD4 陽性 T 細胞に高い親和性で結合し,最適 化された蛍光標識により高感度に検出できます。 ご指定の抗原ペプチドの配列および MHC アリルに基づいて受託合成いたします。 ※ 本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 Ultimer と Tetramer の比較 Ultimer 抗原ペプチドが平面的に配置されており,各ペプチド間の距離が最適 化されている。またヒンジにより MHC タンパク質の T 細胞レセプ ターへの結合性が向上している。 最良のシグナル/ノイズ比が得られるよう最適化されている。APC または R-PE の 2 種類の標識が選択できる。 MHC Tetramer などとほぼ同様の手順で細胞染色が可能。 立体構造 標識 互換性 Tetramer 正四面体構造をしており,中心のストレプトアビジンから 3 方向に MHC- ペプチド複合体が配置されている。 ストレプトアビジン標識で,通常はシグナル/ノイズ比等が最適化さ れていない。 染色時間(1 ~ 3 時間)や温度の最適化が必要。 抗原ペプチド 特 抗原ペプチド 長 抗原ペプチド ◆ MHC Class Ⅱ Ultimer の MHC -抗原ペプチドは平面的に配 抗原ペプチド 置しています。このため,それぞれの複合体が独立的に T 細胞 レセプターに結合できるため,T 細胞に対する親和性が向上し MHC タンパク質 ています。 MHCタンパク質 ◆ ロット間の差を抑え,厳しい品質管理のもとに製造されていま MHC タンパク質 MHCタンパク質 す。 ◆ フローサイトメトリーや細胞の表現型解析,細胞分離等に使用 できます。 蛍光色素 蛍光色素 蛍光色素 11 蛍光色素 ◆ APC(Allophycocyanin) ま た は R-PE(R-Phycoerythrin) で 免疫学研究 蛍光標識した製品があります。 ◆ MHC アリルは DR1(DRA1*0101,DRB1*0101) ,DR2 (DRA1*0101,DRB1*1501),DR3(DRA1*0101, DRB1*0301),DR4(DRA1*0101,DRB1*0401)から選択 できます。 MHC (2)Ultimer (1)Tetramer Multimer R-PE 94.98% (3)Negative control 97.77% 0.50% 1000 1000 1000 100 100 100 10 10 4.74% 1 1 10 100 1000 MHC タンパク質 タンパク質 10 1.99% 1 1 10 100 1000 98.06% 1 1 10 100 1000 CD4 APC CD4 抗体と Tetramer または Ultimer で Influenza hemagglutinin に特異的な T 細胞を 2 重染色した。Ultimer の方がより特異的に標的細胞を標識している。 (1)Influenza hemagglutinin 由来ペプチドを含む DRB1*0101 Tetramer (2)DRB1*0101/HA Ultimer (3)DRB1*0401/HA Ultimer(ネガティブコントロール) 抗原ペプチド 抗原ペプチド 抗原ペプチド 抗原ペプチド MHC タンパク質 MHC タンパク質 蛍光色素 蛍光色素 MHC Class Ⅱ Ultimer の構造 Ultimer は従来の MHC Class Ⅱ Tetramer に替わる MHC Class Ⅱタンパク質と 抗原ペプチドの複合体で,抗原特異的なヘルパー T 細胞の検出・定量に有用。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 95 価 格 商品コード U4A U4B U2A U2B U84A U84B U82A U82B MHC MHC MHC MHC MHC MHC MHC MHC Class Ⅱ Ultimer, Class Ⅱ Ultimer, Class Ⅱ Ultimer, Class Ⅱ Ultimer, Class Ⅱ Ultimer, Class Ⅱ Ultimer, Class Ⅱ Ultimer, Class Ⅱ Ultimer, 品 名 APC * APC, Catalog R-PE * R-PE, Catalog APC+Anti-CD4, FITC Kit * APC+Anti-CD4, FITC Kit, Catalog R-PE+Anti-CD4, FITC Kit * R-PE+Anti-CD4, FITC Kit, Catalog 包 50 150 50 150 50 150 50 150 装 tests tests tests tests tests tests tests tests 価 格 ¥363,000 ¥685,000 ¥322,000 ¥631,000 ¥385,000 ¥741,000 ¥344,000 ¥687,000 * MHC Class Ⅱ Ultimer の 50 tests は,通常製品( Catalog Item )と受託合成品で同一価格です。 ※ 通常製品( Catalog Item )のリストについては,ProImmune 社ホームページ(http://www.proimmune.co.uk/)をご覧下さい。 ※ 通常製品にはない配列の抗原ペプチドでご注文の場合は,Set-up Charge として 1 Ultimer につき¥65,000 を別途申し受けます(合成 に失敗した場合も Set-up Charge は必要となります。また,ProImmune 社に抗原ペプチドの在庫がある場合は,Set-up Charge は不要 となります。詳細はお問い合わせ下さい)。 ご注文方法 フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/download/)に掲載の専用注文書の電子ファイルをダウンロードし,必要事項をご 記入の上,電子メール([email protected])に注文書の電子ファイルを添付してお送り下さい。 ® REVEAL & ProVE Rapid Epitope Discovery System and Cellular Analysis System REVEAL & ProVE® Rapid Epitope Discovery System 免疫学研究 11 お客様にご用意いただいた T 細胞エピトープの候補ペプチドと MHC アリルとの結合能の検証を行う受託サービスです。抗原提示細胞 を模した MHC Class Ⅰ Pentamer および MHC Class Ⅱ Ultimer を用いることにより,in vitro で各アリルとペプチドとの結合能を 検証できます。結合能が確認されたペプチドは,T 細胞エピトープの候補として免疫システムに関わる各種研究に応用できます。 ※ MHC Class Ⅰ Pentamer および MHC Class Ⅱ Ultimer の詳細については,p.93 ~ 96 をご覧下さい。 REVEAL & ProVE® Class Ⅰ REVEAL Class Ⅱ ProImmune 社が合成またはお客様からお送りいただいたペプチ ProImmune 社の合成したペプチドと MHC Class Ⅱアリル(38 ドと,MHC Class Ⅰアリル(A*2402 など 20 種類)との結合能 種類の DR, 18 種類の DQ の計 56 種類)との結合能を検証します。 を検証します。結合能が確認されたペプチドについては,フロー 結合能が確認されたペプチドについては,ご希望の細胞アッセイ サイトメトリーによる CD8+ 陽性 T 細胞エピトープ評価用に 法により更に検証を行った上で,CD4+ 陽性 T 細胞エピトープ評 MHC Class Ⅰ Pentamer -ペプチド複合体を合成します。オプ 価用に MHC Class Ⅱ Ultimer -ペプチド複合体を合成します。 ションでカイネティクスアッセイも承ります。 作業工程概略 REVEAL & ProVE® Class Ⅰ REVEAL Class Ⅱ ・ PEPscreen® Custom Peptide Synthesis(ProImmune 社によ Step 1 るペプチド合成)またはお客様からのペプチドご提供。 ・ PEPscreen® Custom Peptide Library Synthesis(細胞機能アッセ イに最適化されたペプチドセットを含む,ペプチドライブラリーを合成。) ・ REVEAL MHC-Peptide Binding Assay を下記のアリルについて ・ REVEAL MHC-Peptide Binding Assay を 38 種類の DR アリル , 18 行う。 種類の DQ アリルについて行う。 A*0101, A*0201, A*0301, A*1101, A*2402, A*2902, B*0702, B*0801, B*1402, B*1501, B*2705, B*3501, Step 2 B*4001, H-2Db, H-2Kd, H-2Dd, H-2Ld, H-2Kb, Mamu-A*01, Mamu-A*02 ・フローサイトメトリーによる CD8+ 陽性 T 細胞エピトープ評価用に, ・ REVEAL Assay でヒットしたエピトープ配列について,お客様自身で細 MHC Class Ⅰ Pentamer -ペプチド複合体を合成する。 胞機能アッセイを行う。 Step 3 ・フローサイトメトリーによる CD4+ 陽性 T 細胞エピトープ評価用に, MHC Class Ⅱ Ultimer -ペプチド複合体を合成する。 Step 4 96 ・ REVEAL On- and Off-Rate Assay(お客様が選択したペプチド を用いて,カイネティクスアッセイを行う。) フナコシ受託わーるど 2009-2010 ・ REVEAL On- and Off-Rate Assay(お客様が選択したペプチドを用 いて,アリル DR1, 2, 3, 4, 5, 7 についてカイネティクスアッセイを行 う。) ・すべての DR および DQ アリルについて REVEAL Stability Assay を 行う。 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 Cellular Analysis Service 免疫応答の確認やエピトープの同定を体系立てて行えるように,細胞アッセイ受託サービスを各種承ります。 各種細胞アッセイ法の概要 アッセイ方法 ELISpot Assay Intracellular Cytokine Staining Flow Cytometry Testing T Cell Proliferation Assay HLA Tissue Typing 概 T Cell Proliferation Assay トリチウム(3H)標識チミジンの取り込みにより,細胞増殖能 要 • ヒト INF- γおよび IL-2 を測定する。 • CD4+ および CD8+ 陽性 T 細胞の免疫応答を検出 する。 • 免疫応答の観察やエピトープの探索・評価に。 • PBMC 凍結細胞を使用。 • ヒト INF- γを測定する。 • PBMC 凍結細胞を使用。 • 抗原特異的 CD8+ 陽性 T 細胞を検出する。 • Pro5® Pentamer または ProVE® Pentamer Library を用いる。 • 免疫応答の観察やエピトープの探索・評価に。 • PBMC 凍結細胞を使用。 • トリチウム(3H)標識チミジンの取り込みを測定 する。 • 単一のペプチドまたはペプチドライブラリーを用 いたエピトープマッピング。 • 抗原タンパク質についての免疫原性の評価に。 • Class Ⅰアリルの決定 (A, B, C)。 • Class Ⅱアリルの決定 (DR, DP, DQ)。 を測定します。 T 細胞増殖試験は T 細胞エピトープの有無確認を目的として開 発され,前臨床における新規ペプチドおよびタンパク質の発見手 段にも有効活用されます。特に類似配列における免疫原性の関連 性を検証するタンパク質工学の研究に適しています。アミノ酸の 部分置換による低免疫原性化の検証や標的対象の厳密な判別が可 能となります。 エピトープ候補ペプチドスクリーニングのためには,エピトー プ候補ペプチドと PBMC を用いてヘルパー T 細胞の増殖を確認 する試験と,単球由来の樹状細胞への抗原タンパク質の取り込み を指標に T 細胞の増殖を検証する試験があります。 HLA Tissue Typing ご 提 供 い た だ い た PBMC の HLA 組 織 型 が 不 明 な 場 合 に, ELISpot Assay Class Ⅰ(A, B, C),Class Ⅱ(DR, DP, DQ)アリルの決定を行 お客様からお送りいただいた抗原特異的な CD4+ および CD8+ います。 陽性 T 細胞の免疫応答を,分泌された INF- γまたは IL-2 を指標 に ELISpot で検出する受託サービスです。ELISpot では 1 × 105 Cell 中のサイトカイン産出細胞 1 個を検出可能です。 その他の細胞アッセイ受託サービス 11 上記の他にも各種細胞アッセイ受託サービスを承ります。 フローサイトメトリーを用いて,内在性 INF- γを発現してい 免疫学研究 Intracellular Cytokine Staining ● Dendritic Cell(DC):T Cell Assay for Whole Antigen ● Naive Primary T Cell Assay for Peptide Epitope ● Immunogenicity Testing of Biologics る CD4+ および CD8+ 陽性 T 細胞を検出する受託サービスです。 ● REVEAL Class Ⅱ MHC Binding Assay ELISpot と異なり,フローサイトメトリーを用いることにより, ● Epitope Mapping T Cell Proliferation Assay 表現型とゲーティングの同時処理や,生細胞での分布解析が可能 ● Development of Biologics です。 ● Antibody Humanization ● Protein Engineering ● Design of Biologics with Low Antigenicity Flow Cytometry Testing ● Manufacturing Cell Line Development PBMC に対し,MHC ClassⅠ Pentamer( Pro5 Pentamer ま ® たは ProVE® Pentamer Library )を用いたフローサイトメトリー により,抗原特異的な CD8+ 陽性 T 細胞を検出します。 全リンパ球中の 0.02% といわれる抗原特異的な T 細胞を蛍光 ご注文方法 ご注文方法などの詳細は,お問い合わせ下さい。 検出することで定量的な分析が可能となり,免疫応答の実験にお いて ELISpot と補完し合います。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 97 自然免疫活性化能試験/糖脂質関連 解析受託サービス ※ 本サービスは研究用です。臨床用途には利用できません。 自然免疫活性化能(マクロファージ活性化能)試験サービス ご依頼の試料によってマクロファージを刺激した後,マクロ ヒト試料の生化学的検査サービス ご依頼いただいたヒト血清,尿試料をもとに,下記の検査を行 ファージの活性化を以下の指標により解析します。 います(衛生検査所認可)。 ① 貪食活性試験 ④ 遺伝子発現解析 ① DAO(ジアミンオキシダーゼ)活性測定(腸管機能マーカー) ② NO 産生試験 ⑤ プライミング化解析 ② GLP-2(グルカゴン様ペプチド)測定(腸管細胞増殖マーカー) 他 14 12 10 8 6 4 2 0 100 貪食率(%) Nitrite(μM) ③ TNF 産生試験 0.5 0.05 0.025 0.5 0.05 0.025 0.5 0.05 0.025 1000 100 10 80 その他の免疫関連試験 60 40 上記以外にも各種免疫関連試験の受託サービスを承っておりま 20 0 培養液 0 A (w/v) B (w/v) C (v/v)LPS(ng/ml) 10 A 1 B C す。お気軽にご相談下さい。 LPS (μg/ml) マクロファージ細胞での NO 産生試験例 マクロファージ細胞での貪食活性試験例 植物抽出物(A,B または C)を被験物質とし , RAW264.7 細胞を各被験物質で処理した 後上清を回収し,Griess 法により NO 産 生量を測定した。 植物抽出物(A,B または C)を被験物質とし, J774.1 細胞を各被験物質で処理した後, FITC 標識ラテックスビーズの貪食率を測 定した。 ※ 価格・ご注文方法などの詳細については,お問い合わせ下さい。 糖脂質(LPS)関連解析サービス 免疫学研究 11 ① 糖脂質含量測定(リムラス試験) ② パントエア菌糖脂質(IP-PA1)含量測定(特異的 ELISA) ③ 各種物質からの有用グラム陰性細菌解析 ④ 各種グラム陰性細菌からの糖脂質抽出・精製 ⑤ 各種糖脂質の自然免疫活性化能試験 ミクロスフェア作製受託サービス 様々な種類のミクロスフェアを作製する受託サービスです。 材 質 用 途 ● 磁気ビーズ ●ポリスチレン/メタクリル酸ポリマー ● 細胞分離 ●フローサイトメトリー ● シリカ ●機能性/架橋ポリマー ● 凝集テスト ●蛍光顕微鏡 修飾/包埋 納 ● タンパク質 ●スペーサー,リンカー ● 疎水性化合物 ●蛍光物質(表面固定/内包) ●可視光色素 ●磁性粒子アッセイ 品 ● 希釈品/乾燥品 など ※ 詳細はお問い合わせ下さい。 98 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 アレルゲン解析受託サービス Luminex® システムと MARIATM Kit, Premixed Multiplex Array for Indoor Allergen(Indoor Biotechnologies 社)を用いて, ハウスダストに含まれる,チリダニやイヌ,ネコ,ゴキブリなどに由来するアレルゲン(5 種類または 8 種類)を定量する受託サービス です。 ※ 本サービスは研究用です。臨床用途には利用できません。 ※ MARIATM Kit の詳細については,フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)から,キーワード「MARIA」で検索して下さい。 ※ ハウスダストの回収,抽出には DUSTREAM Collector(Indoor 測定対象アレルゲンとそれぞれの感度 測定対象アレルゲン 感度 (ng/ml) 5-Plex 8-Plex Der f1 ダニ,Dermatophagoides farinae 0.06 ○ ○ Der p1 ダニ,Dermatophagoides pteronyssinus 0.06 ○ ○ Der p2 ダニ,Dermatophagoides spp. Group 2 0.06 ○ ○ Fel d1 ネコ,Felis domesticus 0.02 ○ ○ Can f1 イヌ,Canis familiaris 0.06 ○ ○ Biotechnologies 社)のご使用をお勧めします。詳細については, フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)から, キーワード「DUSTREAM」で検索して下さい。 ご注文方法/価格 0.01 - ○ ご注文方法,お見積りなどの詳細は,お問い合わせ下さい。 Rat n1 ラット,Rattus norwegicus 0.02 - ○ ※ 納品の際には,測定結果ファイルに加え,お客様による再解析 Bla g2 ゴキブリ,Blattella germanica 0.98 - ○ や デ ー タ 閲 覧 用 ツ ー ル と し て, 定 量 解 析 ソ フ ト ウ ェ ア Mus m1 マウス,Mus musculus DNASIS® Plex(デモ版)を添付します。 定量解析ソフトウェア DNASIS® Plex DNASIS® Plex は,Luminex® システムの Multiplex 解析性能を最大限に生かすことのできる解析ソフトウェアです。Luminex® シ ステムの大量データ解析を強力にサポートします。測定結果の納品の際には,14 日間使用できるデモ版を添付しますので,ぜひご活用下 さい。 免疫学研究 特 長 ◆ 複雑な Multiplex データも迅速解析が可能です。 ◆ 多彩な標準曲線グラフ機能を搭載しています。 ◆ Luminex® の出力データを 96 ウェル形式で表示できます。 ◆ グラフィカルに表示できるため,ウェル間比較が直感的に分り ます。 ◆ 強力かつ柔軟なレポート作成機能で,実験記録をすばやく作成 できます。 ◆ カスタムレポート機能にも対応しています。XML を使用した スタイルシートを利用すれば,オリジナルレポートも出力でき ます。 ◆ プレートリーダー出力ファイルにも対応しており,幅広い解析 に使用できます。 ◆ Normalized Data,Fold Change 等発現解析にも対応していま す。 ◆ プレート間比較や編集のためのバーチャル機能を搭載していま す。 ※ 本ソフトウェアのご使用には,Windows XP または Vista を搭 載したパソコンが必要です。 対応計算モデル 定量解析 4 パラメータ(4PL),5 パラメータ(5PL),Linear, Log-Log,Log-Logit,Dose Respose(Log EC) Gene Expression Normalized Data,Fold Change 値,Control Sample 比 ※ DNASIS® は日立ソフトウェアエンジニアリング株式会社の登録商標です。 ※ デモライセンス期間を超えて DNASIS® Plex をご使用される場合は,ソフトウェアのご購入が必要となります。詳細は当社テクニカル サポート(機器担当:Tel.03-5684-1619,Fax 03-5684-5643,e-mail:[email protected])までお問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ 11 フナコシ受託わーるど 2009-2010 99 オリゴマンノース被覆リポソーム(OML)への 各種試薬包埋受託サービス 抗原タンパク質・ペプチドや,核酸などのご希望の試薬・薬剤をオリゴマンノース被覆リポソーム(OML:Oligomannose Coated Liposome)へ包埋する受託サービスです。 OML は,実験動物に投与するとマンノース受容体を高発現しているマクロファージや樹状細胞などの抗原提示細胞に効率良く取り込ま れ,封入抗原特異的な細胞性免疫応答(CTL 誘導や Th1 サイトカイン( IL-12 )の産生亢進)を惹起させるユニークな性質を持ってい ます。 ※ 本サービスは研究用です。臨床用途には利用できません。 価 格 大学・公的機関 初期検討料金:20 万円~,受託製品製造料金:30 万円~ 各種試薬 企業・営利団体 初期検討料金:80 万円~,受託製品製造料金:120 万円~ ※ ご依頼の内容により,費用は個別にお見積りいたします。 ※ 製造が困難な場合は,初期検討料金のみを申し受けます。 ※ 同一抗原の場合,2 回目以降のご注文時には受託製品製造料金 のみを申し受けます。 OML の構造 ※ 製品は溶液に懸濁した状態で納品いたします。保存可能期間は ※ Man3-DPPE:Neoglycolipid consisting of mannotriose and 1 か月程度となりますが,包埋する物質の性質により異なりま すので,個別にご連絡いたします。 dipalmitoylphosphatidyl-ethanolamine ※ 凍結乾燥品をご希望の場合は,別途お見積りいたします。 ※ ご注文内容についての秘密は厳守いたします。必要な場合は, 抗原包埋サービス 免疫学研究 11 秘密保持契約をいたします。ご不明な点は,お気軽にご相談下 動物実験に必要な量の抗原包埋リポソームを調製します。抗原 さい。 としては,タンパク質,ペプチドのいずれも可能です。 特 試薬・薬剤包埋サービス 長 動物実験に必要な量の各種試薬包埋リポソームを調製します。 ◆ 細胞性免疫の誘導が必要とされる原虫病,アレルギーや腫瘍な 核酸医薬などへの応用が期待されています。 どに対するワクチンアジュバントとして高い効果を示すこと が,マウスを用いた種々のモデル実験で確認されています。 ◆ OML の原料は天然由来物およびそれらの縮合品で,フロイン 特 長 ト完全アジュバントなどの油性アジュバントとは異なり,免疫 ◆ マクロファージや樹状細胞への活性修飾試薬や各種核酸の能動 動物に対して毒性を示しません。また,培養細胞への添加も可 的な輸送が可能です。また,マクロファージに取り込ませるこ 能です。 とにより,所属リンパ節や炎症巣への集積を行えます。 ◆ 少量の抗原量(OVA の場合:<1 μg OVA /マウス)で効率良 く細胞性免疫を誘導できます。 ◆ 蛍 光 や 酵 素 等 で 標 識 し た OML を 投 与 す る こ と で, マ ク ロ ファージや樹状細胞の標識が可能です。 ※ 詳細はお問い合わせ下さい。 ※ ご注文内容についての秘密は厳守いたします。必要な場合は, 参考文献 秘密保持契約をいたします。ご不明な点は,お気軽にご相談下 1)Takagi, H., et al., Cytokine , 40, 241 ~ 250(2007). 2)Shimizu, Y., et al., Parasite Immunol. , 29, 229 ~ 239(2007). さい。 3)Ikehara, Y., et al., Cancer Res. , 66, 8,740 ~ 8,748(2006). 4)Fukasawa, M., et al., FEBS Lett. , 441, 353 ~ 356(1998). 100 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 ELISA 測定受託サービス 株式会社ホクドーで受託構築した ELISA キット(p.91 参照)または市販の ELISA キット*を用いて,ご提供いただいた試料を測定い たします。 * 市販の ELISA キットの場合は,まず対応の可否を判断しますので,プロトコル・試料形態(血清,血漿,培養上清など) ・試料数(可能 であれば)を教えていただく必要があります。 納 期 ●納期:2 週間〜 ※ ご注文方法,お見積りなどの詳細はお問い合わせ下さい。 酸化ストレス評価受託サービス 酸化ストレスのバイオマーカーである 8-OHdG, イソプラスタン,ヘキサノイルリジン,コエンザイム Q10 の測定や,抗酸化能の評価 を行う受託サービスです。生体の酸化状態や抗酸化物質の評価に最適です。 ※ 本受託サービスは研究用です。臨床用途には利用できません。 特 長 ◆ヒトおよびマウスなどの尿,血清試料* 1 から測定・評価を行い ◆脂溶性の抗酸化物質を評価する場合は,水溶性の 8-OHdG では ます。 生体への効果を検出しにくい場合があります。このような場合 ◆尿だけでなく血清を用いた測定もできるため,両者を測定する には,脂質系の酸化損傷マーカーのイソプラスタン,ヘキサノ ことにより,より精密な評価が行えます。 *1 イルリジンを同時に測定することにより,抗酸化物質の効果を うまく検出できる可能性が高くなります。 試料は冷凍保存して下さい。 目 的 尿中 8-OHdG 8-OHdG 8-OHdG 生成速度 DNA の酸化損傷 (8-hydroxy-2'8-OHdG クレアチニン補正 deoxyguanosine) 高感度 8-OHdG 尿中イソプラスタン イソプラスタン生成速度 イソプラスタン 細胞膜の酸化損傷 イソプラスタンクレアチニン補正 尿中 HEL ヘキサノイルリジン HEL 生成速度 脂質の過酸化度 (HEL) HEL クレアチニン補正 血中 HEL 酸化率 ユビキノール コエンザイム Q10 抗酸化物質 ユビキノン total 抗酸化能(PAO:Potential Anti Oxidant) 抗酸化能 *2 試料 最小必要試 測定法 料量(ml) 価格 (¥) 備 考 蓄尿時間* 2 と量(ml),体重を明記して下さ い。 尿 1.0 ELISA 7,000 血清 1.0 ELISA 9,500 尿 1.0 ELISA 8,000 蓄尿時間* 2 と量(ml),体重を明記して下さ い。 尿 1.0 ELISA 8,000 蓄尿時間* 2 と量(ml),体重を明記して下さ い。 血清 1.0 ELISA 10,000 血清 0.6 HPLC 7,000 ・EDTA 入り採血管の使用は,避けて下さい。 ・血清分離後,速やかに凍結して下さい。 血清 0.5 比色法 8,000 溶血により高値になる可能性があります。 蓄尿時間:採尿時刻と,その前の排尿時刻の差 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 101 生体試料分析 検査項目 12 生体試料分析受託サービス ヒト血液や尿などの生体試料に含まれる脂質代謝項目,TARC ,MPT(マンノピラノシル -L- トリプトファン),サブスタンス P, ニトロ チロシン,ビタミン C の濃度を測定する受託サービスです。 ※ 本サービスは研究用です。臨床用途には利用できません。 サブスタンス P 脂質代謝関連項目プロファイル 脂質代謝に関連する 5 つの項目(TG:中性脂肪,TC:総コレ サブスタンス P は第一次知覚神経の化学伝達物質であり,この ス テ ロ ー ル,HDL-C: 高 密 度 リ ポ タ ン パ ク コ レ ス テ ロ ー ル, 物質が高濃度存在することは,痛みや炎症の神経伝達亢進が疑わ LDL-C:低密度リポタンパクコレステロール,Rem-L-C:レムナ れます。炎症,アレルギー性疾患の有用なマーカーとして注目を ント様リポタンパクコレステロール)の測定と,ポリアクリルア 集めています。 ミドゲル/アガロースゲル電気泳動解析による,脂質代謝関連項 目のプロファイリングを行います。 ニトロチロシン ニトロチロシンは,生体内タンパク質のチロシン残基がニトロ TARC 化されたもので,生体内における炎症と一酸化窒素産生のマー TARC (thymus and activation-regulated chemokine) は白血球 カーとして知られています。ニトロチロシンの生成は,セリアッ に対して走化性などを示すケモカインの一種です。血清中の ク病をはじめ,喘息,慢性関節リウマチ,糖尿病性腎症,炎症性 TARC 量が,アトピー性皮膚炎の重症化に伴い比較的大きな変化 腸疾患に関与すると言われています。 を伴う上昇を示すため,TARC 検査はアトピー性皮膚炎重傷度評 価の補助として有用であると考えられています。 ビタミン C MPT(マンノピラノシル -L- トリプトファン) MPT はトリプトファンとマンノースが C-C 結合によって結合 した構造を持つ新規内因性物質です。MPT はヒトの尿および血中 生体試料分析 12 ビタミン C はアミノ酸の生合成に利用されるなど,生体内にお ける各種物質代謝に多様に関与しています。特に生体内でのコ ラーゲンの生合成と保持に関わる重要な因子で,その欠乏により コラーゲンの生合成が著しく妨げられることが知られています。 に存在しますが,腎疾患において血中 MPT 濃度が上昇すること が報告されています。尿および血清中の MPT は腎機能評価の有 用な指標になります。 価 格 [メーカー:KMM] 対象因子 脂質代謝関連 項目プロファイル TARC MPT サブスタンス P ニトロチロシン ビタミン C ( アスコルビン酸) 測定方法 測定試料 必要試料量 酵素法と電気泳動法 血清 2 ml 以上 検出限界 TG, TC :5 mg/dl HDL-C, LDL-C, RemL-C:1 mg/dl 1 試料当たりの価格(¥) 30,000 *1 試料の前処理:分離した血清を冷蔵で送付して下さい(凍結はしないで下さい)。 *1 ELISA 血清 2 ml 以上 10 pg/ml 30,000 試料の前処理:分離した血清を冷蔵または冷凍で送付して下さい。 血清 1 ml 以上 0.023μg/ml HPLC 7,000 尿 1 ml 以上 0.03μg/ml 試料の前処理:分離した血清,採取した尿を冷凍して送付して下さい。 ELISA 血漿 250μl 以上 8.2 pg/ml 10,000 試料の前処理:安定化剤を送付しますので,分離後 4 時間以内の血漿と安定化剤を等量混合し,冷凍して送付して下さい。 ELISA 血漿 100μl 以上 50 nM 5,000 試料の前処理:分離した血漿を冷凍して送付して下さい。 *2 酵素法 血清 300 μ l 1.0 μ g/ml 953 試料の前処理:凍結用遮光チューブ(シュウ酸入り)を送付しますので分離後 3 時間以内の血清を分注し,冷凍して送付して下さい。 * 1 新規サービスにつき,1 回のご依頼での試料数に応じた特別価格で承っています。 試料数が 5 ~ 9 の場合…上記価格の 30% OFF 試料数が 10 以上の場合…上記価格の 50% OFF * 2 新規サービスにつき,現在特別価格で承っています。 ※詳細はお問い合わせ下さい。 102 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 生体試料分析受託サービス ヒト血液,便,尿など生体試料中に含まれる総ホモシステイン,リゾホスファチジルコリン等を測定するアルフレッサファーマ株式会 社の受託サービスです。 ※ 本サービスは研究用です。臨床用途には利用できません。 ホモシステインチオラクトナーゼ活性 総ホモシステイン 血中総ホモシステイン(tHcy)は,代謝酵素の欠損等により異 ホモシステインチオラクトンはアミノアシル tRNA 合成酵素に 常に高値となるホモシスチン尿症だけではなく,代謝酵素活性の より生成されるチオラクトンです。ホモシステインチオラクトン 低下,腎不全,喫煙,運動不足,加齢等によっても中等度に上昇 はリジン残基を修飾することでタンパク質を変性させることか することが報告されています。近年,この血中ホモシステインの ら,動脈硬化の原因となる LDL の変性にも関与していると考えら 上昇が動脈硬化の独立した危険因子として注目されています。 れます。ホモシステインチオラクトナーゼ (HTLase) は,このホ モシステインチオラクトンを加水分解し,ホモシステインへと変 リゾホスファチジルコリン 換する酵素ですが,近年,この酵素とパラオキソナーゼが同一で リゾホスファチジルコリン (LPC) は,グリセロール骨格にコリ あることが報告されました。これまでに報告されているパラオキ ンリン酸と一つの脂肪酸が結合した,血液中に最も多く存在する ソナーゼの抗動脈硬化作用は,この HTLase 活性によるものであ リゾリン脂質です。LPC は動脈硬化に強く関係するとされる酸化 る可能性が示唆されています。 LDL の主要成分の一つと言われています。また,ある種の肝疾患 や敗血症などで血中 LPC が低値になることが報告されています。 便中ラクトフェリン ラクトフェリン( Lf )は好中球の特殊顆粒から放出され,炎 症性の消化器疾患や大腸癌で測定値の上昇が報告されています。 血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ活性 血小板活性化因子(PAF)は,炎症やアレルギー反応等広範囲 尿中ジアセチルスペルミン の各種病態発症に関与するメディエーターです。血小板活性化因 ポリアミンは細胞増殖因子の一種で,細胞内代謝によりほとん 子アセチルヒドロラーゼ(PAF-AH)は,この PAF が持つ強力な どがアセチル化され尿中に排出されます。この時見られるアセチ 生理活性を消去する機能を有しており,生体内のホメオスタシス ルポリアミンの一種がジアセチルスペルミン(DiAcSpm)です。 に関与しています。また,近年,本酵素は Lp - PLA2 とも呼ばれ, 尿中 DiAcSpm は癌患者で高値となり,特に大腸癌では早期から 酸化リン脂質の代謝にも関与しており,動脈硬化との関連も示唆 高い陽性率を示すことが報告されています。 [メーカー:AZW] 試料 血液 項目コード 測定項目 B002 総ホモシステイン(tHcy) B003 リゾホスファチジルコリン(LPC) 血清 測定試料 (試料量) 血漿(EDTA 処理) 便 △ (0.5 ml) ○(0.5 ml) ○(0.5 ml) ○(0.5 ml) *1 B004 血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ (PAF-AH)活性 ○(0.5 ml) ○(0.5 ml) B005 ホモシステインチオラクトナーゼ (HTLase)活性 ○(0.5 ml) − 便 F003 便中ラクトフェリン(Lf) 尿 U001 尿中ジアセチルスペルミン(DiAcSpm) 尿 測定方法 酵素法 比色法 ○* 2 ○* 3(0.5 ml) 金コロイド凝集法 ※同時に複数項目の測定をご希望の場合に必要な試料量についてはお問い合わせ下さい。 ※血清,血漿試料の場合,必要量の約 3 倍量を目安に採血して下さい。 * 1一般に EDTA 処理 血漿を用いることが推奨されています。 * 2専用の採便容器をお送りしますので,その容器を使用して下さい。 * 3プラスチック製容器で保存,搬送下さい。ガラス容器は絶対に使用しないで下さい。 ご注文方法/価格 ご注文方法,お見積りなどの詳細はお問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 103 生体試料分析 12 されています。 リポタンパク質解析受託サービス LipoSEARCH お客様から提供された試料中のリポタンパク質の主要 4 画分(カイロミクロン,VLDL, LDL, HDL)に含まれるコレステロールとトリ グリセリドの量を測定する受託サービスです。独自のゲルろ過 HPLC システムにより,リポタンパク質の分離~試薬反応を行い,各々を 同時測定します。 さらに,主要 4 画分を,粒子サイズを基準に 20 に分画して詳細に解析することができ,脂質のトータルプロファイルを得られます。 ※ 本サービスは研究用です。臨床用途には利用できません。 特 長 価 ◆ 50 μl 程度の微量の試料から測定できます。 ◆ 粒子サイズを基準に,20 に分画したリポタンパク質サブクラ 格 基本測定 スの測定が可能です。 価 ◆ 動脈硬化惹起性のリポタンパク質である small LDL 中のコレス 測定項目 試料の種類 ◆ ヒト,マウス,ウサギ,サルなど,動物種を問わず測定できます。 可能です。 LipoSEARCH 通常版 (4 分画・20 分画) コレステロール& 中性脂肪 1 ~ 12 ¥24,000 ¥10,000 13 ~ 24 血清 (または血漿) 25 ~ 49 ¥22,200 ¥9,300 ¥19,700 ¥8,200 適用例 ● コレステロールとトリグリセリドに注目した脂質代謝研究 ● 糖尿病や高脂血症,肥満などの生活習慣病の研究 ● 脂質代謝を改善する薬や機能性食品の研究 ● マウスなどの小動物による,同一個体の脂質代謝の経時的解析 ● トランスジェニックやノックアウトマウスの表現型解析 ● 細胞培養上清・脳脊髄液など低濃度試料のリポタンパク質測定 ①健常 700 ②肥満 600 600 HDL 600 500 ﹈ 300 ﹇ 200 100 400 300 LDL 200 100 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34[min] ①健常なイヌは, 「善玉コ レステロール」HDL が ほとんどを占める。 ¥18,700 ¥7,800 1~ ¥30,000 ¥26,000 脳脊髄液 1~ ¥24,000 ¥10,000 その他 1~ LipoSEARCH Light(4 分画のみ) 血清 1~ コレステロール&中性脂肪 (または血漿) 血清 LDL profile 1~ (または血漿) 400 VLDL 300 ②肥満になると, 「悪玉コ レステロール」LDL が増 える。 イヌの解析例 0 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 [min] ③糖尿病,クッシング症 候群,甲状腺機能異常な どの病気になると,カイ ロミクロン(CM),VLDL のコレステロールや中性 脂肪が増えてくる。 ご用意いただくもの ¥6,000 オプション測定 遊 離 コ レ ス テ ロ ー ル 血清(または血漿) (FC)およびリン脂質 培養上清 (PL) 粒子サイズ(観測値) 遊離グリセロール ¥30,000 ¥15,000 ¥40,000 ¥35,000 ¥5,000 ¥1,900 ¥5,000 ¥1,900 ※上記以外のオプション測定も承ります。詳細はお問い合わせ下 さい。 リポタンパク質を測定することの重要性 ● 血清/血漿*の場合 LDL コレステロールや中性脂肪(トリグリセリド)の値が 45 μl 以上:採血後 1 週間以内に冷蔵でお送り下さい 増えると冠動脈疾患などの発症率も増えることから,現在で 45 μl 未満:お問い合わせ下さい も生活習慣病のリスクマーカーとして健康診断などで検査さ ● 細胞培養上清/脳脊髄液/その他の試料の場合 れています。 お問い合わせ下さい * 生体にヘパリンを注射した場合,LPL 活性を誘導し正確な測定 結果が得られない可能性がありますのでご注意下さい。 ※ 凍結試料,抗凝固剤を使用した試料での解析を希望される場合 は,ご相談下さい。 − 項目です。 LDL 100 0 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 [min] ¥14,000 価 格/試 料 企業・営利団体に 大学・官公庁に ご所属の場合 ご所属の場合 CM 200 お問い合わせ下さい ※LipoSEARCH Light は企業・営利団体にご所属のお客様向けの HDL 500 HDL ﹇ ﹈ 400 50 以上 培養上清 700 ﹈ 500 0 ③糖尿病 700 ﹇ 生体試料分析 12 料 にご所属の場合 ご所属の場合 テロールも測定可能です。 ◆ 血清のほか,血漿,細胞培養上清,脳脊髄液などの試料も測定 格/試 測定試料 企業・営利団体 大学・官公庁に 数 LDL コレステロールは悪玉コレステロールといわれていま すが,LDL の中でも粒子サイズの小さい small LDL 中のコレ ステロールは超悪玉コレステロールと呼ばれています。近年 の研究で,small LDL は血管内皮に取り込まれやすく酸化さ れやすいために,動脈硬化を特に促進することが分かってき ました。動脈硬化は脳卒中や心筋梗塞などを引き起こします。 こ れ か ら の 生 活 習 慣 病 の 予 防・ 早 期 発 見・ 治 療 に は, LipoSEARCH のような粒子サイズも含めたリポタンパク質 の詳細な解析が重要と言われています。 104 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 肝臓脂質の測定受託サービス 実験動物の肝臓組織中の脂質を抽出し,含有脂質量を測定する受託サービスです。総コレステロール(TC),中性脂肪(TG),遊離型 コレステロール(FC),リン脂質(PL)の 4 項目の測定が可能です。 ※ 本サービスは研究用です。臨床用途には利用できません。 作業内容 作業項目 組織破砕・均一化 組織サンプリング 作業内容 肝臓試料をホモジナイザーで破砕し,均一にする マイクロチューブに試料を秤量する サンプリングした試料にクロロホルム/メタノールを添加する クロロホルム/メタノール抽出 ホモジナイザーで撹拌して一晩静置する 洗浄 1 抽出液に蒸留水を添加して洗浄する 洗浄 2 抽出液にクロロホルム/メタノール/蒸留水を添加して洗浄する 減圧乾固 抽出液を減圧アスピレーターにセットし,有機溶媒を除く イソプロパノール溶解 抽出物をイソプロパノールで溶解する * 脂質測定 酵素法 による脂質測定を行う 吸光度測定 反応液の吸光度を測定する 解析 肝臓組織 1g 当たりの脂質量(mg)を求める *市販のキットを用いて測定を行います。 ※ 抽出作業は一般に用いられている FOLCH 法 1) を基に行います。 参考文献 1)FOLCH, J., et. al., J. Biol. Chem .,May, 226 (1), 497 ~ 509 (1957). 測定例 マウス肝臓 3 試料について抽出・測定を各 5 回行った。 コレステロール 中性脂肪 200 6 150 遊離型コレステロール リン脂質 3 12 20 生体試料分析 8 15 2 4 100 10 1 50 肝臓1g当たりのTG含有量 2 肝臓1g当たりのTC含有量 0 0 1 2 1 2 3 コレステロール(TC) AVG. mg/g S.D. CV 4.77 0.49 10.34 5.82 0.44 7.50 4.13 0.17 4.01 0 0 3 1 2 試料No. 試料 No. 5 肝臓1g当たりのPL含有量 肝臓1g当たりのFC含有量 3 1 試料No. AVG. mg/g 68.29 97.78 60.52 中性脂肪(TG) S.D. CV 10.27 15.04 2.95 3.02 4.73 7.81 ご用意いただくもの 2 遊離型コレステロール(FC) AVG. mg/g S.D. CV 1.76 0.07 3.80 1.80 0.05 2.62 1.71 0.04 2.56 価 ー20℃以下で速やかに凍結して下さい。 ※肝臓以外の組織試料をご希望の際はお問い合わせ下さい。 ※100 mg の肝臓組織で 4 項目の測定が可能です。 ※肝臓の一部をお送りいただく場合は,肝臓の採取部分はすべて 試料数 1 ~ 12 13 ~ 24 25 ~ 基本項目 +FC 基本項目 +PL ¥ 13,200 ¥ 12,600 ¥ 11,800 ¥ 13,200 ¥ 12,600 ¥ 11,800 基本項目 +FC+PL ¥ 14,600 ¥ 13,800 ¥ 13,000 ※TC & FC や,TC & PL の組み合わせも可能です。価格などは 納 ご注文方法 http://www.funakoshi.co.jp/ リン脂質(PL) AVG. mg/g S.D. CV 15.70 0.64 4.11 9.17 0.27 2.95 9.86 1.05 10.68 1 試料当たりの価格 基本項目 (TC & TG) ¥ 11,200 ¥ 10,600 ¥ 9,800 お問い合わせ下さい。 Excel 形式の報告書をお送りします。 3 格 の試料で同一の箇所から採取して下さい。 品 2 試料No. 試料No. 肝臓全体または肝臓組織 100 mg 以上を採取後,付着した血液 を生理食塩水で洗い流し,ペーパータオルなどで拭き取った後, 1 3 詳細は,お問い合わせ下さい。 フナコシ受託わーるど 2009-2010 105 肝臓胆汁酸の測定受託サービス 実験動物の肝臓組織中の胆汁酸を抽出し,含有胆汁酸量を測定する受託サービスです。 ※ 本サービスは研究用です。臨床用途には利用できません。 作業内容 ご用意いただくもの 作業項目 作業内容 組織破砕・均一化 肝臓試料をホモジナイザーで破砕し,均一にする 組織サンプリング マイクロチューブに試料を秤量する サンプリングした試料にエタノールを添加する エタノール熱抽出 ホモジナイザーで撹拌し,熱抽出する 減圧乾固 抽出液を減圧アスピレーターにセットして,乾固する エタノール溶解 抽出物をエタノールで溶解する 胆汁酸測定 酵素法*による胆汁酸測定を行う 吸光度測定 反応液の吸光度を測定する 解析 肝臓組織 1g 当たりの胆汁酸量(μg)を求める *市販のキットを用いて測定を行います。また,キャリブレーター 肝臓組織 100 mg 以上を採取後,付着した血液を生理食塩水で 洗い流し,ペーパータオルなどで拭き取った後,ー 20℃以下で 速やかに凍結して下さい。 ※肝臓以外の組織試料をご希望の際はお問い合わせ下さい。 納 品 Excel 形式の報告書をお送りします。 としてコール酸(M.W.:408.58)を使用します。 測定例 価 ラ ッ ト 肝 臓 3 試 料 に つ い て 各 5 回 抽 出・ 測 定 を 行 い, CV ≦ 10% の再現性を確認した。 格 試料数 1 ~ 12 13 ~ 24 25 ~ 1 試料当たりの価格 ¥ 11,200 ¥ 10,600 ¥ 9,800 120 100 ご注文方法 80 60 生体試料分析 12 詳細は,お問い合わせ下さい。 40 胆汁酸量(μg/g tissue) 20 0 1 2 3 試料 No. 試料 No. 1 2 3 106 AVG. 66.2 101.0 99.8 胆汁酸 S.D. 3.9 8.9 4.7 フナコシ受託わーるど 2009-2010 CV 5.9 8.8 6.1 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 サイトカイン測定受託サービス Luminex® システムと Fluorokine MAP Kit(R&D Systems 社)を用いて,ヒト,マウス,ラットの細胞培養上清,血清,血漿か らサイトカインやホルモンなど様々な因子をハイスループットに定量する受託サービスです。少量の試料から高感度に複数の因子の定量を 行います。 ※本サービスは研究用です。臨床用途には利用できません。 ※Fluorokine MAP Kit の詳細については,フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)から,キーワード「Fluorokine MAP」 で検索して下さい。 ※R&D Systems はテクネ コーポレイションの登録商標です。 納 品 ● Luminex® システムによる測定データ(CSV 形式) ●定量解析結果(Excel) ●標準曲線レポート(Excel または PDF) ● DNASIS® Plex(定量解析ソフトウェア)デモ版(14 日間使用 可能)インストーラー ご注文方法/価格 ご注文方法,お見積りなどの詳細は,お問い合わせ下さい。 測定因子の例(ヒト) ENA-78 IFN-γ IL-2 IL-8 MIP-1α Tpo FGF basic IL-1α IL-4 IL-10 MIP-1β VEGF ※ヒト由来試料の解析には,日立グループ倫理審査が必要となり G-CSF IL-1ra IL-5 IL-17 RANTES − GM-CSF IL-1β IL-6 MCP-1 TNF-α − ます。 ※詳細についてはお問い合わせ下さい。 DNASIS Plex を用いたデータ解析例 測定結果の納品の際には,定量解析ソフトウェア DNASIS® Plex のデモ版(14 日間使用可能)を添付します。DNASIS® Plex によ り試料間比較等をグラフ表示として視覚的に表現できます。測定結果を研究に合わせて自由に解析することが可能です。 ※DNASIS® Plex の詳細機能については,p.99 をご覧下さい 多数 の計 算モ デル を装 備! Luminex® システム ファイル 10 種類のサイトカインの濃度解析 Linear, 4PL, 5PL, Log-Log, Log-Logit, Dose Response (Log EC) グラ フ表 示に デー よる タの 可視 化! 式 力形 の出 好み 更! に変 ※DNASIS® は日立ソフトウェアエンジニアリング株式会社の登録商標です。 ※デモライセンス期間を超えて DNASIS ® Plex をご使用される場合は,ソフトウェアのご購入が必要となります。詳細は当社テクニカル サポート(機器担当:Tel.03-5684-1619,Fax 03-5684-5643,e-mail:[email protected])までお問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 107 生体試料分析 12 ® 核内レセプター スクリーニング受託サービス 核内レセプターのリガンドについて,転写コファクターの作用を考慮した RCAS(Receptor Cofactor Assay System)* 1 測定に より,精度の高いスクリーニングを行う受託サービスです。 核内レセプターがリガンドと結合して転写活性化/抑制作用を発揮するには,レセプター/リガンド複合体にさらに転写コファクター が結合することが必要です。本受託サービスは,核内レセプターおよびサブタイプ選択性による化学物質のスクリーニングに活用できます。 ※ 本サービスは研究用です。臨床用途には利用できません。 *1 RCAS 関連特許出願済み(国内外)。 特 長 主要なサービスラインナップ ◆ 合成化合物等,多試料からの有用物質の探索に対応しています。 対象疾患 ◆ 健康食品や培養抽出物等,単離精製していない天然物試料にも 乳癌,骨粗鬆症 対応できます。 ◆ お客様に試料の調製をしていただくエコノミープランもありま す。 糖尿病,動脈硬化, 高脂血症,肥満 RCAS 測定原理 リガンド A 関連受容体 ER α ER β PPAR α PPAR γ PPAR δ LXR α LXR β FXR 関連コファクター SRC-1 CBP SRC-1 CBP ※ 対象となるレセプターおよびコファクターラインナップの詳細 核内レセプター 転写コファクター リガンドがレセプターと 結合しない場合 リガンド B リガンドがレセプターと 結合する場合 核内レセプター*2 リガンドとレセプ ターと転写コ ファクタ ー の 複 合体形成 一次反応 洗 浄 HRP 標 識 抗 体 による認識 二次反応 に関しては,お問い合わせ下さい。 スクリーニング手順(スタンダードプランの場合) 1. 溶解度試験 対象物質の DMSO に対する溶解度を調べます。 2. RCAS プライマリー・スクリーニング 1 濃度の RCAS 測定によりプライマリー・ヒットを探索します。 ※ プライマリー・ヒットの結果には,擬陽性が含まれる可能性が 検出 基 質(TMB)に よる発色 発色なし 創薬・物質評価・薬物動態 13 あります。RCAS 活性確認試験による活性の確認をお勧めしま す。 3. RCAS 活性確認試験 発色あり リガンド(アゴニスト)がレセプターに結合すると,レセプターの立体構造が変化し,複 合体は固相化した転写コファクターと結合する。試料がリガンドでない場合には,転写コ ファクターとの結合はみられないため,検出されない。また,リガンドがアンタゴニスト である場合も,レセプターの構造変化がアゴニストの場合と異なるため,検出されない。 *2 組換え体タンパク質関連特許使用許諾済み。 対象物質を 4 濃度に希釈して,RCAS による濃度依存性を確認 します。 4. RCAS 詳細試験(EC50/IC50) 対象物質を 12 濃度に希釈して濃度依存性試験を行い,EC50 ま たは IC50 を求めます。ただし,活性レベルの低い試料に関し ては,EC50/IC50 値が算出できない場合があります。 108 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 サービス内容 スタンダードプラン エコノミープラン 測定可能な受容体 全 15 種類( ERα,ERβ,FXR,LXRα,LXRβ,MR,PPARα,PPARγ,PPARδ,RXRα,RXRβ,RXRγ,TRα,TRβ,VDR ) 測定可能な応答性 アゴニスト様作用 / アンタゴニスト様作用*1 1 点/ 4 点/ 8 点 または 12 点 ((株)エンバイオテック・ラボラトリーズにて希釈系列調製) 測定濃度点数 試料の形態 粉体または DMSO 溶液(8mM または 20mg/ml) 試料の最終濃度 測定緩衝液系への溶解性 DMSO 溶液 (株) エンバイオテック・ラボラトリーズ送付 96 ウェルプレート 任意*3 試料送付時の容器 1点 *2 200 μM または 500 μg/ml *4 任意(お客様にて調製) 追加料金にて事前に試験*5 試験しない*6 測定後の試料 ご希望により返却または廃棄 廃棄 再測定の有無 二重測定の値が大きくぶれた場合,一回まで無料で再測定*7 行わない 納 平均 10 営業日*8 平均 6 営業日 グラフ化(全プラン),EC50,IC50 の算出(8 点濃度測定以上) 測定値および簡易判定結果 期 報告書形式 * 1受容体によっては適切なアンタゴニスト標準品の入手が困難なため,標準曲線を活性の基準とすることができない場合あります。詳 細はお問い合わせ下さい。 * 2粉体の場合は溶液調製のための追加料金を申し受けます。DMSO 溶液の場合は指定濃度(8mM または 20mg/ml)に調製の上,お送 り下さい。お手持ちの試料濃度が指定濃度に満たない場合は,測定時の最終濃度はお送りいただいた濃度の 1/40 となります。 * 3エストロゲンレセプターを用いた RCAS 測定では,一部のプラスチック製品からの溶出成分によって影響を受けることがわかってい ます。エストロゲンレセプターでの測定をご希望の場合は,株式会社エンバイオテック・ラボラトリーズにて測定系に影響を与えな いことを確認した試料バイアルをお送りします。 * 4お手持ちの試料濃度が指定濃度に満たない場合は,測定時の最終濃度はお送りいただいた濃度の 1/40 となります。 * 5測定緩衝液系への試料の溶解性が低い場合は,測定中に析出する危険性があります。スタンダードプランでは,オプションサービス として事前に溶解性を試験し,お客様に測定開始濃度をご指定いただくことが可能です。 * 6測定時に試料が溶解していたかどうかの目安として,報告書には測定溶液の濁度(OD 595)を記載します。 * 7再測定においても値がぶれた場合には,試料の性質上やむをえないものと判断します。 * 8試料数やオプションプランの選択によって前後します。詳細はお問い合わせ下さい。 価 格 EnBio RCAS Kit スタンダードプラン スタンダードプランの価格はお問い合わせ下さい。 エコノミープラン 詳細はお問い合わせ下さい。 価格の例 試料数 受容体数 1 試料 5 試料 10 試料 20 試料 30 試料 50 試料 100 試料 200 試料 300 試料 1 受容体 2 受容体 3 受容体 ¥204,000 ¥220,000 ¥240,000 ¥280,000 ¥320,000 ¥400,000 ¥600,000 ¥1,000,000 ¥1,400,000 ¥258,000 ¥290,000 ¥330,000 ¥410,000 ¥490,000 ¥650,000 ¥1,050,000 ¥1,850,000 ¥2,650,000 ¥312,000 ¥360,000 ¥420,000 ¥540,000 ¥660,000 ¥900,000 ¥1,500,000 ¥2,700,000 ¥3,900,000 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 109 13 創薬・物質評価・薬物動態 ※ 価格は測定する受容体の種類と試料数により決定いたします。 RCAS 測定により各種レセプター*のリガンドをスクリーニングで きるキットもあります。 * ER α/β,LXR α/β,MR,PPAR α/γ,TR α/β,VDR ◆操作は約 3 〜 4 時間で終了します。 ◆ ELISA と同様の操作方法や必要器材で測定できます。 ◆測定に必要な試薬類はすべてキットに含まれています。 ※ 詳 細 は 当 社 テ ク ニ カ ル サ ポ ー ト( 試 薬 担 当:Tel. 03-56841620,Fax 03-5684-1775)までお問い合わせ下さい。 Epigenetic Drug Discovery Service エピジェネティクス関連因子を標的としたドラッグディスカバリー受託サービスです。 エピジェネティクス関連酵素に対する阻害物質,またはヒストン/ DNA 修飾に対するモジュレーターをハイスループットかつ迅速に 解析します。 Epigenase Epigenetic Enzyme Inhibitor Screening System Epigentek 社の保有する幅広い酵素/基質パネルを用いて, HDAC, HMT, Dnmt などのエピジェネティクス関連酵素に対す る阻害物質をスクリーニングする受託サービスです。 スクリーニングステップ ◆阻害活性による一次スクリーニング HDAC や Dnmt の阻害物質は抗癌物質として有効であること が知られています。 ◆ IC50 解析 ◆細胞生存率アッセイ 標的因子 HDAC Total HDAC HDAC-10 HDAC-1 HDAC-11 HDAC-2 SIRT-1 HDAC-3 SIRT-2 HDAC-4 SIRT-3 HDAC-5 SIRT-4 HDAC-6 SIRT-5 HDAC-7 SIRT-6 HDAC-8 SIRT-7 HDAC-9 ー HMT G9a SUV39H2 SET7/9 SETDB1 ASH1 NSD1 ALL-1 DOT1 MLL EZH2 SMYD3 PRMT1 SUV39H1 PRMT4 ー ー ー ー ー ー 反応産物 Dnmt Total Dnmt Dnmt1 Dnmt3A Dnmt3B ー ー ー ー ー ー 基質 酵素 阻害物質 反応産物 または 反応産物(蛍光) 標識抗体 吸光度測定 蛍光測定 EpiModifier Epigenetic Modulator Screening System ヒストン修飾や DNA メチル化に対するモジュレーターをスク リーニングする受託サービスです。 創薬・物質評価・薬物動態 13 モジュレーターによる酵素やコファクターの阻害で,ヒストン スクリーニングステップ ◆モジュレーター活性による一次スクリーニング(in situ ) 修飾や DNA メチル化状態が変化し,転写制御などに影響を及ぼ ◆容量反応曲線の解析(in situ ) します。 ◆抽出ヒストンを用いたモジュレーター活性解析 標的因子 ◆モジュレーターによるメチル化/脱メチル化パスウェイ解析 ヒストンアセチル化 ヒストンメチル化 ヒストンリン酸化 DNA メチル化 H3-K9 H3-K4 H2AX Global Methylation Tumor Suppression Panel H3-K14 H3-K9 H2B H3-K18 H3-K14 H3(Ser10) Oncogene Panel H3-K23 H3-K27 H3(Ser28) Drug Resistance Panel H3-K27 H3-K36 H3(Thr11) Apoptosis Panel H4-K5 H3-R2 ー Cell Cycle Panel DNA Damage Repair Panel H4-K8 H3-R17 ー H4-K9 H4-R3 ー Angiogenesis Panel H4-K12 Histone H3 ー Metastasis Panel Nuclear Receptor Panel H4-K16 Histone H4 ー Histone H2A ー ー Cytokine Panel Transcription Factor Panel Histone H3 ー ー Histone H4 ー ー ー 細胞 固定/透過処理 モジュレーター 標識抗体 比色/蛍光測定 阻害物質 の場合 低 モジュレーター 無しの場合 中 活性化物質 の場合 高 価格/ご注文方法 ※ 化合物数,標的因子数,および各スクリーニングステップにより価格が異なります。 ※ 受託内容の秘密保持に関する契約も可能です。 ※ 詳細はお問い合わせ下さい。 110 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 阻害物質の評価受託サービス BPS Bioscience 社 が 有 す る 高 品 質 の HDAC(Histone Deacetylase),PTP(Protein Tyrosine Phosphatase),PDE (Phosphodiesterase)または DPP(Dipeptidyl Peptidase)を用いて阻害物質の評価を行います。 特 長 測定に用いる酵素 ◆ HDAC(12 種類)と sirtuin(6 種類),PTP(22 種類),PDE(23 種類)または DPP(5 種類)のパネルでアッセイを行います。 ◆ 標準で 7 つの異なる濃度で二重試験による測定を行い IC50 を 測定します。 ◆ ご要望に応じて測定条件を変更できます。 ◆ 秘密保持契約の締結も可能です。 HDAC1 HDAC Sirtuin ※ 詳細はお問い合わせ下さい。 PTP PDE DPP HDAC5 HDAC8 Sirtuin 1 Sirtuin 5 Bas MEG-1 HDAC2 HDAC5 (full length) HDAC9 Sirtuin 2 Sirtuin 6 CD45 MEG-2 HDAC3/NcoR2 HDAC4 HDAC6 HDAC7 HDAC10 Sirtuin 3 ー DEP1 PEST HDAC11 Sirtuin 4 ー LAR PRL-1(2-173) PTP1B(1-321) PRL-2(2-167) PRL-3(2-173) PTP1B(1-321) (mouse) PTP1B(1-321) PTP1B PTP-D2 PTPIA2 (rat) (full length) PTP β PTP μ RPTP γ SHP-1 SHP-2 TC-PTP ー ー PDE1C PDE1A PDE1B PDE2A (mouse) PDE3A PDE3B PDE4A1A PDE4B1 PDE4B2 PDE4C1 PDE4D2 PDE4D3 PDE5A PDE5A1 PDE6C PDE7A (mouse) PDE10A PDE7B PDE8A1 PDE9A2 (mouse) PDE10A(rat) PDE10A1 PDE11A4 ー DPP3 DPP4 DPP7 DPP8 DPP9 ー ー ー 独自の手法(MonoLex 法)で,お客様にご用意いただいた標的タンパク質に対するアプタマーの探索合成を行う受託サービスです。 アプタマーは標的タンパク質と特異的に結合する能力を持った核酸分子で,DNA や RNA アプタマーを医薬品として開発する可能性が 開けたことから,近年注目されています。 特 長 ◆ SELEX 特許に抵触しない独自の手法(MonoLex 法)により, ご注文方法 ※ 詳細はお問い合わせ下さい。 標的とするタンパク質と親和性の強いアプタマーを探索しま ※ 試験が成功しなかった場合は,前金分のみを申し受けます。 す。 ※ 追加選別,追加バッファー処理などについては,お問い合わせ ◆ 少量の試料から標的タンパク質に対するアプタマーを迅速に探 下さい。 索できます。 ◆ 標的とするタンパク質に対する結合活性についても報告されま す。 ※ アプタマーのシークエンス情報は非開示ですが,受託試験によ りヒットが得られた場合,純粋な研究用途に限って契約締結後 にシークエンス情報を開示いたします。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 111 創薬・物質評価・薬物動態 13 アプタマー探索受託サービス バイオアッセイ受託サービス 細胞を用いた試験を中心に各種 in vitro 試験を行います。試料の性質(溶解性や色調の検討)を考慮し,細胞の選択,試験条件 の設定など,事前のご相談を十分に行うことにより個々のお客様のご要望にお応えします。 天然素材由来の化粧品や機能性食品原料の評価試験に有用な受託サービスです。 ※ 本サービスは研究用です。臨床用途・食品用途には利用できません。 特 6 長 5 ◆ 細胞を使用した試験について,初めてのお客様にも詳しくご説 4 ◆ 試験内容が分からない場合にも,最適な試験をご提案いたしま す。 ◆ 測定法の開発,論文再現実験などにも対応します。 ◆ 試料数が多い場合には割引もあります。 サービスの流れ 1. 試験内容の詳細確認 A 社データ 3 2 よりはっきりと したデータへ コラーゲンの生産量 (相対値) 明します。 1 0 6 5 4 3 2. お客様の素材試料のご提供 2 3. 予備検討 1 4. 本試験 0 5. ご報告 (株)エーシー バイオテクノロ ジーズデータ 0 0.0025 0.005 0.01 0.02 試料の濃度(%) ※ 試料が混合物の場合は,特に細胞に対して毒性を示す場合があ り,その状況で試験しても正確な結果が得られません。そこで, 株式会社エーシーバイオテクノロジーズでは予備検討を行い,ま コラーゲン産生促進実験の結果 A 社のデータと比較して,株式会社エーシーバイオテクノロジーズの方がはっきりとした 差が出ていることが分かる。 ず細胞毒性のない範囲を確定します。その範囲で試料濃度の高い 順に濃度を数段階に希釈して試験を行い,最適な条件での試験を 行います。 創薬・物質評価・薬物動態 13 受託項目 細胞増殖(抑制)試験 アッセイ内容 細胞賦活* 1 細胞増殖(抑制)* 1 抗酸化ストレス試験 UVA/B 抗酸化* 1 光毒性* 1 炎症・アレルギー 酵素活性試験 皮膚試験(美白) 骨代謝試験 LDL 抗酸化* 2 COX の阻害活性* 2 ヒスタミン遊離抑制活性* 1 コラーゲン産生促進* 1 メラニン合成抑制* 1 チロシナーゼ阻害活性* 2 骨芽細胞分化促進* 1 破骨細胞形成阻害* 1 NO 生成阻害(NOS 阻害) NOS 指 WST-1 細胞数の計測 標 使用細胞 ヒト正常表皮細胞,ヒト正常線維芽細胞 マウス正常骨芽細胞,リンパ系癌:HL-60,APL,JLK 胃(胃腺)癌:Detorit562 など ヒト正常線維芽細胞 ヒト正常表皮細胞 LPO(過酸化脂質量)の測定 8-OHdG の測定 SOD の測定 ほか 酸化 LDL 量の測定 ― COX-1,COX-2 の測定 ― ヒスタミン遊離量の定量 マウスマスト細胞 Ⅰ型コラーゲン量の測定 ヒト正常線維芽細胞 メラニン量の測定 ほか マウス B16 細胞 活性測定 ― ALP 活性 マウス正常骨芽細胞 アリザリンレッド マウス MT3T3-E1 破骨細胞数の計測 マウス骨髄細胞 亜硝酸量の比色定量 各種動物細胞 * 1細胞を使用する試験です。基本価格には,細胞毒性のない濃度で評価するための条件検討が含まれています。条件検討が不要な場合 はご相談下さい。 * 2生化学試験です。 ※上記以外のアッセイ項目をご希望の際は,お問い合わせ下さい。 ヒトⅠ型コラーゲン測定キット Human Collagen Type Ⅰ ELISA Kit ペプシン処理した試料中のアテロコラーゲン(テロペプチドを分 解したコラーゲン)を競合 EIA により定量するキットです。細胞 培養上清および組織抽出物など,ほとんどの試料中のコラーゲン 濃度を測定できます。 ※ 製品の詳細については,フナコシホームページ(http://www. funakoshi. co.jp/) か ら, キ ー ワ ー ド「 コ ラ ー ゲ ン 測 定 」 で google 検索して下さい。 112 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 機能性食品の有効性評価試験受託サービス 株式会社メルシャンクリンテックは,食品素材のスクリーニングから非臨床試験と,それに付随する開発業務をトータルにお手伝いし ます。お客様の目的,被験物質の特長などにより,最適な試験を設計いたします。 近年,生活習慣や環境変化により,肥満・糖尿病・高血圧・高脂血症を併発するメタボリックシンドロームや花粉症・アトピーなどの アレルギー疾患が増加傾向にあります。食品素材にはこのような疾患を予防したり,改善したりする機能が期待されています。 ※ 本サービスは研究用です。臨床用途には利用できません。 特 長 ◆ コンサルティングの重視 お客様の商品開発の一翼を担う認識のもとで,試験方法の設定 の段階よりコンサルティングを重視し,お客様と十分な協議を 行っています。また,試験結果の考察を十分に行い,試験結果に 基づく商品開発の展望をお客様にご提案しています。 ◆ 食品評価に合致した試験系作製 医薬品を対象とした病態モデルは食品評価に適していません。 本受託サービスは食品評価に特化しているため,食品の有効性を 引き出しやすい病態モデルの作製を行っています。 サービスの流れ 1. お客様訪問 ・受託内容のご説明 ◆ 研究者の経験・質 メルシャン株式会社の研究所で食品および医薬品の探索ならび ・お客様のニーズを打診 ・秘密保持契約の締結(必要により) に薬効(機能性)評価を長年担当してきた研究者が受託研究業務 2. 詳細打ち合わせ に携わるため,経験が非常に豊富です。 3. 試験研究の受託 4. 試験研究の実施 ◆ 新技術分野への挑戦 学界の最先端の情報および技術を入手して,食品評価に適した 新しい試験系の構築を積極的に行っています。 5. 試験結果の報告 ・最終報告書の提出 ・今後の展望のご提案 ※ 詳細はお問い合わせ下さい。 創薬・物質評価・薬物動態 13 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 113 微量表面張力計による ADME 予測受託サービス Kibron 社の自動微量表面張力計を利用した ADMEscreen により,新規医薬品候補物質の薬物動態を予測する受託サービスです。測 定した候補物質の表面張力から算出したデータを基に薬物動態を予測します。 測定・算出項目 価 1. 表面圧の増分 格 基本料金(¥100,000)に下記の価格が加算されます。 2. 限界ミセル濃度 試料数 8 ~ 49 50 ~ 99 100 ~ 299 300 ~ 599 600 ~ 999 1,000 以上 3. 気液分配係数 4. 自由エネルギーの変化 5. 両親媒性インデックス 6. 薬剤の境界表面積 ※ 1. , 2. を測定し, 3. ~ 6. を算出します。 1 試料当たりの価格(¥) 18,000 12,000 10,000 7,000 5,500 5,000 ※ 予測項目の詳細は,フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)をご覧いただくか,お問い合わせ下さい。 薬物動態試験受託サービス 薬物/ P-gp 相互作用試験 血液脳関門通過性試験 ヒト初代培養脳微小血管内皮細胞およびアストロサイトを用い た独自の in vitro モデルにより,薬物の血液脳関門通過性の評価 P-gp を高発現させた小胞膜を用いた独自の in vitro モデルによ り,薬物処理前後の ATPase 活性の変化を測定します。 または通過機構を決定します。 ※ 実験手法の詳細は,フナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)をご覧いただくか,お問い合わせ下さい。 創薬・物質評価・薬物動態 13 ADME 解析受託サービス 独自の TRANSIL ビーズを用いて,創薬候補物質等の ADME 解析を in vitro で行う受託サービスです。目的の創薬候補物質について 膜透過能評価と血漿タンパク質結合能評価を行います。これらの結果に目的物質の溶解性などのデータを組み合わせることで,より生体内 に近い ADME の予測が可能となります。 TRANSIL ビーズの構造 膜透過能評価 表面にホスファチジルコリン(小腸膜透過)または脳由来のリ ン脂質(血液脳関門通過)をコートした TRANSIL ビーズを用いて, Membrane Affinity Serum Protein Binding 創薬候補物質等の膜透過能評価を行います。 従来の人工膜透過試験(PAMPA 法)より正確に評価が行えます。 血漿タンパク質結合能評価 表面に AGP(α1-acid glycoprotein) ,HSA(human serum albumin) , または RSA(rat serum albumin)などの血漿タンパク質をコートし た TRANSIL ビーズを用いて,創薬候補物質等の血漿タンパク質結合 能評価を行います。 ※ 詳細についてはお問い合わせ下さい。 114 フナコシ受託わーるど 2009-2010 ●お問い合わせ先/受託・特注品業務担当 Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 トランスポーター試験受託サービスおよび安定発現細胞 トランスポーター試験受託サービス お客様より化合物をお預かりし,各種ヒトトランスポーターを安定発現させた細胞を用いて,細胞への取り込み,排出試験を行う受託サー ビスです。 サービス内容 トランスポーターの種類 S2 細胞(SV40 ラージ T 抗原トランスジェニックマウス近位尿細 管 S2 セグメント由来株化細胞) ,HEK293 細胞,CHO 細胞にヒト SLC トランスポーター の薬物トランスポーター遺伝子を導入し安定発現させた細胞株を用 いて,細胞への化合物の取り込みを,放射性標識化合物を用いて測 定します。 hOAT1* hOAT2* hOAT3* hOCT2-A hOCT1 hOCT2 hPEPT1 hPEPT2 URAT1* OATP2* LAT1 LAT2 * hOAT4* * OCTN1* hOAT7* hOCT3 OCTN2* * *特許実施許諾契約済み ABC トランスポーター MRP2 MRP3 MRP4 BSEP MDR1 ※ 上記以外のトランスポーターについてはご相談下さい。 トランスポーター遺伝子安定発現細胞 ヒトの薬物トランスポーター遺伝子を導入し安定発現させた細胞株をご提供します。 トランスポーターの種類 創薬・物質評価・薬物動態 13 SLC トランスポーター hOAT1* hOAT2* hOAT3* hOAT4* hOCT1 hOCT2 hOCT2-A* hOCT3 hOAT7* *特許実施許諾契約済み ※ 上記以外のトランスポーターについてはご相談下さい。 ※ 詳細についてはお問い合わせ下さい。 http://www.funakoshi.co.jp/ フナコシ受託わーるど 2009-2010 115 ■試薬に関して・・・・・・・・・・・ Tel.03-5684-1620 Fax 03-5684-1775 e-mail:[email protected] ■受託・特注品に関して・・・ Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 e-mail:[email protected] ■機器に関して・・・・・・・・・・・ Tel.03-5684-1619 Fax 03-5684-5643 e-mail:[email protected] ■試薬に関して・・・・・・・・・・・ Tel.03-5684-1620 Fax 03-5684-1775 e-mail:[email protected] ■受託・特注品に関して・・・ Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 e-mail:[email protected] ■機器に関して・・・・・・・・・・・ Tel.03-5684-1619 Fax 03-5684-5643 e-mail:[email protected] ■試薬に関して・・・・・・・・・・・ Tel.03-5684-1620 Fax 03-5684-1775 e-mail:[email protected] ■受託・特注品に関して・・・ Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 e-mail:[email protected] ■機器に関して・・・・・・・・・・・ Tel.03-5684-1619 Fax 03-5684-5643 e-mail:[email protected] ■試薬に関して・・・・・・・・・・・ Tel.03-5684-1620 Fax 03-5684-1775 e-mail:[email protected] ■受託・特注品に関して・・・ Tel.03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 e-mail:[email protected] ■機器に関して・・・・・・・・・・・ Tel.03-5684-1619 Fax 03-5684-5643 e-mail:[email protected] 本カタログに掲載されていない 受託サービスもご相談下さい! ! フナコシ取り扱いの国内外のメーカーのネットワークを活 用して,本カタログに掲載されていないサービスについても, お客様のご依頼内容に最適のメーカーをご案内いたします。 ご依頼内容について対 応可能であるか,経験 豊富なスタッフが調査 いたします(無料)。 ご依頼内容の秘密は 厳守いたします。 ※次ページに掲載の「各種受託サービス見積り依頼書」をコピーして,必要事項をご記入の上,当社受託・ 特注品業務担当まで Fax でお送り下さい。 ※まずは,お気軽にお問い合わせ下さい。 各種受託サービス見積り依頼書 個人情報の取り扱いについて ●本依頼書にご記入いただきましたお客様の個人情報は,当社個人情報保護方針に基づき適切に取り扱いを行い,次のような目的に利用いたします。利用目的を変更す る必要が生じた場合は,変更前の利用目的と相当の関連性を有すると合理的に認められる範囲内で変更し,変更後の利用目的を当社ホームページに告知いたします。 (1)ご記入内容等の確認 (3)当社が取り扱う商品,サービスの変更案内やサポート情報の提供 (2)当社へのお問い合わせや資料等のご請求への対応 (4)ご注文いただいた製品のお客様への直接の送付 ●ご記入いただいた内容の確認のため,または製品仕様等が変更された場合,当社担当者よりご連絡もしくは直接訪問させていただく場合があります。 □ 上記に同意して記入する □ 上記に同意しない(受託・特注品業務担当(下記参照)にお問い合わせ下さい) 個人情報に関するお問い合わせおよび開示・訂正・削除のお申込み先: フナコシ株式会社 総務部 個人情報相談窓口 Tel. 03-5684-1611 Fax 03-5684-1614 e-mail:[email protected] Fax 送付先:フナコシ株式会社 受託・特注品業務担当(Fax 03-5684-6539) ご依頼日: 年 月 日 ご依頼者 お名前(フリガナ): ( ) 勤務先名: 勤務先住所:(〒 ) Tel.: Fax: e-mail: 販売店(ご利用販売店名を必ずご記入下さい) 販売店名: 住 担当者名: 所:(〒 ) Tel.: Fax: e-mail: フナコシ発刊のカタログおよびフナコシホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/)に掲載されていない受託サービス をご希望される場合は,ご希望のサービスに関する情報を本紙にご記入の上,受託・特注品業務担当(Fax 03-5684-6539) まで Fax をお送り下さい。 ※ 本見積り依頼書は,1 案件ごとに 1 枚の用紙にご記入下さい。 ご希望納期: 年 月頃まで ご予算: 円位まで ご依頼内容および特記事項 お問い合わせ先:受託・特注品業務担当 Tel. 03-5684-1645 Fax 03-5684-6539 コピーしてご利用下さい。 e-mail : [email protected]
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