API実用講座 各社HPLC新技術とAnalyst タカラバイオ株式会社 APIテクニカルサポートライン 渡辺 淳 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 Analystから制御できるかなあ。。。 島津からProminence UFLCが出たけども、 Analystからの制御は？？？ ２液洗浄はどちらも制御できるの？？？ ラックチェンジャーは？？？ 今回は・・・ 各社HPLCの新デバイスを中心に、APIのフ ロントLCとして使用する場合の制御方法 （Analystから制御できる・できないなど）を 紹介します。 ちなみに、 Analystから、 Prominence UFLCは、PDA以外、制御できます。 ２液洗浄はどちらも制御できます。 ラックチェンジャーは96ウエルプレートの場合、制御できます。 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 Menu z Analystから制御する 島津 HPLC z Agilent HPLC z 資生堂 HPLC z CTC PAL（Autosampler） z そのほか z z Analystから制御せず使用する Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 島津 HPLC 従来のLC-10Aのシステムに加え、LC-20A Prominenceの各デバイスもAnalyst から制御可能です。UFLCも制御可能です。 Controllers:CBM-20A CBM-20A Lite Pumps: LC-20AT LC-20AD LC-20AB Detectors: SPD-20A SPD-20AV RID-10A RF-10A RF-10Axl AutoSamplers: SIL-20A SIL-20AC Rack Charger Ovens: CTO-20A CTO-20AC いくつか注意点／オプション設定があります。 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 島津 HPLC SIL-20A(C)では、ポート洗浄とポンプ 洗浄の両方ともAnalystから設定する ことができます。 SIL-HTCでは、ポート洗浄のみAnalyst から設定することができます。ポンプ洗 浄については、事前にシステムコント ローラーで設定したMethodで動作させ ることができます。 Rack Changerでは、 96MTPと 96DWPのみAnalystから設定すること ができます。384プレートや、1.5mlバイ アルはAnalystから設定できません。 SIL-20A(C)では、コントロールラック（10本）はAnalystから制御できません。 SIL-20ACで1.5mlバイアルを使用する場合、70本バイアルラックのほかに、105本バイアルラックが使 用できます。Batch Editorでは、1ml cooledを選択し、105番までのポジションを設定します。 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 Agilent HPLC Agilent1200 Series Systemsは Analystから制御可能です。 超高圧対応のSLも制御可能です。 G1310A Isocratic Pump G1311A Quaternary Pump G1312A Binary Pump G1312B Binary SL Pump G1376A Capillary Pump G2226A Nanoflow Pump G1329A Standard Autosampler G1330B Thermostat Module G1367B High Performance Autosampler G1367C High Performance Autosampler SL G1377A Micro Well-Plate Autosampler G1315B Diode Array Detector G1315C Diode Array Detector SL G1316A Thermostatted Column Compartment G1316A Thermostatted Column Compartment SL Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 Agilent HPLC キャリーオーバー対策のためのキットとして、 Optional Injector Purge Kit がリリースされてい ます。 インジェクションした後、サンプルループを流路か ら切り離し、洗浄液で洗うことができます。 Analystからは制御できませんが、Control Module上で事前にプログラムしたオプション洗浄 Methodを動かすことは可能です。 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 資生堂 HPLC 資生堂HPLC NANOSPACEはAnalystから制御可能です。 資生堂より供給されるAdd-onソフトShiseido NANOSPACE on AnalystをAnalystに追加インストールします。 超音波洗浄機能のついたHTSオートサンプラーZももちろん 制御できます。 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 資生堂 HPLC 超音波洗浄のほか、ポンプ送液に よる有機溶媒オプションを搭載した 3133 HTSオートサンプラーZがリ リースされています。 このオートサンプラーもAnalystから 制御することができます。 追加ポンプ 有機溶媒洗浄槽 注入ポート 96Well Plateが6枚収納可能、 プレート毎に2mLバイアルの 混在も可能です。 高圧切替バルブ 超音波洗浄槽 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 資生堂 HPLC 新 3133 HTSオートサンプラーZ 基本構造 Ultrasonic Vibrator Ultrasonic cleaning port Drain Pre-cleaning port Pump (Mobil phase) Sampling Needle Column Drain Solvent port Sample Loop Sample Vial Solvent Pump Pump (for ultrasonic) Patent applied Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 資生堂 HPLC Acquisition Methodでの資生堂HPLCの設定方法は次のとおりです。 グラジエント の設定 注入量の 設定 カラム温度 の設定 注入プログ ラムの設定 Shiseido NANOSPACE on Analyst画面にて、オートサ ンプラー、ポンプ、カラム オーブン等の情報を設定し ます。 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 資生堂 HPLC スタート [START] ↓ バイアル穴開け [Vial Punch] ↓ サンプリング [Sampling] ↓ (有機)溶媒洗浄 [Solvent Wash 1 (任意時間)] ↓ プレウォッシュ [Pre Wash] ↓ 超音波洗浄 [Ultrasonic (可変設定)] ↓ (有機)溶媒洗浄 [Solvent Wash 2 (任意時間)] ↓ 注入実行 [Injection] ↓ 動作完了 [END] Solvent Port Solvent Pump ： 250uL ： 3mL/min Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 CTC PAL ∼New Wash Station∼ z 新しい洗浄技術を搭載し、超低キャ リーオーバーを実現した新型PAL （AMR New Wash Station）がリリー スされています。 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 CTC PAL ∼New Wash Station∼ Side Port Syringe を採用しています。 24ulと55ulの２種 類があります。 Injectionポートと 洗浄ポートが一体 化しています。 洗浄液Wash1、 Wash2をPumpに より送液します。 バルブの切換えによ りInjectionバルブの 洗浄とシリンジの洗 浄を選択することが できます。 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 CTC PAL ∼New Wash Station∼ Analystから制御可能です。 Hardware ConfigurationでPAL（New Wash）を認識させ、Acquisition Methodを作ります。 Acquisition MethodのPALの設定パラメータは次のとおりです。 ① Available Cycles サンプルのインジェクションに用い るプログラムをプルダウンから選択 します。 ③ ① ② ④ ② Syringe PALに装着されているSyringeの種 類をプルダウンから選択します。 ③ Injection Volume サンプルの注入量を設定します。 ④ Cycle Arguments ①で選択したCyclesにおいてカス タマイズ可能なパラメータが表示さ れます。 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 CTC PAL ∼New Wash Station∼ Analystから制御可能です。 Available Cycles（サンプルの注 入プログラム）を改変、新規作 成するには、別ソフトCycle Editorが必要です。 Cycle Editorにより、さまざまな 注入動作をカスタマイズするこ とができます。 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 そのほか z Analystで制御可能な超高圧仕様・・・ z HPLCシステム 島津UFLC z Agilent1200SL z Waters ACQUITY UPLC System z z その他 Rheos Allegro Pump z CTC PAL 超高圧インジェクションバルブ z 超高圧 Valco Valve z Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 そのほか Rheos Allegro Pump Dedicated LC/MS frontend • Only 70 µL delay volume • Binary or quaternary, biocompatible • Flow range 0.1 µL - 1000 µL/min • Up to 1000 bar / 14500 PSI • Complete integration into Analyst • Integrated 4 channel ZHCR (Pat. pending) degasser CTC PAL 超高圧インジェクショ ンバルブ （6 port／10 port） 超高圧 Valco Valve （6 port／10 port） Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 そのほか Waters ACQUITY UPLC System New Control Software from Waters Released ACQUITY UPLC System Now Supported on Applied Biosystems/MDS SCIEX’s Mass Spectrometers For Immediate Release Milford, Mass., January 11, 2007 – Waters Corporation (NYSE:WAT) announced today that it has released control software that now makes its ACQUITY UltraPerformance LC® (UPLC) System compatible with Applied Biosystems/MDS SCIEX mass spectrometry products controlled by Analyst® software. In conjunction with Applied Biosystems/MDS SCIEX’s release of the latest update to Analyst® V1.4.2 LC/MS control software, Waters will now supply and support additional software which provides full support for the ACQUITY UPLC Systems, including Waters nanoACQUITY UPLC System, on Applied Biosystems/MDS SCIEX’s mass spectrometry platforms. Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 Analystから制御せず使用する z Analystから制御できないHPLCを使用する 場合にも、いくつかの工夫で便利にトラブル 少なく使用することができます。 スタート信号の接続 z レディ信号の接続 z エラー信号の接続 z Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 AnalystからHPLCを制御せず使用する スタート信号の接続 Analystから制御しないオートサンプラーでも、スター トの信号を取り込むことで、オートサンプラーの注入 に連動して測定を開始できます。 MS HPLC HPLC側のケーブルとMS側のケーブルの接続部分 HPLC側の該当ラインとMS側の白黒、緑黒 のラインを接続します。 さらに、MS側のケーブルの橙黒・赤黒のライ Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS ンを短絡します。 MS本体のケーブル接続部分 Users Meeting 2007 Analystから制御せず使用する スタート信号の取り込みに使用する ケーブル（Aux I/O Cable）には、ス タート信号をMassに伝えるためのラ インの他にもいくつかのラインがあり ます。 レディ信号：Massのレディ信号を外 部に発信します。 エラー信号：Massのエラー信号を 外部に発信します。 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 Analystから制御せず使用する z レディ信号の接続 AnalystからHPLCを制御しない場合、オートサンプラーはMassの取り込み時間やレディ （Wait）動作に関係なく、オートサンプラー側のRun Timeで注入動作を行います。これによ り、スタート信号が入らないことによる測定のずれが生じることが起きる場合があります。 この場合、レディ信号の接続を行うことで、ずれがなくなります。 Mass側で１測定が終わり、次の測定のWaitの状態になった時点でレディ信号が出力され ます。 黒白ライン 赤白ライン 注入の準備ができていないとき 青白ライン 黒白ライン 赤白ライン 注入の準備ができているとき 青白ライン Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 Analystから制御せず使用する z エラー信号の接続 AnalystからHPLCを制御しない場合、通常は、Massの停止とオートサンプラーやポンプ の停止が連動しませんが、エラー信号の接続により連動させることができます。 Mass側でトラブルが生じた場合にエラー信号が出力され、HPLCを停止させます。これに より、エラー発生後のサンプルの注入を防ぐことができ、また、エラー発生後、Massへの 移動相の送液を止めることができます。 MassがStandby（黄色）になったときにも信号が出るので、測定終了後、MassをStandby にすると同時にHPLC（ポンプ等）を停止させることができます。 黒ライン 青ライン エラーが起きていないとき 青黒ライン 黒ライン 青ライン エラーが起きたとき 青黒ライン Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 Analystから制御せず使用する HPLCではありませんが．．． API3000（API300、API365）ユーザー様に朗報！！ AIR供給自動停止ユニットリリース！！ API3000では、Gas2はマニュアル制御である ため、連続測定が終わった後に、自動的に停 止することができませんでした。 新開発『AIR供給自動停止ユニット（ジーエル サイエンス社製）』により、連続測定終了後、 MassがStandbyになる際に、Gas2も自動的 に停止させることができます。 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 Analystから制御せず使用する AIR自動供給停止ユニット プローブへ Stop!! AIR自動供給停止ユニット背面 Air作動弁 EXT. STA端子 ここにエラー信号の 接続を行います。 エラー信号が入ると 電源 Gas2配管 Gas供給口 本ユニットは、Gas作動弁により Gas2を停止させるため、Gasの供給が必要です。 Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007 3方Tee ご清聴ありがとうございました。 本内容に関するお問い合わせは・・・ タカラバイオ APIテクニカルサポートライン TEL；077-567-4963 FAX；077-565-6995 e-mail : [email protected] web : http://www.takara-bio.co.jp/API/ Applied Biosystems / MDS SCIEX LC/MS Users Meeting 2007
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