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新製品
CRISPR/Cas9 ノックアウトプラスミド
迅速で効率の良い
ゲノム編集ツール
サンタクルズ社ホームページで詳細をご覧いただけます
Leader in innovation and
quality since 1991
サンタクルズ社は世界のリーディングカンパニーです
研究に必要な 抗体、siRNA/shRNA、レンチウイルス粒子、バイオケミカル、ラボウェア製品を取り揃えています。
■
一次抗体: 68,467 品目以上
( モノクローナル抗体: 18,681 品目、ポリクローナル抗体: 49,786 品目 )
■
リン酸化部位認識抗体: 1,559 品目以上
(898 ものリン酸化調節活性部位をターゲットとして作製、モノクローナル抗体:
350 品目、ポリクローナル抗体 1,209 品目 )
■
siRNA、shRNA プラスミドとレンチウイルス粒子
■
バイオケミカル「ChemCruz™」: 142,000 品目以上
■
サポート製品も多数ご用意: 二次抗体、プロテイン A/G
PLUS 免疫沈降試薬、分子量マーカーなど
■
ウェスタンブロット抗体評価用ライセート:
ヒト: 3,375 品目、マウス: 3,210 品目
記事 ID 検索
( ヒトとマウスの既知遺伝子を 100% カバーする遺伝子サイレンサー試薬 )
5684
NEW:
CRISPR/Cas9 ノックアウトプラスミド
記事 ID 検索
14017
CRISPR/Cas9
ノックアウトプラスミド
サンタクルズ社はこの度、Genome-scale CRISPR Knock-Out(GeCKO) v2 Library (developed by Shalem, O.
ヒトまたはマウス遺伝子の
( 約 18,920 ものヒトタンパク質と約 18,347 ものマウスタンパク質 ) に対するターゲット特異的 CRISPR/Cas9 ノッ
機能を特異的に抑制するよ
クアウト (KO) プラスミド製品をリリースしました。CRISPR/Cas9 KO プラスミドは、目的のタンパク質をコードする特異
うにデザインされています
的な遺伝子の同定と切断をすることができ、その遺伝子産物であるタンパク質の産生を抑制します。
and Sanjana, N.E. In the Feng Zhang Lab at the Broad Institute) で見つかった遺伝子をコードするタンパク質
CRISPR/Cas9 の長所
● 遺伝子特異的に機能
● 高い効率の遺伝子ノックアウト
● 低い細胞毒性
● 迅速かつ低コスト
任意のプラスミド
HDR プラスミド: 2 本鎖切断のための特異的 DNA 修復テンプレー
トをご提供する製品。
Cre ベクター: ピューロマイシン耐性遺伝子を切除することが
できます。
Cas9 誘導性 DNA 切断が生ずる部位に細胞選択
用ピューロマイシン耐性遺伝子を組み込みます。
サンタクルズ社製品のご注文はコスモ・バイオまで
CRISPR/Cas9 システム
20塩基非翻訳RNA配列(guide RNA):
Cas9をゲノムDNA内の特異的標的部位に導く
CRISPR/Cas システムは、古細菌や細菌において
U6プロモータ:
gRNA発現を駆動
御機序です。これらの微生物では、バクテリオファー
ジ由来の外来性遺伝物質は獲得性であり、
U6
CRISPR 座位に組み込まれます。
CRISPR/Cas9 KO プラスミドは、
ヒトおよびマウス遺伝子に対して
GF P
緑色蛍光タンパク質:
選択マーカー
ゲノム工学に適用可能です。
ご利用いただけます。
例:
ヒト遺伝子用:
2Aペプチド:
同一のCBhプロモータよりCas9と
GFPの双方の産生を可能とする
マウス遺伝子用:
CRISPR/Cas9
Knockout Plasmid
2A
p53 CRISPR/Cas9 KO プラスミド (h)
p53 CRISPR/Cas9 KO プラスミド (m)
NLS
CRISPR/Cas9
ノックアウトプラスミド
20 µg 包装:最大 20 回のトランスフェクションが可能
■
3 種の gRNA をプール:CRISPR/Cas9 ノックアウト(KO)
プラスミドは、最大のノックアウト効率が得られるようデザインさ
れた、Cas9 ヌクレアーゼと標的特異的 20 塩基ガイド RNA
(gRNA)をコードする 3 種のプラスミドのプール
■
NL
Cas 9
term:終末シグナル
S
CBh(ニワトリβアクチン混成体)
プロモータ:
Cas9発現を駆動
NLS:核局在化シグナル
SpCas9 リボヌクレアーゼ
NLS:核局在化シグナル
■
gRNA足場:
Cas9の標的DNA結合を介助
g
sca RNA
f fo
ld
rm
Te
この CRISPR/Cas9 メカニズムは、
哺乳動物細胞を含む種々のシステムにおける
20 nt
sequence
C Bh
外来性遺伝物質の崩壊に利用される適応型免疫防
gRNA
Plasmid
2
gRNA
Plasmid
1
gRNA
Plasmid
3
優れた gRNA 配列:gRNA 配列は GeCKO(v2)ライブラリー
由来であり、Cas9 タンパク質を配向してゲノム DNA 内に部位
特異的2本鎖切断(DSB)を誘発する。
■
ヒトおよびマウス遺伝子を網羅
■
Ready-to-use:トランスフェクションに直ちに利用できる精製
済プラスミド DNA ( 非ウイルスベクター ) をご提供
Targeted DNA
細胞へ
トランスフェクション
Cas9リボヌクレアーゼと
gRNAの転写
Cas9 Nuclease
Target DNA
GFP マーカーで
トランスフェクション効率を
視覚化
Cut
Site
PAM
Site
NGG
NCC
Cas9/gRNA複合体がゲノムDNAのPAM部位隣接
標的座位に結合
● 3種のgRNAプラスミドが標的とする3つの特異的
部位においてCas9が遺伝子の5'エキソンを切断
● 標的遺伝子の崩壊
●
20 nt sequence
商品に関するご相談・お問い合わせは・
・
・ TEL:03-5632-9610 FAX: 03-5632-9619
サンタクルズ社は、各 CRISPR/Cas9 2本鎖切断部位に特異的な HDR
(Homology Directed Repair) プラスミドをご用意しています。
HDR プラスミド
RFP(
赤色蛍光タンパク質)
:
Red
Fluorescent Protein:
トランスフェクションの視認用
DNA 修復テンプレートをご提供する製品です。
LoxP (34 bp)組換え部位:
Creリコンビナーゼ認識部位
スミドにより生じた切断部位に相当する相同組換え修復
(HDR)テンプレートから構成
m
Ar
3'
Co-transfection
20 nt
sequence
g
sca RNA
ffo
ld
CRISPR/Cas9
Knockout Plasmid
各 HDR テンプレートは、相当する Cas9 誘導型二本鎖
2A
DNA 切断部位周辺のゲノム DNA に特異的結合するよう
設計された 2 つの相同性アーム (800 bp) を含む
■
U6
NLS
各 HDR プラスミドはノックアウト(KO)細胞の選択を可能
Cas 9
S
NL
とするピューロマイシン耐性遺伝子を挿入
■
各ピューロマイシン耐性遺伝子には 2 つの LoxP 部位が
隣接し、Cre ベクターを用いた切除が可能
■
各 HDR プラスミドは RFP によりトランスフェクションの
視覚化が可能
■
Ready-to-use:トランスフェクションに直ちに利用できる
精製済プラスミド DNA ( 非ウイルスベクター ) をご提供
OH HO
OH HO
DNA containing
Cas9-Induced DSB
裏面のCreベクター
(ピューロマイシン耐性遺伝子の除去用)
も
ご参照ください。
Creベクターを用いて、ピューロマイシン耐性遺伝子を
切除することができます。
www.cosmobio.co.jp
C Bh
標的特異的 HDR プラスミドは、CRISPR/Cas9 KO プラ
LoxP (34 bp)組換え部位:
Creリコンビナーゼ認識部位
GFP
20 µg 包装:最大 20 回のトランスフェクションが可能
■
'A
rm
ピューロマイシン耐性遺伝子:
Cas9 誘導型2本鎖切断 が生ずる
細胞の選択が可能
rm
Te
■
Homology-Directed
Repair (HDR) Plasmid
5
HDR プラスミド商品
■
ro
Pu
性 DNA 切断が生ずる部位に細胞選択用ピュー
ロマイシン耐性遺伝子を組み込みます。
RFP
CMV プロモータ: promoter:
Cytomegalovirus
ピューロマイシン耐性
drives expression of the
遺伝子を駆動
Puromycin resistance gene
CM
V
同時導入すると、HDR プラスミドは Cas9 誘導
LoxP
CRISPR/Cas9 ノックアウト (KO) プラスミドと
Lox P
HDR プラスミドは、2 本鎖切断のための特異的
Cre ベクター
Cre ベクターは、2 つの LoxP 部位間の部位
Cre ベクター
CMV プロモータ:
Cre 酵素発現を駆動
Cr
e
特異的 DNA 組換えを触媒するバクテリオ
V
CM
記事 ID 検索
14017
Creリコンビナーゼ
ファージ p1 酵素である Cre リコンビナーゼ
を発現します。CRISPR/Cas9 ノックアウト
Cre VECTOR
プラスミドと HDR プラスミドを同時にトラン
スフェクトした場合、相同組換え修復(HDR)
の際に挿入された選択マーカーを利用して編
集された DNA をもつ細胞を選択することが
できます。その後、選択細胞に Cre ベクター
をトランスフェクションし、HDR の際に挿入さ
れたピューロマイシン耐性遺伝子を切除する
ことができます。
C re
相同組換え修復(HDR)に
よって挿入されたDNA 配列に
隣接する2 つのLoxP 部位に
Cre が結合して切断する
Cre ベクター商品
■
20 µg 包装:最大 20 回のトランスフェ
クションが可能
■
CRISPR/Cas9 ノックアウト (KO) プラ
スミドおよび HDR プラスミドによる編
集が完了した選択細胞における DNA 修
復に使用
■
CMV プロモーターにより Cre リコンビ
ナーゼを発現
■
Ready-to-use:トランスフェクションに
直ちに利用できる精製済プラスミド
DNA ( 非ウイルスベクター ) をご提供
■
Cre ベクター品番:sc-418923、
包装:20 µg
2 つのLoxP 部位に挟まれた
DNA 断片が環状DNA として
切除される
ゲノムDNA はDNA リガーゼにより連結され、
ゲノムDNA 上には1 つのLoxP 部位のみ
残される
CRISPR/Cas9 サポート商品
詳細はこちらより
ご覧いただけます
sc-395739
SCBT.COM
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14017
● 希望販売価格 ・・・「希望販売価格」は参考であり、販売店様からの販売価格ではございません。
記載の希望販売価格は2014 年 12 月1日現在の希望販売価格です。
予告なしに改定される場合がありますので、ご注文の際にご確認下さい。消費税は含まれておりません。
● 使 用 範 囲 ・・・ 記載の商品は全て、「研究用試薬」です。
人や動物の医療用・臨床診断用・食品用等としては使用しないよう、十分ご注意ください。
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