Empower3 PDA トレーニングテキスト 3471-J 日本ウ ォ ー タ ーズ株式会社 XEM3PDA0100 TEL : 0120-800-299 FAX : 03-3471-7118 E-Mail : [email protected] Web : http://www.waters.com/ iRequestWeb サポー ト : http://www.waters.com/irequest Empower ト ラ ブルシ ュ ーテ ィ ング : http://www.waters.com/japan_empower_tips Masslynx ト ラ ブルシ ュ ーテ ィ ン グ : http://www.waters.com/japan_masslynx_tips Empower3 PDA ト レ ーニ ン グテキス ト このテキス ト の利用法 初めて使う場合 • まず Empower3 基礎トレーニングテキストをご一読ください。ソフトウェ アの基本ルールや操作方法をご紹介しています。このテキストでは PDA (2998,2996,996 及び ACQUITY シリーズ)検出器を用いた測定条件や、3D データ解析に特有の操作をピックアップしています。 PDA 検出器を用いて初めて分析を行う場合 •第 1 章をご覧になり分析に必要な液クロの運転条件設定(装置メソッド・ メソッドセットの作成)を行います。 •第 1 章でお試しのデータを分析した場合は第 2 章に進み、面積計算・検量 線作成・定量計算・スペクトル解析に必要な解析条件(解析メソッド及 びメソッドセット)を作成します。ここでメソッドセットを作成してお くと、以後の分析時に(または分析後の再解析時)、メソッドセットを 使用した解析が可能になります。 PDA 検出器データの解析 •第 2 章で作成したメソッドセットをご使用いただくと、分析と同時に解析 を自動で実行できます。分析終了後、第 4 章の「結果データの確認」第 5 章の「解析結果の印刷」を行います。 •同時解析を行っていない場合は分析後の解析が必要です。 •分析と同時に解析を行った(あるいは行っていない)場合でも、第 3 章の 「サンプルセットデータの再解析」セクションをご覧になれば、分析し たデータを再解析(あるいは解析)できます。 *このテキストでご紹介する解析とは、スペクトル情報を用いたピーク純 度試験・ライブラリ検索、2D クロマトグラムによる検量線作成・定量を 含みます。該当部分をご参照下さい。 解析結果の印刷 •印刷を行う場合は第 5 章で行います。 ライブラリの管理 • Empower3 では、ライブラリ管理は専用画面を用います。変更・バックアッ プ・リストア・削除等をされる場合は第 6 章の「ライブラリの管理」を ご参照下さい。 XEM3PDA0100 Empower3 PDA ト レーニ ン グ 目 次 第1章 分析を行う Empower3 の起動 - - - - - - - - - - - - 分析条件の設定-装置メソッド - - - - - 装置のセットアップ・ベースラインモニター シングルインジェクションの分析開始 - - - 第2章 解析条件の設定 クロマトグラムを確認する - - - - 解析メソッド / メソッドセットの作成 メソッドセットの確認・変更 - - - 解析メソッド・メソッドセットの保存 複数波長を抽出する場合 - - - - - - 第3章 - - - - 2-2 - 2-9 - 2-27 - 2-29 - 2-30 - - - - 3-2 - 3-4 - 3-7 - 3-8 -3-11 - 3-13 サンプルセット データの再解析 連続分析のデータを表示する - - - メソッドセットの適用 - - - - - - 解析メソッド・メソッドセットの保存 サンプル情報の変更 - - - - - - - 自動解析の実行 - - - - - - - - - 解析の終了 - - - - - - - - - - - - 第4章 -1-2 -1-3 -1-8 -1-11 結果の確認 結果を表示する - - - - - - - - - - - - - -4-2 結果の確認 - - - - - - - - - - - - - - - -4-4 純度試験やライブラリ検索に問題があった場合 4-11 第5章 解析結果の印刷 結果の選択 - - - - - - - - - 結果のプレビュー - - - - - - 解析結果の印刷 - - - - - - - レポートメソッドの編集 - - - レポートメソッドのコピー - - 多波長サマリのレポートメソッド - - - - - -5-2 -5-3 -5-5 -5-7 -5-13 -5-15 XEM3PDA0100 Empower3 PDA ト レーニ ン グ 第6章 ライブラリの管理 バックアップ - - - - - - - - - - - - - - - 6-2 リストア - - - - - - - - - - - - - - - - - 6-2 削除 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 6-2 第7章 Appendix 検出器のランプ OFF - - - - - - - - - - 「メソッド表示」からの装置メソッドの作成 システムを自動的に停止させる - - - - - メソッドセットに生成チャンネルを登録する - - - - 同定条件の最適化 - - - - - - - - - - PDA 解析結果の検討 - - - - - - - - - - PDA 解析 - 溶媒アングル - - - - - - - - PDA レポートグループの種類 - - - - - - 多波長サマリレポートの作成 - - - - - - - 7-2 7-6 7-14 7-21 7-24 7-27 7-33 7-35 7-41 XEM3PDA0100 Empower3 PDA ト レーニ ン グ XEM3PDA0100 Empower3 PDA ト レーニ ン グ 第1章 分析を行 う こ の章では始めて分析を行 う 場合の条件設定、 確認を目的 と し た簡単な分 析の手順を ご紹介 し てい ます。 XEM3PDA0100 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 1-1 分析を行 う 1.Empower3 の起動 □デス ク ト ッ プ上の Empower3 ロ グ イ ン シ ョ ー ト カ ッ ト を ダブル ク リ ッ ク し 、Empower3 ロ グ イ ン画面を表示 し ます。 図 1. Empower ロ グ イ ン □ユーザー名 (例 : system)、 パ ス ワー ド (例 : manager) を入力 し ます。 □ 「詳細」 ボ タ ン を ク リ ッ ク し 、 「許可 さ れて い る ユーザー イ ン タ ー フ ェ ー ス」 欄に 「 ク ィ ッ ク ス タ ー ト 」 を選択 し ます。 □ 「OK」 を ク リ ッ ク し て ロ グ イ ン し ます。 作業に使 う プ ロ ジ ェ ク ト と PDA 用分析シ ス テムを選択 し ます。 図 2. Empower3 ク ィ ッ ク ス タ ー ト 画面 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 1-2 XEM3PDA0100 分析条件の設定-装置 メ ソ ッ ド 2. 分析条件の設定-装置 メ ソ ッ ド 初めて分析す る 時には Empower3 で メ ソ ッ ド を設定 し ます。以下の 4 種類の メ ソ ッ ド を 使用 し て、 分析に必要な ク ロ マ ト グ ラ ム の測定条件、 解析条件、 レ ポー ト 書式な ど を 設定 し ます。 ★ メ ソ ッ ド の基本は 4 つの種類 ・ 装置 メ ソ ッ ド : ポ ン プの送液条件、 検出器の波長な ど の運転条件や ク ロ マ ト グ ラ ムの 保存条件 ・ 解析 メ ソ ッ ド * : 面積の計算、 ピー ク の同定、 検量線作成、 定量の条件 ・ レ ポー ト メ ソ ッ ド * : 解析 し た結果を印刷す る 書式 ・ メ ソ ッ ド セ ッ ト : 分析 ・ 解析 ・ レ ポー ト の各条件名は何を使 う のか選んだ も の。 分析の作業では メ ソ ッ ド セ ッ ト 名を指定 し ます。 メ ソ ッ ド セ ッ ト に リ ス ト さ れてい る 、 装置 メ ソ ッ ド ・ 解析 メ ソ ッ ド * ・ レ ポー ト メ ソ ッ ド * が働いて一連の分析が行え ます。 * 印は分析を行 う 場合は必須ではあ り ません。分析終了後再解析を行 う と き に設定 し て く だ さ い。 分析時には必ず メ ソ ッ ド セ ッ ト が必要です。 メ ソ ッ ド セ ッ ト 内に分析に使用す る装置 メ ソ ッ ド を指定 し て、 分析を行います。 PDA デー タ の解析時には、2D ク ロ マ ト グ ラ ムの抽出が必要です。抽出条件は メ ソ ッ ド セ ッ ト 内で設定で き ます。 第 2 章を ご参照下 さ い。 2.1 メ ソ ッ ド セ ッ ト 編集 ウ ィ ザー ド メ ソ ッ ド セ ッ ト 編集 ウ ィ ザー ド を使用す る と 、 各 メ ソ ッ ド を指定 し た メ ソ ッ ド セ ッ ト を簡単に作成で き ます。 装置 メ ソ ッ ド の新規作成 も 可能です。 図 3. 「取 り 込みビ ュ ー」 の メ ソ ッ ド セ ッ ト 編集ボ タ ン □ 「 メ ソ ッ ド セ ッ ト 編集 ウ ィ ザー ド 」 ボ タ ン を ク リ ッ ク し ます。 「 メ ソ ッ ド セ ッ ト 新規作成 ウ ィ ザー ド 」 が表示 さ れ ます。 各画面で設定 し てい き ます。 XEM3PDA0100 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 1-3 分析を行 う 図 4. 「装置 メ ソ ッ ド の選択」 画面 □既存の装置 メ ソ ッ ド を リ ス ト か ら 選択す る か、 装置 メ ソ ッ ド を新規作成す る 場合は 「新規作成」 ボ タ ン を ク リ ッ ク し ます。 図 5. 「装置 メ ソ ッ ド 」 編集画面 各モジ ュ ールのア イ コ ン □各モジ ュ ールのア イ コ ン を それぞれ ク リ ッ ク し てパ ラ メ ー タ 設定 し ます。 こ こ では 2998 検出器のみを ご紹介 し ます。 2996 及び 996 検出器は 7-8 ページの 「2996/996 検出器装置 メ ソ ッ ド の作成」、 UPLC PDA/eλPDA 検出器は 7-10 ページの「UPLC PDA/eλPDA 検出器装置 メ ソ ッ ド の作 成」 を ご参照 く だ さ い。 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 1-4 XEM3PDA0100 分析条件の設定-装置 メ ソ ッ ド 2.2 2998 検出器装置 メ ソ ッ ド の作成 □装置 メ ソ ッ ド 編集画面の W2998 ア イ コ ン を ク リ ッ ク し ます。 ★全般 タ ブの設定 (3D デー タ 取 り 込み) 図 6. 装置 メ ソ ッ ド 編集画面 「2998 検出器 -3D デー タ 取 り 込み」 ヘルプ λ レ ン ジ . 取 り 込むスペ ク ト ルの波長範囲です。 解像度を 1.2 に設定 し た場合 : 190.0 nm ~ 800.0 nm その他の解像度の場合 : 190.0 + ( 解像度 /2)nm ~ 800.0-( 解像度 /2)nm 初期設定値は UV 領域の 210nm ~ 400nm です。 移動相のバ ッ ク グ ラ ン ド 吸収が大き い波長域は避けて く だ さ い。 ( メ タ ノ ールを使用 し た 場合は 220nm 以下は避ける) 解像度 . スペ ク ト ルの解像度を 1.2nm の整数倍で設定 し ます。 スペ ク ト ルの特徴に合わせ て設定 し ます。 た と えば 1.2nm での スペ ク ト ル と 4.8nm の スペ ク ト ルを比較 し 、 差が 無い場合は 4.8nm で測定 し たほ う がデ ィ ス ク スペース を節約で き ます。2.4nm 以上で設 定 し た場合は 1.2nm 刻みのデー タ を平均化 し ます。 サン プ リ ン グ レ ー ト . 毎秒当た り の スペ ク ト ルの取 り 込みポ イ ン ト 数を設定 し ます。 1 又 は 2 スペ ク ト ル / 秒が標準です。 ピー ク 純度を計算す る 場合は、 各ピー ク あ た り 12 以 上の スペ ク ト ルを取 り 込んで下 さ い。 その他の項目 . 既定値か ら 変更の必要はあ り ません。 ラ イ ブ ラ リ 検索をする場合、 ラ イ ブ ラ リ 登録用の標準試料 と 未知試料の分析条件は統一す る こ と を お勧め し ます。 解像度及び波長範囲が異な っ てい る場合、 マ ッ チ許容差は計算 さ れません。 2998 検出器の詳細はヘルプボ タ ンか ら 確認で き ます。 XEM3PDA0100 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 1-5 分析を行 う ★ 2D チ ャ ン ネル タ ブの設定 予め解析す る 波長が分か っ ていて、 UV スペ ク ト ルが必要ない場合に使用 し ます。 こ の 方法で取 り 込んだ ク ロ マ ト グ ラ ムは、” Empower3 基礎 ト レーニ ン グ テ キ ス ト ” と 同様 な手順で解析可能です。 図 7. 装置 メ ソ ッ ド 編集画面 「2998 検出器 -2D デー タ 取 り 込み」 チ ャ ン ネル n . 同時取 り 込みのチ ャ ン ネルの数だけチ ェ ッ ク を入れ ます。 (一度に 8 チ ャ ン ネル ま で設定可能です。) デー タ モー ド . 吸光度を選択 し ます。 λ. 測定波長を設定 し ます。 解像度 . 選択可能な範囲は 1.2nm か ら 12.0nm です。 ★装置 メ ソ ッ ド の保存 □編集後、 フ ァ イ ル メ ニ ュ ー - 「名前を付けて保存」 で保存 し ます。 □保存後、 装置 メ ソ ッ ド の編集画面を終了 し ます。 □ ウ ィ ザー ド 画面に戻 り [次へ] を ク リ ッ ク し ます。 図 8. 「既定の メ ソ ッ ド の選択」 画面 「分析のみ」で実行す る 場合、こ こ でその他の メ ソ ッ ドを指定す る 必要はあ り ません。 □その他の メ ソ ッ ド を指定 し ます。 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 1-6 XEM3PDA0100 分析条件の設定-装置 メ ソ ッ ド 図 9. 「 メ ソ ッ ド セ ッ ト の名前」 画面 装置 メ ソ ッ ド と 同 じ 名前が 自動的に入力 さ れ ます。 □ メ ソ ッ ド セ ッ ト に名前をつけて [完了] を ク リ ッ ク し ます。 ・ 純度試験 と は ピー ク ト ッ プの ス ペ ク ト ルの波形 と ピー ク 中の全ての ス ペ ク ト ルの波形を大 き さ を補 正 し て形状を比較 し ま す。 ピー ク の途中で スペ ク ト ルの形状に差が見 ら れた場合ま ず 考え ら れ る こ と は、 異な る ス ペ ク ト ル波形を持つ他の成分が ピー ク 中に同時溶出 し て い る 場合です。 こ の こ と を利用 し て純度の判定を行い ます。 詳細は 7-28 ページの 「純 度試験」 を ご参照 く だ さ い。 ・ ラ イ ブ ラ リ 検索 と は 試料中の溶出ピー ク 成分の同定は従来保持時間の一致で行っ てい ま す。 ただ し 保持時 間が同程度で も 異な る 成分は存在 し ますので、 さ ら に ス ペ ク ト ルの波形が一致す る か ど う かで同定を よ り 確実な も のにす る のが ラ イ ブ ラ リ 検索です。 詳細は 7-31 ページの 「 ラ イ ブ ラ リ 検索」 を ご参照 く だ さ い。 各 PDA 検出器の取 り 込みモード 996 2996 2998 ・ ACQUITY シ リ ー ズ 2D ( 例 : 254nm) 不可 (3D 取込後抽出) 可 (2Dor3D ど ち ら かのみ) 可 3D ( 例 : 210-400nm) 可 ラ ン プ ON/OFF イ ベ ン ト 使用 可 イ ベン ト 使用 チ ェ ッ ク マー ク or イ ベ ン ト 使用 2D チ ャ ン ネル取 り 込みでは、 スペ ク ト ルの確認はで き ません。 XEM3PDA0100 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 1-7 分析を行 う 3. 装置のセ ッ ト ア ッ プ ・ ベース ラ イ ンモニ タ ー 設定 し た装置 メ ソ ッ ド で LC シ ス テ ム を運転す る 操作がセ ッ ト ア ッ プです。 LC シ ス テ ム の平衡化の状況を確認す る 場合、 平衡化/モニ タ ーの操作を行い ます。 サ ン プル注 入は行われず、 検出器のモニ タ ーが行われ ます。 □ [取 り 込みビ ュ ー] を ON と し ます。 □ [サ ンプルの分析] タ ブ [ コ ン ト ロ ールパネル] を選びます。 図 10. コ ン ト ロ ールパネル □平衡 / モニ タ ー ボ タ ン を ク リ ッ ク し ます。 図 11. □図 11 の画面で、 装置 メ ソ ッ ド 欄に メ ソ ッ ド を指定 し ます。 □ [セ ッ ト ア ッ プ] を ク リ ッ ク し ます。 LC の運転が始ま り ます。 □ [平衡/モニ タ ー] を ク リ ッ ク し ます。 ベース ラ イ ン モニ タ ーが始ま り ます。 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 1-8 XEM3PDA0100 装置のセ ッ ト ア ッ プ ・ ベース ラ イ ンモニ タ ー 図 12. ベース ラ イ ンの拡大はマウス で も行え ます。 XEM3PDA0100 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 1-9 分析を行 う ★モ ニ タ ーの変更 モニ タ ーを変更す る 場合はモニ タ ー画面で右 ク リ ッ ク し ます。 ☆ 2D ク ロ マ ト グ ラ ムの表示 □ 「チ ャ ン ネルのカ ス タ マ イ ズ」 を選択 し ます。 □ [2D チ ャ ン ネル ] タ ブ を ク リ ッ ク し ます。 □表示 さ せたい PDA プ ロ ッ ト の種類を設定 し ます。 ク ロ マ ト グ ラ ムの場合は [ 波長 (nm) ] に波長を入力 し ます。 図 13. チ ャ ン ネルのカ ス タ マ イ ズ [2D チ ャ ン ネル ] タ ブ 3D、2D2 波長(230nm、 280nm) 同時取り込み リ アル タ イ ムプ ロ ッ ト は 4 つま で定義する こ と がで き ます。 [ 一枚の中に複数表示 ] を チ ェ ッ ク すれば 1 つのプ ロ ッ ト の枠に複数の波長の ク ロ マ ト グ ラ ムを表示で き ます。 ☆スペ ク ト ルの表示 □ 「チ ャ ン ネルのカ ス タ マ イ ズ」 を選択 し ます。 □ [3D] タ ブ を ク リ ッ ク し ます。 □ [PDA スペ ク ト ル表示 ] にチ ェ ッ ク マー ク を入れます。 ☆ Y 軸 (吸光度) の設定 □「プ ロ パテ ィ 」を選択 し ます。 □ [ ス ケー リ ン グ ] タ ブ を ク リ ッ ク し ます。 一定の ス ケールに設定す る 場合は [Y- 開始 ][Y- 終了 ] を入力 し ます。 空欄はオー ト ス ケールです。 ★ベース ラ イ ン モ ニ タ ーの中止 ベース ラ イ ン モニ タ ーは中断 し ない と ス ク ロ ールを繰 り 返 し 続行 し ます。 □画面下方にあ る [中断 (赤ボ タ ン)] を ク リ ッ ク し ます。 モ ニ タ ーを中断 し て も ポン プの送液は止ま り ません。セ ッ ト ア ッ プ を行 っ た装置 メ ソ ッ ド の初期条件で送液 さ れ続けます。 ク ィ ッ ク ス タ ー ト : モ ニ タ ーを中断 し な く て も 、 サン プルの注入操作を行 う こ と がで き ま す。 プ ロ フ ェ ッ シ ョ ナル : モ ニ タ ーの中断を行わない と 、 サン プルの注入操作を行 う こ と がで き ません Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 1-10 XEM3PDA0100 シ ン グル イ ン ジ ェ ク シ ョ ンの分析開始 4. シ ン グル イ ン ジ ェ ク シ ョ ンの分析開始 □ [シ ン グル注入] ボ タ ン を ク リ ッ ク し ます。 □分析条件を設定 し ます。 サン プル名 . サン プルの名前を設定 し ます。 機能 . 標準試料注入又は未知試料注入を選びます。 メ ソ ッ ド セ ッ ト . 作成 し た メ ソ ッ ド セ ッ ト が選ばれてい る こ と を確認 し ます。 バイ アル . 注入す る バ イ アル番号を設定 し ます。 注入量 . 注入す る 量 (μl) を設定 し ます。 図 14. ★注入操作 ・ Waters 製オー ト サ ンプ ラ ーの場合 □ [注入] を ク リ ッ ク し ます。設定 し たバ イ アル番号、注入量で分析が ス タ ー ト し ます。 ・ 他社のオー ト サン プ ラ ー ・ マニ ュ アル イ ン ジ ェ ク タ ーの場合 □ [注入] を ク リ ッ ク し ます。 シ ス テ ムの状態が " 注入待機中 " と な っ た こ と を確認 し 、 オー ト サ ンプ ラ ーの ス タ ー ト 又はサ ンプルの注入を行い ます。 図 15. 分析の実行は PDA 検出器を使用する場合であ っ て も 通常検出器 と 差があ り ません。 XEM3PDA0100 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 1-11 分析を行 う Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 1-12 XEM3PDA0100 第2章 解析条件の設定 こ の章では 3D デー タ か ら 2D ク ロ マ ト グ ラ ム を抽出 し 、 解析 (面積値の 計算、 検量線作成、 定量、 スペ ク ト ル解析) を行 う 基本条件の設定や解 析を行 う 画面の基本操作を ご紹介 し ます。 XEM3PDA0100 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 2-1 解析条件の設定 1. ク ロ マ ト グ ラ ム を確認す る 1.1 プ ロ ジ ェ ク ト 参照 ク ロ マ ト グ ラ ムの確認はプ ロ ジ ェ ク ト 画面を開いて行い ます。 □ [プ ロ ジ ェ ク ト 参照] を選びます。 プ ロ ジ ェ ク ト 画面が表示 さ れ ます。 □ [チ ャ ン ネル] タ ブ を選びます。 図 1. プ ロ ジ ェ ク ト 画面 チ ャ ン ネル タ ブ 分析直後のデー タ が見つか ら ない と きは [更新] ボ タ ン を ク リ ッ ク し 最新情報を確認 し ま す。 □条件設定す る デー タ の上で右 ク リ ッ ク 「レ ビ ュ ー」 メ ニ ュ ーを選びます。 複数のデー タ を一度に レ ビ ュ ーす る 場合はあ ら か じ め選んでおいてか ら 右 ク リ ッ ク し ま す。 [Ctrl]+ ク リ ッ ク ・ [Shift]+ ク リ ッ ク で複数選びます。 画面が狭い場合は、 「取 り 込みビ ュ ー」 を OFF にする と 画面を広 く 使 う こ と がで き ます。 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 2-2 XEM3PDA0100 ク ロ マ ト グ ラ ム を確認す る よりみち 一旦デー タ を表示 し た後、 別デー タ を表示す る 際に メ ッ セージが表示 さ れ ます。 「はい」:現在読み込まれてい る デー タ と 置 き 換え ます。 「いいえ」:現在読み込まれてい る デー タ はその ま ま で、後か ら 選択 し たデー タ を追加 し て 読み込みます よりみちはおしまい レ ビ ュ ー [ メ イ ン ] 画面が表示 さ れ ます。 2D ク ロ マ ト グ ラ ム表示画面には等高線は表 示 さ れ ません。 次ページの手順を行っ て く だ さ い。 図 2. レ ビ ュ ー 「 メ イ ン」 画面「 2D レ イ ア ウ ト 」表示 XEM3PDA0100 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 2-3 解析条件の設定 □ 「表示」 メ ニ ュ ーか ら 「3D レ イ ア ウ ト 」 を選びます。 等高線 ク ロ マ ト グ ラ ムが表示 さ れ ます。 図 3. レ ビ ュ ー 「 メ イ ン」 画面「 3D レ イ ア ウ ト 」表示 よりみち 「オプシ ョ ン」 メ ニ ュ ー 「 メ ソ ッ ド セ ッ ト オプシ ョ ン」 か ら デー タ レ ビ ュ ー時に開 く メ ソ ッ ド セ ッ ト を指定す る こ と が可能です。 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 2-4 XEM3PDA0100 ク ロ マ ト グ ラ ム を確認す る ★等高線 ク ロ マ ト グ ラ ム . 等高線 ク ロ マ ト グ ラ ムは横軸が時間、 縦軸が波長です。 吸光度の大 き さ は線の色で 示 さ れてい ます。 ☆吸光度の凡例を表示す る □画面右側下の スペ ク ト ルのテーブルの タ ブか ら 「凡例」 タ ブ を選びます。 図 4. ☆ス ケールを変更す る 時間 ・ 波長のスケール . マ ウ ス で等高線を拡大 し ます。 吸光度のスケール . 等高線 ク ロ マ ト グ ラ ム のプ ロ パテ ィ を設定 し ます。 □等高線 ク ロ マ ト グ ラ ム で右 ク リ ッ ク し 、 プ ロ パテ ィ を選びます。 図 5. 等高線プ ロ ッ ト のプ ロ パテ ィ ベース ラ イ ン付近を詳細に表示す る 場合” ○指数分布” を選びます。 吸光度の ス ケールを マニ ュ アル設定す る 場合は “低等高線” “高等高線” を変更 し ます。 □プ ロ ッ ト のプ ロ パテ ィ の設定後 [OK] を ク リ ッ ク し ます。 XEM3PDA0100 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 2-5 解析条件の設定 ★ 3D プ ロ ッ ト 取 り 込まれた 3D デー タ を 3 次元的に表示 し ます。 □「ウ ィ ン ド ウ 」 メ ニ ュ ーか ら 「 3D プ ロ ッ ト 」を選択 し ます。 図 6. レ ビ ュ ー 「3D プ ロ ッ ト 」 画面 こ こ の 部分 を ド ラ ッ グ す る と 、 360 ℃回転 し ま す ☆角度を変更す る □画面上の○を ド ラ ッ ク し 、 表示 し たい角度に変更 し ます。 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 2-6 XEM3PDA0100 ク ロ マ ト グ ラ ム を確認す る ★ MAX プ ロ ッ ト と UV スペ ク ト ル □画面左上の抽出ア イ コ ン を ク リ ッ ク し て [MAX プ ロ ッ ト ] を選択 し ます。 図 7. MAX プ ロ ッ ト 抽出 と UV スペ ク ト ル表示画面 クリックするとリストが出てきます。 選択後、MAX プロットが 表示されます。 □「解析」 メ ニ ュ ー「スペ ク ト ルの抽出」を選択 し ます。 □スペ ク ト ル抽出ボ ッ ク ス を ダブル ク リ ッ ク し て見たい時間を入力 し ます。 図 8. プロットされた UV スペクトルの 最大吸収波長 スペクトル抽出ボックス 確認 し たい ピー ク (時間) 数、 「スペ ク ト ルの抽出」を選択 し ます。 UV スペ ク ト ル確認後、 スペ ク ト ル抽出ボ ッ ク スは削除 し てお き ます。 (ボ ッ ク ス上右ク リ ッ ク し て「削除」を選択 し ます。) XEM3PDA0100 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 2-7 解析条件の設定 よりみち 等高線プ ロ ッ ト 上で右 ク リ ッ ク す る と 、 ク リ ッ ク し た位置の ス ペ ク ト ル、 及び ク ロ マ ト グ ラ ムの抽出が可能です。 クリックした位置の スペクトル及び クロマトグム よりみちはおしまい Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 2-8 XEM3PDA0100 解析 メ ソ ッ ド / メ ソ ッ ド セ ッ ト の作成 2. 解析 メ ソ ッ ド / メ ソ ッ ド セ ッ ト の作成 デー タ メ イ ン画面で表示 し たデー タ (2-6 ページの 「3D プ ロ ッ ト 」、2-7 ページの 「MAX プ ロ ッ ト と UV スペ ク ト ル」 で確認 し た最適な 2D ク ロ マ ト グ ラ ム) に最適な解析条件 を設定 し てい き ます。 こ こ では、 メ ソ ッ ド セ ッ ト を使用 し た解析を行 う 手順を ご紹介 し ます。 2.1 メ ソ ッ ド セ ッ ト の準備 PDA 解析では 2D ク ロ マ ト グ ラ ムの抽出を行 う ために メ ソ ッ ド セ ッ ト が必要です。 あ ら か じ め開いてお き ます。 □ 「フ ァ イ ル」 メ ニ ュ ー 「開 く 」 - 「 メ ソ ッ ド セ ッ ト 」 を選びます。 □分析時に使っ た メ ソ ッ ド セ ッ ト 名を選びます。 図 9. こ こ で上記の メ ッ セージに対 し ては [ いいえ ] を選択 し ます。 図 10. レ ビ ュ ー 「 メ イ ン」 画面 画面枠下の [ メ ソ ッ ド セ ッ ト : xxxx] に、 選択 し た メ ソ ッ ド セ ッ ト 名が表示 さ れた こ と を 確認 し ます。 XEM3PDA0100 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 2-9 解析条件の設定 2.2 ク ロ マ ト グ ラ ムの抽出 3D 全体では波形解析を行 う こ と はで き ません。あ ら か じ め 2D ク ロ マ ト グ ラ ム を抽出 し て お き ます。 抽出は等高線上で行い ます。 □ 「解析」 メ ニ ュ ーか ら 「 ク ロ マ ト グ ラ ム の抽出」 を選びます。 図 11. レ ビ ュ ー 「 メ イ ン」 画面 ★波長の決定 □等高線右の ク ロ マ ト グ ラ ム抽出バーを ド ラ ッ ク 又はダブル ク リ ッ ク し て波長を タ イ プ し ます ( 例 :260nm)。 ク ロ マ ト グ ラ ム が等高線下に現れ ます。 Empower3 PDA ト レーニ ン グ テ キ ス ト 2-10 XEM3PDA0100
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