J 13 u n e 'HFHPEHU )HEUXDU\ ナカライテスク Rapid Running Buffer Solution(20x) for SDS-PAGE …………………………… 1 ナカライテスク Protein Ladder One …………… 2 InvivoGen ワクチンアジュバント $XJXVW ……………… 3 $SULO Tocris 受容体型チロシンキナーゼ阻害剤 … 4 Viogene トランスフェクション試薬 Viofectin™ … 5 EZ Biosystems 細胞種別トランスフェクション試薬 …… 6 Atlas Antibodies 高品質抗体 -XQH ………………………………… 7 Santa Cruz モノクローナル抗体 新製品 ……… 8 ナカライテスク 細胞保存液 Cell Reservoir One (ガラス化法用)……………………………… 9 ナカライテスク COSMOSIL 粒子径3μm C18 カラム … 10 Rapid Running Buffer Solution(20x) for SDS-PAGE 泳動時間を約 60% に短縮 本製品は、自作ゲル用の高速泳動緩衝液です。従来の Laemmli 法組成の泳動緩衝液の代わりに使用するだけで、 泳動時間を大幅に短縮することができる画期的な緩衝液です。また、本製品使用時はゲル濃度を下げて分析 するので、ウェスタンブロッティングでのメンブレンへの転写効率を上げることもできます。 注)本製品は自作ゲル用の製品であり、プレキャストゲルの中には使用できない製品もあります。使用される場合は予備検討を行って から使用してください。 特 長 製品説明 ● ● ● ● ● 約 25 分で泳動終了* * 電圧 250V ミニゲル使用時 Laemmli 法組成泳動緩衝液を本品に置き換えるだけ グラジエントゲル様の広い分析範囲 ウェスタンブロッティングでの高い転写効率 WIDE RANGE ゲルにも適用 本製品を使用することにより、Laemmli 法組成泳動緩衝液使用時と比較し、泳動時間は約 60% 以下に 短縮されます。また、泳動緩衝液の温度上昇も Laemmli 法組成泳動緩衝液と遜色ありません。 ■ 泳動時間と泳動緩衝液の温度上昇の比較 条件:Laemmli 法組成のミニゲル 2 枚、泳動緩衝液 380ml を使用。ゲル濃度は、泳動緩衝液に本製品を使用時は 8%、Laemmli 法組成泳動緩衝液(0.025mol/l Tris, 0.192mol/l L-Glycine, 0.1% SDS)を使用時は12%。 ■ 同一ゲル濃度での比較 本製品 Laemmli 法 ゲル濃度 8%で、本製品と Laemmli 法組成泳動緩衝液を使用し、250V で 23 分間泳動 しました。本製品が短時間で分離できていることが示されています。 分離パターン ■ ゲル濃度調整例 本製品を使用する場合、従来の Laemmli 法で調製するゲルよりも 4% 低い濃度でゲルを調製することで、 従来の分離パターンに近くなります。 従来法 本製品使用 ゲル濃度 泳動緩衝液 12% Laemmli 法組成泳動緩衝液 → ゲル濃度 泳動緩衝液 8% 本製品 また、本製品と Laemmli 法組成泳動緩衝液を使い分けることにより、1 種類のゲルで低分子領域(本製品 を使用)から高分子領域(Laemmli 法組成を使用)まで分離結果を得ることができます。 ゲル Laemmli 法組成 6% ゲル 泳動緩衝液 ① 本製品 分析範囲 30∼200kDa(低分子領域) ② Laemmli 法組成泳動緩衝液 分析範囲 50∼300kDa(高分子領域) 分離パターンやウェスタンブロッティングでの分離例などは別途 BULLETIN-L-135 をご請求ください。 ■ 価格表 製品名 Rapid Running Buffer Solution(20x) for SDS-PAGE 1 LabFab News Vol.13 Jun 2015 規格 貯法 製品番号 容量 価格 SP 室温 12981-74 250 ml 5,500 Protein Ladder One プレステインド リコンビナントタンパク質マーカー 本マーカーでは組み換えタンパク質を採用していますので、バンドが非常にシャープで見やすくなっています。 またプレステインドタイプですので泳動中でもバンドの位置を確認することができます。 特 長 製品説明 ● リコンビナントタイプなのでバンドがシャープ ● ロット間の分子量のばらつきが少ない ● はっきりしたカラーのバンドで見やすい ■ バンドの泳動像 ■ 製品内容 Triple-color Multi-color タンパク質 製品番号 09547-74 製品番号 09549-25 Triple-color 10 種類 泳動像 泳動像 Multi-color 10 種類 バンド色 バンド色 青 溶液組成 青 青 ピンク 青 青 オレンジ オレンジ 青 緑 青 オレンジ 青 青 オレンジ オレンジ 青 青 緑 緑 グリセリン 33%(v/v) SDS 2%(w/v) DTT 10mM EDTA 1mM 1mM NaN3 Tris-H3PO4 62.5mM pH 7.5 5-20% トリス - グリシン SDS-PAGE 5-20% トリス - グリシン SDS-PAGE 添加量 5μl 添加量 10μl 大腸菌由来のリコンビナントタンパク質を使用しています。分子量の 実測値は、ロットごとに記載していますので、製品添付文書をご参照 ください。 使用例 ■ 他社比較 Protein Ladder One(Triple-color、 Multi-color)と A 社 製 品(2 種 類 )の 5-20%グラジエントゲルでの泳動像 (電気泳動直後) Protein Ladder One(Triple-color、 Multi-color)とA 社 製 品(2 種 類 )を 15% ゲルで泳動後、CBB 染色を実施 しました。 A 社製品と比べ、染色後もバンドの色 の違いがわかりやすくなっています。 ①Triple-color ②Multi-color ③A 社製品 -1 ④A 社製品 -2 添加量 5μl 10μl 10μl 10μl ① Triple-color ② Multi-color ③ A 社製品 -1 ④ A 社製品 -2 添加量 5μl 10μl 10μl 10μl ■ 価格表 製品名 規格 貯法 製品番号 容量 価格 Protein Ladder One, Triple-color (Broad Range) for SDS-PAGE (50 回用) SP 冷凍 09547-74 250 μl 19,000 Protein Ladder One, Multi-color (Broad Range) for SDS-PAGE (50 回用) SP 冷凍 09549-25 500 μl 24,200 LabFab News Vol.13 Jun 2015 2 ワクチンアジュバント ますます充実のラインアップ InvivoGen 社ではワクチンアジュバントを充実させており、現在、約 30 種類の製品を用意しています。今回は その中から一部の製品を紹介します。 特 長 ● 徹底した無菌条件下で製造 ● エンドトキシン試験済み ■ 価格表 使用比率または 作用濃度 エンドトキシン レベル メーカー 製品番号 容量 価格 1:1 (AddaVax™ : 抗原) <5EU/ml vac-adx-10 10 ml 54,000 1 : 9-1 : 1 (Alhydrogel : 抗原) − vac-alu-250 250 ml 56,000 完全フロイントアジュバント Th1 応答 1:1 (CFA : 抗原) vac-cfa-10 10 ml 16,000 <1 EU/ml vac-cfa-60 6×10 ml 33,000 不完全フロイントアジュバント Th2 応答 1:1 (IFA : 抗原) vac-ifa-10 10 ml 14,000 <1 EU/ml vac-ifa-60 6×10 ml 27,000 サポニンワクチンアジュバント mouse:d15μg − vac-quil 1g 45,000 3 3 -cGAMP VacciGrade™ STING リガンド Cyclic [G(3 ,5 )pA(3 ,5 )p] 5-50μg/mouse <0.005 EU/μg vac-cga 1 mg 170,000 2 3 -cGAMP VacciGrade™ STING リガンド Cyclic [G(2 ,5 )pA(3 ,5 )p] 5-50μg/mouse <0.005 EU/μg vac-cga23 1 mg 211,000 2 2 -cGAMP VacciGrade™ STING リガンド Cyclic [G(2 ,5 )pA(2 ,5 )p] 5-50μg/mouse <0.005 EU/μg vac-cga22 1 mg 211,000 c-di-AMP VacciGrade™ STING リガンド CDS アゴニスト Th1/Th2 応答 5-50μg/mouse <0.005 EU/μg vac-cda 1 mg 86,000 c-di-GMP VacciGrade™ STING リガンド CDS アゴニスト Th1/Th2 応答 5-50μg/mouse <0.005 EU/μg vac-cdg 1 mg 86,000 Chitosan VacciGrade™ NLRP3 インフラマソーム誘導剤 Th1/Th2 応答 100μg/mouse <5EU/mg vac-cht 100 mg 61,000 MPLA-SM VacciGrade™ TLR4 アゴニスト モノホスホリルリピド A Th1 応答 2-20μg/mouse − vac-mpla 1 mg 91,000 MPLA Synthetic VacciGrade™ TLR4 アゴニスト 合成モノホスホリルリピド A Th1 応答 2-20μg/mouse − vac-mpls 1 mg 91,000 10-100μg/mouse <5EU/mg vac-gdq 5 mg 145,000 製品名 概要 Alum およびエマルジョンアジュバント AddaVax™ スクアラン - 水中油型 Th2 応答 水酸化アルミニウムゲル Alhydrogel® Adjuvant 2% (Alum) Th2 応答 CFA IFA Quil-A® Adjuvant 自然免疫受容体リガンド TLR7 アゴニスト Gardiquimod VacciGrade™ イミダゾキノリン化合物 Th1 応答 3 LabFab News Vol.13 Jun 2015 受容体型チロシンキナーゼ阻害剤 Tocris 社では、さまざまなターゲットに対するアゴニスト、アンタゴニストおよび酵素の阻害剤を用意して います。今回は、受容体型チロシンキナーゼの阻害剤を一部紹介します。 製品名 メーカー 製品番号 主な作用 容量 価格 ASP 3026 (IC50 = 5.8nM) 強力な未分化リンパ腫リン酸化酵素(ALK)阻害剤 (IC50 = 3.5nM)。また、Ack 5310/10 10 mg 52,000 および ROS1(IC50 = 8.9nM)活性を阻害する。 において NPM-ALK 陽性の T 細胞性 未分化大細胞リンパ腫 (ALCL)の細胞増殖を抑制しアポトーシスを誘導する。マウスに 異種移植した NPM-ALK 陽性の ALCL 細胞の腫瘍の増殖を抑制する。hEML4-ALK トランス 5310/50 50 mg 222,000 ジェニックマウスの腫瘍縮小効果を有する。経口投与可能。 Norleual アンジオテンシン IV アナログ。非常に強力な HGF/c-MET 阻害剤(IC50 = 3pM)。 に おいて、HGF 誘導性の MDCK 細胞の増殖および浸潤を阻害する。また、AT4 受容体の アンタゴニストでもある (LTP の安定化を妨害) 。抗血管新生。 5369/1 1 mg 59,000 XL 184 強力な VEGFR 阻害剤(IC50 = 0.035nM)。また、c-Met(IC50 = 1.3nM)、KIT(IC50 = 4.6nM)、 5422/10 10 mg 60,000 RET( IC 50 = 5.2nM)、FLT4( IC 50 = 6nM)、AXL( IC 50 = 7nM)、FLT3( IC 50 = 11.3nM)、FLT1 (IC50 = 12nM)、Tie2(IC50 = 14.3nM)を阻害する。腫瘍の低酸素環境やアポトーシスを誘導。 5422/50 50 mg 254,000 において腫瘍浸潤および転移を減少させる。抗血管新生。 AEE 788 (IC50 = 6nM)、VEGFR-1 強 力 な EGFR お よ び VEGFR 阻 害 剤(EGFR (IC50 = 2nM)、ErbB2 5318/10 10 mg 72,000 (IC50 = 160nM)、VEGFR-3 (IC50 = 330nM)) 。 (IC50 = 59nM)、VEGFR-2(IC50 = 77nM)、ErbB4 また、c-Abl (IC50 = 52nM) 、c-Fms (IC50 = 60nM)および c-Src (IC50 = 61nM)を阻害する。 において EGFR および ErbB2 過剰発現がん細胞の増殖を阻害する。マウスに異種 5318/50 50 mg 302,000 移植した腫瘍の増殖、および VEGF 誘導性の血管新生を阻害する。経口投与可能。 PKI 166 Hydrochloride 強力な EGFR キナーゼ阻害剤(IC50 = 0.7nM)。セリン / スレオニンキナーゼ群に対し、 3000 倍以上の選択性を示す。膵臓がんのモデルマウスにおいて、転移および血管新生 4941/10 10 mg を減少させる。降圧剤、経口投与可能。 59,000 SU 5402 強力かつ選択的な血管内皮細胞増殖因子受容体(VEGFR)および線維芽細胞増殖因子受容体 (FGFR)阻害剤(VEGFR2(IC50 = 0.02μM)、FGFR1(IC50 = 0.03μM)、PDGFRβ(IC50 = 0.51μM)、 EGFR (IC50 > 100μM))。胚の左右決定を阻害し、 および において、強力な 抗がん活性を示す。神経幹細胞のインテグリンβ 4 誘導による分化を抑制する。 BMS 536924 (IGF1R) イ ン ス リ ン 受 容 体(IR) (IC50 = 73nM)お よ び イ ン ス リ ン 様 成 長 因 子 1 受 容 体 4774/10 10 mg 72,000 (IC50 = 100nM)の両方を阻害する。受容体の自己リン酸化、下流の MEK1/2、Akt シグナル 伝達を阻害する。ML-1 細胞の G1 期停止およびアポトーシスを誘導する。また、複数の mRNA の発現 腫瘍型で細胞増殖を阻害する。IGF1R を過剰発現する MCF10A 細胞の 4774/50 50 mg 302,000 を弱めることで、EMT を逆転させる。 3300/1 1 mg (FGFR1) 3785/1 強力なチロシンキナーゼ c-Src(IC50 = 8.4nM)、線維芽細胞増殖因子受容体 1 1 mg 血小板由来増殖因子受容体 β (PDGFRβ) (IC50 = 98.3nM) の阻害剤。また、 (IC50 = 39.3nM)、 PD 166285 Dihydrochloride* チェックポイントキナーゼ Wee1 および Myt1 を阻害する。多くの腫瘍細胞株で Cdc2 3785/10 10 mg のリン酸化を阻害し、G2 チェックポイントを欠失させる。 60,000 27,000 63,000 *Pfizer Inc. の許可を得て販売しています。 ● 上記に記載されている作用は各化合物の主な作用であり、必ずしも特異的に作用するものではありません。 ● 各化合物の詳細に関しては、Tocris 社の Web site(http://www.tocris.com/) を必ずご確認ください。 Tocris 社より発刊されているがん研究、キナーゼに関する冊子の日本語版を用意しています。 ご希望の方は、弊社営業所または販売取扱店までご連絡ください。 がん研究 製品ガイド ¦ 第2版 高品質ライフサイエンス試薬 イヌサフラン $PMDIJDVNBVUVNOBMF コルヒチンの原料 研究領域別目次: 受容体シグナル伝達 ........................................................................................................... 3 細胞周期とDNA損傷の修復 ............................................................................... 8 細胞死と薬剤耐性 .............................................................................................................. 12 血管新生.................................................................................................................................................14 浸潤と転移......................................................................................................................................... 15 主な掲載内容 ・受容体シグナル伝達 ・細胞周期と DNA 損傷の修復 ・細胞死と薬剤耐性 ・血管新生 ・浸潤と転移 ・参考文献 キナーゼ 製品ガイド ¦ 第2版 高品質ライフサイエンス試薬 クサノオウ $IFMJEPOJVNNBKVT チェレリスリンの原料 グループ別キナーゼ製品: AGCグループ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 CAMKグループ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7 CK1グループ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9 TKLグループ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19 その他のプロテインキナーゼ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 21 主な掲載内容 ・AGC グループ ・CAMK グループ ・CK1 グループ ・CMGC グループ ・STE グループ ・TK グループ ・TKL グループ ・その他のプロテインキナーゼ ・非定型キナーゼ ・脂質関連キナーゼ ・広域スペクトルのキナーゼ阻害剤 ・ホスファターゼ 非定型キナーゼ .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22 CMGCグループ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10 脂質関連キナーゼ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23 STEグループ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14 広域スペクトルのキナーゼ阻害剤 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24 TKグループ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15 ホスファターゼ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 LabFab News Vol.13 Jun 2015 4 トランスフェクション試薬 Viofectin™ トランスフェクション試薬 Viofectin™は広範囲の細胞種に使用可能で優れたコストパフォーマンスが魅力です。 特 長 性能評価 ● 優れたコストパフォーマンス ● DNA および RNA のトランスフェクションが可能 ● 血清存在下で使用可能 ■ GFP 発現プラスミドの導入効率 ● 比較データ Viofectin™ A 社製品① 光学顕微鏡像 蛍光顕微鏡像 HEK293 細胞 ● 実用例 HepG2 細胞 C3H10T1/2 細胞 比較データでは、A 社製品①と同程度の導入効率を持つことが示された。また実用例より、トランスフェクション試薬 による細胞形態に変化は見られず、細胞毒性が低いことが示された。 データご提供:国立大学法人京都大学大学院 農学研究科 食品生物科学専攻 食品分子機能学分野 後藤 剛 准教授 ■ FACS 分析結果 ● HeLa 細胞への遺伝子導入効率 1. Viofectin™ 1μl + pDNA 1μg 2. Viofectin™ 2μl + pDNA 1μg 3. Viofectin™ 1μl + pDNA 0.5μg 4. Viofectin™ 2μl + pDNA 0.5μg 5. A 社製品② 1μl + pDNA 0.5μg FACS を用いて導入効率を測定した結果、HeLa 細胞は A 社製品②と同等、もしくはそれ以上の導入効率を示した。 データご提供:国立大学法人京都大学化学研究所 生体機能設計化学研究領域 ■ 価格表 製品名 Viofectin™ Transfection Reagent メーカー製品番号 製品番号 容量 価格 VFT1001 13359-01 1 ml 39,000 VFT1002 13359-56 10 ml 312,000 24 ウェルプレートの場合、接着細胞では 1 ウェルあたり約 0.6∼2μl、浮遊細胞では 0.2∼1μl 使用します。 5 LabFab News Vol.13 Jun 2015 細胞種別トランスフェクション試薬 EZ Biosystems 社ではさまざまなトランスフェクション試薬を販売しています。細胞種別トランスフェクション 試薬では、初代培養細胞や細胞株を含む 180 種類の細胞種別の製品を用意しています。 特 長 製品説明 使用例 ● ● ● ● 180 種類の細胞種別試薬 数千種類の化合物から組成を厳選 細胞種別に原料 / 組成 / プロトコールを厳密に検討 高効率かつ低細胞毒性を実現 試薬の性能は、複合体のサイズや電荷、細胞の増殖状態やエンドサイトーシス能などさまざまな要因に より影響を受けます。EZ Biosystems 社では、細胞種別の優れたトランスフェクション試薬を提供する ために、数千種類の化合物ライブラリーを作製し、その中から厳選した原料を選別し、プロトコールも 最適化しています。 以下に一部の製品を掲載します。その他、全体のラインアップについては、EZ Biosystems 社 Web site (http://ezbiosystems.com/)をご確認ください。 Human Cardiac Fibroblasts Human Dermal Fibroblast (HDF) Human Fibroblast-Like Synoviocyte Human Lung Fibroblast Human Renal Epithelial cell (HRE) hMSC C6 (rat brain glioma cell) Hepa 1-6 Hep 3B 22Rv1 SF268 SNB.75 T98G U-87 MG U251 ■ 価格表 各製品共に 0.5ml と 1.5ml を用意しています。 容量 価格 0.5 ml 78,000 1.5 ml 136,000 使用量は製品により異なりますが、24 ウェルプレートの場合、1 ウェルあたり 0.2∼1μl 使用します。 LabFab News Vol.13 Jun 2015 6 高品質抗体 Atlas Antibodies 社が有する抗体は、ヒト正常・がん組織や各種細胞株で検証した免疫染色のデータが豊富で、 特にヒト細胞 / 組織の免疫染色におすすめです。また、ヒト以外の交差性やアプリケーションデータも拡充 されており、対応可能なサンプルや用途の保証も充実してきました。 お探しの抗体がありましたらぜひ検索してください(検索ページ:http://www.proteinatlas.org/) 。 特 長 ● 一つの抗体に対し約 700 枚の免疫染色の画像データ ● 交差性やアプリケーションデータも拡充 使用例 ● Anti-BARHL1: HPA004809 Immunohistochemical staining of human cerebral cortex shows strong nuclear positivity in neuronal cells and glial cells. ● Anti-PARD3: HPA030443 ● Anti-TFE3: HPA023881 Immunofluorescent staining of human cell line U-2 OS shows positivity in cell junctions. Antibody staining is shown in green. Lane 1: Marker Lane 2: Human cell line RT-4 ■ 価格表 製品名 Anti-ARID1A 交差性 アイソタイプ 用途 メーカー製品番号 容量 価格 Hu IgG IHC, IF HPA005456 100 μl 68,000 Anti-ATF3 Hu, Ms, Rt IgG IHC, IF, WB HPA001562 100 μl 68,000 Anti-ATRX Hu IgG IHC HPA001906 100 μl 68,000 Anti-BARHL1 Hu IgG IHC HPA004809 100 μl 68,000 Anti-CD44 Hu IgG IHC, IF, WB HPA005785 100 μl 68,000 Anti-CRBN Hu, Ms, Rt IgG IHC, IF, WB HPA045910 100 μl 68,000 Anti-EFNB2 Hu, Ms, Rt IgG IHC, WB HPA008999 100 μl 68,000 Anti-FCGRT Hu IgG IHC, WB HPA012122 100 μl 68,000 Anti-FLNC Hu IgG IHC, IF, WB HPA006135 100 μl 68,000 Anti-GRHL2 Hu IgG IHC, IF HPA004820 100 μl 68,000 Anti-HNF1B Hu IgG IHC, IF, WB HPA002083 100 μl 68,000 Anti-LGR5 Hu IgG IHC, WB HPA012530 100 μl 68,000 Anti-MB21D1 Hu IgG IHC, IF, WB HPA031700 100 μl 68,000 Anti-MCU Hu IgG IHC, IF HPA016480 100 μl 68,000 Anti-PARD3 Hu IgG IHC, IF, WB HPA030443 100 μl 68,000 Anti-PHLDA1 Hu, Ms, Rt IgG IHC, IF, WB HPA019000 100 μl 68,000 Anti-PLA2R1 Hu IgG IHC, IF HPA012657 100 μl 68,000 Anti-PLA2R1 Hu IgG1 IHC, WB AMAb90772 100 μl 68,000 Anti-PTGER4 Hu IgG IHC HPA011226 100 μl 68,000 Anti-SOX11 Anti-TFE3 Anti-WWTR1 Anti-ZEB1 Hu IgG2a IHC, WB AMAb90501 100 μl 68,000 Hu, Ms, Rt IgG IHC, IF, WB HPA023881 100 μl 68,000 Hu, Ms IgG IHC, IF, WB HPA007415 100 μl 68,000 Hu IgG IHC, IF, WB HPA027524 100 μl 68,000 交差性:Hu = Human, Ms = Mouse, Rt = Rat 用途:WB = Western Blotting, IF = Immunofluorescence, IHC = Immunohistochemistry 抗原のアミノ酸配列は Web site (https://atlasantibodies.com) で検索してください。 7 LabFab News Vol.13 Jun 2015 モノクローナル抗体 新製品 さまざまな研究対象の抗体がさらに充実 Santa Cruz 社では、シグナル中間体、転写因子、輸送関連タンパク質などさまざまな研究対象の抗体に、 新しくラインアップを追加しました。今回はその中から、一部の製品を紹介します。 使用例 ● COX2 (D-5): sc-514489 ● Aminoacylase-1 (D-7): sc-514432 Western blot analysis of COX2 expression in HeLa (A), THP-1 (B), MCF7 (C), K-562 (D) and Jurkat (E) whole cell lysates. Western blot analysis of Aminoacylase-1 expression in K-562 (A), Caki-1 (B), HeLa (C), Hep G2 (D) and SH-SY5Y (E) whole cell lysates. ● LARS2 (G-9): sc-514454 Western blot analysis of LARS2 expression in K-562 (A), Jurkat (B), Raji (C), MOLT-4 (D), Hep G2 (E) and CCRF-CEM (F) whole cell lysates. ■ 価格表 製品名 交差性 抗原 アイソタイプ 用途 メーカー製品番号 容量 価格 ADAM15 (A-10) Hu Calpain 15 (D-5) Hu 89-111 (Hu) mouse IgM WB, IP, IF, ELISA sc-514483 200 μg/ml 58,000 1-119 (Hu) mouse IgG1 WB, IP, IF, ELISA sc-514406 200 μg/ml 58,000 COX2 (D-5) Hu 169-192 (Hu) mouse IgM WB, IP, IF, ELISA sc-514489 200 μg/ml 58,000 ITPase (A-4) Hu 1-194 (Hu) mouse IgG1 WB, IP, IF, ELISA sc-514409 200 μg/ml 58,000 合成と分解 TAB182 (G-5) Hu 1084-1140 (Hu) mouse IgG1 WB, IP, IF, ELISA sc-514490 200 μg/ml 58,000 Tyrosinase (B-3) Hu 506-527 (Hu) mouse IgG2a WB, IP, IF, ELISA sc-514492 200 μg/ml 58,000 USP13 (E-11) Hu 71-195 (Hu) mouse IgG2a WB, IP, IF, ELISA sc-514442 200 μg/ml 58,000 シグナル中間体 Aminoacylase-1 (D-7) Hu 357-379 (Hu) mouse IgM WB, IP, IF, ELISA sc-514432 200 μg/ml 58,000 Raftlin (E-11) Ms 29-328 (Ms) mouse IgG2b WB, IP, IF, ELISA sc-514457 200 μg/ml 58,000 Sam 68 (C-7) Ms 331-443 (Ms) mouse IgG1 WB, IP, IF, ELISA sc-514404 200 μg/ml 58,000 Septin 8 (G-12) Hu 1-20 (Hu) mouse IgG2b WB, IP, IF, ELISA sc-514436 200 μg/ml 58,000 TRB-3 (E-7) Hu 331-348 (Hu) mouse IgG1 WB, IP, IF, ELISA sc-514455 200 μg/ml 58,000 USH1G (D-10) Hu 1-17 (Hu) mouse IgG1 WB, IP, IF, ELISA sc-514418 200 μg/ml 58,000 WDR48 (E-4) Hu 530-640 (Hu) mouse IgG2a WB, IP, IF, ELISA sc-514473 200 μg/ml 58,000 Zonadhesin (H-2) Ms 151-450 (Ms) mouse IgG2b WB, IP, IF, ELISA sc-514467 200 μg/ml 58,000 転写因子 BAF60a (A-11) Hu 5-304 (Hu) mouse IgG2a WB, IP, IF, ELISA sc-514400 200 μg/ml 58,000 E2F-2 (H-9) Hu 1-120 (Hu) mouse IgG1 WB, IP, IF, ELISA sc-514477 200 μg/ml 58,000 GATA-3 (C-11) Hu 167-214 (Hu) mouse IgG1 WB, IP, IF, ELISA sc-514427 200 μg/ml 58,000 LARS2 (G-9) Hu 217-232 (Hu) mouse IgG1 WB, IP, IF, ELISA sc-514454 200 μg/ml 58,000 Med18 (E-4) Hu 1-208 (Hu) mouse IgG1 WB, IP, IF, ELISA sc-514415 200 μg/ml 58,000 NFκB p65 (A-12) Hu 1-286 (Hu) mouse IgG1 WB, IP, IF, ELISA sc-514451 200 μg/ml 58,000 TFIIH p52 (A-10) Hu 20-319 (Hu) mouse IgG2a WB, IP, IF, ELISA sc-514448 200 μg/ml 58,000 200 μg/ml 58,000 輸送関連タンパク質 Metaxin 1 (G-7) Hu 362-412 (Hu) mouse IgG1 WB, IP, IF, ELISA sc-514469 SNAP47 (D-11) Hu 290-442 (Hu) mouse IgG1 WB, IP, IF, ELISA sc-514428 200 μg/ml 58,000 Tim23 (H-8) Hu 31-209 (Hu) mouse IgG2b WB, IP, IF, ELISA sc-514463 200 μg/ml 58,000 Tom1 (H-5) Hu 368-439 (Hu) mouse IgG2a WB, IP, IF, ELISA sc-514430 200 μg/ml 58,000 交差性:Hu = Human, Ms = Mouse 用途:WB = Western Blotting, IP = Immunoprecipitation, IF = Immunofluorescence Santa Cruz 社では、その他さまざまな研究対象のモノクローナル抗体の新製品を販売しています。Web site(http://www.scbt.com/new_ monoclonal_antibodies.html)をご参照ください。 LabFab News Vol.13 Jun 2015 8 細胞保存液 Cell Reservoir One (ガラス化法用) iPS 細胞の実施例充実 ご好評頂いているセルリザーバーワンは、優れた細胞凍結保護作用を有するマユ由来タンパク質のセリシンを 主成分とした細胞保存液です。ガラス化法用の本製品は、保存液を添加後液体窒素に投入するまでの時間が、 従来の 15 秒から 60 秒まで延長可能で操作性に大変優れています。今回は、ヒト iPS 細胞の保存例について 紹介します。 特 長 ● 凍結までの操作時間 60 秒でも高い生存率 ● 毒物としての管理不要 ● DMSO、アセトアミド不含で低細胞毒性 実施例 ■ 414C2 株の保存 (エピソーマルベクターにより樹立したヒト iPS 細胞株) 使用した保存液 保存法 ① A 社 ガラス化法用凍結保存液 + Y-27632 ② 弊社 Cell Reservoir One(ガラス化法用)+ Y-27632 コロニー数 ガラス化法用 278 個 269 個 ③ B 社 緩慢法凍結保存液 38 個 ④ B 社 緩慢法凍結保存液 + Y-27632 71 個 緩慢凍結法 ⑤ 弊社 緩慢法凍結保存液 ⑥ 弊社 緩慢法凍結保存液 + Y-27632 15 個 26 個 Cell Reservoir One(ガラス化法用)は、生存率が緩慢凍結法と比べると高いことから、ヒト iPS 細胞の保存に適している。 また、A 社製品と比べると保存液の粘度が低いため、扱いやすいと感じた。 データご提供:京都府立医科大学大学院 医学研究科 佐藤 貴彦 助教 ■ ヒト iPS 細胞 (201B7 株 *1) での生存率の比較 *1 Takahashi, K. . , 2007 Nov 30;131(5) :861-872 ● 凍結操作時間 60 秒 コロニー数 使用した保存液 ガラス化法 60 秒 15 秒 A Cell Reservoir One (ガラス化法用) 672 563 B 37 479 DAP213 Cell Reservoir One (ガラス化法用) 、DAP213 それぞれを用いて液体窒素中で 2 週間以上凍結保存し、細胞を起こして から 4 日目にアルカリホスファターゼを用いて各保存液の性能を確認した。DAP213 ではほぼ全滅したが、本製品では 非常に良好な生存率を示した。 データご提供:外部研究機関 ■ 価格表 製品名 Cell Reservoir One, Vitrify 主成分のセリシンは、セーレン株式会社で製造 9 LabFab News Vol.13 Jun 2015 規格 貯法 製品番号 容量 価格 SP 冷蔵 11325-62 25 ml 16,500 COSMOSIL 粒子径 3μm C18カラム 粒子径 3μm へ変更でランニングコスト削減 充填剤の粒子径を微小化すると、短いカラムで同等の分離能が得られます。お使いの 5μm C18カラムから 3μm C18カラムに変更することによるコスト削減方法について紹介します。 メリット ● 分析時間を短縮できる ● 消費溶媒量の削減につながる ● カラムの価格が安くなる(一部を除く) カラムの変更方法 充填剤の粒子径を微小化すると分離能が高くなります。一方カラム長を短くすると分析時間は短縮でき ますが、分離能は低下します。二つのパラメーターを左表に従って変更いただくと、分離能を維持しつつ 分析時間の短縮ができます。 ■ 粒子径 3μm の推奨カラムサイズ ■ 粒子径、カラム長の関係 お使いのカラム 推奨カラム 粒子径 5μm 長さ 250mm → 粒子径 3μm 長さ 150mm 粒子径を 1/X 倍に 変更する 比率 分析時間 粒子径 5μm 長さ 150mm → 粒子径 3μm 長さ 100mm カラム長を 1/Y 倍に 変更する カラム圧力 理論段数 分離性能 細かい方が 高い 変わらない X2 倍 X倍 1/Y 倍 1/Y 倍 1/Y 倍 長い方が 高い X:現在の粒子径÷変更後の粒子径 Y:現在のカラム長÷変更後のカラム長 使用例 ■ 分析時間の短縮・消費溶媒量の削減 充填剤の粒子径を微小化し短いカラムを使用することにより、同等の分離能で分析時間の短縮、消費溶媒量の削減が 可能となりました。 カラム 保持時間 (Peak 5) 理論段数 (Peak 4) 分析圧力 *1 消費溶媒量 *2 Fully Porous 5μm, 4.6mmI.D.-250mm 約 37 分 23,000 13.2MPa 約 30.4 ml Fully Porous 3μm, 4.6mmI.D.-150mm 約 25 分 25,000 18.8MPa 約 20.8 ml *1 分析圧力について 粒子径 5μm よりもカラムにかかる圧力は大きくなります。粒子径 5μm, 長さ 250mm から粒子径 3μm, 長さ 150mm へ変更すると、圧力は変更前と比較して、約 1.7 倍となります。 [保持時間+1 分]で計算しています。 *2 消費溶媒量は概算です。流速 0.8 ml/min× ■ 価格表 COSMOSIL 3C18-MS-Ⅱ Packed Column サイズ 内径×長さ(mm) 製品番号 価格 COSMOSIL 3C18-AR-Ⅱ Packed Column サイズ 内径×長さ(mm) 製品番号 価格 COSMOSIL 3C18-EB Packed Column サイズ 内径×長さ(mm) 製品番号 価格 4.6×75 08758-31 35,000 4.6×75 13362-41 35,000 4.6×75 09841-91 43,000 4.6×100 38067-51 35,000 4.6×100 38070-91 35,000 4.6×100 09842-81 46,000 4.6×150 04785-91 45,000 4.6×150 06887-01 45,000 4.6×150 09843-71 50,000 LabFab News Vol.13 Jun 2015 10
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