微生物熱量計による細菌のコロニー増殖の把握とその利用東海大学開発工学研究科生物工学専攻１． ○田村匡司・古賀邦正はじめに食品の微生物汚染は固相中でのコロニー増殖によるものが多いにも関わらず、細菌のコロニー増殖に関する知見は液体中での増殖に比べて少ないのが現状である。また、通常、目視ではコロニー形成が観察されない状態でも相当数の細菌が増殖しており、食品の微生物汚染の進行という面では深刻な状態にある場合が多い。本研究では、E.coil または Bacillus 属が寒天培地上で増殖する際のコロニー増殖を、微生物熱量計を用いて増殖に伴う発熱量の経時変化（増殖サーモグラム）を測定することによって把握しようと試みている。とくに、増殖初期のコロニー形成が観察されない時期における増殖特性を中心に定量的に把握することを目的としている。２．実験方法図１は実験に用いた微生物用熱量計を示したもの示している。あるます。培養開始後約 10ｈで発熱がである。寒天培地の表層に、評価菌体を塗布したバ観測され、20ｈでピークを示しｆｌｋじゃｈｆｋｊイアル瓶をセルユニットにセットする。セルユニッｈｄｊｋｆｈｄｓｋｊト内は恒温に維持されている。評価菌体即ち E.coil または Bacillus 属のコロニー増殖に伴う代謝熱をセルユニット下部にあるサーモモジュールで捉え、電気信号に変換し、その発熱量の経時変化をマイクロコンピューターで解析し、記録する。３．結果・考察図Ａは熱量計によって得られた、寒天培地に E.coli を植菌し培養した際の発熱量の経時変化を１.熱検出装置本体２.蓋３.断熱ケース４. 恒温水循環パイプ５.恒温水供給パイプ６.恒温水返送パイプ７.恒温体（ヒートシンク）８. セルユニット９.熱検出体 10.試料皿 11.試料容器 12.直流増幅器 13.インターフェイス 14.マイクロコンピューター 15.フロッピーディスクユニット 16.ＣＲＴ 17.Ｘ－Ｙプロッター 18.プリンター図１．微生物熱量計の概略図示している。培養開始後約 10ｈで発熱が観察され、20ｈでピークを示し、その後徐々に低下し、培養開始後約 40ｈが経過すると一定となる。得られた熱変化曲線即ちサーモグラムを（１）式に従って積分すると、図Ｂに示す真の熱生成曲線ｆ（ｔ）カーブが得られる。この方法を用いて、10 時間を中心とした増殖開始時の増殖速度定数（μ値）を求めて、増殖特性を把握するとともに増殖を抑制する方法を開発する。 f （t ）＝g （t ）＋K ∫ g ( t )d t ・・・（1）