JMS-700 EI (GC-MS) 低分解能測定マニュアル資源化学研究所質量分析室運営委員会改訂：技術部すずかけ台分析支援センター 2014.7 Ver.3 操作手順概要予約システムで使用予約 ↓ GCの接続を管理者に依頼測定溶液の調整 ↓ 117室の鍵を借りる測定モードの準備 ↓ GCと本体の設定 ↓ ワークステーションの確認とSCPファイルの読み込み感度調整（チューニング） ↓ PFK導入データフォルダの作成 ↓ 測定条件ファイルの確認または作成質量較正（キャリブレーション） ↓ キャリブレーションデータ処理サンプリング ↓ サンプリング（付録1, 2）本測定 ↓ データ処理 ↓ 後片付け ↓ SCPファイルの再読み込み GCと本体の温度設定とワークステーションの確認測定記録用紙の提出 117室の施錠と鍵の返却 1 はじめに  JMS-700 の利用はセルフライセンス測定と依頼測定があります。  セルフライセンスはセンター所定のライセンス講習を受講してください。  利用の際は「大学連携設備ネットワーク」の予約システムに登録して ID を分子研から発行してもらい、大学連携設備ネットワークの web にログインして予約してください。  JMS−700 は装置初期状態で FAB 法の設定になっています。GC-MS の設定に変更する必要があるため、利用の際は web から GC 利用である事、使用するキャピラリーカラムを事前にセンターの担当者に連絡してください。  GC-MS では、通常は化合物の同定を目的としています。以下のことを確認の上、ご使用ください。  出来る限り不純物を除去する。特にアルカリ、酸、塩、触媒が存在していますと、 GC の試料導入部を汚染してしまいます。化合物によってはこれらにより、脱ハロゲン、脱水、脱水素などが起こります。  予め GC-MS で使用するカラムと同等のカラムで分析し、標準的な測定条件で溶媒との分離が可能、且つ溶出可能あることを確かめる。  通常の測定では定量性はありません。半定量（内部標準添加による比率）は可能。  GC-MS 用のキャピラリーカラムはセンターで数種類保有しています。どのカラムを使うかについて、担当者と相談の上選択して、事前に担当者が GC にセットします。  定量測定は、通常の GC-MS 測定ではなく、測定モードを SIM 法に設定して行います。装置の不具合、不明な点がありましたら、直ちに分析支援センターの担当者（石川 R1-120 室内線 5276）までご連絡ください。 2 1. 測定溶液の調製１．サンプルから必ずアルカリ、酸、塩、触媒等を除去する。（反応溶液をそのまま分析してはならない）２．サンプルの濃度が 2∼50 mmol/L となるように以下の溶媒に溶解します。  使用可能溶媒メタノール、エタノール、プロパノール、アセトニトリル、アセトン、テトラヒドロフラン、1,4-ジオキサン、ジメチルホルムアミド、ベンゼン、ヘキサン、ジクロロメタン、クロロホルム注）水、および上記の以外の溶媒を用いる必要がある場合は、担当者までご相談ください。 2. MS 本体の確認１．MS 本体の真空コントロールユニットの[READY]ランプが点灯していることを確認します。[STANDBY]スイッチ本体の [OPERAT]と [STANBY]ボタン OFF ↓ が ON でなければ（通常 ON）、ON にします。２．[OPERATE]スイッチが OFF であることを確認する（通常 OFF）。３．イオンソースの真空度が MS 本体の真空計で 6 10-4 Pa ↑ 真空計（イオンソース側）が 10-4Pa （程度）であることを確認する。真空度が悪ければ、直ちに担当者までご連絡ください。 GC 流量コントローラー部 3. GC の準備ヘリウムボンベの二次圧調製弁、GC のカラム入口圧力調整バルブ（COLUMN HEAD PRESSURE）、セプタムパージ調整バルブ (SEPTUM PURGE) は最適な設定になっておりますので、むやみに回さないようお願いします。（右図→）１．ヘリウムガスは GC 接続の際に開栓してあるので、ヘッドを反時計方向に回して開栓の確認をする。ヘリウムボンベの一次圧が 10 kg/cm2(1 MPa) 以上であることを確認する。10 kg/cm2(1 MPa) 以下であれば、担当者まで連絡する。レギュレータの 2 次圧は調整済みなので触らない。ニードルは反時計方向に緩めてあるのを確認。２．GC の圧力計(①)が 30 kPa であることを目視確認する３．[FLOW]を押し（次ページ図）全流速を確認する（通常、10 1mL/min）。４．全流速調整バルブ(②)を反時計方向にゆっくり回し、全流速を 10 3 1mL/min に調節する。５．[INJ A TEMP]を押し、注入口温度が 40 50℃であることを確認して、 [INJ A TEMP] [x] [x] [x] [ENTER] とボタンを押して、目的の温度に設定する。（例：HP-5 なら 250℃）６．オーブンの初期温度をカラムの上限温度（例：HP-5 なら 250℃）に設定し、カラムをエージングします。 [INIT VALUE] [x] [x] [x] [ENTER] カラムのエージングをしている間に、感度調整やキャリブレーションを行います。オーブン温度を確認するときは、 [OVEN GC 温度コントローラー部 TEMP] を押します。 4. MS 本体の調整 1. 測定モードの読込み ① ワークステーションの設定をする。モニター画面には 4 つのタスクがあり、画面下のボタンで切り替える。通常、デフォルトで画面１[Peak ↑ 画面1 [ Peak Tun] をクリックマルチタスク切り替えボタン Tun]になっていて、モニタ画面にはマスコントローラー（下図）と、イオン源コントローラー画面、および、モードコントローラー画面が開いている。開いていない場合は、マスコントローラのモードコントローラーアイコンとイオン源アイコンをクリックすると、それぞれの画面が開く。 ② 測定モードは GC-MS 用になっているはずだが、以下の手順に従い、GC-MS 用の SCP ファイルを読込みます。 ③ マスコントローラの[ファイル]-[読込み]を選ぶとファイル読み込みダイアログが開きます。 ④ ディレクトリ[mstation]、イオン化モード[EI]、SPC ファイル[GCMS-R1000] 4 を選択し、[了解]をクリックする。 2. モードコントローラ、イオン源コントローラ、導入部コントローラの確認１．モードコントローラの [待機]ボタンをクリックし、ON にします。２．モードコントローラの設定値を確認する。「ユニット」 : [standard] 、「モード」：[EI]、[＋]、「分析部」:[HS]、「加速電圧」:[10.0kV]、「導入部」「プローブ前」:[未使用]、「プローブ横」: [未使用]、になっているかを確認する。３．イオン源コントローラ設定値を確認する。イオン電流ボタンは[切]にしておきます。（イオン源コントローラが開いていない場合は、モードコントローライオン源ボタンまたは、マスコントローラのイオン源アイコンをクリックすると、イオン源コントローラ-EI が開きます。）待機中 50℃、任意の温度を入力して enter で確定初期値 200℃ ４．モードコントローラの[表示]-[導入部コントローラ]を選ぶと、導入部コントローラが表示される。GC インターフェース（GC 接続管、ガラス管）の温度を待機中温度（50℃）から適切な設定値に変更します。（例：HP-5 なら初期値 250℃）ウインドウをクリックしてアクティブにし、入力して enter で確定する。 5 適切な温度を入力して enter で確定 3. 検出部の確認１．モードコントローラの検出器ボタンまたは、マスコントローラの検出器アイコンをクリックすると、検出器コントローラが開きます。設定値を確認する。２．[その他]- [プリアンプ]で 1/16 倍、[その他]- [アンプ増幅度]で 1 倍となっているかを確認する。 4. 検出部の確認感度のチューニング１． MS 本体の標準試料導入部の確認 OPERATION VALVE が[CUT OFF]であることを確認してください。もし、 [ROUGH.] であれば [CUT OFF]にしてから、SAMPLE INJECTION PORT のドアを開け、標準試料用注入口に PFK 専用マイクロシリンジを用いて PFK*を 0.2∼0.5 μl 注入して下さい。SAMPLE INJECTION PORT のドアを閉めます（ドアが開いたままだと、加速電圧が入りません）。注）PFK は質量較正標準物質 6 ２．MS 本体の[STANDBY] スイッチが ON であることを確認する。３．ワークステーションのモードコントローラの電源部、 [待機]ボタンが ON であることを確認する。４．MS 本体の[OPERATE] スイッチを ON にする。５．ワークステーションのモードコントローラの電源部、 [操作]ボタンをクリックする。（イオン源コントローラ-EI 操作において、加速部のアニメーションが動きます） 7 ６．ワークステーションのモードコントローラの検出器のイオンモニタアイコンまたは、マスコントローラのイオンモニタアイコンをクリックし、イオンモニタを表示させます。７．イオンモニタの[中心質量]に 131 が入力されている。違う数値ならウインドウをクリックしてアクティブにし、手入力、enter で確定。８．イオン源コントローラ-EI のイオン化室温度の実測値が設定値になっていることを確認します。９．イオン電流[入][切]の[入る]をクリック。（イオン源コントローラ-EI において、フィラメント部のアニメーションが動きます） 10．標準試料導入部の OPERATION VALVE を [CUT OFF]から[ADMI.]の位置にセットにします。 11．最大強度がイオンモニタで 40∼80%となるように標準試料導入部の FLOW CONTROL VALVE を反時計方向にゆっくり回します。 [ADMI.]にしただけで最大強度が 100 となった場合は、検出器コントローラの SEM 電圧を 0.05 kV ずつ下げ、最大強度が 100 以下になるようにします。もし、FLOW CONTROL VALVE を大きく開いても十分な強度が得られないときは、コックを一旦 [ROUGH.]とし、MS 本体の[OPERATE]スイッチを OFF にしてから、操作１からやり直してください。 12. イオンモニタで[表示]-[ピーク頂上を中央に]を選択する。 13. マスコントローラの自動調整アイコンをクリックし、オートチューニングダイアログを表示。 14. [感度のチューニング]、[チューニング・レポート]ボタンをクリックし ON にします。[高速チューニング]、[分解能のチューニング]は OFF にします。注）[分解能のチューニング]は必ず、OFF にしてください。 15. [開始と中止]の[矢印マーク]をクリックします。フォーカス調整が進行します。設定を間違った場合には、[ストップ]ボタンをクリックします。 16. オートチューニングの進捗が終了に達するとチューニング・レポートに調整前後 8 の波形が表示される（前, 赤；後, 青）ので確認する（調整後の方が悪くなることはまずない）。 17. 分解能の実測値が 1000 以上であることを確認する。注）1000 以下なら、直ちに担当者に連絡する。 18. [了解]ボタンをクリックすると、オートチューニングダイアログがクローズします。 19. チューニング・レポートの[ファイル]- [終了]を選択します。 20. OPERATION VALVE を [ADMI.]から [CUT OFF] の位置に戻します。FLOW CONTROL VALVE はピークの強度を調整した状態なので、キャリブレーションを行うため、そのままにしておく。 21. イオン源コントローラ画面で EI のイオン電流[入][切]の[切]をクリックします。 5. データフォルダの作成 1. すでに自分のデータフォルダがある場合は省略して、[6. キャリブレーション] へ進む。 2. 新規作成は、画面 3 でデータマネージャーアイコンをダブルクリックして、データマネージャーを開く。 3. 最上階層（画面の左端の列）にメニュ画面 3 データマネージャーフォルダの新規作成ーバーの[ファイル]-[新規]-[フォルダ] を選択して、自分の研究室名を入力し、 [設定]をクリック。研究室名のフォルダが作成されるので、クリックして選択しておく。 4. 再び、メニューバーの[ファイル]-[新規]-[フォルダ]を選択する。フォルダには[<fl>：フォルダ]と[<dfl>：データフォルダ]の 2 種類があるので間違えないようにする。 5. 表示されるウィンドウにカーソルを合わせてクリックすると入力可能になるので、自分の姓を入力、[設定]ボタン。（日本語は入力できません） 9 6. 次に、測定条件データの入ったファイデータマネージャー測定条件ファイルの複写ルを[<fl>A-condi]からコピーするために、左端の列の一番上にある [<fl>A-condi]、次に[<dfl>GC-MS]をクリックし白く反転させて、メニューバーの[編集]-[複写]を選択。 7. 画面が切り替わるので、複写先は、自分の研究室をクリックし、先ほど新規に作成したフォルダ[<fl>名字]（<dfl>: データフォルダではない）を選び、画面下にある[設定]ボタンをクリックする。データマネージャーメニューバー設定の[ファイル]-[終了]を選択すると、ダイアログが出るので、[はい]をクリックする。 8. 測定条件やキャリブレーションデータなどがこのフォルダに保存されるが、実際に測定するときは「ワークマネージャー」上で行う。 6. 測定条件ファイルの作成１．すでに自分のデータフォルダがある場合は省略して、[7. キャリブレーション] へ進む。２．画面２を選択します。３．すでに、ワークマネージャー画面が表示されている。表示されていないときは、画面上のワークマネージャーアイコンをダブルクリックします。４．表示されている状態では、フォルダー指定が最後に使用した人になっていますので、[ファイル]- [閉じる]を選択します（測定条件、測定データのファイル名が消えます）。[ファイル]- [開く]を選択すると、フォルダ選択ダイアログが開く。 10 ５．測定に用いるデータフォルダを指定し、[了解]をクリックします。６．測定条件ファイルの作成 ① ワークマネージャの[測定条件]-[データベースから読込む]を選択すると、[条件ファイル選択ダイアログ]が表示されます。 ② [条件ファイル選択ダイアログ]の上段をクッリクし、表示された項目の中から [mass]を選択します。 ③ [了解]をクリックします。 ④ 表示されるウィンドウに測定条件ファイル名（較正用）、Calib を入力し、[設定]をクリックします。 ⑤ 2 つめを作成するために同じ事を繰返し、表示されるウィンドウに今度は測定条件ファイル名（測定用）、GCMS を入力し、[設定]をクリックします。 ⑥ 作成された測定条件ファイルをクリックし、[測定条件]-[パラメータの確認・編集]を選び、パラメータウィンドを起動します。 ⑦ 各項目の[･･･]をクリックし、次項に示すパラメータを入力します。項目ごとに確認、変更したら[了解]をクリックします。 ⑧ 各項目で[≡]が表示されている場合は、クリックしてプルダウンメニューから選択します。 ⑨ 加速電圧の印加開始 [分]の[本測定]の設定値[3]は、検出する必要が無い溶媒などが先に多量に MS へ入り、イオン源や検出器にダメージを与えないように、3 分経って溶媒がすべて溶出してから電圧をかけるため。目的物質によって異なる場合は、予備測定を行い、適正な値に設定すること。 ⑩ 最適化した条件を入力後、[ファイル]-[保存]を選択し、[ファイル]-[終了]。 11 測定条件のパラメータ大項目試料情報試料導入法イオン化法装置設定条件測定モード質量較正ファイル検出器設定データの型測定時間ピーク検出条件小項目較正測定本測定試料名 ‐ ‐ 注釈 ‐ ‐ 試料導入法 Reservoir（選択） Capillary（選択）イオン化法 E+ E+ 注）SCP ファイルは読込まない加速電圧 [kV] 10.0 10.0 加速電圧の印加開始 0 3 （重要） [分] 磁場コイル HS HS 質量分解能 1000 1000 スキャン法 MF-Linear MF-Linear スキャン質量範囲 10-500（入力） 10-500（入力） TIC 取得質量範囲 Scan Range Scan Range 全質量範囲スキャン 1.0 1.0 時間繰返し時間 Auto Auto 質量較正用物質 PFK. Pos PFK. Pos 磁場・正イオンファ PFK PFK イル電場・正イオンファ EFdefault（無意味） EFdefault（無意味）イル磁場・負イオンファ PFK-pos （〃） PFK-pos （〃）イル電場・負イオンファ EFdefault（無意味） EFdefault（無意味）イル検出器制御モード Local Local 注）マルチ電圧はマニュアルになりますイオンマルチ電圧 0.8 （無意味） 0.8 （無意味） [kV] フィルタ [Hz] Auto Auto プリアンプ１ 1/16 1/16 プリアンプ２ 1 1 Bar Spectra-Mass Bar Spectra-Mass ２ 35 バー型スペクトル取 0.1 to 0.1 0.1 to 0.1 り込みしきい値 [%] ピーク分離定義 [%] 25 25 ピーク位置（質量） Top or Centroid Top or Centroid の決定法 12 7. キャリブレーション１．較正測定 ① OPERATION VALVE を [CUT OFF]から[ADMI.]の位置にセットにします。 ② 画面２ワークマネージャーで、較正測定用の測定条件ファイル[Ms : Calib] ワークマネージャー画面を選択します。 ③ ワークマネージャーの[較正測定]をクリックし、作業状況のメッセージを確認します(測定モード：Calibration、測定状態：Ready)。測定デー測定条件ファイル ↑ タの欄には、測定データが格作業状況表示と測定ボタン納されるファイル名（Tm： ↑ データファイル ######）が表示されます。ワークマネージャー画面測定開始 ④ [開始]ボタン（緑の△印）を測定条件ファイルクリックする。 ↓ ⑤ ワークマネージャーのメニ作業状況を確認 ← ューバーの[データ]をクリックして、[リアルタイムデー較正測定ボタン ↓ タ処理]を開き、測定されて測定開始ボタン→ いるマススペクトルを確認する。 ↑ データファイル ⑥ 45 秒程度たったら、[リアルタイムデータ処理]画面のメ測定終了ニューバーから[ファイル]-[終了]を選択して画面を終了させる。 ⑦ ワークマネージャーの[終了] ボタン（ピンクの□印）をク測定終了ボタン→ リックする。マウスのアイコ ↑ ンが時計マークを表示してデータファイルいる間は次の操作をしないでアイコンが矢印マークに戻るのを待つ。 ⑧ OPERATION VALVE を [ADMI.]から [CUT OFF]の位置に戻します。２．較正処理 ① キャリブレーションの実行とキャリブレーションファイルの登録 ② 測定データのファイル名をダブルクリックすると、測定データが表示される。 13 ③ 画面はデフォルトでは 2 段なので、メニューバー[ビュー]-[レイアウト設定] でレイアウト設定画面表示。[表示設定]-[縦]に 3 を入力する。ダイアログ下部の[設定]ボタンをクリック。 TIC 上の最後の方を左クリック後、右クリックするとメニューが現れますので、[作成]を選択します。TIC のすぐ下にスペクトルが表示されます。（TIC 上で Extend char キーを押しながら、左クリックしてもスペクトルが現れます）コンピュータが PFK のピークと判断したピークは削除されています  不用なグラフを消したいときは、タイトルメニュー（スペクトルチャートとスペクトルチャート隙間の部分）を左クリックし、プルダウンメニューの[グラフを閉じる]で画面から消す。 ④ タイトルメニュー（スペクトルチャートとスペクトルチャート隙間の部分）を左クリックし、プルダウンメニュー[校正結果のリセット]を選択 ⑤ スペクトルチャートから、m/z 69 と 181 を小さい方から順番にクリックする。指定されたピークは赤線に変わる。間違ったピークを選択した場合は、タイトルメニューで[選択取消し]を選択すると、全てが青線に戻る。 14 ⑥ タイトルメニューで[質量数入力]を選択し、ダイアログが現れるので、ピークを選択した順序に従って、ダイアログのリストの中から選んだピークの質量数を選択する→ [OK]ボタンをクリック。質量数を入力したピークから緑色に変わっていく。 ⑦ 較正グラフのタイトルメニューをクリックし、[較正演算実行]を選択します。比較的強いピークが緑色になっていればキャリブレーションが正しく実行されたと判断します。高 m/z 領域において比較的強いピークが緑色になっていなければ、較正グラフのタイトルメニューをクリックし、[校正結果のリセット]を選択してやり直します。 ⑧ 較正グラフのタイトルメニューをクリックし、[確定]- [現在の較正ファイルに格納]を選択します。 ⑨ データ処理画面のメニューバー[ファイル]-[終了]でデータ処理画面を閉じる。 ⑩ ワークマネージャーのメニューバー[データ]-[改名]を選択する。ダイアログが表示されるので、クリックしてカーソルを点滅させ、テンキーから「yyyymmdd」というように、日付をいれたファイル名を入力する。yyyy＝西暦／mm＝月／dd＝日。 15 ⑪ ⑫ 標準物質 PFK(CnFn+2)のスペクトルの質量数 m/z とイオンの組成を下表に示す。 68.9952 130.9920 204.9888 268.9824 342.9792 416.9760 480.9697 554.9665 618.9601 704.9569 C3F5 C6F7 C5F11 C8F13 C11F15 C10F19 C13F21 C12F25 C16F27 142.9920 216.9888 280.9824 354.9792 418.9729 492.9697 566.9665 630.9601 716.9569 C4F5 C7F7 C6F11 C9F13 C8F17 C11F19 C14F21 C13F25 C17F27 154.9920 218.9856 292.9824 366.9792 430.9729 504.9697 568.9633 642.9601 730.9537 C5F5 C4F9 C7F11 C10F13 C9F17 C12F19 C11F23 C14F25 C15F29 166.9920 230.9856 304.9824 368.9760 442.9729 516.9697 580.9633 654.9601 742.9537 C6F5 C5F9 C8F11 C7F15 C10F17 C13F19 C12F23 C15F25 C16F29 168.9888 242.9856 316.9824 380.9760 454.9729 518.9665 592.9633 666.9601 754.9537 C2F4 C3F7 C6F9 C9F11 C8F15 C11F17 C10F21 C13F23 C16F25 C17F29 116.9952 180.9888 254.9856 318.9792 392.9760 466.9729 530.9665 604.9633 680.9569 766.9537 C5F3 C4F7 C7F9 C6F13 C9F15 C12F17 C11F21 C14F23 C14F27 C18F29 118.9920 192.9888 266.9856 330.9792 404.9760 468.9697 542.9665 616.9633 692.95689 780.9505 C2F5 C5F7 C8F9 C7F13 C10F15 C9F19 C12F21 C15F23 C15F27 C16F31 CF3 73.9968 C3F2 80.9952 C2F3 92.9952 C3F3 99.9936 16 ５.サンプル測定１．GC の温度プログラム設定 ① GC オーブンを冷却するときでも、ドアを開けてはいけません。 ② GC の[FLOW]を押し、全流速が設定値 1mL/min（10mL/min）であることを確認する。 ③ パージバルブの ON、OFF を設定します。 ○スプリット注入 [PURGE VALVE] [ON] ○スプリットレス注入 [PURGE VALVE] [OFF] 注１）サンプル溶液 1μl を注入する場合、10mM 以下の低濃度溶液ではスプリットレス注入を、20mM 以上（ただし、50mM 以下）の高濃度溶液や 10mM 以下でも高い分離能を期待するときはスプリット注入を選択します。注２）スプリットレス注入においても、溶媒によるバックグラウンドの増加を抑制するために、注入後 0.3 分後にパージバルブは ON になります。注３）温度プログラムをスタートさせると途中でパージバルブは OFF になりますので、繰り返し測定する場合にはサンプル溶液を注入する前にパージバルブの ON、 OFF を確認してください。２．データの取り込み準備 ① Peak tune 画面１の検出器コントローラの SEM 電圧が 0.8 kV であることを確認する。導入部コントローラにおいて GC インターフェース（GC 接続管、ガラス管）の温度が設定値付近であることを確認する。 ② Measurement 画面２に戻り、ワークマネージャー上の較正測定用の測定条件ファイル[Ms : GC]を選択します。 ③ 測定条件ファイル[Ms : GC]をダブルクリックし、測定条件ファイルを開きます。（[測定条件]-[パラメータの確認・編集]を選択しても開きます） ④ 装置設定条件の加速電圧の印加開始時間が溶媒用出時間以上（初期値３分）であることを確認します。必要ならば、試料名を入力します。[ファイル]-[保存]を選択した後、[ファイル]-[終了]を選択し測定条件ファイルを閉じます。 ⑤ ワークマネージャーの[本測定]をクリックし、作業状況のメッセージを確認します(測定モード：Measurement、測定状態：Ready)。 ⑥ 測定データの欄には、測定データが格納されるファイル名（Ms：######）が表示されるのを確認する。（Tm：######）と表示してあったら、較正測定条件での測定となりますので、[終了]ボタンをクリックし、データの取り込みをキャンセルします。（較正測定条件では加速電圧の印加開始時間が０分なので、この状態で測定を開始すると溶媒溶出時に EI フィラメントを断線させる恐れがあります） ⑦ [測定モニター]ボタンをクリックします。 17 ⑧ 何らかの理由で測定をキャンセルする場合は、[終了]ボタンをクリックします。３．データの取り込み ① GC が分析可能状態であることを確認します。（STATUS ランプ消灯） ② サンプル溶液 1μl を GC に注入し、GC の[STRAT]ボタンを押します。 GC と MS はリンクしていますので、MS データの取り込みも開始されます。 ③ 注入後３分間は加速電圧が印加されませんので、測定モニターの TIC 強度は低い値を示します。３分を経過すると、加速電圧が印加されるのでバックグランドが増加します。 ④ 測定中に TIC だけでなく溶出物のマススペクトルを見たい場合には、測定モニターを閉じてから、ワークマネージャーの[データ]-[リアルタイムデータ処理]を選択します。 ⑤ マススペクトルの縦軸のフルスケール（16777200）は、コンピュータが読込める最大の強度です。閉じる場合は、中央に表示されている[OK]ボタンをクリックしたのち、[ファイル]-[終了]を選択します。 ⑥ 測定を終了したい場合は、ワークマネージャーの[終了]ボタンをクリックします。 ⑦ GC はクリーニングのため、そのままプログラムを実行させます。 ⑧ 測定モニターまたは、リアルタイムデータ処理を開いている場合は閉じます。６.データ処理 1. 測定データ（Ms：######）をダブルクリック。1. データ処理画面が開く。データ処理画面のメニューバー[ビュー]から[レイアウト設定]を選択 2. レイアウト画面が表示されるので、[縦]欄に 3 を入力、[設定]をクリックする。一番上のグラフは TIC（緑の線）を表示。 3. TIC 上の GC ピークを選択して左クリック後、右クリックするとメニューが現れるので、[作成]を選択。TIC のすぐ下にスペクトルが表示されます。（TIC 上で Extend char キーを押しながら、左クリックしてもスペクトルが現れます） 4. 目的ピークが振り切れていない、スペクトルを作成する（できたバーグラフの縦軸が 16777200 以上であれば振り切れているので使わない）。 5. 目的とする物質の分子イオンやフラグメントイオンのスペクトルパターンを確認する。  測定室の Win PC 上で[Winfinity]というアプリケーションを使用して同様のデータ処理が行える。Win PC には NIST などのライブラリーデータが入っているので、検索して一致度を確認する事が可能。（ワークステーションにはデータベースがインストールされていない。） 18 6. GC ピークが複数ある場合は、データ処理画面のメニューバー[ビュー]から[クロマトリスト]を選択する。画面右下にクロマトリスト画面が表示される。 ① クロマトリスト画面のメニューバー[編集]をクリックし[m/z 入力]を選択。質量数入力画面が表示されるので、クリックしてカーソルマークを点滅させ、テンキーから目的の質量数を入力する。スペースやカンマで区切って複数入力可能。 ② クロマトリスト画面の任意の質量数を選択してダブルクリックすると、データ処理画面にその質量数のマスクロマトグラムが赤い線で表示される。 ③ 強度の大きいところをマウスで左クリックして、右クリックでプルダウンメニューを表示させ、[作成]を選択する。 ④ マスクロマトグラムのすぐ下にマススペクトルが表示される。このスペクトルには目的の[M]+あるいは、フラグメントイオンが強度良く現れているはずである。 ⑤ 作成したマススペクトルで目的ピークが振り切れていたら、振り切れていないところを指定し、スペクトルを作成する（できたバーグラフの縦軸が 16777200 以上で、ベースピークが 100%であれば振り切れているので使わない） ⑥ 目的のスペクトルが振り切れているなどのグラフを画面から削除するときは、スペクトルのタイトルメニュー（グラフとグラフの間のスペース、隙間の部分）、をマウスで左クリックするとプルダウンメニューが現れるので[グラフを閉じる]を選択する。 7. 適正なスペクトルが得られたら、タイトルメニュー（グラフとグラフの間のスペース、隙間の部分）、をマウスで左クリックするとプルダウンメニューが現れるので[確定]を選択すると、このスペクトルデータが[スペクトルリスト]に保存される。保存したマススペクトルを再表示したい場合は[スペクトルリスト]画面のスキャンナンバーをダブルクリックすると再生される。 8. 目的イオンの強度が小さい場合は、スペクトルのタイトルメニュー（グラフとグラフの間のスペース、隙間の部分）、をマウスで左クリックするとプルダウンメニューが現れるので[部分拡大]を選部分拡大のダイアログ ↓ 択。ダイアログ画面に X 軸（m/z）と強度倍率の数字を入力して、[了解]する。目的ピークの強度が拡大される。（例：X 軸の数値は、m/z 307 を大きくして見たいときは 250 や 300 を入力する） 9. 次に目的スペクトルグラフの横軸を適正な範囲にする。まず、横軸 m/z は 500 まで表示されているが、目的の質量数より大きいところにスペクトルが見られない場合は、 m/z 300 や 100 までの表示にする。[Shift]キーを押したままマウスを左クリックし、たとえば m/z 0 19 300 までをドロップ&ドラッグして、横軸を拡大する。（マトリックスのスペクトルは現れていても無視する） 10. スペクトルのタイトルメニュー（グラフとグラフの間のスペース、隙間の部分）、をマウスで左クリックするとプルダウンメニューが現れるので[イオン強度の規格化]-[現在の表示範囲]を選択すると、マススペクトルのベースピークが 100%表示になる。 11. 部分拡大したところもマススペクトルが振り切れていないことを確認。 12. 新たに 4 段目に目的イオンのスペクトルを拡大して表示させる場合。 ① [スペクトルリスト]から確定したスキャンナンバーをダブルクリックして画面の TIC の直ぐ下に表示させる。 ② このスペクトルのタイトルメニューを左クリックして、[グラフを交換する]を選択する。アイコンが指のマークに変わるので、モニタ画面の[マスクロマトグラム]のバックグランドのどこでも良いので、左クリックするとスペクトルチャートが入れ替わる。 ③ 入れ替わった 2 段目のスペクトルチャートのタイトルメニューを左クリックして、[グラフを交換する]を選択する。アイコンが指のマークに変わるので、モニタ画面の一番下に表示されている[マススペクトル]のバックグランドのどこでも良いので、左クリックするとスペクトルチャートが入れ替わる。 ④ モニタ画面の一番下に表示されたスペクトル図の、目的ピークを中心として、低質量側 20 50u、高質量側 20 50u 範囲の横軸の m/z をマウス左クリックでドロップ＆ドラッグする。横軸の m/z が拡大されて、中央に目的のスペクトルが表示される。 4 つのグラフで 1 組の結果この画面をそのまま印刷する時は、[ページ印刷]を選ぶ一番上は TIC 強度の大きいところで作成 [部分拡大]処理→ ２番目はマスクロマトグラム３番目は目的の m/z のマススペクトル(小さいスペクトルは部分拡大処理する) ４番目は目的の m/z の拡大図（スペクトルパターンが確認できる） 20 ⑤ Y 軸（強度）を規格化する。（部分拡大処理がしてある場合は規格化が無効になるので[部分拡大]を開いて[取消]ボタンをクリック、部分拡大を解除してから規格化を行う） 13. これで、1 画面に TIC と目的イオンのマスクロマトグラムと、マススペクトルの 3 つが表示されるので、3 つ一組で測定結果とする。ここで一度、3 つのグラフの[ページ印刷]を行い結果報告書をプリントアウトしておく。  一旦データ処理を終了すると、このレイアウトは消去されている。スペクトルデータは[スペクトルリスト]に保存されているので、保存したマススペクトルを再表示したい場合は[スペクトルリスト]画面のスキャンナンバーをダブルクリックすると再生される。 14. TIC を含む、すべてのスペクトルチャートを印刷する場合は、データ処理画面のメニューバー[プレファレンス]-[印刷設定]-[印刷方向]のダイアログをクリックして、 [portrate]（縦）を選択し、[了解]で画面が閉じる。 15. データ処理画面メニューバーの[ファイル]-[印刷]-[全印刷]を、表示されている 3 段グラフ画面を 1 ページ分印刷したい場合は[ページ印刷]を選択する。表示したすべてを印刷： [ファイル]-[印刷]-[全印刷] 印刷コマンドメニューバー [ プレファレンス ]-[ 印刷設定 ][portrate]（縦）か、[landscape]（横）を選択 ↑一つのチャートだけ印刷：スペクトルチャートのタイトルメニューで[印刷] 16. 画面に表示させたスペクトルのうち、一つのグラフだけ印刷したい場合は、メニューバー [ プレファレンス ]-[ 印刷設定 ]-[ 印刷方向 ] のダイアログから、 [landscape]（横）を選択し[了解]をクリック。目的のスペクトルチャートのタイトルメニューをクリックしてプルダウンメニューから[印刷]を選択する。 17. データ処理画面のメニューバー[ファイル]-[終了]でデータ処理画面を閉じる。 18. ワークマネージャーのメニューバー[データ]-[改名]を選択する。ダイアログが表示されるので、クリックしてカーソルを点滅させ、テンキーから mm＝月／dd ＝日というように[日付]-[サンプル番号]-[補助情報]として、ファイル名を入力す 21 る。７. 測定の終了 1. イオン源コントローラ-EI のイオン電流ボタンが[切]であることを確認する。 2. モードコントローラの電源部、[操作]ボタンをクリックし、OFF にする。 [待機]ボタンは ON のままで結構です。 3. MS 本体の[OPERATE]スイッチを OFF にする。MS 本体の[STANDBY]スイッチは ON のままで結構です。 4. 初期状態にもどすため SCP ファイルを読み込む。 5. マスコントローラの[ファイル]-[読込み]を選ぶとファイル読み込みダイアログが開きます。 6. ディレクトリ[mstation]、イオン化モード[EI]、SPC ファイル[GCMS-R1000] を選択し、[了解]をクリックする。 7. 導入部コントローラにおいて GC インターフェース（GC 接続管、ガラス管）の温度を 250℃から 50℃に変更になっている事を確認。 8. イオン源コントローラーのイオン化室温度が 50℃になっている事を確認。 9. GC の INJ Temp を 50℃に、[FLOW]を押し、全流速を確認する。 10. 10mL/min 以上に調整した場合は、GC の全流速調整バルブ(②)を反時計方向にゆっくり回し、全流速を 10 mL/min 1mL に調節する。 11. GC の圧力計(①)が 30 kPa であることを確認する。 12. ヘリウムボンベの 1 次圧（残量）を記録票に記入する。 13. セルフライセンス記録票を提出（測定室の所定のフィアルケース）。 14. 消灯、施錠して 120 室（分析センター）に鍵を返却する。 22