P-9 牛乳アレノレギー におけるアレノレゲンタンパク質の解析 @加 藤由 理人 曽川拳 1人 佐藤守 到 、三 田 明弘 1\ 下量直樹 " 野村文夫 " 1)麻布大学生命環境科学部生化学研究室、 2) 千葉大学大学院医学研究院分子荊態解析学、 3) 千葉大学大学幌医学研究院小児病態学 [ 背景 ・ 目 的 I 食物アレルギー患者の割合は近年増加 しており、厚生労働省の 2 00 8 年の調査では、全年齢 を通して 1 .......2% と推定されている 。 牛乳は、卵に IX い IX抗体にプロッキングパッファーで 20 倍希釈した牛乳 アレルギー血者血清、 二 位抗体に Humall I gE a nt i bod y ( 1 0同倍 Fitzgerald 社)、三位抗体に Rabbit ant i- mo田e で 2 番目にアレルギー症状の原因となる頻度の高い 食 immuIl oglobl山lslHRP ( 1 叩0 倍 品である 。 牛乳のアレルゲンタンパク質は 11 種類(Bo s は Pierc e We s lemB l o n i l l gs ubs t r at e( ThennoSc ien紅白c 社) d 2-12)報告されている。主要アレルゲンは、 を用いた。 LighトCa pture I I (アトー株式会社)で、バン ト ラク トグロプリン ・ α カゼインである ロ 診断は血清輯 I gE ドを検出した 。 Da ko 社)を用い、検出 ウエスタンプロット法で検出したタンパ および牛乳特異的 I g E を行っているが、数値結果と臨 ク質は SD S -PAGE 桂、 C BB 染色を行い、パンドを切り出 床症状と合わないことがしばしば遭遇する 。 今回我々 し、 は、患者血清を用いて主要アレルゲンタンパク質の頗 トリプシン禍化桂、 LC -MSぶ四により同定した 。 [ 成績 I ウエスタンプロット法にてアレルギー血者で 2 度、牛乳アレノレゲンタンパク質の傑軍及び低減化を試 パンド検出された。 1 つのパンドは 9 症鰍 100%) で検出さ みた。 れ、もう I 方法 I 千葉大学医学部附属病院小児科に受診した牛 乳アレルギー患者 9 名及びアレルギ を 持たない健常 方は 4 症例(44 .4 %)で検出された 。 健常者 1 症 例からは、アレルギー患者で検出された 2 バンドは全例 で検 出されなかった。現在同定を進めている。また、キ 者 1 名の血清検体を用いた。 すべての曲者から同意を クイ 得た上で行った。 量で混合させる事により主要アレルゲンのひとつである 牛乳アレルギーのアレルゲンタンパク質を検出するた カゼインの分解が認められたが、マンゴーの果汁では認 めにウエスタンプロット法で行った。牛乳 2 ~{L を められなかった 。 S D S - PAGE 、 PVDF 膜に転写1!i,プロッキングをした 。 パイナップル ー メロンそれぞれの果汁を牛乳と等
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