平成 23 年 6 月 1 日 CRN JAPAN（日本栄養評議会）会員各位コンドロイチン硫酸含有ムコ多糖蛋白健康食品に関する検討結果中間報告書コンドロイチン硫酸含有ムコ多糖蛋白専門部会１．経緯説明 2008 年 8 月 7 日に、独立行政法人国民生活センターより『関節に良いとされる成分を含む「健康食品」に関する商品テスト結果』（以下商品テスト結果という）が公表された。コンドロイチン及びグルコサミンを含む市販健康食品 18 銘柄と、参考品としてコンドロイチン硫酸を含む医薬品 4 銘柄が調査対象となった。この公表結果の中で、コンドロイチン硫酸の表示量や基原原料に関する問題提起と、業界への改善要望がなされた。そこで、本件に関する改善策を検討すべく、2008 年 10 月 7 日に一丸ファルコス、小林製薬、ビーエイチエヌ、日本水産、マルハニチロ食品、焼津水産化学工業、ヤエガキ発酵技研、ユーエスキュア、ユニキスの 9 社が参画してコンドロイチン硫酸含有ムコ多糖蛋白専門部会が設立され、さらに 2009 年 1 月 22 日からは技術部会（マルハニチロ食品、焼津水産化学工業、ヤエガキ発酵技研、ユニキス）の中で詳細な検討を行ってきた。２．商品テスト結果の概要公表された商品テスト結果の概要（コンドロイチン硫酸関係のみ抜粋）は以下の通りである。１．コンドロイチン硫酸量「コンドロイチン硫酸」表示銘柄のコンドロイチン硫酸量が表示量に比べ実測値は大幅に少なかった。また、コンドロイチン硫酸を含む原材料等の表示量は、実際の含有量の目安にはならなかった。２．基原原料「サメ由来」のコンドロイチン硫酸を含有する原材料を配合している旨の表示があった 16 銘柄の内、陸生哺乳動物由来のコンドロイチン硫酸が配合されている可能性の高い銘柄が 6 銘柄あった。そのうち 3 銘柄は陸生哺乳動物由来の原材料名の表示が無く、JAS 法上問題がある可能性が高い。３．原材料表示大部分の銘柄は、コンドロイチン硫酸を含む原材料の量を表示しており、実際に含まれるコンドロイチン硫酸量は分りにくかった。医薬品に匹敵若しくは上回る量のコンドロイチン硫酸を含むと消費者が誤認するおそれがある。３．商品テスト結果の解析当部会において、上記商品テスト結果の内容を解析した。１．コンドロイチン硫酸量現在、健康食品原料の一般的分析法は、「硫酸バリウム法」あるいは「カルバゾール硫酸法」であり、これら分析法においてはコンドロイチン硫酸を含むムコ多糖類の総量として定量されている。すなわち、ムコ多糖類量＝コンドロイチン硫酸量ではない。一方、商品テストにおいて用いられた分析法は HPLC 法（AOACI 法※）であり、分析法が原理的に異なる。分析法の違いが原因のひとつと考えられた。 ※ Journal of AOAC International Vol.90，No.3，2007 ２．基原原料判定方法として、コンドロイチン分解酵素（コンドロイチナーゼ）によって生成する2種の不飽和二糖である4S（ΔDi-4S※）／6S（ΔDi-6S※）の比が0.76 より大きい場合、陸生哺乳動物由来である可能性が高いとしている。しかし、サメの種類や使用する軟骨の部位によっては4S／6S比が異なる可能性が示唆された他、本法では微量のコンタミネーションは判別できないことも問題と考えられた。 ※ΔDi-4S：2-acetamido-2-deoxy-3-O-(βD-gluco-4-enepyranosyluronic acid -4-Osulfo-D-galactose) ※ΔDi-6S：2-acetamido-2-deoxy-3-O-(β-D-gluco-4-enepyranosyluronic acid)-6-O-sulfo-D-galactose）３．原材料表示「コンドロイチン硫酸」「サメ軟骨抽出物」「ムコ多糖類」「ムコ多糖蛋白複合体」等様々な表示方法がなされていた。また、販売者がムコ多糖量＝コンドロイチン硫酸量あるいはサメ軟骨抽出物量＝コンドロイチン硫酸量として誤って認識している可能性が示唆された。４．技術部会の検討結果１．コンドロイチン硫酸量 AOACI 法※では、標準品に、試薬として販売されている 6 種類の不飽和二糖を使用していたが、高額であることや、一部の不飽和二糖はメーカーが廃業しており入手が困難であることが分った。そこで、会員企業であるマルハニチロ食品が製造し、ナカライテスク社より販売している研究用試薬「コンドロイチン硫酸 C ナトリウム」（サメ軟骨由来、医薬品グレード）を標準品と定義して、新たな HPLC による分析法を確立した。分析法の概要は以下の通りである。 ①標準品（コンドロイチン硫酸 C ナトリウム）をコンドロイチナーゼ ABC（生化学 BB)で酵素分解。 ②生成する不飽和二糖を HPLC で分析。定性には不飽和コンドロ二糖キット（生化学 BB）を使用。ピーク総面積を基に検量線を作成。 ③分析試料について同様の処理を行い、検量線から算出。本法は、サメ軟骨由来のコンドロイチン硫酸量の定量のみに適用されるものであり、定量値を「コンドロイチン硫酸」と表示可能である。また共存成分（グルコサミン、MSM、ヒアルロン酸、賦形材等）の影響が少ないなどの特徴がある。本法により、現在市販されている原料 3 種類について、4 機関により同一試料を分析した結果、分析機関による差は少なく、分析機関間の併行精度が確認されている（下表）。原料中のコンドロイチン硫酸定量分析については、財団法人日本食品分析センターにおいてその妥当性（分析バリデーション）が確認され、「CRN-Japan 法」として分析委託できる。 A機関測定結果(g/100g) 試料１試料２ B機関試料３測定結果(g/100g) 試料１試料２試料３平均(n=7) 32.5 25.4 38.4 平均(n=7) 33.0 26.2 37.9 標準偏差 0.82 0.56 0.62 標準偏差 1.06 0.66 1.38 相対標準偏差(%) 2.53 2.19 1.62 相対標準偏差(%) 3.20 2.53 3.64 C機関測定結果(g/100g) 試料１試料２ D機関試料３測定結果(g/100g) 試料１試料２試料３平均(n=6) 34.1 26.8 39.3 平均(n=7) 31.8 25.1 37.3 標準偏差 0.80 1.36 1.51 標準偏差 0.92 0.77 0.48 相対標準偏差(%) 2.33 5.07 3.83 相対標準偏差(%) 2.89 3.07 1.27 ２．基原原料技術部会におけるサメの種類・部位による 4S/6S 比を検討した結果、種類・部位によって違いはあるものの 6S 優位であることが分かった。しかし、判定基準値（4S/6S 比が＜0.76 であればサメ由来である可能性が高い）の設定は、今後の検討課題である。微量のコンタミネーションを判別するための補完的手段としては、PCR（polymerase chain reaction）法による畜肉（牛、豚、羊、鶏、馬）由来の DNA 配列分析で確認することとした。さらに、原料メーカーが責任をもって目視による原料使用前検査を行い、記録に残すことを徹底する。３．原材料表示原材料表示は食品原料として医薬品原料との違いを明確にするため、「サメ軟骨抽出物」、「ムコ多糖蛋白複合体」などの表記が望ましいと考えられた。枠外表示としてコンドロイチン硫酸量を記載する場合は、本部会で開発した HPLC 法により分析した数値を記載することとした。さらに、起源動物の記載を徹底するよう周知することとした。以上の検討結果については、平成 22 年 10 月 27 日に国民生活センターに報告した。また、平成 22 年 11 月 25 日に CRN-Japan 第 61 回勉強会において口頭発表を行った。５．今後の検討課題 ①製剤の分析コンドロイチン硫酸の配合量を変えて製剤を２種類試作し、複数社による分析確認を行う。製剤分析については、共存物質を除去するための前処理が必要と考えられるので、日本食品分析センターに妥当性の確認を依頼する。 ③分析法の普及活動とコンプライアンスの啓蒙本部会で開発したコンドロイチン硫酸の定量分析法については、学会発表、論文投稿等による公開と普及に尽力する。薬事法（食薬区分）、食品衛生法、景品表示法等の法令順守を改めて業界内で周知徹底するよう努力する。以上